增加胶原或透明质酸生产的肽的制作方法

专利名称：：增加胶原或透明质酸生产的肽的制作方法
技术领域：
：本发明涉及具有特定氨基酸序列的新肽，或者它的衍生物或盐。此外，本发明涉及含有该新肽等的组合物，利用该新肽等的方法，该新肽等的用途，编码该新肽等的多核苷酸。本发明的新肽或者它的衍生物或者盐可以用于增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产。
背景技术：
：通常，已经知道动物的结締组织含有作为其主要成分的胶原、透明质酸、弹性蛋白、硫酸软骨素、硫酸乙酰肝素、疏酸皮肤素、层粘连蛋白等等。在它们中间，胶原和透明质酸在结締组织中起重要作用，如下文描述。换句话说，胶原是组成动物的结締组织的主要蛋白质，且具体地，胶原占人体总蛋白质的近30%。因为胶原的主要功能在于形成活组织的骨骼结构，所以胶原广泛分布于皮肤、软骨组织、角膜、心脏、肝等等中，作为构成动物的组织形式的骨骼结构的主要组分。因为胶原特异性地作用于各种类型细胞的粘附，和细胞的分化或增殖，而且也具有作为细胞功能的调节因子的作用，所以胶原的减少可以引起各种疾病，如角膜病症，如角膜溃疡，关节病症，如风湿病、关节炎、退行性关节炎和骨关节炎，和在一些情况中引起炎性疾病。在皮肤真皮细胞外基质中，从胶原纤维形成网络束维持组织形状。当胶原纤维成熟并增殖而继续进行交联形成时，得到厚和直的胶原纤维束，其又在年轻皮肤中产生合适的皮肤绷紧度(tautness)。然而，在衰老皮肤中，随着成纤维细胞活性(例如，胶原生产活性等等)的降低，因为真皮细胞外基质中胶原纤维显著减少和形成异常的老化交联，所以皮肤变得僵硬，并且原来富有弹性的皮肤绷紧度出现不希望看到的损失。结果，在皮肤中形成皱紋和下垂。已经详细研究了光老化对无毛小鼠的月交原纤维束结构的改变(见Jowm"/，4，36-37,1998)。结果表明在用UVB照射的无毛小鼠中，形成了皱紋，胶原纤维束被破坏，并且皮肤弹性降低，从而与皱紋的形成匹配。此外，还已知胶原在持水功能中很出色。为了改善胶原减少引起的状态，已经发现了各种增强胶原合成的物质。例如，已知视黄酸(见，例如R.Marks等人，5n'fe/zJowr"a/o/Dwm^o/ogy,122,91-98，1990)，含有由甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸组成的三种氨基酸的制剂(见例如，日本专利公开号Hei7-194375),来自甘草、桑才对树皮、,荟、问荆(A《w^Wwwarvewse)、金4艮花(Loniceraeflos)、黄檗树皮、魁蒿(」Wem/wV^n'"ce;w)、龙胆等等的植物提取物(见例如，日本专利公开号2001-206835),TGF-0,抗坏血酸等等。此外，作为增强胶原合成的另一种物质，已知由I型前胶原的182到241位氨基酸残基组成的肽(见例如，K.Katayama等人，j5/oc/^m/^o;，30，7097-7104,1991),和选自由I型前胶原的182到241位氨基酸残基组成的上述肽的Lys-Thr-Thr-Lys-Ser肽(见例如，K.Katayama等人，历o/.C/^m.，268(14),9941-9944,1990)。另一方面，透明质酸是一类酸性粘多糖，其存在于皮肤、软骨、关节液、脐带、眼玻璃体或者其他结締组织中。尤其在皮肤表皮中，已知透明质酸广泛分布于基底层到颗粒层，并且透明质酸支持表皮细胞外空间的结构，并且参与诸如营养物或者废物的物质从表皮基底层到角质细胞层的转运，并且用于触发增强表皮细胞的周转。此外，已经知道透明质酸具有强的水保持作用，可以在仅lg透明质酸中保持约6L水，并且通过该作用，透明质酸在细胞间隙中起保持水分的作用。已知透明质酸随着老化逐渐减少，且该减少与胶原的情况一样，也是导致皮肤老化，例如形成皮肤皱紋和皮肤下垂、皮肤弹性和皮肤绷紧度下降、皮肤干燥或皮肤粗糙的原因之一。然而，透明质酸是一种聚合物化合物，从而不容易从皮肤外部向表皮提供透明质酸，并且为了对诸如表皮细胞之间的部分提供透明质酸，重要的是增强活体内透明质酸的生物合成。为了改善透明质酸减少引起的状态，已经发现增强透明质酸合成的各种物质。例如，已知芦荟提取物、秋葵提取物、水溶性e-l,3-葡聚糖衍生物、酵母提取物(日本专利公开号2004-051533)、属于楷膜藻科(Kallymeniaceae)Callophyllis属的海藻类提取物(日本专利公开号2000-136147)、熏衣草提取物(日本专利公开号Hei10-182402)、属于丛梗藻科(Durvilleaceae)Durvillea属的海藻类提取物(日本专利公开号Hei09-176036)。发明概述以希望开发一种新的材料，其是安全的并且能够显著增强选自胶原和透明质酸的至少一种成员的生产。鉴于上述传统技术存在的问题，本发明的目的是提供新的材料，其是安全的并且能够显著增强选自胶原和透明质酸的至少一种成员的生产。由于对解决上述问题的深入研究的结果，本发明人已经发现具有特定氨基酸序列的新肽可以用作新的材料，其是安全的并且能够显著增强选自胶原和透明质酸的至少一种成员的生产。从而完成了本发明。