用于治疗丙型肝炎的化合物的制作方法

专利名称：用于治疗丙型肝炎的化合物的制作方法
用于治疗丙型肝炎的化合物对相关申请的交叉参考本申请要求2007年11月21日提交的美国临时申请60/989，524的优先权。
背景技术：
丙型肝炎病毒(HCV)是主要的人类病原体，其在世界范围内感染估计一亿七千万 人，大致是1型人类免疫缺陷病毒感染数量的5倍。这些HCV感染个体中相当大的部分发 展成严重的进行性肝脏疾病，包括肝硬化和肝细胞癌(Lauer，G. Μ. ；Walker, B. D. N. Engl. J. Med. 2001，345，41-52)。HCV是正链RNA病毒。基于对所推断氨基酸序列进行的比较和5’-非翻译区的广 泛相似性，已经把HCV归类为黄病毒科中独立的属。黄病毒科的所有成员都具有包封的病 毒体，其含有的正链RNA基因组通过翻译单一的连续的可读框而编码所有已知的病毒专属 性蛋白质。在整个HCV基因组的核苷酸和所编码的氨基酸序列中发现了相当程度的异质性。 已经表征了至少6种主要的基因型，且已经描述了多于50种的亚型。HCV的主要基因型在 世界范围内的分布是不同的，且HCV遗传异质性的临床重要性仍然是难以确定的，尽管对 基因型对发病和治疗的可能影响行了大量的研究。单链HCV RNA基因组的长度大约是9500个核苷酸，且具有单一的可读框(ORF)， 其编码由大约3000个氨基酸组成的单一的大的多蛋白。在被感染的细胞中，这种多蛋白在 多个位点被细胞蛋白酶和病毒蛋白酶裂解，从而产生结构蛋白和非结构(NS)蛋白。就HCV 来说，成熟的非结构蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)的产生受到两种病毒蛋白酶 的影响。认为第一种病毒蛋白酶是金属蛋白酶，且在NS2-NS3接合处进行裂解；第二种病毒 蛋白酶是包含在NS3的N-末端区域内的丝氨酸蛋白酶(也称为NS3蛋白酶)，且介导NS3 下游的所有随后裂解，既在NS3-NS4A裂解位点以顺式进行裂解，又在其余的NS4A-NS4B、 NS4B-NS5A、NS5A-NS5B位点以反式进行裂解。NS4A蛋白似乎具有多种功能，其充当NS3蛋白 酶的辅因子，且可能有助于NS3及其它病毒复制酶组分的膜定位。NS3蛋白与NS4A形成复 合物，这似乎是在所有位点进行加工活动由此提高蛋白质水解效率所必需的。NS3蛋白还显 示出三磷酸核苷酶和RNA解旋酶活性。NS5B (也称为HCV聚合酶)是依赖于RNA的RNA聚 合酶,在HCV 的复制中涉及所述酶。在“Structural Analysis of the Hepatitis C Virus RNA Polymerase in Complex with Ribonucleotides，，(Bressanelli ；S.et al., Journal of Virology 2002,3482-3492)禾口 Defrancesco and Rice, Clinics in Liver Disease 2003，7，211-242 中描述了 HCV NS5B 蛋白。目前，最有效的HCV疗法使用α -干扰素和利巴韦林的组合，其在40%的患者中产 生持续的效果(Poynard，Τ. et al. Lancet 1998，352，1426-1432)。最新的临床结果证明， 作为单一疗法，PEG化的α-干扰素优于未修饰的α-干扰素(Zeuzem，S. et al. N. Engl. J. Med. 2000, 343，1666-1672)。然而，即使就涉及PEG化α -干扰素和利巴韦林组合的实验 性治疗方案而言，相当多的患者也没有出现病毒载量的持续减少。因此，就开发用于治疗HCV感染的有效疗法而言，存在明显和迫切的需要。

发明内容
本发明一个方面为式I化合物或其药用盐， 其中
R1 为-CONR5R6 ； R2 为
或 R3为氢、卤素、烷基、烯基、羟基、苄基氧基、烷氧基或卤代烷氧基；R4为环烷基；R5为烯基SO2-、炔基S02_、烷氧基烷基S02_、(环烷基)烷基S02_、(烷基)环烷基 SO2-,((环烷基)烷基)环烷基so2-、(苄基)环烷基so2-、(烯基)环烷基so2-、(炔基)环 烷基so2-、(三烷基甲硅烷基)环烷基so2-、(CO2R7)环烷基so2-、(苯甲酰基)环烷基so2-、 (PhN(R7)CO)环烷基S02-、四氢呋喃基S02-、四氢吡喃基S02-、(四氢呋喃基)烷基S02-、(四 氢吡喃基)烷基 S02-、异噁唑烷基 SO2^Ar1SO2-, (Ar1)烷基 S02-、Ar2SO2-或(C0N(R7) (R7)) 烧基；R6为氢或烷基；R7为氢或烷基；R8为氢、烷基、环烷基、(环烷基)烷基、烷基羰基、环烷基羰基、商代烷基羰基、烷 氧基羰基、烷基so2-、环烷基so2-、商代烷基so2-、氨基羰基、(烷基氨基)羰基、(二烷基氨 基)羰基、苄基、苄基氧基羰基或吡啶基；Ar1为苯基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基或异喹啉基，且取代有0-3个选自卤素、烷基、 烷氧基和氰基的取代基；和Ar2为呋喃基、噻吩基、吡咯基、异噁唑基、异噻唑基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、咪唑 基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基或四唑基，且取代有0-3个选自卤素、烷基、烷氧基和氰基 的取代基。本发明另一个方面为式I化合物，其中R3为氢。本发明另一个方面为式I化合物，其中R3为甲氧基。本发明另一个方面为式I化合物，其中R4为环己基。本发明另一个方面为式I化合物，其中Ar1为苯基、吡啶基、喹啉基或异喹啉基，且 取代有0-3个选自卤素、烷基、烷氧基和氰基的取代基。
本发明另一个方面为式I化合物，其具有如下立体化学 本发明另一个方面为式I化合物，其具有如下立体化学 任何变量(包括R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、Ar1和Ar2)的任何范围可独立与任何 其它变量的范围一起使用。除非另有说明，这些术语具有下述意义。“烷基”的意思是由1至6个碳所组成的 直链或支链烷基。“烯基”的意思是由2至6个碳所组成且具有至少一个双键的直链或支链 烷基。“炔基”的意思是由2至6个碳所组成且具有至少一个叁键的直链或支链烷基。“环 烷基”的意思是由3至7个碳所组成的单环环系。“羟基烷基”、“烷氧基”及具有经取代烷基 部份的其它术语包括由针对所述烷基部份的1至6个碳原子所组成的直链与支链异构体。 “卤代烷基”与“卤代烷氧基”包括所有卤化异构体，从单卤素取代的烷基至全卤素取代的烷 基。“芳基”包括碳环芳族取代基与杂环芳族取代基。括号与多重括号术语意在向本领域技 术人员阐明键合关系。例如，如((R)烷基)那样的术语指进一步被取代基R取代的烷基取 代基。本发明包括所述化合物的所有药用盐形式。药用盐为其中抗衡离子不会显著地助 长化合物的生理活性或毒性且其本身作为药理等价物的那些药用盐。这些盐可根据一般 有机技术使用商购试剂来制备。一些阴离子盐形式包括醋酸盐、醋硬脂酸盐(acistrate)、 苯磺酸盐、溴化物、氯化物、枸橼酸盐、富马酸盐、葡萄糖醛酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸 盐、碘化物、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、 酒石酸盐、甲苯磺酸盐及昔萘酸盐(xinofoate)。一些阳离子盐形式包括铵盐、铝盐、苄星 (benzathine)盐、铋盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、锂盐、镁盐、葡甲胺盐、4_苯 基环己胺盐、哌嗪盐、钾盐、钠盐、丁三醇胺(tromethamine)盐及锌盐。本发明一些化合物具有不对称碳原子(例如下述化合物)。本发明包括所有立体 异构形式，包括对映异构体与非对映异构体以及立体异构体的混合物如外消旋体。一些立 体异构体可使用本领域已知的方法来制备。所述化合物的立体异构混合物与相关中间体的 立体异构混合物可根据本领域已知的方法来分离成单独的异构体。当在以下方案和表格中 描绘分子结构时使用的楔形线(wedge)和虚线(hash)仅意在表示相对立体化学，而不应该 被解释为暗示绝对立体化学指定。
合成方法所述化合物可通过本领域已知的方法(包括如下所述的那些方法)来制备。一些 试剂和中间体在本领域中是已知的。其它试剂和中间体可通过本领域已知的方法使用容易 得到的原料来制备。用于描述化合物合成的变量(例如所编号的“R”取代基)仅意在说明 如何制备，而不应该与权利要求书中或本说明书其它段落中所使用的变量相混淆。方案中 所使用的缩写通常符合本领域中所使用的惯用意义。可将2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸甲酯水解成2_溴_3_环己基-IH-吲 哚-6-甲酸(参见方案1)。该化合物可在无水THF(四氢呋喃)中使用例如1，1’_羰基二 咪唑(CDI)及1，8_ 二氮杂二环[5.4.0] i^一碳-7-烯(DBU)而与各种磺酰脲(sulfonyl urea)缩合。所得到的酰基硫酰胺(acyl sulfamide)可使用例如苏楚基(Suzuki)偶联反 应条件而与各种2-甲酰基苯基硼酸或2-甲酰基苯基硼酸酯进行已知的偶联反应，从而得 到所绘类型的环状半缩醛胺中间体(cyclic hemiaminal intermediate)。这些化合物可 如下转化为吲哚并苯并氮杂萆衍生物这些化合物在DMF( 二甲基甲酰胺)中用2-( 二甲 氧基磷酰基)丙烯酸甲酯在碳酸铯的影响下通过连续的麦克尔(Michael)反应和Horner Emmons反应进行处理。相关的稠合有环丙基的酯衍生物可通过本领域已知的方法来得到，包括吲哚并 苯并氮杂萆酯在DMSO中在强碱性条件下用碘化三甲基氧化锍(trimethyl sulfoxonium iodide)处理。所得到的稠合环丙烷中余下的脂肪族酯残基可被水解，且产物酸可与各种烷 基稠合的二胺(alkyl-fused diamine)缩合。例如，DMSO中的0_(1H_苯并三唑-1-基)-N， N，N’，N’ -四甲基铄四氟硼酸盐和二异丙基乙基胺可得到烷基稠合的二胺甲酰胺。方案1.
8 N经保护的二胺也可与中间体吲哚并苯并氮杂萆酸偶联，且所得到的二胺甲酰胺 可使用本领域已知的方法来脱保护，及使用各种合成方案来衍生化，所述方法和方案中的 一些示例性实例如下所示(参见方案2)。方案2.
Na(CN)BH3 ZnCI2, MeOH可用于合成本发明一些化合物的中间体涉及方案3中所示叔丁酯吲哚并苯并氮 杂萆的制备。方案3.
叔丁基化 SOCl2或草酰氯 然后叔丁醇钾
或者
叔丁基溴 碳酸银
t-BuOO此方法学涉及对所示吲哚甲酯进行碱催化水解，接着使其与亚硫酰氯及叔丁醇钾 反应，或用碳酸银和叔丁基溴进行烷基化反应。所得到的化合物可使用与先前所概述相似 的化学方法来转化，从而得到如上所示的混合酯吲哚并苯并氮杂萆。这些中间体可用于如下可选择的方法，所述可选择的方法可如方案4所示用于 制备酰基硫酰胺烷基稠合的二胺和酰基磺酰胺烷基稠合的二胺。中间体叔丁酯吲哚并苯 并氮杂萆的环丙烷化及随后叔丁酯基的断裂可得到酸，其可与各种磺酰胺和磺酰脲偶联。 随后进行水解，得到相关的脂肪族酸，其可与各种烷基稠合的二胺偶联。例如，DMSO中的 0-(1Η-苯并三唑-1-基)-N，N, N，，N，-四甲基银四氟硼酸盐和二异丙基乙基胺可得到烷 基稠合的二胺甲酰胺。方案4.
11 一些实施例以立体异构混合物的形式存在。本发明涵盖所述化合物的所有立体异 构体。分离立体异构混合物的方法是本领域公知的，且包括但不限于制备性手性超临界流 体色谱(SFC)和手性高效液相色谱(HPLC)。使用此手段的实例显示在方案5中。方案5. 实现所述分离的另一种方法涉及制备非对映异构体的混合物，所述混合物可使用 本领域已知的各种方法来分离。此手段的一个实例显示在下文中(方案6)。方案6.
通过反相HPLC 分离的非对映异构体一些非对映异构的酰胺可使用反相HPLC来分离。水解后，所得到的光学活性酸可 与稠合的二胺衍生物偶联(方案6)。例如，DMSO中的0-(1Η-苯并三唑-1-基)-N，N, N，， N’-四甲基银四氟硼酸盐和二异丙基乙基胺可用于得到烷基稠合的甲酰胺。也可使用其它 标准酰胺偶联方法，从而得到具有光学活性的甲酰胺。方案6. 生物学方法当在以下HCV RdRp检测中测定时，所述化合物展现了对抗HCV NS5B的活性。
对HCV NS5B RdRp进行克隆、表达及纯化将对HCV基因型Ib的NS5B蛋白进行编码的cDNA克隆至pET21a表达载体中。将 所述蛋白质表达成截掉C末端的18个氨基酸(the protein was expressed with an 18 amino acid C-terminal truncation)以提高溶解度。大肠杆菌感受态细胞系BL21 (DE3) 用于所述蛋白质的表达。使培养物在37°C生长约4小时，直到培养物达到600纳米处的光 密度为2.0。使培养物冷却至20°C，并用ImM IPTG进行诱导。加入新鲜的氨苄青霉素至最 终浓度为50微克/mL，并使细胞在20°C生长过夜。使细胞沉淀(3升)溶解以供纯化，得到15_24mg经纯化的NS5B。溶胞缓冲剂由 20mM Tris-HCl(pH 7.4)、500mM NaCl.O. 5% Triton X-IOOUmM DTTUmM EDTA、20%甘油、 0. 5mg/mL溶菌酶、IOmM MgCl2、15微克/mL脱氧核糖核酸酶I及完全TM蛋白酶抑制剂药片 (Roche)所组成。加入溶胞缓冲剂后，使用组织勻浆器来使经冷冻的细胞沉淀重新悬浮。为 了降低样品的粘度，使用与Branson超声波处理器相连的微尖头来使溶胞产物的等分液在 冰上接受超声波处理。经超声波处理的溶胞产物在4°C以100，OOOXg离心1小时，并过滤 经过0. 2微米滤器单元(Corning)。使用两个连续的色谱步骤来纯化蛋白质肝素琼脂糖CL-6B和PolyU琼脂糖 4B(Pharmacia)。色谱缓冲剂与溶胞缓冲剂相同，但不含有溶菌酶、脱氧核糖核酸酶I、MgCl2 或蛋白酶抑制剂，且缓冲剂的NaCl浓度根据将蛋白质加载至色谱柱上的需要而调整。各色 谱柱以NaCl梯度液洗脱，所述梯度液的长度在5至50个柱体积之间变化，这取决于色谱柱 的类型。在最终色谱步骤后，所得到的酶纯度>90% (基于SDS-PAGE分析)。将酶分成等 分液，并贮存在-80°C。标准HCV NS5B RdRp 酶检测在96孔板(Corning 3600)中在最终体积为60微升的情况下进行HCVRdRp基因 型 Ib 检测。检测缓冲剂由 20mM Hepes (pH 7. 5)、2. 5mM KCl、2. 5mMMgCl2UmM DTT、1.6 单位 RNAse 抑制剂(Promega N2515)、0. Olmg/mLBSA (Sigma B6917)及 2%甘油所组成。所有化合 物在DMSO中连续稀释(3倍)并在水中进一步稀释以使DMSO在检测中的最终浓度为2%。 HCVRdRp基因型Ib酶在最终浓度为28nM时使用。聚A (polyA)模板在6nM时使用，且生物 素化的寡dT12引物在最终浓度为180nM时使用。模板是商购得到的(Amersham 27-4110)。 生物素化的引物由Sigma Genosys制备。3H-UTP在0. 6 μ Ci (0. 29 μ M总UTP)时使用。通 过加入酶来引发反应，在30°C孵育60分钟，并通过加入25微升含有SPA珠粒(4微克/微 升，Amersham RPNQ 0007)的50mM EDTA来停止。在室温孵育> 1小时后，将板在Packard Top Count NXT 上读取。经修改的HCV NS5B RdRp酶检测经修改的酶检测基本如就标准酶检测所描述的那样来进行，不同的是，将生物素 化的寡dT12引物预捕获在链霉抗生物素(sti^ptavidin)涂覆的SPA珠粒上，其方式是将 引物与珠粒在检测缓冲剂中混合，并在室温孵育一小时。离心除去未结合的引物。使与引 物结合的珠粒重新悬浮在20mM !fepes缓冲液(pH 7. 5)中，并在引物的最终浓度为20nM以 及珠粒的最终浓度为0. 67微克/微升时用于检测。检测中的加入顺序如下将酶(1. 75nM) 加到经稀释的化合物中，接着加入模板(0. 36nM)、3H-UTP(0. 6μ Ci，0. 29 μ Μ)及与引物结 合的珠粒的混合物以引发反应，其中所给浓度为最终浓度。使反应在30°C进行4小时。
化合物的IC5tl值使用七种不同的[I] ([I]为抑制浓度)来确定。使用方程式y = A+((B-A)/(l+((C/x)"D)))通过抑制作用来计算IC50值。FRET检测制剂在96孔细胞培养板中进行HCV FRET筛选检测。FRET肽(Anaspec，Inc. ) (Taliani et al.，Anal.Biochem. 1996，240，60-67)在其一端附近含有荧光供体即EDANS，且在另一端 附近含有受体即DABCYL。通过供体与受体之间的分子间共振能量转移(RET)来使所述肽的 荧光淬灭，但当NS3蛋白酶使所述肽裂解时，产物不再发生RET淬灭，且供体的荧光变得显 而易见。检测试剂如下制备得自Promega(#E153A)的5X细胞荧光素酶细胞培养物溶胞 试剂(cell Luciferase cell culture lysis reagent)用 dH20 稀释至 1 X，加入 NaCl 至 最终为150mM，且将FRET肽自2mM储备液稀释至最终为20 μ Μ。为了制备板，带有或不带有海紫罗兰属荧光素酶(Renilla luciferase)报告子基 因的HCV复制子细胞用胰蛋白酶处理，并置于96孔板中，其中将经滴定的测试化合物加到 第3列至第12列中；第1列和第2列含有对照化合物(HCV对照抑制剂)，且最底行含有仅 带有DMSO的细胞。然后将板置于37°C的CO2培养箱中。检测加入上述测试化合物(FRET检测制剂)后，在不同时间将板取出，且向其中加入 Alamar 蓝色溶液(Trek Diagnostics, #00-100)以测量细胞毒性。在 Cytof lour 4000 仪器 (PE Biosystems)中读取后，将板以PBS冲洗，然后通过向每个孔中加入30微升上述FRET 肽检测试剂(FRET检测制剂)而用于FRET检测。接着，将板置于Cytoflour 4000仪器中， 其已被设定成激发波长为340nm/发射波长为490nm，以自动模式历时高达20次循环，且板 在动态模式中读取。典型地，在读取后使用终点分析的信号对噪声为至少三倍。或者，在 Alamar蓝色读取后，将板以PBS冲洗，然后用于使用Promega Dual-Glo Luciferase Assay System 的荧光素酶检测或用于 Promega EnduRen Live Cell Substrate 检测。通过对相对的HCV复制子抑制作用及相对的细胞毒性值进行定量而对化合物进 行分析。为了计算细胞毒性值，将得自对照孔的平均Alamar蓝色荧光信号设定为100%无 毒性。接着，将各化合物测试孔中的各个信号除以平均对照信号并乘以100%以确定细胞毒 性百分比。为了计算HCV复制子抑制值，平均背景值得自在检测结束时含有最高量HCV对 照抑制剂的两个孔。这些值类似于得自天然Huh-7细胞的那些值。然后将背景值从得自对 照孔的平均信号中扣除，且将此值用作100%活性。接着，将各化合物测试孔中的各个信号 除以背景扣除后的平均对照值并乘以100%以确定活性百分比。将EC5tl值计算成可使FRET 或荧光素酶活性降低50%的浓度。针对化合物板所得到的两个值即细胞毒性百分比与活性 百分比用于确定有待进一步分析的重要化合物。化合物的代表性数据报道在表1中。表1.
