双酶系共解法提取磷虾油的方法
【专利摘要】本发明公开了一种双酶系共解法提取磷虾油的方法，包括以下步骤：1）取30g新鲜磷虾匀浆，加入超纯水150～200ml均匀混合；得磷虾匀浆液；2）取0.45～0.75g木瓜蛋白酶，溶解于20～40ml超纯水，得酶液；3）将步骤2）所得的酶液加入步骤1）所得的磷虾匀浆液中，并调节pH至6.0～7.0；然后于45～55℃酶解1.5～2.5h；所得的酶解产物经自然沉淀后，分别得水解液和水解残渣；4）将步骤3）所得的水解残渣用体积浓度≥95%的乙醇于48～52℃下进行浸提；浸提时间为1.5～2.5h，所得的浸提液减压浓缩至18～22ml，80℃水浴加热至乙醇挥发干净，得磷虾油。
【专利说明】双酶系共解法提取磷虾油的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种磷虾油的提取方法。
【背景技术】
[0002]南极磷虾，又名大磷虾或南极大磷虾，是一种生活在南冰洋的南极洲水域的磷虾。
[0003]采用南极磷虾制备而得的磷虾油具有超强的降血脂、降血糖、降血压、穿越血脑屏障营养及活化脑部细胞和神经，从而起到预防和治疗脑血管疾病的作用；同时，还能预防和治疗冠状动脉粥样硬化，冠心病，预防发生心梗、支架、搭桥及二次复发等心血管疾病；当然，南极磷虾油还可以起到抗菌消炎，预防癌症的发生发展，延缓衰老，调节内分泌等多重功效。
[0004]南极磷虾油含有Omega-3必需脂肪酸二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)0 Omega-3必需脂肪酸有很多促进健康的益处，包括心血管，神经，骨骼和关节，视力，皮肤保健等。其不饱和脂肪酸是自然界中唯一以磷脂型态结合ω-3(ΕΡΑ、?ΗΑ)和多样性超强抗氧化物(磷脂型奸青素Astaxanthin)的分子结构。南极磷奸油是含有丰富的维生素E、维生素A、虾青素、磷脂质、类黄酮的功能强大的抗氧化剂。
[0005]南极磷虾自身富含高效的消化腺蛋白酶。
[0006]磷虾油的制备方法大致有以下几种:
[0007]1、申请号为 201210410940的发明《一种从干南极磷虾中提取虾油粗品并处理泡沫的工艺》，步骤如下:(I)干南极磷虾，加入95~100%乙醇，搅拌提取4h，用80目滤布挤滤后再用滤纸过滤，得滤液及滤渣；(2)向步骤(1)所得滤渣中加入95~100%乙醇，搅拌提取4h，用80目滤布挤滤后再用滤纸过滤，得滤液及滤渣；向滤渣中再加入95~100%乙醇，搅拌提取4h，用80目滤布挤滤后再用滤纸过滤，得滤液及滤渣；(3)将步骤(2)所得的滤液合并，真空浓缩，即得虾油粗品。
[0008]每100g干南极磷虾(含水量为8%~10%)最终能得到19~20.72g的虾油粗品。
[0009]2、《南极磷虾粗虾油提取工艺优化》一文研究了南极磷虾粗虾油的有机溶剂提取工艺。探讨不同提取剂、提取剂混合比、提取时间、提取温度和料液比对南极磷虾粗虾油得率的影响。在单因素试验基础上，通过响应面分析确定最佳的提取工艺条件为:以正己烷+乙酸乙酯为提取剂、提取剂混合比71.3:28.7、料液比1:6.6、在57.8°C提取50min ;此时粗虾油得率为14.76%。
【发明内容】
[0010]本发明要解决的技术问题是提供一种DHA+EPA含量高的双酶系共解法提取磷虾油的方法。
[0011]为了解决上述技术问题，本发明提供一种双酶系共解法提取磷虾油的方法，包括以下步骤:
[0012]I)、取30g新鲜磷虾匀浆，然后加入超纯水150~200ml (例如为170ml)均匀混合；得磷虾匀浆液；
