用作tlr7调节剂的3-脱氮嘌呤衍生物的制作方法

专利名称：用作tlr7调节剂的3-脱氮嘌呤衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种3-脱氮嘌呤(3-deazapurine)衍生物。本发明还涉及该3-脱氮嘌呤衍生物的制备方法、用于制备该3-脱氮嘌呤衍生物的中间体、含有该3-脱氮嘌呤衍生物的药物组合物以及该3-脱氮嘌呤衍生物的用途。

背景技术：
Toll样受体(TLR)为主要的跨膜蛋白，其特征为细胞外富含亮氨酸及胞质尾区，该胞质尾区含有称作Toll/IL-1受体(TIR)结构域的保守区。它们主要在免疫细胞(例如树突状细胞、T淋巴细胞、巨噬细胞、单核细胞及自然杀伤细胞)上表达，其在先天免疫系统中具有重要作用。它们为一群结合至病原体相关分子模式的模式识别受体(其综述参见例如Ulevitch，R.J.，Nature ReviewsImmunology，4,512-520，2004，以及，Akira，S.，Takeda，K.，和Kaisho，T.，AnnualRev.Immunol.，21，335-376，2003)。它们的名称来源于在果蝇中发现的黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)基因Toll的同源序列，Toll基因在保护果蝇不受霉菌感染中具有重要作用(Hoffmann，J.A.，Nature，426，33-38，2003)。在哺乳动物中已经鉴定了11种TLR，且在其它脊椎动物中也发现了其它的非哺乳动物TLR。所有的TLR，在识别病原性有机体上存在的一个特异性或一组特异性分子决定子的过程中，似乎均作为同型二聚体或异型二聚体起作用，上述分子决定子包括细菌细胞表面脂多糖、脂蛋白、细菌鞭毛蛋白、来自细菌和病毒的DNA、以及病毒RNA。对TLR活化的细胞反应涉及一种或多种转录因子的活化，引起细胞因子及共刺激分子诸如干扰素、TNF-α、白介素、MIP-1及MCP-1的产生和分泌，它们的作用杀死和清除病原体的侵入。
因此，正需要提供一种TLR7调节剂，尤其是激动剂。优选地，这类化合物应具有以下特性中的一种以上它们应选择性与TLR7受体结合；胃肠道吸收良好；代谢稳定且具有有利的药物动力学特性；几乎不表现副作用且易于制备。


发明内容
本发明人发现了一系列3-脱氮嘌呤衍生物，其为TLR7受体的调节剂、尤其是激动剂，其应用于涉及TLR7受体的调节、尤其是激动作用的各种治疗领域，包括治疗病毒感染(诸如HCV或HBV)、癌症及肿瘤、以及T2辅助细胞(TH2)介导的疾病。
根据本发明的第一方面，提供式(I)的化合物，
或该化合物的药学上可接受的盐或溶剂化物，其中 (a)Y为化学键，且R3选自芳基、(C1-C6)烷基及-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C4)烷基；或 (b)Y为(C1-4)亚烷基，且R3选自芳基、(C3-C7)环烷基及3-10元杂环基； Z为氧或不存在； R1选自H、卤素、OH、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-NHSO2R6、-NR6R7、-C(O)R6、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8、芳基及3-10元杂环基； R2选自H、卤素、OH、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-NR6R7、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8及3-10元杂环基；或 R1与R2可连接形成(C2-C5)亚烷基连接，该连接任选包括1或2个各自独立地选自N、O和S中的杂原子； R5不存在且R4选自H、(C3-C7)环烷基、芳基、-(CH2)芳基、-C(O)R9、-CO2R9、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亚烷基-O-CO2R9)、-C(O)NR9R10、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)NR9R10及-(C1-C6)亚烷基-O-P(O)(OH)2；或 R4不存在且R5选自R9、-C(O)R9、-CO2R9、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亚烷基-O-CO2R9、-C(O)NR9R10、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)NR9R10及-(C1-C6)亚烷基-O-P(O)(OH)2； R6和R7各自独立地选自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基及-(C1-C6)亚烷基(C3-C7)环烷基；或R6和R7与它们所连接的氮一起形成3-6元饱和杂环，该杂环任选另外含有1或2个选自N、O和S中的杂原子； R8选自(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基及苯基； R9和R10各自独立地选自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、芳基、-(CH2)芳基及3-10元杂环基；或 R9和R10与它们所连接的氮一起形成3-10元杂环基； R11和R12独立地选自H及(C1-C6)烷基；或R11和R12与所连接的N一起形成3-6元饱和杂环基，该杂环基任选另外含有1或2个选自N、O和S中的杂原子； 该烷基、环烷基、烷氧基、芳基及杂环基任选被一或多个独立地选自如下的原子或基团取代卤素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-OH、-NR11R12、-(C1-C6)亚烷基-NR11R12、芳基及3-10元杂环基； 其条件为，若R1和R2为H且Z和R5不存在，则 (a)当Y-R3为乙基时，R4不为甲基；且 (b)当Y-R3为甲基时，R4不为H或甲基。
除非另有说明，否则烷基及烷氧基可为直链或支链基团且含有1-6个碳原子，且优选1-4个碳原子。烷基实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、戊基及己基。烷氧基实例包括甲氧基、乙氧基、异丙氧基及正丁氧基。
环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基及双环庚烷基。
卤素意指氟、氯、溴或碘，且优选为氟或氯。
芳基包括苯基、萘基、蒽基及菲基，且优选为苯基。
除非另有说明，否则杂环可为饱和、部分饱和、或芳族杂环，且含有一或多个独立地选自N、O和S中的杂原子。例如，杂环可为5-6元饱和、部分饱和、或芳族杂环。饱和杂环基团的实例为四氢呋喃基、吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、二氧戊环基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、哌啶基、吡唑啉基、二噁烷基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基、氮杂革基、氧氮杂革基及硫氮杂革基。芳族单杂环基团的实例为吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、异噻唑基、噻唑基、三唑基(诸如1，2，3-三唑基及1，2，4-三唑基)、噁二唑基(诸如1-氧杂-2，3-二唑基、1-氧杂-2，4-二唑基、1-氧杂-2，5二唑基及1-氧杂-3，4-二唑基)、噻二唑基(诸如1-硫杂-2，3-二唑基、1-硫杂-2，4-二唑基、1-硫杂-2，5-二唑基及1-硫杂-3，4-二唑基)、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基及三嗪基。二环芳族杂环基团的实例为苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、喹啉基及异喹啉基。
当多个取代基可选自大量替代基团时，所选基团可相同或不同。
在一方案中，Z为氧，以便形成N-氧化物。
在本发明的另一方案中，Z不存在。
在本发明的又一方案中，R1选自 (a)H； (b)CN； (c)卤素； (d)任选被1-3个卤原子取代的(C1-C6)烷基； (e)四氢呋喃氧基； (f)被含有1-3个独立地选自N、O和S中的杂原子的3-6元饱和杂环基取代的(C1-C6)烷基，其中该杂环基任选被1-3个独立地选自CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基及-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基中的基团取代； (g)-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C6)烷基； (h)-(C1-C4)亚烷基-N(H)-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C4)烷基； (i)任选被OH或环丙基取代的(C1-C6)烷氧基； (j)(C3-C7)环烷基； (k)-(C1-C4)亚烷基(C3-C7)环烷基； (1)-C(O)NR6R7； (m)-CO2R6； (n)-C(O)R6； (o)5元芳族杂环基，其包含(i)1-4个氮原子、或(ii)1-2个氮原子及1个氧原子或硫原子、或(iii)1个氧原子或硫原子；或者6元芳族杂环基，其包含1-3个氮原子，该5及6元芳族杂环基任选被1-3个独立地选自卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-OH、-NR11R12及-(C1-C6)亚烷基-NR11R12中的原子或基团取代； (p)任选被1-3个卤原子取代的苯基； (q)-NR6R7； (r)-NH-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C6)烷基； (s)或者R1与R2可连接形成(C2-C5)亚烷基连接； 其中 R6、R7、R11和R12如本发明第一方面所定义。
在另一方案中，R1选自 (a)H； (b)CN； (c)卤素 (d)任选被1-3个卤原子取代的(C1-C6)烷基； (e)四氢呋喃氧基； (f)被任选被1或2个甲基取代的吗啉基、哌嗪基或吡咯烷基取代的(C1-C6)烷基； (h)-(C1-C4)亚烷基-N(H)-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C4)烷基； (i)任选被OH或环丙基取代的(C1-C6)烷氧基； (j)(C3-C7)环烷基； (k)-(C1-C4)亚烷基(C3-C7)环烷基； (l)-C(O)NR6R7； (m)-CO2R6； (n)-C(O)R6； (o)包含(i)1-4个氮原子、或(ii)1-2个氮原子及1个氧原子或硫原子、或(iii)1个氧原子或硫原子的5元芳族杂环基；或者包含1-3个氮原子的6元芳族杂环基，该5及6元芳族杂环基任选被1-3个独立地选自卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-OH、-NR11R12及-(C1-C6)亚烷基-NR11R12中的原子或基团取代； (p)任选被1-3个卤原子取代的苯基； (q)-NR6R7； (r)-NH-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C6)烷基； 其中 R6、R7、R11和R12如本发明第一方面所定义。
在又一方案中，R1选自任选被1-3个卤原子取代的(C1-C4)烷基；(C3-C7)环烷基；或任选被1-3个独立地选自卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基及-NH(C1-C6)烷基中的原子或基团取代的5-6元芳族杂环基。
在又一方案中，R1选自被1-3个氟原子取代的甲基或乙基；环丙基；-(C1-C2)亚烷基-O-(C1-C2)烷基；任选被OH或环丙基取代的(C1-C4)烷氧基；-COCH3；-CH2OCH3；及-CO2CH3。
在又一方案中，R1为环丙基或CF3。
在又一方案中，R1为5元芳族杂环基，其包含(i)1-4个氮原子、或(ii)1-2个氮原子及1个氧原子或硫原子、或(iii)1个氧原子或硫原子，该5元芳族杂环基任选被1-3个独立地选自卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C3)亚烷基-O-(C1-C4)烷基、-(C1-C4)亚烷基-OH、-R11R12及-(C1-C3)亚烷基-NR11R12中的原子或基团取代，其中R11和R12如本发明第一方面中所述定义。
在又一方案中，R1选自咪唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑基、吡唑基及噻唑基，这些基团均任选可被1-3个独立地选自卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C3)亚烷基-O-(C1-C4)烷基、-(C1-C4)亚烷基-OH及-(C1-C3)亚烷基-NR11R12中的原子或基团取代，其中R11和R12如本发明第一方面所定义。
在又一方案中，R1选自未被取代的噁唑基、三唑基、吡唑基及噻唑基。
在又一方案中，R1为噁唑基。
在又一方案中，R2选自 (a)H； (b)卤素； (c)任选被1-3个卤原子取代的(C1-C6)烷基； (d)四氢呋喃氧基； (e)被含有1-3个独立地选自N、O和S中的杂原子的3-6元饱和杂环基取代的(C1-C6)烷基，其中该杂环基任选被1-3个独立地选自CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基及-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基中的基团取代； (f)-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C6)烷基； (g)-(C1-C4)亚烷基-N(H)-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C4)烷基； (h)任选被OH或环丙基取代的(C1-C6)烷氧基； (i)(C3-C7)环烷基； (j)-(C1-C4)亚烷基(C3-C7)环烷基； (k)-C(O)NR6R7； (1)-CO2R6； (m)-C(O)R6； (n)包含(i)1-4个氮原子、或(ii)1-2个氮原子及1个氧原子或硫原子、或(iii)1个氧原子或硫原子的5元芳族杂环基；或者包含1-3个氮原子的6元芳族杂环基，该5及6元芳族杂环基任选被1-3个独立地选自卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-OH、-NR11R12及-(C1-C6)亚烷基-NR11R12中的原子或基团取代； (o)任选被1-3个卤原子取代的苯基； (p)-NR6R7； (q)-NH-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C6)烷基； 其中 R6、R7、R11和R12如本发明第一方面所定义。
在又一方案中，R2为H或甲基。
在又一方案中，R2为H。
在又一方案中，Y为亚甲基；且R3为芳基或5-6元杂环基，该杂环基含有1-3个独立地选自N、O和S中的杂原子，该芳基及杂环基任选被1-3个独立地选自以下的原子或基团取代卤素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-NH(C1-C6)烷基、-N((C1-C6)烷基)2、芳基及3-10元杂环基。
在又一方案中，Y为亚甲基；且R3选自芳基，包含(i)1-4个氮原子、或(ii)1-2个氮原子及1个氧原子或硫原子、或(iii)1个氧原子或硫原子的5元芳族杂环基，及包含1-3个氮原子的6元芳族杂环基；该芳基及芳族杂环任选被1-3个独立地选自以下的原子或基团取代卤素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-OH、-NR11R12、-(C1-C6)亚烷基-NR11R12、芳基及3-10元杂环基，其中R11和R12如本发明第一方面所定义。
在又一方案中，Y为亚甲基；且R3选自苯基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基及吡嗪基，其每一个任选被1-3个独立地选自卤素、(C1-4)烷基、(C1-C4)烷氧基及CF3中的原子或基团取代。
在又一方案中，Y为亚甲基；且R3选自苯基、吡啶-3-基及6-甲基-吡啶-3-基。
在又一方案中， Y为亚甲基； R1选自被1-3个卤原子取代的(C1-C4)烷基；(C3-C7)环烷基；及任选被1-3个独立地选自如下基团中的基团取代的5-6元芳族杂环基卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基及-NH(C1-C6)烷基； R2为H； R3为苯基或3-吡啶基，其每一个任选可被1-3个独立地选自卤素、(C1-4)烷基及CF3中的原子或基团取代； R4为H；且 R5不存在。
在又一方案中， Y为亚甲基； R1选自CF3、环丙基及噁唑基； R2为H； R3选自苯基、吡啶-3-基及6-甲基-吡啶-3-基。
R4为H；且 R5不存在。
在又一方案中，R5不存在；且 R4选自-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亚烷基-O-CO2R9、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)NR9R10及-(C1-C6)亚烷基-O-P(O)(OH)2，其中Y、Z、R1、R2、R3、R9和R10如本发明第一方面所定义，以产生如下式(Ia)的化合物
在又一方案中，R4为H且R5不存在。
在又一方案中，R4不存在；且 R5选自-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亚烷基-O-CO2R9、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)NR9R10及-(C1-C6)亚烷基-O-P(O)(OH)2，其中Y、R1、R2、R3、R9和R10如上文所定义，以产生如下式(Ib)的化合物
本发明的实施例形成本发明的又一方案。
本发明的优选化合物为实施例1-4、12、15-18、26、27、36-38、40-54、60、70、76、78、82、83、86、92-94、96-98及100-102的那些化合物及其互变异构体以及该化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物。
更优选的化合物选自 4-氨基-1-苄基-6-环丙基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(实施例1)； 4-氨基-1-苄基-6-噁唑-2-基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(实施例12)； 4-氨基-1-苄基-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(实施例15)； 及其互变异构体以及该化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物。
在本发明的另一方案中，提供式(Ic)的化合物
其中 Y为亚甲基； R1和R2各自独立地选自H、卤素、OH、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-NR6R7、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8、芳基及3-10元杂环基；或者 R1与R2可连接形成(C2-C5)亚烷基连接，该连接任选包括1或2个各自独立地选自N、O和S中的杂原子； R3选自(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、芳基及3-10元杂环基； R4选自R9、-C(O)R9、-CO2R9及-C(O)NR9R10，且R5不存在；或者 R5选自R9、-C(O)R9、-CO2R9及-C(O)NR9R10，且R4不存在； R6和R7各自独立地选自H及(C1-C6)烷基； R8选自(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基及苯基； R9和R10各自独立地选自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、芳基、-(CH2)芳基及3-10元杂环基；或者 R9和R10与它们所连接的氮一起形成3-10元杂环基； 该烷基、环烷基、烷氧基、芳基及杂环基任选被一或多个独立地选自以下的基团取代卤素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2、芳基及3-10元杂环基； 或该化合物的药学上可接受的盐或溶剂化物； 其条件为，若R1和R2为H且z和R5不存在，则 (a)若Y-R3为乙基，R4不为甲基；或 (b)若Y-R3为甲基，R4不为H或甲基。
本发明的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R4选自R9、-C(O)R9、-CO2R9及-C(O)NR9R10；R5不存在；且Y、R1、R2、R3、R9和R10如本发明的第二方面所定义，以产生如上文中所示的式(Ia)的化合物。
本发明的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中 Y为亚甲基； R1和R2各自独立地选自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、-CO2H、-CO2(C1-C6)烷基及-C(O)NH(C1-C6)亚烷基(C3-C7)环烷基；或R1与R2可连接形成(C2-C5)亚烷基连接； R3为苯基，其任选被一或多个独立地选自以下的基团取代卤素、OH、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、NH(C1-C6)烷基及N((C1-C6)烷基)2； R5不存在；且 R4为H。
本发明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中 Y为亚甲基； R1和R2各自独立地选自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、-CO2H、-CO2(C1-C6)烷基及-C(O)NH(C1-C6)亚烷基(C3-C7)环烷基；或R1与R2可连接形成(C2-C5)亚烷基连接； R3为苯基，其任选被一或多个独立地选自卤素及CF3中的基团取代； R5不存在；且 R4为H。
本发明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R5选自R9、-C(O)R9、-CO2R9及-C(O)NR9R10；R4不存在；且Y、R1、R2和R3如上文所定义，以产生如上文中所示的式(Ib)的化合物。
本发明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R1和R2各自独立地选自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、-CO2R6、-C(O)NR6R7及-C(O)NR6SO2R8；或R1与R2可连接形成(C2-C5)亚烷基连接，该连接任选含有1或2个各自独立地选自N、O和S中的杂原子。
本发明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R1和R2各自独立地选自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、-CO2H、-CO2(C1-C6)烷基及-C(O)NH(C1-C6)亚烷基(C3-C7)环烷基；或R1与R2可连接形成(C2-C5)亚烷基连接。
本发明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R1和R2各自独立地选自H、(C1-C3)烷基、环丙基、-CO2H、-CO2CH3及-C(O)NH(CH2)环丙基；或R1与R2可连接形成C5-亚烷基连接。
本发明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R1选自H、甲基、正丙基、异丙基、环丙基、-CO2H、-CO2CH3及-C(O)NH(CH2)环丙基；且R2选自H及甲基；或R1与R2可连接形成C5-亚烷基连接。
本发明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R3为芳基，其任选被一或多个独立地选自以下的基团取代卤素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2、芳基及3-10元杂环基。
本发明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R3为苯基，其任选被一或多个独立地选自以下的基团取代卤素、OH、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、NH(C1-C6)烷基及N((C1-C6)烷基)2。然而更优选R3为任选被一或多个独立地选自卤素及CF3中的基团取代的苯基。
本发明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R3选自2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基及3-三氟甲基苯基。
除非另有说明，否则本发明的化合物包括式(I)、(Ia)、(Ib)及(Ic)的化合物。
应理解的是，本发明涵盖与式(I)化合物的定义一致的如上所述的本发明的具体方案的所有组合。
在本发明的第三方面中，提供一种制备式(Ic)化合物的方法
其中，在各式Ia、XVIII、XVIIIa、XIX、XIXa、XXa、XXb、XIV、XV、LIV及LXIII中，Y-R3如权利要求14所定义，R1如权利要求2所定义，R2如权利要求10所定义，PG1及PG2为氮保护剂且R13为(C1-6)烷基； 该方法包括 (a)使式(XVIII)或(XVIIIa)的化合物与羰基供给剂反应
以形成相应的式(XIX)或(XIXa)化合物，
然后将式(XIX)或(XIXa)的化合物脱保护；或 (b)还原式(XXa)的化合物
以形成式(XXb)的化合物
然后通过用质子酸处理使式(XXb)化合物环化；或 (c)还原式(XIV)的化合物
以形成式(XV)的化合物
然后在羰基部分存在下使式(XV)的化合物环化；或 (e)在二苯基膦酰基叠氮化物存在下使式(LIV)化合物环化为上文中相应的式(XIXA)化合物然后，将氨基保护基脱保护
；或者 (f)使式(LXIII)的化合物水解
在如本发明第四方面中，提供式XVIII、XVIIIa、XIX、XIXa、XXa、XXb、XIV、XV、LIV及LXIII的中间体， 其中Y-R3如权利要求14所定义，R1如权利要求2所定义，R2如权利要求10所定义，PG1及PG2为氮保护剂且R3为(C1-6)烷基。
式(I)化合物的药学上可接受的盐包括其酸加成盐和碱盐。
适合的酸加成盐由可形成无毒盐类的酸形成。实例包括乙盐酸、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、右旋樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环磺酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、六氟磷酸盐、羟苄基苯甲酸盐、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、苹果酸、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸一氢盐/磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐、糖酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三氟醋酸盐及羟萘甲酸盐(xinofoate salts)。
适合的碱盐由可形成无毒盐类的碱类形成。实例包括铝盐、精氨酸盐、苄星盐(benzathine)、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐(meglumine)、乙醇胺盐(olamine)、钾盐、钠盐、氨丁三醇盐(tromethamine)及锌盐。
还可形成酸类及碱类的半盐，例如，半硫酸盐及半钙盐。
适合的盐的综述，可参见Stahl及Wermuth的＂Handbook ofPharmaceutical SaltsProperties，Selection，andUse＂(Wiley-VCH，Weinheim，Germany，2002)。
式(I)化合物的药学上可接受的盐可通过以下三种方法中的一种以上来制备 (i)使式(I)化合物与所需酸或碱反应； (ii)用所需酸或碱将酸或碱的不稳定保护基从式(I)化合物的适合前体中移除；或 (iii)通过与适合的酸或碱反应或利用适合的离子交换柱，将式(I)化合物的一种盐转化为另一种盐。
三个反应通常均在溶液中进行。所制得的盐可沉淀析出河被过滤收集或可通过蒸发溶剂来回收。所得盐的电离程度可不等(从完全电离至几乎不电离)。
本发明的化合物也可以以非溶剂化形式和溶剂化形式存在。术语“溶剂化物”在本文中用于描述包含本发明的化合物与一种或多种药学上可接受的溶剂分子(例如乙醇)的分子配合物。当所述溶剂为水时采用术语“水合物”系。
目前对有机水合物的公认分类系统是定义分离位点(definesisolated site)定义分离位点、通道或金属离子配位水合物，参见K.R.Morris的Polymorphism in Pharmaceutical Solids(H.g.Brittain主编，Marcel Dekker，1995)，该文引入本文中作为参考文献。通过在分离位点水合物中插入有机分子使水分子分离，互相不直接接触。在通道水合物(channel hydrates)中，水分子处于晶格通道中，在此其与其它水分子紧邻。在金属离子配位水合物中，水分子与金属离子键合。
当溶剂或水紧密结合时，配合物具有明确的不依赖于湿度的化学计量。然而，当在通道溶剂化物及吸湿性化合物中溶剂或水的结合微弱时，则水/溶剂的含量将取决于湿度及干燥条件。此时，非化学计量法是标准量。
本发明的化合物可以以连续的固态存在，其范围从完全无定形至完全结晶。术语“无定形”是指材料在分子水平上缺乏长程有序的状态，并根据温度不同而呈现固体或液体的物理特性。通常这些物质不显示特征性的X射线衍射图，尽管显示固体特性，但更成常描述为液体。在被加热后固体特性向液体特性转变的特征则为状态的改变，一般是两级的(second order)(“玻璃化转变”)。术语“结晶”是指材料在在分子水平具有规则的有序内部结构的固态，其显示特征性的带有确定峰态的X射线衍射图。当被充分加热时，这些材料也会显示液体的特性，但从固态至液态的变化的特征是相变，一般是一级的(“熔点”)。
本发明的化合物还可以以多组分复合物(除盐类及溶剂化物以外)存在，其中药物及至少一种其它组分以化学计量或非化学计量的用量存在。这种类型的复合物包括晶笼化合物(药物-主晶包合复合物)和共晶体。后者通常定义为中性分子成分的结晶复合物，其通过非共价相互键合在一起，但也可以是中性分子和盐的复合物。共晶体可通过熔融结晶、从溶剂中重结晶或通过物理性地将各个组分研磨在一起来制备，参见0.Almarsson及M.J.Zaworotko的ChemCommun，17，1889-1896(2004)，该文引入本文中作为参考文献。关于多组分复合物的综述，参见Haleblian的J PharmSci，64(8)，1269-1288(1975年8月)，该文引入本文中作为参考文献。
在处于合适条件下时，本发明的化合物也可以以介晶态(中间相或液晶)存在。介晶态为介于真正的晶态与真正的液态(熔体或溶液)之间的中间态。因温度变化所引起的介晶现象被称为＂热致的＂介晶性，加入第二种成分(如水或其它溶剂)所引起的介晶现象被称为＂溶致的＂介晶性。有形成溶致中间相趋势的化合物被称为”两性分子”，其由具有离子(如-COO-Na+、-COO-K+或-SO3-Na+)或非离子(如-N-N+(CH3)3)的极性头基的分子组成。更多资料请参考N.H.Hartshorne及A.Stuart的Crystals and the Polarizing Microscope，第4版(EdwardArnold，1970)，该文引入本文中作为参考文献。
下文中涉及式(I)的化合物均包括其盐、溶剂化物、多组分复合物及液晶，以及其盐的溶剂化物、多组分复合物及液晶。
本发明的化合物包括如上文中定义的式(I)化合物，包括如下文中定义的所有的其多晶型物及晶癖、其前体药物及异构体(包括光学异构体、几何异构体及互变异构体)以及式(I)的同位素标记化合物。
如上所述，式(I)化合物的所谓＂前体药物＂也包括在本发明的范围内。因此，其本身具有很小或不具有药理活性的式(I)化合物的一些衍生物当给药于体内或机体上时，例如能通过水解分裂作用转化成具有所需活性的式(I)化合物。这些衍生物称为“前体药物”。关于前体药物应用的进一步资料可参见＂Pro-drugs as Novel Delivery Systems＂第14卷，ACS Symposium Series(T.Higuchi及W.Stella)及＂BioreVersible Carriers in Drug Design＂，Pergamon Press，1987(E.B.Roche编，American Pharmaceutical Association)。
本发明的前体药物例如可通过将式(I)化合物中存在的合适官能团替代为本领域技术人员已知的某些部分来作为“前体部分”(如H.Bundgaard的＂Design of Prodrugs＂(Elsevier，1985)中所述)进行制备。
本发明的前体药物的一些实例包括 (i)其中式(I)化合物含有羧酸官能团、其酯时，例如其中式(I)化合物的羧酸官能团中的氢被取代为(C1-C8)烷基的化合物；及 (ii)其中式(I)化合物含有伯胺基或仲胺基官能团、其酰胺基时，例如根据具体情况，其中式(I)化合物的胺基官能团中的1或2个氢被取代为(C1-C10)烷酰基的化合物。
根据上述实例及其它前体药物类型的实例的取代基的进一步实例可参见前面提到的参考文献。此外，式(I)的一些化合物本身可充当式(I)的其它化合物的前体药物。
具体而言，本发明的R4如本文所定义且不为H、且R5不存在(即，式(Ia)的化合物)的式(I)化合物可经代谢作用或溶剂分解作用转化成R4为H且R5不存在的式(I)化合物。此外，本发明的R4不存在、且R5如本文所定义且不为H(即，式(Ib)化合物)的式(I)化合物可经代谢作用或溶剂分解作用转化成R4不存在且R5为H的式(I)化合物。
式(I)化合物的代谢物也包括在本发明的范围内，即，给予药物后在体内形成的化合物。符合本发明的代谢物的一些实例包括 (i)当式(I)化合物含有甲基时，为其羟甲基衍生物(-CH3->-CH2OH)； (ii)当式(I)化合物含有烷氧基时，为其羟基衍生物(-OR->-OH)； (iii)当式(I)化合物含有叔氨基时，为其仲氨基衍生物(-NR1R2->-NHR1或-NHR2)； (iv)当式(I)化合物含有仲氨基时，为其伯氨基衍生物(-NHR1->-NH2)； (v)当式(I)化合物含有苯基部分时，为其苯酚衍生物(-Ph>-PhOH)； (vi)当式(I)化合物含有酰胺基时，为其羧酸衍生物(-CONH2->-COOH)。
含有一或多个不对称碳原子的式(I)化合物可作为两种或两种以上的立体异构体存在。当式(I)化合物含有烯基或亚烯基时，可为顺式/反式(或Z/E)几何异构体。当结构异构体可用低能障互变时，可发生互变异构现象(“互变现象”)。在含有例如酮基的式(I)化合物中可采取质子互变异构形式，或在含有芳族部分的化合物中可采取所谓的价互变异构形式。由此可见单一化合物可呈现一种类型以上的异构现象。
举式(I)中的虚线为例进行说明，其中R4为H的式(Ia)化合物为其中R5为H的式(Ib)化合物的互变异构体
式(I)化合物的所有立体异构体、几何异构体及互变异构形式(包括呈现一种类型以上的异构现象的化合物)及它们的一种以上的混合物均包括在本发明的范围内。本发明还包括其中平衡离子为光学活性的(例如d-乳酸盐或l-赖氨酸)或外消旋(例如dl-酒石酸盐或dl-精氨酸)的酸加成盐类。
顺式/反式异构体可通过本领域技术人员公知的常规技术(例如层析法及分步结晶法)分离。
用于制备/分离单个对映异构体的常规技术包括由适合的光学纯前体手性合成或使用例如手性高效液相色谱法(HPLC)拆分外消旋化合物(或盐或衍生物以外消旋化合物)。
或者，可使外消旋化合物(或外消旋前体)与适合的光学活性化合物(例如，醇；或，碱或酸(当式(I)化合物含有酸性或碱性部分时)，诸如1-苯乙胺或酒石酸)反应。所得非对映体混合物可通过层析法和/或分步结晶法分离，且非对映异构体中的1或2个可通过本领域技术人员公知的方法转化为相应的纯的对映异构体。
本发明的手性化合物(及其手性前体)可使用层析法(典型的是HPLC法)，在具有流动相的不均匀树脂上、以富含对映异构体的形式获得，该流动相由烃组成，该烃通常为含有0-50体积％(通常2-20体积％)异丙醇及0-5体积％烷基胺(通常0.1％二乙胺)的庚烷或己烷。浓缩洗脱液以产生浓缩混合物。
本发明包括式(I)化合物的所有晶型，包括其外消旋化合物及外消旋混合物(conglomerates)。立体异构外消旋混合物可通过本领域技术人员已知的常规技术分离，例如参见E.L.Eliel及S.H.Wilen的＂Stereochemistry of Organic Compounds＂(Wiley，New York，1994)。
本发明包括式(I)的所有药学上可接受的同位素标记化合物，其中一或多个原子被替代为具有相同原子数但原子质量或质量数不同于自然界中居优选的原子质量或质量数的原子。
适合包括在本发明化合物中的同位素的实例包括氢同位素，诸如2H及3H；碳同位素，诸如11C、13C及14C；氯同位素，诸如36Cl；氟同位素，诸如18F；碘同位素，诸如123I及125I；氮同位素，诸如13N及15N；氧同位素，诸如15O、17O及18O；磷同位素，诸如32P；及硫同位素，诸如35S。
式(I)的一些同位素标记化合物(例如，合并有放射性同位素的那些化合物)可用于药物和/或底物组织分布研究中。放射性同位素氚(即，3H)及碳14(即，14C)由于其易于合并及检测方法简便而尤其适用于此目的。
经重同位素(诸如氘，即2H)取代时，因代谢稳定性更大而产生一定的治疗优势(例如，体内半衰期延长或所需剂量减少)，因此在有些情况下更为优选。
经正电子发射性同位素(诸如11C、18F、15O及13N)取代时，可用于正电子发射断层(PET)研究中以调查底物受体占用率。
式(I)的同位素标记化合物通常可通过本领域技术人员公知的常规技术制备，或采用适合的同位素标记试剂替代以往所用的非标记试剂、通过与本文的实施例和制备例中所述的那些方法同样的方法制备。
本发明的药学可接受的溶剂化物包括其中结晶化溶剂可被同位素(例如，D2O、d6-丙酮、d6-DMSO)取代的那些溶剂化物。
还包括在本发明范围内的有如下文所定义的中间化合物、其所有的盐、溶剂化物及复合物，以及如上文中对式(I)化合物所定义的其盐的所有溶剂化物及复合物。本发明包括上述物质类型的所有多晶型物及其晶癖。
当制备本发明的式(I)化合物时，对于本领域技术人员来说，例行选择为了制备目的可提供最佳特征组合的中间体形式是显而易见的。这些特征包括中间体形式的熔点、溶解度、可加工性及产量，以及由此所产生的可分离纯化产物的简易性。
意欲用作药物的本发明的化合物可作为结晶产物或无定形产物给药，或可以以固态连续体(从完全无定形至完全结晶)存在。其例如可通过诸如沉淀、结晶、冷冻干燥、喷雾干燥或蒸发干燥等方法得到它们的固体填料、粉末或膜形式。为此也可以使用微波干燥或高频干燥。
它们可单独给药或与一种或多种本发明的其它化合物联合给药或与一种或多种其它药物(或者作为其任意的组合)联合给药。通常，它们将作为与一种或多种药学上可接受的赋形剂组合的制剂而给药。术语＂赋形剂＂在本文中用于描述除本发明化合物以外的任何成分。选择赋形剂在很大程度上依赖于以下因素诸如特定给药方式、赋形剂对溶解性和稳定性的影响及剂型性质等。