A > 0. 5 μ M ;B 为 0. 0042 μ Μ_0· 5 μ M ;C < 0. 02 μ Μ，但没有确定确切值；D > 0.04 μ Μ,但没有确定确切值；E < 0. 07 μ Μ,但没有确定确切值；F > 1. 0 μ Μ，但没有确定确切值。药物组合物和治疗方法所述化合物展现出对抗HCV NS5B的活性，且可用于治疗HCV与HCV感染。因此， 本发明另一个方面为一种组合物，其包含所述化合物或其药用盐及药用载体。本发明另一个方面为一种组合物，其还包含具有抗HCV活性的化合物。本发明另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物为干扰素。在本 发明另一个方面，所述干扰素选自干扰素a2B、PEG化的(pegylated)干扰素α、同感干扰 素(consensus interferon)、干扰素a 2A及淋巴细胞样干扰素τ。本发明另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物为环孢菌素。在 本发明另一个方面，所述环孢菌素为环孢菌素A。本发明另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物选自白细胞介素 2、白细胞介素6、白细胞介素12、可提高1型辅助T细胞应答发展的化合物、干扰RNA、反义 RNA、Imiqimod、利巴韦林、5’ -单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、金刚烷胺及金刚乙胺。本发明另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物可有效抑制靶标 的功能以治疗HCV感染，所述靶标选自HCV金属蛋白酶(HCV metalloprotease)、HCV丝 氨酸蛋白酶(HCV serine protease)、HCV 聚合酶(HCV polymerase)、HCV 解螺旋酶(HCV heIicase)、HCV NS4B 蛋白(HCV NS4B protein)、HCV 进入(HCV entry)、HCV 组装(HCV assembly)、HCV 释出(HCV egress)、HCV NS5A 蛋白(HCV NS5A protein)、IMPDH 及核苷类 M^] (nucleoside analog)。本发明另一个方面为一种组合物，其包含所述化合物或其药用盐、药用载体、干扰 素及利巴韦林。
本发明另一个方面为一种抑制HCV复制子(HCV replicon)功能的方法，其包括使 HCV复制子与所述化合物或其药用盐接触。本发明另一个方面为一种抑制HCV NS5B蛋白功能的方法，其包括使HCV NS5B蛋 白与所述化合物或其药用盐接触。本发明另一个方面为治疗患者中HCV感染的方法，其包括向所述患者给予治疗有 效量的所述化合物或其药用盐。在另一个实施方案中，所述化合物可有效抑制HCV复制子 的功能。在另一个实施方案中，所述化合物可有效抑制HCV NS5B蛋白的功能。本发明另一个方面为治疗患者中HCV感染的方法，其包括向所述患者给予治疗有 效量的所述化合物或其药用盐，且给予(之前、之后或同时)另一种具有抗HCV活性的化合 物。本发明另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物为干扰素的方法。本发明另一个方面为其中所述干扰素选自干扰素α 2Β、PEG化的干扰素α、同感 干扰素、干扰素α 2Α及淋巴细胞样干扰素τ的方法。本发明另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物为环孢菌素的方法。本发明另一个方面为其中所述环孢菌素为环孢菌素A的方法。本发明另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物选自白细胞介素2、白细 胞介素6、白细胞介素12、可提高1型辅助T细胞应答发展的化合物、干扰RNA、反义RNA、 Imiqimod、利巴韦林、5’ -单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、金刚烷胺及金刚乙胺的方法。本发明另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物可有效抑制靶标功能以 治疗HCV感染的方法，所述靶标选自HCV金属蛋白酶、HCV丝氨酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV 解螺旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、HCV组装、HCV释出、HCV NS5A蛋白、IMPDH及核苷类似 物。本发明另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物可有效抑制HCV生命循环 中靶标的功能而非抑制HCV NS5B蛋白的功能的方法。“治疗有效”的意思是提供有意义的患者益处所需要的药物量，如肝炎与HCV感染 领域中的执业医师所理解的那样。“患者”的意思是被HCV病毒感染且适于治疗的人们，如肝炎与HCV感染领域中的 执业医师所理解的那样。“治疗”、“疗法”、“给药方案”、“HCV感染”及相关术语如肝炎与HCV感染领域中的 执业医师所理解的那样来使用。本发明化合物一般以药物组合物的形式来给予，所述组合物包含治疗有效量的所 述化合物或其药用盐及药用载体，且可含有常规赋形剂。治疗有效量为提供有意义的患者 益处所需要的量。药用载体为具有可接受安全性的常规已知载体。组合物涵盖所有常见的 固体形式与液体形式，包括胶囊剂、片剂、锭剂与粉末剂以及液体混悬剂、糖浆剂、酏剂及溶 液剂。组合物使用一般制剂技术来制备，且常规赋形剂(诸如粘合剂与润湿剂)与介质(诸 如水与醇)通常用于组合物。固体组合物通常被配制成剂量单位，且每份剂量提供约1至IOOOmg活性成份的组 合物是优选的。剂量的一些实例为lmg、10mg、100mg、250mg、500mg& 1000mg。通常，其它药 物可按与临床上所使用的经典单位范围相似的单位范围存在。典型地，其为0. 25-1000mg/
21单位。液体组合物通常在剂量单位范围内。通常，液体组合物的单位剂量范围可以是 1-lOOmg/mL。剂量的一些实例为 lmg/mL、10mg/mL、25mg/mL、50mg/mL及 100mg/mL。通常，其 它药物可按与临床上所使用的经典单位范围相似的单位范围存在。典型地，其为I-IOOmg/mL。本发明涵盖所有常规给药模式，且口服方法与肠胃外方法是优选的。通常，给药方 案可类似于临床上所使用的其它药物。典型地，每日剂量可以是每日I-IOOmg/公斤体重。 通常，口服方式需要较多的化合物，而肠胃外方式需要较少的化合物。然而，具体的给药方 案可由医师通过合理的医药判断来确定。本发明也涵盖在组合疗法中给予所述化合物的方法。即所述化合物可与可用于治 疗肝炎及HCV感染的其它药物一起使用，但所述化合物与所述其它药物分开使用。在这些 组合方法中，所述化合物通常可搭配其它药物而以每日I-IOOmg/公斤体重的每日剂量来 给予。其它药物一般可按治疗上所使用的量来给予。然而，具体的给药方案可由医师通过 合理的医药判断来确定。适于组合物及方法的化合物的一些实例列在表2中。表2.
具体实施例方式除非另有说明，使用下述柱和条件来得到下述中间体和实施例的分析性LCMS数 据。停止时间梯度时间+1分钟；起始浓度0%B，除非另有说明；洗脱剂A:5%CH3CN/95% H20(含有 IOmM NH4OAc (乙酸铵))(对于柱 A、D 和 E)，10 % MeOH(甲醇)/90 % H2O(含有 0. TFA(三氟乙酸))(对于柱 B 和 C)；洗脱剂 B :95% CH3CN/5% H20(含有 IOmM NH4OAc) (对于柱 A、D 和E)，90%Me0H/10%H20(含有0· 1 % TFA)(对于柱 B 和 C)；柱 A =Phenomenex 10 μ 4. 6 X 50mm C18 ；柱 B :Phenomenex C18 10 μ 3. 0 X 50mm ；ft C =Phenomenex 4. 6 X 50mm C18 10 μ ； ft D =Phenomenex Lina C18 5 μ 3. 0 X 50mm ； ft E =Phenomenex 5 μ 4. 6 X 50mm C18。作为图形软件所生成的人为结构式(artifact)，一些结构具有被省略的氢原子。中间体1
25 2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸甲酯.在2°C将新重结晶的三溴化吡啶鐺(pyridinium tribromide)(在热AcOH(乙酸) (5毫升/1克)中重结晶，用冷AcOH冲洗，并在高真空下用KOH干燥)逐份(历时10分钟) 加到搅拌的3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸甲酯(60克，233毫摩尔)(使用在W02004/065367 中描述的方法来制备)于CHC1/THF(四氢呋喃)(1 1，1.25L)中的溶液中。将反应溶液 在0_5°C搅拌2. 5小时，并用饱和NaHSO3水溶液(IL)、IN HCl (IL)和盐水(IL)洗涤。干 燥(MgSO4)有机层并浓缩。所得红色油状物用Et20(乙醚)稀释并浓缩。将所得粉色固体 溶解在Et2O(200mL)中，用己烷(300mL)处理，并部分浓缩。过滤收集固体，并用己烷冲洗。 将母液浓缩至干，并重复上述操作。合并固体，得到2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸 甲酯(64克，190毫摩尔，82%)，其为蓬松粉色固体，所述固体不经进一步纯化即使用。1H 匪R (300MHz,CDCl3) δ 8. 47 (宽单峰，1Η) ,8. 03(d, J = 1. 4Hz, 1H)，7. 74(dd, J = 1. 4,8. 8Hz, 1H)，7. 69 (d, J = 8. 8Hz, 1H)，3. 92(s，3H)，2. 82 (tt, J = 3. 7,11. 7Hz, 1H)，1. 98-1. 72 (m, 7H)，1. 50-1. 27 (m, 3H)。13CNMR (75MHz，CDCl3) δ 168. 2，135. 6，130. 2，123. 1，120. 8，120. 3， 118. 7，112. 8，110. 7,52. 1,37. 0，32. 2 (2)，27. 0 (2)，26. 1。LCMS :m/e 334 (Μ—ΗΓ，保留时间 3. 34分钟，柱Α，4分钟梯度。中间体2 2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸.将2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸甲酯(20克，60毫摩尔)和LiOH(3. 8克， 160毫摩尔)于MeOH(甲醇)/THF/H20(l 1 l，300mL)中的溶液在90°C加热2小时。将 反应混合物在冰/水浴中冷却，用IM HCl溶液(约160mL)中和，用水(250mL)稀释，并在室 温搅拌1小时。过滤收集沉淀物，用水冲洗，并干燥，得到2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲 酸(定量)，其不经进一步纯化即使用。可用于提供2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸的可选择方法如下所述。将2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸甲酯(117克，349毫摩尔)和LiOH ·Η20(26. 4 克，629毫摩尔)于Me0H/THF/H20(l 1 1，1. 8L)中的溶液回流加热3小时。将反应混合 物在冰/水浴中冷却至约2°C，用IM HCl (约650mL)中和(加入速率使温度不超过5°C )， 用水(IL)稀释并搅拌，同时温热至环境温度。过滤收集沉淀物，用水冲洗，并干燥，得到 2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸的单THF溶剂化物(135. 5克，345毫摩尔，99% )，其为黄色固体，所述固体不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，⑶Cl3) δ 11. 01 (宽单峰，1H)， 8. 77 (s，1Η) ,8. 07 (d, J=L 5Hz, 1H)，7. 82 (dd, J=L 5,8. 8Hz, 1H)，7· 72 (d, J = 8. 8Hz, 1H)，3. 84-3. 74(m，4H)，2. 89 (m, 1H)，1. 98-1. 72(m，11H)，1. 50-1. 24 (m, 3H)。13CNMR (75MHz， CDCl3) δ 172. 7，135. 5，130. 7，122. 3，120. 9(2) ,118. 8, 113. 3, 111. 1,67. 9 (2) ,37. 0, 32. 2(2)，27. 0(2)，26. 1，25. 5(2)。LCMS :m/e 320 (Μ-ΗΓ，保留时间:2· 21 分钟，柱 A，4 分钟 梯度。中间体3 2-溴-3-环己基-N_[( 二甲基氨基)磺酰基]-IH-吲哚-6-甲酰胺.在22°C将1，1’ -羰基二咪唑(1. 17克，7. 2毫摩尔)加到搅拌的2_溴_3_环己 基-IH-吲哚-6-甲酸(2. 03克，6. 3毫摩尔)于THF(6mL)中的溶液中。立即有CO2放出，当 放出减慢时，将溶液在50°C加热1小时，然后冷却到22°C。加入N，N-二甲基硫酰胺(0.94 克，7. 56毫摩尔)，然后滴加DBU (1.34克，8. 8毫摩尔)于THF(4mL)中的溶液。继续搅拌 24小时。将混合物在乙酸乙酯和稀HCl之间分配。乙酸乙酯层先后用水和盐水洗涤，并用 Na2SO4干燥。将萃取物浓缩至干，留下标题产物，其为浅黄色易碎泡沫状物(2.0g，74%，通 过 NMR 估计纯度> 90% )。1H NMR(300MHz, DMS0-D6) δ ppm 1. 28-1. 49 (m, 3H) 1. 59-2. 04 (m, 7H) 2. 74-2. 82 (m, 1H) 2. 88 (s, 6H) 7. 57 (dd, J = 8. 42,1. 46Hz, 1H) 7. 74 (d, J = 8. 78Hz, 1H) 7· 91 (s，1H) 11. 71 (s，1H) 12. 08 (s, 1H)。用于制备2-溴-3-环己基-N_[ ( 二甲基氨基)磺酰基]-IH-吲哚_6_甲酰胺的 可选择方法如下所述。在氮气气氛下向配备有机械搅拌器、温度控制器、氮气进口和冷凝器的IL四颈 圆底烧瓶中加入2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸(102.0克，0. 259摩尔)和无水 THF(300mL)。搅拌10分钟后，逐份加入CDI (50. 3克，0. 31摩尔)。然后将反应混合物加热 至50°C且保持2小时。冷却到30°C后，一次性加入N，N-二甲基氨基磺酰胺(41. 7克，0. 336 摩尔)，然后历时1小时滴加DBU(54. ImL, 0. 362摩尔)。然后将反应混合物在室温搅拌20 小时。真空除去溶剂，并将残余物在EtOAc (乙酸乙酯)和IN HCKl 1，2L)之间分配。分 离有机层，且水层用EtOAc (500mL)萃取。合并的有机层用盐水(1. 5L)洗涤并用MgSO4干 燥。过滤溶液，并真空浓缩，得到粗产物(111. 0克)。在60°C将粗产物悬浮在Et0Ac(400mL) 中。向悬浮液中缓慢加入庚烷(2L)。搅拌所得悬浮液并冷却到0°C。然后对其进行过滤。 滤饼用少量庚烷冲洗，并真空风干(house vacuum air dry) 2天。收集产物，其为白色固体 (92. 0 克，83% )。1HNMR(MeODdOOMHz) δ 7. 89 (s, H), 7. 77 (d, J = 8. 4Hz, 1H), 7. 55 (dd, J =8· 4 和 1. 8Hz, 1Η)，3· 01 (s，6Η)，2. 73-2. 95 (m, 1Η)，1. 81-2. 05 (m, 8H)，1. 39-1. 50 (m, 2H)。 m/z 429(M+H)+。中间体4
3-环己基-N_[( 二甲基氨基)磺酰基]-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-IH-吲 哚-6-甲酰胺.将2-溴-3-环己基-N_[( 二甲基氨基)磺酰基]-IH-吲哚-6-甲酰胺(4. 28克， 0.01摩尔)、4_甲氧基-2-甲酰基苯基硼酸(2. 7克，0.015摩尔)、2_ 二环己基膦基-2’， 6’-二甲氧基-联苯(41毫克，0.0001摩尔)、乙酸钯(11. 2毫克)和经微细研磨的碳酸钾 (4. 24克，0. 02摩尔)于甲苯(30mL)中的混合物在氮气气氛下回流搅拌30分钟，此时LC/ MS分析显示反应完成。然后反应混合物用乙酸乙酯和水稀释，然后用过量稀HCl酸化。然 后收集乙酸乙酯层，并用稀HC1、水和盐水洗涤。然后干燥(硫酸镁)有机溶液，过滤并浓 缩，得到胶状物。胶状物用己烷(250ml)和乙酸乙酯(25mL)稀释，并将混合物在22°C搅拌 20小时，在此期间产物转化成亮黄色颗粒状固体(4. 8克)，所述固体不经进一步纯化即直 接使用。用于制备3-环己基-N_[( 二甲基氨基)磺酰基]-2_(2-甲酰基_4_甲氧基苯 基)-IH-吲哚-6-甲酰胺的可选择方法如下提供。向浆化的2-溴-3-环己基-N_[( 二甲基氨基)磺酰基]-吲哚-6-甲酰胺(54.0 克，126毫摩尔)、4_甲氧基-2-甲酰基苯基硼酸(29. 5克，164毫摩尔)和LiCl (13. 3克， 315毫摩尔)于EtOH(乙醇)/甲苯(1 1，1L)中的溶液中加入Na2CO3(40. 1克，379毫摩 尔)的水(380mL)溶液。将反应混合物搅拌10分钟，然后加入Pd(PPh3)4(四(三苯基膦) 钯)(11. 3克，10.0毫摩尔)。反应溶液用氮气冲洗，并在70°C (内部监测)加热过夜，然后 冷却至室温。反应混合物用EtOAc (IL)和EtOH(IOOmL)稀释，用IN HCl水溶液(IL)和盐 水(500mL)小心洗涤，干燥(MgSO4),过滤并浓缩。将残余固体与Et2O (乙醚)(600mL) —起 搅拌1小时，并过滤收集，得到3-环己基-N-[ ( 二甲基氨基)磺酰基]-2- (2-甲酰基-4-甲 氧基苯基)-IH-吲哚-6-甲酰胺(52. 8克，109毫摩尔，87% )，其为黄色粉末，所述粉末不 经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz, d6_DMS0) δ 11. 66 (s，1H)，8. 17 (s，1H)，7. 75 (d，J =8. 4Hz, 1H)，7· 74 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，7. 59 (dd, J=L 4,8. 4Hz, 1H)，7. 23-7. 16(m，2H)， 7. 08 (dd, J = 2. 6,8. 4Hz, 1H) ,6. 54 (d, J = 8. 8Hz，1H)，3. 86 (s，3H)，3. 22-3. 08 (m，1H)， 2.91(s，6H)，2.00-1.74(m，7H)，1.60-1.38(m，3H)。13C NMR(75MHz, CDCl3) δ 165. 7,158. 8, 147. 2，139. 1，134. 3，132. 0，123. 4，122. 0，119. 2，118. 2，114. 8，112. 3，110. 4，109. 8,79. 6， 45. 9,37. 2(2) ,34. 7，32. 0 (2)，25. 9 (2)，24. 9。LCMS :m/e 482 (M-H)、保留时间:2· 56 分钟， 柱Α，4分钟梯度。中间体5 11-环己基-N_[( 二甲基氨基)磺酰基]-6-乙氧基-8-甲氧基-6H-异吲哚并[2， Ι-a]叼丨哚-3-甲酰胺.向配备有温度控制器、冷凝器、氮气进口和机械搅拌器的5L四颈圆底烧瓶中加入 甲苯(900mL)、Et0H(900mL)、2_溴_3_环己基-N- (N, N- 二甲基氨磺酰基)-IH-吲哚-6-甲 酰胺(90g，0. 21mol)、2-甲酰基 _4_ 甲氧基苯基硼酸(49. 2g，0. 273mol)和 LiCl (22. lg，
0.525mol)。所得溶液用氮气鼓泡15分钟。加入Na2CO3(66. 8g，0. 63mol)的水(675mL)溶 液，且反应混合物用氮气再鼓泡10分钟。加入Pd (PPh3) 4 (7. Og, 6. 3mmol)，并将反应混合物 加热至70°C且保持20小时。冷却至35°C后，缓慢加入IN HCl溶液(1. 5L)。将所得混合物 转移到6L分液漏斗中，并用Et0Ac(2X1.5L)萃取。合并的有机萃取物用盐水(2L)洗涤， 用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色固体，所述黄色固体用20% EtOAc/己烷(450mL， 50°C至0°C )研磨，得到3-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-2-(2-甲酰基-4-甲氧基 苯基)-IH-吲哚-6-甲酰胺(65. 9g)，其为黄色固体。HPLC纯度为98%。将来自研磨的母液真空浓缩。将残余物与Et0H(50mL) —起回流3小时。然后将 溶液冷却至0°c。过滤沉淀物，并用经冷却的TBME (叔丁基甲基醚)(5°C ) (20mL)洗涤。 将滤饼真空风干，得到额外量的标题化合物，其为白色固体(16. 0g)。HPLC纯度为99%。 1H 匪R (CDCl3, 300MHz) δ 8. 75 (s，1H) ,7. 96 (s，1H) ,7. 73 (d，J = 8. 4Hz，1H)，7. 67 (d，J = 8. 4Hz, 1H)，7. 45 (dd, J = 8. 4 禾口 1. 4Hz, 1H)，7. 09 (d, J = 2. 2Hz, 1H)，6. 98 (dd, J = 8. 4 和 2. 2Hz, 1H) ,6. 50 (s，1H)，3. 86(s，3H)，3. 05(s，6H)，2. 92-3. 13(m，3H)，1. 85-1. 93 (m, 7H)，
1.40-1. 42 (m, 3H), 1. 05 (t, J = 7. 1Ηζ，3Η)。m/z 512 (M+H) +。中间体6 3-环己基-N_[( 二甲基氨基)磺酰基]-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-IH-吲 哚-6-甲酰胺.将11-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-6-乙氧基-8-甲氧基-6H-异吲哚并 [2，Ι-a]吲哚-3-甲酰胺溶解在THF(75mL)中。向溶液中加入2N HCl溶液(300mL)。在室温 将混合物在氮气气氛下剧烈搅拌16小时。过滤所得悬浮液，并用经冷却的TBME(2X30mL) 洗涤。将滤饼真空风干(vacuum air dry)过夜，得到标题化合物，其为黄色固体。HPLC纯 度为 99%。1H NMR(DMS0-d6, 300MHz) δ 11. 65 (s, 1H)，8· 16 (s，1Η)，7. 76(d, J = 5. 9Hz, 1H)，
297. 73 (d, J = 5. 9Hz, 1H)，7. 58 (dd, J = 8. 5 和 1. 5Hz, 1H)，7. 17-7. 20 (m, 2H)，7. 08 (dd, J = 8.5 和 1. 4Hz, 1H) ,6. 55 (d, J = 8. 6Hz，1H)，3. 86 (s，3H)，3. 14-3. 18 (m，1H)，2. 91 (s，6H)， 1. 75-1. 99(m，7H)，1. 48-1. 60(m，3H)。m/z 484 (M+H)+。中间体7 13-环己基-10-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-甲氧基-7H-吲哚并 [2，1-a] [2]苯并氮杂萆,-6-甲酸甲酉旨.将3-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-2-(2-甲酰基_4_甲氧基苯基)-IH-吲 哚-6-甲酰胺(4.8克，0.01摩尔)、2-( 二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯(9.7克，0. 02摩尔) 和碳酸铯(7. 1克，0. 02摩尔)于DMF(28mL)中的混合物在油浴温度55°C搅拌20小时。将 混合物倒入冰-水中并用稀HCl酸化，从而使粗产物沉淀。收集固体，干燥并进行硅胶(110 克)快速色谱(使用含有2%乙酸的乙酸乙酯和二氯甲烷(1 10)溶液)。合并同质的 级分(homogeneous fraction)并蒸发，得到标题化合物，其为浅黄色固体(3. 9克，71%收 率)。MS :552(M = H+)。用于制备13-环己基-10-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-甲氧 基-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆,-6-甲酸甲酯的可选择方法如下提供。将11-环己基-N_[( 二甲基氨基)磺酰基]-6-羟基-8-甲氧基-6H-异吲哚并 [2，1-a] B引哚-3-甲酰胺(环状半缩醛胺)(63. 0克，130毫摩尔)、2_( 二甲氧基磷酰基) 丙烯酸甲酯(60克，261毫摩尔)和碳酸铯(106克，326毫摩尔)于DMF(400mL)中的溶液 在60°C (浴温)加热4. 5小时。加入额外的2-( 二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯(15克， 65毫摩尔)和碳酸铯(21.2克，65毫摩尔)，将反应混合物在60°C加热过夜，然后冷却至 室温。搅拌的反应混合物用H2O(IL)稀释，用IN HCl水溶液(SOOmL)缓慢中和，搅拌3小 时，然后过滤收集沉淀物。固体用Et2O(SOOmL)研磨，并干燥，得到13-环己基-10-[[[( 二 甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_6_甲 酸甲酯(70. 2克，127毫摩尔，98% )，其为黄色固体，所述固体不经进一步纯化即使用。 1HNMR(300MHz, CDCl3) δ 8. 67 (s, 1H), 8. 09 (s, 1H), 7. 86 (d, J = 8· 4Hz，1Η)，7· 80 (s，1Η)， 7. 50 (d, J = 8. 4Hz, 1Η)，7· 42 (d, J = 8. 8Hz, 1Η)，7· 08 (dd, J = 2. 6,8. 8Hz, 1Η)，6· 98 (d, J =2. 6Hz, 1Η)，5. 75-5. 51 (m, 1Η)，4. 29-4. 01 (m, 1Η)，3. 89 (s, 3Η)，3. 82 (s, 3H)，3. 05 (s,6H)， 2. 87-2. 73 (m, 1H)，2. 11-1. 12 (m, 10H)。LCMS :m/e 550 (Μ-ΗΓ，保留时间3. 21 分钟，柱 A，4 分钟梯度。中间体8
(+/") "8"环己基-5- [ [ [ (二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-I，12b- 二氢-11-甲 氧基-环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸甲酯.在圆底烧瓶中将DMSO (5毫升)加到碘化三甲基氧化锍(199毫克，0. 906毫摩尔) 与NaH(38毫克，浓度为60%的油分散液，0. 953毫摩尔)的混合物中。将反应混合物在室温 搅拌0.5小时。然后加入13-环己基-10-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]_3-(甲 氧基)-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_6_甲酸甲酯(125毫克，0. 227毫摩尔)，并将反 应混合物在室温搅拌3小时，接着在50°C再搅拌3小时。然后以水使反应淬灭，并以IN HCl 溶液酸化。然后粗产物以淡黄色固体的形式沉淀，其通过过滤来收集，及风干(106毫克， 83%产率)。接着，6毫克此物质通过制备性HPLC来纯化，得到标题化合物，其为淡黄色固体 (1.8毫克)。]\^ m/z 566 (MH+)，保留时间为 3. 850 分钟。1HNMR(500MHz，MeOD) δ ppm 0. 28 (m, 0. 36H) 1. 19-2. 20 (m, 11. 64H) 2. 70-3. 02 (m，2H)3. 03(s，2. 16Η)3· 05(s，3. 84H) 3. 49 (d, J = 15. 26Hz,0. 64H)3. 54 (s, 1. 92H)3. 83 (s, 1. 08H) 3. 91 (s,3H)4. 08 (d, J = 15. 26Hz, 0. 36H) 5. 29 (d, J = 15. 26Hz，0. 36H) 5. 50 (d, J = 14. 95Hz，0. 64H) 6. 98-7. 06 (m, 1H) 7. 16 (d, J = 2. 44Hz，0. 36H)7. 23(d，J = 2. 44Hz，0. 64H) 7. 30 (d，J = 8. 55Hz，0. 64H) 7. 34 (d， J = 8. 55Hz,0. 36H)7. 56 (dd, J = 8. 55，1. 53Hz，0. 64H) 7. 63 (dd，J = 8. 55,1. 53Hz,
0.36H) 7. 88 (d, J = 8. 55Hz，0. 64H) 7. 91 (d, J = 8. 55Hz，0. 36H) 8. 12 (s，0. 36H) 8. 33 (d, J =
