专利名称：新的α－氨基酸化合物、其制备方法和包含它们的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的α-氨基酸化合物、其制备方法和包含它们的药物组合物以及它们作为二肽基肽酶IV(DPP IV)的抑制剂的用途。
二肽基肽酶IV是一种存在于许多人体组织并且与许多病理学有关的膜丝氨酸蛋白酶。
具体地，已经证明，DPP IV与GLP-1(胰升糖素样肽-1)的失活有关。GLP-1是一种刺激胰腺分泌胰岛素的重要试剂，因而对血液中葡萄糖的水平具有直接的有益影响。
因此，抑制DPP IV构成了一种极有前景的治疗葡萄糖不耐受症(glucose intolerance)以及与高血糖症有关的疾病例如非胰岛素依赖型糖尿病(II型糖尿病)或肥胖的方法。
文献中已经描述了DPP IV抑制剂，例如在专利申请EP0490379和期刊Adv.Exp.Med.Biol.1997，421，157-160中描述了酰胺化合物，以及在专利申请DE19826972中描述了氨基甲酸酯化合物。
而且，在专利申请WO96/27593中描述了作为NO-合成酶抑制剂的α-氨基酸化合物—精氨酸类似物在治疗中枢神经系统和周围神经系统疾病、胃肠道系统和泌尿系统功能障碍疾病以及与心血管系统或肺支气管系统有关的疾病中的用途。
本发明的化合物具有二肽基肽酶IV抑制性能，这使得它们特别地可用于治疗葡萄糖不耐受症以及与高血糖症有关的疾病。
更特别地，本发明涉及式(I)的化合物、其可能存在的互变异构体、旋光异构体及其与药学上可接受的酸形成的加成盐 其中 代表一个任选地被氰基取代的5-元含氮杂环，Ak代表一个直链或支链的(C1-C6)亚烷基链，X代表一条单键或一个亚苯基，R1和R2可以相同或不同，各自代表氢原子或直链或支链的(C1-C6)烷基，Y代表NR4或CH-NO2，R4代表氢原子或直链或支链的(C1-C6)烷基，当Y代表CH-NO2时，R3代表一个选自直链或支链的(C1-C6)烷基、硝基和氰基的基团；或当Y代表NR4时，R3代表一个选自硝基和氰基的基团，其中不包括这样的化合物其中 代表一个未取代的5-元含氮杂环，同时Ak代表基团-(CH2)3-，同时X代表一条单键，同时Y代表NH，并且R3代表硝基。
在药学上可接受的酸中，例如可以非限定性的地提到盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、谷氨酸、富马酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、抗坏血酸、甲磺酸、樟脑酸、草酸等。
应当明白，“5-元含氮杂环”是指含有一、二或三个杂原子、其中一个杂原子是氮原子而其它存在的杂原子选自氧原子、氮原子和硫原子原子的5-元饱和单环基团。
优选的5-元含氮杂环是吡咯烷基和噻唑烷基。
其中R2代表氢原子的式(I)化合物以式(Ia)和(Ib)所代表的两种互变异构体形式存在 它们都构成了本发明整体的一部分。
其中R3代表氢原子的式(I)化合物以式(Ic)和(Id)所代表的两种互变异构体形式存在 它们都构成了本发明整体的一部分。
优选的式(I)化合物是其中 代表一个任选地被一个氰基取代的1-吡咯烷基或任选地被一个氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基。
优选的式(I)化合物是其中酰胺官能团的α-位构型为(S)的那些化合物。
本发明的一个优选方面涉及其中Ak代表基团(CH2)4的式(I)化合物。
本发明的另一个优选方面涉及其中 代表一个任选地被一个氰基取代的1-吡咯烷基或任选地被一个氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基并且Ak代表基团(CH2)3的式(I)化合物。
本发明的另外一个优选方面涉及其中X代表一条单键的式(I)化合物。
本发明的又一个优选方面涉及其中Y代表一个基团NR4(其中R4代表氢原子或直链的或支链的(C1-C6)烷基)的式(I)化合物。
本发明还有一个优选方面涉及其中R3代表硝基的式(I)化合物。
在本发明的优选化合物中，可以更具体地提到N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍、其互变异构体、旋光异构体及其与一种药学上可接受的酸形成的加成盐，N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其互变异构体、旋光异构体及其与一种药学上可接受的酸形成的加成盐，和N-{(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其互变异构体、旋光异构体及其与一种药学上可接受的酸形成的加成盐。
本发明还涉及一种制备式(I)化合物的方法，其特征在于使一种式(II)的化合物 其中Ak和X如式(I)所定义，P1代表一种氨基官能团的保护基，而P2代表一种不同于P1的氨基官能团的保护基，与一种式(III)的化合物在常规的肽偶联条件下反应 其中 如式(I)所定义，脱保护后，得到一种式(IV)的化合物 其中 ，P1、Ak和X如前面所定义，然后通过常规的有机化学反应，再经过脱保护反应，把它转变为式(I)的化合物，如果需要的话，按照常规的纯化技术对该化合物进行纯化，如果需要的话，按照常规的分离技术把它分离为旋光异构体，并且，如果需要的话，用一种药学上可接受的酸把它转变为一种加成盐。
式(Ie)的化合物—式(I)化合物的一种特例 其中 、R1、Ak和X如式(I)所定义，也可以以式(V)的化合物为原料而制得 其中P1、Ak和X如前面所定义，使该原料与式(III)的化合物在常规的肽偶联条件下反应，在脱保护(如果需要的话)后，得到式(Ie)的化合物，如果需要的话，按照常规的纯化技术对该化合物进行纯化，如果需要的话，按照常规的分离技术把它分离成它的旋光异构体，并且，如果需要的话，用一种药学上可接受的酸把它转变为加成盐。
本发明的化合物除了是新颖的外，还具有很有价值的药理活性。它们具有二肽基肽酶IV-抑制性能，使得它们可用于治疗葡萄糖不耐受症以及与高血糖症有关的疾病例如II型糖尿病或肥胖。