具体地，本发明的要点涉及[1]式(I)代表的肽Leu-Glu-His(1)，或者它的衍生物，或者其盐；[2]肽，其在如上面[l]中定义的氨基酸序列中具有一个或多个氨基酸的替代和/或添加，并且其能够增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产，或者它的衍生物或者其盐，附带条件是该肽不含有Lys-Thr-Thr~Lys-Ser;[3]式(II)代表的肽Leu-Glu画His隱Ala(SEQIDNO:1)(11)，或者它的衍生物，或者其盐；[4]式(III)代表的肽Leu画Glu-Lys-Ala(SEQIDNO:18)(III),或者它的衍生物，或者其盐；[5]式(IV)代表的肽Leu-Asp画His曙Ala(SEQIDNO:19)(IV)，或者它的衍生物，或者其盐；[6]式(V)代表的肽Leu國Glu画ffis-Ala-Phe(SEQIDNO:20)(V)，或者它的衍生物，或者其盐；[7]含有如上面[1]到[6]的任一项定义的肽或它的衍生物或者其盐的组合物；[8]用于增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产的方法，其通过使用如上面[1]到[6]的任一项定义的肽或它的衍生物或者其盐或者如上面[7]中定义的组合物实现；[9]如上面[1]到[6]的任一项定义的肽或它的衍生物或者其盐在生产用于增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产的组合物中用途；[10]由编码如上面[1]到[6]的任一项定义的肽的核普酸序列组成的多核苷酸；[11]由编码如上面[1]到[6]的任一项定义的肽的核普酸序列的反义序列组成的多核普酸；[12]含有如上面[10]或者[11]定义的多核苷酸的质粒；[13]含有如上面[10]或者[11]定义的多核苦酸的表达载体；和[14]含有如上面[10]或者[11]定义的多核苦酸的转化体。发明详述根据本发明，提供了能够增强选自胶原和透明质酸的至少一种成员的生产的新的材料。此外，已显示本发明的肽或者它的衍生物或者其盐当作用于细胞时不显著减少细胞数目。因此，根据本发明，提供了新的肽或者它的衍生物或者其盐，其能够增强选自胶原和透明质酸的至少一种成员的生产，并且可以安全^f吏用而不显示出细胞毒性。本发明提供了式(I)代表的肽Leu-Glu-His，或者它的衍生物或者其盐。本发明还提供了肽，其特征是该肽在式(I):Leu-Glu-His代表的氨基酸序列中具有一个或多个氨基酸的替代和/或添加，并且能够增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产(其中该肽不含有Lys-Thr-Thr-Lys-Ser)，或它的衍生物或者其盐。在本说明书中，"肽的衍生物"指例如，通过肽的乙酰化、棕榈酰化、十四烷基化、酰胺化、丙烯酸酯化(acrylation)、丹石黄酰化、生物素化、磷酸化、琥珀酰化、iV-(某)酰苯胺(anilide)形成、苄氧羰基化、甲酰化、硝化、磺化、醛形成、环化、糖基化、一甲基化、二曱基化、三甲基化、胍基化、amidination、马来酰化、三氟乙酰化、氨曱酰化、三硝基苯基化、nitrotroponylation或者乙酰乙酰化等得到的衍生物。其中，棕榈酰化是优选的，因为预期它能增加对细胞的通透性，并且N-末端的乙酰化、C-末端的酰胺化和C-末端的甲基化也是优选的，因为预期它们赋予对从末端降解肽的外肽酶的抗性，并从而增加活体中的稳定性。在本说明书中，"盐"指肽或者它的衍生物的任何可药用盐(包括无机盐和有机盐)，并且包括例如，肽或者它的衍生物的钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、铵盐、盐酸盐、疏酸盐、硝酸盐、有机盐(乙酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、草酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐、延胡索酸盐、丙酸盐、曱酸盐、苯曱酸盐、苦味酸盐、苯磺酸盐等等)等等，优选地铵盐、盐酸盐、硫酸盐和乙酸盐，更优选铵盐和乙酸盐。氨基酸的替代优选为但不具体限于，保守氨基酸替代，即，氨基酸的保守替代。在本说明书中，术语"氨基酸的保守替代"指下面表l中所示的每组中氨基酸之间的替代。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>酸(M)、苏氨酸(T)其中，氨基酸的优选的保守替代包括天冬氨酸(D)和谷氨酸(E)之间的替代，精氨酸(R)、赖氨酸(K)和组氨酸(H)之间的替代，色氨酸(W)和苯丙氨酸(F)之间的替代，苯丙氨酸(F)和缬氨酸(V)之间的替代，亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)和丙氨酸(A)之间的替代，甘氨酸(G)和丙氨酸(A)之间的替代，等等。一个或多个氨基酸的(保守)替代优选地指一个或几个氨基酸的(保守)替代，更优选地1到3个氨基酸的(保守)替代，更优选1到2个氨基酸的(保守)替代，甚至更优选1个氨基酸的(保守)替代。一个或多个氨基酸的添加指加入优选1到22个氨基酸，更优选1到12个氨基酸，甚至更优选1到5个氨基酸，甚至更优选1到3个氨基酸，还更优选1到2个氨基酸。在Leu-Glu-His(下文中称作LEH，如在一些情况中，氨基酸的单字母密码所示)中具有一个或多个氨基酸的保守替代和/或添加的肽包括，但不限于，例如，含有一个或多个氨基酸的保守替代的那些肽(例如，IEH、LDH、LDK、LEK等等)，和向LEH序列加入一个或多个氨基酸的那些肽(例如，LEHA、LEHW、LEHF、LEHV、LEHL、LEHI、LEHM、LEHG、LEHS、LEHT、ALEH、GLEH、SLEH、MLEH、TLEH、LEHAW、LEHAF、LEHAV、LEHAL、LEHAI、LEHAM、LEHAG、LEHAS、LEHAT、ALEHA、GLEHA、SLEHA、MLEHA、TLEHA、FLEHA、SLEHHT、GLEHAL、DLEHAL、QLEHAK、SLEHAD、QLEHAR、EFLEHA、LEHAVV、DPELEHA、HLEHAAS、LEHASVD等)等等。其中，优选的肽包括IEH、LDH、LDK、LEK、LEHA、LEHF、LEHG、LEHAF、FLEHA、SEEHHT、GLEHAL、DLEHAL、QLEHAK、SLEHAD、QLEHAR、EFLEHA、LEHAVV、DPELEHA、HLEHAAS、LEHASVD等等，且更优选地，肽是LEHA和LEHAF。此外，在LEH肽中具有一个和多个氨基酸的保守替代和添加的肽包括j旦不限于作为优选的实例的例如，IEHA、LDHA、LDKA、LEKA等等。