一种改善子宫内膜容受性的中药复方制剂及其制备方法和用图
【专利摘要】本发明属中药领域，涉及一种治疗子宫内膜异位症的中药复方制剂及其制备方法。本发明遵循中医治则补充和调节脏腑、气血和经络，采用中药原料药熟地黄，白芍，首乌，女贞子，山茱萸，麦冬，巴戟天，党参，香附和菟丝子的提取物制备改善子宫内膜容受性的中药复方制剂：经实验结果显示，本药物制剂能改善子宫内膜容受性，有助于简化体外受精-胚胎移植(即试管婴儿)治疗的步骤，提高妊娠率和活产率，以及建立中西医结合的有效干预措施。进一步本复方制剂可用于制备治疗不孕症的药物制剂。
【专利说明】
一种改善子宫内膜容受性的中药复方制剂及其制备方法和用途
技术领域
[0001]本发明属中药领域，涉及一种治疗子宫内膜异位症的中药复方制剂及其制备方法。【背景技术】
[0002]据文献报道，不孕症已成为影响家庭健康的严重卫生问题，当传统的治疗手段 (促排卵、宫腹腔镜手术、人工授精等)失败后，体外受精-胚胎移植(IVF-ET，俗称“试管婴儿)成为不孕症治疗的最有效手段。受婚育年龄的延迟和多种因素影响，在我国接受 IVF-ET治疗的病例数呈上升趋势。体外受精-胚胎移植治疗包括控制的促排卵(C0H)、手术取卵、体外受精、胚胎培养和胚胎移植等多个环节。在这些多个环节中，控制的促排卵决定了子宫内膜的容受性，同时也决定了获得卵子的数量和质量，因此在IVF-ET治疗中作用至关重要。
[0003]研究显示，应用于年轻妇女的长方案和应用于高龄妇女的短方案(亦称经典方案)渐产生出下述弊病，其中，由于促排卵用药时间长和用药剂量大引起明显的临床并发症，主要体现在卵巢过度刺激综合征(0HSS)，中度和重度卵巢过度刺激综合征的发生率为 10-30% ;0HSS是由于促排卵治疗引起的医源性疾病，主要体现在全身血管通透性改变而引起的胸水、腹水、有效血液循环不足、肝肾损伤及呼吸功能障碍等的全身性病变，重者危及生命安全；以及，由于刺激强烈导致卵巢明显增大，增加了取卵手术后出血的风险和患者对卵巢囊肿、乳腺肿瘤等雌激素依赖性疾病的担忧；此外，显著延长了治疗周期并增加了就诊次数，加剧了病人的身心困扰和经济负担。
[0004]随着IVF-ET技术的发展，微刺激促排卵方案逐渐受到生殖医学界的关注和应用， 也越来越受到患者的广泛认可和接受；但实践显示，在微刺激(或温和刺激)治疗中子宫内膜容受性受到负面影响，因此导致新鲜胚胎移植的可能性很低(< 10% )，大部分患者需要接受冷冻胚胎移植。
[0005]鉴于现有技术的传统促排卵方案中存在的并发症严重、时间长和花费大等的弊病，本申请的发明人拟提供一种改善子宫内膜容受性的中药复方制剂，以通过中药治疗，补充和调节脏腑、气血和经络，改善子宫内膜容受性，增加新鲜胚胎移植几率，提高新鲜胚胎移植成功率，进一步提高妊娠率和活产率。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是为克服现有技术存在的缺陷，提供一种改善子宫内膜容受性的中药复方制剂及其制备方法和用途；本发明的中药复方制剂能遵循中医治则补充和调节脏腑、气血和经络，改善子宫内膜容受性，达到增加新鲜胚胎移植几率，提高新鲜胚胎移植成功率的效果，进一步提高妊娠率和活产率。
[0007]本发明有助于简化体外受精-胚胎移植(即试管婴儿)治疗的步骤，提高妊娠率和活产率，建立中西医结合的有效干预关于试管婴儿实施措施。
[0008]具体的，本申请提供的中药复方制剂(亦称:补气调经方)，其特征在于，采用下述中药材原料药的提取物制备改善子宫内膜容受性的中药复方制剂:
[0009]熟地黄白芍首乌女贞子山茱萸麦冬巴戟天
[0010]党参香附菟丝子
[0011]本发明中，每付中药中的原料重量配比为:(g)
[0012]熟地黄10_12g 炒白芍10-12g 制首乌l〇-12g 女贞子9-12g 山茱萸 5_6g 6g麦冬10-12g巴戟天8-10g党参10-13g香附8-10g菟丝子10-12g