本发明还涉及包含至少一种式(I)的化合物作为活性成份和一种或多种合适的惰性的无毒赋形剂的药物组合物。在本发明的药物组合物中，可以更特别地提到适用于口服、非肠胃给药(静脉注射、肌肉内注射或皮下注射)或鼻腔给药的那些组合物、片剂或糖锭剂、适用于舌下给药的片剂、明胶胶囊、锭剂、栓剂、可注射制剂、可饮用悬浮液等。
使用的剂量可以根据疾病的性质和严重程度、给药方式和病人的年龄和体重以及任意相关的治疗而进行调整。每24小时的剂量在从0.5mg至2g的范围内变化，一次或分多次给药。
下列实施例详细说明本发明但是不以任何方式限制本发明。
所用的原料是已知的产物或者可以按照已知的方法制备。
实施例中所描述的化合物的结构是按照常规的光谱技术(红外、核磁共振、质谱)进行测定的。
应当明白，术语“构型(2α)或(2β)的化合物”是指一种选自绝对构型为(2R)和(2S)的化合物中的一种化合物，应当明白，当化合物(2α)代表绝对构型为(2R)的化合物时，则化合物(2β)代表化合物(2S)。实施例1N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍盐酸盐步骤AN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍把10mmol(2S)-2-氰基-吡咯烷、10mmol 1-羟基苯并三唑和10mmol二环己基碳化二亚胺加入10mmol N2-(叔丁氧基羰基)-N5-[(亚氨基)-(硝基氨基)甲基]鸟氨酸的二甲基甲酰胺溶液中，在室温下搅拌过夜，把生成的二环己基脲过滤出来，然后通过蒸发除去二甲基甲酰胺。通过硅胶色谱纯化(洗脱剂二氯甲烷/乙醇＝95/5)所得的残留物，得到预期的产物。
步骤BN-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍盐酸盐把4N盐酸的二噁烷溶液加入10mmol前一步骤中得到的化合物的二噁烷溶液中，在室温下搅拌24小时后，通过蒸发除去溶剂，加入水，冷冻干燥溶液，得到预期的产物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％计算值 39.58 6.04 29.37 10.62测定值 40.35 6.00 29.00 10.90实施例2N-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍倍半盐酸盐步骤A1-[(S)-N5-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酰基]吡咯烷按照实施例1步骤A中所述的方法，以(S)-N5-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酸和吡咯烷为原料，制得预期的产物。
步骤B1-[(S)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酰基]吡咯烷在10％钯/炭存在下，在室温和常压下，把10mmol前一步骤中得到的化合物的乙醇溶液氢化6小时，然后过滤反应混合物，蒸发，然后加入水后进行冷冻干燥，得到预期的产物。
步骤CN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基}-N’-氰基胍按照Synthesis 1975，332中所述的方法，以前一步骤中得到的化合物和NaN(CN)2为原料，制得预期的产物。
步骤DN-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍倍半盐酸盐按照实施例1的步骤B中描述的方法，以前一步骤中得到的化合物为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％计算值 43.03 7.06 27.37 17.32测定值 43.26 7.23 26.82 16.85实施例3N-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍步骤A3-{(S)-N5-(叔丁氧基羰基)-N2-[(9H-芴-9-基-甲氧基)羰基]鸟氨酰基]-1，3-噻唑烷按照实施例1步骤A中所述的方法，以(S)-N5-(叔丁氧基羰基)-N2-(9H-芴-9-基-甲氧基)羰基]鸟氨酸和1，3-噻唑烷为原料，制得预期的产物。
步骤B3-{(S)-N2-[(9H-芴-9-基-甲氧基)羰基]鸟氨酰基}-1，3-噻唑烷盐酸盐按照实施例1步骤B中所述的方法，以前一步骤中得到的化合物为原料，得到预期的产物。
步骤CN-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍按照Synthesis 1975，332中所述的方法，以前一步骤中得到的化合物和NaN(CN)2为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％计算值 44.43 6.71 31.08 11.86测定值 44.41 6.68 30.18 10.52实施例4N-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N’-氰基胍盐酸盐按照实施例2中所述的方法，以(S)-N6-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)赖氨酸代替(S)-N5-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酸作为原料，制得预期的产物。实施例5N1-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二盐酸盐步骤A1-[(S)-N5-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酰基]吡咯烷按照实施例1步骤A中所述的方法，以(S)-N5-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酸和吡咯烷为原料，制得预期的产物。