此类肽的更优选的实例包括在LEHA肽中具有一个和多个氨基酸的替代和/或添加的肽，更优选在LEHA肽中具有一个和多个氨基酸的保守替代和/或添加的肽。这里，一个和多个氨基酸的(保守)替代和/或添加具有与上文所述的相同的含义。此外，从在LEH肽中具有一个和多个氨基酸的保守替代和/或添加的肽中缺失一个或几个氨基酸的肽也包括在本发明的肽中，只要该肽能够增强细胞中的胶原或者透明质酸的生产。此类肽包括例如，EHA、LHA、LEA等等，其是从LEHA肽缺失一个氨基酸的肽。在本说明书中，术语"能够增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产"指当目的肽或者它的衍生物或者其盐作用于细胞时，与目的肽或者它的衍生物或者其盐不作用于细胞的情况相比，细胞中胶原、透明质酸或者两者的生产的量增加了。该术语指例如，当目的肽或者它的衍生物或者其盐在人细胞的培养系统的测试中以10pg/ml的浓度作用时，与目的肽或者它的衍生物或者其盐不作用的情况相比，细胞中胶原的生产量达到例如，约110%或以上，更优选约120%或以上，甚至更优选约130%或以上。该术语也指，例如，当目的肽等以100pg/ml的浓度作用时，与目的肽等不作用的情况相比，细胞中透明质酸的生产量达到例如，约110%或以上，更优选约120%或以上，甚至更优选约130%或以上。在特定实施方案中，关于上述术语的细胞指成纤维细胞或者角质形成细胞，且在另一特定实施方案中，指皮肤成纤维细胞或表皮角质形成细胞。可以以本领域中已知的方法制备本发明的肽。例如，可以通过化学合成方法(例如，固相方法(例如，Fmoc方法)、液相方法等等)合成本发明的肽，或者可以通过如重组表达的方法制备本发明的肽。组成本发明的肽的氨基酸可以是L-或者D-型，优选L-型。此外，通过已知的方法，如蛋白酶处理，从含有目的氨基酸序列的蛋白质的氨基酸序列切出由目的氨基酸序列组成的肽，也可以制备本发明的肽。例如，含有LEH序列和LEHA序列的蛋白质包括如下面表2中显示的蛋白质。<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>ga〃o戸由"D618-621(seqidno:17)在考虑到蛋白酶的序列特异性等的基础上，本领域技术人员可以适当地选择适于从含有目的氨基酸序列的蛋白质的氨基酸序列切出由目的氨基酸序列组成的肽的蛋白酶。例如为了从来自胡萝卜的上述序列(SEQIDNO:6)切出LEH序列和/或LEHA序列，切出方法例如可以为并用嗜热菌蛋白酶(来自Sac/〃w^zwmo/7ro^o(y"cwj和月夷凝乳蛋白酶(来自牛胰)，等等。此外，例如，为了从上述来自马铃薯的序列(SEQIDNO:8)切出LEH序列和/或LEHA序列，方法可以为例如伴随使用蛋白酶M"Amano"G(来自米曲霉(A^erg"/^oo;zm):AmanoEnzyme,Inc.生产)和上述嗜热菌蛋白酶等等。此夕卜，例如，为了从上述来自稻的序列(SEQIDNO:9)切出LEH序列和/或LEHA序列，方法可以为例如伴随使用上述蛋白酶M"Amano"G和上述嗜热菌蛋白酶，等等。此外，例如，为了从上述来自大豆的序列(SEQIDNO:10)切出LEH序列和/或LEHA序列，方法例如可以为使用上述嗜热菌蛋白酶等等。此外，例如，为了从上述来自菜豆的序列(SEQIDNO:11)切出LEH序列和/或LEHA序列，方法可以为例如伴随使用上述胰凝乳蛋白酶和上述嗜热菌蛋白酶，等等。此外，例如，为了从上述来自木薯的序列(SEQIDNO:12)切出LEH序列和/或LEHA序列，方法可以为例如伴随使用上述胰凝乳蛋白酶和上述嗜热菌蛋白酶，等等。此外，例如，为了从上述来自日本叉牙七鳃鳗的序列(SEQIDNO:16)切出LEH序列和/或LEHA序列，方法可以为例如伴随使用胰蛋白酶(来自猪胰)和上述嗜热菌蛋白酶，等等。含有目的氨基酸序列的蛋白质和蛋白酶的组合不限于上述组合，并且优选组合包括大豆蛋白(来自大豆的蛋白质)和嗜热菌蛋白酶的组合。当用蛋白酶水解蛋白质时，使用的反应条件不受特别限制，并且可以由本领域技术人员根据普通技术知识选择。例如，当使用市售的蛋白酶时，可以根据其使用说明选择反应条件。通常可以使用30。C到80°C,优选40。C到70。C,更优选50。C到6(TC的反应温度。此外，通常，可以使用2到30小时，优选3到24小时，更优选10到20小时，尤其优选12到18小时的反应时间。反应pH优选所使用的蛋白酶的大约最佳的pH。结束反应的方法也不受特别限制，并且可以使用已知的方法。此类方法包括例如，热处理，如85。C加热15分钟或者100。C加热5分钟，等等。用蛋白酶水解处理后，根据本领域中已知的方法，通过纯化可以得到目的肽。作为此类已知的方法，例如，可以使用强酸离子交换树脂、十八烷基二氧化硅(octadecylsilica)(ODS)树脂等等。例如，通过将用蛋白酶处理过的肽的水溶液吸附到ODS树脂，并用任意浓度的有机溶剂(例如，乙腈等)洗脱肽，可以纯化目的肽。另一方面，例如，通过将用蛋白酶处理的肽的水溶液吸附到强酸离子交换树脂，并用盐浓度为0.18M到0.25M，更优选0.20M到0.23M的洗脱物(例如，氯化钠、氯化钾溶液等等)洗脱肽，可以纯化目的肽。从而，与通过化学合成方法生产的情况相比，从成本观点看，用蛋白酶水解天然蛋白质得到的肽是有利的。此外，据认为通过用蛋白酶水解天然肽得到的肽对于活体更安全。因此，所得到的肽适用于内用药、食物、敏感性皮肤的化妆品、饲料等等，其对活体的应用需要较高的安全性。通过本领域中已知的方法可以制备本发明肽的书f生物。例如，该方法示例如下，其中以LEH肽的N-末端乙酰化为例(根据Fmoc方法进4亍的固相合成方法(L.A.Carpino,G.Y.Han,C/zem.Soc.,92,5748(1970))。首先，将Fmoc-His(l-Trt)-OH的C-末端结合到用于固相合成的树脂，之后通过哌啶处理除去保护基(Fmoc)。随后，将得到的树脂中和并洗涤，并向His的N-末端引入Fmoc-Glu(OtBu)-OH。其次，通过哌啶处理除去保护基(Fmoc),并再次中和和洗涤得到的树脂。