1.53Hz，0. 64H)。 用于制备标题化合物的可选择操作如下提供。在N2下向配备有机械搅拌器、N2进口及温度计的经火焰干燥的1升四颈圆底烧 瓶中加入氢化钠(95 (3. 09克，129. 2毫摩尔)与无水DMF(200毫升)。在剧烈搅拌 下分批加入碘化三甲基氧化锍(32. 5克，147. 3毫摩尔)，在此期间温度上升至30°C。搅 拌30分钟后，迅速加入13-环己基-10-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]_3-(甲 氧基)-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_6_甲酸甲酯(33. 8克，61. 3毫摩尔)在无水 DMF(70毫升)中的溶液。将反应混合物在低于30°C的温度搅拌30分钟，然后分批倒入IN HCl (130毫升)在H20(2升)中的冰冷溶液中。将所得到的悬浮液以机械方式搅拌1小时 后，过滤沉淀物，并以H20(100毫升)洗涤滤饼。将滤饼在EtOAc与0.5N HC1(1 1，4升) 之间分配。分离有机相，以吐0(1升)与盐水(1升)洗涤，以MgSO4干燥，过滤，及在真空中 浓缩。使残留物溶于EtOAc (150毫升)中，并使溶液过滤经过硅胶垫(300克，在己烷中)， 且以50% EtOAc/己烷(5升)冲洗。使滤液在真空中浓缩，得到微黄色固体，将其与50°C 至0°C的10% Et0Ac/TBME(220毫升)一起研磨，得到(+/_) _8_环己基_5_[ [ [ ( 二甲基氨 基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基_环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯 并氮杂蕈-la(2H)_甲酸甲酯，其为白色固体(26. 1克，75%产率)。HPLC纯度为100%。
311H NMR (DMS0-d6, 300MHz) δ 11. 61 (s, 1H)，8· 47 (s，0· 5H)，8· 25 (s，0· 5Η)，7· 81-7. 88 (m, 1H)，7. 57-7. 63 (m, 1H)，7. 23-7. 29 (m, 2H)，7. 01-7. 07 (m, 1H)，5. 43 (d, J = 15. OHz, 0. 5H)， 5. 22 (d, J = 15Ηζ，0· 5Η)，4· 04 (dd, J = 15. 4 和 6. 6Ηζ，0· 5Η)，3. 83(s，3H)，3· 75 (s, 1Η)， 3. 08-3. 47(m，0. 5H)，3. 29(s，3H)，2. 73-2. 92(m，8H)，1. 11-1. 99 (m, 10. 5H)，0. 20(m，0. 5H)。 m/z566(M+H)+。中间体9 (_)-8-环己基-5_[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-l，12b_ 二氢-11-甲 氧基-环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸甲酯.使(+/-)-8_环己基_5-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二 氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)-甲酸甲酯的样品以50 毫克/毫升的浓度溶于EtOH/CH3CN 1/1+0. 5% DEA( 二乙胺)中。[DEA的加入确保所述化 合物在注射过程中留在溶液中]。然后在下文所示的条件下将此溶液注射至Thar SFC-350 制备性SFC上。在Thar SFC-350上的制备条件色谱柱为Chiralcel OJ-H 5X25厘米；流动相 为25% [Me0H/CH3CN(l/l)]/C02 ；压力(巴)为100 ；流速(毫升/分钟)为240 ；溶液浓度 (毫克/毫升)为50 ；注射量(毫升)为4. 5-5 ；循环时间(分钟/注射)为6. 5-7 ；温度 (°C )为45 ；通量(克/小时)为约2 ；检测器波长(纳米)为254。由371. 4克外消旋起始原料得到总计177. 3克所要第二洗脱的㈠异构体，其含 有约1摩尔当量的二乙胺。此物质使用下述程序来纯化。溶于二氯甲烷(800毫升)中的 混合物(24. 7克)先后以0.5N HCl (IX 400毫升，IX 240毫升)、H2O (2 X 240毫升)及盐 水(2X240毫升)洗涤。然后使有机层干燥(无水Na2SO4),过滤，并蒸发，得到22. 33克 (-)-8-环己基-5-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环 丙并M吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸甲酯，其为黄色固体(92%收率)。 HPLC1 > 99 % (保留时间 2. 38 分钟)；LC/MS(ES+) 566. 51 (M+H，100)。-194.640 (c 1. 03，MeOH)。C30H35N3O6S · 0. 33H20 的分析计算值:C，63. 04、H，6. 29、N，7. 35、S, 5. 61、H20,1. 04 ； 实测值:C,63. 07、Η，6· 01、Ν，7· 24、S，5. 58,H20,1. 03。NMR 显示不存在 Et2NH( 二乙胺)。此 物质的EE (对映异构体过量)使用下述分析性HPLC程序来确定(>99%)。在Thar分析性SFC上确定对映异构体过量的分析条件分析性色谱柱为 Chiralcel OJ(0. 46X 25 厘米，10 μ 1) ；BI3R 压力为 100 巴；温度为 35°C ；流速为 3. 0 毫升 / 分钟；流动相为15% [Me0H/CH3CN(l/l)]/C02 ；检测器波长为254纳米；保留时间(分钟)为4和6.5。中间体10 (-)-8_环己基_5-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-l，12b_ 二氢-11-甲 氧基-环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸.历时20分钟向(-)-8_环己基_5-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1， 12b-二氢-11-甲氧基_环丙并M吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)-甲酸甲酯 (22. 33克，39. 5毫摩尔)在MeOH(300毫升)中的溶液中缓慢加入IN NaOH(120毫升)， 同时保持反应温度< 30°C。在N2下将混合物在室温搅拌18小时。HPLC显示反应完成。 向反应溶液中加入IN HCl (130毫升)。加入完成后，反应混合物的pH为约2。对反应混 合物中的甲醇进行蒸发。将水(300毫升)加到混合物中，然后其以CH2C12(1X600毫升， 1X200毫升)萃取。合并的萃取物&Η20(2Χ300毫升)及盐水(2X300毫升)洗涤，干 燥(Na2SO4),并蒸发，得到20. 82克(96%产率)标题化合物，其为黄色固体。HPLC条件色 谱柱为Phenomenoex Synergi Polar-RP 4微米4. 6X50毫米；UV为220纳米；梯度时间 为4分钟；流速为4毫升/分钟；75-100% B ；溶剂A为含有0. 2% H3PO4的10% Me0H/90% H2O ；溶剂 B 为含有 0. 2% H3PO4 的 90% MeOH/10% H2O0 HPLC >99% (保留时间 1. 80 分 钟)。LC/MS (ES+) 552. 25 (M+H, 100)。[α] 10 -166.99° (c 1. 00，MeOH)。GC (气相色谱)分 析:CH2C124. 94% ο C29H33N3O6S · 0. 16Η20 · 0. 35CH2Cl2 的分析计算值:C，60. 37、H, 5. 87、N, 7. 20、S，5. 49,H20,0. 49,CH2Cl2, 5. 02 ；实测值:C，59. 95、Η，5· 89、Ν，7· 03、S，5. 38,H20,0. 47、 CH2Cl2,4. 94。中间体11 (+/") -8-环己基-5- [ [ [ (二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-I，12b- 二氢-11-甲 氧基-环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸.向(+/-)-8_环己基_5-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂革-la(2H)_甲酸甲酯(100毫 克，0. 177毫摩尔)在THF/甲醇混合物(2. 0毫升/2. 0毫升)中的溶液中加入2N NaOH 溶液(1.0毫升)。在微波条件下将反应混合物在90°C加热5分钟。然后将其浓缩，以 IN HCl溶液酸化，并以乙酸乙酯(2X20毫升)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4),过滤，及 浓缩。残留物通过制备性HPLC来纯化，得到所要产物，其为淡黄色固体(59毫克，60%产 率)。MS m/z 552 (MH+)，保留时间为 3. 850 分钟。1H NMR(300MHz, MeOD) δ ppm 0. 25 (m, 0. 38H) 1. 14-2. 22 (m, 11. 62H) 2. 69-2. 98(m，2H)3. 02(s，2. 28Η)3· 02(s，3. 72H) 3. 41 (d, J = 15. 00Hz, 0. 62H) 3. 88 (s, 3H) 4. 01 (d, J = 15. ΟΟΗζ,Ο. 38H)5. 26 (d, J = 15. 00Hz, 0. 38H) 5. 45 (d, J = 14. 64Hz，0. 62H) 6. 94-7. 02 (m, 1H) 7. 13 (d, J = 2. 56Hz，0. 38H) 7. 21 (d, J = 2. 20Hz,0. 62H)7. 26 (d, J = 8. 42Hz，0. 62H) 7. 30 (d，J = 8. 78Hz，0. 38H) 7. 53 (dd， J = 8. 42，1. 46Hz，0. 62H)7. 61 (dd，J = 8. 60，1. 65Hz，0. 38H) 7. 85 (d，J = 8. 42Hz, 0. 62H) 7. 89 (d, J = 8. 42Hz，0. 38H) 8. 10 (s，0. 38H) 8. 28 (d, J=L 46Hz，0. 62H)。
中间体12 (IaR)-[部分]-8-环己基-N5-[( 二甲基氨基)磺酰基]_1，12b_ 二氢 _Nla_[ (2R， 3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2. 2. 1]庚_2_基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2， 1-a] [2]苯并氮杂萆-la，5(2H)_ 二甲酰胺.将TBTU (437毫克，1.36毫摩尔)与DIPEA (二异丙基乙基胺)(0. 95毫升，5. 436 毫摩尔)加到(+/-)_8-环己基_5-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二 氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂蕈-la(2H)-甲酸(500毫克，0. 906 毫摩尔)在DMSO(20.0毫升)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后加入 (25，3幻-3-氨基-1，7，7-三甲基二环[2. 2. 1]庚_2_醇(280毫克，1. 36毫摩尔)，并将反 应混合物在室温搅拌过夜。以水使反应混合物淬灭，并以IN HCl溶液酸化。褐色固体分离 出来，其通过过滤来收集。接着，此物质通过制备性HPLC在下述条件下来分离色谱柱为 Waters Sunfire 19 毫米 X 100 毫米；溶剂 A 为 10% CH3CN-90% H2O-O. 1% TFA ；溶剂 B 为 90% CH3CN-IO% H2O-O. TFA ；程序为以65%溶剂B开始，最初保持时间为5分钟，然后历 时30分钟逐渐增加至90%溶剂B ；流速为25毫升/分钟；加载量为50-60毫克/操作。在上述HPLC条件下洗脱(IaR)-[部分]-8-环己基-N5-[( 二甲基氨基)磺酰 基]-1，12b-二氢-Nla-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2. 2. 1]庚 _2_ 基]-11-甲氧 基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_la，5 (2H)_ 二甲酰胺，接着洗脱(IaS)-[部 分]-8-环己基-N5- [ ( 二甲基氨基)磺酰基]-1，12b- 二氢-Nla- [ (2R，3S) -3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2. 2. 1]庚-2-基]-11-甲氧基_环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆 -la，5(2H)_ 二甲酰胺。所得产物为淡黄色固体(230毫克，36%产率)。MS m/z 703 (MH+)， 保留时间为 3.936 分钟。1H NMR(500MHz, MeOD) δ ppm 0. 14-0. 24 (m，2. 64H) 0. 51 (s， 2. 46H) 0. 72-2. 21 (m, 20. 9H) 2. 49 (m, 0. 18H) 2. 62 (m, 0. 82H) 2. 85 (m, 0. 18H) 2. 96 (m, 0. 82H) 3. 03 (s，6H) 3. 39 (m, 0. 82H) 3. 49-3. 58 (m, 1. 64H) 3. 71-3. 80 (m, 0. 36H) 3. 90 (s, 3H)4. 17 (d, J = 14. 65Hz,0. 18H) 5. 06 (d, J = 14. 65Hz，0. 18H) 5. 37 (d，J = 14. 95Hz, 0. 82H) 6. 73 (d, J = 5. 49Hz，0. 82H) 6. 98-7. 05 (m, 1H) 7. 08 (d, J = 4. 58Hz，0. 18H) 7. 10 (d, J = 2. 44Hz，0. 18H)7. 21 (d, J = 2. 44Hz，0. 82H) 7. 31 (d, J = 8. 55Hz，0. 82H) 7. 34 (d, J = 8. 55Hz，0. 18H)7. 59-7. 64 (m, 1H)7. 87-7. 93 (m, 1H) 7. 99(s，0. 18H)8. 09 (d, J=L 22Hz, 0. 82H)。中间体13 (IaS)-[部分]-8-环己基-N5-[( 二甲基氨基)磺酰基]_1，12b_ 二氢 _Nla_[ (2R， 3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2. 2. 1]庚_2_基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2， 1-a] [2]苯并氮杂萆-la，5(2H)_ 二甲酰胺.将TBTU (437毫克，1. 36毫摩尔)与DIPEA (0. 95毫升，5. 436毫摩尔)加到 (+/-)-8_环己基-5-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧 基-环丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸(500毫克，0. 906毫摩尔)在 DMS0(20. 0毫升)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后加入(2S，3R)-3-氨 基-1，7，7-三甲基二环[2. 2. 1]庚-2-醇(280毫克，1. 36毫摩尔)，并将反应混合物在室温 搅拌过夜。以水使反应混合物淬灭，接着以IN HCl溶液酸化。褐色固体分离出来，其通过过 滤来收集。接着，此物质通过制备性HPLC在下述条件下来分离色谱柱为Waters Sunfire 19 毫米 X 100 毫米；溶剂 A 为 10% CH3CN-90 % H2O-O. 1% TFA ；溶剂 B 为 90% CH3CN-IO % H2O-O. 1% TFA ；程序为以65%溶剂B开始，最初保持时间为5分钟，接着历时30分钟逐渐 增加至90%溶剂B ；流速为25毫升/分钟；加载量为50-60毫克/操作。在上述HPLC条件下，在(IaR)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]_1， 12b-二氢-Nla-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2. 2. 1]庚-2-基]-11-甲氧基-环 丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_la，5 (2H)_ 二甲酰胺后洗脱(IaS)-[部分]-8-环 己基-N5- [ (二甲基氨基)磺酰基]-1，12b- 二氢-Nla- [ (2R，3S) -3-羟基-4，7，7-三甲基二环 [2. 2. 1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_la，5 (2H) - 二 甲酰胺。所得产物为淡黄色固体(215毫克，34%产率)。MS m/z 703 (MH+)，保留时间为4. 038分钟。1H NMR(500MHz，MeOD) δ ppm 0. 20 (m, 0. 38H) 0. 75 (s, 1. 86H) 0. 76 (s, 1. 86H) 0. 84 (s, 1. 86H) 0. 85 (s，1. 14H) 0. 89-2. 18 (m, 18. 9H) 2. 52 (m, 0. 38H) 2. 70 (m, 0. 62H) 2. 85 (m,
0.38H) 2. 97 (m, 0. 62H) 3. 03 (s, 2. 28H) 3. 04 (s,3. 72H) 3. 33-3. 39 (m, 0. 62H) 3. 43-3. 51 (m,
1.24H) 3. 73-3. 77 (m, 0. 38H) 3. 78-3. 84 (m, 0. 38H) 3. 90 (s, 1. 86H) 3. 90 (s, 1. 14H) 4. 14 (d, J= 14. 65Hz，0. 38H)5. ll(d，J = 14. 65Hz，0. 38H) 5. 44 (d，J = 15. 26Hz，0. 62H) 6. 68 (d， J = 4. 88Hz, 0. 62H) 6. 96-7. 03 (m, 1H) 7. 07 (d, J = 5. 19Hz，0. 38H) 7. 12 (d，J = 2. 44Hz, 0. 38H)7. 23 (d, J = 2. 14Hz，0. 62H) 7. 27 (d，J = 8. 54Hz，0. 62H) 7. 33 (d，J = 8. 54Hz,
0.38H)7. 55 (dd, J = 8. 39，1. 68Hz，0. 62H) 7. 62 (dd，J = 8. 55，1. 53Hz，0. 38H) 7. 87 (d，J =8. 54Hz，0. 62H) 7. 91 (d, J = 8. 55Hz，0. 38H) 8. 08 (d, J=L 22Hz，0. 38H) 8. 10 (d, J =
1.22Hz,0. 62H)。中间体14 (_)-8-环己基-5_[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-l，12b_ 二氢-11-甲 氧基-环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸.将ION NaOH溶液(2. 0毫升，20毫摩尔)与4毫升水加到(IaR)-[部分]_8_环 己基-N5-[( 二甲基氨基)磺酰基]-l，12b-二氢-Nla-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲 基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并M吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆 -la，5(2H)-二甲酰胺(160毫克，0. 228毫摩尔)在THF(四氢呋喃)/MeOH(甲醇)(7毫 升/7毫升)中的溶液中。在微波条件下将反应混合物在120°C加热1小时。然后将 其浓缩，以浓HCl溶液酸化，并以乙酸乙酯萃取两次(2X 30毫升)。合并有机层，干燥 (MgSO4)，过滤，及在真空中浓缩成橙色油状物。接着，粗产物通过制备性HPLC色谱柱来 纯化，得到产物，其为淡黄色固体(80毫克，64%产率)。平均旋光率(average specific rotation)-130. 85° ；溶剂 MeOH ；波长 589 纳米；50 厘米样品池。MS m/z 552(MH+)，保留时 间3. 760 分钟。1HNMR(SOOMHzjMeOD) δ ppm 0. 27(m，0. 38H) 1. 14-2. 22 (m, 11. 62H) 2. 76 (m, 0. 38H) 2. 80-2. 92 (m, 1H) 2. 92-3. 09 (m, 6. 62H) 3. 45 (d, J = 14. 95Hz,0. 62H) 3. 90 (s, 1.86H)3. 91(s，l. 14H)4. 04 (d, J = 15. 26Hz，0. 38H) 5. 28 (d，J = 15. 26Hz，0. 38H) 5. 47 (d， J = 15. 26Hz，0. 62H)6. 95-7. 05 (m, 1H) 7. 15 (d, J = 2. 75Hz，0. 38H) 7. 23 (d, J=L 83Hz, 0. 62H) 7. 28 (d, J = 8. 55Hz，0. 62H) 7. 33 (d, J = 8. 54Hz，0. 38H) 7. 54 (dd, J = 8. 39，1. 68Hz, 0. 62H) 7. 63 (dd, J = 8. 55，1. 53Hz，0. 38H) 7. 86 (d, J = 8. 55Hz，0. 62H) 7. 91 (d，J = 8. 55Hz, 0. 38H) 8. 11 (d, J = 1. 22Hz，0. 62H)8. 29 (d, J=L 22Hz，0. 38H)。中间体15 (+)-8_环己基_5-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-l，12b_ 二氢-11-甲 氧基-环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸.将ION NaOH溶液(1.8毫升，18毫摩尔)与4毫升水加到(IaS)-[部分]_8_环己 基-N5-[ ( 二甲基氨基)磺酰基]-1，12b- 二氢-Nla-[ (2R，3S) -3-羟基-4,7,7-三甲基二环 [2. 2. 1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_la，5 (2H) - 二 甲酰胺(130毫克，0. 185毫摩尔)在THF/Me0H(7毫升/7毫升)中的溶液中。在微波条件下 将反应混合物在120°C加热1小时。将其浓缩，以浓HCl溶液酸化，并以乙酸乙酯萃取两次 (2 X 30毫升)。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，及在真空中浓缩，得到橙色油状物。然后粗 产物通过制备性HPLC色谱柱来纯化，得到产物，其为淡黄色固体(68毫克，67%产率)。平 均旋光率+174. 73° ；溶剂MeOH ；波长589纳米；50厘米样品池。MS m/z552 (MH+)，保留时间 为 3. 773 分钟。1H NMR(500MHz,MeOD) δ ppm 0. 27 (m，0. 38H) 1. 14-2. 22 (m，11. 62H) 2. 76 (m， 0. 38H) 2. 80-2. 92 (m, 1H) 2. 92-3. 09 (m, 6. 62H) 3. 45 (d, J = 14. 95Hz,0. 62H) 3. 90 (s, 1.86H)3. 91(s，l. 14H)4. 04 (d, J = 15. 26Hz，0. 38H) 5. 28 (d, J = 15. 26Hz，0. 38H) 5. 47 (d, J = 15. 26Hz，0. 62H)6. 95-7. 05 (m, 1H) 7. 15 (d, J = 2. 75Hz，0. 38H) 7. 23 (d, J=L 83Hz, 0. 62H) 7. 28 (d, J = 8. 55Hz，0. 62H) 7. 33 (d, J = 8. 54Hz，0. 38H) 7. 54 (dd, J = 8. 39，1. 68Hz, 0. 62H) 7. 63 (dd, J = 8. 55，1. 53Hz，0. 38H) 7. 86 (d, J = 8. 55Hz，0. 62H) 7. 91 (d，J = 8. 55Hz, 0. 38H) 8. 11 (d, J=L 22Hz，0. 62H)8. 29 (d, J=L 22Hz，0. 38H)。中间体16 2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸(1，1_ 二甲基乙基)酯.向机械搅拌的2-溴-3-环己基-IH-吲哚-6-甲酸(80克，0. 24mol)于无水二氯 甲烷(1.2L)和THF(IOOmL)中的溶液中加入经活化的分子筛(4入’ 80克)和碳酸银(275 克，0. 99mol)。将反应混合物冷却至0°C，并滴加叔丁基溴(142克，1. (Mmol)。将混合物在 室温搅拌过夜，并通过TLC (己烷-乙酸乙酯80 20，Rf(产物)=0.7)进行监测。如果 留有任何溴代酸未发生转化，则再加入10%的碳酸银，并再继续搅拌2-4小时。结束后，将 反应混合物过滤通过薄的硅藻土床。滤渣(filtrand)用二氯甲烷(500mL)洗涤。真空浓 缩合并的滤液，由此得到的粗产物通过硅胶色谱(230-400目)(用0-2%乙酸乙酯/石油醚的梯度进行洗脱)进行纯化。合并同质的级分，并减压蒸发，得到80克(85% )标题化 合物。hplc 90. 1% (rt = 6. 56 分钟)，柱:c18bds (50x4. 6mm)，流动相0. 1 % tfa/ 水 acn(乙腈)的梯度(30 — 100 — 30)，流速0. 8ml/ 分钟。lcms 99. 8% (rt = 4. 44min)， 柱geneis，c1850x4. 6mm，流动相0. 甲酸 / 水acn 的梯度(70 — 95 — 70)，流速 0. 8ml/ 分钟，m-i = 376. 5。1hnmr(cdci3) (400μηζ) δ 1. 37-1. 40(m，3h，环己基)，1. 62 (s, 9h,叔丁基),1.80-1. 94 (两组多重峰，分别是3h和4h，环己基部分)，2. 81 (m，1h，环己基的 ch-苄型的(ch of。7。.彻171^^皿71化))，7.70-7.75(111，2!1，吲哚-!14和！15)，8.04(8，1!1， 吲哚-h7)，8. 52 (s，1h，吲哚-nh)。中间体17 3-环己基-2- (2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-ih-吲哚_6_甲酸(1，二甲基乙基)将2-溴-3-环己基-ih-吲哚-6-甲酸叔丁酯(72克，0. 19mol)溶解在甲苯和乙 醇的1 1混合物(720ml)中并脱气。然后加入licl (23. 9克，0. 51mol)，接着加入碳酸 钠(720ml，经单独脱气的浓度为1. om的溶液)和pd-tetrakis (13. 1克，0. ollmol)。搅拌 0. 25小时后，加入2-甲酰基-4-甲氧基苯基硼酸(41. 1克，0. 22mol)，并将反应混合物加 热至85°c且保持4小时。然后通过tlc (己烷-乙酸乙酯80 20，rf (产物)=0. 55)监 测反应。结束后，将反应混合物冷却至室温，加入水(1. 0l)，然后加入乙酸乙酯(1.0l)。有 机层用盐水洗涤，干燥并真空浓缩，得到标题化合物，其为黄色固体。收率75克(74%)。 hplc 99. 7% (rt = 6. 30min)，柱c18bds (4. 6x 50mm)，sc-307，流动相0. 1 % tfa//k :acn 的梯度(30 — 100 — 30)，流速0. 8ml/ 分钟。lcms 98. 0% (rt = 5. 28min)，柱geneis， c18(50x4. 6mm)，流动相0. 1 % 甲酸 / 水acn 的梯度(70 — 95 — 70)，流速0. 8ml/ 分 钟，m-i = 432.2。1hnmr(dmso-ci6) (400μηζ) δ 1. 40-1. 48 (m，3η，环己基)，1. 57 (s，9η，叔丁 基)，1. 84-1. 90 (m，7h，环己基部分)，3. 09 (m，1h，环己基的 ch-苄型的)，3. 84 (s，3h，och3)， 6. 55 (d, j = 4hz, 1h,芳基 h2,)，7. 06 (d, 1h,芳基 h3,)，7. 08 (s, 1h,芳基 h6,)，7. 23 (d, 1h,吲 哚-h5)，7. 53 (d, j = 8hz, 1h,吲哚-h4)，7. 70-7. 75 (m, 2h, nh+ 吲哚-h7)，8. 06 (s, 1h, ch0)。中间体18
38 13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆_6，10-二甲酸10_(1，
1-二甲基乙基)酯·6-甲酯.将3-环己基-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-IH-吲哚_6_甲酸叔丁酯(62.5 克，0. 144mol)溶解在无水DMF(1. 2L)中并机械搅拌。然后加入碳酸铯(84克，0. 17mol)和
