一种防治肝癌的中药复方及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种防治肝癌的中药复方及其制备方法，由如下重量份比例的生药制备而成：太子参，60～70份；肉豆蔻，35～45份；吴茱萸，45～55份；黄连，15～25份；补骨脂，35～45份；川牛膝，25～35份；关黄柏和独活共50～70份，二者重量份之比为4～6:1。肿瘤内微血管密度可作为一种新的肿瘤生物学特性，它反映了肿瘤微血管形成的强度与肿瘤侵袭性的必然关系，本发明提供的中药复方可以显著抑制肝癌移植瘤的生长，可以开发成治疗肝癌的药物，这可能与生药关黄柏和独活重量份之比有关。
【专利说明】
-种防治肝癌的中药复方及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于中药领域，具体设及一种防治肝癌的中药复方及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 肝癌即肝脏恶性肿瘤，可分为原发性和继发性两大类。原发性肝脏恶性肿瘤起源 于肝脏的上皮或间叶组织，前者称为原发性肝癌，是我国高发的，危害极大的恶性肿瘤;后 者称为肉瘤，与原发性肝癌相比较较为少见。继发性或称转移性肝癌系指全身多个器官起 源的恶性肿瘤侵犯至肝脏。一般多见于胃、胆道、膜腺、结直肠、卵巢、子宫、肺、乳腺等器官 恶性肿瘤的肝转移。
[0003] 原发性肝癌的病因及确切分子机制尚不完全清楚，目前认为其发病是多因素、多 步骤的复杂过程，受环境和因此双重因素影响。流行病学及实验研究资料表明，乙型肝炎病 毒化BV)和丙型肝炎病毒化CV)感染、黄曲霉素、饮水污染、酒精、肝硬化、性激素、亚硝胺类 物质、微量元素等都与肝癌发病相关。继发性肝癌(转移性肝癌）可通过不同途径，如随血 液、淋己液转移或直接侵润肝脏而形成疾病。
[0004] 目前尚没有治疗肝癌效果特别显著的中药复方。
【发明内容】
[0005] 本发明的第一目的在于提供一种中药复方，用于防治肝癌；
[0006] 本发明的第二目的在于提供一种利用上述中药复方制备的中药活性成分浸膏；
[0007] 本发明的第Ξ目的在于提供一种防治肝癌的中药复方制剂，含有上述的中药活性 成分浸膏和药学上可W接受的辅料。
[000引本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的：
[0009] -种防治肝癌的中药复方，由如下重量份比例的生药制备而成：太子参，60~70 份；肉豆違，35~45份;吴荣英，45~55份;黄连，15~25份;补骨脂，35~45份；川牛膝，25~ 35份;关黄柏和独活共50~70份，二者重量份之比为4~6:1。
[0010] 进一步地，所述的防治肝癌的中药复方由如下重量份比例的生药制备而成:太子 参，65份；肉豆違，40份;吴荣英，50份满连，20份;补骨脂，40份；川牛膝，30份;关黄柏和独 活共60份，二者重量份之比为5:1。
[0011] 进一步地，所述的防治肝癌的中药复方由如下重量份比例的生药制备而成:太子 参，60份；肉豆違，35份;吴荣英，45份;黄连，15份;补骨脂，35份;川牛膝，25份;关黄柏和独 活共50份，二者重量份之比为4:1。
[0012] 进一步地，所述的防治肝癌的中药复方由如下重量份比例的生药制备而成:太子 参，70份；肉豆違，45份;吴荣英，55份;黄连，25份;补骨脂，45份;川牛膝，35份;关黄柏和独 活共70份，二者重量份之比为6:1。
[0013] -种防治肝癌的中药活性成分浸膏，由上述中药复方制备而成，包括如下步骤:取 配方量的生药用65~95%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩，喷雾干燥得浸膏粉。
[0014] 进一步地，取配方量的生药用80%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液。
[0015] 进一步地，浓缩至密度为1.15~1.30。
[0016] 进一步地，每克浸膏粉相当于生药4~6g。
[0017] 一种防治肝癌的中药复方制剂，含有上述中药活性成分浸膏和药学上可W接受的 辅料，按照常规方法制备成制剂。
[001引进一步地，所述制剂包括颗粒剂、片剂、胶囊剂、注射液、口服液。