之后，向Glu的N-末端引入N-乙酰-亮氨酸。从所得的树脂切出肽链，并通过用TFA(三氟乙酸)解理His的Trt基团和Glu的tBu基团进行去保护。最后，通过制备型HPLC除去未反应的物质进行纯化，以得到N-末端乙酰化的LEH。本领域技术人员明白通过适当修改上述方法可以制备任意衍生物，并且例如，当制备N-末端棕榈酰化的LEH时，可以将上述N-乙酰-亮氨酸改变成N-棕榈酰-亮氨酸。本领域技术人员通过本领域中已知的任一种方法可以容易地制备本发明的肽的盐。所得到的本发明的肽或者它的衍生物或其盐可以用于增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产。如下面的实施例所示，证实在添加此类肽或者它的衍生物或其盐的培养溶液中培养皮肤成纤维细胞导致细胞中I型胶原的生产量增加，并且在该培养溶液中培养表皮角质形成细胞导致细胞中透明质酸生产的量增加。本发明还提供了組合物，其特征在于该组合物含有上述肽或者它的4汙生物或其盐。由于此类特征，该组合物可以例如合适地用作药物组合物、食物、化妆品或饲料，且此外，用作用于阐明与胶原或透明质酸有关的生理状况的研究试剂。药物组合物包括例如，以人为代表的哺乳动物中胶原和/或透明质酸的量减少导致的疾病的治疗剂或预防剂。具体地，本发明的组合物可以合适地用作关节疾病如类风湿性关节炎、退行性关节炎或骨关节炎的治疗剂和/或预防剂，或者用作用于由于暴露于紫外线、老化等等引起的皱紋或者皮肤下垂的预防剂和/或治疗剂，和另外用作皮肤的弹性或者绷紧度下降的预防剂和/或治疗剂。食物包括例如，用于改善或预防以人为代表的哺乳动物中胶原和/或透明质酸的量减少引起的状况的食物。具体地，本发明的组合物可以合适地用作改善或预防诸如关节痛的症状的食物，或者用作用于改善或预防由于暴露于紫外线、老化等等引起的皱紋或者皮肤下垂的食物。口^'、，-、'、又，化妆品包括例如，用于预防和/或改善由于暴露于紫外线、老化等等引起的皱紋或者皮肤下垂的化妆品，和用于预防和/或改善皮肤的弹性或者绷紧度下降的化妆品。饲料包括例如，用于改善或预防家畜如牛、猪、家禽、羊和马或者宠物动物如狗和猫中胶原和/或透明质酸的量减少导致的状况的饲料。具体地，本发明的组合物可以合适地用作改善或预防胶原和/或透明质酸的量减少导致的各种疾病的饲料，所述疾病为诸如角膜病症，如角膜溃疡，关节病症，如风湿病、关节炎、退行性关节炎和骨关节炎，和炎性疾病。肽等等的类型、组合物的剂量开;式等等而变。通^常，从得到增强胶原和/或透明质酸生产的显著作用的观点看，含量优选为按重量计o.oooi到70%,更优选按重量计0.001到50%，甚至更优选按重量计0.001到20%，更优选按重量计0.01到10%,还优选按重量计0.05到10%,更优选按重量计0.12到10%。通过在可以实现本发明的目标的范围内，合适地组合通常用于制剂、食物等领域中的载体、基质和/或添加剂和上述肽或者它的衍生物或者其盐，可以制备本发明的组合物。在一个实施方案中，通过组合通过一次纯化上述肽或者它的衍生物或者其盐得到的纯化物来制备本发明组合物，以便具有例如按重量计0.05%或以上，优选按重量计0.08%或以上，更优选按重量计0.1%或以上，甚至更优选按重量计0.12%或以上的浓度，以便具有上述含量。载体可以与例如糖(例如，甘露糖醇、乳糖、葡聚糖等等)、纤维素(例如，羟丙基纤维素、曱基纤维素、结晶纤维素等等)、弱水溶性树胶(例如，阿拉伯树胶、西黄蓍胶等等)、交联的烯类聚合物、脂类等等的一种或多种组合使用。基质可以与例如水、脂肪和油、矿物油、蜡、脂肪酸、硅酮油、固醇、酯、金属皂、醇等等的一种或多种组合使用。添加剂可以与例如表面活性剂、增溶组分、乳化剂、油性组分、稳定剂、增稠剂、防腐剂、粘合剂、润滑剂、分散剂、pH调节剂、增湿剂(moisturizer)、紫外线吸收剂、螯合剂、经皮吸收增强剂、抗氧化剂、崩解剂、增塑剂、緩冲剂、维生素、氨基酸、着色剂、加香剂等等的一种或多种组合使用。此外，如果需要，为了加入其他有用的作用，本发明的组合物可以含有一种或多种各种组分的组合，如皮肤增白组分、抗炎组分、抗生素组分、细胞激活组分、收敛剂组分、抗氧化剂组分、痤疮改善性组分、用于增强生物学组分如胶原的合成的组分、增强循环的组分、增湿的组分和抗老化组分。本发明的组合物可以采取任一种剂量形式，如用于外用剂(包括化妆品)，用于内用剂(包括食物和祠料)等等，并且可以优选地作为外用剂使用。用于外用剂可以以任意形式使用，如液体、乳剂、乳膏、洗剂、糊剂、奶油冻、凝胶、片(通过基质支持)、气溶胶和喷雾剂。化妆品可以以任意形式使用，如用于基本皮肤护理的化妆品，如洗剂、乳剂、乳膏、油和面膜，以及化妆品，如粉底、胭脂和口红，以及另外的清洁制剂，如洗面剂(facewash)、清洁制剂和身体清洁制剂，和;木浴剂。用于内用剂(包括食物和饲料)可以以任何形式使用，例如，片剂、丸剂、颗粒、细小颗粒、粉末、硬胶嚢、软胶嚢、干燥糖浆、溶液(包括可饮用的制剂、悬浮液和糖浆)、凝胶制剂、脂质体制剂、提取制剂、酊剂、清凉剂制剂和胶冻制剂。此外，对于食物的情况，组合物可以以食物的任一种通常的形式提供，如面包、面条、现成的食物、加工的肉产品(例如，火腿、香肠等等)、加工的海产品、调味品(例如，色拉调料等等)、乳制品、糖食(例如，饼干、糖果、果冻、冰洪淋等等)、汤和汁。当生产成这种形式时，取决于目的食物的性质等等，通过本领域技术人员已知、、飼;;受:体限制Z因为饲-十可以以任一种i式使用。本发明的组合物可以用于增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产，其中利用上述肽或者它的衍生物或者其盐增强细胞中胶原和/或透明质酸生产的能力。本发明还提供了增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产的方法，其特征在于使用上述肽或者它的衍生物或者其盐或者上述组合物。在本发明的方法中，上述肽或者它的衍生物或者其盐或者上述组合物可以以有效量或者以上的量用于得到增强选自胶原和透明质酸的至少一种成员的生产的作用。