步骤B1-[(2S)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酰基]吡咯烷在10％钯/炭存在下，在室温和常压下，把10mmol前一步骤中得到的化合物的乙醇溶液氢化6小时，然后过滤反应混合物，蒸发，然后加入水后进行冷冻干燥，得到预期的产物。
步骤CN1-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基}-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺按照Bioorg.Med.Chem.1997，7(23)，3045-3048中所述的方法，以前一步骤中得到的化合物和N-甲基-1-甲硫基-2-硝基-乙二胺为原料，制得预期的产物。
步骤DN1-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二盐酸盐按照实施例1的步骤B中描述的方法，以前一步骤中得到的化合物为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％ H％ N％计算值40.23 7.03 19.55测定值40.17 6.98 18.92实施例6N-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N″-氰基-N’-甲基胍盐酸盐步骤A1-[(S)-N5-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酰基]吡咯烷按照实施例1步骤A中所述的方法，以(S)-N5-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酸和吡咯烷为原料，制得预期的产物。
步骤B1-[(2S)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酰基]吡咯烷在10％钯/炭存在下，在室温和常压下，把10mmol前一步骤中得到的化合物的乙醇溶液氢化6小时，然后过滤反应混合物，蒸发，然后加入水后进行冷冻干燥，得到预期的产物。
步骤CN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基}-N″-氰基-N’-甲基胍按照Chem.Pharm.Bull.1997，45(1)，53-61中所述的方法，以前一步骤中得到的化合物、N-氰基亚氨基-S，S-二甲基二硫代碳酸酯和甲胺为原料，制得预期的产物。
步骤DN-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N″-氰基-N’-甲基胍盐酸盐按照实施例1的步骤B中描述的方法，以前一步骤中得到的化合物为原料，制得预期的产物。质谱[M+H]+＝267；[M+C1]+＝301；[M-H]-＝265实施例7N-{(4S)-4-氨基-5-[(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例1中描述的方法，以(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷代替(2S)-2-氰基吡咯烷，制得预期的产物。元素微量分析C％ H％ N％ S％ Cl％计算值 34.14 5.16 27.87 9.11 10.08测定值 34.32 5.11 27.70 9.23 10.44实施例8N-{(4S)-4-氨基-5-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍盐酸盐步骤AN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[2-氨基甲酰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例1步骤A中所述的方法，以(±)-1，3-噻唑烷-2-甲酰胺(carboxamide)代替(2S)-2-氰基吡咯烷，制得预期的产物。
步骤BN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[(2α)-2-氨基甲酰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍盐酸盐通过硅胶色谱分离前一步骤A中得到的非对映异构体的混合物(洗脱剂二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵＝90/10/0.5)。预期的产物是以此方式从非对映异构体中分离出的第一个组份。
步骤CN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍把20mmol咪唑加入10mmol前一步骤中得到的化合物的吡啶溶液中，然后把反应混合物冷却到-30℃，滴加40mmol POCl3，然后用1小时的时间把温度调节到-20℃。通过蒸发除去吡啶，把残留物溶于乙酸乙酯中。洗涤溶液，干燥，浓缩，残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱剂二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵＝95/5/0.5)，得到预期的产物。