[0019]本发明的优点：
[0020] 本发明提供的中药复方经药理实验证明可W防治肝癌;本发明提供的中药活性成 分浸膏通过本发明提供的中药复方经提取、浓缩制备而成，可W显著防治肝癌;本发明提供 的中药复方制剂含有本发明提供的中药活性成分浸膏和药学上可W接受的辅料载体，可防 治肝癌。
【具体实施方式】
[0021] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明保护范 围。本发明中设及的生药基源与2015版中国药典一致。
[0022] 实施例1:活性成分浸膏的制备
[0023] 生药配方：
[0024] 太子参，65份；肉豆違，40份;吴荣英，50份;黄连，20份;补骨脂，40份；川牛膝，30 份;关黄柏和独活共60份，二者重量份之比为5:1。
[0025] 制备方法:取配方量的生药用80%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.22,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药5g。
[0026] 实施例2:活性成分浸膏的制备
[0027] 生药配方：
[00%]太子参，60份；肉豆違，35份;吴荣英，45份;黄连，15份;补骨脂，35份；川牛膝，25 份;关黄柏和独活共50份，二者重量份之比为4:1。
[0029] 制备方法:取配方量的生药用65%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.15,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药4g。
[0030] 实施例3:活性成分浸膏的制备
[0031] 生药配方：
[0032] 太子参，70份；肉豆違，45份;吴荣英，55份;黄连，25份;补骨脂，45份；川牛膝，35 份;关黄柏和独活共70份，二者重量份之比为6:1。
[0033] 制备方法:取配方量的生药用95%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.30，喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药6g。
[0034] 实施例4:活性成分浸膏的制备
[0035] 生药配方：
[0036] 太子参，65份；肉豆違，40份;吴荣英，50份;黄连，20份;补骨脂，40份；川牛膝，30 份;关黄柏和独活共60份，二者重量份之比为4:1。
[0037] 制备方法:取配方量的生药用80%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.22,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药5g。
[0038] 实施例5:活性成分浸膏的制备
[0039] 生药配方：
[0040] 太子参，65份；肉豆違，40份;吴荣英，50份;黄连，20份;补骨脂，40份；川牛膝，30 份;关黄柏和独活共60份，二者重量份之比为6:1。
[0041] 制备方法:取配方量的生药用80%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.22,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药5g。
[0042] 实施例6:实施例1的对比，关黄柏和独活重量份之比为3:1
[0043] 生药配方：
[0044] 太子参，65份；肉豆違，40份;吴荣英，50份;黄连，20份;补骨脂，40份；川牛膝，30 份;关黄柏和独活共60份，二者重量份之比为3:1。
[0045] 制备方法:取配方量的生药用80%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.22,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药5g。
[0046] 实施例7:实施例1的对比，关黄柏和独活重量份之比为7:1
[0047] 生药配方：