具体地，用于本发明方法中的上述肽或者它的衍生物或者其盐的量在用于外用剂的情况中，通常优选为约0.1ng到2g/天/体重约S0kg的成年人。在用于内用剂的情况中，体重约50kg的成年人的用量通常优选为约0.001mg到10，000mg/天，更优选约1到l，OOOmg/天，甚至更优选约1到100mg/天。盐或者上述组合物的步骤。在该种:清况下,'应s用于皮肤的上述^或者它的^f汙生物或者其盐的量优选为约lng到500yg/cn^，更优选约0.01到50yg/cm2，甚至更优选约0.1到10yg/cm2。本发明还提供了上述肽或者它的衍生物或者其盐在生产用于增强选自细月包中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产的组合物中的用途，所述组合物优选可以用作用于外用剂的组合物。可以使用上述肽或者它的衍生物或者其盐，从而使得在组合物中具有上述含量。本发明还提供了多核苷酸，其特征是该多核苦酸由编码上述肽的核苦酸序列组成。本发明的多核苷酸不受具体限制，只要该多核苷酸编码上述肽。例如，作为编码LEHA的多核香酸，根据遗传密码表，显然编码LEHA的任何序列都可以合适的使用，这取决于密码子选择等等。优选地，通过下面的序列示例该多核苷酸TTGGAACATGCG(SEQIDNO:2)TTGGAACATGCA(SEQIDNO:3)CTTGAACACGCG(SEQIDNO:4)CTGGAGCACGCA(SEQIDNO:5)可以通过本领域中已知的方法制备本发明的多核苷酸。例如，使用通过商业途径可获得的DNA合成仪(例如，AppliedBiosystems3400DNA合成仪，AppliedBiosystems生产)，可以制备该多核苷酸。使用如上述得到的多核苷酸，可以制备如下述的质粒或者表达载体。本发明还提供了多核苷酸，其特征是该多核普酸由编码上述肽的核香酸序列的反义序列组成。此类多核苷酸也可以以与如上述相同的方式制备。本发明的多核苷酸可以用于通过基因工程或者在基因疗法等等中表达上述肽，或者作为阐明与胶原或者透明质酸有关的生理状况的试剂。此外，使用此类多核苷酸，可以制备下述本发明的质粒或者表达载体。本发明还提供了质粒，其特征是该质粒含有上述多核苷酸。使用分子生物学实验中的一般技术，通过将本发明的多核普酸整合入已知的质粒，可以制备本发明的质粒，所述已知的质粒包括但不具体限于，例如，pBR质粒、pUC质粒等等。本发明还提供了表达载体，其特征是该表达载体含有本发明的多核苦酸。使用分子生物学实验中的一般技术，通过将本发明的多核苦酸整合入已知的载体，从而使得该多核苷酸可以表达，可以制备本发明的表达载体，所述已知的载体包括但不具体限于，例如，pcDNA3、pSD64、人谨菌体载体等等。使用如上述得到的质粒或表达载体，可以制备如下述的转化体。本发明还提供了转化体，其特征是该转化体含有上述多核苷酸。通过将上述质粒或表达载体导入所需宿主中，将上述多核普酸直接整合入宿主的染色体等等，可以得到本发明的转化体。宿主不受具体限制，并且例如，大肠杆菌(￡.co/z')、酵母、昆虫细i包、动物细胞等等都可以用作宿主。作为向宿主中导入表达载体的方法，可以使用已知的方法，如钙处理方法、原生质体方法、电穿孔方法或者DEAE葡聚糖方法。通过在适于表达上述肽的条件下培养上述得到的转化体并纯化上述肽可以得到该肽。实施例将基于实施例、比较例和参考例在下文描述本发明，但是本发明不限于这些实施例。实施例1LEH的制备1)肽的合成使用自动化肽合成仪(SHIMADZUCORPORATION:生产的PSSM8)通过Fmoc方法通过固相合成方法合成肽。具体步骤如下首先，将Fmoc-His(l-Trt)-OH的C-末端结合到用于固相合成的树脂，之后通过哌啶处理除去保护基(Fmoc)。随后，将该树脂中和并洗涤，并向His的N-末端引入Fmoc-Glu(OtBu)-OH。其次，通过^/^定处理除去保护基(Fmoc)，再次中和并洗涤该树脂。之后，向Glu的N-末端引入Fmoc-Leu-OH。接着，通过派咬处理除去保护基(Fmoc)，并从该树脂切出肽链。通过用TFA(三氟乙酸)切割His的Trt基团和Glu的tBu基团进行去保护。最后，通过制备型HPLC除去未反应的物质进行纯化，以得到LEH。2)合成肽的纯度测定将得到的纯化产物进行反相高效液相层析分析[柱HBondasphere5|aC18國100A(内径3.9mm,长度150mm),WatersCorporation生产；流动相含有0.1%三氟乙酸的溶剂A和含有0.1%三氟乙酸和90%乙腈的溶剂B从0分钟(溶剂8=7%)到20分钟(溶剂B=12%)的梯度；流速1ml/分钟;检测方法220nm波长下的吸光度]。在13.1分钟出现单个尖峰，且纯度为99%。实施例2LEHA的制备以与实施例1中描述的方法相同的方式合成和纯化肽LEHA。将得到的纯化的产物进行反相高效液相层析分析[柱^Bondasphere5juC18-100A(内径3.9mm,长度150mm),WatersCorporation生产；流动相含有0.1%三氟乙酸的溶剂A和含有0.1%三氟乙酸和90%乙腈的溶剂B从0分钟(溶剂B=12%)到20分钟(溶剂B=H。/。)的梯度；流速lml/分钟;检测方法220nm波长下的吸光度]。在12.8分钟出现单个尖峰，且纯度为99%。实施例3使用LEH和LEHA测定皮肤成纤维细胞中胶原的生产在48孔培养平板中培养来自人正常皮肤的成纤维细胞(CRL-1836;ATCC)。更具体地，将细胞以12,500个细胞/cm2的密度涂敷在平板上，并在37。C、5%二氧化碳气体和95%空气的气氛中培养约72小时。作为培养液，以每孔500ial的量使用含有浓度为10重量％的胎牛血清(FBS)的Dulbecco氏改良的Eagle培养基(D-MEM)。当细胞达到汇合状态时，除去培养液，并以每孔500jal的量向其中加入培养基，该培养基通过将实施例1或2中合成的LEH或LEHA以10jug/ml的浓度加入D-MEM而制备。