新型二苯乙烯类化合物及其制备方法

专利名称：：新型二苯乙烯类化合物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一类新型的二苯乙烯类化合物，及其制备方法和它们在制备治疗肿瘤的药物中的用途。
背景技术：
：已知结构中含有二苯乙烯母核的化合物具有预防心脏病、抑制血小板凝聚、调控脂质和脂蛋白代谢、抗氧化及治疗肿瘤等方面的作用，这些作用被PhilippedeMedina等人在#ed6Te瓜2005，4《287-291;MarinellaRoberti等人在/.Oe瓜2003,46,3546-3554;AGosslau等人在5r"is//oi/77WCa/7car.2005，513—521中公开报道。近年来，化学家们以二苯乙烯为母核设计合成了一系列具有重要生理活性的二苯乙烯类化合物，这类化合物对良性、恶性肿瘤表现出较好的预防和治疗作用。M.Cushman等人曾在,#edC/e瓜1991，■《2579-2588中报道过，具有二苯乙烯母核的(f)-3，4，5-三甲氧基-4'-氨基二苯乙烯具有抗肿瘤活性。本发明人经过长期试验研究，发现一类抗肿瘤活性良好的新型二苯乙烯类化合物，并基于该发现完成本发明。
发明内容本发明一方面提供一种新型的二苯乙烯类化合物，所述化合物具有式I的结构5R3式I其中R'、W或R3可以相同或不同，分别为H原子、烷基或烷氧基；R4为HOo人o原子或一WW基。R1、R2或R3优选为H原子或烷氧基；更优选R1、R2或R3同时为烷氧基或R'、R2或R3其中二者为烷氧基，另一个为氢。在这里列举式I中的一些化合物如下化合物AH3CO、化合物BH3cd化合物c化合物D本发明另一方面提供所述新型二苯乙烯类化合物的制备方法，所述方法包括下列反应<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>该反应将反应底物氨基二苯乙烯类化合物与DMDO-Br进行亲核取代反应。在目标化合物制备过程中，当氨基二苯乙烯类化合物与DMDO-Br物质的量比约为1:1时，主要生成一取代产物；当二者物质的量比约为1:2时，主要生成二取代产物。其中所用的4-溴甲基-5-甲基-1,3-二氧环戊烯-2-酮(DMDO-Br)由4-氯甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮(DMD0-C1)与NaBr反应而得到，反应如下所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>所述方法具体包括如下步骤(1)4-氯甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮与溴化钠在有机溶剂中反应，生成4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮和氯化钠；(2)向步骤(1)的反应混合物中加入丙酮使生成的氯化钠析出，过滤后得4-溴甲基-5-甲基-l,3-二氧环戊烯-2-酮的溶液，待用；(3)将步骤(2)中的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮的溶液加入到含有4'-氨基二苯乙烯衍生物和KHC03的有机溶剂中进行反应，薄层色谱跟踪反应，至反应混合物组成不再有明显变化，加水终止反应，分离纯化得式I的化合物；其中R1、R2、^与上述定义相同。上述步骤中所用的有机溶剂为N，N-二甲基甲酰胺。本发明再一方面提供所述新型二苯乙烯类化合物治疗肿瘤的用途，所述肿瘤选自宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌、头颈癌、卵巢癌、前列腺癌、结直肠癌、生殖泌尿道癌、黑素瘤、鳞状细胞癌、星形细胞癌、Kaposi肉瘤、成胶质细胞癌，本发明的化合物或组合物尤其对宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌等具有良好的治疗作用。本发明再一方面提供一种治疗肿瘤的药物组合物，所述组合物含有所述式I的新型二苯乙烯类化合物和药学上可接受的辅料。本发明提供的组合物可以制成口服制剂、注射剂和外用制剂等多种制剂形式。合适的口服制剂有片剂、胶囊、混悬液等形式；合适的注射剂有注射液、冻干粉剂等形式；适宜的外用制剂有乳膏、软膏、洗剂等形式。各种制剂中可以包含药物制剂领域普遍使用的药学上可接受的载体、辅剂，例如，固态制剂中可包含填充剂、崩解剂、粘合剂、助流剂等；液态制剂中可包含杀菌剂、表面活性剂等。前提条件是所有辅料都必须无毒、无药理活性并且与相应的剂型相适宜。本发明中的术语"院基"是指含有l一6个碳原子的饱和脂肪烃基，包括直链和支链烷基的非限制性实例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基或叔丁基等。所述的垸氧基为含有1一6个碳原子的垸氧基，包括直链和支链烷氧基，代表性的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基等。本发明提供的式I新型二苯乙烯类化合物制备工艺简单，重现性好，抗癌活性试验研究结果表明此类化合物具有良好的抗肿瘤活性，特别是对Hda肿瘤细胞的增殖抑制活性较好，具有开发成治疗人宫颈癌药物的前景。本发明化合物在代谢中有突出的优点，毒性较小，生物利用度高，更易于开发成药品。具体实施例方式下面以具体实施例对本发明作进一步详细说明，但本