2-(二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯(GC纯度为65-70%，56. 2克，0. 18mol)，将反应混合物 加热至65°C且保持4小时，且通过TLC (己烷-乙酸乙酯80 20，Rf (产物)=0. 7)监测 反应。结束后，将混合物冷却至室温，然后用水(1.0L)淬灭。黄色固体沉淀出来，过滤收集 所述固体并风干。然后将该物质在甲醇中浆化，过滤，并真空干燥，得到产物，其为黄色粉末 (70 克，90% )。HPLC 99. 1% (RT = 6. 45 分钟)，柱:C18BDS(4. 6X50mm)，流动相0. 1% TFA/ 水=ACN 的梯度(30 — 100 — 30)，流速0. 8 毫升 / 分钟。LCMS 100% (RT = 7. 00 分 钟)，柱Geneis，C18(50X4. 6mm)，流动相0. 甲酸 / 水=ACN 的梯度(70 — 95 — 70)， 流速0. 8 毫升 / 分钟，M+1 = 502. 2。1H NMR(CDCl3) (400ΜΗζ) δ 1. 10-1. 30 (m, 3H,环己 基)，1. 64 (s，9H，叔丁基)，1. 77-2. 07 (m, 7H，环己基部分)，2. 80 (m, 1H，环己基的 CH-苄型 的)，3. 84(s，3H，OCH3), 3. 93(s，3H，COOCH3), 4. 15 禾口 5. 65(两个宽峰，各为 1Η，烯丙酰基 的 CH2(allylic CH2))，6. 95 (s，1H，芳基 H 6 ’)，7. 01 (d，1H，芳基 H2,)，7. 53 (d，J = 8Ηζ，1Η， 芳基 H3,)，7. 70 (d，J = 4Hz, 1H，吲哚-H5)，7. 84 (s+d, 2H，烯基的 H+ 吲哚-H4)，8. 24 (s，1H， 吲哚-H7)。13C NMR(CDCl3) (100. ΟΜΗζ) δ 166. 92，165. 71，158. 96，142. 28，136. 47，13. 50， 134. 61，132. 43，132. 01，129. 73，124. 78，124. 68，120. 33，119. 39，119. 04，115. 62，115. 05， 111. 27,80. 27,55. 49,52. 50,39. 09,36. 81,33. 40,28. 38,27. 15,26. 28。中间体192- ( 二甲氧基氧膦基)-2-丙烯酸甲酯.向配备有机械搅拌器、冷凝器、温度控制器和氮气进口的5L四颈圆底烧瓶中加入 低聚甲醛(40. 5克，1. 35摩尔)、MeOH(甲醇)(2L)和哌啶(2mL)。将反应混合物在氮气气 氛下加热至回流且保持3小时。冷却到50°C后，一次性加入2-( 二甲氧基磷酰基)乙酸甲 酯(150克，0.824摩尔)。将反应混合物继续回流18小时。冷却到室温后，真空浓缩反应 溶液，得到透明无色油状物。在配备有温度控制器、氮气进口、磁力搅拌器和迪安_斯托克 分水器(Dean-Stark apparatus)的3L四颈圆底烧瓶中将上述油状物溶解在无水甲苯(IL) 中。向溶液中加入TsOH-H2O (5.2克)。然后将反应混合物共沸回流18小时，从而除去甲
醇。冷却到室温后，将溶液真空浓缩，得到黄色油状物，将其在150-155°C/0.2mm Hg的条 件下真空蒸馏，得到产物，其为无色油状物(135.0克)。根据1H NMR确定纯度为90%。1H 匪R (CDCl3, 300MHz) δ 7. 0(dd，J = 42. 4 禾口 1. 5Hz, 1H)，6. 73 (dd, J = 20. 5 禾口 1. 8Hz, 1H)， 3. 80(s，6H)，3. 76(s，3H)。中间体20 (+/-)-8_环己基-l，12b_ 二氢-11-甲氧基_环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并 氮杂萆-la，5(2H)-二甲酸5-(l，l-二甲基乙基)酯· Ia-甲酯.在氮气下将氢化钠(96毫克，4毫摩尔)加到搅拌的氯化三甲基氧化锍(567毫克， 4. 4毫摩尔)在无水DMSO(10毫升)中的悬浮液中。将所得到的混合物在室温搅拌30-45 分钟，然后以小份分批加入纯净的13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮 杂萆-6，10-二甲酸10-(1，1_ 二甲基乙基)酯·6-甲酯(1.0克，2毫摩尔)。悬浮液以 DMS0(5毫升)稀释，并在50°C加热3-4小时。使反应混合物冷却至室温，并加入水。固体 分离出来，其通过过滤来收集，并以水洗涤，接着风干过夜，得到1. 15克粗产物。此物质通 过快速柱色谱(硅胶，3% MeOH/DCM( 二氯甲烷))来纯化，得到纯标题化合物(0. 96克)。 LC/MS 保留时间 3. 816 分钟；m/e 516(ΜΗ")。1H NMR (400MHz, CDCl3)基于化合物的 NMR 光 谱，发现产物以相互转化的旋转异构体(rotamer)的形式存在。下述程序为对外消旋的(+/-)-8_环己基-1，12b- 二氢-11-甲氧基-环丙并[d] 吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂蕈-la，5(2H)_ 二甲酸5-(l，l-二甲基乙基)酯· Ia-甲酯进 行拆分的方法的实施例。使(+/-)_8-环己基-l，12b-二氢-11-甲氧基_环丙并M叼丨哚 并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la，5(2H)_ 二甲酸5-(l，l-二甲基乙基)酯· Ia-甲酯的样品 溶于异丙醇与乙腈的混合物(8 2)中，所得到的最终浓度为20毫克/毫升。将此混合物 注射至使用下述条件的制备性手性SFC色谱系统上=Chiralcel OJ-H色谱柱，4. 6 X 250毫 米，5微米；流动相为8% Me0H/C02 ；温度为35°C ；流速为2毫升/分钟并保持16分钟；UV 监测在260纳米；注射量为5微升浓度为约20. 0毫克/毫升的IPA ACN(8 2)溶液。中间体21
40
(+/-)-8_环己基-l，12b_ 二氢-11-甲氧基_环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并 氮杂蕈-la，5(2H)_ 二甲酸Ia-甲酯.将TFA(三氟乙酸)(5毫升)加到(+/-)-8-环己基_1，1&，2，1213-四氢-11-甲氧 基-Ia-(甲氧基羰基)_环丙并M吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸叔丁酯(515毫 克，1毫摩尔)在无水DCM(二氯甲烷)(10毫升)中的溶液中。将所得到的溶液在室温搅拌 约8至12小时。然后使反应混合物蒸发至干，得到标题化合物(0. 47克，100% )。LC/MS 保留时间2. 245分钟；m/e 460 (MH+)。1HnmrgoomHzADCI3)基于化合物的NMR光谱，发现 产物以相互转化的旋转异构体的混合物的形式存在。中间体22 8-环己基-1，12b- 二氢-11-甲氧基-5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-环 丙并M吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸甲酯.将8-环己基-l，la，2，12b_四氢-11-甲氧基-Ia-(甲氧基羰基)_环丙并[d]吲 哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸(140毫克，0. 31毫摩尔)与CDI (64毫克，0. 40毫摩 尔)在THF(3毫升)中的溶液在60°C搅拌1小时。加入N-甲基硫酰胺(68毫克，0. 62毫 摩尔)与DBU (71. 6毫克，0.47毫摩尔)，并将混合物在60°C搅拌过夜。然后将反应混合物 倒入冷水中，以稀盐酸酸化，并萃取到乙酸乙酯中。萃取物先后以稀盐酸(0. 1N)与盐水洗 涤，接着干燥(无水硫酸钠)，过滤，及蒸发，得到标题化合物，其为褐色固体。ESI-MS m/e 552 (ΜΗ+)。使用此物质而无需进一步纯化。中间体23 8-环己基-1，12b- 二氢-11-甲氧基-5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-环 丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸.使8-环己基_5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧 基-环丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸甲酯溶于THF和MeOH的混 合物(2毫升，2毫升)中。然后加入2.5M NaOH(水溶液)(1. 2毫升，3毫摩尔)，并将反应 混合物在22°C振荡2小时。接着以IM HCl (水溶液)(3毫升)使溶液中和，及浓缩，从而除 去有机溶剂。残留物以H2O浆化，并通过过滤来收集固体，以H2O洗涤，且干燥，得到标题化 合物(160毫克，0.30毫摩尔)。ESI-MSm/e 538 (MH+)。使用此物质而无需进一步纯化。中间体24 (+/") "8"环己基-5-[[[(苄基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-I，12b- 二氢-11-(甲 氧基)_环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂蕈-la(2H)_甲酸甲酯.将(+/-)-8-环己基-1，1^2，1213-四氢-11-甲氧基_la_(甲氧基羰基)_环丙并 [d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸(200毫克，0. 44毫摩尔)与CDI (92毫克，0. 57 毫摩尔)在THF(5毫升)中的溶液在60°C搅拌1小时。然后加入N-苄基硫酰胺(164毫克， 0.88毫摩尔)与DBUdOO毫克，0.66毫摩尔)，并将所得到的混合物在60°C搅拌过夜。接 着，将反应混合物倒入冷水中，以稀盐酸酸化，并萃取到乙酸乙酯中。有机相以盐酸(0. 1N) 及盐水洗涤，并干燥(硫酸钠)，及在真空中蒸发，得到标题化合物，其为褐色固体。ESI-MS m/e 628 (MH+)。中间体25 (+/-)-8_环己基-l，12b_ 二氢-11-甲氧基_5_[[[[(苯基甲基)氨基]磺酰基] 氨基]羰基]_环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂蕈-la (2H)_甲酸.标题化合物使用与就8-环己基_5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1， 12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆_la(2H)_甲酸所述相似 的程序由(+/-)_8-环己基_5-[[[(苄基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-(甲 氧基)_环丙并M吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂蕈-la(2H)_甲酸甲酯开始来制备。ESI-MS m/e 613 (ΜΗ+)。1H NMR (500MHz, MeOD) δ ppm 1. 22—2. 20 (m，13Η) 3. 27—3. 31 (m，1Η) 3. 47 (d，J =14. 95Ηζ，0· 6Η)3· 92 (d, J = 2. 44Ηζ，3Η)4· 04 (d，0· 4Η)4· 31 (d, J = 2. 75Ηζ，2Η)5· 24 (d, 0. 4Η) 5. 48 (d, 0. 6Η) 7. 02 (d, 1Η) 7. 17 (d, J = 2. 75Hz，1Η) 7. 19-7. 35 (m，5Η) 7. 39 (t，J = 7. 48Ηζ，2Η)7. 45-7. 52(m，1Η)7. 80(d，J = 1. 53Hz，0. 4Η) 7. 85 (dd，J = 8. 39,6. 87Hz, 1Η)8. 22 (d, J=L 53Ηζ，0. 6Η)。中间体26 (+/-)_8-环己基-5_[[(环丙基磺酰基)氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧 基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸.将(+/-)-8_环己基-l，la，2，12b_四氢_11_甲氧基_la_(甲氧基羰基)_环丙 并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸(1当量)与羰基二咪唑(1. 5当量)在无 7jC THF中的混合物在50°C加热30分钟，然后使其冷却至室温。然后连续加入1当量的环 丙基磺酰胺与1，8_ 二氮杂二环[5. 4. 0]十一碳-7-烯(2当量)。将所得到的混合物在室 温搅拌过夜。用酸性水溶液处理后，经分离的粗产物通过制备性HPLC来纯化。接着，使用 IN NaOH的THF-MeOH溶液来水解中间体酯，得到标题化合物。LC/MS 保留时间为2. 030分 钟；m/e 549(μη+)。1HnmrgoomHzADCI3)基于化合物的NMR光谱，发现产物以相互转化的 旋转异构体的形式存在。除非另有说明，中间体27-38使用以下实验操作。LCMS数据停止时间梯度时 间+1分钟；开始浓度0% B，除非另有说明；结束浓度100% B，除非另有说明；洗脱剂A 5% CH3CN/95% H2O(含有 IOmM NH4OAc)(用于柱 A、D 及 E)，10% Me0H/90% H20(含有 0. 1% TFA)(用于柱 B 与 C);洗脱剂8:95%0^^5%!120(含有101111 NH4OAc)(用于柱 A、D 及 E)， 90%]^0!1/10%!120(含有0.1%1卩六)(用于柱8与0 ；柱 A :Phenomenex 10 μ 4. 6X 50 毫 米 C18 ；柱 B :Phenomenex C1810 μ 3. 0X 50 毫米；柱 C :Phenomenex4. 6X 50 毫米 C1810 μ ； ft D =Phenomenex Lina C185 μ 3. 0 X 50 毫米；柱 E :Phenomenex 5 μ 4. 6 X 50 毫米 C18。制 备性HPLC数据用于H20/CH3CN(含有IOmM NH4OAc缓冲剂)的条件梯度历时20分钟的 线性梯度，除非另有说明；开始浓度15% B,除非另有说明；结束浓度100% B ；洗脱剂A 5% CH3CN/95% H2O(含有 IOmM NH4OAc)；洗脱剂 B 95% CH3CN/5% H2O(含有 IOmM NH4OAc)； 柱Sunfire Prep C18OBD 5 μ 30X 100 毫米；用于 H20/Me0H (含有 0. TFA 缓冲剂)的条 件梯度历时20分钟的线性梯度，除非另有说明；开始浓度30% B，除非另有说明；结束 浓度100% B ；洗脱剂 A 10% Me0H/90 % H2O (含有 0. 1% TFA)；洗脱剂 B 90% MeOH/10% H2O (含有 0. 1 % TFA)；柱Phenomenex 2I X 100 毫米 Cl8H2O15中间体27 (+/-)-8_环己基_5-[[(环丙基磺酰基)氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧 基-环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸.将(+/-)-8_环己基-l，la，2，12b_四氢_11_甲氧基_la_(甲氧基羰基)_环丙 并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸(1当量)与羰基二咪唑(1. 5当量)在无 7jC THF中的混合物在50°C加热30分钟，然后使其冷却至室温。然后连续加入1当量的环丙 基磺酰胺与1，8_ 二氮杂二环[5. 4. 0]十一碳-7-烯(2当量)。将所得到的混合物在室温 搅拌过夜。用酸性水溶液处理后，经分离的粗产物通过制备性HPLC来纯化。接着，使用IN NaOH的THF-MeOH溶液来水解中间体酯，得到标题化合物。LC/MS 保留时间为2. 030分钟； m/e 549(mh+)。1HnmrgoomHzADCI3)基于化合物的NMR光谱，发现产物以相互转化的旋转 异构体的形式存在。中间体28 13-环己基-3-甲氧基-6_(甲氧基羰基)_7H_吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆 -10-甲酸.在氮气下将三氟乙酸(30毫升)逐滴加到搅拌的13-环己基-3-甲氧基_7H_吲 哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂蕈_6，10-二甲酸10-叔丁酯· 6-甲酯(10克，20毫摩尔)在 二氯乙烷(30毫升)中的浆液中。将透明深绿色溶液在室温搅拌2. 5小时，浓缩至干，并 与EtOAc (乙酸乙酯)(100毫升)一起搅拌过夜。过滤收集固体，以EtOAc与Et2O (乙醚) 洗涤，得到13-环己基-3-甲氧基_6-(甲氧基羰基)-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆 -10-甲酸(8. 35克，18. 8毫摩尔，94% )，其为黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 13-2. 16 (m, 10H)，2· 74-2. 88 (m, 1H)，3. 84(s，3H)，3· 89(s，3H)， 4. 06-4. 29 (m, 1H)，5. 54-5. 76 (m, 1H)，6. 98 (d, J = 2. 6Hz, 1H)，7. 08 (dd, J = 8. 4，2. 6Hz, 1H)，7. 52 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，7. 78 (dd, J = 8. 8，1. IHz, 1H)，7. 80 (s, 1H)，7. 86 (d, J = 8. 8Hz, 1H)，8· 34 (d, J = 1. IHz, 1Η)。LCMS :m/e 446 (M+H)+，保留时间:3· 21 分钟，柱 B，4 分 钟梯度。中间体29 13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基_7Η_吲哚并[2，l_a] [2] 苯并氮杂蕈-6-甲酸甲酯.将1，1’_羰基二咪唑(1.82克，11. 2毫摩尔)力口到13-环己基_3_甲氧基_6_(甲 氧基羰基)-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆_10_甲酸(3. 85克，8. 65毫摩尔)在 THF(15毫升)中的浆液中。将反应混合物在60°C加热1.5小时，冷却至室温，以环丙基磺 酰胺(1. 36克，11. 2毫摩尔)处理，搅拌10分钟，然后通过逐滴加入DBU (2. 0毫升，13毫 摩尔)在THF(3毫升)中的溶液来处理。将反应混合物在室温搅拌过夜，以EtOAc (100毫 升)稀释，并以H20(约30毫升)、1N HC1(水溶液)(2X50毫升)及盐水(约30毫升)洗 涤。合并的水层以EtOAcdOO毫升)萃取，并以IN HCl (水溶液)(约50毫升)洗涤有机 层。以盐水(约30毫升)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4),过滤，及浓缩。将残留物与 Et2O (约100毫升)一起搅拌2小时，并过滤收集固体，以Et2O冲洗，及干燥，得到13-环己 基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_6_甲 酸甲酯(4. 24克，7. 73毫摩尔，89% )，其为淡黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 08-2. 13 (m, 14H)，2· 73-2. 87 (m, 1H)，3· 13-3. 24 (m, 1H)，3· 82 (s, 3H)，3. 89 (s，3H)，4. 04-4. 27 (m, 1H)，5. 50-5. 71 (m, 1H)，6. 98 (d, J = 2. 6Hz, 1H)，7. 08 (dd, J = 8. 8,2. 6Hz, 1H)，7· 44 (dd, J = 8· 4，1. IHz, 1Η)，7· 50 (d, J = 8. 8Hz, 1Η)，7· 80 (s, 1Η)，7. 86 (d，J = 8·4Ηζ，1Η)，8· 11 (宽单峰，1Η)，8· 78 (宽单峰，1Η)。LCMS :m/e 549(M+H)+，保留 时间3. 79分钟，柱B，4分钟梯度。中间体30 13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基_7H_吲哚并[2，l_a] [2] 苯并氮杂萆-6-甲酸.使13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基_7H_吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂蕈-6-甲酸甲酯(1.0克，1.8毫摩尔)溶于MeOH/THF(l 1，24毫升)中， 并以IM NaOH水溶液(5毫升)处理。将反应混合物搅拌并在60°C加热1. 5小时，且冷却 至室温。以IM HCl水溶液(5毫升)使透明溶液中和，及浓缩，从而除去有机溶剂。过滤 收集所得到的固体，以H2O洗涤，及在真空下干燥，得到13-环己基-10-((环丙基磺酰基) 氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂蕈_6_甲酸(1.0克，1.7毫摩尔， 94% )，其为亮黄色固体(含有0.75当量的THF)，所述固体无需进一步纯化即使用。1H NMR (300MHz, CD3OD) δ 1. 11-2. 24 (m, 17H，来自 THF 的 3H)，2. 81-2. 96 (m, 1H)，3. 17-3. 28 (m, 1H)，3. 69-3. 79 (m, 3H, from THF)，3. 94 (s, 3H)，4. 07-4. 33 (m, 1H)，5. 55-5. 81 (m, 1H)， 7. 14-7. 24 (m, 2H)，7. 55-7. 64 (m, 2H)，7. 88-7. 94 (m, 2H)，8. 20 (宽单峰，1H)。LCMS :m/e 535(M+H)+，保留时间3. 73分钟，柱B，4分钟梯度。中间体31 8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d] 吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸甲酯.向在氮气下搅拌的氢化钠(浓度为60%的矿物油分散液，370毫克，9. 2毫摩尔) 在DMSO (8毫升)中的浆液中加入碘化三甲基氧化锍(2. 03克，9. 2毫摩尔)。将反应混合物 搅拌45分钟，然后加入13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚 并[2，l-a][2]苯并氮杂萆-6-甲酸甲酯(2. 2克，4.0毫摩尔)在DMSO (5毫升)中的溶液 (以DMSO (2 X 3毫升)冲洗烧瓶)。将反应混合物搅拌1小时，倒入0. 25N HCl (100毫升)
46中，并以EtOAc (150毫升)萃取。以盐水(20毫升)洗涤有机层，且合并的水层以EtOAc (100 毫升)萃取。以盐水(约20毫升)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4),过滤，及浓缩至干。 将残留物与Et0Ac/Et20(l 3，50毫升)一起搅拌，并过滤除去固体。使母液浓缩，及在高 真空下干燥，得到8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b- 二氢环 丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸甲酯(1. 92克，3. 4毫摩尔，85% )， 其为黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或阻转异构体的约2 1 混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz, CD3OD) δ 0. 19-0. 26 (m，0· 4H)，0· 78-2. 19 (m, 15. 6Η)， 2. 64-3. 02 (m，2Η)，3. 16-3. 28 (m，1H)，3. 41 (d，J = 15. 0Hz，0. 6H)，3. 51 (s，1. 8H)，3. 80 (s， 1. 2H)，3· 88(s，3H)，4· 00 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 4H)，5. 22 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 4Η)，5. 42 (d, J = 15. 0Ηζ，0. 6H)，6. 93-7. 01(m，lH)，7. 12 (d, J = 2. 6Hz，0. 4H)，7. 19 (d, J = 2. 6Hz，0. 6H)， 7. 25 (d, J = 8. 8Hz，0. 6H)，7. 29 (d, J = 8. 8Hz，0. 4H)，7. 55 (dd, J = 8. 8，1. 5Hz，0. 6H)，
7.63 (dd, J = 8. 8，1. 5Ηζ，0· 4H)，7· 85 (d, J = 8. 8Ηζ，0· 6Η)，7· 88 (d, J = 8. 8Ηζ，0· 4Η)，
8.08(d, J= Ι.δΗζ,Ο. 4Η), 8. 31 (d, J = L 5Ηζ，0· 6Η)。LCMS :m/e 563 (Μ+Η)+，保留时间:3· 75 分钟，柱B，4分钟梯度。中间体32 8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d] 吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸.使8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并 [d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸甲酯(1. 92克，3. 41毫摩尔)溶于MeOH/ THF(1 1，40毫升)中，并以IM NaOH水溶液(8毫升)处理。将反应混合物搅拌并在60°C 加热2小时，且冷却至室温。用IM HCl水溶液(8毫升)中和透明溶液，及浓缩除去有机 溶剂。过滤收集所得到的固体，以H2O洗涤，及在真空下干燥，得到8-环己基-5-((环丙 基磺酰基)氨甲酰基)-11_甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂 萆-Ia (2H)-甲酸(1. 66克，3. 03毫摩尔，89 % )，其为黄色粉末，所述粉末无需进一步纯化 即使用。以旋转异构体或阻转异构体的1 1混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，⑶Cl3) δ 0. 32 (t, J = 6. 2Ηζ，0· 5Η)，0· 71-2. 12 (m, 15. 5H)，2· 61-2. 94(m，2H)，3· 16-3. 27 (m, 1H)， 3. 41 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 5Η), 3. 82 (s, 1. 5Η), 3. 86 (s, 1. 5Η), 3. 99 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 5Η),
5.28 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 5Η)，5. 49 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 5Η)，6· 85 (dd, J = 8. 4,2. 6Ηζ，0· 5Η)，
6.91 (dd, J = 8. 4，2. 6Ηζ，0. 5Η)，6. 96(d，J = 2. 6Ηζ，0. 5Η)，7. 08 (d，J = 2. 6Ηζ，0. 5Η)，
7.19 (d, J = 8. 4Ηζ，0· 5Η)，7· 24 (d, J = 8. 4Ηζ，0· 5Η)，7. 61 (d, J = 8. 4Ηζ，0· 5Η)，7. 67 (d,J = 8·4Ηζ，0· 5Η) ,7. 83 (d, J = 8·4Ηζ，0· 5Η), 7. 85 (d, J = 8·4Ηζ，0· 5Η)，8. 06 (s，0. 5H)， 8. 35 (s，0. 5H)，9· 31-10. 35 (m, 1Η)。LCMS :m/e 547 (Μ_Η)、保留时间:2· 06 分钟，柱 Α，4 分