这里，以每孔500iul的量加入了没有添加肽的培养基的细胞用作对照。培养72小时后，收集培养液，并通过酶if关免疫吸附测定(Anti-HumanProcollagentypeIC誦peptideEIAKit;TAKARABIOINC.生产)定量收集的培养液中I型胶原的浓度。基于定量的结果，计算加入了肽的培养液中I型胶原的量，其中将对照培养液中I型胶原的量定义为100%。结果在表3中显示。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>如表3中所示，发现通过在加入肽的每种培养液中培养细胞，来自人正常皮肤的成纤维细胞中胶原的生产量显著增加。实施例4使用LEH和LEHA的毒性测试在实施例3中收集培养液后，向细胞中加入250微升D-MEM,并随后用CellCountingKit-8(DOJINDOLABORATORIES生产)计数活细胞的数目。结果在表4中显示。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>如表4中所示，发现通过在加入肽的每种培养液中培养细胞，活细胞数目没有显著减少。实施例5从大豆蛋白制备LEH和LEHA肽1)大豆蛋白的蛋白酶降解将lg除壳的大豆粉分散在40ml蒸馏水中，并用O.lNNaOH调节分散体的pH至8.5。向其中加入50微克嗜热菌蛋白酶(来自万a"7/wf/2^7noj^o^o(y"cws，商品名THERMOASEPCI0F，DAIWAKASEIK.K.生产)，并在6(TC进行降解15小时。反应后，通过在IO(TC煮沸分散体10分钟灭活嗜热菌蛋白酶。让分散体冷却后，向其中加入lg助滤剂(商品名Radiolight500,SHOWACHEMICALINDUSTRYCO.,LTD生产)，并搅拌混合物。之后，进行过滤。2)收集粗肽使如上得到的滤液穿过装有强酸离子交换树脂(商品名"Dowex50Wx2，H+型，50-100目，，，TheDowChemicalCompany生产)的150ml柱，并用5倍柱体积的去离子水洗涤柱，以除去非肽组分。通过使2M氨溶液穿过柱洗脱吸附到柱的组分，并收集肽级分。用蒸发器蒸馏除去氨，并进一步浓缩级分并干燥成固体。通过向其中加入5ml水溶解干燥产物，通过进行离心(10，000rpm，30分钟)除去未溶解的物质。用分析试剂盒(商品名QuantiProBCAassaykit,SIGMA)定量溶液中的肽。结果，证实收集了140mg粗肽。3)分子量分级分离将装有SephadexG-25(中等型，AmershamBiosciences生产)的凝胶过滤柱(())2.6x100cm)用0.1M磷酸钠緩沖液(pH7.0)平衡，并向其中应用如上述得到的140mg粗肽。以1.0ml/分钟的流速进行洗脱，并在280nm检测，且收集分子量为1,000或以下的级分。将收集得到的级分去矿质并浓缩到2ml体积。4)通过强酸离子交换树脂分离将装有强酸离子交换树脂(商品名"SPSephadexC-25,H+型"，AmershamBiosciences生产)的20ml柱用去离子水平衡，并向其应用如上述得到的分子量为l，OOO或更小的浓缩级分。将柱用5倍柱体积的去离子水洗涤，并用从0到0.256M的氯化钠水溶液的线性梯度洗脱组分。通过级分收集器以每级分2.0ml的量收集洗脱物。在得到的层析谱中，检测到6个主要峰。分别收集这6个主要峰，具体为，用0.026到0.062M浓度的氯化钠洗脱的14ml级分(下文中SP[l]),用0.062到0.092M浓度的氯化钠洗脱的12ml级分(下文中SP[2])，用0.092到0.113M浓度的氯化钠洗脱的8ml级分(下文中SP[3])，用0.113到0.168M浓度的氯化钠洗脱的22ml级分(下文中SP[4]),用0.20到0.23M浓度的氯化钠洗脱的14ml级分(下文中SP[5])，和用0.256M或以上的浓度的氯化钠洗脱的16ml级分(下文中SP[6])。5)HPLC分析去矿质后，将上述得到的SP[l]到SP[6]在下面的条件下进行HPLC分析(柱)InertsilODS-2，())4.6x250mm,5jam(GLScienceInc.)(检测)214nm(流速)1.0mL/分钟(分离条件)溶剂(a):含有0.05%三氟乙酸的溶液溶剂(b):含有0,05%三氟乙酸和20%乙腈的溶液用100%溶剂(a)平衡柱后，在线性梯度下进行洗脱，从而使得60分钟时溶剂(b)将为100%。(注射体积)20jul(柱温)室温使用通过化学合成制备的Leu-Glu-His和Leu-Glu-His-Ala作为标准，将级分的洗脱时间与标准的洗脱时间比较。结果，与标准在相同洗脱时间检测到峰的级分仅为SP[5]，并且在不同于SP[5]的级分中在与标准相同的洗脱时间时没有发现显著峰。6)N-末端氨基酸序列分析将与标准在相同的洗脱时间检测到的SP[5]中的两个峰进行分配，并用N-末端氨基酸序列分析仪进行分析(Procise494HTProteinSequencingSystems,AppliedBiosystems)。结果，证实这两个峰对应于Leu-Glu-His和Leu-Glu-His-Ala。7)定量从HPLC分析的结果计算，揭示当用嗜热菌蛋白酶处理lg除壳的大豆粉时，产生了30.1jugLeu-Glu-His和20.1jagLeu-Glu-His-Ala。实施例6使用来自大豆蛋白的LEH和LEHA测定皮肤成纤维细胞中胶原的生产除了调节实施例5中的得到的SP[5]级分中所含的肽至10|ig/ml的浓度并将其用于替代合成的LEH和LEHA外，以与实施例3中相同的方式检查皮肤成纤维细胞中胶原生产的增强作用。结果在表5中显示。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>如表5中所示，发现通过在加入SP[5]的培养液中培养细胞，来自人正常皮肤的成纤维细胞中胶原的生产量显著增加。实施例7使用来自大豆蛋白的LEH和LEHA的毒性测试对于实施例6收集培养液后的细胞，以与实施例4中相同的方式计数活细胞数目。