步骤DN-{(4S)-4-氨基-5-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例1的步骤B中描述的方法，以前一步骤C中得到的化合物为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％计算值 34.145.1627.879.1110.08测定值 34.414.9327.679.359.71实施例9N-{(4S)-4-氨基-5-[(2β)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例8的步骤C和D中描述的方法，以实施例8的步骤B中分离出来的非对映异构体的第二个组份为原料，制得预期的产物。质谱LC/ESI/HR和MS/MS[M+H]+＝316。实施例10N-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亚氨基)-(硝基氨基)甲基]赖氨酸和吡咯烷为原料，制得预期的产物。实施例11N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亚氨基)-(硝基氨基)甲基]赖氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％计算值41.44 6.38 28.19 10.19测定值41.66 6.31 27.78 10.18实施例12N-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亚氨基)-(硝基氨基)甲基]赖氨酸和1，3-噻唑烷为原料，制得预期的产物。质谱[M+H]+＝305，[M-H]-＝303实施例13N-{(5S)-5-氨基-6-[(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亚氨基)-(硝基氨基)甲基]赖氨酸和(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％计算值 36.115.5126.808.769.69测定值 36.365.4926.688.8110.04实施例14N-{(5S)-5-氨基-6-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍盐酸盐步骤AN-{(5S)-5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-6-[2-氨基甲酰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例1步骤A中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亚氨基)-(硝基氨基)甲基]赖氨酸和(±)-1，3-噻唑烷-2-甲酰胺为原料，制得预期的产物。
步骤BN-{(5S)-5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-6-[(2α)-2-氨基甲酰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍盐酸盐通过硅胶色谱分离前一步骤A中得到的非对映异构体的混合物(洗脱剂二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵＝90/10/0.5)。预期的产物是以此方式从非对映异构体中分离出的第一个组份。
步骤CN-{(5S)-5-氨基-6-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例8的步骤C和D中描述的方法，以前一步骤中得到的化合物为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％ H％ N％S％ Cl％计算值 36.11 5.5126.808.769.69测定值 36.52 5.4926.859.269.51实施例15N-{(5S)-5-氨基-6-[(2β)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例8的步骤C和D中描述的方法，以实施例14的步骤B中分离出来的非对映异构体的第二个组份为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％计算值 36.115.5126.808.769.69测定值 36.505.4926.009.669.66实施例16N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-氰基胍倍半盐酸盐按照实施例2中所述的方法，以(S)-N5-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酸和(2S)-2-氰基-吡咯烷为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％ H％N％ Cl％计算值43.03 7.06 27.37 17.32测定值43.26 7.23 26.82 16.85实施例17N-[(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基]-N’-氰基胍盐酸盐按照实施例2中所述的方法，以(S)-N6-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)赖氨酸和(2S)-2-氰基-吡咯烷为原料，制得预期的产物。质谱[M+H]+＝292，[M-H]-＝290实施例18N-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N’-氰基胍盐酸盐按照实施例2中所述的方法，以(S)-N6-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)赖氨酸和1，3-噻唑烷为原料，制得预期的产物。