钟梯度。中间体33 13-环己基-10-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基_7Η_吲哚并[2，l_a] [2] 苯并氮杂萆-6-甲酸甲酯.将1，1，-羰基二咪唑(262毫克，1. 62毫摩尔)加到13-环己基_3_甲氧基_6_(甲 氧基羰基)-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-10-甲酸(603毫克，1. 36毫摩尔)在 THF (3毫升)中的浆液中。将反应混合物在60°C加热1.5小时，冷却至室温，以丙-2-磺酰 胺(200毫克，1.62毫摩尔)处理，搅拌10分钟，然后通过逐滴加入DBU(0. 27毫升，1. 8毫 摩尔)在THF (0. 75毫升)中的溶液来处理。将反应混合物在室温搅拌过夜，以EtOAc (15 毫升)稀释，并以H20(约5毫升)、1N HCl (水溶液)(2X10毫升)及盐水(约5毫升) 洗涤。合并的水层以Et0Ac(15毫升)萃取，并以IN HC1(水溶液)(约10毫升)洗涤有 机层。以盐水(约5毫升)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4),过滤，及浓缩。将残留物与 Et2O(约15毫升)一起搅拌2小时，并过滤收集固体，以Et2O冲洗，及干燥，得到13-环己 基-10-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-3_甲氧基-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂蕈_6_甲 酸甲酯(640毫克，1. 2毫摩尔，85% )，其为亮黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。 1H WR(300MHz，CDCl3)Sl.l2-2.13(m，10H)，1.47(d，J = 7. 0Hz，6H)，2. 73-2. 86 (m，1H)， 3. 82 (s，3H)，3. 89 (s, 3H)，4. 06-4. 26 (m, 1H)，4. 09 (七重逢，J = 7. OHz, 1H)，5. 51-5. 71 (m, 1H) ,6. 98 (d, J = 2. 6Hz, 1H)，7. 08 (dd, J = 8. 4,2. 6Hz, 1H)，7. 44 (dd, J = 8. 4，1. 5Hz, 1H)，
7.50 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，7. 80 (s, 1H)，7. 87 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，8· 10 (d, J=L 5Hz, 1H)，
8.57(s，lH)。LCMS :m/e 551 (M+H)+，保留时间3. 87 分钟，柱 B，4 分钟梯度。中间体34 8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11_甲氧基-l，12b_ 二氢环丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂蕈-la(2H)_甲酸甲酯.向在氮气下搅拌的氢化钠(浓度为60%的矿物油分散液，97毫克，2.4毫摩尔)在 DMS0(2毫升)中的浆液中加入碘化三甲基氧化锍(530克，2. 4毫摩尔)。将反应混合物搅 拌45分钟，然后加入13-环己基-10-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并 [2,1-a] [2]苯并氮杂萆-6-甲酸甲酯(578克，1.05毫摩尔)在DMSO (1.5毫升)中的溶液 (以DMSO (2 X 0. 75毫升)冲洗烧瓶)。将反应混合物搅拌1小时，倒入0. 25N HCl (25毫升) 中，并以Et0Ac(40毫升)萃取。以盐水(10毫升)洗涤有机层，且合并的水层以Et0Ac(25 毫升)萃取。以盐水(约10毫升)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4),过滤，及浓缩至干。将 残留物与Et0Ac/Et20(l 4，10毫升)一起搅拌，并过滤除去固体。使母液浓缩，及在高真 空下干燥，得到8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b- 二氢环丙 并M吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸甲酯(620毫克，1. 0毫摩尔，定量)， 其为黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或阻转异构体的约2 1 混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 0. 32-0. 39(m，0. 4H)，0. 77-2. 09 (m, 17. 6H)， 2. 60-2. 96 (m, 2H)，3. 41 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 6Η)，3. 53 (s, 1. 8H)，3. 79 (s, 1. 2H)，3. 87 (s, 3H)， 4. 02-4. 14(m, 1. 4H)，5. 14(d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 4Η)，5. 39 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 6Η)，6· 89(dd, J = 8.4,2. 6Hz,0. 4H),6. 91(dd, J = 8. 4，2. 6Hz，0. 6H)，7. 00 (d，J = 2. 6Hz，0. 4H)，7. 11 (d, J =2. 6Hz，0. 6H)，7. 23 (d, J = 8. 4Hz，0. 6H)，7. 25 (d, J = 8. 4Hz，0. 4H)，7. 38 (dd, J = 8. 4， 1. 5Hz，0. 6H)，7. 43(dd，J = 8. 4，1. 5Hz，0. 4H)，7. 83 (d，J = 8. 4Hz，0. 6H)，7. 86 (d，J = 8. 4Hz，0. 4H)，7. 96(d, J = 1. 5Hz，0. 4H)，8. 20(d, J = 1. 5Hz，0. 6H)，8. 39(s，0. 4H)，8. 43 (s, 0. 6H)。LCMS :m/e 563 (M-H) _，保留时间3. 00 分钟，柱 A，4 分钟梯度。中间体358-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b- 二氢环丙并M 吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸.使8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b- 二氢环丙并 [d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸甲酯(606毫克，1. 07毫摩尔)溶于MeOH/ THF(1 1，14毫升)中，并以IM NaOH水溶液(2. 5毫升)处理。将反应混合物搅拌并在 60°C加热2小时，且冷却至室温。以IM HCl水溶液(2. 5毫升)使透明溶液中和，及浓缩， 从而除去有机溶剂。将残留物与H2OdO毫升)一起搅拌过夜，并过滤收集所得到的固体，以 H2O洗涤，及在真空下干燥，得到8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1， 12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸(530毫克，0.96毫摩 尔，90% )，其为亮黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或阻转异构体
的约 2 1 混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz, CD3OD) δ 0. 23-0. 30 (m, 0. 4H)，0. 80-2. 24 (m, 17. 6H) ,2. 70-3. 11 (m，2H)，3. 46 (d，J = 15. 0Hz，0. 6H)，3. 95 (s，3H)，3. 93-4. 10 (m, 1. 4H), 5. 29 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 4Η)，5. 48 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 6Η)，6. 98-7. 05 (m, 1Η)，7. 16 (d, J = 2. 6Ηζ，0· 4Η)，7· 23 (d, J = 2. 6Ηζ，0· 6Η)，7. 29 (d, J = 8. 8Ηζ，0. 6Η)，7. 33 (d, J = 8. 8Ηζ, 0. 4Η) ,7. 56 (dd, J = 8. 8，1. 5Ηζ，0. 6Η)，7. 64 (dd，J = 8. 4，1. 5Ηζ，0. 4Η)，7. 87 (d，J = 8. 8Ηζ，0. 6Η)，7. 92(d，J = 8. 4Ηζ，0. 4Η)，8. 13 (d, J = 1. 5Ηζ，0. 4Η)，8. 31 (d，J = 1. 5Ηζ， 0. 6Η)。LCMS :m/e 551 (Μ+Η)+，保留时间:3· 74 分钟，柱 B，4 分钟梯度。
中间体3610-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7Η-吲哚并[2，l_a] [2] 苯并氮杂萆-6-甲酸甲酯.将1，1’_羰基二咪唑(1.23克，7. 60毫摩尔)力口到13-环己基_3_甲氧基_6_(甲 氧基羰基)-7H-吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆_10_甲酸(2. 6克，5. 8毫摩尔)在THF(11毫 升)中的浆液中。将反应混合物在60°C加热1.5小时，冷却至室温，以硫酰胺(1. 12克，11. 7 毫摩尔)处理，搅拌10分钟，然后通过逐滴加入DBU (1. 8毫升，11. 7毫摩尔)在THF (3毫升) 中的溶液来处理。将反应混合物在室温搅拌3小时，以EtOAc (80毫升)与CH2Cl2 (100毫升) 稀释，及浓缩至干。残留物以CH2Cl2 (100毫升)稀释，并以IN HCl (水溶液)(2 X 100毫升) 洗涤。以CH2Cl2(100毫升)萃取合并的水层，并以饱和的盐水(约50毫升)洗涤合并 的有机层，干燥(MgSO4),过滤，及浓缩。将残留物与Et20(约75毫升)一起搅拌1小时，并 过滤收集固体，以Et2O冲洗，及干燥，得到10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13_环己基-3-甲 氧基-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_6_甲酸甲酯(2. 8克，5. 3毫摩尔，91 % )，其为亮 黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1.08-2. 10 (m, 10H), 2. 71-2. 84 (m, 1H)，3. 79 (s, 3H)，3. 89 (s, 3H)，4. 00-4. 18 (m, 1H)，5. 50-5. 64 (m, 1H)，5. 68 (s, 2H), 6. 97 (d, J = 2. 6Hz, 1H)，7. 07 (dd, J = 8. 8,2. 6Hz, 1H)，7. 46 (dd, J = 8. 4，1. 5Hz, 1H)， 7. 49 (d, J = 8. 8Hz, 1H)，7. 78 (s, 1H)，7. 82 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，8· 10 (宽单峰，1Η) ,9. 49 (s, 1H)。LCMS :m/e 524 (Μ+Η)+，保留时间3. 60分钟，柱B，4分钟梯度。中间体37 10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基_7H_吲哚并[2，l_a] [2] 苯并氮杂萆-6-甲酸.使10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-6-甲酸甲酯(725毫克，1.39毫摩尔)溶于MeOH/THF(l 1，16毫升) 中，并以IM NaOH水溶液(3毫升)处理。将反应混合物搅拌并在60°C加热0. 5小时，且冷 却至室温。反应溶液以Me0H/H20(2 1，15毫升)稀释，以IM HCl水溶液(3毫升)中和， 及浓缩，从而除去有机溶剂。过滤收集所得到的固体，以H2O洗涤，及在真空下干燥，得到 10_((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13_环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂 萆-6-甲酸(650克，1. 3毫摩尔，92，其为亮黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 16-2. 22 (m, 10H)，2· 82-2. 96 (m, 1H)，3. 94(s，3H)，4· 07-4. 29 (m, 1H)，5. 57-5. 80 (m, 1H)，7. 14-7. 23 (m, 2H)，7. 55-7. 63 (m, 2H)，7. 88-7. 94 (m 2H)，8. 18 (s, 1H)。LCMS :m/e 510 (M+H)+，保留时间2. 85分钟，柱B，4分钟梯度。中间体38 5_((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8_环己基-11-甲氧基-l，12b_ 二氢环丙并[d]吲 哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_甲酸甲酯.向在氮气下搅拌的氢化钠(浓度为60%的矿物油分散液，350毫克，8. 8毫摩尔) 在DMS0(8毫升)中的浆液中分三份加入碘化三甲基氧化锍(1.93克，8. 8毫摩尔)。将反 应混合物搅拌0. 5小时，然后加入10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧 基-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-6-甲酸甲酯(2. 0克，3. 8毫摩尔)在DMSO(8毫 升)中的溶液(以DMS0(2X2毫升)冲洗烧瓶)。将反应混合物搅拌1小时，倒入0.25N HCldOO毫升)中，并以CH2Cl2 (100毫升)稀释。过滤溶液，从而收集固体，并分离母液的 有机层，且浓缩至干。使残留物溶于EtOAc (约150毫升)中，以H20(约50毫升)与盐水 (约50毫升)洗涤，干燥(MgSO4),过滤，及浓缩至干。将残留物与Et0Ac/Et20 (4 1，50毫 升)一起搅拌，并过滤收集固体，且以EtOAc洗涤。将这些固体与最初收集的固体合并，得 到5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8_环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂蕈-la(2H)_甲酸甲酯(1. 39克，2. 6毫摩尔，68% )，其为黄褐色固体， 所述固体无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或阻转异构体的1 1混合物的形式呈 现。1H NMR(300MHz，DMS0-d6) δ 0. 13-0. 21 (m,0. 5H), 1. 06-2. 12 (m, 11. 5Η), 2. 64-2. 94 (m, 2Η) ,3. 46 (s, 1. 5Η) ,3. 49 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 5Η), 3. 75 (s, 1. 5Η), 3. 85(s,3H) ,4. 02 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 5Η)，5· 21 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 5Η)，5. 42 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 5Η)，6· 99-7. 09 (m, 1Η)， 7. 17-7.31(m，lH)，7.41(s，0.5H)，7.43(s，0.5H)，7.66-7.56(m，lH)，7.82(d，J = 8. 4Hz, 0. 5Η)，7· 87 (d, J = 8. 8Ηζ，0· 5Η)，8· 25 (s，0· 5Η)，8· 47 (s，0· 5Η)，11. 62 (s，0· 5Η)，11. 69 (s, 0. 5H)。LCMS :m/e 538 (M+H)+，保留时间:3· 56 分钟，柱 B，4 分钟梯度。
中间体395_((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8_环己基-11-甲氧基-l，12b_ 二氢环丙并[d]吲 哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸.使5_((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8_环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并 [d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_甲酸甲酯(1. 1毫克，2. 0毫摩尔)溶于MeOH/ THF(1 1，24毫升)中，并以IM NaOH水溶液(5毫升)处理。将反应混合物搅拌并在 60°C加热2小时，且冷却至室温。以IM HCl水溶液(5毫升)使透明溶液中和，及浓缩， 从而除去有机溶剂。将残留物与H2OdO毫升)一起搅拌1小时，并过滤收集所得到的固 体，以H2O洗涤，及在真空下干燥，得到5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲 氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)-甲酸(1. 05毫克， 2.0毫摩尔，98% )，其为淡黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或 阻转异构体的 1 1 混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 0. 08-0. 17(m,0. 5H)， 0. 79-2. 13 (m, 11. 5H)，2. 65-2. 94(m，2H)，3· 44 (d, J = 14. 6Ηζ，0· 5Η)，3. 85(s，3H)，3· 96 (d, J = 14. 6Ηζ，0. 5Η)，5. 20 (d, J = 14. 6Ηζ，0. 5Η)，5. 40 (d, J = 14. 6Ηζ，0. 5Η)，6. 98-7. 08 (m, 1Η)，7· 17-7. 46(m，4H)，7· 58 (d, J = 8. ΙΗζ,Ο. 5Η)，7. 62 (d, J = 8. ΙΗζ,Ο. 5Η)，7· 81 (d, J = 8. 8Ηζ，0· 5Η)，7· 87 (d, J = 8. 8Ηζ，0· 5Η)，8· 25 (s，0· 5Η)，8· 44 (s，0· 5Η) ,11. 48-13. 19 (m, 2Η)。LCMS :m/e 524 (M+H)+，保留时间3. 51分钟，柱B，4分钟梯度。除非另有说明，中间体40-44使用以下实验操作。中间体40 在氮气下将无水氢化钠(96毫克，4毫摩尔)加到搅拌的氯化三甲基氧化锍(567 毫克，4. 4毫摩尔)在无水DMSO(10毫升)中的悬浮液中。将所得到的混合物在室温搅拌 30-45分钟，然后以小份分批加入纯净的烯烃(1.0，2毫摩尔)。悬浮液以DMS0(5毫升)稀 释，并在50°C加热3-4小时。使反应混合物冷却至室温，并加入水。对所沉淀的固体进行 过滤，并以水洗涤，接着风干过夜，得到1. 15克粗产物，所述粗产物通过快速柱色谱(硅胶， 3% MeOH/DCM( 二氯甲烷))来纯化，得到纯的所期望的环丙基化合物(0. 96克)，其为灰白 色固体。LC/MS 保留时间 3. 816 分钟；m/e 516(MH+)。1H NMR(400MHz,CDCl3)观察到产物 以相互转化的旋转异构体的形式存在。中间体41 将叔丁酯(515毫克，1毫摩尔)与TFA(三氟乙酸)(5毫升)在无水DCM( 二氯甲 烷)(10毫升)中的溶液在室温搅拌直至水解完成(8至12小时)。使过量的TFA和DCM蒸 发至干，得到所要的酸(0.47克，100%)，其为浅褐色固体。冗肩5:保留时间2.245分钟； m/e 460 (ΜΗ+)。1H NMR (400MHz，⑶Cl3)观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。中间体42 一般操作将酸(1当量)与羰基二咪唑(1.5当量)在无水THF(四氢呋喃)中 的混合物在50°C加热30分钟，然后使其冷却至室温。然后连续加入1当量的硫酰胺(R = NR2)或磺酰胺(R=烷基或芳基)与DBU (2当量)。将所得到的混合物在室温搅拌过夜。用 酸性水溶液处理后，经分离的粗产物通过制备性HPLC来纯化，得到产物。 中间体43
使用IN NaOH的THF-MeOH溶液来水解甲酯部分，得到相应的酸c 中间体44
R-
O
OMe将酸衍生物(1当量)与相应的胺(RRNH，1.2当量)、三乙胺(2至3当量)和 TBTUd. 3当量)在无水DMF中混合，并在室温搅拌1至2小时直至酰胺偶联完成。经分离 的粗产物通过制备性HPLC来纯化，得到所要的酰胺。下述中间体45-49通过以下LC/MS方法来分析分析条件柱PHENOMENNEX_LUNA 3. O X 50毫米S 10;流动相(A) 10 90甲醇-水，(B) 90 10甲醇-水，缓冲剂为0. 1 % TFA ；梯度范围0-100% B ；梯度时间2分钟；流速4毫升/分钟；分析时间3分钟；检测 检测器1为UV 220纳米，检测器2为MS (ESI+)。中间体45(+/-)-8-环己基-1，1^2，1213-四氢_11_甲氧基_la_(甲氧基羰基)_环丙并 [d]吲哚并[2，l-a][2]苯并氮杂萆-5-甲酸叔丁酯。LC/MS 保留时间3· 816分钟；m/e 516 (ΜΗ+)。1H NMR (400MHz，⑶Cl3)观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。中间体46
54 (+/-)-8_环己基-l，la，2，12b_四氢-11-甲氧基_la_(甲氧基羰基)_环丙 并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸。保留时间2· 245分钟；m/e 460 (MH+)。 1HNMR(400MHz,⑶Cl3)。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。中间体47 (+/-)-8_环己基_5-(吗啉代磺酰基氨甲酰基)-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧 基“环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-Ia-甲酸·产物通过制备性HPLC来纯化，并分离为米色固体。LC/MS 保留时间1. 968分钟； m/e 460 (ΜΗ+)。1H NMR (400MHz，⑶Cl3)。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。中间体48 (+/-)-8_环己基-5-(4_甲基哌嗪-1-基磺酰基氨甲酰基)-l，la，2，12b-四 氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-Ia-甲酸.产物通过制备性HPLC来纯化，并分离为米色固体，其为单TFA盐形式。LC/MS 保 留时间1. 687分钟；m/e 607 (MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。观察到产物以相互转化的旋 转异构体的形式存在。中间体49
(+/-)-8_环己基-5_(环丙基磺酰基氨甲酰基)-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧 基-环丙并M吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-Ia-甲酸。LC/MS 保留时间2· 030分钟； m/e 549 (ΜΗ+)。1H NMR (400MHz，⑶Cl3)观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。中间体50-60通过以下LC/MS方法来分析开始％ B 0 ；最终％ B 100 ；梯度时 间3分钟；停止时间4分钟；流速4毫升/分钟；波长220纳米；溶剂A:10% Me0H/90% Η20/0· 三氟乙酸；溶剂 B 10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸；柱=XBridge 4. 6X50 毫 米S5。中间体50 将酸(1.3g，2. 83mmol)和 CDI (0. 64g，3. 97mmol)在 THF(20mL)中的混合物在 50°C 加热0. 5小时，冷却下来，并加入甲磺酰胺(0. 4g，4. 2mmol)和DBU(0. 264mL, 1. 77mmol)。将 混合物搅拌20小时，以EtOAc稀释，以冷的INHCl (2X)洗涤，以盐水洗涤，干燥(MgSO4)， 除去溶剂，并通过快速色谱(Biotage 40M)来纯化，得到化合物1_2 (1. 28g，85 % )，其为 浅黄色固体。LC-MS保留时间3. 51 ;MS m/z 537 (M+H)。观察到化合物1_2以相互转化 的旋转异构体的形式存在。主要异构体=1H NMR(400MHz，氯仿-D) δ ppm 1. 11-2. 17 (m, 12H)，2. 84-2. 98 (m, 2H)，3. 43 (d, J = 14. 86Hz, 1H)，3. 49 (s, 3H)，3. 55 (s, 3H)，3. 89 (s, 3H)， 5. 40 (d, J = 15. 11Hz，1H) ,6. 91-6. 96(m，1H)，7. 13(d，J = 2. 52Hz，1H)，7. 22-7. 27 (m， 1H)，7· 39 (dd, J = 8. 31，1. 51Hz, 1H)，7. 85 (d, J = 8. 81Hz, 1H)，8· 23 (d, J=L 26Hz, 1H)， 8. 75 (s，1H)。中间体51 向酯(1. 28g，2. 4mmol)在 THF(5mL)禾口 Me0H(5mL)中的溶液中加入 NaOH(1N，12mL, 12mmol)。在室温搅拌3小时后，混合物以EtOAc稀释，以冷的IN HCl洗涤，以盐水洗涤，干 燥(MgSO4)，并真空除去溶剂，得到酸，其为米色固体(1. 20g,96% )。LC-MS保留时间3. 46 ； MS m/z 523 _)。1H NMR(400MHz，氯仿-D)观察到酸以相互转化的旋转异构体(约1/1) 的形式存在。中间体52用于胺偶联的典型一般操作向酸(0.060g，0. llmmol)和含有仲胺基团/叔胺基 团的二胺二盐酸盐(0. 034g，0. 17mmol)在DMC(1.5mL)中的混合物中加入Et3N(三乙胺) (0. 096mL,0. 69mmol)和 HBTU(0. 065g，0. 17mmol)。将混合物在室温搅拌 0. 5 小时，用 MeOH 稀释，除去溶剂。将残留物溶于甲醇中，过滤，并通过制备性HPLC来纯化，得到胺1的TFA 盐(0. 0378g，82% )，其为TFA盐，所述TFA盐通过LC-MS禾口 1H NMR来表征。中间体53由酸制得产物(0.47g,44% )。LC-MS 保留时间3. 54 ；MS m/z 551 (M+H)。中间体54 制得产物(0. 43g,94% )。LC-MS 保留时间3. 49 ；MS m/z 537 (M+H) 中间体55 由酸制得产物(0.96g，59% ) ο LC-MS 保留时间3. 58 ；MS m/z 578 (M+H)。观 察到化合物以相互转化的旋转异构体(3/4)的形式存在。主要异构体=1H NMR(400MHz, 氯仿-D) δ ppm 1. 16-1. 59(m，4H)，1. 72(dd，J = 9. 44，4. 15Hz，3H)，1. 88—2. 12 (m，4H)， 2. 24-2. 36 (m, 2H)，2. 75-2. 97 (m, 2H)，3. 44 (d, J = 14. 86Hz, 1H)，3. 56 (s, 3H)，3. 89 (s, 3H)， 4. 09 (d, 1H)，4. 24-4. 37 (m, 4H)，5. 41 (d，J = 14. 86Hz, 1H)，6. 92-6. 96 (m, 1H)，7. 13 (d, J =2. 01Hz, 1H), 7. 24-7. 30 (m, 1H), 7. 39 (dd, J = 8. 31，1. 51Hz，1H)，7. 84-7. 88 (m，1H)， 8. 24 (d, J=L 51Hz, 1H)。中间体56 制得产物(0.93g，100% )。LC-MS 保留时间3. 51 ;MS m/z 564(M+H) 观察到 化合物以相互转化的旋转异构体(约3/4)的形式存在。主要异构体力NMR(400MHz)ppm 0. 34-0. 42 (m, 1H)，1. 15-2. 10 (m, 11H)，2. 22-2. 38 (m, 2H)，2. 65-2. 78 (m, 1H)，2. 84-2. 94 (m, J = 3. 02Hz, 1H) ,3. 84(s,3H) ,4. 03 (d, J = 15. 11Hz，1H)，4· 21-4. 43 (m，4H)，5· 34 (d，J =14. 86Hz, 1Η) ,6. 87 (dd, J = 8. 56，2. 77Hz，1Η)，6. 98 (d，J = 2. 52Hz，1Η)，7. 21 (d，J = 8. 31Hz, 1H)，7· 69-7. 75 (m, 1H)，7· 86-7. 90 (m, 1Η)，8· 13 (s，1Η)。中间体57