[0013]本发明的一个实施例中，优选的原料药重量配比为，每付中药:
[0014]熟地黄12g炒白芍12g制首乌12g女贞子9g
[0015]山茱萸6g麦冬12g巴戟天9g党参12g香附9g英丝子12g
[0016]本发明采用上述中药材的提取物制成颗粒剂冲服。
[0017]本发明所采用的原料药的中药药材质量符合中国药典2005年版一部相应药材项下各有关规定。其中，
[0018]熟地黄甘温入肾，补血滋阴益精；白芍酸苦微寒入肝养血调经敛阴，两者配伍，二味是补血之要药；制首乌补血养肝，益精固肾；山茱萸既能润养肝肾之阴，又能温补肾阳； 女贞子有补肝肾之阴的功用，三药配伍，加强补益肝肾之作用。麦冬养阴生精，清心除烦；党参补中益气，生精养血；巴戟天补肾阳益精血；菟丝子既补肾阳又补肾阴，两药伍用，意在阳中求阴；香附善疏肝理气、调经止痛；本发明的复方制剂于大量补血药中配伍滋阴药物， 意在调补经后期精血亏虚之证；同时加入少量补阳药和理气药，意在阴中求阳，鼓舞阳气， 又行气和血，使血海充盈、气血双补。
[0019]本发明提供了上所述的中药复方制剂的制备方法。
[0020]更具体的，本发明通过下述方法制备改善子宫内膜容受性的中药复方制剂(亦称:补气调经方):首先将每味中草药制成〇? 1mm至3mm直径颗粒饮片，干燥，通过自动颗粒包装机用无毒性热封型纸，包装成直接配伍煎煮使用的重量分别为lg、2g、3g、4g、6g、9g、 10g、12g、30g的小包装，在小包装内的中草药占包装袋体积的二分之一至三分之二；所述的无毒性热封型纸包装成的小包装，集合为20-500倍，利用真空包装机真空包装；抽取样本，通过显微鉴定或/和薄层层析方法制得显微鉴定图或/和薄层图谱；避免了肉眼观察带来的鉴定不准确，影响了鉴定结果，提高了鉴定的科技水平；克服了传统中草药粗、大、黑的缺点，精确了剂量，保证了产品质量，便于药渣与药液的分离，保证了原药的功效，也减少了患者服用中药的麻烦，同时，有利于药物的贮存，更有利于中药的产业化和推广应用。
[0021]本复方制剂进行了动物试验，结果表明:可明显补充和调节脏腑、气血和经络，改善子宫内膜容受性(包括厚度、形态、血流等)，增加新鲜胚胎移植几率，提高新鲜胚胎移植成功率。
[0022]本复方制剂进行了临床试用，在34 (总68例)例的微刺激IVF治疗对象中的结果显示，加入本中药复方制剂组的，其子宫内膜的厚度、形态和血流有明显改善，新鲜胚胎移植的几率提尚。
[0023]本发明进一步进行了有关所述的中药复方制剂改善子宫内膜的分子机制的研究， 结果显示，本发明的中药复方制剂改善子宫内膜种植内环境，能影响血清中孕激素，促卵泡素和雌激素类似物的浓度，以及影响NFKB信号通路激活和相关基因的表达。研究数据显示，内膜厚度(mm):观察组(10.12±1.37)vs对照组(9.02±1.32) ;A型内膜人数(百分比％ ):观察组(97.06% )vs对照组(76.47% );(+、++)型内膜人数(百分比％ ):观察组 (94.11% )vs 对照组(70.59% ) ;P1:观察组(0? 94±0.18)vs 对照组(1.32±0.25) ;IR:观察组(0.58 ±0.12) vs 对照组(0.79 ±0.24)。
[0024]本发明的复方制剂可进一步用于制备治疗不孕症的药物制剂，以及用于制备提高妊娠率的药物制剂。
[0025]本发明的优点在于，
[0026]1，改善微刺激IVF-ET治疗中的子宫内膜种植环境不良问题。
[0027]2,通过改善微刺激治疗中内膜种植环境，提高子宫内膜受性，提高了微刺激 IVF-ET治疗效率。
[0028]3,揭示了中药辅助改善微刺激IVF-ET结局的分子生物学机制。
[0029]4,有助于建立中西医结合的有效干预IVF-ET治疗的实施措施。【附图说明】
[0030]图1是经典方案与微刺激促排卵方案的比较结果，其中显示微刺激方案比较传统方案有明显优势。