实施例19N1-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二盐酸盐按照实施例5中所述的方法，以(S)-N5-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酸和1，3-噻唑烷为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％ H％ N％S％ Cl％计算值 35.11 6.1618.618.5218.84测定值 35.54 5.9918.048.6119.51实施例20N1-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二盐酸盐按照实施例5中所述的方法，以(S)-N6-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)赖氨酸和吡咯烷为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％ H％N％ Cl％计算值41.94 7.31 18.81 19.05测定值41.87 7.26 18.34 19.75实施例21N1-[(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基吡咯烷基]-6-氧代己基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二盐酸盐按照实施例5中所述的方法，以(S)-N6-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)赖氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷为原料，制得预期的产物。质谱ESI/FIA/HR和MS/MS[M+H]+＝325；[M+Na]+＝347。实施例22N1-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二盐酸盐按照实施例5中所述的方法，以(S)-N6-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)赖氨酸和1，3-噻唑烷为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％计算值 36.936.4617.948.2218.17测定值 37.086.4917.178.1118.63实施例23N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N”-氰基-N’-甲基胍二盐酸盐按照实施例6中所述的方法，以(S)-N5-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酸和(2S)-2-氰基-吡咯烷为原料，制得预期的产物。实施例24N-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N”-氰基-N’-甲基胍盐酸盐按照实施例6中所述的方法，以(S)-N5-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鸟氨酸和1，3-噻唑烷为原料，制得预期的产物。实施例25N-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N”-氰基-N’-甲基胍盐酸盐按照实施例6中所述的方法，以(S)-N6-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)赖氨酸和吡咯烷为原料，制得预期的产物。实施例26N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N”-氰基-N’-甲基胍盐酸盐按照实施例6中所述的方法，以(S)-N6-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)赖氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷为原料，制得预期的产物。实施例27N-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N”-氰基-N’-甲基胍盐酸盐按照实施例6中所述的方法，以(S)-N6-(苄氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)赖氨酸和1，3-噻唑烷为原料，制得预期的产物。实施例28N-{4-[(2S)-2-氨基-3-((2S)-2-氰基-1-吡咯烷基)-3-氧代丙基]苯基}-N”-氰基-N’-甲基胍盐酸盐按照实施例6中所述的方法，以(S)-4-[(苄氧基羰基)氨基]-N2-(叔丁氧基羰基)苯丙氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷为原料，制得预期的产物。实施例29N-{4-[(2S)-2-氨基-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯基}-N’-硝基胍盐酸盐步骤A4-[(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯胺按照实施例1步骤A中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-(4-氨基苯基)-丙酸和吡咯烷为原料，制得预期的产物。
步骤BN-{4-[(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯基}-N’-硝基胍按照J.Am.Chem.Soc.1949，71，1968-1970中所述的方法，使前一步骤中得到的化合物与N-甲基-N’-2-二氧代肼甲酰亚氨基酰肼-2-氧化物反应，得到预期的产物。
步骤CN-{4-[(2S)-2-氨基-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯基}-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例1步骤B中所述的方法，以前一步骤B中得到的化合物为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％计算值47.13 5.93 23.55 9.94测定值48.06 5.77 23.60 10.00实施例30N-[(6S)-6-氨基-7-(1，3-噻唑烷-3-基)-7-氧代庚基]-N’-硝基胍二盐酸盐按照实施例29中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-7-氨基庚酸和1，3-噻唑烷为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％计算值 34.736.2822.098.4315.84测定值 34.786.1921.248.5815.56实施例31N-[(6S)-6-氨基-7-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-7-氧代庚基]-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例29中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-7-氨基庚酸和(2S)-2-氰基吡咯烷为原料，制得预期的产物。