适用于本发明化合物输送的药物组合物及其制备方法对于本领域技术人员是显而易见的。这类组合物及其制备方法可参见例如＂Remington’s Pharmaceutical Sciences＂，第19版(Mack PublishingCompany，1995)。
适合的给药方式包括口服给药、非胃肠道给药、局部给药、吸入/鼻内给药、直肠/阴道给药以及经眼/经耳给药。
本发明的化合物可口服给药。口服给药可包括吞咽，以便化合物进入胃肠道；或可采用口含或舌下给药，以便化合物直接从口腔进入血流。适用于口服给药的制剂包括固体制剂，诸如片剂、含微粒、液体或粉末的胶囊、锭剂(包括填充液体的)、咀嚼剂、多微粒及纳米微粒、凝胶、固溶体、脂质体、薄膜、丸剂(卵状体)、喷雾剂、液体制剂以及口腔/粘膜粘着贴片。
液体制剂包括混悬液、溶液、糖浆及酏剂。这类制剂可作为软胶囊或硬胶囊中的填充剂使用，且通常包含载剂(例如，水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素或适合的油)及一种或多种乳化剂和/或助悬剂。液体制剂还可通过例如自药囊中将固体重新配伍来制备。
本发明的化合物还可用于速溶剂、速崩剂，诸如Liang和Chen在Expert Opinion in Therapeutic Patents，11(6)，981-986(2001)中所述的那些剂型。
对于片剂剂型，根据剂量，药物可占该剂型的1重量％至80重量％、优选为剂型的5重量％至60重量％。除药物以外，片剂通常还含有崩解剂。崩解剂的实例包括淀粉羟乙酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、微晶纤维素、低碳烷基取代的羟丙基纤维素、淀粉、预胶化淀粉及藻酸钠。通常，崩解剂占该剂型的1重量％至25重量％、优选为剂型的5重量％至20重量％。
粘合剂一般用于使片剂制剂具有粘着性。适合的粘合剂包括微晶纤维素、明胶、糖、聚乙二醇、天然及合成树胶、聚乙烯吡咯烷酮、预胶化淀粉、羟丙基纤维素及羟丙甲基纤维素。片剂还可含有稀释剂，诸如乳糖(一水合物、经喷雾干燥的一水合物、无水乳糖及类似物)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨醇、微晶纤维素、淀粉及磷酸氢钙二水合物。
片剂任选还可包含表面活性剂(诸如十二烷基硫酸钠及聚山梨酯80)及助流剂(诸如二氧化硅及滑石粉)。当含有这些物质时，表面活性剂可占片剂的0.2重量％至5重量％，助流剂可占片剂的0.2重量％至1重量％。
片剂一般还含有润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、十八烷基富马酸钠以及硬脂酸镁与十二烷基硫酸钠的混合物。润滑剂通常占片剂的0.25重量％至10重量％、优选占0.5重量％至3重量％。其它可能的成分包括抗氧化剂、着色剂、调味剂、防腐剂及掩味剂。
例示的片剂含有至多约80重量％药物、约10重量％至约90重量％粘合剂、约0重量％至约85重量％稀释剂、约2重量％至约10重量％崩解剂及约0.25重量％至约10重量％润滑剂。片剂混料可直接压片或通过滚筒压片形成片剂。或者，片剂混料或一部分混料的部分可以在压片之前进行湿法、干法或熔融制粒、熔融凝结或挤出。最终制剂可包含一层或多层，可以是包衣或不包衣的；甚至可以被囊封。片剂的制备的论述参见H.Lieberman及L.Lachman的＂Pharmaceutical DosageFormsTablets＂，第1卷(Marcel Dekker，New York，1980)。
供人或兽医使用的可经口消耗薄膜通常为易挠的水溶性薄膜剂型或水膨胀性薄膜剂型，其可快速溶解或粘膜粘附且通常包含式(I)的化合物、成膜聚合物、粘合剂、溶剂、保湿剂、增塑剂、稳定剂或乳化剂、粘度改良剂及溶剂。该制剂中的一些组分具有一种以上的功能。
式(I)化合物可为水溶性或不溶性。水溶性化合物通常包含1重量％至80重量％、更通常为20重量％至50重量％的溶质。难溶性化合物可构成组合物的较大比例，通常至多为溶质的88重量％。或者，式(I)化合物可为多颗粒微珠的形式。
成膜聚合物可选自天然多糖、蛋白质或合成的水胶体，且存在范围通常为0.01-99重量％、更通常为30至80重量％。
其它可能成分包括抗氧化剂、着色剂、调味剂及增香剂、防腐剂、唾液刺激剂、冷却剂、共溶剂(包括油)、润滑剂、填充剂、消泡剂、表面活性剂及掩味剂。
本发明的薄膜通常是将涂布于可剥离的背衬或纸上的含水薄膜经蒸发干燥而制得。该操作可在干燥箱或烘道(通常为组合式涂布干燥器)中达成，或通过冰冻干燥或抽真空达成。
用于口服给药的固体制剂可制备成速释型和/或缓释型。缓释型制剂包括延迟释放、持续释放、脉冲释放、控释、靶向释放及计划释放(programmed release)。
适用于本发明目的缓释制剂描述于美国专利第6,106,864号中。其它适合的药物释放技术(诸如高能分散剂及渗透与包衣颗粒)的详情参见Verma等人的＂Pharmaceutical TechnologyOn-line＂，25(2)，1-14(2001)。利用咀嚼片实现控制释放的技术描述于WO00/35298中。
本发明的化合物还可直接给药于血流、肌肉或内脏器官内。适用于非胃肠道给药的方式包括静脉、动脉、腹腔、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌肉及皮下。适用于非胃肠道给药的装置包括针(包括显微针)注射器、无针头注射器及输注技术。非胃肠道制剂通常为可含有赋形剂(诸如盐、碳水化合物)及缓冲剂(优选pH3-9)的水溶液，然而对于某些应用，更适合将它们配制成无菌非水溶液或与适合的溶媒(诸如无菌无热原的水)一起使用的干燥形式。在无菌条件下(例如通过冻干)制备非胃肠道制剂可使用本领域技术人员公知的标准制药技术很容易地实现。
用于制成非胃肠道给药溶液的式(I)化合物的溶解性可通过利用适当的制剂技术(诸如添加溶解性增强剂)来增强。用于非胃肠道给药的制剂可制成速释型和/或缓释型。缓释制剂包括延迟缓释、持续缓释、脉冲缓释、控释、靶向释放及计划缓释。因此，本发明的化合物可制成固体、半固体或触变液体，用作能提供缓释活性化合物的植入储库给药系统。该制剂实例包括涂药支架及聚(dl-乳酸-羟基乙酸)(PGLA)微球的悬液。
本发明的化合物还可局部、皮(内)或透皮给药于皮肤或粘膜。用于此目的典型制剂包括凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、乳剂、软膏、撒粉、敷料剂、泡沫、膜剂、皮肤贴片、包药干糊片、植入剂、海棉、纤维、绷带及微乳液。还可使用脂质体。典型的载剂包括醇、水、矿物油、液体石蜡、白凡士林、甘油、聚乙二醇及丙二醇。可以加入渗透促进剂，例如参见Finnin及Morgan的J PharmSci，88(10)，955-958。其它局部给药方式包括通过电穿孔法、离子导入法、超声透入法、超声促渗法及显微针或无针(例如，PowderjectTM、BiojectTM等)注射法传递药物。用于局部给药的制剂可制备为速释型和/或缓释型。缓释制剂包括延迟缓释、持续缓释、脉冲缓释、控释、靶向释放及计划缓释(programmed release)。
本发明的化合物还可以经鼻内或通过吸入给药；通常以来自干粉吸入器的干粉形式(以例如与乳糖的干燥混合物形式单独使用或作为混合组分颗粒，例如与磷脂(诸如磷脂酰胆碱)混合的形式使用)给药。或者使用或不使用适合的推进剂(诸如1，1，1，2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷)、作为来自加压容器、泵、喷淋器、雾化器(优选利用电水动力学产生细雾的雾化器)或喷雾器的喷雾剂给药，或作为滴鼻剂。对于鼻内给药，该粉剂可包括生物粘附剂，例如，壳聚糖或环糊精。
加压容器、泵、喷淋器、雾化器或喷雾器含有本发明的化合物的溶液或混悬液，该溶液或混悬液例如包含乙醇、乙醇水溶液或适用于分散、增溶或延长活性化合物释放的替代剂、作为溶剂的推进剂以及任选的表面活性剂，诸如山梨糖醇酐三油酸酯、油酸或低聚乳酸。
在用于干粉或混悬液制剂中之前，将药物产物微粒化至适于通过吸入法传递的尺寸(通常在5微米以下)。这可通过任一种适合的粉碎方法实现，诸如螺旋喷射研磨法、流化床喷射研磨法、形成纳米微粒的超临界流体处理法、高压均质法或喷雾干燥法。
用于吸入器或吹入器中的胶囊剂(例如，由明胶或羟丙甲基纤维素制成)、泡罩及药筒可制成含有本发明的化合物、适合粉末基质(诸如乳糖或淀粉)与性能调节剂(诸如1-亮氨酸、甘露醇或硬脂酸镁)的粉末混合物。乳糖可为无水乳糖或为一水合物形式，优选后者。其它适合的赋形剂包括葡聚糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖及海藻糖。
适合在使用电水动力学产生细雾的雾化器中使用的溶液制剂每喷1μg至20mg的本发明化合物、喷出体积为1μl至100μl。典型的制剂可包含式(I)的化合物、丙二醇、灭菌水、乙醇及氯化钠。可替代丙二醇使用的替代溶剂包括甘油及聚乙二醇。
可将适合的调味剂(诸如薄荷醇及左旋薄荷醇)或甜味剂(诸如糖精或糖精钠)添加至用于吸入给药/鼻内给药的本发明制剂中。
用于吸入给药/鼻内给药的制剂例如使用PGLA可制备为速释型和/或缓释型。缓释制剂包括延迟释放、持续释放、脉冲释放、控制释放、靶向释放及计划释放。
当为干粉吸入器及气雾剂时，剂量单位由传送计量剂量的阀来判定。符合本发明的剂量单位通常设计成给予含有1μg至100mg式(I)化合物的计量剂量或“喷射量”。每日总用药量的范围通常为1μg至200mg，其可以单一剂量给药，或更通常在一天内以多剂量给药。
本发明的化合物例如可以栓剂、子宫托、杀微剂、阴道环或灌肠剂的形式经直肠或阴道给药。可可脂为传统的栓剂基质，但若适合则可使用各种替代物。用于直肠/阴道给药的制剂可制备为速释型和/或缓释型。缓释制剂包括延迟释放、持续释放、脉冲释放、控制释放、靶向释放及计划释放。
本发明的化合物通常还可以经pH调节的等渗无菌生理盐水中的微粒化混悬液或溶液的液滴形式直接给予眼或耳。适合经眼及经耳给药的其它制剂包括药膏、生物可降解(例如，可吸收凝胶海棉、胶原蛋白)及生物不可降解(例如，聚硅氧烷)植入物、包药干糊片、透镜及微粒或囊泡系统，诸如类脂囊泡或脂质体。可与诸如苯扎氯铵等防腐剂一起加入下述聚合物诸如交联聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明质酸、纤维素聚合物(例如，羟丙甲基纤维素、羟乙基纤维素或甲基纤维素)或杂多糖聚合物(例如，结冷胶)。该制剂还可通过离子导入法传送。用于经眼/经耳给药的制剂可制备为速释型和/或缓释型。缓释制剂包括延迟释放、持续释放、脉冲释放、控制释放、靶向释放或计划释放。
本发明的化合物可与可溶性大分子实体(诸如环糊精及其适合的衍生物或含聚乙二醇的聚合物)组合，以改善其溶解性、溶出速度、掩味性、生物利用度和/或稳定性而用于上述任意一种给药方式。已经发现，例如药物-环糊精复合物一般可用于大多数剂型及给药途径。包合复合物与非包合复合物均可使用。作为与药物直接复合(络合)的可选择方式，环糊精可用作辅助添加剂，即，用作载剂、稀释剂或增溶剂。最常用于该目的为α-环糊精、β-环糊精及γ-环糊精，其实例可参见国际专利申请第WO 91/11172、第WO 94/02518号及第WO 98/55148号中。
由于例如为了治疗具体的疾病或病状，可能需要给予活性化合物的组合，因此本发明的范围涵盖将两种或两种以上药物组合物(其中至少一种含有本发明的化合物)方便地组合成适合共同给药的药盒形式。因此，本发明的药盒包含两种或两种以上单独的药物组合物(其中至少一种含有本发明的式(I)化合物)以及分别容纳该组合物的构件，诸如容器、分装瓶或分隔式箔袋。该药盒的实例为常用于包装片剂、胶囊剂等的泡罩包装。本发明的药盒尤其适合例如经口及非胃肠道给药等不同剂型的给药，适合在不同给药间隔期给予单独的组合物，或用于彼此相互滴定各自组合物。为有助于顺应性，该药盒通常包含用药说明书且可以提供所谓的记忆支持。
对于给予人患者，本发明化合物的总日服剂量的范围通常为1mg至10g，如10mg至1g，如25mg至500mg，当然，这取决于给药方式及疗效。例如，口服给药可能需要50mg至100mg的总日服剂量。总日服剂量可以单次剂量或多次剂量给药，且可按医生判断超出本文中指定的一般范围。这些剂量都是基于具有约60kg至70kg体重的普通人受试者。医师易能判定适用于体重超出此范围的受试者(例如幼儿及老年人)的剂量。
为改良溶出特性，如下制备4-氨基-1-苄基-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(下文实施例15)与羟丙甲基纤维素(HPMC E3 Prem LV，Methocel

，购自Dow ChemicalCompany，Midland，MI)的固体无定形喷雾干燥分散体(SDD)。首先，形成含有2.97g水、16.83g甲醇及250μL 1M KOH(含有9.8mg钾阳离子)的喷雾溶液，向其添加51.27mg的4-氨基-1-苄基-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮的结晶中性形式。然后，将140.4mg HPMC添加至该溶液中并将该溶液搅拌5分钟且超声处理2分钟。将该溶液以1.1ml/min流速、用Cole Parmer 74900串联控速注射泵抽入由直径11cm的不锈钢壳室组成的小型喷雾干燥设备。使用被加热的氮气流，将该溶液以1标准ft3/分钟的流速用双流体喷嘴(Spraying Systems Co.，Wheaton，Illinois，型号SU1A)雾化。热气体以85℃的入口温度进入壳室且以22℃的出口温度排出。将所得固体无定形分散体收集于Whatman #1微晶纤维素过滤介质(11μm孔径，11cm外径)上，在真空下干燥，且储存于干燥器中。该分散体含有25.4wt％4-氨基-1-苄基-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮、4.9wt％钾阳离子及69.7wt％ HPMC。收率为约60％。
为避免怀疑，本文中所述＂治疗＂包括涉及治疗性、缓解性及预防性治疗。
以下流程说明用于制备式(I)化合物及其中间体的一般方法。
本领域技术人员应理解的是，式(I)化合物或其中间体的制备流程中所述的一些程序可能不适用于一些可能的替取代基。
本领域技术人员还应理解的是，有时有可能需要或优选以与所述不同的顺序进行流程中所述的转化，或需要修改一种或多种转化，以形成所需的式(I)化合物。
本领域技术人员此外应理解的是，如下文流程中所说明，可能需要或优选在合成式(I)化合物的任何阶段保护分子中的一或多个敏感基团以便防止不需要的副反应。详细地说，可能需要保护胺基。在式(I)化合物制备中所用的保护基可以常规方式使用。例如参见Theodora W Green及Peter G M Wuts的”Protective Groups in OrganicSynthesis”第3版(John Wiley及Sons，1999)(尤其第7章、第494-653页(＂Protection for the Amino Group＂))中所述的那些内容，该文引入本文中作为参考文献，其还描述了移除该类基团的方法。
氨基保护基boc、苄氧基羰基、苄基及乙酰基尤其适用于制备式(I)化合物及其中间体。
除非另有说明，流程中R1-R7及Y均如本文所定义。PG1及PG2为氮保护基。
式(I)化合物可如流程1中所述制备，下文中制备例1-27则进一步说明流程1。
应理解的是，式(XVII)至(XIX)中的氨基保护基N(PG1)(PG2)在一些情况下可为N(H)PG1。
流程1
流程1描绘了制备式(I)化合物的各种方式。
a)例如，在Zn源存在下，使市购腈(II)或通过化学文献中所述任一种标准方法所制备的腈(II)与卤代乙酸酯(III)(例如溴乙酸乙酯)反应。Tet.Letts，1997，38，443-446描述了若应用碱性条件分离该产物，则该转化反应可产生通用结构(IV)的烯胺。
b)若上述步骤a)中应用酸性条件，则产生酮酯(V)，然后可使用氨源(例如乙酸铵)、在分离步骤中使其再转化为烯胺(IV)。由此可见，通用结构(V)的各种酮酯可在中间体(IV)处截获上述合成路线。c)然后可使烯胺(IV)在碱性条件(诸如乙醇钠、氢化钠或叔丁醇钾)下与丙二酸二烷酯(VII)反应以产生(VIII)。J.Org.Chem.，1981，46(15)，3040-3048描述了该转化的实例。
d)或者，可使烯胺(IV)在适合的碱(诸如碳酸钾或三乙胺)存在下与丙二酰氯(VI)反应以产生酰胺化形式(IX)。
e)然后可使(IX)在分离步骤中与适合的碱反应以环合为吡啶(VIII)。适合的碱包括乙醇钠、氢化钠或叔丁醇钾。
f)然后在加热作用下使(VIII)在提供相应的酸(例如，HCl、HBr、硫酸)、氢氧化钠或氢氧化锂的酸性或碱性条件下皂化，自发脱羧基化以产生吡啶(X)。该转化的实例描述于WO01101949中。
g)(X)可使用本领域技术人员已知的任何文献条件(例如使用硝酸与硫酸的混合物或乙酸与硝酸的混合物)硝化以产生硝基吡啶(XI)。例如，Bioorg.Med.Chem.Lett.，1996，6(2)，173-178中描述了该转化。
h)(XI)可使用各种转化羟基为氯的条件(诸如亚硫酰氯或磷酰氯)氯化以产生(XII)。本领域技术人员应理解的是，2个羟基可分别氯化或转化为替代的离去基团(诸如另一卤原子)或活化酯(诸如甲烷磺酸酯或三氟甲基磺酸酯)。该所有方法的实例包括于下文部分中。
i)使(XII)与通式R3YNH2的胺反应(其优先在4-氯基团反应)以产生(XIII)。视R3Y基团的性质而定，可存在2个氯基团的部分易位或2-氯基团处的少量易位，但无损于显著获得(XIII)的能力。
j)然后使(XIII)与氨或氨等效物(诸如乙酸铵)反应以产生(XIV)。
k)然后可使(XIV)在文献中已知的任一种条件(例如使用HCl中的铁或锡)下还原以将硝基芳族化合物还原为胺，再在过渡金属催化剂(诸如钯、铂或镍)或化学还原剂(诸如氢化铝锂)存在下进行氢化反应以产生(XV)。
l)然后可使(XV)与C＝0源(诸如1，1-羰基二咪唑或光气)反应以产生咪唑酮(XVI)与(I)的混合物，其中(I)可通过细致的层析纯化获得。
m)或者，(XIII)可与氨的受保护形式(诸如二苄基胺或二烯丙胺)反应，其中2个氢原子被2个随后在温和条件下移除的基团取代。关于这些实例的替代，例如参见Theodora W Green及Peter G M Wuts的“Protective Groups in Organic Synthesis”第3版(John Wileyand Sons，1999)、尤其第7章、第494-653页(＂Protection for theAmino Group＂)中所述的那些基团。
n)-o)参见步骤k)-l)。
p)然后在适合移除保护基PG1及PG2的各种条件下将(XIX)脱保护以产生(I)。例如参见Theodora W Green及Peter G M Wuts的”Protective Groups in Organic Synthesis”第3版(John Wiley andSons，1999)、尤其第7章、第494-653页(＂Protection for the AminoGroup＂)中所述的那些基团，以及其移除条件。
q)或者，(XIII)可优选使用强碱诸如氢化钠、叔丁醇钾或二异丙基氨基胺锂与适合的酰化剂(诸如氯甲酸乙酯或其它任何氯甲酸烷酯或氯甲酸芳酯，氯仿或酸酐的组合，作为胺基甲酸烷基酯R13CO2X(其中R13为C1-6烷基且X为卤素)加以保护，以形成(XX)。
r)可对(XX)如上应用步骤j)及k)，然后可将由此步骤顺序所得的产物通过质子酸(诸如乙酸或甲酸)简单处理，被区位选择地环化为(I)。
还可根据下述流程2使用中间体(XVII)的替代构型(其中卤原子存在于C2位且形成适合的中间体(流程2中的XXVII)用于进一步操作)制备通式(I)的化合物。
流程2
从而，市购二卤代吡啶(例如，二溴吡啶XXI)可用若干步骤的处理以产生通式(I)的诸多类似物。
a)-e)市购二溴吡啶(XXI)可根据被改良的文献程序(描述于WO2005026164中)操作以产生中间体(XXVI)。介于(XXI)与(XXVI)之间的诸多步骤有赖于热危险试剂或产生潜在地热危险产物，因此应谨慎操作。
f)(XXVI)是使用各种已知可自氨基产生重氮化物的条件反应而得，例如，由HCl与亚硝酸钠现场产生、而其中重氮化物被C1原子取代的亚硝酸条件。然后(XXVI)转化为关键中间体(XXVII)可通过添加过量的胺(例如苄胺)至粗氯化物来实现。该步骤将C2卤原子与C4卤原子取代为氨基。任何伯胺或仲胺基团均适用于该转化。
g)-i)然后可使(XXVII)中的C2卤原子在各种取代C2卤素基团为各种官能团的条件下反应，从而可制备多种替代产物(I)。例如，使用多种有机金属试剂(硼酸、锌酸盐、镁试剂、铜酸盐、锡烷等)将杂环与(XXVII)偶合可产生(XXVIII)，使用乙烯基有机金属试剂(诸如乙烯基三丁基锡)及钯催化剂(诸如Pd(PPh3)4)将杂环与(XXVII)偶合可产生乙烯基物质(XXX)，以及羰化反应，其中(XXVII)在诸如三乙胺等碱及钯催化剂存在下、在压力下、被CO气体处理，以产生通用结构(XXIX)的酰基产物。然后可根据流程1的步骤n、o及p使结构(XXVIII)及(XXIX)的化合物转化为式(I)的化合物。
j)-l)(XXX)然后可通过氧化作用处理以产生醛(XXXII)，然后(XXXII)或(XXXI)可分别用胺在诸如三乙胺等碱存在下处理或用诸如三乙酰氧基硼氢化钠的还原剂处理以产生产物(I)(按照流程1中的步骤n、o及p)。
中间体(XIII)的替代构型可根据流程3制备，然后如下操作产生式(I)化合物。流程3
a)-e)步骤a)-e)与流程1所述那些步骤本质相似，除制备一卤化物(XXXIV)以确保(XXXVI)中C6与C4的区位化学完整性以外。
f)(XXXVIII)可在本领域技术人员已知的各种条件下(诸如非极性溶剂(诸如DCM或MeCN)中的溴水)溴化以产生C3-溴化物(XXXIX)。
g)然后可使用CO气体、在诸如三乙胺等碱、诸如甲醇等醇及诸如Pd(PPh3)4等钯催化剂存在下、在压力下使(XXXIX)羰化以产生酯(XXXX)。
h)-i)然后可使(XXXX)与胺NR6R7反应以产生酰胺(XXXXI)，其可如上被脱保护以产生产物(I)。
中间体(XI)的替代合成展示于如下流程4中。
流程4
a)可使在腈官能团相邻处具有亚甲基的任一种腈(XXXXII)与丙二酰氯(XXXXIII)反应以形成吡啶(XXXXIV)。该转化描述于Synthesis，1984，765-766中。
b)然后可使用本领域技术人员已知的任何文献条件，例如使用硝酸与硫酸的混合物或乙酸与硝酸的混合物将吡啶(XXXXIV)硝化以形成硝基吡啶(XXXXV)。
c)(XXXXV)中的氯原子然后可在各种条件下偶合，其中可在过渡金属催化剂存在下(在钯催化剂存在下)用反应性有机金属试剂(例如，锡烷、锌酸盐或硼酸)处理(XXXXV)，以产生被取代的吡啶(XI)。在其中R1＝H时，在诸如披钯木炭或氢氧化钯的适合催化剂存在下可有效进行简单的氢化反应。
中间体(X)的另一替代合成展示于如下流程5中。
流程5
在该方法中，使丙二酰基酯、优选二苯酯(XXXXVI)与希夫碱(XXXXVII)反应且加热以产生通式(X)的吡啶。
制备通式(X)化合物的另一替代方式展示于流程6中。
流程6
a)使通式(XXXXVIII)的酮酸(其可市购或通过式(V)的酮酯的皂化反应直接制得)在高温下、在适合的溶剂中与C＝0源(诸如1，1-羰基二咪唑)反应以产生环化吡喃酮(XXXXIX)。
b)将(XXXXIX)用诸如硫酸或盐酸的强无机酸处理以除去C3-酰基取代基且产生吡喃酮(L)。
c)在加热下可使(L)与诸如浓氢氧化铵水溶液等氨源反应以将吡喃酮环转化为吡啶(X)，从而截获流程1中所述的相同中间体。或者，通式(L)的若干种吡喃酮可获自商业来源，其可直接应用于步骤c。通式(L)化合物转化为通式(X)的那些化合物系描述于例如WO9504730的若干来源中。
制备通式(XIX)化合物的一替代方式展示于流程7中。
流程7
a)可使通式(LI)的市购二氯吡啶与式R3YNH2的胺反应以选择性取代4-氯基团，从而产生吡啶(LII)。
b)然后可使(LII)与氨的受保护形式PG1NH2或PG1PG2NH(诸如苄胺、烯丙胺、二苄胺或二烯丙胺)反应以取代2-氯基团，其中2个氢原子系被2个可随后在温和条件下移除的基团取代。关于该实例的替代，请参见例如Theodora W Greene和Peter G M Wuts的“ProtectiveGroups in Organic Synthesis”第3版(John Wiley and Sons，1999)、尤其第7章、第494-653页(＂Protection for the Amino Group＂)中所述的那些基团。若自步骤a使用过量的胺R3YNH2，则该基团可取代2-氯基团与4-氯基团。
c)(LIII)的酯可在已知将酯脱保护的各种条件下(例如，氢氧化钠或氢氧化锂)水解以产生酸(LIV)。关于该试剂的替代，请参见例如Theodora W Greene及Peter G M Wuts的”Protective Groups inOrganic Synthesis”第3版(John Wiley and Sons，1999)、尤其第5章、第373-441页(＂Protection for the Carboxylgroup＂)中所述的那些条件。
d)然后可使(LIV)与已知可使酸转化为酰基叠氮(例如二苯基膦酰基叠氮化物)的试剂反应。在加热作用下，中间体酰基叠氮经历其中产生异氰酸酯并在内部经过4-胺基取代基截留的重排反应，以产生咪唑酮(XIX)，从而截获流程1中所述的相同中间体。
制备通式(I)化合物的一替代方式展示于流程8中。
流程8
a)根据Org.BioMol.Chem.，2003，1，1354-1365所制备的(LVI)可通过使(LVI)中的氨基与活性试剂(例如，亚硝酸异戊酯)及卤化剂(诸如二碘甲烷或二溴甲烷)反应来卤化，以产生卤化物质(LVII)。
b)(LVII)然后可经历各种过渡金属介导的偶合反应，其中碘基团选择性地与例如末端炔反应。关于对咪唑构型的该转化的实例，参见J.Med.Chem.，34(2)，1991，778-786。
c)然后可使(LVIII)与氨反应以使炔基-甲腈环化为吡啶环。关于对咪唑构型的该转化的实例，例如参见Tetrahedron，49(3)，1993，557-570。
d)然后可使(LIX)中的溴原子在强酸性条件下(例如，盐酸或硫酸)水解；或与OH的亲核源(诸如氢氧化钠或甲醇钠)反应，然后适度的酸性水解，以产生(I)。
中间体(LVIII)还可根据下述流程9用于制备通式(I)的化合物。 流程9
e)可使(LVIII)在适度的加热下与醇(例如，甲醇、乙醇、丙醇或其它任何醇)反应以形成缩醛(LX)。
f)缩醛(LX)然后可在已知使缩醛或缩酮水解为酮的任何条件下(例如，盐酸水溶液)经历水解。关于该条件的替代，请参见例如Theodora W Green及Peter G M Wuts的”Protective Groups in OrganicSynthesis”第3版(John Wiley and Sons，1999)、尤其第4章、第297-347页(＂Protection for the Carbonylgroup＂)中所述的那些条件。
g)然后可使酮(LXI)在适合的碱(诸如氢化钠、叔丁醇钾或碳酸钾)及烷化剂(诸如烷基卤、烷基磺酸盐或烷基三氟甲烷磺酸盐)存在下烷基化以产生(LXII)。
h)然后可使(LXII)与氨反应以使酮-甲腈环化为吡啶环。
i)然后可使(LXIII)中的溴原子在强酸性条件下(例如，盐酸或硫酸)水解；或与OH的亲核源(诸如氢氧化钠或甲醇钠)反应，然后适度的酸性水解，以产生(I)。在醇解步骤e期间，高温可使溴原子被醇取代，然后以引入氧代的替代方式将其引入(I)。
流程8及9使用溴(其为优选)进行说明，但应了解还可使用其它卤原子。
中间体(XVII)的替代合成展示于如下流程10中。流程10
a)(LXIV)可在本领域技术人员已知的任何硝化条件下处理。已知该类型转化是通过用中间体N-硝基类似物进行的。例如，参见WO2005026164中所述的同样化学内容。
b)(LXV)被HBr处理以使氯原子转化为溴(LXVI)。
c)然后将(LXVI)用本领域技术人员已知的将氨基转化为N-亚硝基或重氮基团的任何条件处理，然后用HCl处理以产生氯化物(LXVII)。
d)(LXVII)可用胺PG1NH(例如苄胺)处理以取代4-氯与2-溴以产生(LXVIII)。
e)然后使用过渡金属介导方法，例如，Pd催化羰化、经由Sn、Zn或B试剂的有机金属交叉偶合反应，或利用Li或Mg试剂、使用Fe或Ni作为催化剂，可使剩余6-溴用于引入各种取代基。在所示实例中，羰化反应产生所示的具体类似物(LXIX)。然后可根据流程1中的步骤n、o及p，使此物转化为式(I)化合物。
制备通式(XIX)化合物的一替代方式展示于流程11中。流程11
a)依次在可引入卤原子的各种条件下(例如NCS、NBS、NIS、溴水等)将(LXX)卤化以产生二卤素吡啶(LXXI)。
b)然后用通用结构R3YNH2的胺处理(LXXI)以产生两化合物(LXXII)与(LXXIII)的混合物。
c)-e)所需化合物(LXXII)然后可环化，取代剩余卤，然后最后脱保护，可产生(I)。
制备通式(X)、(XI)及(I)的化合物的另一方法展示于流程12中。流程12
a)从而，可使用一般脱水剂(诸如POCl3、SOCl2、PPA或三氟甲磺酸酐)、在强碱存在下、在现场可形成腈的条件下、使市购的式(LXXV)酰胺与丙二酰二酯(例如，1，3-丙酮二甲酸二烷基酯)经起始酰胺的脱水作用而起反应。该条件直接导致二羟基吡啶(X)的形成。
b)(X)可根据流程1中所述方法硝化以产生(XI)。
c)(X)可根据流程1中所述方法皂化及脱羧基。
d)和e)然后可使用流程1中所述任一种方法使(X)或(XI)转化为式(I)化合物。
(I)的前体药物衍生物的制备方法展示于如下流程13中。

流程13 活性母体化合物与特征为基团R4或R5连接于适合的离去基团的试剂在适合的碱存在下反应，可产生(I)的前体药物衍生物。适合的试剂包括但不限于如下所示的烷基卤、酰氯、氯甲酸酯及氨基甲酰氯。

适合的碱包括三乙胺、二异丙基乙胺、碳酸钾、碳酸铯、氢化钠及正丁基锂。多种溶剂(包括但不限于THF、乙腈、二甲基甲酰胺、二氯甲烷及乙醚)还可用于实现该转化。溶剂与碱的特定选择会影响烷化反应/酰化反应的区域选择性，即，反应基团是否连接O原子(R5)或N原子(R4)。例如，母体分子与氯甲酸乙酯在DCM中的三乙胺存在下反应可显著地产生O酰化。
上述所有反应以及上述方法中公开的新的起始物质的制备为常规的，且对本领域技术人员而言，参考文献先例及其实施例及制备，可知晓用于其执行或制备的适合的试剂及反应条件以及分离所需产物的程序。
本发明的化合物由于其在哺乳动物(包括人)中具有药理活性而为有用的。详细地说，其适用于治疗与TLR7的调节(尤其是激动作用)相关的疾病。
在另一方案中，本发明另外提供用于治疗与TLR7受体的调节相关的疾病或病症的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
从而本发明提供用于治疗其中已知或可证明调节TLR7受体能产生有益效果的疾病或病症的(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在又一方案中，本发明的化合物适用于治疗病毒感染，诸如由以下病毒所引起的感染腺病毒、疱疹病毒(例如，HSV-I、HSV-II、CMV或VZV)、痘病毒(例如，诸如天花或牛痘的正痘病毒，或接触传染性软疣)、细小核糖核酸病毒(例如，鼻病毒或肠病毒)、正粘液病毒(例如流感病毒)、副粘液病毒(例如，副感冒病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒或呼吸道合胞体病毒(RSV))、冠状病毒(例如，SARS)、乳多泡病毒(例如，乳头状瘤病毒，诸如产生生殖器疣、普通疣或足脚底疣的那些病毒)、嗜肝DNA病毒(例如，乙型肝炎病毒)、黄病毒(例如，丙型肝炎病毒或登革热病毒)、逆转录病毒(例如，慢病毒如HIV)或丝状病毒(例如，埃博拉病毒或马尔堡病毒(marbug virus))。
在另一方案中，本发明的化合物适用于治疗丙型肝炎病毒感染。
在又一方案中，本发明的化合物适用于治疗肿瘤或癌症，其包括但不限于癌、肉瘤及白血病，例如，鳞状细胞癌、肾细胞癌瘤、卡波西氏肉瘤、黑色素瘤、肾细胞癌瘤、骨髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤、非何杰金氏淋巴瘤。
在又一方案中，本发明的化合物适用于治疗细菌感染、真菌感染及原生动物感染，包括但不限于由如下菌属细菌所引起的感染埃希氏杆菌属(Escherichia)、肠杆菌属(Enterobacter)、沙门氏菌属(Salmonella)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、克雷白氏杆菌属(Klebsiella)、变形杆菌属(Proteus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、链球菌属(Streptococcus)、衣原体属(Chlamydia)；或是真菌感染，如念珠菌病(candidiasis)、曲霉病(aspergillosis)、组织胞浆菌病(histoplasmosis)、隐球菌脑膜炎(cryptococcal meningitis)。
在又一方案中，本发明的化合物适用于治疗T-辅助细胞(Th2)介导的疾病(例如参见Dabbagh等人，Curr Opin Infect Dis 2003，16199-204，该文引入本文中作为参考文献)，这些疾病包括但不限于特应性疾病，诸如特应性皮炎或湿疹、嗜酸性红细胞增多症、哮喘、变态反应、过敏性鼻炎。
在又一方案中，本发明的化合物适用于治疗损伤或老化的皮肤，诸如疤痕及皱纹。
在又一方案中，本发明的化合物适用于治疗自体免疫性疾病，诸如克罗恩氏病及炎症性肠病。
式(I)化合物及其药学上可接受的盐或溶剂化物可单独给药或作为联合疗法的一部分进行给药。因此，本发明的范围包括包含本发明的化合物与一种或多种其它治疗剂的组合物的实例及其共同给药的实例。
在一方案中，本发明的组合形式包括用式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物以及一种或多种具有抗HCV活性的其它药剂进行治疗，该抗HCV活性的药剂是能抑制如下靶标的药剂，诸如但不限于HCV NS3蛋白、HCV NS5A蛋白、HCV NS4B蛋白、HCV聚合酶、HCV金属蛋白酶、HCV丝氨酸蛋白酶、HCV解螺旋酶、p7蛋白。此类药剂的实例包括但不限于干扰素、聚乙二醇化干扰素(例如，聚乙二醇化α-2a干扰素及聚乙二醇化α-2b干扰素)、长效干扰素(例如，白蛋白干扰素α)、拉米夫定(lamivudine)、利巴韦林(ribavarin)、恩曲他滨(emtricitabine)、维拉米定(viramidine)、西戈韦(celgosivir)、伐洛他滨(valopicitabine)、HCV-086、HCV-796、RMZ702、BILN2061、IDN6566、NM283、SCH 6及VX-950。
在另一方案中，本发明的组合形式包括用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物及一种或多种其他TLR激动剂例如TLR3、TLR7、TLR8或TLR9受体的激动剂进行治疗。
在另一方案中，本发明的组合形式包括用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物及一种或多种选自如下抑制剂的其它抗病毒剂治疗HCV-HIV共感染HIV蛋白酶抑制剂(PI)、非核苷逆转录酶抑制剂(NNRTI)、核苷/核苷酸逆转录酶抑制剂(NRTI)、CCR5拮抗剂、抑制gp120与CD4的相互作用的药剂、抑制HIV进入靶细胞的药剂(如融合抑制剂)、整合酶抑制剂、异戊烯化抑制剂、RNase H抑制剂及成熟抑制剂。
NNRTI的实例包括但不限于依法韦仑(efavirenz)、HBY-097、奈韦拉平(nevirapine)、TMC-120(达匹韦林(dapivirine))、TMC-125、依曲韦林(etravirine)、地拉韦啶(delavirdine)、DPC-083、DPC-961、卡普韦林(capravirine)、利匹韦林(rilpivirine)、5-{[3，5二乙基-1-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-4-基]氧基}间苯二甲腈或其药学上可接受的盐、溶剂化物或衍生物；GW-678248、GW-695634、MIV-150、胡桐素(calanolide)及三环嘧啶酮衍生物，如WO 03/062238中所揭示。
CCR5拮抗剂的实例包括但不限于TAK-779、SC-351125、安立韦罗(ancriviroc)(以往称为SCH-C)、维立韦罗(vicriviroc)(以往称为SCH-D)、马拉韦罗(maraviroc)、PRO-140、阿拉韦罗(aplaviroc)(还称GW-873140、Ono-4128、AK-602)、AMD-887 CMPD-167、1-内-{8-[(3S)-3-(乙酰氨基)-3-(3-氟苯基)丙基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基}-2-甲基-4，5，6，7-四氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-5-甲酸甲酯或其药学上可接受的盐、溶剂化物或衍生物，3-内-{8-[(3S)-3-(乙酰氨基)-3-(3-氟苯基)丙基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基}-2-甲基-4，5，6，7-四氢-3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-5-甲酸甲酯或其药学上可接受的盐、溶剂化物或衍生物，1-内-{8-[(3S)-3-(乙酰氨基)-3-(3-氟苯基)丙基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基}-2-甲基-4，5，6，7-四氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-5-甲酸乙酯或其药学上可接受的盐、溶剂化物或衍生物，及N-{(1S)-3-[3-内-(5-异丁酰基-2-甲基-4，5，6，7-四氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-1-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基]-1-(3-氟苯基)丙基}乙酰胺或其药学上可接受的盐、溶剂化物或衍生物。
进入和融合抑制剂的实例包括但不限于BMS-806、BMS-488043、5-{(1S)-2-[(2R)-4-苯甲酰基-2-甲基-哌嗪-1-基]-1-甲基-2-氧代-乙氧基}-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸甲基酰胺及4-{(1S)-2-[(2R)-4-苯甲酰基-2-甲基-哌嗪-1-基]-1-甲基-2-氧代-乙氧基}-3-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺、恩夫韦肽(enfuvirtide)(T-20)、西夫韦肽SP-01A(sifuvirtide SP-01A)、T1249、PRO 542、AMD-3100、可溶性CD4、在JP 2003171381中公开的化合物及在JP 2003119137中公开的化合物。
HIV整合酶抑制剂的实例包括但不限于L000870810、GW-810781、WO 03/062204中公开的1，5-萘啶-3-甲酰胺衍生物、WO 03/047564中公开的化合物、WO 03/049690中公开的化合物及WO 03/035076中公开的5-羟基嘧啶-4-甲酰胺衍生物、MK-0518(WO 03016315中公开的5-(1，1-二氧代-1，2-硫氮杂环己烷基(thiazinan)-2-基)-N-(4-氟苄基)-8-羟基-1，6-萘啶-7-甲酰胺)、GS-9137(JTK-303)。
异戊烯化抑制剂的实例包括但不限于HMG辅酶A还原酶抑制剂，诸如他汀类(例如阿伐他汀(atorvastatin))。
成熟抑制剂的实例包括3-O-(3’3’-二甲基琥珀酰基)桦木酸(或称为PA-457)及αHGA。
在又一方案中，本发明的组合形式包括用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物及一种或多种其它药剂进行治疗，所述其它药剂例如、但不限于抗真菌剂，例如氟康唑(fluconazole)、福司氟康唑(fosfluconazole)、伊曲康唑(itraconazole)或伏立康唑(voriconazole)；抗菌剂，例如，阿奇霉素(azithromycin)或克拉霉素(clarithromycin)；用于治疗AIDS相关性卡波西氏肉瘤的干扰素、柔红霉素(daunorubicin)、阿霉素(doxorubicin)及紫杉醇(paclitaxel)；以及用于治疗巨细胞病毒(CMV)视网膜炎的西多福韦(cidofovir)、福米韦生(fomivirsen)、膦甲酸(foscarnet)、更昔洛韦(ganciclovir)及万赛维(valcyte)。