发明内容不限于这些实施例。本发明实施例中所用的0)-3，4,5-三甲氧基-4'-氨基-1，2-二苯乙烯、(f)-3,4-二甲氧基-4'-氨基-1，2-二苯乙烯为本发明人分别以3，4,5-三甲氧基苯甲醛、3，4-二甲氧基苯甲醛及对硝基甲苯为原料合成，具体合成方法参照[赖宜天，张喜全，郭键，李宝林.化学试剂，2007,29(5):257-259,262]*,其它所用试剂均为分析纯。化合物结构确定所用的核磁共振仪为BrukerAvance300超导核磁共振仪，TMS作为内标；红外光谱采用Nicolet170SXFT-IR红外光谱仪测定；熔点采用WRS-113数字熔点测定仪测定(熔点未进行校正)；元素分析在VarioELIII元素分析仪(德国元素分析系统公司)上进行测定。实施例l:化合物A的制备取0.82g(5.50mmol)4-氯甲基-5-甲基-1,3-二氧环戊烯-2-酮，1.15g(11.00mmol)溴化钠，2.0mLDMF于25mL的烧瓶中，25。C下，搅拌1.5小时后加入1.0mL丙酮，继续搅拌1小时；滤掉固体后得4-溴甲基-5-甲基-l,3-二氧环戊烯-2-酮溶液，待用。取1.28g(5.00,1)(f)-3,4-二甲氧基-4'-氨基-1,2-二苯乙烯，0.96g(9.50咖o1)KHC03，40.0mLDMF于50mL的烧瓶中，25。C，在剧烈搅拌下，缓慢滴加上述制备的4-溴甲基-5-甲基-1,3-二氧环戊烯-2-酮溶液，加入的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮与(f)-3，4_二甲氧基-4'-氨基-1,2-二苯乙烯的摩尔比约为l:1。加毕25-C下继续搅拌，TLC跟踪反应，直至反应物组成不再有明显变化，加水40.0mL后，用乙酸乙酯萃取。有机层用5%盐酸洗涤三次，再用饱和食盐水洗涤至中性。有机层用无水硫酸镁干燥后浓縮至干；浓縮物经硅胶柱色谱层析纯化后得到浅黄色固体0.35g，目标化合物产率19.1%，熔点157.9158.7。C;'H丽R(300MHz,DMSO-cUS:2.15(s，3H，-CH3)，3.75(s,3H,-0CH3),3.80(s，3H，-OCH3),4.14(s,2H，—CH2—),6.22(s，1H，—NH-)，6.63(d，2H，/:7.4Hz，2，，6，-Ar-H)，6.84—6.99(m,4H，-CH:CH-，5,6-Ar-H)，7.14(s，1H,2-Ar-H),7.32(d，2H，/=7.4Hz,3，，5，-Ar-H);1:iCNMR(75MHz，DMS0-d6)S:9.2，36.3,56.0，56.1，109.5，112.5，113.1，119.5，124.3,126.7，127.2，127.7，131.4，136.5,137.2，147.7,148.6，149.5，153.7;IRvKBrmaxcnf':3431,3356,3011，，2844,1615,1514,1459，1382，1264，1140，1025,962,818,757;元素分析(%):C21H21N05，实测值(计算值)C,68.22(68.65)，H，5.50(5.76)，N,3.37(3.81)。实施例2:化合物B的合成H3CO、H3CO-H3CO'4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮的制备同实施例1。取1.43g(5.00mraol)(￡)-3，4，5-三甲氧基-4'-氮基-1,2-二苯乙烯，0.96g(9.50mmol)KHC03，40.0mL的DMF于50mL的烧瓶中，25。C，在剧烈搅拌下，缓慢滴加上述制备的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮溶液，加入的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮与(f)_3，4-二甲氧基-4'-氨基-1，2-二苯乙烯的摩尔比约为l:1。加毕25T:下继续搅拌，TLC跟踪反应，直到反应物组成不再有明显变化，加水40.0mL后，用乙酸乙酯萃取。有机层用5%盐酸洗涤三次，再用饱和食盐水洗涤至中性。有机层用无水硫酸镁干燥后浓縮至干；浓縮物经硅胶柱色谱层析纯化后得到浅黄色固体0.63g,目标化合物产率33.2%，熔点139.0141.1。C;'H画R(300MHz，DMS0-d6)S:2.14(s,3H，-CH3),3.66(s,3H，-0CH3)，3.82(s，6H，-0CH3),4.18(s，2H，-CH'厂)，6.72(d,2H，/=8.2Hz,2，，6，-Ar-H)，6.84(s,2H，2,6-Ar-H)，6.93(d，1H，力16.5Hz，-CH《H-)，7.05(d，1H，/=16.5Hz，-CH=CH-),7.37(d,2H，,8.2,3，，5，-Ar-H);IR/Br謹cm匿'3431，3353，2981,2937,2834，1592，1508，1456,1302,1232,1177,1122，995,832,671;元素分析(％):(:2孔3,6，实测值(计算值)C，66.31(66.49)，H，5.68(5.83):N，3.47(3.52)。