由酸制得产物(0.109g,67% )。LC-MS 保留时间3. 60 ；MS m/z 580 (M+H)。观察 到化合物以相互转化的旋转异构体(约5/4)的形式存在。主要异构体=1H NMR(400MHz) ppm 1. 16-2. 09 (m, 14H)，2. 73-2. 93 (m, 2H)，3. 07 (s,3H)，3. 31-3. 52 (m, 3H)，3. 76 (s,3H)， 3. 88(s，3H)，4· 05-4. 10 (m, 1H)，5. 40 (d, J = 15. 11Hz, 1H) ,6. 88-6. 93 (m, 1H)，7. 13 (d, J = 2. 27Hz, 1H)，7. 22-7. 29 (m, 1H)，7. 33-7. 42 (m, 1H)，7. 82-7. 86 (m, 1H)，8. 19 (d, J= 1. 51Hz, 1H)。中间体58 制得产物(0.108g, 100% )。LC-MS 保留时间3. 55 ；MS m/z 566 (M+H)。中间体59 由酸制得产物(0.127g，67% )。LC-MS 保留时间3. 64 ;MS m/z 594(M+H) 观 察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在。1H NMR (400MHz) ppm 1. 11-2. 13 (m, 18H)，2. 64 (dd, J = 10. 07，6. 80Hz, 1H)，2. 84-2. 96 (m, 1H)，3. 34-3. 67 (m, 4H)，3. 75 (s, 3H)， 3. 88 (s，3H)，4. 03-4. 10 (m, 1H)，5. 40 (d, J = 15. 36Hz, 1H)，6. 90-6. 95 (m, 1H)，7. 13 (d, J = 2. 01Hz, 1H), 7. 21-7. 29 (m, 1H), 7. 33-7. 39 (m, 1H), 7. 83 (d, J = 8. 06Hz, 1H) ,8. 20 (d, J = 1. 26Hz, 1H)。中间体60
制得产物(0.126g, 100% )。LC-MS 保留时间3. 57 ；MS m/z 580 (M+H)。 8-环己基-11-甲氧基-N-((l-甲基环丙基)磺酰基)-la-((3_甲基_3，8_ 二氮 杂二环[3. 2.1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并 氮杂革_5_甲酰胺·将CDI (26. 4mg，0. 163mmol)加到搅拌的 8_ 环己基 _11_ 甲氧基-la_((3_ 甲 基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并 [2，l-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸· TFA(60mg，0.092讓ol)于THF(ImL)中的溶液中，将 反应混合物在60°C搅拌1小时，并使其冷却至室温。然后加入1-甲基环丙烷-1-磺酰 胺(22mg，0. 16mmol)和DBU(0. 03mL，0. 2mmol)，然后将反应混合物在室温搅拌过夜。反 应混合物用MeOH稀释并通过制备性HPLC(H20/CH3CN(含有IOmM NH4OAc缓冲剂))来纯 化，得到8-环己基-11-甲氧基-N-((l-甲基环丙基)磺酰基)-la-((3-甲基-3，8-二 氮杂二环[3. 2.1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2] 苯并氮杂萆-5-甲酰胺(15.811^，0.02411111101，26%收率)，其为灰白色固体。分离化合物， 其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或阻转异构体的13混合物的形式存在。 1H NMR (300MHz，CD3OD) δ ppm 8. 15 (s，0. 25H)，8. 03 (s，0. 75H)，7. 90 (d，J = 8·8Ηζ，1Η)， 7. 72-7. 59 (m, 1Η)，7. 38-7. 30 (m, 1Η)，7. 22 (s，0. 75H)，7. 16 (s, 0. 25H)，7. 07-6. 97 (m, 1H)， 5. 17 (d, J = 15. OHz, 0. 75H), 4. 23-4. 13(m，0. 25H)，3. 91(s，3H)，3· 66 (d, J = 15. OHz, 1H)， 3. 33-3. 20 (m, 2H)，3. 12-0. 87 (m，31. 75H)，0. 26-0. 08 (m, 0. 25H)。LCMS :m/e = 671 (M+H) +，保 留时间=2. 33 分钟(柱=(3)Phenomenex 10 μ C 184. 6X 30mm，溶剂 A = 5% CH3CN-95% H2O-IOmm 乙酸铵，溶剂 B = 95% CH3CN-5% H2O-IOmM 乙酸铵，起始％ B = 0，终止％ B = 100， 梯度时间=4分钟，保持时间=1分钟，流速=4毫升/分钟)。
60 8-环己基-N-(异丙烯基磺酰基)-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环 [3. 2.1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆 -5-甲酰胺·将CDI (26. 4mg，0. 163mmol)加到搅拌的 8_环己基_11_ 甲氧基-la_((3_ 甲基 _3， 8_ 二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸· TFA(60mg，0. 092mmol)于THF(ImL)中的溶液中，将反应混合物 在60°C搅拌1小时，使其冷却至室温。然后加入丙-1-烯-2-磺酰胺(20mg，0. 16mmol)和 DBU (0. 03mL,0. 2mmol)，将反应混合物在室温搅拌过夜。用MeOH稀释反应混合物并通过制 备性HPLC (H20/CH3CN (含有IOmM NH4OAc缓冲剂))来纯化，得到8-环己基-N-(异丙烯基 磺酰基)-11-甲氧基_la-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)_l，la， 2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆_5_甲酰胺(16. Omg,0. 024mmol, 26%收率)，其为白色固体。分离化合物，其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或 阻转异构体的1 3混合物的形式存在。1H NMR(300MHz，CD3OD) δ ppm 8. 20 (s，0. 25H)， 8. 07 (s，0· 75H)，7. 84-7. 70 (m, 2H)，7. 35-7. 27 (m, 1H)，7. 23-7. 18 (m, 0. 75H)，7. 17-7. 13 (m, 0. 25H)，7. 05-6. 95 (m, 1H)，6. 00 (s, 1H)，5. 54 (s, 1H)，5. 24-4. 81 (m, 1H)，4. 54-3. 30 (m, 1H)， 3. 91 (s，0. 75H) 3. 90 (s, 2. 25H)，3. 09-0. 98 (m, 29. 75H)，0. 28-0. 18 (m, 0. 25H)。LCMS :m/e = 657(M+H)+，保留时间=2. 05 分钟(柱=(3)Phenomenex 10 μ C 184. 6X 30mm，溶剂 A = 5% CH3CN-95 % H2O-IOmm 乙酸铵，溶剂 B = 95% CH3CN-5 % H2O-IOmM 乙酸铵，起始 ％ B = 0，终 止％ B = 100，梯度时间=4分钟，保持时间=1分钟，流速=4毫升/分钟)。 13-环己基-3-甲氧基-6-((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂蕈-10-甲酸叔丁酯.将HATU(680mg，1. 8mmol)加到搅拌的10_(叔丁氧基羰基)_13_环己基-3-甲氧 基-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-6-甲酸(670mg，1. 37mmol)和3-甲基_3，8-二氮杂 二环[3. 2. 1]辛烷二 HCl 盐(560mg，2. 81mmol)于 DMF(6mL)和 ΤΕΑ(1· 2mL，8. 2mmol)中的溶 液中，将反应混合物搅拌30分钟(通过LCMS确定反应完成)。反应混合物用水( 35mL) 稀释(形成沉淀物)并搅拌过夜。过滤收集沉淀物，用水冲洗并在55°C高真空干燥，得到 13-环己基-3-甲氧基-6-((3-甲基_3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)_7H_吲 哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-10-甲酸叔丁酯(775mg，L30mmol，95%收率)，其为浅黄 色固体。所述物质不经进一步纯化即使用。1HNMR(SooMHziCDCl3)Sppm 1. 14-3. 95 (m,24H), 1. 59(s,9H) ,3. 86(s,3H) ,4. 21-5. 26 (m,2H) ,6. 82 (s, 1H) ,6. 88 (d, J = 2. 6Ηζ，1Η)， 7. 01 (dd, J = 8. 8,2. 6Hz, 1H), 7. 47 (d, J = 8. 8Hz，1H)，7. 66 (dd，J = 8. 4，1. 1Hz，1H)， 7. 80 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，8. 02 (宽单峰，1H)。LC-MS 保留时间:3· 72 分钟；m/z 596 (ΜΗ+)。 在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C183. 0 X 50mm柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5 毫升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟， 保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为10% Me0H/90% H20/0. 三氟乙 酸且溶剂B为10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸。使用Micromass Platform用于LC以 电喷雾模式确定MS数据。
将13-环己基-3-甲氧基-6-((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基) 羰基)-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆_10_甲酸叔丁酯(300mg，0. 504mmol)溶解在 DCE (5mL)中，然后加入TFA (700 μ 1，9. 09mmol)(反应混合物变为绿色)，将反应混合物在 室温搅拌1小时(通过LCMS确定转化约70% )。再加入TFA(700y 1，9. 09mmol)，将反应 混合物搅拌1小时(通过LCMS确定反应完成)。在旋转蒸发仪上浓缩反应混合物，用乙醚 稀释并再次浓缩，如此进行两次，得到13-环己基-3-甲氧基-6-((3-甲基-3，8-二氮杂 二环[3. 2.1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-10-甲酸三氟乙酸 盐(362mg，0. 55mmol，定量)，其为深黄色固体。不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 06-2. 13 (m，21H)，2. 68-2. 86 (m, 1H)，3. 36-3. 50 (m, 2H)，3. 90 (s,3H)， 4. 11-5. 35(m，2H)，7. 14(s，lH)，7. 18-7. 28 (m，2H)，7. 53 (d，J = 8. 4Hz, 1H), 7. 61 (dd, J = 8. 4，1. IHz, 1Η)，7· 87 (d, J = 8. 4Hz, 1Η)，8· 21 (宽单峰，1Η)，9· 55 (宽单峰，1Η)。LC-MS 保 留时间3. 72分钟；m/z 596 (ΜΗ+)。LC-MS保留时间2. 50分钟；538m/z (MH_)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C 184. 6 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升 /分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持 时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且溶剂 B为5%H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确 定MS数据。
13-环己基-N-((l-(环丙基甲基)环丙基)磺酰基)-3-甲氧基-6-((3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂蕈-10-甲酰 胺·将CDI(27mg，0. 17mmol)加到搅拌的 13-环己基_3_ 甲氧基_6_((3-甲基-3，8_二 氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂蕈_10_甲酸三氟 乙酸盐(70mg，0. 130mmol))于THF (0. 5mL)中的溶液中，将反应混合物在60°C加热1. 5小 时。将反应混合物冷却至室温，然后加入1_(环丙基甲基)环丙烷-1-磺酰胺(29.6mg， 0. 169mmol)。将反应混合物搅拌5分钟，然后加入DBU (0. 029mL, 0. 195mmol)。将反应混合物 在室温搅拌1小时，再加入DBU (0. 029mL,0. 195mmol)并在室温搅拌过夜(通过LCMS确定转 化约75%)。反应混合物用EtOAc( 2mL)稀释，用浓度为IM的HCl水溶液(2X2mL)洗涤。 在氮气气流下浓缩有机层，溶解在MeOH ( 3mL)中，通过制备性HPLC来纯化(柱=Xterra Prep MS C185 μ 30 X 100mm，洗脱剂A 乙腈/水(含有IOmM乙酸铵)，洗脱剂B :95%乙 腈/水(含有IOmM乙酸铵)，流速42毫升/分钟，历时20分钟从15%洗脱剂B至100% 洗脱剂B的线性梯度)，得到13-环己基-N- ((1-(环丙基甲基)环丙基)磺酰基)-3-甲氧 基-6- ((3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并 氮杂萆-10-甲酰胺(32mg，0. 046mmol，35%收率)，其为黄色固体。1H NMR(300MHz, CDCl3) δ ppmO. 02-0. 09(m，2H)，0· 38-0. 47(m，2H)，0· 61-0. 74 (m, 1Η)，1. 14-2. 95(m，31H)，3· 89 (s, 3H)，4· 20-4. 42 (m, 1Η)，5· 11-5. 32 (m, 1Η)，6· 82 (s，1Η)，6· 86-6. 90 (m，2Η)，7· 05 (dd, J = 8. 8,2. 6Hz, 1Η) ,7. 49 (d, J = 8· 8Hz，1Η)，7· 49—7. 54 (m，1Η)，7· 86 (d，J = 8·4Ηζ，1Η)， 8. 10 (宽单峰，1Η)。LC-MS 保留时间3. 46 分钟；m/z 697 (ΜΗ+)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C183.0X50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为 220nm的SPD-10AV UV--Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100% 溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析 时间为5分钟，其中溶剂A为10%Me0H/90%H20/0. 1 %三氟乙酸且溶剂B为10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆_5_甲酸叔丁酯·将碘化三甲基氧化锍(375mg，1. 69mmol)分三份加到搅拌的60 % NaH分散体 (68mg, 1. 7mmol)于DMSO (1. 5mL)中的浆液中(起泡)。将反应混合物搅拌20分钟，然后加入 13-环己基-3-甲氧基-6-((3-甲基_3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)_7H_吲 哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂蕈-10-甲酸叔丁酯(438mg，0. 735mmol)于DMS0(2. 5mL)中的溶 液，将反应混合物搅拌1小时(通过LCMS确定没有所需产物)。将反应混合物在90°C加 热3小时(通过LCMS确定反应完成)，冷却至室温，用0. 25M HCl水溶液(20mL)淬灭并用 Et0Ac(2X20mL)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩，得到
72009-057，其为橙色油状物。油状物不经进一步纯化即使用，其为制备8-环己基-11-甲氧 基-la-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)-1，la，2，12b-四氢环丙并 [d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂革-5-甲酸三氟乙酸盐的起始物料。分离化合物，其为对映 异构体的混合物。LC-MS保留时间3. 68分钟；m/z 610 (ΜΗ+)。在配备有Phenomenex-Luna 10 μ C183.0X50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为 220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100% 溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析 时间为5分钟，其中溶剂A为10%Me0H/90%H20/0. 1 %三氟乙酸且溶剂B为10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂蕈_5_甲酸三氟乙酸盐·将酸(448mg，0.735mmol)溶解在 DCE (6mL)中，然后加入 TFA (1. 5mL，19mmol)(反 应混合物变为深红色)，将反应混合物在室温搅拌2小时(通过LCMS确定反应完成)。在旋 转蒸发仪上浓缩反应混合物，用乙醚稀释两次并再次浓缩成橙色油状物。残余物用乙醚浆 化，过滤收集固体(360mg黄色固体)，用己烷冲洗。从滤液中收集额外的固体(52mg黄色固 体)并用己烷冲洗。显示合并的固体为8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基-3，8-二氮杂 二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-1，1^2，1213-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂 萆-5-甲酸三氟乙酸盐(412mg，0. 62mmol,84% )。分离化合物，其为对映异构体的混合物并 以旋转异构体或阻转异构体的1 5混合物的形式存在。主要异构体"HNMRGOOMHz，⑶Cl3) δ ppm 0. 81-1. 01 (m, 2H)，1. 13-2. 65 (m, 18H)，2. 62 (s, 3H) 2. 69-3. 70 (m, 2H)，3. 60 (d, J = 15. 4Hz, 1H) ,3. 87(s,3H) ,4. 36-5. 30(m,3H) ,6. 95 (dd, J = 8. 8，2. 2Hz，1H)，7. 09 (d，J = 2. 2Hz, 1H) ,7. 28 (d, J = 8. 8Hz，1H)，7. 75 (d，J = 8. 4Hz，1H)，7. 86 (d，J = 8·4Ηζ，1Η)， 8. 08 (s，1H)。LC-MS 保留时间3. 24 分钟；554m/z (ΜΗ+)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C183. 0X50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为 220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100% 溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析 时间为5分钟，其中溶剂A为10%Me0H/90%H20/0. 1 %三氟乙酸且溶剂B为10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。
8-环己基-N-((l-乙基环丙基)磺酰基)-11-甲氧基_la_((3-甲基_3，8_ 二氮 杂二环[3. 2.1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并 氮杂萆-5-甲酰胺.将CDI(21mg，0. 13mmol)加到搅拌的8_环己基-11-甲氧基-la_((3_甲基_3， 8_ 二氮杂二环[3. 2.1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸三氟乙酸盐(56mg，0. IOmmol)于THF(0.5mL)中的溶液中，将反应 混合物在60°C加热1. 5小时。将反应混合物冷却至室温，先后加入1-乙基环丙烷-1-磺 酰胺(20mg，0. 13mmol)和 DBU (0. 025mL，0. 15mmol，浓度为 20% 的 THF 溶液)。将反应混合 物在室温搅拌1小时，再加入DBU(， 0. 025mL)，继续搅拌2小时。将反应混合物在60°C 加热1小时，然后在室温搅拌过夜(转化约25% )。再加入DBU(0. 025mL)和1-乙基环丙 烷-1-磺酰胺(20mg，0. 13mmol)，将反应混合物在室温搅拌3天。反应溶液用EtOAc (2mL) 稀释，用IM HCl (2mL)洗涤。用氮气气流将有机层浓缩至干，溶解在MeOH (1. 5mL)中，过滤并 通过制备性HPLC(CH3CN/H20 (含有IOmM NH4OAc))来纯化，得到8-环己基-N-((1-乙基环丙 基)磺酰基)-11-甲氧基_la-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)_1， la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂蕈_5_甲酰胺(5. 3mg,7. 7ymol, 8%收率)，其为黄色固体。分离化合物，其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或阻 转异构体的1 2混合物的形式存在。1H NMR(500MHz，CDCl3) δρρπι-0. 27至-0. 12(m， 0. 33H)，0. 27-0. 32 (m, 0. 33H)，0. 94-2. 84 (m, 32. 33H)，2. 91-3. 00 (m, 1H)，3. 29-3. 50 (m, 1H) ,3. 59 (d, J = 15. 3Hz, 1H) ,3. 89(s,2H) ,3. 90 (s, 1H) ,4. 14 (d, J = 14. 7Hz，0. 33H)， 4. 35-4. 51 (m, 0. 67H)，4. 76 (d, J = 14. 7Hz，0. 33H)，5. 18 (d, J = 14. 7Hz，0. 67H)，6. 92 (dd, J = 8. 2,2. 6Hz,0. 33H) ,6. 96 (dd, J = 8. 6，2. 6Hz，0. 67H)，7. 01 (d，J = 2. 6Hz，0. 33H)， 7. 12 (d, J = 2· 6Ηζ，0· 67H)，7· 29(d，J = 8. 6Ηζ，0. 67Η)，7. 29 (d，J = 8· 2Ηζ，0· 33Η)， 7. 49 (d, J = 8. 2Ηζ，0. 33Η)，7. 54-7. 61 (m，0. 67Η)，7. 87(d，J = 8. 6Ηζ，0. 67Η)，7. 88 (d， J = 8. 2Ηζ,0. 33Η)，7. 98 (s, 1Η)。LC-MS 保留时间3. 23 分钟；685m/z (ΜΗ+)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C183. 0 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据，使 用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/ 分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B。梯度时间为4分钟。保持 时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为10% Me0H/90% H20/0. 三氟乙酸且 溶剂B为10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸。使用Micromass Platform用于LC以电喷 雾模式确定MS数据。 8-环己基-N- ((1-(环丙基甲基)环丙基)磺酰基)-11-甲氧基-Ia- ((3_甲基_3， 8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-1，la, 2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂萆_5_甲酰胺· 将CDI(24mg，0. 15mmol)加到搅拌的8_环己基-11-甲氧基-la_((3_甲基_3， 8_ 二氮杂二环[3. 2.1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸三氟乙酸盐(64mg，0. 12mmol)于THF(0.5mL)中的溶液中，将反 应混合物在60°C加热1.5小时。将反应混合物冷却至室温，先后加入1_(环丙基甲基) 环丙烷-I-磺酰胺(33mg，0. 19mmol)和DBU (0. 09mL,0. 6mmol)，将反应混合物在室温搅拌 过夜(通过LCMS确定转化约50% )。反应混合物用IM HCl (水溶液)淬灭，浓缩，溶解 在MeOH (1 · 5mL)中，过滤并通过制备性HPLC (CH3CN/H20 (含有1 OmM NH4OAc))来纯化，得 到8-环己基-N-((l-(环丙基甲基)环丙基)磺酰基)-11-甲氧基_la-((3-甲基-3， 8_ 二氮杂二环[3. 2..1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺(14.21^，0.020_01，17%收率)，其为浅黄色固体。分离化合 物，其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或阻转异构体的1 3混合物的形式存在。 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ ppm-0. 33 至-0. 14 (m，0. 25H)，0. 01-0. 11 (m，2H)，0. 20-0. 29 (m， 0. 25H)，0. 38-0. 47 (m, 2H)，0. 61-3. 44 (m, 32. 5H)，3. 56 (d, J = 14. 6Hz,0. 75H)，3. 87 (s, 2. 25H), 3. 88 (s, 0. 75H), 4. 10 (d, J = 14. 3Ηζ，0. 25H)，4. 24-4. 54 (m，1H)，4. 73 (d，J = 14. 3Hz,0. 25H) ,5. 16 (d, J = 14. 6Hz，0. 75H)，6. 87-6. 97 (m，1H)，6. 99 (d，J = 2. 6Hz, 0. 25H) ,7. 10 (d, J = 2. 2Hz，0. 75H)，7. 27(d，J = 8. 8Hz，0. 75H)，7. 28 (d，J = 8. 4Hz, 0. 25H), 7. 48 (dd, J = 8. 8，1. 1Ηζ，0. 25H)，7. 59 (宽二重峰，J = 8. 4Ηζ，0· 75H)，7· 85 (d, J =8. 4Hz，0. 75H)，7. 85 (d, J = 8. 8Hz，0. 25H)，7. 95(s，0. 75H)，7. 97(s，0. 25H)。LC-MS 保 留时间3. 04 分钟；m/z 309(MH-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6X50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0% 溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶 剂A为5%乙腈/95% H2O/IOmM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用 Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。
