专利名称：：长春氟宁精氨酸酯及其制备方法和在制备靶向治疗实体瘤和癌症的药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种具有靶向治疗肿瘤和癌症的药物——长春氟宁精氨酸酯，属于医药领域。
背景技术：
：长春氟宁是法国PierreFabre公司开发(商品名Javlor)，2004年在欧洲用于治疗膀胱癌和非小细胞肺癌进行三期临床阶段；其用于治疗乳腺癌和卵巢癌则处于二期临床试验。长春氟宁(vinflimine)是继长春瑞滨之后又一种新型的半合成长春碱类生物碱抗肿瘤药，它与长春瑞滨的区别在于在C-19'位上由两个氟原子取代两个氢原子，在15'和20'位的碳碳双键被还原成单键。国外研究资料表明，动物实验已经显示出对P338白血病、B16恶性黑素瘤及对人体肺部和胸部肿瘤的抗肿瘤活性，而作为抗癌药物，长春氟宁也具有抗癌药物的缺点一副作用大，如骨髓抑制，白细胞减少等。因此开发具有低副作用的抗癌药物或对长春氟宁进行结构的修饰具有非常重要的意义。目前，利用氨基酸修饰美法仑、雌莫司汀、卡莫司汀等，在提高上述药物的靶向性上取得了一些成果，而长春碱类药物非活性位点的修饰还未见文献报道。
发明内容本发明的目的就在于提供一种长春氟宁衍生物一一长春氟宁精本发明采用如下技术方案一种长春氟宁精氨酸酯，其具有如下结构式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>本发明还提供了上述长春氟宁精氨酸的制备方法，包括如下过(1)将长春氟宁在碱性条件下水解，将C-3位水解为-COOH;(2)将(1)所得的产物和L-精氨酸为原料，在极性溶剂中反应合成长春氟宁精氨酸酯。本发明的制备方法，步骤(1)中的碱性条件可以为醇钠、氢氧化钠或氢氧化钾的水或醇溶液。碱性条件PH值为1013，pH过高容易引起反应产率下降，副反应增多。本发明的制备方法，步骤(2)中的溶剂可为氯仿-甲醇、氯仿-乙醇、二甲基亚砜和水。歩骤(2)中的反应温度可以控制为各溶剂的回流温度。本发明的制备方法，反应中原料长春氟宁和L-精氨酸的摩尔比优选为长春氟宁L-精氨酸=1:3-5，使长春氟宁能够完全参与反应，提高长春氟宁的利用率，降低反应成本。本发明还提供了上述长春氟宁精氨酸酯在制备靶向治疗实体瘤的药物中的应用。本发明还提供了上述长春氟宁精氨酸酯在制备靶向治疗癌症的药物中的应用。特别是在制备靶向治疗肝癌和肺癌的药物中的应用。在保证长春氟宁药物药理活性的前提下，在长春氟宁上接入--些可以提高药物靶向性的L-氨基酸基团，通过对长春氟宁结构的修饰，增加药物对癌细胞的指向性和滞留性，并进而可以降低药物对正常细胞的毒性，减少剂量，提高药物制剂的生物利用度。具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，以助于理解本发明的内容。实施例l、长春氟宁精氨酸的制备(1)取长春氟宁5.0g，加入甲醇150ml溶液中，接着加入醇钠10g，pH值为10，置水浴上加热到85"，回流5个小时后，用氯仿萃取3次后合并，旋转蒸干，得固体4.19g。(2)将前面得到的固体加入到体积比为1:1氯仿-甲醇混合液100ml中，置水浴上加热至溶解。在7(TC回流搅拌的条件下，缓缓加入含5.gL-精氨酸的水溶液15ml，继续回流30分钟至溶液透明澄清。趁热过滤，滤液回收氯仿、甲醇。取残余水溶液冷冻干燥，得长春氟宁精氨酸酯，共4.42g。实施例2(1)取长春氟宁3.0g，加入甲醇150ml溶液中，接着加入氢氧化钠10g，pH值为11，置水浴上加热到85"，回流3个小时后，用氯仿萃取3次后合并，旋转蒸干，得固体1.98g。(2)将前面得到的固体加入到体积比为1:1氯仿-乙醇混合液100ml中，置水浴上加热至溶解。在7(TC回流搅拌的条件下，缓缓加入含L-精氨酸2.lg的水溶液，继续回流60分钟。趁热过滤，滤液回收氯仿、乙醇。取残余水溶液冷冻干燥，得长春氟宁精氨酸酯，共2.6g。实施例3(1)取长春氟宁6.0g，加入l:1水-甲醇150ml溶液中，接着加入氢氧化钾13g，pH值为13，置水浴上加热到95°C，回流5个小时后，用氯仿萃取3次后合并，旋转蒸干，得固体4.96g。