[0013]2)、取0.45~0.75g木瓜蛋白酶(B卩，木瓜蛋白酶的用量为新鲜磷虾重量的
1.5%~2.5%)，溶解于20~40ml (例如为30ml)超纯水，得酶液；
[0014]3)、将步骤2)所得的酶液加入步骤I)所得的磷虾匀浆液中，并调节pH至6.0~
7.0 ;然后于45~55°C酶解L 5~2.5h ;
[0015]所得的酶解产物经自然沉淀后，分别得位于上层的水解液和位于下层的水解残渣；
[0016]水解液作废弃处理；
[0017]4)、将步骤3)所得的水解残渣用体积浓度≥95%的乙醇于48~52°C (较佳为50°C)下进行浸提；浸提时间为1.5~2.5h (较佳为2h)，所述步骤I)中的新鲜磷虾与体积浓度≥95%的乙醇的料液比为:lg/6~IOml ；
[0018]浸提所得的浸提残渣重复上述浸提2次，合并3次浸提所得的浸提液；减压浓缩至18~22ml (较佳为20ml)，80°C水浴加热(为常压下的水浴加热)至乙醇挥发干净，所得物称为磷虾油。
[0019]作为本发明的双酶系共解法提取磷虾油的方法的改进:
[0020]所述步骤2)中，木瓜蛋白酶的重量为0.6g;
[0021]所述步骤3)中，调节pH至7.0 ;然后于50°C酶解2.5h;
[0022]所述步骤4)中，步骤I)中的新鲜磷虾与体积浓度>95%的乙醇的料液比为:lg/6ml。
[0023]备注说明:
[0024]本发明的磷虾即为南极磷虾。
[0025]本发明所选用的木瓜蛋白酶活力为250U/mg。
[0026]可用浓度为I~2mol/L HCl溶液、NaOH溶液等进行pH值的调节，此调节方法属于常规技术。
[0027]采用本发明的方法提取磷虾油，具有如下技术优势:
[0028]1、利用磷虾自溶特性，采用自溶+酶解的方式，更易于磷虾油的提取；
[0029]2、不需要事先对磷虾进行干燥处理，工艺简单；易于产业化；
[0030]3、所得的磷虾油中DHA+EPA含量>70%，较以往工艺有明显提高(现有技术一般仅能达到60%左右)。
[0031]4、避免使用易爆炸的乙酸乙酯作为溶剂；选用的乙醇是工业常用溶剂,无毒，易回收，不易爆炸。
【专利附图】
【附图说明】
[0032]下面结合附图对本发明的【具体实施方式】作进一步详细说明。
[0033]图1为不同pH条件下所得磷虾油中DHA+EPA含量的对比图；
[0034]图2为不同料液比条件下所得磷虾油中DHA+EPA含量的对比图；
[0035]图3为不同酶用量条件下所得磷虾油中DHA+EPA含量的对比图；
[0036]图4为不同酶解时间下所得磷虾油中DHA+EPA含量的对比图；
[0037]图5为不同酶解温度下所得磷虾油中DHA+EPA含量的对比图。【具体实施方式】
[0038]实施例1、一种双酶系共解法提取磷虾油的方法，依次进行以下步骤:
[0039]I )、取30g新鲜磷虾匀浆，然后加入超纯水170ml均匀混合；得磷虾匀浆液；
[0040]2)、取0.6g木瓜蛋白酶，溶解于30ml超纯水，得酶液；
[0041]3)、将步骤2)所得的酶液加入步骤I)所得的磷虾匀浆液中，并调节pH至7.0 ;然后于50°C酶解2.5h ；
[0042]所得的酶解产物经自然沉淀后，分别得位于上层的水解液和位于下层的水解残渣；
[0043]水解液作废弃处理；
[0044]4)、将步骤3)所得的水解残渣用95%乙醇180ml于50°C下浸提2h ；
[0045]浸提所得的浸提残渣重复上述浸提2次，即，每次均为:以浸提残渣替代水解残渣用95%乙醇180ml于50°C下浸提2h ；