13-环己基-N- ((1-乙基环丙基)磺酰基)-3-甲氧基_6_ ((3-甲基_3，8_ 二氮杂 二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂蕈-10-甲酰胺.将CDI(80mg，0.49mmol)加到搅拌的 13-环己基-3-甲氧基_6-((3_ 甲基-3，8-二 氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂革_10_甲酸叔丁 酯· TFA(200mg，0. 30mmol)于THF(1. 5mL)中的溶液中，将反应混合物在60°C加热2小时。 将反应混合物冷却至室温，然后将反应溶液的1/3( 0. 55mL)加到搅拌的1_乙基环丙 烧-1-磺酰胺(40mg,0. 27mmol)于 DBU (0. 20mL，1. 3mmol)禾Π THF (0. 20mL)中的溶液中。将 反应混合物在室温搅拌过夜(通过LCMS确定转化约75% )，浓缩成油状物，用IN HCl ( ImL)淬灭(形成沉淀物)并用EtOAc (2X ImL)和DCM(2X ImL)萃取。将合并的有机相浓缩至干，溶解在MeOH (1. 5mL)中并通过制备性HPLC(CH3CN/H20 (含有IOmM NH4OAc))来纯化， 得到13-环己基-N-((1-乙基环丙基)磺酰基)-3_甲氧基-6-((3-甲基_3，8-二氮杂二 环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂蕈-10-甲酰胺(30. 9mg, 0. 046mmol，45%收率)，其为黄色固体。1H NMR(300MHz, CD3OD) δ ppm 0. 97-2. 35 (m，29H)， 2. 56-2. 73 (m, 1H)，2. 80-2. 94 (m, 1H)，3. 38-3. 58 (m, 1H)，3. 94 (s,3H)，4. 29-4. 64 (m, 2H)， 5. 14-5. 31 (m, 1H)，7. 05 (s, 1H)，7. 09-7. 20 (m, 2H)，7. 57 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，7. 65 (dd, J = 8. 4，1. 5Hz, 1H)，7· 92 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，8· 16 (宽单峰，1Η)。LC-MS 保留时间2. 91 分钟； m/z 669 (ΜΗ-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C 184. 6 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下 洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100 %溶剂A/0 %溶剂B至0 %溶剂A/100 %溶剂B， 梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟和分析时间为5分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用 于LC以电喷雾模式确定MS数据。13-环己基-N_(异丙基磺酰基)-3_甲氧基_6-((3_甲基_3，8_ 二氮杂二环 [3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-10-甲酰胺.将CDI(80mg，0. 49mmol)力卩到 13-环己基-3-甲氧基 _6_((3-甲基 _3，8_ 二氮 杂二环[3. 2.1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-10-甲酸叔丁 酯· TFA(200mg，0. 30mmol)于THF(1. 5mL)中的溶液中。将反应混合物在60°C加热2小 时。将反应混合物冷却至室温，然后将反应溶液的1/3 ( 0.55mL)加到搅拌的丙_2_磺 酰胺(40mg,0. 33mmol)于 DBU(0. 20mL，1. 3謹ol)和 THF(0. 20mL)中的溶液中。将反应混 合物在室温搅拌过夜(通过LCMS确定反应完成)，浓缩成油状物，用IN HCl ( ImL)淬灭 (形成沉淀物)并用EtOAc (2 X ImL)萃取。将合并的有机相浓缩至干，溶解在MeOH(1. 5mL) 中并通过制备性HPLC(CH3CN/H20 (含有IOmM NH4OAc))来纯化，得到13-环己基-N-(异丙 基磺酰基)-3-甲氧基-6-((3-甲基_3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)_7H_吲 哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-10-甲酰胺(28. 5mg，0. 044mmol，43 %收率)，其为黄色固 体。1H NMR(300MHz，CD3OD) δ ppm 1. 13-2. 77 (m，28H)，2. 80-2. 93 (m，1H)，3. 93 (s，3H)， 3· 90-4. 02(m，1H)，4· 27-4. 65(m，2H)，5· 11-5. 31 (m，1H)，7· 04 (s，1H)，7· 11 (d, J = 2. 6Hz, 1H)，7. 16 (dd, J = 8· 4，2. 6Hz, 1Η)，7. 56 (d, J = 8. 4Hz, 1Η)，7. 67 (dd, J = 8· 4，1. 5Hz, 1Η)， 7. 88 (d, J = 8. 4Hz, 1Η)，8· 18 (宽单峰，1Η)。LC-MS 保留时间:2· 55 分钟；m/z 643 (MH-)。 在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6 X 50mm柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5 毫升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟， 保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且
溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模
式确定MS数据。 13-环己基-3-甲氧基-6-((3-甲基_3，8-二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-N-((1-甲基-IH-咪唑-4-基)磺酰基)-7H-吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆_10_甲 酰胺.将13-环己基-3-甲氧基-6-((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基) 羰基)-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-10-甲酸叔丁酯· TFA (200mg，0. 30mmol)溶解 在THF(1.5mL)中并在氮气下搅拌。加入⑶I (80mg，0. 49mmol)，将反应混合物在60°C加热 2小时。将反应混合物冷却至室温，然后将反应溶液的1/3 ( 0. 55mL)加到搅拌的1_甲 基-IH-咪唑-4-磺酰胺(60. Omg, 0. 37mmol)于 DBU (0. 20mL, 1. 3mmol)和 THF (0. 20mL)中 的溶液中。将反应混合物在室温搅拌过夜(通过LCMS确定转化约75% )，浓缩成油状物， 用IN HCl ( ImL)淬灭(形成沉淀物)并用EtOAc (2 X ImL)和DCM (2 X ImL)萃取。浓缩 合并的有机相，溶解在MeOH(l. 5mL)中，通过制备性HPLC(CH3CN/H20(含有IOmM NH4OAc)) 来纯化，得到13-环己基-3-甲氧基-6-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基) 羰基)-Ν-((1-甲基-IH-咪唑-4-基)磺酰基)-7H-吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆 -10-甲酰胺(15.6mg，0.023mmol，22% 收率)，其为黄色固体。1H NMR (300MHz，CD3OD) δ ppm 1. 08-2. 77 (m, 22H)，2. 78-2. 92 (m, 1H)，3. 81 (s，1H)，3. 93 (s, 3H)，4. 26-4. 65 (m, 2H)，5. 08-5. 31(m，lH)，7. 01(s，lH)，7. 10(d，J = 2. 6Hz，1H)，7. 15 (dd，J = 8. 4,2. 6Hz, 1H)，7. 55 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，7. 65 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，7. 67 (s, 1H)，7. 81 (s, 1H)，7. 83 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，8. 17 (s, 1H)。LC-MS 保留时间2. 15 分钟；m/z 681 (MH_)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据，使 用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/ 分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时 间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且溶剂B 为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定 MS数据。
8-环己基-N_((3，5-二甲基异噁唑-4-基)磺酰基)_11_甲氧基_la_((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2， 1-a] [2]苯并氮杂蕈-5-甲酰胺.将8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基-3，8_二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-l，la，2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸· TFA(400mg， 0. 61mmol)溶解在THF(4mL)中并在氮气下搅拌。加入⑶I (160mg，0. 98mmol)，将反应混合 物在60°C加热2小时。将反应混合物冷却至室温，然后将反应溶液的1/8 ( 0. 50mL)加 到搅拌的3，5_ 二甲基异噁唑-4-磺酰胺(30mg，0. 17謹ol)于DBU (100 μ L，0. 66謹ol)和 THF (0. IOOmL)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌2天(通过LCMS确定反应完成)，用 IM HCl (水溶液)(0. 75mL)淬灭(轻微放热)，用MeOH稀释并浓缩。将残余物溶解在MeOH 中，使用制备性HPLC(CH3CN/H20(含有IOmM NH4OAc))以一次注射进行纯化，得到8-环己 基-N-((3，5-二甲基异噁唑-4-基)磺酰基)-11-甲氧基-Ia-((3-甲基_3，8-二氮杂二 环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-1，1^2，1213-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆 -5-甲酰胺(33.711^，0.04711111101，63%收率)，其为黄色固体。分离化合物，其为对映异构体 的混合物并以旋转异构体或阻转异构体的1 4混合物的形式存在。1H NMR(300MHz，⑶Cl3) δ ppm 0. 10-0. 17 (m, 0. 2H)，0. 71-0. 92 (m, 0. 8H)，1. 00-2. 14 (m, 17H)，2. 25-2. 39 (m, 2H)，
2.45 (s，2· 4H), 2. 46(s，0. 6H)，2. 78(s，3H)，2· 85-3. 47(m，6H)，3· 54 (d, J = 15. 4Hz, 1H)，
3.87 (s，2. 4H)，3. 88 (s，0. 6H)，4. 04 (d, J = 15. OHz, 0. 2H)，4. 29-4. 56 (m, 0. 8H)，4. 69 (d, J =15. OHz, 0. 2H), 5. 08-5. 24(m，0. 8H)，6. 91 (dd，J = 8.8，2. 6Ηζ，0· 2Η)，6· 94(dd，J = 8.8， 2. 6Ηζ，0· 8H)，7· 04 (d, J = 2. 6Ηζ，0· 8Η)，7· 21-7. 26 (m，0· 2Η)，7· 26 (d, J = 8. 8Ηζ，0· 8Η)， 7. 29 (d, J = 8. 8Ηζ，0. 2Η)，7. 50(dd，J = 8. 4，1. 5Ηζ，0. 2Η)，7. 80 (dd，J = 8. 4，1. ΙΗζ， 0. 8Η)，7· 81 (d，J = 8· 4Ηζ，0· 8Η)，7. 82 (d, J = 8. 4Ηζ，0· 2Η)，7· 89 (宽单峰，0. 8Η)，7. 93 (宽 单峰，0. 2Η)。LC-MS 保留时间2· 22 分钟；m/z 710 (MH-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6X50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为 220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100% 溶剂A/0 %溶剂B至0 %溶剂A/100 %溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分 析时间为5分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙 腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。 8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-N-((1-甲基-IH-咪唑-4-基)磺酰基)-1，1￡1，2，1213-四氢环丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂蕈_5_甲酰胺·将8-环己基-11-甲氧基-la-((3_甲基-3，8_二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-l，la，2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸· TFA(400mg， 0. 61mmol)溶解在THF(4mL)中并在氮气下搅拌。加入CDI (160mg，0. 98mmol)，将反应混合物在60°C加热2小时。将反应混合物冷却至室温，然后将反应溶液的1/8 ( 0. 50mL)加 到搅拌的 1-甲基-IH-咪唑-4-磺酰胺(30mg，0. 19mmol)于 DBU(100 μ L，0. 66mmol)和 THF (0. IOOmL)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌2天(通过LCMS确定转化约60 % )， 用IM HCl (水溶液)(0. 75mL)淬灭(轻微放热)，用MeOH稀释并浓缩。将残余物溶解在 MeOH(l. 5mL)中，过滤并使用制备性HPLC (CH3CN/H20 (含有IOmM NH4OAc))以一次注射进行 纯化，得到8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基) 羰基)-Ν-((1-甲基-IH-咪唑-4-基)磺酰基)_1，la, 2,12b-四氢环丙并[d]吲哚并 [2,1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺(21.811^，0.031讓01，42%收率)，其为黄色固体。分 离化合物，其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或阻转异构体的1 2混合物的形 式存在。1H NMR(300MHz, CDCl3) δ ppm-0. 39 至 _0· 56 (m，0· 33H)，0· 12-0. 21 (m，0· 33H)， 0. 74-3. 68 (m, 25. 33H)，3. 65 (s,3H)，3. 85 (s, 2H)，3. 86 (s, 1H)，4. 02 (d, J = 14. 6Hz, 0. 33H)，4. 18-4. 59 (m, 0. 67H)，4. 72 (d，J= 14. 6Hz，0. 33H)，5. 11 (d，J = 14. 6Hz，0. 67H)，
5.96-6. 21(m，lH)，6. 87(dd，J = 8. 8，2. 6Hz，0. 33H)，6. 91 (dd，J = 8. 8,2. 6Hz,0. 67H),
6.95 (d, J = 2. 6Hz，0. 33H)，7. 06 (d, J = 2. 6Hz，0. 67H)，7. 19-7. 27 (m, 1H)，7. 41 (s, 1H)，
7.56 (d, J = 8. 8Ηζ，0· 33H)，7.61(d，J = 8. 8Ηζ，0· 67Η)，7· 68-7. 78 (m，2Η)，7· 96 (宽单峰， 0. 67Η)，7. 99(宽单峰，0. 33Η)。LC-MS 保留时间2. 09 分钟；m/z 695 (MH-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据，使 用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/ 分钟，梯度为100 %溶剂A/0 %溶剂B至0 %溶剂A/100 %溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时 间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且溶剂B 为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定 MS数据。8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-N-((5-甲基吡啶-2-基)磺酰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2，l_a] [2] 苯并氮杂蕈-5-甲酰胺·将8-环己基-11-甲氧基-la-((3_甲基-3，8_二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-l，la，2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸· TFA(400mg， 0. 61mmol)溶解在THF(4mL)中并在氮气下搅拌。加入⑶I (160mg，0. 98mmol)，将反应混合物 在60°C加热2小时。将反应混合物冷却至室温，然后将反应溶液的1/8 ( 0. 50mL)加到搅 拌的 5-甲基吡啶-2-磺酰胺(30mg，0. 17mmol)于 DBU (100 μ L，0. 66mmol)禾PTHF (0. IOOmL) 中的溶液中。将反应混合物搅拌3小时(通过LCMS确定反应完成)，用IM HCl (水溶液) (0. 75mL)淬灭(观察到轻微放热)并历时2天在氮气气流下浓缩。将残余物溶解在MeOH ( ImL)中并通过制备性HPLC(CH3CN/H20 (含有IOmM NH4OAc))以一次注射进行纯化，得到8-环
己基-11-甲氧基-la-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)_N_((5-甲 基吡啶-2-基)磺酰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂蕈 -5-甲酰胺(35.911^，0.05111111101，68%收率)，其为黄色固体。分离化合物，其为对映异构 体的混合物并以旋转异构体或阻转异构体的1 2混合物的形式存在。1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 卯m 0. 19-0. 27 (m, 0. 33H)，0· 95-3. 11 (m，24. 67H)，2· 45(s，3H)，3· 59 (d, J = 14. 6Ηζ，1Η)，3. 90(s，2H)，3. 91(s，lH)，4. 02(d，J = 14. 6Hz，0. 33H)，4. 15 (d, J = 14. 6Hz, 0. 33H)，4. 64-4. 26 (m, 1. 67H)，5. 12 (d, J = 14. 6Hz，0. 67H)，6. 95-7. 03 (m, 1H) 7. 15 (d, J = 2. 6Ηζ，0· 33Η)，7· 19(d, J = 2. 6Ηζ，0· 67Η)，7. 30(d, J = 8. 4Ηζ，0· 67Η)，7. 31(d，J = 8. 8Hz, 0. 33Η)，7. 66-7. 84 (m, 3Η)，8. 03-8. 10 (m, 1. 67Η)，8. 22 (s, 0. 33H)，8. 44 (s, 1H)。LC-MS 保 留时间2. 19 分钟；m/z 706(MH-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6X50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0% 溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶 剂A为5%乙腈/95% H2O/IOmM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用 Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-N-(苯基磺酰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆_5_甲 酰胺.将8-环己基-11-甲氧基-la-((3-甲基_3，8_氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸· TFA(400mg， 0. 61mmol)溶解在THF(4mL)中并在氮气下搅拌。加入⑶I (160mg，0. 98mmol)，将反应混合物 在60°C加热2小时。将反应混合物冷却至室温，然后将反应溶液的1/8 ( 0. 50mL)加到搅 拌的苯磺酰胺(30mg，0. 19mmol)于 DBU(100 μ L，0. 66mmol)禾PTHF(0. IOOmL)中的溶液中。 将反应混合物在室温搅拌2天(通过LCMS确定反应完成)，用IM HC1(水溶液)(0. 75mL) 淬灭(轻微放热)，用MeOH稀释并浓缩至干。将残余物溶解在Me0H(1.5mL)中，使用制备 性HPL(CH3CN/H20(含有IOmM NH4OAc))C以一次注射进行纯化，得到8-环己基-11-甲氧 基-la-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)_N_(苯基磺酰基)_1，la， 2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺(27. 6mg，0. (MOmmol， 53%收率)，其为浅黄色固体。分离化合物，其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或阻 转异构体的 1 3 混合物的形式存在。1H NMR(300MHz, CDCl3) δ ppm 0· 14-0. 22 (m，0· 25H)，
0.93-2. 97(m，24. 75H)，3. 39-3. 38 (m, 1. 25H)，3. 55 (d, J = 15. OHz, 0. 75H)，3· 87(s，3H)， 3. 99-4. 11 (m，0· 25H)，4· 20-4. 11 (m, 1Η)，5· 13 (d，J = 15. OHz，0· 75Η)，6· 87-6. 98 (m,
1.25Η)，7. 09 (d, J = 2. 2Hz，0· 75Η)，7. 23-7. 29 (m, 1Η)，7. 44-7. 63 (m, 4H)，7. 80 (d, J =8. 4Hz, 1H) ,7. 90 (s, 1H) ,8. 11-8. 19(m，2H)。LC-MS 保留时间:2. 32 分钟；m/z 691 (ΜΗ-)。在 配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C 184. 6 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5 毫升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟， 保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且 溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模 式确定MS数据。
N-((4-氯吡啶-3-基)磺酰基)-8-环己基-11-甲氧基-la_((3_甲基_3，8_ 二 氮杂二环[3. 2.1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯 并氮杂萆-5-甲酰胺.将8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基-3，8_二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-l，la，2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸· TFA(400mg， 0. 61mmol)溶解在THF(4mL)中并在氮气下搅拌。加入⑶I (160mg，0. 98mmol)，将反应混合 物在60°C加热2小时。将反应混合物冷却至室温，然后将反应溶液的1/8 ( 0. 50mL)加到 搅拌的 4-氯吡啶-3-磺酰胺(40mg，0. 21mmol)于 DBU (100 μ L，0. 66mmol)禾PTHF (0. IOOmL) 中的溶液中。将反应混合物搅拌3小时(通过LCMS确定反应完成)，用IM HCl (水溶 液)(0. 75mL)淬灭(观察到轻微放热)并历时2天在氮气气流下浓缩。将残余物溶解在 MeOH ( ImL)并通过制备性HPLC (CH3CN/H20 (含有IOmM NH4OAc))来纯化，得到N-((4-氯 吡啶-3-基)磺酰基)-8_环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3. 2. 1] 辛-8-基)羰基)-1，la, 2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_5_甲酰胺 (28. 6mg，0. 039mmol，52%收率)，其为亮黄色固体。分离化合物，其为对映异构体的混合物 并以阻转异构体或旋转异构体的混合物的形式存在。部分1H NMR(300MHz，OT3OD) δ 3. 86 (s, 3H)，6. 93 (d, J = 8. 8, 2. 2Hz, 1H)，7· 08 (宽单峰，1Η)，7. 20-7. 28 (m, 1H)，7. 35 (d, J = 5. IHz, 1H), 7. 59 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，7. 76 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，7. 98 (s, 1H) ,8. 58 (d, J = 5. IHz, 1H)，9. 87 (s，1H)。LC-MS 保留时间2. 18 分钟；m/z 726 (MH-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184.6X50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为 220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100% 溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分 析时间为5分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙 腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。