在又一方案中，本发明的组合形式包括用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物及一种或多种可增强机体免疫系统的其它治疗剂进行治疗，所述其它治疗剂包括低剂量的环磷酰胺、胸腺刺激素、维生素及营养补充剂(例如，抗氧化剂，包括维生素A、C、E、β-胡萝卜素、锌、硒、谷胱甘肽、辅酶Q-10及紫锥花)、及疫苗例如免疫刺激复合物(ISCOM)，该复合物包含将表达多聚体5的抗原与佐剂组合的疫苗制剂。
根据本发明的应用的其它组合包括式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物与下述药剂的组合，所述药剂为CCR1拮抗剂，诸如BX-471；β肾上腺素受体激动剂，诸如沙美特罗(salmeterol)；皮质类固醇激动剂，诸如丙酸氟替卡松(fluticasone propionate)；LTD4拮抗剂，诸如孟鲁司特(montelukast)；毒蕈碱拮抗剂，诸如噻托溴铵(tiotropium bromide)；PDE4抑制剂，诸如西洛司特(cilomilast)或罗氟司特(roflumilast)；COX-2抑制剂，诸如塞来考昔(celecoxib)、伐地考昔(valdecoxib)或罗非考昔(rofecoxib)；α-2-δ配体，诸如加巴喷丁(gabapentin)或普加巴林(pregabalin)；TNF-α受体调节剂，诸如TNF-α抑制剂(例如，阿达木单抗(adalimumab))；或免疫抑制剂，诸如环孢菌素(cyclosporin)或大环内酯(macrolide)，诸如他克莫司(tacrolimus)。
包括于本发明范围内的还有式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物与一种或多种其它治疗剂的组合，该其它治疗剂可降低本发明化合物的代谢速率，由此引起与患者的接触增加。以这种方式增加暴露被称为增效(boosting)。这种作用的优点在于具有增强本发明化合物的功效或减少达到与未增效剂量相同的功效所需的剂量。本发明的化合物的代谢包括通过P450(CYP450)酶、尤其是CYP 3A4所进行的氧化过程以及通过UDP葡糖醛酸基转移酶和硫酸化酶所进行的结合。因此，在可以用于增加患者与本发明化合物接触的药剂是能够充当细胞色素P450(CYP450)酶的至少一种同种型(isoform)的抑制剂的那些药剂。可以被有利抑制的CYP450的同种型包括但不限于CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9、CYP2C19及CYP3A4。可用于抑制CYP 3A4的适合药剂包括但不限于利托那韦(ritonavir)、沙奎那维(saquinavir)或酮康唑(ketoconazole)。
在上述组合中，就剂型而言，式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物及其它治疗剂可单独给药或彼此联合给药；就其给药时间而言，可同时或依次给药。因此，一组分药剂的给药可以在另一组分药剂给药之前、同时或之后给药。
应理解的是，本文所提及的治疗包括治疗性、缓解性和预防性的治疗。
应了解本发明包括以下各方面。
(i)式(I)的化合物或其互变异构体或者该化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物； (ii)包含如上述任一项发明所述的式(I)化合物或其互变异构体或该化合物或者其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物与一种或多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物； (iii)用作药物的式(I)化合物或其互变异构体或者该化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物； (iv)用于治疗与TLR7受体的调节相关的疾病或病症的式(I)化合物或其互变异构体或者该化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物； (v)式(I)化合物或其互变异构体或者该化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗与TLR7受体的调节相关的疾病或病症的药物中的用途。
(vi)包括一种或多种其它治疗剂的药物组合物； (vii)包含式(I)化合物或其互变异构体或者该化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物与其它治疗活性剂的医药产品(如试剂盒形式)，其作为在治疗与TLR7受体的调节相关的疾病中，同时、单独或依次使用的组合制品。
(viii)式(I)化合物或其互变异构体或者该化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物在制备与其它治疗活性剂组合使用从而在治疗与TLR7受体的调节相关的疾病中同时、单独或依次使用的药物中的用途。
(ix)治疗哺乳动物中与TLR7受体的调节相关的疾病或病症的方法，其包括将治疗有效量的式(I)化合物或其互变异构体或者该化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物给予该哺乳动物。
(x)制备式(I)化合物或其互变异构体或者该化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物的方法。
(xi)本文中公开的一些新型中间体。

具体实施例方式 本发明通过以下非限制性实施例进行说明，其中使用以下缩略语及定义

过滤剂(木质纤维素)，购自J.Rettenmaier & Sohne，Germany APCI+大气压力化学电离(正向扫描) Bn 苄基 br 宽峰 d双峰 dd双二重峰 DMSO 二甲亚砜 ELSD 蒸发光散射检测器 ES+ 电喷雾正向扫描质谱 ESI 电喷雾电离质谱 (正向扫描或负向扫描) eq当量 HRMS 高分辨率质谱 1H NMR质子核磁共振 LC-MS 液质联用仪 LRMS 低分辨率质谱 m 多重峰 m/z 质谱峰 Reacti-VialTM 反应瓶，购自美国 飞世尔科学世界公司 q 四重峰 s 单峰 t 三重峰 δ 化学位移 * 表示连接点 实施例1 4-氨基-1-苄基-6-环丙基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将4-烯丙氨基-1-苄基-6-环丙基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(70mg，0.2mmol)溶于乙醇(2ml)中，添加10％ Pd-C(70mg，w/w)，再逐滴添加BF3·OEt2(27 1，0.2mmol)。将混合物在N2气氛下、在回流下加热过夜。将混合物冷却至室温并用Arbocel(木质纤维素)过滤，用新制EtOH冲洗并将滤液真空浓缩以产生粗产物(150mg)。用98:2→95:5 DCM:MeOH洗脱、用二氧化硅柱色谱产生灰白色固体的标题化合物(17mg)。
1H NMR(CD3OD)δ 7.35-7.27(m，5H)，6.26(s，1H)，5.00(s，2H)，1.89-1.82(m，1H)，0.85-0.80(m，2H)，0.77-0.73(m，2H)；C16H16N4O的HRMS计算值281.1397，实测值281.1395。
实施例2 4-氨基-1-苄基-6-甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将1-苄基-4-二苄基氨基-6-甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(34mg，0.08mmol)混悬于乙醇(5ml)中并在室温下、在60psi、在10％ Pd(OH)2(7mg)上氢化6小时。将反应混合物用Arbocel短塞过滤，然后将滤液真空蒸发为不透明胶。将此胶溶于甲醇中，且预吸附于硅胶上，然后用EtOAc中的5％甲醇洗脱、通过柱色谱纯化。将适合的洗脱组分合并并在真空中蒸发以产生白色固体的标题化合物7mg。
1H NMR(CD3OD)δ 2.31(s，3H)，5.01(s，2H)，6.40(s，1H)，7.31(m，5H)；LRMS(ES+)m/z 255(MH+)。
实施例3 1-苄基-4-氨基-6，7-二甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将1-苄基-4-二烯丙氨基-6，7-二甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(358mg，1mmol)溶解于水(10ml)及乙腈(25ml)中，添加一份RhCl(PPh3)3(286mg，0.3mmol)，然后将混合物在回流下加热16h。将混合物冷却至室温，然后真空浓缩，使用95:5→85:15 DCM:MeOH的梯度、通过硅胶柱色谱将残余物纯化，以产生淡褐色固体的标题化合物(77mg，29％)。
1H NMR(DMSO)δ 1.98(s，3H)，2.14(s，3H)，5.13(s，2H)，5.34(s，2H)，7.03-7.31(m，5H)，10.38(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 269[MH]+ 实施例4 4-氨基-1-苄基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯
将1-苄基-4-苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯(0.02g)溶解于硫酸(2ml)中，快速搅拌15分钟。将反应混合物冷却至0℃，添加水，产生沉淀物，将其过滤并在真空中干燥以产生白色固体的标题化合物(10mg)。
1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ 3.75(s，3H)，4.95(s，2H)，7.20-7.50(m，6H)，10.20(s，1H)。LRMS(ES+)m/z 299[MH]+ 实施例5 4-氨基-1-苄基-6-吡嗪-2-基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将N-2，N-4-二苄基-6-吡嗪-2-基-吡啶-2，3，4-三胺(100mg/0.261mmol)溶于DMF(5ml)中，添加CDI(95.3mg/0.523mmol)，在60℃加热5小时，然后真空浓缩。然后将反应混合物溶于浓硫酸(3ml)中，并在室温下搅拌30分钟。然后向反应物添加冰，通过倾注在水(5ml)中的K2CO3(8g)来骤冷。然后用EtOAc萃取，用硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物通过柱色谱法纯化。详细地说，然后使用EtOAc、95:5EtOAc:MeOH分离该两种区位异构体以产生淡橙色固体的标题化合物(15mg)。
1H NMR(CD30D，400MHz)δ 5.10(s，2H)，7.20-7.40(m，5H)，7.55(s，1H)，8.45(d，1H)，8.55(d，1H)，9.4(s，1H) 实施例6 4-氨基-1-苄基-6-吗啉-4-基甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮
将N-2，N-4-二苄基-6-吗啉-4-基-甲基-吡啶-2，3，4-三胺(240mg，0.59mmol)溶于20ml二氯甲烷中，然后添加1，1′-羰基二咪唑(91mg，1.77mmol)，并将反应物在室温下搅拌48小时。添加20ml水并将有机层分离，用硫酸镁干燥并在真空中移除溶剂。使用二氯甲烷中的4％甲醇、通过硅胶柱色谱法纯化粗残余物，以产生140mg的2种异构体的混合物。将60mg的2种异构体的该混合物溶于2ml浓硫酸中并在室温下搅拌30分钟。谨慎添加水(5ml)，然后添加碳酸钾(5.2g直至pH～7)。将混合物用乙酸乙酯萃取，将有机层分离，用硫酸镁干燥并在真空中移除溶剂。使用二氯甲烷中的1％氨及10％甲醇、通过硅胶柱色谱法纯化粗残余物，以产生10mg标题化合物及6mg的另一异构体。
1H NMR(CD3OD)δ 7.38-7.2(m，5H)，6.58(s，1H)，5.05(d，2H)，3.65(m，4H)，3.4(s，2H)，2.4(m，4H)；LRMS(ES+)m/z 340[MH]+ 实施例7 4-氨基-1-苄基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5，c]吡啶-7-甲酸环丙基甲基-酰胺
将1-苄基-4-二苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5，c]吡啶-7-甲酸环丙基甲基-酰胺(10mg，0.02mmol)溶解于1ml浓硫酸中，并将混合物在室温下搅拌30分钟。一旦完成，则将混合物稀释于5ml水中，逐次添加碳酸钾直至pH～12。然后用乙酸乙酯(2×50ml)萃取混合物。将有机层合并，用MgSO4干燥并在真空中移除溶剂。使用乙酸乙酯中的20％甲醇、通过硅胶柱色谱法纯化残余物，以产生1mg标题化合物；LRMS(ES+)m/z 338[MH]+ 实施例8 4-氨基-1-苄基-7-溴-6-甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮
将4-氨基-1-苄基-6-甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(20mg，0.08mmol)混悬于5ml乙酸中，然后添加乙酸钠(5mg，0.08mmol)，然后逐滴添加溴(4L，0.08mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物稀释于水(50ml)中并用乙酸乙酯(50ml)萃取，将有机层分离，用硫酸镁干燥并在真空中移除溶剂。使用乙酸乙酯中的10％甲醇、通过硅胶柱色谱法纯化残余物，以产生15mg褐色固体的标题化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ7.40-7.10(m，5H)，6.85(s，2H)，5.30(s，2H)，2.35(s，3H)；LRMS(ES+)m/z 333，335[MH]+ 实施例9 4-氨基-1-苄基-6-甲基-5-氧基-1，3-二氢-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮
将4-氨基-1-苄基-6-甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(20mg，0.08mmol)溶于10ml二氯甲烷中，然后添加3-氯过氧苯甲酸(15mg，0.09mmol)，并将混合物在室温下搅拌2小时。将混合物用水洗涤，用硫酸镁干燥并在真空中移除溶剂，以产生5mg标题化合物。
1H NMR(CD30D)δ7.40-7.20(m，5H)，6.59(s，1H)，5.05(s，2H)，2.45(s，3H)；LRMS(ES+)m/z 271[MH]+ 实施例10 4-氨基-1-苄基-6-(2-甲氧基-乙基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将1-苄基-4-苄基氨基-6-(2-甲氧基-乙基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(32mg，0.082mmol)在浓硫酸(2ml)中搅拌30分钟。添加水(5ml)并将混合物逐滴添加至饱和NaHCO3的被搅拌的溶液中以获得碱性pH值。将水溶液用2×EtOAc萃取并将所合并的有机物干燥且浓缩以产生黄色固体。用DCM:MeOH 97:3(梯度增加至DCM:MeOH:NH395:5:0.5)洗脱、通过二氧化硅柱色谱法分离异构体的混合物，以产生浅黄色固体的标题化合物(3.1mg，13％)。
1H NMR(MeOD)δ 2.82-2.85(t，2H)，3.66-3.69(t，2H)，5.08(s，2H)，6.36(s，1H)，7.19-7.34(m，5H)；LRMS(ES)m/z 299[MH]+ 实施例11 4-氨基-1-苄基-6-[2-(2-甲氧基-乙氨基)-乙基]-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将[2-(1-苄基-4-苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-基)-乙基]-(2-甲氧基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(64mg，0.12mmol)在浓硫酸(2ml)中搅拌30分钟。添加水(5ml)并将混合物逐滴添加至饱和NaHCO3的被搅拌的溶液中以获得碱性pH值。将水溶液用2×EtOAc萃取并将所合并的有机物干燥且浓缩以产生黄色固体。用DCM:MeOH 98:2(梯度增加至DCM:MeOH:NH3 90:10:1)洗脱、通过二氧化硅柱色谱法分离异构体的混合物，以产生黄色固体的标题化合物(4.2mg，11％)。
1H NMR(MeOD)δ 2.84-2.86(t，2H)，3.02-3.05(t，2H)，3.27(s，3H)，3.45-3.48(t，2H)，5.09(s，2H)，6.34(s，1H)，7.20-7.34(m，5H)；LRMS(ES)m/z 342[MH]+ 实施例12 4-氨基-1-苄基-6-噁唑-2-基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将CDI(821mg，5.06mmol)添加至N*2*，N*4*-二苄基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，3，4-三胺(940mg，2.53mmol)于THF(15ml)中的溶液中。将溶液在氮气氛下、在60℃加热18小时。将反应混合物冷却，然后真空浓缩。然后将粗混合物溶于浓H2SO4(15ml)中并在室温下静置30分钟。将暗褐色溶液逐滴添加在碎冰上。通过添加K2CO3饱和水溶液将pH值调节至～9，然后过滤混合物。将固体用EtOAc(200ml)洗涤，然后将有机物及水性滤液转入分液漏斗中。将各层分离并将水溶液用EtOAc(200ml)再萃取。将有机物合并、干燥(MgSO4)且蒸发为橙色胶粘固体。将粗物质用EtOAc及甲苯研磨。将所得固体过滤并用EtOAc洗涤以产生灰白色固体。用0.05％甲酸(水溶液)及MeCN中的0.05％甲酸以15ml/min流速洗脱、通过在Phenomenex Gemini 5μm柱(150×21.2mmid)上的HPLC纯化此物质。使梯度在5％有机物时等度0.6分钟，然后历经12分钟线性地由5％增加至80％有机物。
将来自研磨的滤液蒸发，然后在Isco Companion二氧化硅柱(12g，Redisep)上进行柱色谱。然后用EtOAc:MeOH洗脱所得物质，经8个柱容积将梯度由95:5线性地增加至98:2。将所需洗脱组分合并且蒸发为橙色胶粘固体。如上通过HPLC纯化该物质。将所有来自HPLC柱的所需洗脱组分合并且蒸发以产生白色固体的标题化合物(26mg，3％)。
1H NMR(CD30D)δ 5.07(s，2H)7.17-7.36(m，7H)7.92(s，1H)LCMS Rt＝2.15m/z 308[MH]+ 制备实施例12的替代方式描述如下。
4-氨基-1-苄基-6-噁唑-2-基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
在-78℃、在N2气氛下将己烷(1.6M，183μl，0.29mmol)中的丁基锂溶液逐滴添加至噁唑(16μl，0.24mmol)于THF(1ml)中的溶液。将溶液在-78℃搅拌10分钟，然后逐滴添加氯化锌(100mg，0.73mmol)于THF(1ml)中的溶液。将溶液在-78℃搅拌15分钟，然后加温至室温。然后用注射器将溶液添加至含有4-氨基-1-苄基-6-溴-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(13mg，0.04mmol)及双(三苯基膦)二氯化钯(12mg，0.02mmol)的预密封的被氮气吹洗的微波瓶(Biotage，0.5-2.0ml)。将该瓶在微波照射(Biotage，Initiator 8(微波合成仪))下、在110℃加热15分钟。将反应混合物在乙酸乙酯(20ml)与饱和NH4Cl(aq)(10ml)之间分溶。将混合物用硅藻土过滤，用乙酸乙酯(20ml)洗涤。将各层分离并将有机物用水(10ml)及盐水(10ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩以产生粗产物。将该样品溶于乙腈:水:DMSO(2:1:1)的混合物中，通过制备性HPLC(FractionLynx)纯化以产生白色固体的标题化合物(2mg)。
1H NMR(d6-DMSO)δ 10.60(brs，1H)，8.10(s，1H)，7.36-7.27(m，6H)，7.19(s，1H)，6.01(br s，2H)，5.04(s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 308[MH]+。
实施例13 4-氨基-1-苄基-6-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将CDI(184mg，1.13mmol)添加至在反应瓶中的N*2*，N*4*-二苄基-6-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-2，3，4-三胺(218mg，0.567mmol)于DMF(3ml)中的溶液中。将瓶用氮冲洗，然后密封并在铝块中、在60℃(铝块温度)加热。将暗褐色溶液在此温度下搅拌16小时。将溶液在高真空下浓缩，然后溶于浓硫酸(5ml)中。将褐色溶液在室温下搅拌30分钟，然后倾注在碎冰(～20ml)上。逐滴添加碳酸钾的饱和水溶液直至pH～8。自中和期间沉淀析出的固体中倾析出水溶液，然后用EtOAc(2×50ml)萃取。将被合并的有机物干燥(MgSO4)，蒸发为黄色固体(106mg)。
在Phenomenex Gemini 5μm柱(150×21.2mmid)上通过HPLC层析样品(58mg)。用0.05％ DEA(aq)及MeCN中的0.05％ DEA、以18ml/min流速洗脱。使梯度在5％有机物时等度0.6分钟，然后历经15分钟由5％线性地增加至100％有机物。
将所需洗脱组分合并且蒸发以产生白色固体的标题化合物(10mg，6％)。
1H NMR(CD30D)δ 3.94(s，3H)5.08(s，2H)6.91-6.95(m，1H)7.00(s，1H)7.07-7.10(m，1H)7.16-7.38(m，5H)；LRMS(ES+)m/z 321[MH]+ 实施例14 4-氨基-1-苄基-6-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将1-苄基-4-苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸(1-羟亚氨基-乙基)-酰胺混悬于甲苯中且密封于微波瓶中(Biotage，0.5-2.0ml)。将瓶密封并在微波照射(Biotage Initiator 8)下、在150℃加热15分钟。将样品在微波中、在150℃再加热30分钟，再在150℃加热30分钟。将混合物蒸发，然后在EtOAc(10ml)与水(5ml)之间分溶。将水溶液用EtOAc(2×10ml)萃取两次以上，然后将所合并的有机物干燥(MgSO4)且蒸发。将残余物混悬于乙腈(2ml)中并将此混合物密封于微波瓶中，然后在微波照射下、在170℃加热30分钟，然后在190℃再加热30分钟。将反应混合物真空浓缩，然后溶于浓H2SO4(2ml)中。将溶液搅拌30分钟，然后倾注在碎冰上。逐滴添加饱和K2CO3水溶液直至pH值为～8。将水溶液自固体倾析入分液漏斗中，然后用EtOAc(3×15ml)萃取。将所合并的有机物干燥(用MgSO4)且蒸发。将异构体混合物在Luna 10微米C18(2)柱(150×21.2mmid)上、通过HPLC纯化。用0.1％甲酸(aq)及MeCN中的0.1％甲酸、以25ml/min流速洗脱。使梯度在5％有机物时等度0.6分钟，然后历经8.50分钟由5％线性地增加至90％有机物。将所需洗脱组分蒸发以产生白色固体的标题化合物(0.5mg，1％)。
LCMS Rt＝2.46m/z 323[MH]+。
实施例15 4-氨基-1-苄基-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将1-苄基-4-苄基氨基-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(2.63g，6.60mmol)溶于浓硫酸(50ml)中并将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将反应混合物冷却至0℃，添加冰。将K2CO3(150g)溶于水(700ml)中且逐滴添加反应混合物。将水溶液用EtOAc(6×500ml)萃取。将所合并的有机物用盐水(200ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩以产生白色固体的标题化合物(1.20g)。
1H NMR(CDCl3)δ 10.77(brs，1H)，7.36-7.25(m，5H)，7.01(s，1H)，6.20(br s，2H)，5.04(s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 309[MH]+，307[MH]-。实测值C.54.55 H.3.60 N.18.17％。C14H11F3N4O需要％C.54.36H.3.61 N.17.86。
实施例15的替代合成描述如下； 将乙基-[2，3-二氨基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-苄基氨基甲酸酯(35gm，99mmol)在室温下溶于冰醋酸(300ml)中。过滤移除任何不溶性物质然后在搅拌下将透明黄色滤液加热至80℃。10分钟内开始形成白色沉淀物。持续加热共40分钟。将反应混合物冷却至环境温度并将沉淀物通过过滤收集，用乙酸洗涤并在真空中、在50℃干燥3小时以产生白色固体的标题化合物(26.4gm，86％收率)。
实施例16 4-氨基-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-噁唑-2-基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将CDI(272mg)添加至N2，N2-二苄基-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-噁唑-2-基-吡啶-2，3，4-三胺(400mg)于THF(10ml)中的溶液中。将溶液在N2气氛下、在60℃搅拌5小时。再添加3当量的CDI(408mg)并将反应物在回流下加热16小时。将反应混合物冷却然后真空浓缩。然后将粗混合物溶于浓H2SO4(5ml)中并在室温下静置30分钟。将暗褐色溶液逐滴添加在碎冰上。通过添加K2CO3饱和溶液将pH值调节至～8，然后过滤混合物。将所获得的固体用EtOAc(50ml)洗涤，然后将有机物及水性滤液转入分液漏斗中。将各层分离并将水溶液用EtOAc(50ml)再萃取。将有机物合并，干燥(用MgSO4)且蒸发以产生胶粘固体。将此物用Et2O研磨，并将固体通过过滤收集并用Et2O洗涤，产生灰白色固体的标题化合物(30mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.45(s，3H)，5.09(s，2H)，7.21-7.28(m，2H)，7.30(s，1H)，7.70(dd，1H)，7.95(s，1H)，8.42(d，1H)。LCMS Rt＝2.29m/z 323[MH]+ 实施例17 4-氨基-1-苄基-6-(2-甲氧基-乙氧基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将[2-氨基-6-(2-甲氧基-乙氧基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯(118mg)溶于乙醇(5ml)中，添加10％ Pd/碳(15mg)。将反应物在氢气氛下(50psi)、在室温下搅拌1小时。然后将反应混合物用硅藻土垫过滤且蒸发。将粗产物溶于冰醋酸(2ml)中且转入微波瓶(Biotage，0.5-2.0ml)中。将瓶密封并在微波照射下、在100℃加热5分钟。将所得褐色混合物蒸发，将固体装载于二氧化硅上并在IscoCompanion二氧化硅柱(4g，Redisep)上进行柱色谱，用EtOAc庚烷洗脱(使梯度经8个柱容积(CV)由6040线性地增加至100％ EtOAc)、然后在100％ EtOAc时对8个CV等度。将所需洗脱组分合并且蒸发以产生白色固体的标题化合物(50mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 3.35(s，3H)，3.62(t，2H)，4.20(t，2H)，4.95(s，2H)，5.80(s，1H)，7.20-7.38(m，5H)。LCMS Rt＝2.13m/z 315[MH]+ 实施例18 4-氨基-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将(2-氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(27mg，0.07mmol)置于冰醋酸(5ml)中搅拌，并将溶液在环境温度下、在40psi H2气氛下、在10％ Pd/C(5.4mg，20％wt)存在下搅拌4小时。将混悬液用Arbocel垫过滤，用2×3ml AcOH洗涤并将滤液真空浓缩。将乙腈(5ml)添加至残余物中，并将该物质研磨，将所得固体通过过滤移除并在真空中干燥以产生白色固体的标题化合物。
1H NMR(d6-DMSO)δ 8.45(s，1H)，7.57-7.55(d，1H)，7.20-7.18(d，1H)，7.10(s，1H)，6.20(bs，2H)，5.01(s，2H)，2.40(s，3H)；LRMS(APCI)m/z 324[MH]+ 制备实施例18的替代方式描述如下。
4-氨基-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并(4，5-c)吡啶-2-酮
将4-苄基氨基-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并(4，5-c)吡啶-2-酮(30mg，0.07mmol)溶于1ml浓硫酸中并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将混合物倾注入水(100ml)中，逐次添加碳酸钾直至pH值为碱性。然后用乙酸乙酯(100ml)萃取。将有机层分离，用硫酸镁干燥并将溶剂在真空中移除以产生16mg白色固体的标题化合物。
1H NMR(d6-DMSO)δ 8.45(s，1H)，7.57-7.55(d，1H)，7.20-7.18(d，1H)，7.10(s，1H)，6.20(bs，2H)，5.01(s，2H)，2.40(s，3H)；LRMS(APCI)m/z 324[MH]+ 实施例19 4-氨基-6-(4-甲基-噁唑-2-基)-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将阮内镍(5mg)与[2-氨基-6-(4-甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(69mg)于乙酸(3ml)中的混合物在氢气氛(80psi)下搅拌1小时。将Arobcel添加在磺酸阳离子交换滤筒(Bakerbond，1g)顶端上，并将反应混合物装载在该顶端上进行过滤。将催化剂及Arbocel用刮刀移除，然后将滤筒用甲醇(5ml)洗涤以移除杂质。通过用甲醇中的氨(2M，2×5ml)洗脱使产物自滤筒释出。将粗溶液蒸发，然后添加IPA(3ml)，使固体沉淀，通过过滤收集并用IPA洗涤。将所得灰白色固体在高真空下干燥以产生标题化合物(16mg)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 2.13(s，3H)2.42(s，3H)5.05(s，2H)5.98(s，2 H)7.21(d，J＝7.90Hz，1 H)7.25(s，1 H)7.56(dd，J＝7.90，2.44Hz，1 H)7.80(s，1 H)8.47(d，J＝2.44Hz，1 H)10.68(br.s.，1H)；LRMS(ESI)m/z 337[MH]+，335[MH]- 实施例20 4-氨基-6-(4-乙基-噁唑-2-基)-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将[2-氨基-6-(4-乙基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(74mg)溶于乙酸(2ml)中并将锌粉(113mg，Aldrich，99％)添加至反应物中。将混合物在室温下、在氮气氛下搅拌16小时。将反应混合物在阳离子交换滤筒(Bakerbond SCX，磺酸粘合相，1g)上直接过滤。将SCX滤筒用甲醇(2×4ml)洗涤以移除杂质，然后用甲醇中的氨(2M，4ml)释出产物。将所需洗脱组分合并且蒸发为灰白色固体，用异丙醇研磨，过滤，然后用异丙醇洗涤，产生白色固体的标题化合物(32mg)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.16(t，J＝7.42Hz，3 H)2.40(s，3 H)2.44-2.56(m，2 H)5.04(s，2 H)5.98(s，2 H)7.19(d，J＝8.02Hz，1 H)7.23(s，1 H)7.54(dd，J＝8.02，2.34Hz，1 H)7.79(s，1 H)8.45(d，J＝2.34Hz，1 H)10.65(s，1 H)；LCMS Rt＝1.73m/z 351[MH]+ 实施例21 4-氨基-1-苄基-6-(1H-咪唑-2-基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
使用乙酸(3ml)中的{2-氨基-3-硝基-6-[1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑-2-基]-吡啶-4-基}-苄基-氨基甲酸乙酯(174mg)与阮内镍(5mg)，按照实施例20的方法制备标题化合物。由此可初步产生被SEM保护的咪唑化合物。然后逐滴添加二噁烷(4M，1ml)中的氯化氢并将溶液在室温下搅拌24小时。然后将反应混合物转入微波瓶(Biotage，2-5ml)中，并在微波照射(Biotage Initiator 8)下、在110℃加热10分钟。将反应混合物蒸发，然后再溶于甲醇中，并将溶液装载在阳离子交换滤筒(Bakerbond，磺酸粘合相，1g)上。将滤筒用甲醇(2×5ml)洗涤以移除杂质然后通过用甲醇中的氨(2M，5ml)洗脱来释出产物。将所需洗脱组分合并且蒸发为褐色固体。将此物用异丙醇研磨，并将固体通过过滤收集，然后用更多异丙醇洗涤，产生浅褐色固体的标题化合物(28mg)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 5.02(s，2 H)5.58(s，2 H)6.91(s，1H)7.06(s，1 H)7.11(s，1 H)7.25-7.36(m，5 H)10.53(s，1 H)11.99(s，1 H)；LCMS Rt＝1.52m/z 307[MH]+。
实施例22 4-氨基-1-苄基-6-(2-氟-苯基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
将[2-氨基-6-(2-氟-苯基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯(31mg)溶于乙酸(1ml)中。添加锌粉(Aldrich，99％，20mg)并将混合物在室温下、在氮气氛下搅拌2小时。添加额外锌粉(30mg)并将混合物再搅拌1小时。将反应混合物用甲醇(2ml)稀释，然后在阳离子交换滤筒(Bakerbond SCX，磺酸粘合相，1g)上直接过滤。将SCX滤筒用甲醇(2×5ml)洗涤以移除杂质然后用甲醇中的氨(2M，5ml)释出产物。将所需洗脱组分蒸发为浅褐色固体。将此物用乙酸乙酯研磨，然后过滤，并用更多乙酸乙酯洗涤以产生淡紫色固体的标题化合物(8mg)。
1H NMR(400MHz，DMS0-d6)δ ppm 4.99(s，2 H)5.82(s，2 H)6.87(d，J＝1.95Hz，1 H)7.15-7.29(m，3 H)7.29-7.39(m，5 H)7.81(td，J＝8.01，1.95Hz，1 H)10.51(s，1 H)；LCMS Rt＝2.21m/z 335[MH]+ 以下实施例23-119可以与实施例1-22类似的方式、由使用类似化学方法的制备部分中所述的类似中间体制备。
实施例23-28按照实施例1的方法制备，实施例54-60、65-72及107-110均按照实施例15及18所述的方法制备，实施例31及61按照实施例3所述的方法制备，实施例42-49、83-95及101-102均按照实施例17所述的方法制备，实施例73-78、96-99、103-106及111-112均按照实施例19所述的方法制备，实施例79-81按照实施例22所述的方法制备，实施例34-35及40按照实施例6所述的方法制备，实施例29-30、36-39、41及50-53按照实施例4所述的方法制备，实施例32-33按照实施例5所述的方法制备，按照实施例14所述的方法制备。
实施例62-64可按照实施例15及18所述的方法制备，实施例82可按照实施例14所述的方法按照，实施例100可按照实施例17所述的方法制备。
在以下实施例表中，星号表示连接点。















制备1 3-氨基-3-环丙基-丙烯酸乙酯 将环丙腈(2.7g，40.5mmol)溶于无水THF(100ml)中，然后添加锌(13.2g，202.3mmol)及氧化锌(1.6g，20.2mmol)，然后逐滴添加溴乙酸乙酯(6.7g，40.5mmol)。将混合物在N2气氛下、在35kHz超声波浴中超声处理2小时。30分钟后观察到绿颜色。将混合物用硅藻土过滤以移除锌及氧化锌。将滤液添加至20ml的50％ K2CO3(aq)溶液中。将所形成的稠沉淀物过滤以移除固体，并将水溶液用100ml EtOAc萃取。将萃取物用20ml盐水洗涤，用MgSO4干燥，并真空浓缩以产生粗产物(3.8g)。用90:10戊烷EtOAc洗脱、通过硅胶柱色谱纯化粗物质，以产生黄色油状标题化合物(1.32g)。
1H NMR(CDCl3)δ 4.47(s，1H)，4.11(四重峰，2H)，1.45-1.39(m，1H)，1.26(t，3H)，0.88-0.83(m，2H)，0.76-0.72(m，2H)；LRMS(APCI+)m/z156[MH]+。
制备2 6-环丙基-2，4-二羟基-烟酸乙酯 将金属钠(8.1g，119mmol)切成小块并在室温下、在氮气氛下逐次添加至被搅拌的乙醇(120ml)中。然后将混合物在60℃、在N2气氛下搅拌过夜，以确保金属的完全溶解。将丙二酸二乙酯(18.1ml，119mmol)在60℃添加至乙醇钠溶液中并将混合物在N2气氛下、在60℃搅拌1小时。在60℃逐滴添加3-氨基-3-环丙基-丙烯酸乙酯(10.3g，40mmol)于乙醇(10ml)中的溶液，并将混合物在回流温度下、在N2气氛下加热5天以产生橙色混悬液。将混合物冷却至室温且通过过滤收集所得固体。将滤液真空浓缩以产生更多固体。将所合并的固体溶于水(150ml)中，并将溶液用EtOAc(150ml)洗涤。使用浓HCl将水溶液酸化至pH 2，使得白色固体沉淀。将固体通过过滤收集，然后用冷水及Et2O洗涤，然后在真空中、在40℃干燥过夜以产生细白色固体的标题产物(5.32g)。将滤液真空浓缩至其体积的一半，使更多产物沉淀。将此第2次收获的固体通过过滤收集，用水及Et2O洗涤，并在真空中、在40℃干燥以产生另外0.35g的米黄色固体的标题化合物。