结果在表6中显示。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>如表6中所示，发现通过在加入SP[5]的培养液中培养细胞，活细胞数目没有显著减少。在使用如实施例5中所述的从大豆蛋白的制备的LEH和LEHA肽，以与上述相同的方式进行胶原的生产的测定的情况中，也发现与合成的LEH和LEHA肽所示的增强作用相似的对胶原生产的增强作用。此外，当使用从大豆蛋白制备的LEH和LEHA肽，如上述进行毒性测试时，发现活细胞数目没有显著减少。实施例8N-末端-乙酰化LEHA的制备通过Fmoc方法(L.A.Carpino,G.Y.Han,/」w.C72ew.5"oc.，92，5748(1970)),按照下面的固相合成方法制备LEHA肽的N-末端乙酰化的衍生物。首先，将Fmoc-Ala-OH的C-末端结合到用于固相合成的树脂，之后通过哌啶处理除去保护基(Fmoc)。随后，将得到的树脂中和并洗涤，并向Ala的N-末端引入Fmoc-His(l-Trt)-OH。其次，通过哌啶处理除去保护基(Fmoc),并再次中和和洗涤所述树脂。之后，向His的N-末端引入Fmoc-Glu(OtBu)-OH。接着，通过哌啶处理除去保护基(Fmoc)。随后，中和和洗涤树脂，并向Glu的N-末端引入N-乙酰-亮氨酸。从该树脂切出肽链，通过用TFA(三氟乙酸)切割His的Trt基团和Glu的tBu基团进行去保护。最后，通过制备型HPLC除去未反应的物质进行纯化，以得到N-末端乙酰化的LEHA。所得纯化产物的纯度为96.8%。实施例9C-末端酰胺化LEHA的制备4要照固相合成方法通过Fmoc方法(L.A.Carpino，G.Y.Han，,」m.CA，.Soc.，92,5748(1970))制备LEHA肽的C-末端酰胺化的衍生物。首先，将Fmoc-Ala-OH的C-末端结合到4-曱基二苯曱基胺树脂，之后通过哌咬处理除去保护基(Fmoc)。随后，将该树脂中和并洗涤，并向Ala的N-末端引入Fmoc-His(l-Trt)-OH。其次，通过哌咬处理除去保护基(Fmoc),并再次中和和洗涤该树脂。之后，向His的N-末端引入Fmoc-Glu(OtBu)-OH。接着，通过哌啶处理除去保护基(Fmoc)。随后，将该树脂中和并洗涤，并向Glu的N-末端引入Fmoc-Leu-OH。从该树脂切出肽链，通过用TFA(三氟乙酸)切割His的Trt基团和Glu的tBu基团进行去保护。最后，通过制备型HPLC除去未反应的物质进行纯化，以得到C-末端酰胺化的LEHA。所得纯化产物的纯度为94.0%。实施例10使用肽衍生物测定皮肤成纤维细胞中胶原的生产除了使用实施例8和9中制备的N-末端乙酰化的LEHA和C-末端酰胺化的LEHA代替实施例1和2中合成的LEH和LEHA外，以与实施例3中相同的方式检查皮肤成纤维细胞中胶原生产的增强作用。结果在表7中显示。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>如表7中所示，发现通过在加入肽衍生物的每种培养液中培养细胞，来自人正常皮肤的成纤维细胞中胶原的生产量显著增加。实施例U1^用肽书f生物的毒性测试对于在实施例10中收集培养液后的细胞，以与实施例4中相同的方式计数活细胞数目。结果在表8中显示。表8<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>如表8中所示，发现通过在加入肽衍生物的每种培养液中培养细胞，活细胞数目没有显著减少。实施例12皮肤表皮角质形成细胞中透明质酸的生产的测定KURABOINDUSTRIESLTI^生产):更具体地，将细胞以25,000个细胞/cm2的密度涂敷在平板上，并在37。C、5%二氧化碳气体和95%空气的气氛中培养约72小时。作为培养液，以每孔400jal的量使用HuMediaKG-2(KURABOINDUSTRIESLTD.生产)。培养72小时后除去培养液，并以每孔400jal的量向其中加入HuMediaKG-2培养基，该培养基中加入了100或300jag/ml的浓度的如实施例2中所述合成的LEHA。这里，以每孔400jul的量加入了没有添加LEHA的HuMediaKG-2的细月包用作对照。额外培养72小时后，收集培养液，并通过酶4关免疫吸附测定(透明质酸测定试剂盒；SeikagakuCorporation生产)定量收集的培养液中透明质酸的浓度。基于定量的结果，计算加入了LEHA的培养液中透明质酸的量，其中将对照培养液中透明质酸的量定义为100%。结果在表9中显示。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>如表9中所示，发现通过在加入LEHA的培养液中培养细胞，正常人表皮角质形成细胞中透明质酸的生产量显著增加。令人惊奇的地，当以300jag/ml的浓度使用LEHA时，发现了对于透明质酸的生产的更为显著的增强作用，其中与对照中相比，生产的透明质酸的量为约200%。实施例13LEKA的制备以与实施例1中描述的方法相似的方式制备肽LEKA。接着，通过制备型HPLC除去未反应的物质进行纯化，以得到LEKA。实施例14使用LEKA在皮肤成纤維细胞中生产胶原的测定除了使用如上述合成的LEKA肽代替实施例1和2中合成的LEH和LEHA外，以与实施例3中相同的方式检查皮肤成纤维细胞中胶原生产的增强作用。结果在表10中显示。表10<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>如表10中所示，发现通过在加入LEKA肽的培养液中培养细胞,来自正常人皮肤的成纤维细胞中胶原的生产量增加。实施例15使用LEKA的毒性测试对于在实施例14中收集培养液后的细胞，以与实施例4相同的方式计数活细胞数目。结果在表11中显示。表11<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>如表11中所示，发现通过在加入LEKA的培养液中培养细胞，活细胞数目没有减少。