[004引太子参，65份；肉豆違，40份;吴荣英，50份;黄连，20份;补骨脂，40份；川牛膝，30 份;关黄柏和独活共60份，二者重量份之比为7:1。
[0049] 制备方法:取配方量的生药用80%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.22,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药5g。
[0050] 实施例8:防治肝癌作用
[0051] 本实施例使用体外培养人肝癌Bel-7402细胞株种植于左前上肢蔽窝皮下制备裸 鼠肝癌移植瘤模型模型，观察药物改善肝癌移植瘤的作用。
[0052] 1、材料和方法
[0化3] 1.1细胞及动物
[0054]实验室符合DB44/61-94清洁级标准。人肝癌细胞株Be^7402来源于广州医学院微 生物免疫学教研室。裸鼠（BALB/C-nu/nu)由南方医科大学实验动物中屯、提供，雄性，鼠龄4- 6周，体质量20-25g，平均(23.28 ± 1.62)饲养于SPF环境中。
[00对 1.2试剂与样品
[0056]分别按实施例1~7方法制备活性成分浸膏1~7。
[0化7] 1.3小鼠分组及模型制备
[0058] 移植瘤裸鼠动物模型复制:将冻存于液氮罐中肝癌细胞株Bel-7402取出，复苏，体 外培养于RPM11640中，加入体积分数为0.1的小牛血清，青霉素10万单位/L，链霉素 lOOmg/ L，单层培养于C〇2恒溫解育箱内，细胞为上皮样贴壁生长，每两Ξ天传代1次，取对数生长期 细胞用于实验。用体积分数为0.1的小牛血清的RPM11640培养液稀释细胞至含瘤IXIO^L -1，在裸鼠左前上肢蔽窝皮下接种0.2mL。
[0059] 分组:48只接种肝癌细胞株的裸鼠单纯随机分成正常对照组、活性成分浸膏1~7 组（140mg · kg-i)，共8组。所有裸鼠自接种肝癌细胞株第3天起开始灌胃给药，正常对照组为 等量生理盐水灌胃，隔日1次，灌胃20次。停药1周后，脱颈处死:完整取出瘤块，检测瘤体质 量。按W下公式计算肿瘤抑制率：
[0060] 肿瘤抑制率=(对照组平均瘤质量-给药组平均瘤质量）/对照组平均瘤质量X 100%。
[0061] 1.4微血管密度的测定
[0062] 采用二步法染色:标本经甲醒固定后，进行3um连续切片:将石蜡切片脱蜡至水:高 压煮沸抗原修复3min，体积分数为0.03的此化室溫解育lOmin，滴加兔抗人第Μ因子相关抗 体，4摄氏度过液，滴加1:200生物素标记的羊抗兔IgG，37摄氏度解育30min，二氨基联苯胺 显色5min，W0.01mol/L憐酸盐缓冲液代替一抗作为空白对照，W血管瘤为阳性对照。微血 管密度的测J 定参照 C1 inica 1 importance of the determination of tumor angiogenesisin breast carcinoma：much more than a new prognostictool的方法。在 低倍视野下检查微血管染色情况：W新生血管内皮染为栋黄色为阳性判定标准，取癌巢间 质血管最多的视野，在200倍视野下，按双盲法由3位观察者分别计数3个视野:观察染成栋 色的单个细胞和细胞丛，并W此作为一个血管:血管腔和腔内红细胞不作为计数，如有肌层 的血管或管腔巧0着者应排除，取3人计数平均值作为该例的微血管密度。
[0063] 1.5裸鼠生存质量评价
[0064] 通过裸鼠精神状态、活动状况、对刺激的反应、体质量下降幅度、食欲和尿、便6项 指标的观察，评价裸鼠生存质量和药物毒副反应。
[0065] 1.6统计学分析
[0066] 由本课题组应用SPSS11.0软件进行统计学处理，肿瘤抑制率、微血管密度均值采 用F分析进行组间比较，P<0.05为具有统计学意义。
[0067] 2、实验结果
[0068] 2.1对肝癌移植瘤裸鼠生存质量的影响
[0069] 治疗方案结束时：正常对照组只有4只存活;活性成分浸膏1~5组6只裸鼠均存活； 活性成分浸膏6、7组也仅有4只存活。所有死亡裸鼠均已解剖排除了由于实验操作不当致死 的可能，裸鼠死亡是由肿瘤本身恶化或药物毒副反应所致。
[0070] 2.2对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用