(2)将前面得到的固体加入到100ml水中，置油浴上加热至溶解。在ll(TC回流搅拌的条件下，缓缓加入含3gL-精氨酸的水溶液15ml，继续回流30分钟至溶液透明澄清。有100ml氯仿萃取三次，合并萃取液，旋转蒸发，得长春氟宁精氨酸酯，共3.78g。为验证长春氟宁精氨酸酯的靶向性，进行了如下实验。1、荧光标记长春氟宁精氨酸酯的制备及体内分布研究精密称取按上述方法制备的长春氟宁精氨酸酯300mg溶于水溶液10ml中，调节pH值到6.9，加入21mgFITC(异硫氰荧光素)，混合均匀后室温下反应24小时，透析。将透析后的样品冷冻干燥。测定荧光素含量为6.56%(w/w)。取小鼠20只，雄性，重量在25-30g之间，随机每4只为一组，一共5组，按注射剂量40mg/kg计算，尾静脉分别注射FITC-长舂氟宁精氨酸酯。分别15min、30min、60min、120min处死小鼠，取心、肝、脾、肺、肾，称重，并制备成组织匀浆，沉淀蛋白后，用荧光分光光度计测定含量，计算出每只小鼠每种组织中长春氟宁精氨酸酯的量占总注射量的百分数。结果如表l:表1长春氟宁精氨酸酯在不同脏器中的分布<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>结果证明，长春氟宁精氨酸酯是一种具有良好肝、肺靶向性的药物。2、各种长春氟宁精氨酸酯前体药物在小鼠体内肿瘤细胞中分布研究取带肿瘤的小鼠20只，雄性，重量在25-30g之间，随机每4只为一组，一共5组，按注射剂量28mg/kg计算，尾静脉分别注射长春氟宁、长春氟宁精氨酸酯。分别在15min、30min、60min、120min处死小鼠，取出肿瘤细胞，捣碎，加入甲醇和10%(wt%)三氯乙酸沉淀蛋白，漩涡振摇5分钟，离心(14000转/分，15分钟)，高效液相色谱测定上清液游离药物浓度，计算出平均每克肿瘤细胞组织中，长春氟宁的含量(Ug)，结果如表2。表2长春氟宁精氨酸酯前体药物在小鼠体内肿瘤细胞中分布<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>从上面的数据可以看出，当长春氟宁与精氨酸形成前体药物以后，在肿瘤细胞中水解，并且水解后的原药一长春氟宁的浓度比直接注射长春氟宁后的浓度高，因此可以证明形成的前体药物具有明显的靶向作用。权利要求1、一种长春氟宁精氨酸酯，其具有如下结构式2、一种权利要求1所述长春氟宁精氨酸酯的制备方法，其特征在于主要包括如下过程(1)将长春氟宁在碱性条件下水解，将O3位水解为-C00H;(2)将(1)所得的产物和L-精氨酸为原料，在极性溶剂中反应合成长春氟宁精氨酸酯。3、如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述步骤(1)碱性条件是指pH值为10—13。4、如权利要求2或3所述的方法，其特征在于步骤(2)中的溶剂为氯仿-甲醇、氯仿-乙醇、二甲基亚砜或水。5、如权利要求4所述的方法，其特征在于合成反应的温度为相应溶剂的回流温度。6、如权利要求2或3所述的方法，其特征在于反应中原料长春氟宁和L-精氨酸的摩尔比1:3-5。7、一种权利要求1所述长春氟宁精氨酸酯在制备靶向治疗实体瘤的药物中的应用。8、一种权利要求1所述长春氟宁精氨酸酯在制备靶向治疗癌症的药物中的应用。9、如权利要求8所述的应用，其特征在于所述的癌症是指肺癌。10、如权利要求8所述的应用，其特征在于所述的癌症是指肝癌。全文摘要本发明公开了一种长春氟宁精氨酸酯，以及其制备方法，是将长春氟宁C-3位水解为-COOH并与L-精氨酸反应合成长春氟宁精氨酸酯。通过对长春氟宁结构的修饰，增加药物对癌细胞的指向性和滞留性，因此可以降低药物对正常细胞的毒性，减少剂量，提高药物制剂的生物利用度。文档编号C07D519/00GK101386624SQ20081017523公开日2009年3月18日申请日期2008年11月4日优先权日2008年11月4日发明者伍曾利,敏刘,刘全胜申请人:刘全胜