[0031]图2随机数字表法分本复方制剂组和非中药组，比较子宫内膜厚度、形态和血流变化的技术路线示意图。
[0032]图3随机数字表法分本复方制剂组和非中药组，比较适宜新鲜胚胎移植比率；比较新鲜胚胎移植后临床结局。
[0033]图4本复方制剂改善子宫内内膜客受性子宫内膜种植内环境差异比较。
[0034]图5本复方制剂组和非中药组两组间血清中孕激素，促卵泡素和雌激素类似物的浓度变化。
[0035]图6,本复方制剂组和非中药组NFKB信号通路激活情况，RT-PIR和方法检测一个环节的相关基因表达。【具体实施方式】
[0036]实施例1制备改善子宫内膜容受性的中药复方制剂
[0037]取下述组成的原料药:熟地黄白芍首乌女贞子山茱萸麦冬巴戟天当生香附菟丝子；分别按每付中药中的原料重量配比，将各原料药的提取物制成颗粒；首先将每味中草药制成〇.1mm至3mm直径颗粒饮片，干燥，通过自动颗粒包装机用无毒性热封型纸， 包装成直接配伍煎煮使用的重量分别为lg、2g、3g、4g、6g、9g、10g、12g、30g的小包装，在小包装内的中草药占包装袋体积的二分之一至三分之二；所述的无毒性热封型纸包装成的小包装，集合为20-500倍，利用真空包装机真空包装；抽取样本，通过显微鉴定或/和薄层层析方法制得显微鉴定图或/和薄层图谱；避免了肉眼观察带来的鉴定不准确，影响了鉴定结果，提高了鉴定的科技水平；克服了传统中草药粗、大、黑的缺点，精确了剂量，保证了产品质量，便于药渣与药液的分离，保证了原药的功效，也减少了患者服用中药的麻烦，同时， 有利于药物的贮存，更有利于中药的产业化和推广应用。
[0038]实施例2体内实验
[0039]本复方制剂进行了初步临床试验试验，结果表明:本复方制剂可明显补充和调节脏腑、气血和经络，改善子宫内膜容受性(包括厚度、形态、血流等)，增加新鲜胚胎移植几率，提高新鲜胚胎移植成功率。
[0040]实施例3临床试用研究
[0041]1.病人入组选择
[0042]接受IVF-ET治疗的患者(25岁-40岁之间)，无以下情况，PC0S，肥胖(BMI彡30)， 输卵管积水，无宫腔病变(粘连、息肉)，吸烟；
[0043]临床确定为肾虚气虚病人；根据病人年龄分组，分为正常反应组(< 35岁)和低反应组(> 36?40岁)，再根据卵巢对促排卵用药反应程度(获卵数、优质胚胎数)再次分为多胚组(多4)和少胚胎组3)进行分层研究；
[0044]2.观察应用本复方制剂对病人内膜厚度、形态、血流的影响
[0045]根据分组，用随机数字表法将病人分为本复方制剂治疗组和非治疗组，在促排卵过程中，观察子宫内膜厚度变化、形态变化、血流变化，并在移植日收集内膜脱落细胞，分析比较内膜种植相关基因表达差异(IL1、IL8、IL18、LIF、HB-EGF);
[0046]3.比较新鲜胚胎移植后临床结局
[0047]应用随机数字表法将病人分为应用本复方制剂组和对照组，比较适合新鲜胚胎移植(扳机日内膜厚度8-14mm，形态A-B型，内膜血流“ + ”以上)周期比率。并比较两组间新鲜胚胎移植临床结果，包括妊娠率、种植率、流产率、活产率、出生体重和胎儿畸形发生率等指标；
[0048]试验结果显示，微刺激IVF治疗对象中，加入本中药复方制剂组的，其子宫内膜的厚度、形态和血流有明显改善，新鲜胚胎移植的几率提高。
[0049]实施例4中药改善子宫内膜的分子机制研究
[0050]研究对象及干预方案:
[0051]接受IVF-ET治疗的患者(25岁-40岁之间)，无以下情况，PC0S，肥胖(BMI彡30)， 输卵管积水，无宫腔病变(粘连、息肉)，吸烟；
[0052]微刺激促排卵治疗中，每天用150iu的Gn，保证卵巢的适度反应，以获得满意数目的卵子，有助于保证良好的妊娠率；
[0053]①比较本发明中药组和非中药组子宫内膜种植内环境差异；
[0054]②比较本发明中药组和非中药组间血清中孕激素，促卵泡素和雌激素类似物的浓度变化；