1H NMR(d6-DMSO)δ 12.71(br s，1H)，11.43(br s，1H)，5.51(s，1H)，4.26(四重峰，2H)，1.86-1.79(m，1H)，1.26(t，3H)，1.06-1.01(m，2H)，0.90-0.86(m，2H)；LRMS(APCI)m/z 224[MH]+。
制备3 6-环丙基-2，4-二羟基-吡啶 将6-环丙基-2，4-二羟基-烟酸乙酯(5.3g，20.5mmol)溶于浓HCl(25ml)中，并将混合物回流过夜。将混合物冷却至室温然后用浓氨中和。将所得沉淀物通过过滤收集，用冷水及乙腈洗涤并在真空中、在40℃干燥2天以产生米黄色粉末状标题化合物(3.39g)。
1H NMR(d6-DMSO)δ 10.96(br s，1H)，10.25(br s，1H)，5.38，(d，1H)，5.32(d，1H)，1.79-1.72(m，1H)，0.93-0.89(m，2H)，0.75-0.71(m，2H)；LRMS(ES)m/z 152[MH]+。
制备4 6-环丙基-2，4-二羟基-3-硝基-吡啶 将6-环丙基-2，4-二羟基-吡啶(1g，6.6mmol)在室温下混悬于AcOH:EtOAc(4:1，10ml)中。将混合物加温至30℃且逐滴添加发烟硝酸的一小部分(0.05ml，1.2mmol)，使温度保持在30℃与35℃之间。添加后混合物变成透明溶液。逐滴添加剩余发烟硝酸(0.25ml，6.3mmol)。将透明溶液冷却至室温，于是沉淀物开始形成。将混合物在室温下搅拌过夜。将固体通过过滤收集，用冷水及Et2O洗涤并在真空中、在室温下干燥隔周(一个周末)以产生黄色粉末状标题化合物(1.21g)。
1H NMR(d6-DMSO)δ 12.17(br s，1H)，11.88(br s，1H)，5.57(s，1H)，1.88-1.81(m，1H)，1.08-1.03(m，2H)，0.87-0.83(m，2H)；LRMS(APCI)m/z 197[MH]+。
制备5 6-环丙基-2，4-二氯-3-硝基-吡啶 将6-环丙基-2，4-二羟基-3-硝基-吡啶(1.2g，6.1mmol)混悬于POCl3(5mL)中。将混合物在碱洗气器下、在85℃加热过夜。将过量POCl3在真空中移除，将反应残余物溶于EtOAc(50ml)并在使用冰控制温度下逐滴添加至被搅拌的温水(50ml)中。将各层分离并将水溶液用90:10 EtOAc:MeOH(100ml)萃取。将有机物用盐水(50ml)洗涤，用MgSO4干燥且浓缩以产生粗产物(2g)。用90:10戊烷:EtOAc洗脱、用硅胶柱色谱可产生浅黄色结晶固体的标题化合物(893mg)。
1H NMR(d6-DMSO)δ 7.94(s，1H)，2.31-2.24(m，1H)，1.18-1.14(m，2H)，1.06-1.02(m，2H)；LRMS(APCI)m/z 233[MH]+。
制备6 苄基-(2-氯-6-环丙基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺 将6-环丙基-2，4-二氯-3-硝基-吡啶(160mg，0.8mmol)溶于THF(2ml)中，添加三乙胺(1041，0.8mmol)及苄胺(811，0.8mmol)。将混合物在室温下、在氮气氛下搅拌48小时，然后形成黄色沉淀物。将挥发物在真空中移除并将残余物在室温下、在塞紧烧瓶中贮存10天。然后用99:1 DCM:MeOH、98:2 DCM:MeOH洗脱、通过硅胶柱色谱纯化残余物以产生黄色结晶固体的标题化合物(185mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.42-7.31(m，5H)，7.05(br s，1H)，6.47(s，1H)，4.49(d，2H)，1.88-1.81(m，1H)，1.09-1.04(m，2H)，1.01-0.96(m，2H)；LRMS(APCI)m/z 304[MH]+。
制备7 苄基-(3-氨基-2-氯-6-环丙基-吡啶-4-基)-胺 将苄基-(2-氯-6-环丙基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺(245mg，0.8mmol)溶于AcOH:H2O(9.0:0.9ml)中。添加铁粉(270mg，4.8mmol)并将混合物在室温下、在氮气氛下剧烈搅拌隔周，此期间沉淀析出灰白色沉淀物。将反应混合物用EtOAc(20ml)及水(20ml)稀释，将混合物用硅藻土过滤并将滤饼用EtOAc(20ml)洗涤。将各相分离并将有机层用饱和NaHCO3水溶液(10ml)及盐水(10ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩。将残余物在真空中、在40℃干燥过夜以产生灰白色结晶固体的标题化合物(215mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.40-7.31(m，5H)，6.29(s，1H)，4.59(br s1H)，4.37(d，2H)，3.30(br s 2H)，1.89-1.82(m，1H)，0.87-0.86(m，4H)；LRMS(APCI)m/z 274[MH]+。
制备8 1-苄基-4-氯-6-环丙基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮将苄基-(3-氨基-2-氯-6-环丙基-吡啶-4-基)-胺(210mg，0.8mmol)溶于乙腈(10ml)中。添加1，1-羰基二咪唑(370mg，2.3mmol)并将混合物在氮气氛下、在80℃加热2小时。再添加250mg(1.5mmol)的1，1-羰基二咪唑并将混合物在80℃加热过夜。将混合物冷却至室温并在真空中移除溶剂。将残余物溶于DCM(20ml)中然后用1N HCl(10ml)、水(10ml)及盐水(10ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩。将残余物在真空中、在40℃干燥过夜以产生白色蓬松固体的标题化合物(217mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 8.20(brs，1H)，7.38-7.31(m，5H)，6.59(s，1H)，5.03(s，2H)，1.96-1.91(m，1H)，0.94-0.92(m，4H)；LRMS(APCI)m/z300[MH]+。
制备9 4-烯丙氨基-1-苄基-6-环丙基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 将1-苄基-4-氯-6-环丙基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(100mg，0.3mmol)溶于反应瓶ReactivialTM中的烯丙胺(2mL)中。添加硫酸铜(II)(83mg，0.3mmol)并将瓶密封。将混合物在85℃加热过夜。添加更多份的硫酸铜(II)(83mg，0.3mmol)及烯丙胺(1ml)且再次将瓶密封。将混合物在85℃加热隔周。将混合物冷却至室温。将过量的烯丙胺在真空中移除并将残余物溶于EtOAc(50ml)中并用饱和NaHCO3水溶液(20ml)处理。将各层分离并将有机物再用更多饱和NaHCO3水溶液(10ml)、盐水(10ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩以产生粗产物(120mg)。用98:2 DCM:MeOH洗脱、用硅胶柱色谱产生灰白色固体的标题化合物(73mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 10.40(br s，1H)，7.34-7.25(m，5H)，6.17-6.15(m，1H)，5.96-5.87(m，1H)，5.17(d，1H)，5.02-5.00(m，1H)，4.89(s，2H)，4.05-4.00(m，2H)，1.85-1.80(m，1H)，0.97-0.93(m，2H)，0.84-0.76(m，2H)；LRMS(APCI)m/z 321[MH]+。
制备10 苄基-(2-氯-6-甲基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺 将2，4-二氯-6-甲基-3-硝基-吡啶(2g，9.7mmol)及三乙胺(1.35mL，9.7mmol)溶于40ml THF中且冷却(冰/水)至～5℃。逐滴添加苄胺(1.04g，9.7mmol)于10ml THF中的溶液，然后将混合物逐渐加温至室温过夜。将混合物在真空中蒸发，在EtOAc(50ml)与水(20ml)之间分溶。将有机层用饱和NaHCO3水溶液(10ml)洗涤，用MgSO4干燥并在真空中蒸发为橙色胶体。将此胶体预吸附在硅胶上，然后用DCM:戊烷3:1洗脱、通过柱色谱纯化。将适合的洗脱组分合并并在真空中蒸发以产生黄色固体的标题化合物(716mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.32(s，3H)，4.38(d，2H)，6.39(s，1H)，6.90(宽单峰，1H)，7.21(m，2H)，7.29(m，3H)。LC-MS(ELSD，ES+)m/z 278(MH+)。
制备11 N-2’，N-2’，N-4’-三苄基-6-甲基-3-硝基-2，4-二胺 将苄基-(2-氯-6-甲基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺(99mg，0.4mmol)与三乙胺(55 1，0.4mmol)溶于THF(2ml)且逐滴添加二苄胺(77mg，0.4mmol)。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜，然后在真空中蒸发。将残余物在EtOAc(5ml)与饱和NaHCO3水溶液(3ml)之间分溶。将有机层干燥(用MgSO4)并在真空中蒸发为黄色胶体，将胶体预吸附在硅胶上然后用1:1 DCM:戊烷洗脱、通过柱色谱纯化。将适合的洗脱组分合并并在真空中蒸发为鲜黄色胶体，静置固化以产生标题化合物(75mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.32(s，3H)，4.45(d，2H)，4.54(s，4H)，5.96(s，1H)，7.13-7.40(m，15H)，8.12(宽单峰，1H)。LRMS(ES+)m/z 439(MH+)。
制备12 N-2’，N-2’，N-4’-三苄基-6-甲基-2，3，4-三胺 将N-2’，N-2’，N-4’-三苄基-6-甲基-3-硝基-2，4-二胺(59mg，0.14mmol)溶于乙醇(5ml)中并在室温下、在30psi下经阮内镍(6mg)氢化1小时。再添加12mg阮内镍并将混合物在30psi及室温下再氢化1.5小时。将反应混合物用Arbocel短塞过滤，然后将滤液真空蒸发为不透明胶体的标题化合物(39mg)。
1H NMR(DMSO)δ 2.08(s，3H)，4.07(s，4H)，4.21(s，2H)，4.30(d，2H)，5.83(t，1H可交换)，6.05(s，1H)，7.14-7.34(m，15H)；LRMS(APCI+)m/z409(MH+)。
制备13 1-苄基-4-二苄基氨基-6-甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 将N-2’，N-2’，N-4’-三苄基-6-甲基-2，3，4-三胺(35mg，0.09mmol)及1，1-羰基二咪唑(139mg，0.86mmol)溶于乙腈(3ml)中并将混合物在回流下加热3小时。将反应混合物在真空中蒸发，使用DCM作为洗脱液、通过柱色谱纯化残余物。将适合的洗脱组分合并并在真空中蒸发以产生白色固体的标题化合物(30mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.32(宽单峰，3H)，4.68(s，4H)，4.85(s，2H)，6.18(s，1H)，7.18-7.26(m，15H)；LRMS(ES+)m/z 435(MH+)。
制备14 N4-苄基-2-氯-6-三氟甲基-吡啶-3，4-二胺 将苄基-(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-胺(345mg，1.0mmol)溶于AcOH(18ml)与水(2ml)的混合物中。添加铁粉(349mg，6.2mmol)并将混合物在室温下剧烈搅拌24小时。将反应混合物真空浓缩并将残余物用EtOAc(10ml)及水(10ml)稀释。将混合物用硅藻土过滤，用EtOAc(20ml)洗涤。将各层分离并将有机层用饱和NaHCO3水溶液(2×10ml)及盐水(10ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩以产生浅黄色固体的标题化合物(304g)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.43-7.34(m，5H)，6.87(s，1H)，4.46(brs，1H)，4.42(d，2H)，3.72(br s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 302[MH]+。
制备15 1-苄基-4-氯-6-三氟甲基-吡啶-2-酮 将N4-苄基-2-氯-6-三氟甲基-吡啶-3，4-二胺(300mg，1.0mmol)溶于MeCN(20ml)中。添加CDI(806mg，4.9mmol)并将混合物在80℃加热48小时。将混合物冷却至室温并在真空中移除溶剂。将残余物溶于EtOAc(50ml)中然后用1N HCl(aq)(20ml)、水(20ml)及盐水(20ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩以产生浅黄色固体的标题化合物(325g)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.41-7.33(m，5H)，7.14(s，1H)，5.11(s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 328[MH]+。
制备16 1-苄基-4-苄基氨基-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 将1-苄基-4-氯-6-三氟甲基-吡啶-2-酮(100mg，0.3mmol)溶于反应瓶中的BnNH2(2ml)中。添加CuSO4(152mg，0.6mmol)并将瓶密封。将反应混合物在80℃加热120小时。然后将反应混合物冷却至室温且溶于EtOAc(20ml)中。将混合物用饱和NaHCO3水溶液(2×5ml)及盐水(5ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩以产生粗产物(700mg)。用99:1DCM:MeOH洗脱、用二氧化硅柱色谱可产生黄色固体的标题化合物(50mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 10.66(br s，1H)，7.34-7.10(m，10H)，6.58(s，1H)，5.86-5.84(m，1H)，4.70(d，2H)，4.66(s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 399[MH]+。
以上标题化合物的替代制备描述如下； 将N2，N4-二苄基-6-三氟甲基-吡啶-2，3，4-三胺(9.02g，24.2mmol)溶于TBME(180ml)中，添加CDI(19.6g，121mmol)。将反应混合物在室温下搅拌72小时。将水(100ml)添加至反应混合物并将各层分离。将水溶液用EtOAc(200ml)萃取。将所合并的有机物用盐水(50ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩以产生粗产物(25g)。用30:70→60:40庚烷:EtOAc洗脱、用二氧化硅柱色谱产生白色蓬松固体的标题化合物(2.64g)。
1H NMR(CDCl3)δ 10.52(br s，1H)，7.44-7.12(m，10H)，6.60(s，1H)，5.76-5.72(m，1H)，4.71-4.70(m，4H)；LRMS(APCI及ES)m/z 399[MH]+。
制备17 N2，N4-二苄基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二胺 将3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇(5.0g，22.3mmol)溶于DCM(50ml)中，添加Et3N(6.22ml，44.6mmol)。将混合物冷却至0℃且逐滴添加Tf2O(7.32ml，44.6mmol)。将混合物加温至室温且搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩并将残余物溶于THF(50ml)中。添加BnNH2(7.3ml，66.9mmol)并将混合物在50℃搅拌24小时。将反应混合物冷却至室温并真空浓缩。将残余物用水(50ml)处理，并用EtOAc(150ml)萃取。将萃取物用盐水(50ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩以产生粗产物(27g)。
将第二批3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇(11.06g，49.4mmol)溶于DCM(100ml)中，添加Et3N(13.8ml，98.7mmol)。将混合物冷却至0℃且逐滴添加Tf2O(16.2ml，98.7mmol)。将混合物加温至室温且搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩并将残余物溶于THF(100ml)中。添加BnNH2(16.2ml，148mmol)并将混合物在50℃搅拌24小时。将反应混合物冷却至室温并真空浓缩。将残余物用水(100ml)处理，并用EtOAc(200ml)萃取。将萃取物用盐水(50ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩以产生粗产物(53g)。将两种粗产物合并。用95:5→90:10戊烷:EtOAc洗脱、用二氧化硅柱色谱产生黄色固体的标题化合物(15.93g)。
1H NMR(CDCl3)δ 9.68-9.64(m，1H)，9.36-9.32(m，1H)，7.43-7.29(m，10H)，6.38(s，1H)，4.81(d，2H)，4.55(d，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 403[MH]+。
制备18 N2，N4-二苄基-6-三氟甲基-吡啶-2，3，4-三胺 将N2，N4-二苄基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二胺(15.9g，35.6mmol)溶于THF(100ml)与MeOH(200ml)的混合物中。添加阮内镍(3.18g，20wt％)并将混合物在室温下、在80psi H2下搅拌1小时。将混合物用硅藻土过滤以移除催化剂并将滤液真空浓缩以产生油状物。在MeOH中用少量水研磨产生沉淀物，通过过滤收集，用冷MeOH洗涤并在真空中干燥以产生白色固体的标题化合物(9.02g)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.43-7.28(m，10H)，6.57(s，1H)，4.66(d，2H)，4.62-4.59(m，1H)，4.57-4.54(m，1H)，4.39(d，2H)，2.49(br s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 373[MH]+。
制备19 2，4-二羟基-6-三氟甲基-烟酸乙酯 添加吡啶(53ml/660mmol)以溶解DCM(6000ml)中的3-氨基-4，4，4-三氟丁烯酸乙酯(100g/546mmol)。然后将混合物置于氮气氛下且通过混悬于冰浴中而冷却至5℃。经约1小时逐滴添加乙基丙二酰氯以使得温度不超过20℃。将所得浅褐色溶液在5℃搅拌3小时，然后加温至室温过夜以产生暗绿色溶液。然后将混合物用1M HCl水溶液(200ml)、饱和NaHCO3水溶液(250ml)洗涤。将水性洗液继续用另外的DCM(2×250ml)再萃取。将有机层合并，用Na2SO4干燥，过滤且浓缩为暗绿色油状的粗3-(2-乙氧羰基-乙酰氨基)-4，4，4-三氟-丁-2-烯酸乙酯(175g)。将一部分粗物质(120g)溶于EtOH(300ml)中且放置于氮气氛下。然后分若干份添加叔丁醇钾(54g/480mmol)以使得温度不超过60℃，从而产生紫色溶液。然后将混合物在70℃加热3小时。然后添加EtOH(100ml)以降低粘度并在80℃再加热1小时。然后将混合物冷却然后真空浓缩为红色固体。将混合物溶于水(500ml)中，添加柠檬酸(180g)，产生沉淀。然后添加EtOAc(600ml)并将混合物倾注入分液漏斗内并将水层排出。将含有大量不溶解固体的有机层过滤以产生白色固体的标题化合物(46.5g)。浓缩有机物滤液并用MeOH研磨，产生更多的白色固体的标题化合物(15.3g)。
1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ 1.20-1.25(t，3H)，4.20-4.25(q，2H)，6.8(s，1H) 制备20 6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇 在回流温度下将2，4-二羟基-6-三氟甲基-烟酸乙酯(62g/247mmol)分若干份经30分钟添加至6M HCl(aq)(620ml)中。然后在剧烈搅拌下将所得混合物在100℃加热过夜以获得完整溶液。然后将该溶液冷却并真空浓缩为白色固体。将此物在水(250ml)中调成浆液并用浓氨调节至pH7以得到稠白色混悬液。将所得固体通过过滤收集，用新鲜水冲洗且干燥以产生白色固体的标题化合物(44.0g)。
1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ 6.05(s，1H)，6.6(s，1H) 制备21 乙基-[2，3-二氨基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-苄基氨基甲酸酯 将粗乙基-[2-氨基-3-硝基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-苄基氨基甲酸酯(65gm，170mmol)溶于乙醇(1000ml)中，添加10％ Pd-C(6gm)。在40℃及40psi下进行氢化反应1小时，使硝基完全还原。将催化剂通过过滤移除并将滤液在减压下蒸干以产生浅褐色半固体。用叔丁基甲醚(150ml)研磨，然后过滤并用上述相同溶剂(30ml)洗涤，产生白色固体的标题化合物(36gm，60％收率)。
1H NMR(DMSOd6)δ 7.30-7.21(m，5H)，6.32(宽峰s，1H)，6.15(宽峰s，2H)，5.39(宽峰s，2H)，5.00(宽峰d，1H)，4.25(宽峰d)，4.09(宽峰d，2H)，1.12(宽峰s，3H)；LRMS(ES+)m/z 355(MH+) 制备22 乙基-[2-氨基-3-硝基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-苄基氨基甲酸酯 将乙基-[2-氯-3-硝基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-苄基氨基甲酸酯(63gm，160mmol)溶于四氢呋喃(300ml)中且向其中添加0.880氨溶液(100ml)以产生两相。将此物转入压力容器内，密封并在搅拌下加热至80℃历时2小时。将四氢呋喃蒸发并将残余物在饱和盐水与乙醚之间分溶。将有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤且蒸发以产生稠黄色浆液(65gm)粗产物；LRMS(ES+)m/z 385(MH+)，(ES-)m/z 383(M-H)。
制备23 乙基-[2-氯-3-硝基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-苄基氨基甲酸酯 将苄基-(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-胺(57gm，170mmol)溶于四氢呋喃(750ml)中并在N2下搅拌。然后将所得混合物在冰/盐浴中冷却至-5℃。在约30分钟内逐滴添加叔丁醇钾(21.2gm，189mmol)于四氢呋喃(200ml)中的溶液，使温度维持在-5℃与0℃之间以产生深红色反应混合物。然后将所得混合物在此温度搅拌15分钟后，再逐滴添加氯甲酸乙酯(21.4gm，198mmol)于四氢呋喃(100ml)中的溶液，使温度保持在5℃以下。
移除冷却浴，允许反应混合物经1小时达到环境温度以产生浅褐色浑浊溶液。蒸发溶剂，然后将残余物在饱和盐水(50ml)与叔丁基甲基醚(300ml)之间分溶。将有机相依次用水(50ml)、饱和盐水(50ml)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且蒸发以产生褐色油。将此油溶于正戊烷(250ml)中并在环境温度贮存过夜。
将正戊烷溶液自已沉淀析出的暗褐色焦油中倾析出。蒸发溶剂，产生浅褐色粘性油状标题化合物(63gm，91％收率)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.28-7.10(m，5H)，4.80(s，2H)4.15(q，2H)1.18(t，3H)；LRMS(ES+)m/z 404/406(MH+)。
制备24 苄基-(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-胺 将4-苄基氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2-醇(61.7gm，197mmol)添加至苯基膦酰二氯(180ml)中，并在N2气氛下、在油浴中加热至100℃过夜。加热溶解起始物质以产生淡黄色溶液。然后使混合物骤冷于冰水(600gm冰+100ml水)上以产生浅黄色固体。将固体滤出并用水适当洗涤。将固体溶于乙酸乙酯(600ml)中并用碳酸氢钠水溶液(10％w/v)洗涤直至不再发泡且洗液水的pH为碱性。将有机层用硫酸钠干燥，过滤且蒸发以产生浊黄色固体。然后将固体溶于乙醚中。然后向其中添加正己烷直至溶液混浊为止。在几分钟内一稠絮状固体形成，然后滤出，用正己烷洗涤且干燥以产生标题化合物(60.59gm，92％收率)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.44-7.30(m，5H)，7.04(s，1H)，6.95(s宽峰，1H)4.53(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 332(MH+)。
制备25 2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基胺 将苄基-(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-胺(3.1g，9.3mmol)在5ml浓硫酸中搅拌0.5小时，再将溶液谨慎倾注入有碎冰的烧杯中。逐次添加固体K2CO3直至达成碱性pH值，并用2×50ml EtOAc萃取水溶液。将所合并的有机物用MgSO4干燥并真空浓缩以产生2.2g浅黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.06(s，1H)，5.87(bs，2H)；LRMS(ESCI)m/z 240[M-H]+ 制备26 (2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)氨基甲酸乙酯 将(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基胺(2.2g，9.1mmol)在2-MeTHF(20ml)中搅拌，添加三乙胺(1.52ml，10.9mmol)。将溶液在冰浴中冷却至～5℃，再逐滴添加氯甲酸乙酯(1.04ml，10.9mmol)，将溶液加温至环境温度并在氮气氛下搅拌16小时。添加20ml EtOAc及10mlH2O并将各相分离，用另外的2×10ml饱和盐水溶液洗涤。将有机萃取物用MgSO4干燥，真空浓缩且预吸附在二氧化硅柱上。用庚烷:EtOAc9:1洗脱，产生2.1g白色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.79(s，1H)，8.02(bs，1H)，4.35-4.30(t，2H)，1.38-1.35(qt，3H)；LRMS(ESCI)m/z 312[M-H]+ 制备27 (2-苄基氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)氨基甲酸乙酯 将2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)氨基甲酸乙酯(300mg，0.96mmol)溶于10ml四氢呋喃中，然后添加苄胺(0.103ml，0.96mmol)、三乙胺(0.194ml，1.91mmol)，并将反应混合物在60℃搅拌过夜。移除溶剂并将固体在乙酸乙酯/水(50ml/30ml)中分溶，将有机层用MgSO4干燥，浓缩并用乙酸乙酯中的0％至10％甲醇的梯度洗脱、通过二氧化硅柱色谱纯化以产生323mg黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 10.75(s，1H)，8.89(s，1H)，8.22(s，1H)，7.35(m，5H)，4.82(d，2H)，4.31(q，2H)，1.36(t，3H)；LRMS(APCI)m/z 385[MH]+ 制备28 (3-氨基-2-苄基氨基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)氨基甲酸乙酯将(2-苄基氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(95mg，0.25mmol)溶于10mL乙醇中，添加阮内镍(20mg，20％MW)、然后将反应混合物在室温下、在50PSI氢气下在压力罐中搅拌2小时。将混合物用Arbocel(木质纤维素)过滤并将滤液真空浓缩以产生88mg浅绿色胶体的标题化合物；LRMS(APCI)m/z 355[MH]+ 制备29 4-苄基氨基-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并(4，5-c)吡啶-2-酮 将(3-氨基-2-苄基氨基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(88mg，0.25mmol)溶于5ml乙酸中并将反应混合物在80℃搅拌过夜。移除溶剂并将此胶状物在水/乙酸乙酯中分溶。将有机层分离，用MgSO4干燥，将溶剂在真空中移除，并用乙酸乙酯中的1％至5％甲醇的梯度洗脱、通过二氧化硅柱色谱纯化以产生37mg无色胶体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 10.56(s，1H)，7.51-7.47(m，5H)，6.61-6.58(m，2H)，5.87(s，1H)，4.61(d，2H)；LRMS(APCI)m/z 309[MH]+ 制备30 4-苄基氨基-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并(4，5-c)吡啶-2-酮 将4-苄基氨基-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并(4，5-c)吡啶-2-酮(100mg，0.32mmol)溶于5mL二甲基甲酰胺中然后添加碳酸钾(89mg，0.65mmol)、5-氯甲基-2-甲基-吡啶(46mg，0.32mmol)，并将反应混合物在80℃搅拌过夜。质谱分析展示预期为一些二苯甲基化产物。将溶剂在真空中移除并将残余物在乙酸乙酯/水中分溶。将有机层分离，用MgSO4干燥，将溶剂在真空中移除，并将残余物用乙酸乙酯中的1％至10％甲醇的梯度洗脱、通过二氧化硅柱色谱纯化以产生30mg白色固体的标题化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ 8.46(s，1H)，7.57-7.55(dd，1H)，7.38-7.16(m，7H)，6.63(t，1H)，5.02(s，2H)，4.59(d，2H)，2.40(s，3H)；LRMS(APCI)m/z 414[MH]+ 制备31 (2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 将碳酸钾(88mg，0.64mmol)添加至(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(100mg，0.32mmol)于丙酮(10ml)中的被搅拌的溶液中。然后添加5-(氯甲基)-2-甲基吡啶(54.2mg，0.38mmol)、碘化钠(57.4mg，0.38mmol)并将混悬液在氮气氛下搅拌16小时。添加20ml EtOAc并将有机相用2×H2O洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩以产生红色油。用庚烷:EtOAc 3:2洗脱、通过二氧化硅柱色谱纯化该粗物质以产生54mg橙色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.35(d，1H)，7.54-7.51(dd，1H)，7.31(s，1H)，7.16-7.15(d，1H)，4.84(s，2H)，4.23-4.18(qt，2H)，2.55(s，3H)，1.26-1.22(t，3H)；LRMS(ESCI)m/z 419[MH]+ 制备32 (2-氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 将(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(54mg，0.13mmol)溶于THF(1ml)中且转入10ml反应瓶中。添加880氨水(1ml)，将容器密封并将混合物在环境温度剧烈搅拌16小时。将溶液真空浓缩以产生粗油，将其用100％ EtOAc洗脱、通过二氧化硅柱色谱法直接纯化以产生27mg为黄色残余物的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.39(s，1H)，7.61-7.59(d，1H)，7.15-7.13(d，1H)，6.76(s，1H)，6.25(bs，2H)，4.92(s，2H)，4.23-4.14(qt，2H)，2.54(s，3H)，1.22-1.19(t，3H)LRMS(APCI)m/z 400[MH]+ 制备33 4-苄基氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2-醇 将4-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2-醇(65.1gm，268mmol)溶于四氢呋喃(350ml)中，并在室温下、在N2气氛下搅拌。经30分钟逐滴添加四氢呋喃(50ml)中的苄胺(86.3gm，805mmol)以产生亮黄色溶液。将反应物在50℃的油浴中加热18小时(反应期间形成固体)。然后将所得混合物冷却至环境温度，用乙醚(200ml)稀释然后滤出所得固体(盐酸苄胺)。在减压下将滤液蒸发至低容积以产生黄色稠浆液。添加乙醚(300ml)且滤出黄色固体，在滤垫上干燥以产生苄胺盐(96.5gm)。将所需产物通过将固体在2N HCl水溶液与二氯甲烷之间分溶来释出，自乙酸乙酯/正戊烷中结晶，产生浅黄色固体的标题化合物(61.7gm，73.4％收率)。
1H NMR(DMSO d6 δ 9.04(宽单峰，1H)，7.38-7.25(m，5H)，6.54(s，1H)，4.67(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 314(MH+)。
制备34 4-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2-醇 将3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇(5.8gm，26mmol)在苯基膦酰二氯(30ml)中、在100℃加热19小时。然后冷却所得混合物且倾注在冰(60gm)上，然后用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。将所合并的有机萃取物用碳酸氢钠水溶液(10％w/v)洗涤直至洗液为碱性(pH～8)。然后将深黄色有机层用饱和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且蒸发以产生黄色胶体。用二氯甲烷研磨该胶体，产生黄色固体，将其滤出且干燥(4.65gm)。将固体溶于水(25ml)中并用2N盐酸(7.5ml)酸化以产生白色稠沉淀物，将其滤出并用水洗涤。将沉淀物溶于乙酸乙酯中，用硫酸钠干燥，过滤且蒸发以产生白色固体的标题化合物(3.75gm)。
1H NMR(DMSOd6)δ 7.78(s，1H)。13C NMR(DMSOd6)δ 157.2(s)145.2(q)138.1(s)136.98(s)120.6(q)113.86(s)；LRMS(ES-)m/z 241/243[MH]- 制备35 3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇 在搅拌下，将6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇(56gm，310mmol)以每份3-5mg添加至浓硫酸(140ml)中，以产生浅褐色溶液。添加期间温度升高至～50℃。以使得反应温度维持在45℃与50℃之间的流速逐滴添加硝酸(21.1ml，328mmol，70％ HNO3，d＝1.4gm/ml)，历时约90分钟。一旦硝酸全部添加完，则历经3小时将反应物冷却至环境温度。然后在搅拌下，将反应混合物倾注入冰/水(～1.3kg)内，几分钟后，形成浅黄色沉淀物，将其滤出，溶于乙酸乙酯中并用硫酸钠干燥，过滤且蒸发。将第2次收获的物质通过用乙酸乙酯萃取水性滤液而获得。将各获得物合并且通过结晶作用自乙酸乙酯/正庚烷中纯化，产生白色＂蓬松＂固体的标题化合物(49.5gm，71％收率)。
1H NMR(DMSOd6)δ 6.82(s，1H)。13C NMR(DMSOd6)159.82(s)157.58(s)143.10(宽单峰)127.26(s)120.85(q)102.83(s)。
制备36 2，6-二溴吡啶1-氧化物 将2，6-二溴吡啶(79g，334mmol)溶于800ml无水二氯甲烷中并在氮气氛下冷却至5℃，然后在一份中添加过氧化氢脲(104g，1.1mol)。当混合物再冷却至3℃时，历经45分钟用滴液漏斗添加三氟乙酸酐(140ml，1mol)于100ml DCM中的溶液，同时使温度保持在5-7℃之间。将混合物加温至室温且搅拌20小时。将混合物在冰浴中冷却至10℃且历经60分钟逐滴添加10％ Na2SO3水溶液(～50g/500ml)直至用淀粉碘化物试纸测试为阴性。将所得混合物过滤以移除大量蓬松固体并将各层分离。将水层用二氯甲烷(2×200ml)萃取，并将所合并的萃取物用MgSO4干燥并在减压下浓缩以产生浅褐色固体。使用600ml沸腾丙酮使粗产物重结晶，产生48.47g标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.65(d，2H)，6.95(m，1H)。
制备37 2，6-二溴-4-硝基吡啶1-氧化物 在室温下，将2，6-二溴吡啶1-氧化物(10g，39.5mmol)添加至65ml浓硫酸中，无需冷却。将浓硫酸(15ml)与硝酸(13.3ml)混合且放置于压力平衡滴液漏斗中。将反应混合物加热至79℃，然后历经25分钟逐次添加硝化混合物。当添加完成时，将混合物在83-85℃搅拌3.5小时。将混合物冷却至室温且缓慢倾注在一250g碎冰上。形成非常浅的黄色固体，将其滤出并用水(100ml)洗涤，在真空烘箱中、在50℃干燥过夜以产生10.9g标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.45(s，2H)。