[0046]合并3次浸提所得的浸提液；减压浓缩至20ml，80°C水浴加热至溶剂一乙醇挥发干净，得磷虾油。
[0047]所述的磷虾油中，DHA+EPA含量为71.4%。
[0048]对比例I系列、将实施例1中步骤3)中的pH由7.0分别改成5.0,6.0,8.0，其余等同于实施例1;从而得对比例I系列。
[0049]所得的磷虾油中，DHA+EPA含量如图1所述。
[0050]对比例2系列、将实施例1中步骤4)的浸提中的料液比由lg/6ml改成lg/10ml、lg/14ml ;其余等同于实施例1 ;从而得对比例2系列。
[0051 ] 所得的磷虾油中，DHA+EPA含量如图2所述。
[0052]备注说明:料液比为lg/10ml时，即每次浸提95%乙醇的用量为300ml ;料液比为lg/14ml时，即每次浸提95%乙醇的用量为420ml。
[0053]当料液比改为lg/5ml，由于所用溶剂的量偏少，无法实现有效浸提，即，由于所得浸提液过少，从而导致无法进行后续步骤。
[0054]对比例3系列、将实施例1中步骤2)中的木瓜蛋白酶与新鲜磷虾的重量比由2%分别改成0.5%、1.0%、1.5%, 2.5% ;其余等同于实施例1 ;从而得对比例3系列。
[0055]所得的磷虾油中，DHA+EPA含量如图3所述。
[0056]对比例4系列、将实施例1中步骤3)中的酶解时间由2.5h分别改成lh、l.5h、2h、3h ;其余等同于实施例1 ;从而得对比例4系列。
[0057]所得的磷虾油中，DHA+EPA含量如图4所述。
[0058]对比例5系列、将实施例1中步骤3)中的酶解温度由50°C分别改成40°C、60°C、70°C ;其余等同于实施例1 ;从而得对比例5系列。
[0059]所得的磷虾油中，DHA+EPA含量如图5所述。
[0060]最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
【权利要求】
1.双酶系共解法提取磷虾油的方法，其特征是包括以下步骤: 1)、取30g新鲜磷虾匀浆，然后加入超纯水150~200ml均匀混合；得磷虾匀浆液； 2)、取0.45~0.75g木瓜蛋白酶，溶解于20~40ml超纯水，得酶液； 3)、将步骤2)所得的酶液加入步骤I)所得的磷虾匀浆液中，并调节pH至6.0~7.0 ;然后于45~55°C酶解1.5~2.5h ; 所得的酶解产物经自然沉淀后，分别得位于上层的水解液和位于下层的水解残渣； 水解液作废弃处理； 4)、将步骤3)所得的水解残渣用体积浓度≥95%的乙醇于48~52°C下进行浸提；浸提时间为1.5~2.5h，所述步骤I)中的新鲜磷虾与体积浓度≥ 95%的乙醇的料液比为:lg/6 ~IOml ； 浸提所得的浸提残渣重复上述浸提2次，合并3次浸提所得的浸提液；减压浓缩至18~22ml，80°C水浴加热至乙醇挥发干净，得磷虾油。
2.根据权利要求1所述的双酶系共解法提取磷虾油的方法，其特征是: 所述步骤2)中，木瓜蛋白酶的重量为0.6g ； 所述步骤3)中，调节pH至7.0 ;然后于50°C酶解2.5h ； 所述步骤4)中，步骤I)中的新鲜磷奸与体积浓度> 95%的乙醇的料液比为:lg/6ml。
【文档编号】C11B1/10GK103525541SQ201310480475
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2013年10月14日 优先权日:2013年10月14日
【发明者】沈晨浩, 沈生荣 申请人:浙江大学