实施例16LDHA的制备以与实施例1中描述的方法相同的方式制备肽LDHA。接着，通过制备型HPLC除去未反应的物质进行纯化，以得到LDHA。实施例17使用LDHA在皮肤成纤维细胞中生产胶原的测定除了使用1pg/ml量的如上述合成的LDHA肽代替实施例1和2中10jag/ml量的合成的LEH和LEHA外，以与实施例3中相同的方式检查皮肤成纤维细胞中胶原生产的增强作用。结果在表12中显示。表12<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>如表12中所示，发现通过在加入LDHA肽的培养液中培养细胞，来自正常人皮肤的成纤维细胞中胶原的生产量增加。实施例18使用LDHA的毒性测试对于在实施例17中收集培养液后的细胞，以与实施例4相同的方式计数活细胞数目。结果在表13中显示。表13<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>如表13中所示，发现通过在加入LDHA的培养液中培养细胞，活细胞数目没有减少。实施例19LEHAF的制备以与实施例1中描述的方法相同的方式制备肽LEHAF。接着，通过制备型HPLC除去未反应的物质进行纯化，以得到LEHAF。实施例20使用LEHAF在皮肤成纤維细胞中生产胶原的测定除了使用1或3ng/ml浓度的如上述合成的LEHAF肽代替实施例1和2中10iug/ml浓度的合成的LEH和LEHA夕卜，以与实施例3中相同的方式检查皮肤成纤维细胞中胶原生产的增强作用。结果在表14中显示。表14<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>如表14中所示，发现通过在加入LEHAF肽的培养液中培养细胞，来自正常人皮肤的成纤维细胞中胶原的生产量增加。实施例21使用LEHAF的毒性测试对于在实施例20中收集培养液后的细胞，以与实施例4相同的方式计数活细胞数目。结果在表15中显示。表15<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>如表15中所示，发现通过在加入LEHAF的培养液中培养细胞，活细胞数目没有显著减少。实施例22使用无毛小鼠测定抗皱紋作用通过用肽进行的应用测试测定对使用无毛小鼠通过紫外线产生皱紋的预防作用。换句话说，将5周龄雄性无毛小鼠分成3组(8只小鼠/组)，并在3周时间段内每周用UVB紫外线照射小鼠三次(第一周密度为90mJ/cm2，第二周为120mJ/cm2,且第三周为150mJ/cm2)。将含有每种测试肽等的50微升测试溶液应用于每组中无毛小鼠的背部，每天三次，进行三周。从用紫外线第一次照射过了24天后，以7个等级通过视觉对皱紋评分(表16)，以评价对皱紋产生的预防作用。基于对抗皱紋作用的该测定，在应用含有本发明的肽的测试溶液的组中发现了对皱紋产生的大的预防作用。表16:*皮纟丈目效'J#r查的4寻分,在尸/zo^^/^vwWo/.尸/7ofo/wmw"o/.尸/zo化mgof7,153-158，1990中称作铍紋评分_0.0在背部皮肤上没有发现显著的皮沟0.5在背部皮肤部分发现显著的皮沟1.0在整个背部皮肤发现显著的皮沟1.5对于整个背部皮肤中发现的皮沟，横向的皮沟比纵向皮沟更深2.0对于整个背部皮肤中发现的皮沟，横向的皮沟比纵向皮沟进一步加深2.5在整个背部皮肤发现皱紋3.0在整个背部皮肤发现深的皱紋序列表自由文本序列表中SEQIDNO序列表中SEQIDNO序列表中SEQIDNO序列表中SEQIDNO序列表中SEQIDNO序列表中SEQIDNO序列表中SEQIDNO序列表中SEQIDNO1是本发明的肽。2是编码LEHA肽的DNA。3是编码LEHA肽的DNA。4是编码LEHA肽的DNA。5是编码LEHA肽的DNA。18是本发明的肽。19是本发明的肽。20是本发明的肽。权利要求1.式(I)代表的肽Leu-Glu-His①或者它的衍生物，或者其盐。2.肽，或者它的衍生物或者其盐，该肽在如权利要求1中定义的氨基酸序列中具有一个或多个氨基酸的替代和/或添加，并且该肽能够增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产，附带条件是该肽不含有Lys-Thr-Thr-Lys-Ser。3.权利要求2的肽或者它的衍生物，或者其盐，其中所述替代是氨基酸的保守替代。4.式(II)代表的肽Leu画Glu-His國Ala(SEQIDNO:1)(II)或者它的衍生物，或者其盐。5.式(III)代表的肽Leu-Glu國Lys画Ala(SEQIDNO:18)(III)或者它的衍生物，或者其盐。6.式(IV)代表的肽Leu-Asp-His-Ala(SEQIDNO:19)(IV)或者它的衍生物，或者其盐。7.式(V)代表的肽Leu-Glu画His-Ala-Phe(SEQIDNO:20)(V)或者它的衍生物，或者其盐。8.权利要求2或3的肽或者它的衍生物，或者其盐，其中所述肽或者它的衍生物，或者其盐是长度为3到25个的氨基酸残基。9.组合物，其含有权利要求1到8任一项定义的肽或者它的衍生物，或者其盐。10.权利要求9的组合物，其中该组合物可用于增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产。11.权利要求9或10的组合物，其中该组合物可以用作用于外用剂。全文摘要本发明涉及具有特定氨基酸序列的新肽，或者其衍生物或其盐。此外，本发明涉及含有该新肽等的组合物，利用该新肽等的方法，该新肽等的用途，编码该新肽等的多核苷酸。本发明的新肽或者其衍生物或者其盐可以用于增强选自细胞中胶原和透明质酸的至少一种成员的生产。文档编号C07K5/08GK101146819SQ200680009008公开日2008年3月19日申请日期2006年3月17日优先权日2005年3月22日发明者上村浩,常次修一,本间阳一,稻冈贤,菊地数晃申请人:老笃制药株式会社