制备38 2，6-二溴吡啶-4-基胺 将2，6-二溴-4-硝基吡啶1-氧化物(14.5g，48.6mmol)溶解于130ml乙酸中，逐次添加铁粉(11g，196.9mmol)，并将混合物在室温下搅拌45分钟。添加500ml水并将产物用EtOAc(500ml)萃取。将有机层依次用300ml水、300ml饱和K2CO3溶液、300ml盐水洗涤。将有机层用硫酸镁干燥并将溶剂在真空中移除以产生11.1g白色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 6.65(s，2H)，4.4-4.1(s宽峰，2H)；LRMS(ES+)m/z251，253[MH]+ 制备39 2，6-二溴吡啶-4-基-N-硝基胺 在室温下将2，6-二溴吡啶-4-基胺(11g，43.6mmol)溶于100ml硫酸中然后在-5℃冷却。逐滴添加6ml硝酸，使温度保持在-10℃至-5℃之间，并将混合物在-5℃搅拌30分钟。然后将混合物倾注在400ml碎冰上。将所形成的固体滤出，然后溶于EtOAc中。将残留水移除并将有机层用300ml盐水洗涤，用硫酸镁干燥并将溶剂在真空中移除以产生12.5g黄色固体的标题产物。
1H NMR(CDCl3)δ 6.85(s 1H)，5.7-5.4(s宽峰，2H)。
制备40 2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基胺 将浓硫酸(250ml)在油浴中加热直至酸温度达到47℃。历经35分钟逐次添加2，6-二溴吡啶-4-基-N-硝基胺(34.0g，114.5mmol)。混合物的温度在整个添加期间逐渐上升直至最后其为56℃。将混合物在53-55℃搅拌1小时。一旦反应完成，则在搅拌下将反应混合物在冰浴中冷却且倾注在～2L碎冰上。产物沉淀并被滤出。与获自相同规模反应的其它批料00110916-140-001合并。将粗湿氨基硝基吡啶溶于700ml EtOAc中且分离水层。将有机层用水(2×150ml)、1×150mlNaHCO3水溶液、盐水(2×150ml)洗涤，干燥(用MgSO4)，在减压下浓缩以产生28g标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.3-7.2(s宽峰，1H)，7.55(s，2H)。
制备41 N-2，N-4-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基胺(6.5g，21.9mmol)混悬于浓HCl(100ml)中且冷却至0℃，然后添加亚硝酸钠(7.5g，109mmol)。将混合物搅拌30分钟，然后加温至室温。添加100ml冷水并将混合物用100ml乙酸乙酯萃取。将有机层用100ml水洗涤，用硫酸镁干燥，并在真空中移除溶剂，以产生5.8g橙色油状的2，6-二溴-3-硝基-4-氯吡啶。将此油溶于80ml THF中且冷却至0℃。将苄胺(94.9ml，44.9mmol)溶于20ml THF中且逐滴添加至反应物中，然后添加碳酸钾(6.6g，48.2mmol)。将混合物加温至室温，然后在50℃加热过夜。一旦反应完成，则将混合物在水(150ml)与乙酸乙酯(100ml)中分溶。将有机层用200ml水及200ml盐水洗涤，用硫酸镁干燥并在真空中移除溶剂。添加100ml乙醇并将混合物超声处理五分钟且置于通风橱中过夜。将沉淀物滤出并用30ml乙醇洗涤以产生4.56g黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.6-9.4(m宽峰，2H)，7.4-7.2(m，10H)，6.2(s，1H)，4.8(d，2H)，4.45(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 413，415[MH]+ 制备42 N-2，N-4-二苄基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-2，4-二胺 将N-2，N-4-二苄基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-2，4-二胺(2g，5mmol)溶于THF(60ml)中，添加乙烯基三丁基锡(3.4g，10.8mmol)、乙酸钯(350mg，10重量％)及三苯基膦(380mg)。将混合物用氩气脱气，然后在80度加热过夜。在真空中移除溶剂，使用戊烷中的10％乙酸乙酯作为洗脱液、通过硅胶柱色谱法纯化粗残余物以产生1.9g橙色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.65(s峰宽，1H)，9.4(s峰宽，1H)，7.45-7.2(m，10H)，6.5-6.4(m，1H)，6.35(m，1H)，5.95(s，1H)，5.5(m，1H)，4.85(d，2H)，4.55(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 361[MH]+ 制备43 4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲醛 将N-2，N-4-二苄基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-2，4-二胺(800mg，2mmol)溶于10ml四氢呋喃及30ml水中，然后依次添加四氧化锇(60mg，0.2mmol)、偏高碘酸钠(1.2g，5.6mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物在水(30ml)与乙酸乙酯(30ml)中分溶，将有机层用50ml盐水洗涤，用硫酸镁干燥，使用戊烷中的10％乙酸乙酯作为洗脱液、通过硅胶柱色谱法纯化粗残余物以产生450mg橙色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.78(s，1H)，9.55(宽单峰，1H)，9..3(s宽峰，1H)，7.4-7.2(m，10H)，7.62(s，1H)，5.5(m，1H)，4.9(d，2H)，4.6(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 363[MH]+ 制备44 N-2，N-4-二苄基-6-吗啉-4-基-甲基-3-；硝基-吡啶-2，4-二胺 在室温下将4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲醛(150mg，0.41mmol)溶于15ml二氯甲烷中，然后添加2-甲氧基-乙胺(43mg，0.49mmol)、乙酸(25mg，0.41mmol)。将混合物搅拌5分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(130mg，0.62mmol)并将混合物在室温下搅拌1小时。将20ml水添加入混合物中，然后将有机层分离，用20ml水洗涤，然后用MgSO4干燥。在真空中移除溶剂以产生180mg橙色胶体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.55(宽单峰，1H)，9.4(宽单峰，1H)，7.4-7.2(m，10H)，6.19(s，1H)，4.8(d，2H)，4.55(d，2H)，3.6(m，4H)，3.45(m，2H)，3.3(s，2H)，2.35(m，4H)；LRMS(ES+)m/z 434[MH]+ 制备45 N-2，N-4-二苄基-6-吗啉-4-基-甲基-吡啶-2，3，4-三胺 将N-2，N-4-二苄基-6-吗啉-4-基-甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(190mg，0.43mmol)溶于30ml甲醇中，添加阮内镍(40mg，20重量％)，然后将混合物在室温下、在80psi氢气下搅拌1小时。完成后，将混合物用Arbocel(木质纤维素)过滤并在真空中移除溶剂以产生180mg绿色油状标题化合物。
1H NMR(CD3OD)δ 7.4-7.2(m，10H)，6.1(s，1H)，4.6(d，2H)，4.4(d，2H)，3.3(m，6H)，2.4-2.2(宽单峰，2H)，2.15(m，4H)；LRMS(ES+)m/z 417[MH]+ 制备46 N-2，N-4-二苄基-6-乙基-吡啶-2，3，4-三胺 将N-2，N-4-二苄基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-2，4-二胺(300mg，0.75mmol)溶于20ml四氢呋喃中，添加阮内镍(40mg，13重量％)，然后将混合物在室温下、在60psi氢气下搅拌1.5小时。完成后，将混合物用Arbocel(木质纤维素)过滤并在真空中移除溶剂以产生230mg标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.40-7.20(m，5H)，6.0(s，1H)，4.90-4.80(宽单峰，2H)，4.65(d，2H)，4.35(d，2H)，2.55(q，2H)，1.20(t，3H)。
制备47 1-(4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙酮 将N-2，N-4-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(800mg，1.94mmol)溶于40ml四氢呋喃中，然后依次添加(1-乙氧基乙烯基)-三-正丁锡(909mg，2.52mmol)、乙酸钯(90mg，W/W)及三苯基膦(100mg，w/w)，并将混合物在80℃搅拌1小时。一旦反应完成，添加30ml乙酸乙酯及40ml的3N HCl溶液。将混合物在60℃剧烈搅拌30分钟。将有机层分离，用50ml盐水洗涤并将溶剂在真空中移除。使用戊烷中的10％乙酸乙酯、通过硅胶柱色谱法纯化粗残余物以产生680mg黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.55(宽单峰，1H)，9.35(宽单峰，1H)，7.40-7.0(m，10H)，6.75(s，1H)，5.25(s，1H)，4.85(d，2H)，4.55(d，2H)，2.50(s，3H)；LRMS(ES+)m/z 377[MH]+ 制备48 N-2，N-4-二苄基-6-二氟甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲醛(250mg，0.69mmol)溶于15ml二氯甲烷中且冷却至0℃，然后添加双-(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫(611mg，2.76mmol)并将反应混合物在室温下搅拌3小时。一旦反应完成，则将30ml水添加入混合物中，然后将有机层分离，用30ml碳酸钾饱和溶液及盐水洗涤，然后用MgSO4干燥。在真空中移除溶剂，使用戊烷中的10％乙酸乙酯、通过硅胶柱色谱法纯化粗残余物以产生220mg黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.60(宽单峰，1H)，9.3(宽单峰，1H)，7.4-7.2(m，10H)，6.30(s，1H)，6.35-6.05(t，1H)，6.75(d，2H)，6.50(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 385[MH]+ 制备49 4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲腈 将N-2，N-4-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(500mg，1.21mmol)混悬于10ml甲苯中，然后依次添加氰化三丁基锡(765mg，2.42mmol)、乙酸钯(60mg，W/W)及三苯基膦(70mg，w/w)，并将混合物在130℃微波处理25分钟。一旦反应完成，则将溶剂在真空中移除，使用戊烷中的10％乙酸乙酯、通过硅胶柱色谱法纯化粗残余物以产生408mg黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.65(宽单峰，1H)，9.30(宽单峰，1H)，7.40-7.20(m，10H)，6.40(s，1H)，4.75(d，2H)，4.50(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 360[MH]+ 制备50 (4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-甲醇 将N-2，N-4-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(315mg，0.87mmol)混悬于20ml四氢呋喃中且冷却至0℃，然后添加氢化硼钠(40mg，1.1mmol)并将混合物在0℃搅拌15分钟。将混合物在水(10ml)与乙酸乙酯(10ml)中分溶。将有机层分离，用15ml盐水洗涤，用硫酸镁干燥并将溶剂在真空中移除以产生315mg黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.50(宽单峰，1H)，7.40-7.20(m，10H)，5.85(s，1H)，4.59(d，2H)，4.45(d，2H)，4.35(s，2H)；LRMS(ES+)m/z[MH]+ 制备51 N-2，N-4-二苄基-6-溴甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将(4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-甲醇(300mg，0.82mmol)溶于20ml二氯甲烷中且冷却至0℃，然后依次添加三苯基膦(237mg，0.91mmol)、N-溴代琥珀酰亚胺(161mg，0.82mmol)，并将混合物在0℃搅拌30分钟，然后加温至室温且搅拌2小时。在真空中移除溶剂，使用戊烷中的20％乙酸乙酯、通过硅胶柱色谱法纯化粗残余物以产生220mg黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.59(宽单峰，1H)，9.40(宽单峰，1H)，7.40-7.20(m，10H)，6.15(s，1H)，4.80(d，2H)，4.55(d，2H)，4.15(s，2H)；LRMS(ES+)m/z 427，429[MH]+ 制备52 N-2，N-4-二苄基-6-甲氧基甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将N-2，N-4-二苄基-6-溴甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(100mg，0.23mmol)溶于10ml甲醇中，然后添加甲醇钠(25mg，0.46mmol)，然后在60℃搅拌过夜。将溶剂在真空中移除并将粗产物在10ml二氯甲烷与10ml水中分溶。将有机层分离，用硫酸镁干燥并将溶剂在真空中移除以产生80mg黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.59(宽单峰，1H)，9.40(宽单峰，1H)，7.40-7.20(m，10H)，6.20(s，1H)，4.80(d，2H)，4.55(d，2H)，4.25(s，2H)，3.35(s，3H)；LRMS(ES+)m/z 379[MH]+ 制备53 N-2，N-4-二苄基-3-硝基-6-吡嗪-2-基-吡啶-2，4-二胺 将N-2，N-4-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(100mg/0.242mmol)、2-三-正丁基锡烷基吡嗪(116mg/0.315mmol)、乙酸钯(15mg)及三苯基膦(20mg)溶于甲苯(2ml)中并在BiotageInitiator中、在130℃经微波照射25分钟。在2个以上场合中按照相同规模重复反应。将三种反应物合并，用EtOAc(10ml)稀释，用水(5ml)洗涤并真空浓缩。用10:1戊烷:EtOAc洗脱、通过柱色谱法纯化产生黄色固体的标题化合物(105mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 4.60-4.65(d，2H)，4.90-4.95(d，2H)，7.20-7.40(多重峰，10H)，8.55-8.60(多重峰，2H)，9.40-9.50(多重峰，2H)，9.60(多重峰，1H)；LRMS(ESCI)m/z 413[MH]+。
制备54 N-2，N-4-二苄基-6-吡嗪-2-基-吡啶-2，3，4-三胺 将N-2，N-4-二苄基-3-硝基-6-吡嗪-2-基-吡啶-2，4-二胺(105mg/0.255mmol)溶于MeOH(20ml)/THF(20ml)中。添加阮内镍(30mg)并将反应物在室温下、在80psi氢气下放置5小时。用硅藻土过滤并真空浓缩以产生浅绿色油状标题化合物(95mg)；LRMS(ESCI)m/z 383[MH]+，381[MH]-。
制备55 6-烯丙基-N2，N4-二苄基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将N*2*，N*4*-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(1g，2.4mmol)在无水四氢呋喃(20ml)中搅拌并将溶液用氮气脱气，再添加乙酸钯(109mg，0.48mmol)及烯丙基三丁基锡(1.1ml，3.6mmol)。将反应混合物脱气10分钟，将混悬液在80℃加热16小时。将混悬液冷却至环境温度，真空浓缩并用戊烷:EtOAc 9:1洗脱、通过二氧化硅柱色谱法直接纯化，以产生黄色固体的标题化合物(696mg，77％)。
1H NMR(CDCl3)δ 3.23-3.25(d，2H)，4.47-4.49(d，2H)，4.81-4.82(d，2H)，5.07-5.14(m，2H)，5.89-5.99(m，1H)，7.29-7.40(m，11H)；LRMS(ES)m/z 375[MH]+ 制备56 (4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙醛 将6-烯丙基-N2，N4-二苄基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(1.0g，2.7mmol)混悬于15ml四氢呋喃与30ml水的混合物中。添加锇酸钾(148mg，0.4mmol)及高碘酸钠(1.17g，5.4mmol)后，将溶液在室温下剧烈搅拌30分钟。将乙酸乙酯(20ml)添加至反应混合物中并将各相分溶，将有机萃取物用硫酸镁干燥，真空浓缩并用100％ EtOAc洗脱、通过二氧化硅柱色谱法纯化，以产生3-(4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-丙烷-1，2-二醇(992mg，91％)。将中间体二醇在20ml丙酮中、在高碘酸钠(1.17g，5.5mmol)存在下搅拌。2h后，将溶液在EtOAc与水之间分溶，将有机萃取物干燥(用MgSO4)且浓缩以产生橙色油状标题化合物(962mg，96％)。
1H NMR(CDCl3)δ 3.49(d，2H)，4.49-4.50(d，2H)，4.65-4.66(d，2H)，7.52-7.90(m，11H)，10.03(s，1H)； LCMS(APCI+)RT@3.74min，m/z 409[MH]+ 制备57 2-(4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙醇 将(4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙醛(250mg，0.66mmol)置于15ml二氯甲烷中搅拌。添加氢化硼钠(38mg，0.99mmol)并将溶液在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物在DCM与水之间分溶，将有机物用硫酸镁干燥且浓缩以产生粗固体，用戊烷:EtOAc 4:1-1:1洗脱、通过二氧化硅柱色谱纯化以产生黄色固体的标题化合物(134mg，53％)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.68-2.70(t，2H)，3.83-3.86(t，2H)，4.49-4.51(d，2H)，4.72-4.74(d，2H)，5.86(s，1H)，7.29-7.38(m，10H)，9.50-9.54(bd，2H)；LRMS(ES)m/z 379[MH]+ 制备58 N2，N4-二苄基-6-(2-甲氧基-乙基)-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将2-(4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙醇(134mg，35mmol)混悬于二氯甲烷(15ml)与三乙胺(59μl，0.43mmol)的混合物中并将溶液在冰浴中冷却至5℃。添加甲磺酰氯(33μ1，0.43mmol)并将反应混合物在环境温度下搅拌1小时。再添加10mlDCM，将有机物用2×K2CO3(10％水溶液)洗涤，干燥且浓缩以产生粗油。将中间体甲磺酸盐混悬于丙酮(20ml)中，添加甲醇钠(96mg，1.7mmol)，将混合物在回流下加热1小时。在真空中移除残留溶剂，添加DCM并将溶液用2×H2O洗涤。将所合并的有机物用MgSO4干燥，浓缩并用8:1-4:1 Pent:EtOAc洗脱、通过二氧化硅柱色谱法纯化以产生黄色油状标题化合物(68mg，47％)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.70-2.73(t，2H)，3.26(s，3H)，3.64-3.67(t，2H)，4.49-4.50(d，2H)，4.81-4.82(d，2H)，5.91(s，1H)，7.29-7.39(m，10H)，9.40-9.48(bd，2H)；LRMS(ES)m/z 393[MH]+ 制备59 N*2*，N*4*-二苄基-6-(2-甲氧基-乙基)-吡啶-2，3，3-三胺在阮内镍(20wt％，13mg)存在下，将N*2*，N*4*-二苄基-6-(2-甲氧基-乙基)-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(65mg，0.17mmol)置于THF(10ml)中搅拌。将混合物在室温下、在60psi H2下搅拌2小时，然后用Arbocel垫过滤，用2×THF洗涤。将滤液真空浓缩以产生褐色油状标题化合物(47mg，78％)，其可直接用于下一步骤而无需进一步纯化；LRMS(ES)m/z363[MH]+ 制备60 1-苄基-4-苄基氨基-6-(2-甲氧基-乙基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 将N*2*，N*4*-二苄基-6-(2-甲氧基-乙基)-吡啶-2，3，3-三胺(47mg，0.13mmol)置于乙腈(5ml)中搅拌。添加N，N-羰基二咪唑(105mg，0.65mmol)并将混合物在回流下加热16小时。将溶液真空浓缩并用100％ DCM至964洗脱、通过二氧化硅柱色谱法直接纯化以产生作为与异构体1-脱氮嘌呤的3:2混合物存在的浅褐色固体的标题化合物(32mg，64％)；LRMS(ES)m/z 389[MH]+ 制备61 N2，N4-二苄基-6-[2-(2-甲氧基-乙氨基)-乙基]-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将N*2*，N*4*-二苄基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-2，4-二胺(50mg，0.14mmol)混悬在2-甲氧基-乙胺(1ml)中并将混合物回流1小时。在真空中移除过量试剂，将残余物溶于DCM(10ml)中，用2×H2O洗涤，干燥且浓缩。用DCM:MeOH 92:8洗脱、通过二氧化硅柱色谱法纯化粗物质以产生黄色油状标题化合物(58mg，96％)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.75-2.80(m，4H)，2.96-3.00(t，2H)，3.29(s，3H)，3.48-3.51(t，2H)，4.48-4.49(d，2H)，4.76-4.78(d，2H)，5.87(s，1H)，7.27-7.40(m，10H)，9.41-9.51(dt，2H)；LRMS(ES)m/z 436[MH]+ 制备62 [2-(4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙基]-(2-甲氧基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯 将N*2*，N*4*-二苄基-6-[2-(2-甲氧基-乙氨基)-乙基]-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(150mg，0.34mmol)混悬于DCM(10ml)中并将溶液冷却至0℃，再将boc酸酐(95μl，0.41mmol)作为于5ml DCM中的溶液逐滴添加。将混合物加温至室温，1小时后，用10ml H2O骤冷。将有机萃取物干燥并真空浓缩以产生黄色油状标题化合物(170mg，92％)。
1H NMR(CDCl3)δ 1.41(s，9H)，2.68(t，2H)，3.30(s，3H)，3.42(bs，2H)，3.50(m，4H)，4.47-4.48(d，2H)，4.80-4.81(d，2H)，5.82(s，1H)，7.24-7.39(m，10H)；LRMS(ES)m/z 536[MH]+ 制备63 N2，N4-二苄基-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，4-二胺 在-78℃(干冰/丙酮浴)，将丁基锂(12.8ml，20.5mmol)逐滴添加至噁唑(1.13ml，17.1mmol)于无水THF(20ml)中的被搅拌的溶液中，保持缓慢的添加速率以使得反应温度不超过-60℃。在此温度将溶液搅拌10分钟，然后逐滴添加氯化锌(5.00g，36.7mmol)于THF(30ml)中的溶液。将溶液在-78℃搅拌15分钟，然后移除冷却浴，并将反应混合物加温至室温。
用注射器将反应混合物的等分样品(19ml)添加至预密封且被氮气吹洗的微波瓶(Biotage，10-20ml)中，该瓶含有N*2*，N*4*-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(1.11g，2.68mmol)及双(三苯基膦)二氯化钯(373mg，0.53mmol)。将该瓶在微波照射(Biotage Initiator 8)下、在130℃加热15分钟。将反应混合物真空浓缩，然后在2-甲基THF(80ml)与饱和氯化铵溶液(80ml)之间分溶。将混合物过滤，然后转入分液漏斗中。将各层分离，然后用更多2-甲基THF(50ml)萃取水溶液。将所合并的有机物干燥(用MgSO4)且蒸发。将所得褐色固体用EtOAc研磨且通过过滤收集固体，然后用EtOAc洗涤以产生褐色固体的产物(1.03g，96％)。
1H NMR(CDCl3)δ 4.59(d，J＝5.47Hz，2H)4.91(d，J＝5.47Hz，2H)6.93(s，1H)7.21-7.47(m，11H)7.78(s，1H)9.31-9.44(m，1H)9.54-9.63(m，1H)；LRMS(ES+)m/z 402[MH]+ 制备64 N2，N4-二苄基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，3，4-三胺 将N*2*，N*4*-二苄基-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，4-二胺(1.02g，2.54mmol)溶于THF(60ml)中，然后添加MeOH(60ml)。将溶液在氢气氛(80psi)下经阮内镍(210mg，0.25mmol)氢化1小时。将反应混合物用硅藻土垫过滤，然后蒸发以产生褐色胶体的标题化合物(944mg，100％)。出于稳定性考虑，其无需进一步纯化便可使用。
LCMS Rt＝2.41m/z 372[MH]+ 制备65 N2，N4-二苄基-6-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将N-甲基咪唑(0.728ml，9.18mmol)溶于无水THF(25ml)中，然后将溶液冷却至-15℃(冰/盐浴)。将己烷(6.31ml，10.1mmol)中的正丁基锂逐滴添加至溶液中(颜色由无色变为黄色)。将溶液在-15℃搅拌1小时，然后逐滴添加无水氯化锌(5.00g，36.7mmol)于无水THF(35ml)中的溶液。将溶液在-15℃搅拌1小时，然后缓慢加温至室温，然后搅拌1个多小时。
将该溶液的等分样品(16ml)添加至预密封且被氮气吹洗的微波瓶(Biotage，2.0-5.0ml)中，该瓶含有N*2*，N*4*-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(400mg，0.968mmol)及双(三苯基膦)二氯化钯(136mg，0.193mmol)。将瓶在130℃、在微波照射(Biotage Initiator8)下加热15分钟。将反应混合物真空浓缩。将残余物在EtOAc(15ml)与2M氨溶液(15ml)之间分溶。使用分液漏斗将大部分水相移除(各层之间有少量乳液)。将有机层依次用更多的2M氨溶液(15ml)、盐水(15ml)洗涤，然后干燥(用MgSO4)且蒸发。将粗产物在Isco Companion二氧化硅柱(12g，Redisep)上进行柱色谱。用EtOAc:庚烷洗脱，经8个柱容积使梯度由20:80线性地增加至60:40，然后使4个柱容积在60:40等度。将所需洗脱组分合并且蒸发以产生黄色固体的标题化合物(240mg，60％)。
1H NMR(CD3OD)δ3.88(s，3H)4.67(d，J＝5.48Hz，2H)4.83(d，J＝5.48Hz，2H)6.92(d，J＝1.17Hz，1H)7.14(d，J＝1.17Hz，1H)7.17(s，1H)7.26-7.42(m，10H)9.43-9.66(m，2H)；LRMS(ES+)m/z 415[MH]+ 制备66 N2，N4-二苄基-6-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-2，3，4-三胺 将N*2*，N*4*-二苄基-6-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(0.235g，0.567mmol)溶于THF(10ml)中，然后添加MeOH(10ml)。将溶液在氢气氛(80psi)下经阮内镍(0.050g，0.58mmol)氢化1小时。将反应混合物用硅藻土垫过滤，然后蒸发以产生浅绿色固体的标题化合物(218mg，100％)。出于稳定性考虑，其无需进一步纯化便可使用。
LCMS Rt＝2.22m/z 385[MH]+ 制备67 (2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 在0℃，将氯甲酸乙酯(5.96g)于无水2-甲基THF(50ml)中的溶液逐滴添加至2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基胺(15.00g)与三乙胺(10.1g)于无水2-甲基THF(100ml)中的溶液中，保持添加速率以使得反应温度上升不超过5℃。将反应混合物加温至室温，然后在氮气氛下搅拌1小时。再添加一份氯甲酸乙酯(0.54g)并将混合物再搅拌1小时。添加水(50ml)并将各层分离。将水层用EtOAc(50ml)萃取并将所合并的有机物干燥(用MgSO4)且蒸发为褐色固体。将此固体在二氧化硅(～19g)上预吸附，然后用EtOAc:庚烷洗脱、在Isco Companion二氧化硅柱(330g，Redisep)上进行柱色谱。使1个柱容积(CV)的梯度在10:90等度，然后经6个CV由10:90线性地增加至30:70。由此产生浅黄色发泡固体的标题化合物(12.6g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.36(t，J＝7.10Hz，3H)，4.26(q，＝7.10Hz，2 H)，7.95(br，s，1 H)，8.59(s，1 H)，LCMS Rt＝3.22m/z368，370，372[MH]+ 制备68 (2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 将碳酸钾(7.95g)添加至(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)氨基甲酸乙酯(10.62g)于丙酮(100ml)中的被搅拌的溶液中。然后依次添加5-(氯甲基)-2-甲基吡啶(4.89g)、碘化钠(5.18g)。将混合物在氮气氛下搅拌18小时。将反应混合物过滤，真空浓缩然后在乙酸乙酯(100ml)与水(100ml)之间分溶。将有机物干燥(用MgSO4)且蒸发为暗紫色胶，用EtOAc:庚烷洗脱、在Isco Companion二氧化硅柱(330g，Redisep)上进行柱色谱，经6个柱容积梯度由40:60线性地增加至80:20。由此形成绿色胶状标题化合物(8.5g)，将其静置固化为浅绿色固体。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.24(t，J＝7.10Hz，3 H)2.59(s，3 H)4.19(q，J＝7.10Hz，2 H)4.79(s，2 H)7.17(s，1 H)7.19(d，J＝8.20Hz，1 H)7.57(dd，J＝8.20，2.34Hz，1 H)8.38(d，J＝2.34Hz，1 H)，LCMSRt＝2.44m/z 473，475，477[MH]+ 制备69 (2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 将(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(6.00g)溶于2-甲基四氢呋喃(60ml)中。将溶液等量分入3个可密封容器(Biotage，10-20ml)中。将氨水溶液(0.88gcm-3，20ml)添加至各瓶(共60ml)中。将瓶密封，然后将二相混合物在室温下剧烈搅拌过夜。将三种反应混合物合并且转入分液漏斗中。添加乙酸乙酯(120ml)及水(120ml)。将各相分离，然后将有机物用盐水(100ml)洗涤。将有机物干燥(用MgSO4)，然后蒸发为褐色胶。将此胶再溶于乙醚中，然后蒸发以形成黄色发泡固体的标题化合物(5.4g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.16-1.27(m，3 H)2.58(s，3 H)4.10-4.21(m，2 H)4.87(s，2 H)6.34(s，2 H)6.61(s，1 H)7.18(d，J＝8.19Hz，1 H)7.66(s，1 H)8.41(d，J＝2.34Hz，1 H)，LCMSRt＝1.94m/z 412[MH]+ 制备70 [2-氨基-6-(4-甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 在-78℃(干冰/丙酮浴)，将丁基锂(1.6M于己烷中，366μl)逐滴添加至在反应瓶中的4-甲基噁唑(41mg)于THF(0.5ml)中的被搅拌的溶液中。在此温度将溶液搅拌10分钟，然后逐滴添加氯化锌(199mg)于THF(1ml)中的溶液。将溶液在-78℃搅拌15分钟，然后移除冷却浴并将反应混合物加温至室温。用注射器将此锌噁唑溶液添加至预密封且被氮气吹洗的微波瓶(Biotage，0.5-2.0ml)中，该瓶含有(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)及双(三苯基膦)二氯化钯(34mg)。将该瓶在微波照射(BiotageInitiator 8)下、在60℃加热15分钟。然后将反应混合物在乙酸乙酯(10ml)与饱和氯化铵水溶液(10ml)之间分溶。将各层分离并用乙酸乙酯(10ml)萃取水溶液。将所合并的有机物用盐水(10ml)洗涤，然后干燥(用MgSO4)且蒸发。将粗产物用4个柱容积(CV)的乙酸乙酯洗脱、在Isco Companion二氧化硅柱(12g，Redisep)上进行柱色谱，然后经10个CV使乙酸乙酯中的甲醇梯度由0线性地增加至5％。由此形成黄色胶状标题化合物(69mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.11-1.25(m，3 H)2.28(s，3 H)2.56(s，3 H)4.13-4.23(m，2 H)4.96(s，2 H)6.37(s，2 H)7.16(d，J＝7.80Hz，1 H)7.26(s，1 H)7.53(s，1 H)7.65-7.78(m，1 H)8.43(s，1 H)，LCMS Rt＝1.86m/z 413[MH]+ 制备71 5-乙基-噁唑 将乙基-5-乙基噁唑-4-甲酸酯(3.5g)溶于乙醇(45ml)中，添加氢氧化钠(2.07g)于水(18ml)中的溶液。将反应物在室温下搅拌16小时。将反应混合物减缩为～20ml，然后添加浓盐酸以产生～1-2的pH值。将反应混合物用CH2Cl2 3×30ml萃取。将被合并的有机萃取物用饱和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤且蒸发以产生浅黄色固体。将此物溶解于喹啉(3ml)中，添加100mg氧化铜(II)。然后将反应物在稍微减压下加热(油浴160℃)并在～60-70℃蒸馏出透明液体。由此形成透明油状标题化合物(790mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.2(t，3 H)，2.6(q，2 H)，6.65(s，1H)，7.7(s，1 H)。