实施例3:化合物C的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>4-溴甲基-5-甲基-1,3-二氧环戊烯-2-酮的制备同实施例1。取0.64g(2.50隨ol)(f)-3,4-二甲氧基-4'-氨基-1，2-二苯乙烯，0.48g(4.80mmol)KHC0"20.0mL的面F于50mL的烧瓶中，加入上述制备的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮溶液，加入的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮与GF)-3，4-二甲氧基-4'-氨基-1，2-二苯乙烯的摩尔比约为2:1。在25'C下，剧烈搅拌，TLC跟踪反应，直到反应物组成不再有明显变化，加水20.0mL后，用乙酸乙酯萃取。有机层用5。/。盐酸洗涤三次，再用饱和食盐水洗涤至中性。有机层用无水硫酸镁干燥后浓缩至干；浓縮物经硅胶柱色谱层析纯化后得到浅黄色固体1.14g,目标化合物产率95.1%，熔点147.9148.5°C;'H醒R(300MHz,DMS0-d》5:2.12(s,6H,-CH3),3.76(s>3H,-0CH3),3.81(s，3H,_0CH3)，4.41(s，4H,—CH2-)，6.92-7.07(m，6H)，7.18(s,1H，2-Ar-H),7.44(d，2H，/=8.2Hz,3，，5，-Ar-H);13CNMR(75MHz，DMSO—d6)S:9.2,43.1，56.0，56.1,109,5，112.4，115.0，119.8，125.7，126.6，127.6,128.4，131.1，135.1，138.2，147.1，148.8，149.4,152.7;IRvKBrmaxCm-':2931，2668,1819，1731，1580，1512，1419，1326,1230,1183，1130，959，822;元素分析(%):C26H25N08，实测值(计算值):C，65.15(65.13);H，4.95(5.26);N，2.70(2.92)。实施例4:化合物D的合成4-溴甲基-5-甲基-1,3-二氧环戊烯-2-酮的制备同实施例1。取0.72g(2.50画1)(￡")-3，4，5-三甲氧基-4，-氨基-1，2-二苯乙烯，0.48g(4.80mraol)KHC03，20.0mL的DMF于50mL的烧瓶中，加入上述制备的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮溶液，加入的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮与(f)_3，4-二甲氧基-4'-氨基-1,2-二苯乙烯的摩尔比约为2:1。在25"C下，剧烈搅拌，TLC跟踪反应，直到反应物组成不再有明显变化，加水20.0mL后，用乙酸乙酯萃取。有机层用5%盐酸洗涤三次，再用饱和食盐水洗涤至中性。有机层用无水硫酸镁干燥后浓缩至干；浓縮物经硅胶柱色谱层析纯化后得到浅黄色固体1.09g，目标化合物产率85.6%，熔点153.3154.7°C;'HNMR(300MHz,DMS0—d6)S:2.12(s,6H，—CHO,3.66(s,犯，一0CH》'3.83(s，6H，-0CH3)，4.43(s，4H,-CH2-)，6.86(s，2H，2,6-Ar-H)，6.96(d，2H，/=8.0Hz，2',6，-Ar-H),7.02(d，1H，,16.5Hz，-CH二CH-),7.10(d,1H,户16.5Hz，-CH=CH-)，7.45(d，2H，/=8.0Hz，3',5'-Ar—H);13CNMR(75MHz,DMSO-ds)3:9.2,43.0,56.3,60.5，104.0，115.0，125.8'127.8，128.0，128.1'133.8，135.1,137.4，138.2，147.3，152.7，153.5;IRvKBrmaxCm-':2920，2816，1821,1742,1584,1512，l識1221，1131,1024，964,767;元素分析(％):C27H27N09，实测值(计算值)C，63.21(63.65);H,5.32(5.34)13N，2.67(2.75)。实施例5:抗癌活性试验1.受试化合物A、B、C、D分别按照实施例l一的方法制备2.受试细胞株人宫颈癌细胞Hela人肝癌细胞SMMC-7721人肺癌细胞A549人低分化胃腺癌细胞BGC-8233.方法3.1取处于指数生长期状态良好的细胞一瓶，加入0.25%胰蛋白酶消化液，消化使贴壁细胞脱落，计数24xl(^个/mL，制成细胞悬液。3.2取细胞悬液接种于96孔板上，180^iL/孔，置恒温C02培养箱中培养24小时。3.3换液，加入受试药物，20pL/孔，培养48小时。3.4将MTT加入96孔板中，20pL/孔，培养箱中反应4小时。3.5吸去上清液，加入DMSO，150)aL/孔，平板摇床上振摇5分钟。