[0055]③研究本发明中药辅助组和非中药辅助组NFKB信号通路激活情况，RT-PIR和方法检测个环节的相关基因表达；
[0056]取移植日脱落子宫内膜组织，比较两组种植相关基因的表达差异(LIF、IL6、IL18、 HB-EGF 等)；
[0057]比较本发明中药组和非中药组患者血清中FSH，E2, E3和雌激素类似物的浓度；并比较两组中内膜组织和孕激素受体与雌激素受体的表达差异；
[0058]比较本发明中药组和非中药组中IL1 a，ILf3表达差异，并比较分析IL1 a，IL0 激活的NFKB信息传导通路在应用本发明中药组和非中药组的激活程度；
[0059]实验结果如图1所示，对比经典方案，微刺激方案不需要GnRHa降调，对卵巢深度抑制得到了缓解，相应促性腺素(Gn)应用剂量明显减少；在微刺激促排卵中Gn的总应用剂量为经典方案的1/5以下，因此，显著降低卵巢过度刺激和术后出血的风险，增加治疗过程中和取卵手术后的身体舒适度；微刺激发生重度0HSS的发生率显著低于经典方案(0.05% vs 5%);微刺激促排卵方案避免了使用昂贵的GnRHa药物降调，且Gn用药时间短并剂量小，因此大幅度降低了治疗费用，同时微刺激方案减少了就诊次数，缩短了微刺激IVF治疗周期，因此减轻了患者的经济负担和身心困扰，证明微刺激IVF治疗剧透有效、安全、经济的优势；
[0060]基于现有技术中的微刺激治疗中，通常需采用枸橼酸氯米芬(CC)抑制LH峰、抑制早发排卵等。但由于CC的抗雌激素作用，大部分病人的子宫内膜生长受到抑制和子宫内膜微环境不良，因此往往不能够在取卵当月做新鲜胚胎移植，大部分病人需要做冷冻胚胎移植，因此，冷冻胚胎移植增加了治疗环节，也在一定程度上增加了治疗费用，尤其是胚胎冷冻的安全性尚无明确科学答案，存在未可知的隐患；本申请采用改善子宫内膜容受性的中药复方制剂用于微刺激IVF治疗中能改善子宫内膜容受性，使新鲜胚胎移植成为可能，为中药协同微刺激方案治疗新鲜胚胎移植提供了契机。
【主权项】
1.一种改善子宫内膜容受性的中药复方制剂，其特征在于，由下述原料药的提取物制 成:熟地黄炒白芍制首乌女贞子山茱萸麦冬巴戟天党参香附菟丝子。2.按权利要求1所述的改善子宫内膜容受性的中药复方制剂，其特征在于，所述的 每付中药中的原料药的重量配比为:熟地黄l〇_12g炒白芍10_12g制首乌10-12g女贞 子9-12g山茱萸5-6g 6g麦冬l〇-12g巴戟天8-10g党参l〇-13g香附8-10g英丝子10-12g〇3.按权利要求1所述的改善子宫内膜容受性的中药复方制剂，其特征在于，所述的每 付中药中的原料药的重量配比为:熟地黄12g炒白芍12g制首乌12g女贞子9g山茱萸6g麦冬12g巴戟天9g党参12g香附9g英丝子12g。4.权利要求1或2或3的改善子宫内膜容受性的中药复方制剂的制备方法，其特征在 于，按每付中药中的原料重量配比，取原料药:熟地黄白芍首乌女贞子山茱萸麦冬巴戟 天当生香附菟丝子进行提取获得提取物，分别将各原料药的提取物制成颗粒；将每味中 草药制成〇.1_至3mm直径颗粒饮片，干燥，包装成直接配伍煎煮使用的重量分别为lg、2g、 3g、4g、6g、9g、10g、12g、30g的小包装；抽取样本，通过显微鉴定或/和薄层层析方法制得显 微鉴定图或/和薄层图谱，进行精确剂量，保证产品质量。5.权利要求1或2或3的改善子宫内膜容受性的中药复方制剂在用于制备治疗不孕症 的药物制剂中的用途。6.按权利要求5的用途，其特征在于，所述的中药复方制剂改善子宫内膜容受性，增加 新鲜胚胎移植几率，提高新鲜胚胎移植成功率。7.按权利要求5的用途，其特征在于，所述的中药复方制剂用于制备提高妊娠率和活 产率的药物制剂。
【文档编号】A61P15/00GK105983052SQ201510096165
【公开日】2016年10月5日
【申请日】2015年3月3日
【发明人】童国庆, 戴德英
【申请人】上海中医药大学附属曙光医院