制备72 [2-氨基-6-(5-乙基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用5-乙基-噁唑(47mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(79mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.13-1.25(m，3 H)1.33(t，J＝7.61Hz，3H)2.56(s，3 H)2.80(q，J＝7.41Hz，2 H)4.13-4.22(m，2 H)4.96(s，2H)6.31-6.45(m，2 H)6.97(s，1 H)7.16(d，J＝7.80Hz，1 H)7.26(s，1H)7.63-7.79(m，1 H)8.43(s，1 H)，LCMS Rt＝2.16m/z 427[MH]+ 制备73 5-异丙基-噁唑-4-甲酸乙酯 在0℃、在氮气氛下将异氰基乙酸乙酯(4.52g)逐滴添加至KOtBu于THF(35ml)中的被搅拌的混悬液中。添加完成后，将暗褐色溶液搅拌30分钟然后逐滴添加异丁酰氯(2.1ml)于THF(15ml)中的溶液，使温度保持在约10℃以下。将反应物搅拌1小时然后蒸干。将残余物用乙酸(1.14ml)及水(25ml)处理，然后用醚(3×30ml)萃取。将所合并的醚萃取物用饱和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且蒸发以产生褐色油，将其用二氯甲烷中的1％MeOH洗脱、通过柱色谱纯化。由此产生无色油状标题化合物(1.91g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.25(d，6 H)，1.38(t，3 H)，3.8(m，1H)，4.35(q，2 H)，7.7(s，1 H)，LRMS m/z(API)184[MH]+，367[2MH]+ 制备74 5-异丙基-噁唑 将5-异丙基-噁唑-4-甲酸乙酯(1.89g)溶解于1N氢氧化钠(10ml)与乙醇(0.5ml)的溶液中，并将混合物在室温下搅拌16小时。添加1NHCl溶液(约9ml)并将混合物搅拌几分钟。有白色固体结晶析出且通过过滤收集。干燥后，将此固体溶解于喹啉(3ml)中，添加氧化铜(120mg)。将反应物在真空下加热，使油浴温度缓增至～170℃。蒸馏出透明液体，产生所需产物与喹啉的混合物。然后将此油在更低压力(～180mBar)及温度(70℃)下再蒸馏，产生透明油状标题化合物(260mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.24(d，6 H)，2.96(m，1 H)，6.7(s，1H)，7.7(s，1 H) 制备75 [2-氨基-6-(5-异丙基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用5-异丙基-噁唑(54mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(48mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.13-1.26(m，3 H)1.34(d，J＝6.63Hz，6H)2.56(s，3 H)3.04-3.15(m，1 H)4.10-4.23(m，2 H)4.96(s，2 H)6.39(s，2 H)6.94(s，1 H)7.16(d，J＝7.80Hz，1 H)7.21(s，1 H)7.63-7.76(m，1 H)8.43(s，1 H)，LCMS Rt＝2.30m/z 441[MH]+ 制备76 [2-氨基-6-(4，5-二甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用4，5-二甲基-噁唑(47mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(75mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.03-1.26(m，3 H)2.19(s，3 H)2.37(s，3 H)2.56(s，3 H)4.09-4.26(m，2 H)4.95(s，2 H)6.40(s，2H)7.16(d，J＝7.80Hz，1 H)7.21(s，1 H)7.62-7.83(m，1 H)8.42(s，1H)，LCMS Rt＝2.12m/z 427[MH]+ 制备77 噁唑-4-基-甲醇 在-78℃，经15分钟将DIBAL-H(56ml于甲苯中的1.0M溶液)逐滴添加至噁唑-4-甲酸乙酯(7.50g，53.1mmol)于THF(140ml)中的溶液。将所得溶液在-78℃搅拌30分钟然后经15分钟再添加DIBAL-H(56ml于甲苯中的1.0M溶液，56.0mmol)。然后将反应物由-78℃缓慢加温至室温历时16小时。将所得亮黄色溶液在冰浴中冷却至0℃且逐小份添加Na2SO4.10H2O(15.9g-与所添加的DIBAL-H重量相等)(注意缓慢添加以防止放热)以促使铝盐沉淀。将混合物加温至室温，搅拌90分钟后，将所得混悬液用硅藻土层过滤。将硅藻土塞用二氯甲烷(3×100ml)及甲醇(2×100ml)冲洗并将滤液合并。在减压下移除溶剂，产生褐色油状标题化合物(4.8g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 4.60(s，2 H)，7.6(s，1 H)，7.9(s，1 H) 制备78 4-甲氧基甲基-噁唑 将噁唑-4-基-甲醇(750mg)溶于无水THF(38ml)中并将溶液冷却至0℃。然后经过4分钟逐小份添加氢化钠(365mg，9.1mmol)，添加结束后，将反应物加温至室温历时30分钟。将反应物再冷却至0℃且逐小份添加甲基甲苯磺酸盐(2.11g)。添加结束后，将反应物加温至室温且搅拌16小时。将粗反应混合物预吸附于硅胶上然后通过ISCOcombi-快速色谱(SiO2；DCM中的2至5％ MeOH的梯度洗脱，1％ NH3)纯化以产生浅黄色液体的标题化合物(473mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 3.41(s，3 H)，4.40(s，2 H)，7.61(s，1H)，7.85(s，1 H) 制备79 [2-氨基-6-(4-甲氧基甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用4-甲氧基甲基-噁唑(110mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(200mg)及双(三苯基膦)二氯化钯(68mg)，按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(107mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.11-1.29(m，3 H)2.54(s，3 H)3.47(s，3 H)4.09-4.24(m，2 H)4.49(s，2 H)4.96(s，2 H)6.34(s，2H)7.13(d，J＝7.81Hz，1 H)7.32(s，1 H)7.63-7.72(m，1 H)7.76(s，1H)8.42(s，1 H)，LCMS Rt＝1.62m/z 443[MH]+ 制备80 (2-氨基-3-硝基-6-噻唑-2-基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用噻唑(42mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(79mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.06-1.30(m，3 H)2.56(s，3 H)4.07-4.25(m，2 H)4.99(s，2 H)6.26(s，2 H)7.16(d，J＝7.80Hz，1 H)7.46(s，1 H)7.54(d，J＝3.12Hz，1 H)7.64-7.84(m，1 H)7.96(d，J＝3.12Hz，1 H)8.35-8.50(m，1 H)，LCMS Rt＝2.11m/z 415[MH]+ 制备81 2-氯-3-氧代-戊酸乙酯 在室温下将磺酰氯(6.50ml)逐滴添加至丙酰基乙酸乙酯(11.70g)中并将反应物搅拌16小时。将反应混合物在真空下放置1小时以移除高度挥发性物质，然后将残余物在“高”真空下蒸馏以产生油，将油在75-79℃、在6Mbar(＝4.5mmHg)真空下蒸馏，从而产生透明油状标题化合物(13.54g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.11(t，3 H)，1.31(t，3 H)，2.75(q，2H)，4.25(q，2 H)，4.80(s，1 H) 制备82 4-乙基-噁唑-5-甲酸乙酯 将2-氯-3-氧代-戊酸乙酯(13.5g)溶于75ml的95％甲酸中。添加甲酸铵(27.6g)并将反应物在回流温度下、在氮气氛下加热6小时。冷却至室温后，将反应混合物蒸发并将残余物用醚(3×50ml)萃取。将所合并的醚萃取物用水及盐水洗涤，干燥(用MgSO4)，过滤且蒸发以产生粗油(9g)。将油用CH2Cl2/MeOH 99:1洗脱、通过硅胶层析法纯化，产生浅褐色油状标题化合物(3.77g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.25(t，3 H)，1.41(t，3 H)，2.90(q，2H)，4.41(q，2 H)，7.85(s，1 H) 制备83 4-乙基-噁唑-5-甲酸 将4-乙基-噁唑-5-甲酸乙酯(4.6g)置于1N NaOH(25ml)与乙醇(1ml)的溶液中搅拌。然后将反应混合物在室温下搅拌16小时。添加乙醚(25ml)，然后将水层分离并用1N HCl(26ml)酸化。通过过滤收集形成黄色固体，然后用水、正戊烷洗涤，产生白色固体的标题化合物(2.6g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.30(t，3 H)，2.95(q，2 H)，8.0(s，1H) 制备84 4-乙基-噁唑 将4-乙基-噁唑-5-甲酸(1.2g)溶解于喹啉(3ml)中，添加CuO(50mg)。然后将反应物加热至215-20℃，收集无色馏分，从而产生混浊油状标题化合物(621mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.21(t，3 H)，2.55(q，2 H)，7.4(s，1H)，7.8(s，1 H) 制备85 [2-氨基-6-(4-乙基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用4-乙基-噁唑(47mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(74mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.09-1.22(m，3 H)1.25(t，J＝7.42Hz，3H)2.50(s，3 H)2.56-2.68(m，2 H)4.04-4.21(m，2 H)4.92(s，2 H)6.33(s，2 H)7.10(d，J＝7.81Hz，1 H)7.23(s，1 H)7.46-7.49(m，1 H)7.59-7.69(m，1 H)8.39(s，1 H)，LCMS Rt＝2.07m/z 427[MH]+ 制备86 1-溴-3-甲基-丁-2-酮 将3-甲基-2-丁酮(5g)于甲醇(55ml)中的溶液冷却至-30℃。然后逐滴添加溴(2.97μl)，一旦添加结束，则将反应物加温至室温且搅拌3.5小时。然后将反应物倾注入水(100ml)中，并用乙醚(2×100ml)萃取，将所合并的萃取物干燥(用MgSO4)，过滤且浓缩。将油状残余物静置后形成两层不同的油层，将其分离。保留底层，从而产生浅黄色油状标题化合物(5.14g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.15(d，6 H)，2.95(m，1 H)，3.95(s，1H) 制备87 4-异丙基-噁唑 将1-溴-3-甲基-丁-2-酮(1.0g)添加至甲酰胺(3.0ml)中并将反应混合物加热至110℃历时6小时。冷却至室温后，将反应混合物用40％氢氧化钾溶液(10ml)稀释，搅拌几分钟然后用乙醚(3×10ml)萃取。将醚萃取物合并且谨慎地蒸发。将所得褐色机油用正戊烷研磨并将溶剂倾析。重复此方法(×2)，然后蒸发残留戊烷，以产生浅褐色油状标题化合物(65mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.30(d，6 H)，2.85(m，1 H)，4.41(q，2H)，7.35(s，1 H)，7.80(s，1 H) 制备88 [2-氨基-6-(4-异丙基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用4-异丙基-噁唑(54mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(71mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.10-1.22(m，3 H)1.27(d，J＝6.64Hz，6H)2.50(s，3 H)2.82-2.97(m，1 H)3.96-4.27(m，2 H)4.92(s，2 H)6.34(s，2 H)7.10(d，J＝7.81Hz，1 H)7.23(s，1 H)7.45(s，1 H)7.59-7.70(m，1 H)8.39(s，1 H)，LCMS Rt＝2.23m/z 441[MH]+ 制备89 苄基-(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 将碳酸钾(5.57g)添加至(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(7.44g)于丙酮(100ml)中的被搅拌的溶液中，然后依次添加苄基溴(2.87ml)、碘化钠(3.63g)。将混合物在氮气氛下搅拌36小时。然后将反应混合物过滤以移除所沉淀的白色固体，真空浓缩，然后在乙酸乙酯(100ml)与水(100ml)之间分溶。将有机物干燥(用MgSO4)且蒸发为黄色油。将此粗油吸附于硅胶上然后用EtOAc:庚烷洗脱、通过Isco Companion二氧化硅柱(80g，Redisep)层析法纯化，梯度由10:90线性地增至50:50。由此产生黄色油状标题化合物(7.50g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.20(t，3 H)，4.18(q，2 H)，4.8(br，s，2H)，7.0(s，1 H)，7.20(m，2 H)，7.35(m，3 H)，LRMS m/z(API)458，460，462[MH]+ 制备90 (2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 将苄基-(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(7.50g)溶于2-甲基-四氢呋喃(15ml)中且将该溶液放置于可密封容器中。添加浓氨水溶液(15ml)然后将瓶密封，并将二相混合物在室温下剧烈搅拌36小时。然后将反应混合物转入分液漏斗中，添加乙酸乙酯(120ml)及水(120ml)。将各相分离，然后将有机物用盐水(100ml)洗涤，干燥(用MgSO4)且蒸发为黄色油。静置后，结晶出黄色固体。将此物通过过滤收集并用戊烷洗涤，产生黄色固体的标题化合物(6.64g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm1.21(t，3H)，4.19(q，2H)，4.82(br，s，2H)，6.25(br，s，2H)，6.55(s，1H)，7.20-7.35(m，5H)，LRMS m/z(API)395，397[MH]+ 制备91 [2-氨基-6-(4-甲氧基甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 使用4-甲氧基甲基-噁唑(114mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(200mg)及双(三苯基膦)二氯化钯(71mg)，按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(160mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.20(t，J＝7.03Hz，3 H)3.46(s，3 H)4.12-4.22(m，2 H)4.47(s，2 H)4.92-5.03(m，2 H)6.32(s，2 H)7.28-7.35(m，6 H)7.74(s，1 H)，LCMS Rt＝3.08m/z 428[MH]+ 制备92 二甲基-噁唑-4-基甲基-胺 经5分钟将亚硫酰氯(5.51ml)逐滴添加至噁唑-4-基-甲醇(1.51g)于二氯甲烷(50ml)中的冷溶液(0℃)中。将所得混浊溶液在室温下搅拌5分钟然后加热至回流。加热后，溶液变得透明且为深黄色。在回流温度下10分钟后，将溶液冷却至室温并在减压下移除过量的亚硫酰氯及溶剂以产生相应的氯化物化合物，其无需进一步纯化便可使用。在冰浴中将二甲胺(38ml于THF中的2.0M溶液)冷却至0℃且经10分钟逐小份添加该氯化物(1.74g)于无水THF(50ml)中的溶液。然后使所得混悬液反应16小时。移除溶剂以产生暗褐色/黑色固体，然后将其预吸附于二氧化硅上并用具有10％ NH3的二氯甲烷中的5至15％MeOH洗脱、通过硅胶上的ISCO combi-快速色谱纯化。由此产生暗褐色粘油状标题化合物(335mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 2.35(s，6 H)，3.50(s，2 H)，7.62(s，1H)，7.85(s，1 H) 制备93 [2-氨基-6-(4-二甲基氨基甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 使用二甲基-噁唑-4-基甲基-胺(128mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(200mg)及双(三苯基膦)二氯化钯(71mg)，按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(99mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.20(t，J＝7.03Hz，3 H)2.32(s，6 H)3.49(s，2 H)4.13-4.23(m，2 H)4.92-5.03(m，2 H)6.33(s，2 H)7.28-7.36(m，6 H)7.68(s，1 H)，LCMS Rt＝1.86m/z 441[MH]+ 制备94 {2-氨基-3-硝基-6-[1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑-2-基]-吡啶-4-基}-苄基-氨基甲酸乙酯 使用1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑(201mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(200mg)及双(三苯基膦)二氯化钯(71mg)，按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(174mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm-0.04(s，9 H)0.87-0.94(m，2 H)1.19(t，J＝7.03Hz，3 H)3.49-3.59(m，2 H)4.10-4.22(m，2 H)4.98(s，2 H)5.93(s，2 H)6.18(s，2 H)7.18(s，1 H)7.23(s，1 H)7.28-7.38(m，5 H)7.53(s，1 H) 制备95 (2-氨基-6-甲基硅烷基-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 将甲硫醇钠(180mg)逐滴添加至(2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(300mg)于甲醇:THF(3:1，4ml)中的被搅拌的混悬液中。将混合物密封于反应瓶中，然后在室温下搅拌2小时。将反应混合物用甲醇稀释，然后直接地预吸附于硅胶上。将粗物质用EtOAc:庚烷洗脱、通过Isco Companion二氧化硅柱(12g，Redisep)进行柱色谱，经6个柱容积梯度由30:70线性增至50:50。将所需洗脱组分合并且蒸发以产生黄色胶状标题化合物(297mg)。
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ ppm 1.04-1.22(m，3 H)2.43(s，3 H)3.96-4.24(m，2 H)4.35-4.55(m，1 H)5.03-5.17(m，1 H)6.13(s，2 H)7.12-7.47(m，6 H)，LCMS Rt＝3.29m/z 363[MH]+ 制备96 [2-氨基-6-(2-氟-苯基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 将2-氟-苯基硼酸(34mg)、噻吩-2-甲酸铜(I)(79mg)及双(三苯基膦)二氯化钯(19mg)添加至微波瓶中。然后将瓶用氮气吹洗且密封。然后将(2-氨基-6-甲硫基-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(42mg)于无水THF(0.5ml)中的溶液添加该瓶中，并将混合物在微波照射(CEM)下、在100℃加热10分钟。然后将反应混合物用甲醇稀释，用Arbocel、在阳离子交换滤筒(Bakerbond，磺酸粘合相，1g)上直接过滤。将滤筒用甲醇(2×5ml)洗涤以移除杂质然后通过用甲醇中的氨(2M，5ml)洗脱来释出产物。将所需洗脱组分合并且蒸发以产生黄色胶状标题化合物(31mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.03-1.31(m，3 H)4.16(s，2 H)4.91(br.s.，1 H)6.20(s，2 H)6.95(s，1 H)7.07(dd，J＝11.71，8.20Hz，1H)7.16-7.22(m，1H)7.21-7.42(m，7H)7.84-7.93(m，1H)，LCMSRt＝3.50m/z 411[MH]+ 制备97 [2-氨基-6-(3-氟-苯基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 使用3-氟-苯基硼酸、按照制备96中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(18mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.08-1.35(m，3 H)4.19(s，2 H)5.29(br.s.，2 H)6.29(s，2 H)6.66(s，1 H)7.04-7.17(m，1 H)7.28-7.40(m，7 H)7.43-7.55(m，1 H)，LCMS Rt＝3.53m/z 411[MH]+ 制备98 [2-氨基-6-(4-氟-苯基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 使用4-氟-苯基硼酸、按照制备96中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(28mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.19(s，3 H)4.19(s，2 H)5.33(br.s.，2 H)6.31(s，2 H)6.63(s，1 H)7.03-7.13(m，2 H)7.29-7.38(m，5H)7.68-7.77(m，2 H)，LCMS Rt＝3.52m/z 411[MH]+ 制备99 (2-氨基-6-甲氧基-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 谨慎地将氢化钠(9mg)溶解于甲醇(0.5ml)中然后在室温下将该溶液添加至(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(50mg)于THF(0.5ml)中的溶液中。将反应物在氮气氛下搅拌2小时，然后直接将溶液预吸附于硅胶上。将混合物用乙酸乙酯:庚烷洗脱、通过Isco Companion层析纯化，经若干个柱容积，梯度由20:80线性地增至60:40。将所需洗脱组分合并且蒸发以产生黄色胶状标题化合物(23mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.15(s，3 H)3.84(s，3 H)3.97-4.32(m，2 H)4.42(d，J＝15.05Hz，1 H)5.21(d，J＝15.05Hz，1 H)5.77(s，1 H)6.61(br.s.，2 H)7.23-7.38(m，5 H)，LCMS Rt＝3.19m/z347[MH]+ 制备100 (2-氨基-6-乙氧基-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 使用乙醇、按照制备99中的实例制备标题化合物，产生灰白色固体的产物(31mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.10-1.28(m，3 H)1.31(t，J＝7.03Hz，3H)3.97-4.32(m，4 H)4.43(d，J＝15.83Hz，1 H)5.20(d，J＝15.83Hz，1H)5.70-5.86(m，1 H)6.61(br.s.，2 H)7.26-7.36(m，5 H)，LCMS Rt＝3.36m/z 361[MH]+ 制备101 (2-氨基-6-丙氧基-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 使用丙醇、按照制备99中的实例制备标题化合物，产生灰白色固体的产物(30mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 0.95(t，J＝7.42Hz，3 H)1.07-1.33(m，3H)1.62-1.79(m，2 H)3.95-4.29(m，4 H)4.44(d，J＝15.63Hz，1 H)5.20(d，J＝15.63Hz，1 H)5.67-5.90(m，1 H)6.61(br.s.，2 H)7.25-7.41(m，5 H)，LCMS Rt＝3.51m/z 375[MH]+ 制备102 (2-氨基-6-甲基氨基-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 在室温下将甲胺(40％水溶液)(0.055ml)添加至(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(50mg)于THF(0.5ml)中的溶液中。将反应物在氮气氛下搅拌16小时，然后直接将溶液预吸附于硅胶上。将混合物用乙酸乙酯:庚烷洗脱、通过Isco Companion层析纯化，经若干个柱容积，梯度由20:80线性地增至60:40。将所需洗脱组分合并且蒸发以产生黄色胶状标题化合物(30mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.04-1.40(m，3 H)2.82(s，3 H)3.97-4.33(m，3 H)4.75-5.04(m，1 H)5.22-5.49(m，2 H)6.79(br.s.，2 H)7.28-7.39(m，5 H)，LCMS Rt＝2.83m/z 346[MH]+ 制备103 (2-氨基-6-乙基氨基-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 使用乙胺(70％水溶液)(0.051ml)、按照制备102中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(35mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.05-1.37(m，6 H)3.23(s，2 H)3.93-4.35(m，3 H)4.84(s，1 H)5.17-5.52(m，2 H)6.75(br.s.，2 H)7.29-7.42(m，5 H)，LCMS Rt＝3.0m/z 360[MH]+ 制备104 (2-氨基-6-丙基氨基-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 使用1-丙胺(0.052ml)、按照制备102中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(35mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 0.91(t，J＝7.42Hz，3 H)1.06-1.38(m，3H)1.44-1.55(m，2 H)3.14(s，2 H)3.93-4.30(m，3 H)4.75-5.07(m，1H)5.22-5.48(m，2 H)6.77(br.s.，2 H)7.28-7.37(m，5 H)，LCMS Rt＝3.16m/z 374[MH]+ 制备105 (2-氨基-6-丁基氨基-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 使用正丁胺(0.063ml)、按照制备102中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(39mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 0.92(t，J＝7.42Hz，3 H)1.12-1.37(m，5H)1.41-1.51(m，2 H)3.17(s，2 H)3.98-4.31(m，3 H)4.84(s，1 H)5.26-5.47(m，2 H)6.75(br.s.，2 H)7.28-7.36(m，5 H)，LCMS Rt＝3.31m/z 388[MH]+ 制备106 [2-氨基-6-(2-甲氧基-乙氨基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 使用2-甲氧基乙胺(1.0ml)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(150mg)、按照制备102中的实例制备标题化合物，产生黄色胶状产物(121mg)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.21(t，3 H)，3.35(s，3 H)，3.45(m，4H)，4.20(q，2 H)，5.25(br，s，2 H)，7.20-7.35(m，5 H)，LRMS m/z(API)390[MH]+，388[MH]-。
制备107 (2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用碳酸钾(1.50g)、丙酮(40ml)中的(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(2.0g)、5-(氯甲基)-2-三氟甲基吡啶(1.06g)及碘化钠(0.98g)、按照制备68中的实例制备标题化合物。由此产生黄色油状产物(2.79g)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.20(t，3 H)，4.20(q，2 H)，4.85(s，2H)，7.28(s，1 H)，7.71(d，1 H)，7.88(dd，1 H)，8.61(d，1 H) 制备108 (2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用(2，6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(2.75g)、氨水(11ml)及2-甲基-THF(11ml)、按照制备69中的实例制备标题化合物。由此产生黄色油状产物(1.92g)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.21(t，3 H)，4.11(q，2H)，4.95(br，s，2 H)，6.41(br，s，2 H)，6.60(s，1 H)，7.65(d，1H)，7.95(m，1 H)，8.65(m，1 H) 制备109 (3-氰基-苄基)-(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 使用碳酸钾(1.50g)、丙酮(40ml)中的(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(2.0g)、3-氯甲基-苯甲腈(0.82g)及碘化钠(0.98g)、按照制备68中的实例制备标题化合物。由此产生黄色油状产物(2.62g)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.20(t，3 H)，4.15(q，2H)，4.80(br，s，2 H)，7.15(s，1 H)，7.5(m，2 H)，7.61(m，1 H)，7.65(m，1H) 制备110 (2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(3-氰基-苄基)-氨基甲酸乙酯 使用(3-氰基-苄基)-(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(2.32g)、氨水(10.2ml)及2-甲基-THF(10.2ml)、按照制备68中的实例制备标题化合物。由此产生黄色固体的产物(1.51g)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.20(t，3 H)，4.21(q，2H)，4.95(br，s，2 H)，6.35(br，s，2 H)，6.59(s，1 H)，7.5(m，1H)，7.6(m，3 H) 制备111 (2-氨基-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用噁唑(30mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)及双(三苯基膦)二氯化钯(30mg)，按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色固体的产物(61mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.10-1.31(m，3 H)4.02-4.30(m，2 H)5.07(s，2 H)6.39(s，2 H)7.32(s，1 H)7.35(s，1 H)7.69(d，J＝7.82Hz，1 H)7.84(s，1 H)8.01(d，J＝5.47Hz，1 H)8.70(s，1 H)，LCMS Rt＝3.02m/z 453[MH]+ 制备112 [2-氨基-6-(4-甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用4-甲基-噁唑(36mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)及双(三苯基膦)二氯化钯(30mg)、按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色固体的产物(44mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.10-1.25(m，3 H)2.28(s，3 H)4.09-4.25(m，2 H)5.06(s，2 H)6.41(s，2 H)7.25(s，1 H)7.55(d，J＝1.17Hz，1 H)7.69(d，J＝8.21Hz，1 H)8.01(d，J＝7.03Hz，1H)8.70(s，1 H)，LCMS Rt＝3.13m/z 467[MH]+ 制备113 (2-氨基-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-4-基)-(3-氰基-苄基)-氨基甲酸乙酯 使用噁唑(33mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(3-氰基-苄基)-氨基甲酸乙酯(100mg)及双(三苯基膦)二氯化钯(33mg)、按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色固体的产物(67mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.20(t，J＝7.03Hz，3 H)4.17(s，2 H)4.99(s，2 H)6.36(s，2 H)7.26(s，1 H)7.34(s，1 H)7.46(t，J＝7.62Hz，1 H)7.59(d，J＝7.42Hz，1 H)7.62-7.68(m，2 H)7.82(s，1 H)，LCMSRt＝2.93m/z 409[MH]+ 制备114 [2-氨基-6-(4-甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(3-氰基-苄基)-氨基甲酸乙酯 使用4-甲基-噁唑(40mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(3-氰基-苄基)-氨基甲酸乙酯(100mg)及双(三苯基膦)二氯化钯(30mg)、按照制备70中的实例制备标题化合物，产生黄色固体的产物(65mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.10-1.25(m，3 H)2.28(s，3 H)4.10-4.23(m，2 H)4.99(s，2 H)6.39(s，2 H)7.20(s，1 H)7.46(t，J＝7.62Hz，1 H)7.54(d，J＝1.17Hz，1 H)7.60(d，J＝7.42Hz，1H)7.63-7.69(m，2 H)，LCMS Rt＝3.04m/z 423[MH]+ 制备115 4-氨基-1-苄基-6-溴-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 将(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(50mg，0.13mmol)溶于AcOH(3ml)中。添加铁粉(43mg，0.76mmol)并将混合物在室温下剧烈搅拌24小时。将反应混合物用EtOAc(20ml)及水(10ml)稀释。将混合物用硅藻土过滤并用EtOAc(20ml)洗涤。将各层分离并将有机层用水(10ml)、饱和NaHCO3水溶液(2×10ml)及盐水(10ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩。将粗物质研磨于戊烷中，过滤并在真空中、在40℃干燥以产生米黄色固体的标题化合物(15mg)。
1H NMR(d6-DMSO)δ 10.47(br s，1H)，7.36-7.26(m，5H)，6.70(s，1H)，6.05(br s，2H)，4.94(s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 319/321[MH]+。
制备116 苄基-(2，3-二氨基-6-吡唑-1-基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 将(2-氨基-3-硝基-6-吡唑-1-基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(65.4mg，0.171mmol)溶于甲醇(5ml)中并在室温、80psi H2下经阮内镍(25mg)氢化1小时。将反应混合物用Arbocel短塞过滤然后将滤液在真空中蒸发以产生58mg褐色残余物状标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 1.15(m，3H)，2.90(s br，2H)，3.50(m，2H)，4.12(d，2H)，4.20(s br，2H)，6.28(s br，1H)，7.10(s br，1H)，7.20-7.35(m，5H)，7.85(s，1H)，8.30(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 353(MH+)。
制备117 (2-氨基-3-硝基-6-[1，2，4]三唑-1-基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 标题化合物按照制备116中的实施例制备。
1H NMR(CDCl3)δ 1.20(t，3H)，4.19(四重峰，2H)，5.00(sbr，2H)，6.37(sbr，2H)，7.09(s，1H)，7.27-7.37(m，5H)，8.03(s，1H)，9.00(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 384(MH+)。
制备118 (ai)(2-氨基-3-硝基-6-[1，2，3]三唑-2-基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯及(bi)(2-氨基-3-硝基-6-[1，2，3]三唑-1-基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯
将(2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(100mg，0.285mmol)溶于乙腈(10ml)中然后添加1，2，3-三唑(39.4mg，0.570mmol)、碳酸钾(78.8mg，0.570mmol)。将黄色溶液在70℃、在氮气氛下搅拌18小时。将所得暗橙色反应混合物在真空中蒸发并将残余物溶于EtOAc中并用水萃取。将有机萃取物合并，被无水硫酸镁干燥并真空浓缩。通过自动纯化(chiralpak柱，50:50甲醇:乙醇)将2种结构异构体分离以产生均为黄色固体的48.1mg(ai)(2-氨基-3-硝基-6-[1，2，3]三唑-2-基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯及34.9mg的(bi)(2-氨基-3-硝基-6-[1，2，3]三唑-1-基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯。
1H NMR(CDCl3)(ai)δ 1.19(t，3H)，4.18(d，2H)，5.00(s br，2H)，6.62(sbr，2H)，7.25-7.36(m，6H)，7.87(s，1H).LRMS(ES+)m/z 384(MH+)。