[0071] 与正常对照组比较，活性成分浸膏1~5组对肿瘤抑制作用明显较强，表现为平均 瘤质量减少(P<〇.01)，肿瘤抑制率较高(P<〇.01);与正常对照组比较，活性成分浸膏6、7 组无显著性差异(P>〇. 05)。结果见表1。
[0072] 2.3对肿瘤血管形成的影响
[0073] 与正常对照组比较，活性成分浸膏1~5组对肿瘤抑制作用明显较强，表现为平均 瘤质量减少(P<〇.01)，肿瘤抑制率较高(P<〇.01);与正常对照组比较，活性成分浸膏6、7 组无显著性差异(P>〇. 05)。结果见表1。
[0074] 表1对裸鼠肝癌移植瘤和肿瘤血管形成的影响
[0075]
[0076] 活性成分浸膏2、3与活性成分浸膏4、5作用效果基本一致。
[0077] 肿瘤内微血管密度可作为一种新的肿瘤生物学特性，它反映了肿瘤微血管形成的 强度与肿瘤侵袭性的必然关系。
[0078] 上述试验结果表明，本发明提供的中药复方可W显著抑制肝癌移植瘤的生长，可 W开发成治疗肝癌的药物。运可能与生药关黄柏和独活重量份之比有关。
[0079] 实施例9:颗粒剂的制备
[0080] 按实施例1方法先制得活性成分浸膏，按其与赋形剂重量比为1:8的比例加入赋形 剂，制成颗粒剂。
[0081] 实施例10:片剂的制备
[0082] 按实施例1方法先制得活性成分浸膏，按其与赋形剂重量比为1:8的比例加入赋形 剂，制粒压片。
[0083] 实施例11:注射液的制备
[0084] 按实施例1方法先制得活性成分浸膏，按常规加注射用水，精滤，灌封灭菌制成注 射液。
[0085] 实施例12: 口服液的制备
[0086] 按实施例1方法先制得活性成分浸膏，按常规口服液制法制成口服液。
[0087] 实施例13:胶囊剂的制备
[0088] 按实施例1方法先制得活性成分浸膏，按其与赋形剂重量比为1:8的比例加入赋形 剂，制成胶囊剂。
[0089] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可W对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种防治肝癌的中药复方，其特征在于，由如下重量份比例的生药制备而成：太子 参，60~70份；肉豆蔻，35~45份;吴茱萸，45~55份;黄连，15~25份;补骨脂，35~45份；川 牛膝，25~35份;关黄柏和独活共50~70份，二者重量份之比为4~6:1。2. 根据权利要求1所述的防治肝癌的中药复方，其特征在于，由如下重量份比例的生药 制备而成:太子参，65份；肉豆蔻，40份;吴茱萸，50份;黄连，20份;补骨脂，40份;川牛膝，30 份;关黄柏和独活共60份，二者重量份之比为5:1。3. 根据权利要求1所述的防治肝癌的中药复方，其特征在于，由如下重量份比例的生药 制备而成:太子参，60份；肉豆蔻，35份;吴茱萸，45份;黄连，15份;补骨脂，35份;川牛膝，25 份;关黄柏和独活共50份，二者重量份之比为4:1。4. 根据权利要求1所述的防治肝癌的中药复方，其特征在于，由如下重量份比例的生药 制备而成:太子参，70份；肉豆蔻，45份;吴茱萸，55份;黄连，25份;补骨脂，45份;川牛膝，35 份;关黄柏和独活共70份，二者重量份之比为6:1。5. -种防治肝癌的中药活性成分浸膏，由如权利要求1~4任一所述的中药复方制备而 成，其特征在于，包括如下步骤:取配方量的生药用65~95%乙醇热回流提取2~3次，合并 提取液，浓缩，喷雾干燥得浸膏粉。6. 根据权利要求5所述的中药活性成分浸膏，其特征在于:取配方量的生药用80%乙醇 热回流提取2~3次，合并提取液。7. 根据权利要求5所述的中药活性成分浸膏，其特征在于:浓缩至密度为1.15~1.30。8. 根据权利要求5所述的中药活性成分浸膏，其特征在于:每克浸膏粉相当于生药4~ 6g〇9. 一种防治肝癌的中药复方制剂，其特征在于:含有如权利要求5~8任一所述的中药 活性成分浸膏和药学上可以接受的辅料，按照常规方法制备成制剂。10. 根据权利要求9所述的中药复方制剂，其特征在于:所述制剂包括颗粒剂、片剂、胶 囊剂、注射液、口服液。
【文档编号】A61K36/756GK105920160SQ201610279420
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月29日
【发明人】陈芝维
【申请人】陈芝维