3.6用酶联免疫检测仪在波长为570nm处测定每孔的吸光值(OD值)，并计算细胞抑制率。以相应溶媒作阴性对照，以长春瑞宾(Vinordbine，VBI)为阳性对照。xl00%3.7抗肿瘤活性判断标准(NCI)，具体见表1表1.抗肿瘤活性判断标准(NCI)化合物lag/mL10100细胞抑制率％>50>50<50^50<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>4.实验结果实验数据(见表2)表明受试化合物AD对所用肿瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用；从试验结果可知此类化合物对Hda肿瘤细胞的增殖抑制活性较好。这种结果表明对此类化合物的深入研究将会得到对人宫颈癌细胞Hela具有选择性抑制作用的抗肿瘤药物。表2.受试物对肿瘤细胞增殖的影响(11=3，重复l次)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>权利要求1.一种二苯乙烯类化合物，其具有式I的结构id="icf0001"file="A2008101560920002C1.tif"wi="59"he="29"top="36"left="70"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>式I其中R1、R2或R3可以相同或不同，分别为H原子、烷基或烷氧基；R4为H原子或id="icf0002"file="A2008101560920002C2.tif"wi="23"he="16"top="80"left="38"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>2.权利要求1所述的二苯乙烯类化合物，其中，R'、R2或R3选自H原子或烷氧基；3.权利要求1或2所述的二苯乙烯类化合物，其中，R1、R2或R3同时为烷氧基或R1、R2或R3其中二者为烷氧基，另一个为氢。4.权利要求1或2所述的二苯乙烯类化合物，其选自下列化合物化合物A<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>化合物B<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>化合物C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>化合物D<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>5.权利要求1所述的二苯乙烯类化合物的制备方法，包括下列反应:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中，R'、R2或R3与权利要求1中定义相同，在反应中，当氨基二苯乙烯类化合物与DMD0-Br物质的量比约为1:1时，主要生成一取代产物；当二者物质的量比约为h2时，生成二取代产物。6.权利要求5所述的新型二苯乙烯类化合物的制备方法，包括下列反应步骤(1)4-氯甲基-5-甲基-1,3-二氧环戊烯-2-酮与溴化钠在有机溶剂中反应，生成4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮和氯化钠；(2)向步骤(1)的反应混合物中加入丙酮使生成的氯化钠析出，过滤后得4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧环戊烯-2-酮的溶液，待用；(3)将步骤(2)中的4-溴甲基-5-甲基-1,3-二氧环戊烯-2-酮的溶液加入到含有4'-氨基二苯乙烯衍生物和KHC03的有机溶剂中进行反应，薄层色谱跟踪反应，至反应混合物组成不再有明显变化，加水终止反应，分离纯化得式I的化合物。7.权利要求1所述的二苯乙烯类化合物在制备治疗肿瘤的药物中的用途，所述肿瘤选自宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌、头颈癌、卵巢癌、前列腺癌、结直肠癌、生殖泌尿道癌、黑素瘤、鳞状细胞癌、星形细胞癌、Kaposi肉瘤、成胶质细胞癌。8.权利要求7的用途，其中肿瘤选自宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌。9.一种治疗肿瘤的药物组合物，其包含权利要求1所述的二苯乙烯类化合物和药学上可接受的辅料。全文摘要本发明涉及一种结构式如式I所示的新型二苯乙烯类化合物，其中R¹、R²或R³可以相同或不同，分别为H原子、烷基或烷氧基；R⁴为H原子或式a基。本发明还涉及该类化合物的制备方法以及其在制备治疗肿瘤的药物中的用途。所述化合物制备工艺简单，重现性好，抗癌活性试验研究结果表明此类化合物具有良好的抗肿瘤活性。文档编号C07D317/40GK101684114SQ20081015609公开日2010年3月31日申请日期2008年9月27日优先权日2008年9月27日发明者张喜全,徐宏江,李宝林,丽王,王喆之,顾红梅申请人:江苏正大天晴药业股份有限公司;陕西师范大学