1H NMR(CDCl3)(bi)δ 1.21(t，3H)，4.20(q，2H)，5.02(s br，2H)，6.35(sbr，2H)，7.24-7.40(m，6H)，7.77(s，1H)，8.40(d，1H).LRMS(ES+)m/z384(MH+)。
制备119 [2-氨基-6-(4-氟-吡唑-1-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 在氮气氛下，将(2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(100mg，0.285mmol)、4-氟吡唑(24.5mg，0.285mmol)及碳酸钾(118mg，0.855mmol)一起置于5ml乙腈中搅拌。将反应物加热至回流温度历时3小时，然后冷却至环境温度过夜。
将溶剂蒸发并将残余物的二氯甲烷可溶性部分用二氯甲烷中的1％甲醇洗脱、通过二氧化硅层析法纯化。将含有纯净物质的洗脱组分与0.66的Rf在同一洗脱液中合并且蒸发以产生黄色胶状标题化合物(106mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.20(宽单峰，3H)，4.17(宽单峰，2H)，4.95(宽双峰，2H)6.38(宽单峰，2H)7.15(s，1H)7.35(m，5H)7.58(d，1H)8.23(d，1H)；LRMS(ES+)m/z 401(MH+) 使用与制备119中所述相同的方法制备以下化合物。
制备120 [2-氨基-6-(3，5-二甲基-吡唑-1-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.19(宽单峰，3H)，2.24(s，3H)2.62(s，3H)4.16(宽单峰，2H)，4.94(宽双峰，2H)5.98(s，1H)6.36(宽单峰，2H)7.21(s，1H)7.32(m，5H)；LRMS(ES+)m/z 411(MH+)。
制备121 [2-氨基-6-(4-甲基-吡唑-1-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.20(宽单峰，3H)，2.14(s，3H)4.16(宽单峰，2H)，4.95(宽双峰，2H)6.39(宽单峰，2H)7.16(s，1H)7.36(m，5H).7.53(s，1H)8.15(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 397(MH+) 制备122 [2-氨基-6-(3-三氟甲基-吡唑-1-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.22(宽单峰，3H)，4.20(宽单峰，2H)，5.00(宽双峰，2H)，6.33(宽单峰，2H)6.69(d，1H)，7.22(s，1H)，7.35(m，5H)，8.45(d，1H)；LRMS(ES+)m/z451(MH+)。
制备123 [2-氨基-6-(5-甲基-3-三氟甲基-吡唑-1-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.22(宽单峰，3H)，2.69(s，3H)，4.20(宽单峰，2H)，5.00(宽单峰，2H)，6.29(宽单峰，2H)，6.41(s，1H)，7.19(s，1H)，7.33(m，5H)；LRMS(ES+)m/z 465(MH+)。
制备124 {2-氨基-6-[4-(2-羟基-乙基)-吡唑-1-基]-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.20(宽峰，3H)，2.78(t，2H)，3.85(q，2H)4.18(宽单峰，2H)，4.98(宽单峰，2H)，6.37(宽单峰，2H)，7.17(s，1H)，7.33(m，5H)，7.61(s，1H)，8.28(s，1H)；LRMS(ES+)m/w 427(MH+) 制备125 1-苄基-4-苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸-(1-羟亚氨基-乙基)-酰胺 在反应瓶中，将CDI(52mg，0.32mmol)添加至1-苄基-4-苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸(80mg，0.21mmol)与Hunnigs碱(83μl，0.64mmol)于无水DMF中的溶液中。将瓶密封并将混合物在室温下搅拌15分钟。添加N-羟基乙脒(24mg，0.32mmol)并将混合物在铝块中加热至60℃。将混合物在此温度搅拌3小时，然后冷却并真空浓缩。将残余物在EtOAc(15ml)与水(5ml)之间分溶。将各层分离并将有机相用盐水(5ml)洗涤。此时，有一些固体沉淀，置于分液漏斗内。用MeOH将其洗入有机相内，然后将有机物干燥(用MgSO4)且蒸发以产生白色固体的最终产物(120mg，130％)。该物质可能含有无机物质，但就纯化而言可用于下一步骤。
1H NMR CD3OD δ 1.94(s，3H)4.54(s，2H)5.16(s，2H)7.16-7.46(m，11H)。
LCMS Rt＝3.47m/z 431[MH]+ 制备126 N2，N2-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将2，6-二溴-4-氨基-5-硝基-吡啶(3.52g)溶于2-甲基THF(40ml)中并将溶液在冰浴中冷却至<5℃。将二苄胺(2.39ml)与三乙胺(2.48ml)于2-甲基THF(20ml)中的溶液逐滴添加至二溴吡啶溶液中，并将反应混合物加温至室温并在氮气氛下搅拌16小时。再添加二苄胺(684μl)及三乙胺(496μl)，并将混合物在室温下再搅拌5小时，然后再添加二苄胺(684μl)及三乙胺(496μl)，并将混合物在室温下再搅拌16小时。
将混合物转入分液漏斗中，然后添加水(60ml)。将各层分离并将水溶液用EtOAc(60ml)再萃取。将所合并的有机物干燥(用MgSO4)且蒸发为橙色胶。使该胶自MeOH:水(90:10，～200ml)中结晶以产生固体，将其过滤并用MeOH:水(90:10)洗涤，然后在真空下干燥以产生橙色结晶固体的标题化合物(3.6g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 4.45(s，4H)，5.95(br，s，2H)，6.22(s，1H)，7.05-7.15(m，4H)，7.21-7.35(m，6H)。LCMS Rt＝3.73m/z 415[MH]+ 制备127 N2，N2-二苄基-6-溴-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-3-硝基吡啶-2，4-二胺 在氮气氛下将叔丁醇钾(448mg)逐滴添加至N2，N2-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(1500mg，3.63mmol)于THF(40ml)中的冷溶液(-18℃-盐/冰浴)中。添加碱后，溶液由黄色变为深红色/橙色。将溶液在冷却浴中搅拌5分钟。
将5-溴甲基-2-甲基-吡啶氢溴酸盐(1160mg)在饱和NaHCO3溶液(20ml)与2-Me THF(20ml)之间分溶。将各相分离并将有水溶液用2-MeTHF(20ml)再萃取。将所合并的有机物干燥(用MgSO4)，然后用滴液漏斗逐滴添加至氨基吡啶与KOtBu混合物中。颜色由红色/橙色变为黄色/橙色。将混合物在冷却浴中缓慢加温至室温，然后在室温、在氮气氛下搅拌48小时。将反应混合物再冷却至-18℃(冰/盐浴)，然后依次添加KOtBu(102mg)、四-正丁基碘化铵(670mg)。移除冷却浴并将混合物加温至室温，然后再搅拌4小时。将反应混合物直接预吸附于二氧化硅上，然后用EtOAc:庚烷洗脱、通过Isco Companion二氧化硅柱(80g，Redisep)进行柱色谱，经10个柱容积梯度由40:60线性增至80:20。将所需洗脱组分合并且蒸发以产生黄色固体的标题化合物(0.99g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.58(s，3H)，4.38(d，2H)，4.45(s，4H)，6.19(s，1H)7.05-7.15(m，4H)，7.18(d，1H)，7.21-7.35(m，6H)，7.49(dd，1H)，7.99(t，1H)，8.42(d，1H)。LCMS Rt＝3.12m/z 520[MH]+ 制备128 N2，N2-二苄基-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，4-二胺 将丁基锂(2.9ml)在-78℃(干冰/丙酮浴)逐滴添加至噁唑(0.251ml)于THF(5ml)中的被搅拌的溶液中，保持添加速率以使得反应温度不超过-60℃。将溶液在此温度搅拌10分钟，然后逐滴添加氯化锌(1.56g)于THF(7ml)中的溶液。将溶液在-78℃搅拌15分钟，然后移除冷却浴并将反应混合物加温至室温。将锌噁唑溶液的等分样品(1.2ml)用注射器添加至预密封且被氮气吹洗的微波瓶(Biotage，0.5-2.0ml)中，该瓶含有N2，N2-二苄基-6-溴-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-3-硝基吡啶-2，4-二胺(90mg)及双(三苯基膦)二氯化钯(24mg)。将此瓶在微波照射(Biotage Initiator 8)下、在130℃加热15分钟。以同样方式再使锌噁唑溶液的九份等分样品与溴吡啶在微波中反应。
将所有反应混合物合并并真空浓缩为褐色胶。将胶在EtOAc(20ml)与2M氨溶液(20ml)之间分溶。将水溶液用EtOAc(20ml)再萃取，并将所合并的有机物用盐水(20ml)洗涤，然后干燥(用MgSO4)且蒸发为褐色胶。将粗产物用EtOAc:庚烷洗脱、在Isco Companion二氧化硅柱(120g，Redisep)上进行纯化，经6个柱容积梯度由80:20线性增至100:0，然后使18个柱容积在100％ EtOAc等度。将所需洗脱组分合并且蒸发以产生黄色发泡固体的标题化合物(0.43g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.60(s，3H)，4.55(d，2H)，4.60(s，4H)，6.99(s，1H)7.05-7.15(m，4H)，7.20-7.22(d，2H)，7.22-7.35(m，6H)，7.59(dd，1H)，7.79(s，1H)，8.09(t，1H)，8.55(d，1H)。LCMS Rt＝2.87m/z 507[MH]+ 制备129 N2，N2-二苄基-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-噁唑-2-基-吡啶-2，3，4-三胺 将N2，N2-二苄基-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，4-二胺(425mg)溶于THF(60ml)中，然后添加MeOH(60ml)。将溶液在氢气氛下(80psi)经阮内镍(40mg)氢化1小时。将反应混合物用硅藻土垫过滤，然后蒸发以产生黄色粗胶状标题化合物，其可直接用于下一步骤。
LCMS Rt＝2.42m/z 477[MH]+。
制备130 (2，6-二氯-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 将氯甲酸乙酯(2.75ml)于2-甲基THF(10ml)中的溶液逐滴添加至2，6-二氯-4-氨基-5-硝基-吡啶(5.00g)与三乙胺(4.02ml)于2-甲基THF(50ml)中的冷(冰浴)溶液中。添加速率应使得反应温度不升至5℃。添加氯甲酸乙酯后，形成沉淀物。将混悬液加温至室温，然后在氮气氛下搅拌16小时。将混悬液转入分液漏斗内，添加水(50ml)。将各层分离并将有机物用盐水(50ml)洗涤，然后干燥(用MgSO4)且蒸发为橙色胶，将其静置固化为黄色固体。使固体自MeOH:水(70:30)中重结晶，产生白色针状标题化合物，将其通过过滤收集(6.7g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.25(t，3H)，4.31(q，2H)，8.10(br，s，1H)，8.40(s，1H)。LCMS Rt＝4.16m/z 280[MH]+ 制备131 苄基-(2，6-二氯-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 将溴化苄(2.33ml)逐滴添加至(2，6-二氯-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(4.57g)于乙腈(40ml)中的被搅拌的混悬液中。将混合物在氮气氛下、在室温下搅拌16小时。将混合物真空浓缩然后在EtOAc(50ml)与水(50ml)之间分溶。将各层分离并将有机物用饱和NH4Cl(50ml)、水(50ml)及盐水(50ml)洗涤。将有机物干燥(用MgSO4)且蒸发为黄色油。将此物质预吸附于二氧化硅上，然后用EtOAc:庚烷洗脱、在Isco Companion二氧化硅柱(330g，Redisep)进行柱色谱，使1个柱容积(CV)在10:90等度，然后梯度经6个CV由10:90线性增至30:70。将所需洗脱组分合并且蒸发以产生黄色油状标题化合物(6.05g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.25(t，3H)，4.19(q，2H)，4.81(s，2H)，6.88(s，1H)，7.20-7.28(m，2H)，7.30-7.40(m，3H)。LCMS Rt＝3.62m/z372[MH]+。
制备132 (2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯 将苄基-(2，6-二氯-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(500mg)溶于反应瓶中的THF(3ml)中。添加氨(7M于MeOH中，1ml)，将瓶密封，并将反应物在室温下搅拌48小时。然后将反应混合物直接预吸附于二氧化硅上，并用EtOAc:庚烷洗脱、在Isco Companion二氧化硅柱(40g，Redisep)进行柱色谱，梯度经10个柱容积由10:90线性增至40:60。将所需洗脱组分合并且蒸发以产生黄色胶状标题化合物，使其静置固化(305mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.05(t，3H)，4.02(q，2H)，4.87(br，s，2H)，6.58(s，1H)，7.20-7.36(m，5H)，7.61(br，s，1H)。LCMS Rt＝3.24m/z351[MH]+ 制备133 [2-氨基-6-(2-甲氧基-乙氧基)-3-硝基-吡啶-4-基]-苄基-氨基甲酸乙酯 将氢化钠(21mg)逐滴添加至2-甲氧基乙醇(0.5ml)中。将所得溶液逐滴添加至(2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-苄基-氨基甲酸乙酯(100mg)于THF(1.0ml)中的溶液中。反应混合物由黄色溶液变为深红/橙色溶液，并将其在室温下搅拌1小时。将橙色混合物真空浓缩，然后在EtOAc(10ml)与饱和NH4Cl溶液(10ml)之间分溶。将各层分离并将有机物用水(10ml)及盐水(10ml)洗涤，然后干燥(用MgSO4)且蒸发以产生粗黄色胶状的标题化合物(111mg)。此物可直接用于下一步骤而无需进一步纯化。
LCMS Rt＝3.13m/z 391[MH]+ 制备134 4-苄基氨基-3-硝基-吡啶-2-醇 将4-氯-3-硝基-2-吡烷酮(5g，28.65mmol)混悬于150ml乙腈中，然后依次添加苄胺(3.15ml，28.65mmol)、碳酸钾(4g，28.65mmol)，并将混合物在60℃搅拌过夜。在真空中移除溶剂并将残余物混悬于水(200ml)中。添加2M HCl溶液直至pH值为～6。将沉淀物过滤并在真空中干燥以产生4.75g米黄色固体的标题化合物。自母液中第2次收获，产生1.4g标题化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ11.20(宽单峰，1H)，9.35(t，1H)，7.40-7.20(m，6H)，5.85(d，1H)，4.60(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 246[MH]+ 制备135 苄基-(2-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-胺 将4-苄基氨基-3-硝基-吡啶-2-醇(6.15g，25.07mmol)混悬于100ml乙腈中，然后依次添加磷酰氯(12ml，125.40mmol)、氯化四乙铵(4.15g，25.07mmol)，并将混合物在85℃搅拌过夜。在真空中移除溶剂并将残余物混悬于水(300ml)中并用二氯甲烷(2×200ml)萃取。将有机层用硫酸镁干燥并将溶剂在真空中移除以产生5.9g黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ8.0(d，1H)，7.40-7.20(m，5H)，6.9(宽单峰，1H)，6.60(d，1H)，4.5(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 264[MH]+ 制备136 N-2，N-2，N-4，三苄基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将苄基-(2-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-胺(3.95g，14.99mmol)混悬于50ml乙腈中，然后依次添加二苄胺(2.9ml，14.99mmol)、碳酸钾(2g，14.99mmol)，并将混合物在80℃搅拌过夜。在真空中移除溶剂并将残余物混悬于水(100ml)中并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。将有机层用硫酸镁干燥并在真空中移除溶剂。使用戊烷中的15％乙酸乙酯、通过硅胶柱色谱法纯化粗残余物以产生6g黄色油状标题化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ8.1(s宽峰，1H)，7.9(d，1H)，7.40-7.10(m，15H)，6.10(d，1H)，4.55(s，4H)，4.5(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 425[MH]+ 制备137 N-2，N-2，N-4-三苄基-吡啶-2，3，4-三胺 将N-2，N-2，N-4，三苄基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(6g，14.13mmol)混悬于150ml乙醇中，添加阮内镍(1.2g，20重量％)，然后将混合物在室温下、在50psi氢气下搅拌3小时。完成后，将混合物用Arbocel(木质纤维素)过滤并在真空中移除溶剂以产生5g淡紫色胶状标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ7.80(d，1H)，7.40-7.15(m，15H)，6.35(d，1H)，4.35(d，2H)，4.15(s，4H)，3.5-3.25(宽单峰，2H)；LRMS(ES+)m/z 395[MH]+ 制备138 1-苄基-4-二苄基氨基-1，3-二氢-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮 将N-2，N-2，N-4，三苄基-吡啶-2，3，4-三胺(5g，12.67mmol)溶于100ml乙腈中，然后添加1，1’-羰基二咪唑(3g，19.701mol)并将反应物在80℃搅拌过夜。将混合物冷却至室温并将沉淀物过滤并用乙腈洗涤，然后在真空中干燥以产生4.3g浅紫色固体的标题化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ10.9(s，1H)，7.75(d，1H)，7.40-7.10(m，15H)，6.70(d，1H)，4.9(s，2H)，4.6(s，4H)；LRMS(ES+)m/z 421[MH]+。
制备139 1-苄基-7-溴-4-二苄基氨基-1，3-二氢-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮 将1-苄基-4-二苄基氨基-1，3-二氢-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮(1g，2.4mmol)混悬于20ml乙酸中，然后然后逐滴添加乙酸钠(195mg，2.4mmol)、溴(456mg，2.85mmol)。将混合物在室温下搅拌15分钟。形成稠的沉淀物。将混合物稀释于水(50ml)中并将固体过滤并用水洗涤。然后稀释于乙酸乙酯(20ml)中，用硫酸镁干燥，并在真空中移除溶剂以产生1.29g浅橙色固体的标题化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ11.5(s，1H)，7.85(s，1H)，7.40-7.10(m，15H)，5.30(s，2H)，4.55(s，4H)；LRMS(ES+)m/z 499，501[MH]+ 制备140 1-苄基-4-二苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5，c]吡啶-7-甲酸甲酯 将1-苄基-7-溴-4-二苄基氨基-1，3-二氢-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮(500mg，1mmol)混悬于30ml甲醇中，然后依次添加三乙胺(203mg，2mmol)、(1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁)二氯钯(82mg，0.1mmol)，并将混合物在100℃、在100psi CO下搅拌过夜。将混合物冷却至室温，用Arboce1过滤并用甲醇洗涤。在真空中移除溶剂，使用二氯甲烷中的1％甲醇、通过硅胶柱色谱法纯化残余物以产生21mg白色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ8.4(s，1H)，8.0(宽单峰，1H)，7.40-7.00(m，15H)，5.45(s，2H)，4.80(s，4H)，3.7(s，3H)；LRMS(ES+)m/z 479[MH]+ 制备141 1-苄基-4-二苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5，c]吡啶-7-甲酸环丙基甲基酰胺 将1-苄基-4-二苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5，c]吡啶-7-甲酸甲酯(50mg，0.1mmol)混悬于2ml(氨基甲基)环丙烷中，并将混合物在120℃搅拌过夜。在真空中移除过量的胺并将胶在水(20ml)与乙酸乙酯(50ml)中分溶，将有机层分离，用MgSO4干燥并在真空中移除溶剂。使用二氯甲烷中的5％甲醇、通过硅胶柱色谱法纯化残余物以产生10mg黄色胶状标题化合物；LRMS(ES+)m/z 518[MH]+ 制备142 6-氯-2，4-二羟基-5-甲基-吡啶 将丙二酰氯(10g，71mmol)与丙腈(12ml)混合并在室温下、在氮气氛下搅拌16小时。将50mL二噁烷添加至所得异质混合物中，通过过滤收集所得沉淀物并用冷二噁烷洗涤。将所收集固体溶于几毫升甲醇中并用二噁烷再次沉淀。通过过滤收集固体，用二噁烷洗涤并在真空中干燥以产生白色固体的标题化合物(6g，53％)；LRMS(ES+)m/z 160[MH]+。
制备143 6-氯-2，4-二羟基-5-甲基-3-硝基-吡啶 将6-氯-2，4-二羟基-5-甲基-吡啶(500mg，3.1mmol)溶解于乙酸(1ml)中，冷却至0℃，并在搅拌下逐滴添加硝酸(4ml)。添加结束后，移除冰浴，经16小时将反应混合物加温至室温。将冰添加至混合物以产生沉淀物，通过过滤收集并在真空中干燥以产生黄色固体的标题化合物(180mg，28％)；LRMS(ES+)m/z 205[MH]+ 制备144 丙二酸二苯酯 在0℃、在氮气氛下使丙二酸(11g，106mmol)与苯酚(20g，212mmol)混合，并将磷酰氯(11.5ml，123mmol)逐滴添加至固体混合物中。将所得混合物在0℃搅拌5分钟，然后在回流温度加热5小时，使固体熔融且形成橙色溶液。将反应物冷却至室温，然后倾注在100ml水上并用乙醚(3×75ml)萃取。将所合并的有机物用盐水洗涤，用MgSO4干燥，真空浓缩为橙色油状的标题化合物(27g，99％)。
1HNMR(CDCl3，400MHz)3.86(s，2H)，7.17(m，4H)，7.27(m，2H)，7.41(m，4H)；LRMS(ES)m/z 257[MH]+ 制备145 环戊酮-叔丁亚胺 在氮气氛下将环戊酮(13.3ml，150mmol)与叔丁胺(47.4ml，450mmol)混合于110ml乙醚中，然后在干冰/乙腈浴中冷却至-55℃。将四氯化钛(8.2ml，75mmol)溶解于70ml戊烷中，逐滴添加至上述溶液，注意使温度维持在-40℃。然后将反应物在-40℃搅拌6小时，然后加温至室温过夜。将反应混合物用硅藻土短塞过滤并用乙醚洗涤。将滤液在真空中蒸发以产生15.9g(76％)透明油状的标题产物。
1HNMR(CDCl3，400MHz)1.26(s，9H)，1.67(m，2H)，1.82(m，2H)，2.29(t，2H)，2.36(t，2H)。
制备146 6，7-二氢-5H-[1]吡啶-2，4-二醇 将环戊酮-叔丁亚胺(2.78g，20mmol)与丙二酸二苯酯(5.12g，20mmol)混合于40ml三甘醇二甲醚中并在100℃加热4小时，然后在200℃加热2小时。然后将反应物冷却至室温，再倾注入200ml乙醚中并在密封烧瓶中、在冰箱中贮存4天。过滤所得沉淀物，用乙醚洗涤并在真空中干燥以产生浅褐色固体的标题化合物(1.45g，50％)。
1HNMR(CD3OD，400MHz)2.12(m，2H)，2.70(t，2H)，2.82(t，2H)，5.64(s，1H)。
制备147 5，6-二甲基-吡啶-2，4-二醇 将5，6-二甲基-4-羟基-2-氧代-2H-吡喃(J.Chem.Soc.PerkinTrans 1，1980，2272)(10g，71mmol)溶于66ml二噁烷及33ml的0.88NH3溶液中，并将混合物回流3小时。然后将所得混悬液冷却至室温过夜，过滤收集固体，并在真空中干燥以产生白色结晶固体的标题化合物(6.5g)。将滤液真空浓缩至约10ml，通过过滤收集第2次收获的固体(1.0g)。将两次收获物合并用于下一合成步骤。
1H NMR(DMSO，400MHz)δ 1.77(s，3H)，2.06(s，3H)，5.42(s，1H)；LRMSm/z(APCI+)140[MH]+。
制备148 5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二醇 将5，6-二甲基-吡啶-2，4-二醇(6.5g，47mmol)置于30ml硫酸中搅拌然后在冰浴中冷却至0℃。逐滴添加发烟硝酸(10ml)，添加结束后将混合物搅拌1小时。将反应混合物倾注在碎冰上且通过过滤收集所得黄色固体以获得标题化合物(3.9g，46％)。
1H NMR(MeOD，400MHz)δ 2.04(s，3H)，2.31(s，3H)；LRMS m/z(APCI+)185[MH]+。
制备149 2，4-二氯-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶 将5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二醇(3.9g，21mmol)溶于乙腈(150ml)中，然后添加氯化四乙铵(7.1g，42mmol)及磷酰氯(19.9ml，210mmol)，并将整个物质在70℃加热16小时。将反应混合物倾注入碎冰中并用DCM(2×30ml)萃取。将所合并的萃取物用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩以产生褐色固体。将此固体溶解于2ml DCM中并用21戊烷EtOAc洗脱、用硅胶短塞过滤。然后蒸发滤液以产生浅褐色固体的标题化合物(3.5g，75％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.61(s，3H)，2.41(s，3H) 制备150 苄基-(2-氯-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺 将2，4-二氯-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶(2g，9mmol)溶于乙腈(100ml)与苄胺(1.0ml，9.5mmol)中。将碳酸钾(1.3g，9.5mmol)以一份添加，并将整个物质在55℃加热16小时。将反应混合物用EtOAc稀释并用50ml水洗涤。将水溶液用EtOAc再萃取，将有机物合并然后用MgSO4干燥，蒸发为暗红色残余物。使用81戊烷EtOAc作为洗脱液、通过硅胶柱色谱法纯化此残余物，以产生亮橙色固体的标题化合物(1.2g，45％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.09(s，3H)，2.47(s，3H)，4.25-4.27(d，2H)，4.52(bs，1H)，7.28-7.30(m，2H)，7.35-7.41(m，3H)LRMS m/z(APCI+)292[MH]+。
制备151 N2，N2-二烯丙基-N4-苄基-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将苄基-(2-氯-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺(1.2g，4.1mmol)溶于乙氧基乙醇(60ml)中，并将二异丙基乙胺(1.1ml，6.2mmol)及二烯丙胺(0.76ml，6.2mmol)以一份添加。将反应混合物在密封容器中、在100℃加热过夜，然后真空浓缩为橙色残余物。使用梯度8:1→1:1的戊烷:EtOAc作为洗脱液、通过硅胶柱色谱法直接纯化此残余物以产生亮橙色油状标题化合物(938mg，65％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.16(s，3H)，2.34(s，3H)，3.90-3.92(d，4H)，4.33-4.34(d，2H)，5.13-5.21(m，4H)，5.77-5.87(m，2H)，6.37-6.40(bt，1H)，7.35-7.28(m，5H)；LRMS m/z(APCI+)353[MH]+ 制备152 N2，N2-二烯丙基-N4-苄基-5，6-二甲基-吡啶-2，3，4-三胺 将N2，N2-二烯丙基-N4-苄基-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(828mg，2.4mmol)溶于乙醇(15ml)及2N HCl(15ml)中，并将铁粉(527mg，9.6mmol)以一份添加。将反应混合物在70℃加热2小时，然后冷却至室温且倾注入50ml水中。将所得溶液用1N NaOH溶液中和以产生暗绿色混悬液，将其用EtOAc(2×25ml)萃取，并将所合并的有机物用MgSO4干燥，过滤且蒸发以产生暗绿色油状标题化合物(559mg，74％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.95(s，3H)，2.32(s，3H)，3.73-3.74(d，4H)，4.21(s，2H)，5.07-5.23(m，4H)，5，86-5.96(m，2H)，7.26-7.32(m，5H)；LRMS m/z(APCI+)323[MH]+ 制备153 1-苄基-4-二烯丙氨基-6，7-二甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 将N2，N2-二烯丙基-N4-苄基-5，6-二甲基-吡啶-2，3，4-三胺(559mg，1.7mmol)溶于乙腈(50ml)中，并将1，1-羰基二咪唑(2.8g，17mmol)以一份添加，使整个物质回流2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩，使用梯度8:1→4:1戊烷:EtOAc作为洗脱液、通过硅胶柱色谱法直接纯化，以产生白色固体的标题化合物(258，59％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.12(s，3H)，2.34(s，3H)，3.99-4.01(dt，4H)，5.25-5.28(m，4H)，5.34-5.40(d，2H)，6.01-6.10(m，2H)，7.11-7.13(d，2H)，7.24-7.32(m，3H)，7.66(bs，1H)；LRMS m/z(ESCI+)349[MH]+ 制备154 4-甲基-3-氧代-戊酸 将乙基异丁酰基乙酸(21g，132mmol)溶解于1.5M氢氧化钠溶液(15g于250ml水中)中并在室温下搅拌16小时。将溶液在冰浴中冷却至0℃然后用35ml浓盐酸酸化至pH1-2。将所得溶液用氯化钠饱和然后用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。将所合并的萃取物用硫酸钠干燥后过滤，并真空浓缩以产生透明油状标题化合物(16.4g，95％)。
1HNMR(CDCl3，400MHz，酮与烯醇互变异构体的约4:1混合物)(主要酮形式)1.15-1.16(d，6H)，2.75-2.71(m，1H)，3.56(s，2H)。
制备155 4-羟基-3-异丁酰基-6-异丙基-吡喃-2-酮 将4-甲基-3-氧代-戊酸(16.4g，126mmol)在室温下、在氮气氛下溶解于THF(200ml)中，并将1，1-羰基二咪唑(22.4g，138mmol)以一份添加。将所得黄色溶液在室温下搅拌16小时，然后真空浓缩并将残余物用DCM(200ml)稀释。将溶液用2N HCl(100ml)及水(100ml)洗涤并将水溶液用DCM(50ml)再萃取。将所合并的有机物用硫酸钠干燥，然后真空浓缩以产生黄色油状标题化合物(11.7g，80％)。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ 1.16-1.18(d，6H)，1.25-1.27(d，6H)，2.71-2.74(m，1H)，3.94-3.97(m，1H)，5.92(s，1H)；LRMS(APCI+)m/z225[MH]+ 制备156 4-羟基-6-异丙基-吡喃-2-酮 将4-羟基-3-异丁酰基-6-异丙基-吡喃-2-酮(11.7g，52mmol)溶解于浓硫酸(40ml)中并在130℃搅拌15分钟。将所获得的黑色油冷却至室温然后进一步在冰浴中冷却至0℃，再在搅拌下添加200ml碎冰。将所得溶液用乙酸乙酯(3×200ml)萃取并将所合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤并在真空中蒸发为浅褐色油，使用乙酸乙酯中的戊烷3:1→30:70梯度作为洗脱液、通过柱色谱将其纯化以产生浅褐色油状的标题化合物，将其静置固化(6.1g，77％)。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ 1.20-1.22(d，6H，2.70-2.80(m，1H)，5.58(s，1H)，5.99(s，1H)；LRMS(APCI+)m/z 155[MH]+ 制备157 乙基-2，4-二氨基苄基-6-甲基-3-甲酸酯 将乙基-2，4-二氯-6-甲基-3-甲酸酯(100mg，0.43mmol)溶于乙腈(2ml)中，然后用三乙胺(2401，1.70mmol)及苄胺(1121，1.02mmol)处理，并将反应混合物在40℃、在氮气氛下搅拌18小时。冷却至室温后，将反应物倾注入水中并将混合物用乙酸乙酯(3×5ml)萃取。将所合并的有机物干燥(用MgSO4)且蒸发以产生粗油，用戊烷乙酸乙酯20:1-5:1洗脱、通过硅胶柱色谱纯化。获得透明油状的标题化合物(98mg，61％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.21(t，3H)，2.25(s，3H)，4.29(q，2H)，4.40，(d，2H)，4.78，(d，2H)，5.81(s，2H)，7.21-7.42(m，10H)，8.10(brs，1H)，8.30(brs，1H)；LRMSm/z(ESI)376[MH]+ 制备158 2，4-二氨基苄基-6-甲基-3-甲酸 将乙基-2，4-二氨基苄基-6-甲基-3-甲酸酯(40mg，0.11mmol)溶于甲醇(1ml)中，并用2N氢氧化钠溶液(601，0.12mmol)处理，并将反应混合物在65℃、在氮气氛下搅拌5小时。冷却至室温后，将反应物倾注入水中，使用2N盐酸将pH调节至6-7，并将混合物用乙酸乙酯(3×5ml)萃取。将所合并的有机物干燥(用MgSO4)且蒸发以产生灰白色固体的标题化合物(37mg，定量)。
1H-NMR(DMSO，400MHz)δ2.22(s，3H)，4.59，(d，2H)，4.64，(d，2H)，6.20(s，2H)，7.20-7.39(m，10H)；LRMS m/z(ESI)348[MH]+，346[M-H]- 制备159 6-苄基氨基-9-苄基-2-甲基-8-氧代-8，9-二氢-7H-嘌呤及4-苄基氨基-9-苄基-6-甲基-8-氧代-8，9-二氢-7H-嘌呤
将2，4-二氨基苄基-6-甲基-3-甲酸(30mg，0.09mmol)、二苯基膦酰基叠氮化物(25mg，0.09mmol)及三乙胺(141，0.10mmol)混合于甲苯中，并将反应物在氮气氛下、在111℃加热16小时。冷却至室温后，将反应物倾注入水中，并将混合物用乙酸乙酯(3×5ml)萃取。将所合并的有机物干燥(用MgSO4)以产生粗油，用戊烷:乙酸乙酯1:1洗脱、通过硅胶柱色谱法纯化，产生均为透明油状的各自的标题化合物(10mg(I)，11mg(II)，68％组合收率)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)(I)δ 2.39(s，3H)，4.7，(s，4H)，6.04(s，2H)，7.15-7.39(m，10H)；LRMS m/z(ESI)354[MH]+；(II)δ2.39(s，3H)，4.39，(d，2H)，5.01，(s，2H)，6.19(s，2H)，7.15-7.39(m，10H)。LRMS m/z(ESI)354[MH]+。
制备160 1-苄基-2-溴-1H-咪唑-5-碘-4-甲腈 将5-氨基-1-苄基-2-溴-1H-咪唑-4-甲腈(50mg，0.18mmol)溶于二碘甲烷(1ml)中并将混合物加热至100℃。然后用注射器将亚硝酸异戊酯(971，0.72mmol)逐滴添加至所加热的反应混合物中。观察到气体逸出。30分钟后，将反应物冷却至室温并在高真空下移除溶剂。用100％戊烷至73戊烷乙酸乙酯洗脱、通过硅胶柱色谱法纯化剩余的红色粗残余物。由此产生黄色油状标题化合物(40mg，60％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ 5.22(s，2H)，6.71(s，2H)，7.09(m，2H)，7.28-7.40(m，3H)；LRMS m/z(ESI)388/390[MH]+ 制备161 1-苄基-2-溴-5-(4-羟基丁-1-炔)-1H-咪唑-4-甲腈(I)及2-(4-氨基-1-苄基-2-溴-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-基)-乙醇(II) 将1-苄基-2-溴-1H-咪唑-5-碘-4-甲腈(39mg，0.1mmol)溶于乙腈(1ml)中并将混合物用三乙胺(201，0.15mmol)、Pd(PhCN)2Cl2(3.8mg，0.01mmol)及丁-1-炔-4-醇(91，0.12mmol)处理。然后将反应物在密封管中、在100℃加热2小时。将反应物冷却至室温并在真空下移除溶剂。然后将7N甲醇中的氨溶液添加至剩余粗褐色残余物中，并将反应物在密封管中、在120℃加热18小时。然后在真空下移除挥发性组分，产生粗褐色油。此物质的LRMS表明主要组分为环化物质(II)，m/z(ESI)347/349[MH]+。然后将此油用乙酸乙酯中的10％戊烷洗脱、通过硅胶柱色谱法纯化，产生黄色油状的标题化合物(I)(6mg)。化合物(II)无法自硅胶柱中回收。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)(I)δ 2.75(t，2H)，3.79(t，2H)，5.2(s，2H)，7.18(m，2H)，7.22-7.38(m，3H)；LRMS m/z(ESI)330/332[MH]+ 制备162 1-苄基-5-(-丁-4-羟基-2-酮-1-基)-1H-咪唑-2-甲氧基-4-甲腈将1-苄基-2-溴-5-(4-羟基丁-1-炔)-1H-咪唑-4-甲腈(6mg，0.02mmol)溶于甲醇(1ml)中并将混合物用甲醇钠(5mg，×s)处理。然后将反应物在65℃加热12小时。将反应物冷却至室温并将溶剂在真空下移除。然后将2N盐酸溶液添加至剩余的粗残余物中并将反应物在室温下搅拌2小时。然后在真空下移除挥发性组分，产生主要含有标题化合物的粗白色固体；LRMS m/z(ESI)300[MH]+。