元素微量分析C％H％ N％Cl％计算值 43.156.6927.109.80测定值 43.756.5926.939.94实施例32N-{4-[(2S)-2-氨基-3-氧代-3-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]丙基]苯基}-N’-硝基胍盐酸盐按照实施例29中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-(4-氨基苯基)丙酸和(2S)-2-氰基吡咯烷为原料，制得预期的产物。
本发明化合物的药理学研究实施例33在体外对二肽基肽酶IV的抑制作用按照如下方式评价了化合物在体外对DPPIV酶活性的影响。使用一种产色素的底物—能水解释放对硝基苯胺(在405nm处有吸收)的甘氨酰基-脯氨酰基-对硝基苯胺(glycyl-prolyl-p-nitroanilide)(1.4mM)，对来自猪肾脏的酶进行分析。通过在不同浓度的待评价化合物的存在下(大多数为10-4-10-9M)的吸光值来测定酶的活性。根据得到的数据可以确定能抑制50％的对照活性时的有效剂量(IC50)，本发明化合物的IC50为1nM-10μM。
权利要求
1.式(I)的化合物、其可能存在的互变异构体、旋光异构体及其与药学上可接受的酸形成的加成盐 其中 代表一个任选地被氰基取代的5-元含氮杂环，Ak代表一个直链或支链的(C1-C6)亚烷基链，X代表一条单键或一个亚苯基，R1和R2可以相同或不同，各自代表氢原子或直链或支链的(C1-C6)烷基，Y代表NR4或CH-NO2，R4代表氢原子或直链或支链的(C1-C6)烷基，当Y代表CH-NO2时，R3代表一个选自直链或支链的(C1-C6)烷基、硝基和氰基的基团；或当Y代表NR4时，R3代表一个选自硝基和氰基的基团，其中不包括这样的化合物其中 代表一个未取代的5-元含氮杂环，同时Ak代表基团-(CH2)3-，同时X代表一条单键，同时Y代表NH，并且R3代表硝基。应当明白，“5-元含氮杂环”是指含有一、二或三个杂原子，其中一个杂原子是氮原子、而其它存在的杂原子选自氧原子、氮原子和硫原子原子的5-元饱和单环基团。
2.权利要求1的式(I)化合物，其中 代表一个任选地被一个氰基取代的1-吡咯烷基或任选地被一个氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基。
3.权利要求1或2的式(I)化合物，其中酰胺官能团的α-位构型为(S)。
4.权利要求1-3的任意一项的式(I)化合物，其中Ak代表基团(CH2)4。
5.权利要求1-3的任意一项的式(I)化合物，其中 代表一个被一个氰基取代的1-吡咯烷基或一个被一个氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基，并且Ak代表基团(CH2)3。
6.权利要求1-5的任意一项的式(I)化合物，其中X代表一条单键。
7.权利要求1-6的任意一项的式(I)化合物，其中Y代表基团NR4，其中R4代表氢原子或直链或支链的(C1-C6)烷基。
8.权利要求1-7的任意一项的式(I)化合物，其中R3代表硝基。
9.权利要求1的式(I)化合物，它是N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍、其旋光异构体、互变异构体及其与一种药学上可接受的酸形成的加成盐。
10.权利要求1的式(I)化合物，它是N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其旋光异构体、互变异构体及其与一种药学上可接受的酸形成的加成盐。
11.权利要求1的式(I)化合物，它是N-{(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其旋光异构体、互变异构体及其与一种药学上可接受的酸形成的加成盐。
12.合成权利要求1的式(I)化合物的方法，其特征在于使式(II)的化合物 其中Ak和X如式(I)所定义，P1代表一种氨基官能团的保护基，并且P2代表一种不同于P1的氨基官能团的保护基，与一种式(III)的化合物在常规的肽偶联条件下反应 其中 如式(I)所定义，脱保护后，得到一种式(IV)的化合物 其中 P1、Ak和X如前面所定义，然后通过常规的有机化学反应，再经过脱保护反应，把它转变为式(I)的化合物，如果需要的话，按照常规的纯化技术对该化合物进行纯化，如果需要的话，按照常规的分离技术把它分离为其旋光异构体，并且，如果需要的话，用一种药学上可接受的酸把它转变为一种加成盐。
13.药物组合物，其中包含权利要求1-11的任意一项的化合物作为活性组份以及一种或多种惰性的无毒的药学上可接受的载体。
14.权利要求13的药物组合物作为二肽基肽酶IV抑制剂在治疗葡萄糖不耐受症以及与高血糖症有关的疾病例如II型糖尿病或肥胖中的用途。
15.权利要求14的药物组合物作为抗糖尿病药物的用途。
全文摘要
作为药物的式(I)的化合物、其可能存在的互变异构体、旋光异构体及其与药学上可接受的酸形成的加成盐，其中:(a)代表一个任选取代的5－元含氮杂环,Ak代表一个亚烷基链,X代表一条单键或一个亚苯基,R
文档编号C07D277/04GK1385421SQ0211990
公开日2002年12月18日 申请日期2002年5月15日 优先权日2001年5月15日
发明者G·德南图尔, B·波特文, A·本诺斯特, N·里文斯, O·诺斯简, B·哈森－罗伯特, M·鲍兰格 申请人:瑟维尔实验室