制备163 2，6-二氯-4-(N-硝基)氨基-吡啶 在0℃、在氮气氛下将2，6-二氯-4-氨基吡啶(1.58g)溶解于硫酸(20ml)中，逐滴添加硝酸(2.5ml)。30分钟后，反应物变成橙色并将其缓慢倾注入冰水中。将沉淀物过滤，用水洗涤然后溶于乙酸乙酯中。然后将有机溶液用MgSO4干燥，过滤并在真空中蒸发以产生黄色固体的标题化合物(1.7g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 7.40(s，2H)，10.4(s，1H)。
制备164 2，6-二氯-4-氨基-5-硝基-吡啶 将2，6-二氯-4-(N-硝基)氨基-吡啶(1.7g)溶解于硫酸(10ml)中，并在90℃加热30分钟。将反应混合物冷却至室温，然后倾注入冰水中以产生沉淀物。将黄色固体滤出、收集、溶于乙酸乙酯中，然后用Na2CO3水溶液洗涤。然后将有机物再用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空中蒸发以产生黄色固体的标题化合物(1.45g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 5.70(s，2H)，6.70(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 209[MH]+ 制备165 2，6-二溴-4-氨基-5-硝基-吡啶 将2，6-二氯-4-氨基-5-硝基-吡啶(2g)溶解于HBr于乙酸(20mL)中的33％溶液中，并在90℃、在铁氟龙内衬容器中加热72小时。将反应混合物冷却至室温，倾注入冰水中以产生沉淀物。将所得固体滤出、收集、溶于乙酸乙酯中，然后用Na2CO3水溶液洗涤。然后将有机物再用盐水洗涤，然后用MgSO4干燥，过滤并在真空中蒸发以产生浅黄色固体的标题化合物(2g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 5.60(s，2H)，6.90(s，1H)；LRMS(ES+)m/z295，297，299[MH]+ 制备166 2，6-二溴-4-氯-5-硝基-吡啶 将2，6-二溴-4-氨基-5-硝基-吡啶(3g)溶解于浓盐酸(20ml)中，冷却至0℃。添加亚硝酸钠(3.5g)，并将反应混合物在0℃搅拌1小时。移除冰浴且经3小时将反应物加温至室温，然后通过添加乙酸乙酯(50ml)及水(100ml)骤冷。将有机层分离，用MgSO4干燥且过滤并在真空中蒸发为浅黄色油，将其使用35:1戊烷EtOAc作为洗脱液、通过柱色谱法纯化，以产生白色固体的标题化合物(2.2g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 7.65(s，1H)。
制备167 N-2，N-4-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 将2，6-二溴-4-氨基-5-硝基-吡啶(1.53g)溶解于THF(20ml)中，然后各以一份添加固体K2CO3(100mg)及苄胺(1.1ml)。然后将反应混合物在70℃加热16小时。在真空中移除溶剂，使用戊烷中的10％乙酸乙酯作为洗脱液、通过硅胶柱色谱法纯化粗残余物以产生黄色油状的标题化合物(1.2g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 4.45(d，2H)，4.78(d，2H)，6.20(s，1H)，7.20-7.41(m，10H)，9.41(s，1H)，9.50(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 413，415[MH]+ 制备168 4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯 将N-2，N-4-二苄基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(1g)溶解于甲醇与DMF(2:1，15ml)的混合物中，然后添加三乙胺(0.7ml)、三苯基膦(30mg)及乙酸钯(27mg)，并将混合物在60℃及100psi一氧化碳压力下加热16小时。将反应混合物冷却至室温，用Arbocel短塞过滤并在真空中蒸发以产生黄色残余物。使用乙酸乙酯中的8:1→2:1戊烷梯度作为洗脱液、通过硅胶柱色谱法纯化此残余物以产生浅黄色固体的标题化合物(0.5g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 3.91(s，2H)，4.58(s，1H)，4.85(d，2H)，6.85(s，1H)，7.05-7.25(m，10H)，9.3(t，1H)，9.55(t，1H)；LRMS(ES+)m/z 393[MH]+ 制备169 5-氨基-4，6-苄基氨基-吡啶-2-甲酸甲酯 将4，6-双-苄基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(800mg)溶解于甲醇(30ml)中，并将阮内镍(80mg)以一份添加，并将混合物在室温下、在60psi氢气压力下搅拌3小时。将反应混合物用Arbocel短塞过滤并将滤液在真空中蒸发以产生黄色残余物状的标题化合物(0.75g)，其无需进一步纯化便可使用；LRMS(ES+)m/z 363[MH]+ 制备170 1-苄基-4-苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯 将5-氨基-4，6-苄基氨基-吡啶-2-甲酸甲酯(0.75g)溶解于乙腈(40ml)中，并将1，1-羰基二咪唑(500mg)以一份添加，并将混合物在80℃加热6小时。将反应混合物在真空中蒸发以产生残余物，使用乙酸乙酯中的1:1戊烷作为洗脱液、通过硅胶柱色谱法纯化，以产生白色固体的标题化合物(100mg)。
1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ 3.75(s，3H)，4.45(d，2H)，4.98(s，2H)，6.48(t，1H)，7.18(s，1H)，7.22-7.47(m，10H)；LRMS(ES+)m/z 389[MH]+ 制备171 1-苄基-4-苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢[4，5-c]吡啶-6-甲酸 将1-苄基-4-苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯(0.03g)溶解于甲醇(1ml)及1N NaOH溶液(2ml)中，并将混合物在40℃搅拌。2小时后，添加2ml的2N HCl，促使固体沉淀析出。将此固体滤出并在真空中干燥以产生白色固体的标题化合物(25mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 4.30(s，2H)，4.90(s，2H)，7.10-7.35(m，11H)，10.80(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 375[MH]+ 制备172 1-苄基-4-苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸环丙基甲基酰胺 将1-苄基-4-苄基氨基-2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯(0.05g)溶解于环丙基甲胺(1ml)并在反应瓶中、在80℃加热3小时。在真空中移除溶剂，添加乙醚，促使固体沉淀析出。将此固体滤出并在真空中干燥以产生40mg白色固体。使用乙腈、水与二乙胺的混合物作为洗脱液、通过制备性HPLC将此固体纯化，以产生白色固体的标题化合物(18mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 0.22(q，2H)，0.55(q，2H)，1.05(m，1H)，3.22(t，2H)，4.35(d，2H)，4.90(s，2H)，5.90(t，1H)，7.10-7.35(m，11H)，7.85(t，1H)；LRMS(ES+)m/z 428[MH]+ 制备173 4-溴-2-氯-6-三氟甲基-吡啶-3-基胺 将6-三氟甲基-吡啶-3-基胺(150g，925mmol)混悬于500ml乙腈中。将N-氯代琥珀酰亚胺(124g，925mmol)添加至该溶液中，并将混合物在80℃加热2小时，然后添加N-溴代琥珀酰亚胺(165g，925mmol)并将混合物在80℃再加热3小时。将反应混合物冷却至环境温度，真空浓缩并在100ml乙醚中研磨，通过过滤移除沉淀物。将所得滤液真空浓缩，并用庚烷:EtOAc 4:1洗脱、通过二氧化硅柱色谱纯化，以产生暗红色油状标题化合物(220g，86％)。
1H NMR(CDCl3)δ 4.90(bs，2H)，7.67(s，1H)；LRMS(ES)m/z 275/277[MH]+ 制备174 N*4*-苄基-2-氯-6-三氟甲基-吡啶-3，4-二胺 在氟化铯(46.3g，305mmol)及苄胺(66.6ml，610mmol)存在下，将4-溴-2-氯-6-三氟甲基-吡啶-3-基胺(84g，300mmol)置于500ml DMSO中搅拌。将所得褐色混悬液在150℃加热16小时。将1500ml水添加至被冷却的混悬液中并将混合物用2×500ml乙醚萃取。将所合并的有机萃取物干燥(用MgSO4)，真空浓缩并用庚烷:EtOAc 4:1-2:1洗脱、通过二氧化硅柱色谱法纯化，以产生浅褐色固体的标题化合物(15.8g，17％)。将褐色油状的非所需异构体以同样方式分离(51.0g，48％)。
1H NMR(CDCl3)δ 3.76(bs，2H)，4.39-4.41(d，2H)，4.53(bs，1H)，6.85(s，1H)，7.34-7.40(m，5H)；LRMS(ES)m/z 302[MH]+。
制备175 4，6-二羟基-2-三氟甲基-烟酸乙酯 在一个三颈瓶中，将叔丁醇钾(5.8g，51.9mmol)混悬于100ml四氢呋喃中，缓慢添加1，3-丙酮二甲酸二乙基酯(10g，49.5mmol)于30ml四氢呋喃中的溶液。一旦添加结束，则将混合物在室温下搅拌30分钟。在第二个配有与第一个三颈瓶连接的气体出口的三颈瓶中，将2，2，2-三氟乙酰胺(11.2g，98.9mmol)溶于80ml吡啶中，缓慢添加三氟醋酐(20.8g，98.9mmol)于30ml吡啶中的预混溶液，所形成气体(2，2，2-三氟甲基乙腈)直接鼓泡通入第一个三颈瓶。一旦添加结束，将第二个三颈瓶中的混合物在室温下搅拌30分钟，然后在真空中移除溶剂，并将残余物倾注入100ml的4M HCl中。将混合物用150ml乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用硫酸镁干燥并在真空中移除溶剂。将残余物在二氯甲烷中研磨，并将沉淀物过滤以产生3g固体的标题化合物。
1H NMR(MeOD)12.5(s，1H)，12.4(宽单峰，1H)，7.1(s，1H)，5.05(q，2H)，2.05(t，3H)；LRMS(ES+)m/z 252[MH]+ 制备176 4，6-二羟基-5-硝基-2-三氟甲基-烟酸乙酯 将4，6-二羟基-2-三氟甲基-烟酸乙酯(1g，3.9mmol)溶于10ml浓硫酸中，并在室温下逐滴添加2ml发烟硝酸。一旦添加结束，则将混合物在室温下搅拌30分钟。然后将混合物倾注入碎冰中，收集白色沉淀物，溶于50ml乙酸乙酯中，用50ml水及50ml盐水洗涤，用硫酸镁干燥并在真空中移除溶剂以产生1.1g白色固体的标题化合物。
1H NMR(d6 DMSO)4.25(q，2H)，1.20(t，3H)。
制备177 6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇 将4，6-二羟基-2-三氟甲基-烟酸乙酯(15g，59.7mmol)溶于250ml浓HCl中，并将混合物在115℃搅拌3天。将混合物冷却至0℃，添加0.88氨直至pH值为～7。将所形成的固体过滤，用水洗涤，与甲苯共沸，并在真空中干燥以产生白色固体的9g标题化合物。
1H NMR(d6 DMSO)6.7(s，1H)，6.1(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 180[MH]+ 制备178 (2-氨基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 将(2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(715mg/1.955mmol)、乙烯基三氟硼酸钾(415mg/3.098mmol)、[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II).CH2Cl2(90mg/0.11mmol)及三乙胺(0.28ml/2.0mmol)混合于iPrOH(8.0ml)中，并在50℃、在N2气氛下加热24小时。直接预吸附于二氧化硅上且通过柱色谱纯化以产生紫色树脂状的标题化合物(270mg)。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ 1.15-1.20(多重峰，3H)，2.50(s，3H)，4.05-4.15(多重峰，2H)，4.90-4.95(多重峰，2H)，5.60(d，1H)，6.20-6.30(多重峰，1H)；6.55-6.65(多重峰，2H)，7.20-7.25(d/1H)，7.70(多重峰/1H)，8.35(s/1H)；LRMS(ES)m/z358[MH]+。
制备179 (2-氨基-6-甲酰基-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 将(2-氨基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(270mg/0.755mmol)溶于丙酮(5ml)/水(5ml)中，添加四氧化锇(2.5wt％于tBuOH中)(0.10ml/0.008mmol)。搅拌5分钟以产生褐色溶液，然后添加偏高碘酸钠(500mg/3.47mmol)，将橙色混悬液搅拌1小时。在EtOAc(100ml)与硫代硫酸钠五水合物(20wt％于H2O中)(50ml)之间分溶。收集有机物，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤且浓缩为褐色树脂。用EtOAc洗脱、通过柱色谱法纯化产生黄色油状标题化合物(220mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.15-1.20(多重峰，3H)，2.55(s，3H)，4.10-4.20(多重峰，2H)，4.95(s，2H)，6.06-6.15(br s，2H)，7.05(s，1H)；7.10-7.15(d，1H)，7.60(d/1H)，8.35-8.40(s/1H)，9.75(s/1H)；LRMS(AP)m/z 360[MH]+。
制备180 (2-氨基-3-硝基-6-噁唑-5-基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 将(2-氨基-6-甲酰基-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(190mg/0.529mmol)溶于MeOH(5ml)中。依次添加(4-甲苯磺酰基)甲胩(124mg/0.634mmol)、无水碳酸钾(200mg/1.45mmol)。在N2气氛下搅拌1小时，然后真空浓缩。在EtOAc(100ml)与H2O(50ml)之间分溶。收集有机物，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤且浓缩为黑色树脂。用90:10 DCM/MeOH洗脱、通过柱色谱法纯化产生粗褐色固体的标题化合物(135mg)；LRMS(ES)m/z399[MH]+。
生物数据 通过如下详述的PBL/HCV复制子生物检定法来确认式(I)化合物及其药学上可接受的盐、溶剂化物和多晶型物调节TLR7受体活性的能力，其中使用以下的缩略语 EMCV脑心肌炎病毒 IRES内部核糖体进入位点 HuhHuh-7人肝瘤细胞株7(用于产生HCV复制子细胞株的亲代细胞) luc荧光素酶 ubi泛素 neo新霉素 ET谷氨酸、苏氨酸(用于检定的复制子中的细胞培养适应性突变) RPMI-FCSRoswell Park Memorial Institute(PBL的细胞培养基)-胎牛血清 PBL外周血淋巴细胞 PBL含有浆细胞样树突状细胞亚群，其在感染期间是天然干扰素产生细胞，因此它是描绘干扰素诱导剂的优良模型。作为一个极敏感的抗病毒生物试验，检测取自PBL的上清液在HCV复制子系统中的抗病毒活性。抗病毒EC50值定义为在预定量的PBL培养基传递至含有HCV复制子的细胞株后，使得HCV复制子含量减少50％时施用于PBL的测试化合物的浓度。尽管含有HCV复制子的细胞对PBL条件培养基完全响应，但其并不对已知的TLR激动剂如雷西莫特(Resiquimod)和咪喹莫特(Imiquimod)直接响应。
HCV复制子(Huh-5-2[I389luc-ubi-neo-NS3-3’/ET])为HCV复制的体外模型，其中荧光素酶报道分子整合入HCV序列中，并稳定地保留在人肝瘤细胞株Huh-7中。萤火虫荧光素酶报道分子表达为荧光素酶-泛素-新霉素磷酸转移酶融合蛋白，该融合蛋白可被宿主蛋白酶分裂而释放荧光素酶。该复制子还含有内部EMCV IRES，其驱动HCVNS3-5B聚合蛋白的转译，该蛋白具有细胞培养适应性突变能力以容许高克隆率。荧光素酶产量已显示与宿主细胞中存在的HCV RNA的含量直接成正比。萤火虫荧光素酶活性使用Promega制造的Bright-GloTM荧光素酶检测系统进行检测。
具体来说，将1-3mg的测试化合物溶于100％(v/v)DMSO中，至最终浓度通常为1、4或10mM或10mM以上，取决于试验中所需起始浓度。从母液中制备化合物在100％ DMSO中的初始3倍连续稀释液系列。再将该稀释液系列进一步用完整RPMI-FCS稀释100倍。因此，试验中DMSO的终浓度为0.1％，100％ DMSO稀释液系列中测试化合物的终浓度为1/1000。
PBL系以5×105/孔/90μl接种于含有上述制备的化合物的检测板(96孔底部透明的TC级)中而进行制备，孵育24小时。
LucUbiNeo HCV复制子细胞以104/孔/90μl接种。将其孵育24小时。24小时后，从PBL检测板中取10μl培养基转移至HCV复制子检测板中并继续孵育48小时。
有利的是本发明的化合物具有针对TLR7受体而非一种或多种其它已知的Toll样受体的选择性。还有利的是本发明的化合物具有针对TLR7受体而非一种或多种细胞激酶和/或一种或多种嘌呤能受体诸如腺苷或磷酸二酯酶受体的选择性。
实施例1、2、12及15经试验发现对TLR7受体而非其它所有已知的Toll样受体具有选择性。
此外，实施例1、2、12及15经试验发现对TLR7受体而非以下靶标具有选择性MEK(丝裂素活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶)、CDK1(周期素依赖性激酶-1)、CDK2(周期素依赖性激酶-2)、JNK(应激活化蛋白激酶)、MSK(丝裂素和应激活化蛋白激酶)、MSK-1、SGK、AMPK、MLCK、CHK-2及磷酸二酯酶PDE3、PDE4及PDE5。
此外，实施例12及15经试验发现对TLR7受体而非MAP(丝裂素活化蛋白激酶)具有选择性。
此外，实施例15经试验发现对TLR7受体而非所有已知的腺苷受体A1、A2a、A2b及A3具有选择性。
权利要求
1.式(I)的化合物，
或者该化合物或互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物，其中
(a)Y为化学键，R3选自芳基、(C1-C6)烷基和-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C4)烷基；或
(b)Y为(C1-4)亚烷基，R3选自芳基、(C3-C7)环烷基和3-10元杂环基；
Z为氧或不存在；
R1选自H、卤素、OH、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-NHSO2R6、-NR6R7、-C(O)R6、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8、芳基和3-10元杂环基；
R2选自H、卤素、OH、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-NR6R7、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8和3-10元杂环基；或
R1与R2可连接形成(C2-C5)亚烷基连接，该连接任选并入1或2个各自独立地选自N、O和S中的杂原子；
R5不存在且R4选自H、(C3-C7)环烷基、芳基、-(CH2)芳基、-C(O)R9、-CO2R9、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亚烷基-O-CO2R9)、-C(O)NR9R10、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)NR9R10和-(C1-C6)亚烷基-O-P(O)(OH)2；或
R4不存在且R5选自R9、-C(O)R9、-CO2R9、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亚烷基-O-CO2R9、-C(O)NR9R10、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)NR9R10和-(C1-C6)亚烷基-O-P(O)(OH)2；
R6和R7各自独立地选自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基和-(C1-C6)亚烷基(C3-C7)环烷基；或R6和R7与它们所连接的氮一起形成3-6元饱和杂环，该饱和杂环任选含有另外1或2个选自N、O和S中的杂原子；
R8选自(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基和苯基；
R9和R10各自独立地选自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、芳基、-(CH2)芳基和3-10元杂环基；或R9和R10与它们所连接的氮一起形成3-10元杂环基；
R11和R12独立地选自H和(C1-C6)烷基；或R11和R12与所连接的N一起形成3-6元饱和杂环基，该饱和杂环基任选含有另外1或2个选自N、O和S中的杂原子；
该烷基、环烷基、烷氧基、芳基和杂环基任选被一或多个独立地选自如下的原子或基团取代:卤素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-OH、-NR11R12、-(C1-C6)亚烷基-NR11R12、芳基和3-10元杂环基；
其条件为，若R1和R2为H、且Z和R5不存在，则:
(a)当Y-R3为乙基时，R4不为甲基；且
(b)当Y-R3为甲基时，R4不为H或甲基。
2.如权利要求1的化合物，其中，R1选自
(a)H；
(b)CN；
(c)卤素
(d)任选被1-3个卤原子取代的(C1-C6)烷基；
(e)四氢呋喃氧基；
(f)被含有1-3个独立地选自N、O和S中的杂原子的3-6元饱和杂环基取代的(C1-C6)烷基，其中该杂环基任选被1-3个独立地选自CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基和-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基中的基团取代；
(g)-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C6)烷基；
(h)-(C1-C4)亚烷基-N(H)-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C4)烷基；
(i)任选被OH或环丙基取代的(C1-C6)烷氧基；
(j)(C3-C7)环烷基；
(k)-(C1-C4)亚烷基(C3-C7)环烷基；
(l)-C(O)NR6R7；
(m)-CO2R6；
(n)-C(O)R6；
(o)包含(i)1-4个氮原子、或(ii)1-2个氮原子及1个氧原子或硫原子、或(iii)1个氧原子或硫原子的5元芳族杂环基；或者包含1-3个氮原子的6元芳族杂环基，该5和6元芳族杂环基任选被1-3个独立地选自卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-OH、-NR11R12和-(C1-C6)亚烷基-NR11R12中的原子或基团取代；
(p)任选被1-3个卤原子取代的苯基；
(q)-NR6R7；
(r)-NH-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C6)烷基；
其中
R6、R7、R11和R12如权利要求1所定义。
3.如权利要求1或2的化合物，其中，R1选自
(a)H；
(b)CN；
(c)卤素
(d)任选被1-3个卤原子取代的(C1-C6)烷基；
(e)四氢呋喃氧基；
(f)被任选被1或2个甲基取代的吗啉、哌嗪或吡咯烷取代的(C1-C6)烷基；
(h)-(C1-C4)亚烷基-N(H)-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C4)烷基；
(i)任选被OH或环丙基取代的(C1-C6)烷氧基；
(j)(C3-C7)环烷基；
(k)-(C1-C4)亚烷基(C3-C7)环烷基；
(l)-C(O)NR6R7；
(m)-CO2R6；
(n)-C(O)R6；
(o)包含(i)1-4个氮原子、或(ii)1-2个氮原子及1个氧原子或硫原子、或(iii)1个氧原子或硫原子的5元芳族杂环基；或者包含1-3个氮原子的6元芳族杂环基，该5和6元芳族杂环基任选被1-3个独立地选自卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-OH、-NR11R12和-(C1-C6)亚烷基-NR11R12中的原子或基团取代；
(p)任选被1-3个卤原子取代的苯基；
(q)-NR6R7；
(r)-NH-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C6)烷基；
其中，
R6、R7、R11和R12如权利要求1所定义。
4.如上述任一项权利要求的化合物，其中，R1选自:被1-3个氟原子取代的甲基或乙基、环丙基、-(C1-C2)亚烷基-O-(C1-C2)烷基、任选被OH或环丙基取代的(C1-C4)烷氧基、-COCH3、-CH2OCH3、和-CO2CH3。
5.如上述任一项权利要求的化合物，其中，R1为环丙基或CF3。
6.如权利要求1-3中任一项的化合物，其中，R1为包含(i)1-4个氮原子、或(ii)1-2个氮原子及1个氧原子或硫原子、或(iii)1个氧原子或硫原子的5元芳族杂环基，该5元芳族杂环基任选被1-3个独立地选自如下的原子或基团取代:卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C3)亚烷基-O-(C1-C4)烷基、-(C1-C4)亚烷基-OH、-NR11R12和-(C1-C3)亚烷基-NR11R12，其中，R11和R12如权利要求1所定义。
7.如权利要求6的化合物，其中，R1选自咪唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑、吡唑和噻唑，它们均任选被1-3个独立地选自如下的原子或基团取代:卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C3)亚烷基-O-(C1-C4)烷基、-(C1-C4)亚烷基-OH和-(C1-C3)亚烷基-NR11R12，其中，R11和R12如权利要求1所定义。
8.如权利要求7的化合物，其中，R1选自未被取代的噁唑基、三唑、吡唑和噻唑。
9.如权利要求8的化合物，其中，R1为噁唑基。
10.如上述任一项权利要求1的化合物，其中，R2选自
(a)H；
(b)卤素；
(c)任选被1-3个卤原子取代的(C1-C6)烷基；
(d)四氢呋喃氧基；
(e)被含有1-3个独立地选自N、O和S中的杂原子的3-6元饱和杂环基取代的(C1-C6)烷基，其中该杂环基任选被1-3个独立地选自CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基和-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基中的基团取代；
(f)-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C6)烷基；
(g)-(C1-C4)亚烷基-N(H)-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C4)烷基；
(h)任选被OH或环丙基取代的(C1-C6)烷氧基；
(i)(C3-C7)环烷基；
(j)-(C1-C4)亚烷基(C3-C7)环烷基；
(k)-C(O)NR6R7；
(l)-CO2R6；
(m)-C(O)R6；
(n)包含(i)1-4个氮原子、或(ii)1-2个氮原子及1个氧原子或硫原子、或(iii)1个氧原子或硫原子的5元芳族杂环基；或者包含1-3个氮原子的6元芳族杂环基，该5和6元芳族杂环基任选被1-3个独立地选自卤素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-OH、-NR11R12和-(C1-C6)亚烷基-NR11R12中的原子或基团取代；
(o)任选被1-3个卤原子取代的苯基；
(p)-NR6R7；
(q)-NH-(C1-C4)亚烷基-O-(C1-C6)烷基；
其中
R6、R7、R11和R12如权利要求1所定义。
11.如上述任一项权利要求的化合物，其中，R2为H或甲基。
12.如上述任一项权利要求的化合物，其中，R2为H。
13.如上述任一项权利要求的化合物，其中，Z不存在。
14.如上述任一项权利要求的化合物，其中，Y为亚甲基；且R3选自:芳基；包含(i)1-4个氮原子、或(ii)1-2个氮原子及1个氧原子或硫原子、或(iii)1个氧原子或硫原子的5元芳族杂环基；和包含1-3个氮原子的6元芳族杂环基；该芳基和芳族杂环任选被1-3个独立地选自如下的原子或基团取代:卤素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-OH、-NR11R12、-(C1-C6)亚烷基-NR11R12、芳基和3-10元杂环基，其中，R11和R12如权利要求1所定义。
15.如上述任一项权利要求的化合物，其中，Y为亚甲基；且R3选自苯基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基和吡嗪基，其每一个任选被1-3个独立地选自卤素、(C1-4)烷基、(C1-C4)烷氧基和CF3中的原子或基团取代。
16.如上述任一项权利要求的化合物，其中，Y为亚甲基；且R3选自苯基、吡啶-3-基和6-甲基-吡啶-3-基。
17.如上述任一项权利要求的化合物，其中，R5不存在；且
R4选自-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亚烷基-O-CO2R9、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)NR9R10和-(C1-C6)亚烷基-O-P(O)(OH)2，其中，R9和R10如权利要求1所定义。
18.如上述任一项权利要求的化合物，其中，R4为H且R5不存在。
19.如权利要求1-16中任一项的化合物，其中，R4不存在；且R5选自-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亚烷基-O-CO2R9、-(C1-C6)亚烷基-O-C(O)NR9R10和-(C1-C6)亚烷基-O-P(O)(OH)2，其中，R9和R10如权利要求1所定义。
20.如权利要求1的化合物，其中:
Y为亚甲基；
R1选自CF3、环丙基和噁唑；
R2为H；
R3选自苯基、吡啶-3-基和6-甲基-吡啶-3-基；
R4为H；且
R5不存在。
21.式(Ic)的化合物，
或其互变异构体，或者该化合物或互变异构体的药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物，
其中，
Y为亚甲基；
R1和R2各自独立地选自H、卤素、OH、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-NR6R7、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8、芳基和3-10元杂环基；或
R1与R2可连接形成(C2-C5)亚烷基连接，该连接任选并入1或2个各自独立地选自N、O和S中的杂原子；
R3选自(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、芳基和3-10元杂环基；
R4选自R9、-C(O)R9、-CO2R9和-C(O)NR9R10，R5不存在；或
R5选自R9、-C(O)R9、-CO2R9和-C(O)NR9R10，R4不存在；
R6和R7各自独立地选自H和(C1-C6)烷基；
R8选自(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基和苯基；
R9和R10各自独立地选自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、芳基、-(CH2)芳基和3-10元杂环基；或
R9和R10与它们所连接的氮一起形成3-10元杂环基；
上述烷基、环烷基、烷氧基、芳基及杂环基任选被一或多个独立地选自以下基团的基团取代:卤素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亚烷基-O-(C1-C6)烷基、-NH(C1-C6)烷基、-N((C1-C6)烷基)2、芳基和3-10元杂环基；
其条件为，若R1和R2为H，Z和R5不存在，则:
(a)当Y-R3为乙基时，R4不为甲基；且
(b)当Y-R3为甲基时，R4不为H或甲基。
22.如权利要求21的化合物，其中，R1和R2各自独立地选自:H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、-CO2H、-CO2(C1-C6)烷基和-C(O)NH(C1-C6)亚烷基(C3-C7)环烷基；或R1与R2可连接形成(C2-C5)亚烷基连接。
23.如权利要求22的化合物，其中，R1选自H、甲基、正丙基、异丙基、环丙基、-CO2H、-CO2CH3和-C(O)NH(CH2)环丙基；且R2选自H和甲基；或R1与R2可连接形成C5-亚烷基连接。
24.如权利要求21-23的化合物，其中，R3为芳基，其任选被一或多个独立地选自以下基团的基团取代:卤素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)环烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、-NH(C1-C6)烷基、-N((C1-C6)烷基)2、芳基和3-10元杂环基。
25.如权利要求24的化合物，其中，R3为苯基，其任选被一或多个独立地选自卤素和CF3中的基团取代。
26.如权利要求1的式(I)化合物，其选自:
4-氨基-1-苄基-6-环丙基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮；
4-氨基-1-苄基-6-噁唑-2-基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮；及
4-氨基-1-苄基-6-三氟甲基-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮；
或该化合物的药学上可接受的盐或溶剂化物。
27.药物合并物，包含如上述任一项权利要求的式(I)化合物或该化合物的药学上可接受的盐或溶剂化物以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。
28.如权利要求27的药物合并物，其包括一种或多种其它治疗剂。
29.如权利要求28的药物合并物，其中上述一种或多种其它治疗活性剂选自HCV NS3A蛋白、HCV NS5A蛋白、HCV NS4B蛋白、HCV聚合酶、HCV金属蛋白酶、HCV丝氨酸蛋白酶、HCV解螺旋酶和p7蛋白的抑制剂。
30.如权利要求1-26中任一项的式(I)化合物或该化合物的药学上可接受的盐或溶剂化物，用作药物。
31.如权利要求1-26中任一项的式(I)化合物或该化合物的药学上可接受的盐或溶剂化物，用于治疗与TLR7受体的调节相关的疾病或病症。
32.如权利要求31的化合物，其中，所述疾病或病症为选自以下各病毒的病毒感染:腺病毒、疱疹病毒、痘病毒、正粘液病毒、副粘液病毒、冠状病毒、乳多泡病毒、乳头状瘤病毒、嗜肝DNA病毒、黄病毒、逆转录病毒和丝状病毒。
33.如权利要求31的化合物，其中，所述疾病或病症为丙型肝炎。
34.如权利要求1-26中任一项所述的式(I)化合物或该化合物的药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗与TLR7受体的调节相关的疾病或病症的药物中的用途。
35.在哺乳动物中治疗与TLR7受体的调节相关的疾病或病症的方法，其中包括向所述哺乳动物给药治疗有效量的权利要求1-26中任一项所述的式(I)化合物或该化合物的药学上可接受的盐或溶剂化物。
36.式(I)的化合物的制备方法，
其中，在式I、XVIII、XVIIIa、XIX、XIXa、XXa、XXb、XIV、XV、LIV和LXIII各者中，Y-R3如权利要求14所定义，R1如权利要求2所定义，R2如权利要求10所定义，PG1和PG2为氮保护剂且R13为(C1-6)烷基；
该方法包括:
(a)使式(XVIII)或(XVIIIa)的化合物与羰基供给剂反应，
以形成相应的式(XIX)或(XIXa)化合物，
然后，将式(XIX)或(XIXa)的化合物脱保护；或者
(b)使式(XXa)的化合物还原，
以形成式(XXb)的化合物，
然后通过用质子酸处理使式(XXb)的化合物环化；或者
(c)使式(XIV)的化合物还原，
以形成式(XV)的化合物，
然后在羰基部分存在下使式(XV)的化合物环化；或者
(e)在二苯基膦酰基叠氮化物存在下，使式(LIV)的化合物环化为上述相应的式(XIXA)的化合物，然后将氨基保护基脱保护，
或者
(f)使式(LXIII)的化合物水解，
37.式XVIII、XVIIIa、XIX、XIXa、XXa、XXb、XIV、XV、LIV和LXIII的化合物，其中，Y-R3如权利要求14所定义，R1如权利要求2所定义，R2如权利要求10所定义，PG1和PG2为氮保护剂且R13为(C1-6)烷基。
38.式XVIII、XVIIIa、XIX、XIXa、XXa、XXb、XIV、XV、LIV和LXIII的化合物，其中，Y-R3如权利要求15或16所定义，R1如权利要求4-6中任一项所定义，R2为H或甲基，PG1和PG2为氮保护剂且R13为(C1-6)烷基。
全文摘要
本发明涉及式(I)的免疫反应调节剂，其选择性地通过对Toll样受体(TLR)的激动而发挥作用；还涉及其用途、其制备方法、其制备中所使用的中间体以及含有该抑制剂的合并物。这些抑制剂可用于各种治疗领域，包括治疗诸如肝炎(例如，HCV、HBV)等传染性疾病、与遗传学相关的病毒感染以及癌症。
文档编号C07D213/80GK101384593SQ200780005609
公开日2009年3月11日 申请日期2007年2月5日 优先权日2006年2月17日
发明者P·琼斯, D·C·普赖德, T·D·特兰 申请人:辉瑞有限公司