8-环己基-11-甲氧基-N- ((2-甲氧基~4~甲基苯基)磺酰基)-Ia- ((3_甲基_3， 8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-1，la, 2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂萆-5-甲酰胺.将8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基-3，8_二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸· TFA(100mg, 0. 15mmol)溶解在THF(ImL)中并在氮气下搅拌。加入CDI (40mg，0. 25mmol)，将反应混合 物在60°C加热2小时。将反应混合物冷却至室温，然后将反应溶液的1/2 ( 0. 50mL)加 到搅拌的2-甲氧基-4-甲基苯磺酰胺(35mg,0. 17mmol)于DBU(100 μ L，0. 66mmol)和 THF (0. IOOmL)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌1天(通过LCMS确定反应完成)，用 IM HCl (水溶液)(0. 75mL)淬灭(轻微放热)，用MeOH稀释并浓缩。残余物用MeOH (1. 3mL) 和DMF(0. 2mL)稀释，并使用制备性HPLC(H20/CH3CN(含有IOmM NH4OAc))以一次注射进行 纯化，得到8-环己基-11-甲氧基-N-((2-甲氧基-4-甲基苯基)磺酰基)-Ia-((3-甲 基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2， 1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺(14.6!1^，0.020_01，27%收率)，其为灰白色固体。分离 化合物，其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或阻转异构体的1 4混合物的形式 存在。1H NMR (300MHz，CD3OD) δ ppm 0· 14-0. 20 (m，0· 2H)，0· 89-3. 12 (m，22. 8H)，3· 88 (s， 2H)，2. 44 (s，3H)，3. 37 (s, 3H)，3. 64 (d, J = 15. OHz, 0. 8H)，3. 87-3. 94 (m, 6H)，4. 17 (d, J = 15. 4Ηζ，0. 2H)，4. 25-4. 35 (m, 0. 8H)，4. 51-4. 56 (m, 0. 2H)，4. 87-4. 97 (m, 0. 2H)，5. 13 (d, J = 15. 4Hz,0. 8H)，6. 93-7. 06 (m, 3H)，7. 14-7. 18 (m, 0. 2H)，7. 19-7. 23 (m, 0. 8H)，7. 29-7. 37 (m, 1H)，7. 53-7. 61(m，lH)，7. 83-7. 99(m，2. 8H)，8. 10(s，0. 2H)。LC-MS 保留时间2. 90 分钟； m/z 735 (MH-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液 相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗 脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B， 梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为5 %乙腈/95 % H20/10mM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用 于LC以电喷雾模式确定MS数据。4-叔丁基噻唑-2-磺酰胺. 将次氯酸钠(15mL，28mm0l)(试剂级)(用冰( 15g)内部冷却)滴加到剧烈搅 拌的在冰浴中冷却的4-叔丁基噻唑-2-硫醇(800mg,4. 62mmol)于DCM(25mL)和IM HCl 水溶液(25mL，25mmol)中的溶液中。将反应混合物在5°C搅拌10分钟，分离各层。有机
层在烧瓶中用干冰和丙酮浴冷却，并历时5分钟将氨气鼓泡到溶液中。移开冷却浴，使反 应混合物达到室温。浓缩粗反应混合物，溶解在MeOH中并过滤以除去固体。浓缩溶液，得 到4-叔丁基噻唑-2-磺酰胺，其为蜡状固体，所述固体不经进一步纯化即使用。LC-MS保 留时间1· 85 分钟；m/z 219(MH-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6X50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0% 溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶 剂A为5%乙腈/95% H2O/IOmM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用 Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。
N-((4-叔丁基-1，3-噻唑-2-基)磺酰基)_8_环己基-11-甲氧基-la_((3_甲 基-3，8-氮杂二环[3.2. 1]辛-8-基)羰基)-1，1 2，1213-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂蕈-5-甲酰胺·将8-环己基-11-甲氧基-la-((3_甲基-3，8_二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-l，la，2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸· TFA(100mg， 0. 15mmol)溶解在THF(ImL)中并在氮气下搅拌。加入CDI (40mg，0. 25mmol)，将反应混合 物在60°C加热2小时。将反应混合物冷却至室温，然后将反应溶液的1/2( 0. 50mL) 加到搅拌的4-叔丁基噻唑-2-磺酰胺(35mg, 0. 16mmol)于DBU (100 μ L，0. 66mmol)和 THF (0. IOOmL)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌1天(通过LCMS确定反应完成)，用 IM HCl (水溶液)(0. 75mL)淬灭(轻微放热)，用MeOH稀释并浓缩。残余物用MeOH(l. 3mL) 和DMF(0. 2mL)稀释并使用制备性HPLC(H20/CH3CN (含有IOmM NH4OAc))以一次注射进行纯 化，得到N-((4-叔丁基-1，3-噻唑-2-基)磺酰基)-8-环己基-11-甲氧基-Ia-((3-甲 基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2， 1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺(9.01^，0.012讓01，15%收率)，其为灰白色固体。LC-MS 保留时间2. 59 分钟；m/z 754 (MH-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0% 溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶 剂A为5%乙腈/95% H2O/IOmM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用 Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。
喹啉-8-磺酰胺.在DCM(20mL)中浆化喹啉_8_磺酰氯(1. 0克，4. 39mmol)并冷却至-600C0然后 历时5分钟将氨气( 5克，294mmol)鼓泡到反应混合物中(体积增加 5mL)。搅拌反应 混合物并使其达到室温且过夜。将残余物在水(50mL)和Et0Ac(50mL)之间分配，有机层用 盐水(20mL)洗涤并用己烷( 50mL)稀释。将溶液搅拌20分钟，过滤收集固体，得到喹 啉-8-磺酰胺(432mg，2. 07mmol，47%收率)，其为浅黄色固体。1H NMR(500MHz, DMS0-d6) δ ppm 7. 25(s，2H)，7· 73 (dd, J = 8. 3,4. 3Hz, 1H)，7. 76 (dd, J = 8. 6,7. 3Hz, 1H)，8· 28 (d, J = 8. 3Hz, 1H)，8· 31 (d, J = 7. 3Hz, 1H)，8· 56 (宽二重峰，J = 8. 6Hz, 1Η)，9· 08 (dd, J = 4. 3,0. 9Hz, 1H)。LC-MS 保留时间1. 27 分钟；m/z 209 (ΜΗ+)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6X50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为 220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100% 溶剂A/0 %溶剂B至0 %溶剂A/100 %溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分 析时间为5分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙 腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-N-(喹啉-8-基磺酰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂 萆-5-甲酰胺.将8-环己基-11-甲氧基-la-((3_甲基-3，8_二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-l，la，2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸· TFA(104mg， 0. 16mmol)和 CDI (40mg，0. 25mmol)溶解在 THF(1. OmL)中，在氮气下搅拌，然后在 60°C 加热2小时。将反应混合物冷却至室温，然后将反应溶液的1/2( 0.50mL)加到搅拌 的喹啉-8-磺酰胺(40mg, 0. 19mmol)于DBU (0. IOmL)和THF (0. IOmL)中的溶液中。将 反应混合物在室温搅拌1天，用IM HCl水溶液(0. 7mL)淬灭，用MeOH和DMSO (0. 2mL)稀 释并浓缩。粗油状物用MeOH(ImL)稀释，过滤并通过制备性HPLC(H20/CH3CN(含有IOmM NH4OAc))以一次注射进行纯化，得到8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂 二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-N-(喹啉-8-基磺酰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d] 吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂蕈-5-甲酰胺(11.2!^，0.015讓01，20%收率)，其为黄色固 体。分离化合物，其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或阻转异构体的1 2混合物 的形式存在。1H NMR(500MHz，CDCl3) δ ppm 0. 19-0. 27 (m，0. 33H)，0. 67-3. 61 (m，26. 67H)， 3. 88 (s，2H)，3. 89 (s, 1H)，4. 00-4. 32 (m, 1H)，4. 62-4. 72 (m, 0. 33H)，5. 02-5. 16 (m, 0. 67H)，
6.90(dd, J = 8. 5,2. 4Ηζ，0· 33Η)，6· 94(dd, J = 8. 6,2. 5Ηζ，0· 67H)，7· 00 (宽单峰，0· 33Η)，
7.10 (宽单峰，0. 67Η)，7. 19-7. 27 (m, 1H)，7. 39-7. 55 (m, 2H)，7. 66-7. 83 (m, 2H)，7. 90 (s, 1H) ,8. 01-8. ll(m，lH)，8. 15-8. 27 (m，1H)，8. 71-8. 77 (m，1H)，8. 93-9. 09 (m，1H)。LC-MS 保
.沾
75留时间2. 57 分钟；m/z 742(MH-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6X50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0% 溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶 剂A为5%乙腈/95% H2O/IOmM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用 Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。 8-环己基-11-甲氧基-la-((3_甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-N_((吡啶-2-基甲基)磺酰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯 并氮杂萆-5-甲酰胺·将8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基) 羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆_5_甲酸三氟乙酸 盐(40mg，0. 060mmol)、吡啶-2-基甲磺酰胺(25mg，0. 15mmol)和 DMAP(7mg,0. 060mmol) 在DCM(0.5mL)中浆化，然后加入EDC(20mg，0. lOmmol)。小瓶用氮气冲洗，密封并将反应 混合物在室温搅拌过夜(通过LCMS确定反应完成)。反应混合物用MeOH稀释并通过制 备性HPLC(CH3CN/H20 (含有IOmM NH4OAc))以一次注射进行纯化，得到8-环己基-11-甲 氧基-la-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)-N-((吡啶-2-基甲 基)磺酰基)_l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰 胺(巧^！！^…^？？！！！^^？^收率^其为黄色固体。分离化合物，其为对映异构体的 混合物并以旋转异构体或阻转异构体的 1 1混合物的形式存在。1H NMR(300MHz, CDCl3) δ ppmO. 19-0. 26 (m, 0. 5H)，0. 34-3. 66 (m, 26. 5H)，3. 88 (s, 3H)，3. 98-4. 58 (m, 1. 5H)， 4. 72 (d, J = 14. 3Hz，0. 5H)，4. 87-4. 99 (m, 1. 5H)，5. 09 (d, J = 14. 6Hz，0. 5H)，6. 86-7. 01 (m, 1. 5H)，7. 06-7. 13 (m, 1H)，7. 16-7. 30 (m, 1. 5H)，7. 46-7. 52 (m, 1H)，7. 59-7. 75 (m, 2H)， 7. 78-8. 13 (m, 2H), 8. 53 (d, J = 5. 1Ηζ，1Η)。LC-MS 保留时间2. 19 分钟；m/z 706 (MH-)。在 配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6X50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5 毫升/分钟，梯度为100 %溶剂A/0 %溶剂B至0 %溶剂A/100 %溶剂B，梯度时间为4分钟， 保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且 溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模 式确定MS数据。
2,4- 二甲基噻唑-5-磺酰胺. 在-78°C经由CO2/丙酮冷凝器将液氨滴加到2，4- 二甲基噻唑_5_磺酰氯(260mg， 1. 228mmol)于THF(3mL)中的溶液中，直到体积大约翻倍( 10分钟)。将反应混合物 在_78°C搅拌1小时，然后将其缓慢温热至室温。将反应混合物浓缩至干，残余物用CH2Cl2 稀释。过滤浆液以除去固体，浓缩溶液，得到2，4_ 二甲基噻唑-5-磺酰胺(230mg，1.2mmOl， 97%收率)，其为浅黄色固体。LC-MS保留时间0.43分钟；m/z 191(MH_)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C183. O X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据，使 用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/ 分钟，梯度为100 %溶剂A/0 %溶剂B至0 %溶剂A/100 %溶剂B，梯度时间为3分钟，保持时 间为1分钟，及分析时间为4分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且溶剂B 为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定 MS数据。8-环己基-N_((2，4-二甲基-1，3-噻唑-5-基)磺酰基)_11_甲氧基-la_((3_甲 基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2， 1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺·将8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基) 羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂革_5_甲酸(40mg， 0.072mmol)、2，4-二甲基噻唑-5-磺酰胺(26mg，0. 14mmol)和 DMAP (10mg，0. 082mmol)在 CH2Cl2 (0. 5mL)中浆化，然后用EDC(20mg，0. lOmmol)处理。将反应混合物在室温搅拌过 夜。用氮气气流浓缩反应混合物，溶解在MeOH中，过滤并通过制备性HPLC(CH3CN/H20 (含 有IOmM NH4OAc), 15-100%历时20分钟)来纯化，得到8-环己基-N_((2，4_ 二甲基-1， 3-噻唑-5-基)磺酰基)-11-甲氧基-Ia- ((3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基) 羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆.5-甲酰胺(25. 4mg, 0. 035mmol，48%收率)，其为黄色固体。LC-MS保留时间3. 14分钟；m/z 728 (ΜΗ+)。在配 备有 Phenomenex-Luna 10 μ C183. 0 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数 据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫 升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保 持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为10% Me0H/90% H20/0. 三氟乙酸 且溶剂B为10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸。使用Micromass Platform用于LC以电 喷雾模式确定MS数据。
IH-I，2，4-三唑 _3_ 磺酰胺.在-78°C经由CO2/丙酮冷凝器将液氨滴加到1H-1，2，4-三唑_3_磺酰氯(500mg， 2. 98mmol)于THF(5mL)中的溶液中，直到体积大约翻倍( 15分钟)。将反应混合物 在-78°C搅拌1小时，然后缓慢温热至室温。将反应混合物浓缩至干，残余物用DCM稀释。过 滤浆液以除去固体，浓缩溶液，得到1H-1，2，4-三唑-3-磺酰胺(240mg, 1. 620mmol,54. 3% 收率)，其为灰白色固体。1H NMR(300MHz，CD3OD) δ ppm 8. 60 (宽单峰，1H)。LC-MS保留时间 0. 19 分钟；m/z 147 (MH-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C183. 0 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使 用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100% 溶剂B，梯度时间为3分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为4分钟，其中溶剂A为5%乙 腈/95% H2O/IOmM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95 %乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。 8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)4-(1!1-1，2，4-三唑-3-基磺酰基)-1，1￡1，2，1213-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2] 苯并氮杂萆-5-甲酰胺·将8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基) 羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂蕈_5_甲酸(39mg， 0. 070mmol)、1H-1，2，4-三唑-3-磺酰胺(25mg，0. 17mmol)和 DMAP(10mg，0. 082mmol)在 CH2Cl2 (0. 5mL)中浆化，然后用EDC (20mg，0. 104mmol)处理。将反应混合物在室温搅拌过 夜。用氮气气流浓缩反应混合物，溶解在MeOH中，过滤并通过制备性HPLC(CH3CN/H20 (含 有IOmM NH4OAc), 15-100%历时20分钟)来纯化，得到8-环己基-11-甲氧基_la_((3-甲 基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-Ν-(1Η-1，2，4-三唑-3-基磺酰基)-1， la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆_5_甲酰胺(5. 4mg，6. 3 μ mol， 9 %收率)，其为黄色固体。LC-MS保留时间2. 88分钟；m/z 684 (ΜΗ+) 0在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C18 3. OX 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升 /分钟，梯度为100 %溶剂A/0 %溶剂B至0 %溶剂A/100 %溶剂B，梯度时间为4分钟，保持 时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为10% Me0H/90% H20/0. 三氟乙酸且 溶剂B为10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸。使用Micromass Platform用于LC以电喷 雾模式确定MS数据。 乙烯磺酰胺.在-240C(CCl4-干冰浴)将 TEA (7. 67mL, 55. Ommo 1)于 Et2O (5OmL)中的溶液加到 2-氯乙磺酰氯(5. 22mL，50mmol)于Et2O(IOOmL)中的溶液中，搅拌混合物并历时2小时将 其温热至室温。过滤反应混合物以除去白色沉淀物，浓缩滤液(体积为约20mL)。历时10 分钟将NH3鼓泡到乙烯磺酰氯(1. 266克，10. OOmmol)于Et2O (20mL)中的溶液中，过滤除去 白色沉淀物。浓缩滤液，得到乙烯磺酰胺(180mg，1.680mmOl，16. 80%收率)，其为无色胶状 物，所述胶状物不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz,CD3OD) δ ppm 6. 80(dd, J = 16.5， 9. 9Hz, 1H)，6· 16 (d, J = 16. 5Hz, 1H)，5. 87 (dd, J = 9. 9Hz, 1H)。LC-MS 保留时间:0· 17 分 钟；m/z 108 (ΜΗ+)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-IOAS 液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为220nm的SPD-IOAV UV-Vis检测器。使用以下 洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100 %溶剂A/0 %溶剂B至0 %溶剂A/100 %溶剂B， 梯度时间为2分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为10% MeOH/90% H20/0. 1 %三氟乙酸且溶剂B为10% H20/90 % Me0H/0. 1 %三氟乙酸。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。 8-环己基-11-甲氧基-la-((3_甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-N-(乙烯基磺酰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆 -5-甲酰胺·将乙烯磺酰胺(14.5mg，0. 135mmol)和 DBU(0. 03mL，0. 2讓ol)加到搅拌的 8-环 己基-11-甲氧基-la-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)_l，la， 2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂蕈_5_甲酸(50mg，0. 090mmol)和 ⑶I(22mg，0. 14mmol)于THF(ImL)中的溶液中。将反应混合物在60°C搅拌1小时，然后在室 温搅拌16小时。反应混合物用MeOH稀释，过滤并通过制备性HPLC (H2O-MeOH(含有0. TFA缓冲剂))来纯化，得到产物8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环 [3. 2.1]辛-8-基)羰基)-N-(乙烯基磺酰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2， 1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺(35.211^，0.055讓01，61%收率)，其为灰白色固体。分离 化合物，其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或阻转异构体的1 4混合物的形式存 在。1H NMR(300MHz, CD3OD) δ ppm 8. 07 (s，0· 2H)，8· 00 (s，0· 8Η)，7· 93(d, J = 8. 4Ηζ，0· 2H)， 7. 92 (d, J = 8. 4Ηζ，0· 8Η)，7. 61 (d, J = 8. 4Ηζ，0· 2Η)，7. 57 (d, J = 8. 4Ηζ，0· 8Η)，7. 35 (d, J = 8. 8Hz，0. 2H)，7. 34(d，J = 8. 4Hz，0. 8H)，7. 25-7. 00 (m 3H)，6. 49(d，J = 16. 8Hz, 1H) ,6. 23 (d, J = 9. 9Hz, 1H), 5. 16 (d, J = 15. 4Hz，0. 8H)，4. 96 (d，J = 15. 0Hz，0. 2H)，1H)，4· 37-4. 26 (m，0· 8H)，4· 21 (d, J = 15. ΟΗζ,Ο. 2Η)，4· 01-3. 86(m，3H)， 3.73-1. 15(m，25. 8Η)，0. 24-0. 16(m，0. 2Η)。LC-MS 保留时间:1·72 分钟；m/z 641 (MH-)。在 配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6X50mm 柱的 Shimadzu LC-IOAS 液相色谱上记录 LC 数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5 毫升/分钟，梯度为100 %溶剂A/0 %溶剂B至0 %溶剂A/100 %溶剂B，梯度时间为3分钟， 保持时间为1分钟，及分析时间为4分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且 溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模 式确定MS数据。
2-甲基丙-1-烯-1-磺酰胺.在-70 V将叔丁基锂(13mL，22. OOmmo 1)加到搅拌的1-溴-2-甲基丙-1-烯 (2. 0mL,20mmol)于Et2O(IOOmL)中的溶液中。将反应混合物在_70°C和氮气下搅拌1小时， 然后在0°C滴加到搅拌的硫酰氯(3. 2mL,40mmol)于Et2O(IOOmL)中的溶液中(形成白色沉 淀物)。将反应混合物缓慢温热至室温，在氮气下搅拌16小时。过滤反应混合物，对滤液(仍 是混浊的)进行浓缩。将残余物溶解在THF(IOOmL)中，形成透明黄色溶液。在配备有冷凝 管(-70°C )的250mL三颈烧瓶中历时10分钟将NH3鼓泡到搅拌的2-甲基丙-1-烯-1-磺 酰氯(3.09克，20讓01)于THF(IOOmL)中的溶液中(形成白色沉淀物且观察到NH3回流)。 1小时后，移开冷凝管，将反应混合物在室温搅拌16小时。过滤反应混合物以除去白色沉 淀物，用EtOAc冲洗并真空浓缩，得到2-甲基丙-1-烯-1-磺酰胺(2. 59克，19. 2mmol, 96%收率)，其为透明黄色油状物。LC-MS保留时间0. 41分钟；m/z 136 (ΜΗ+)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C 184. 6 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升 /分钟，梯度为100 %溶剂A/0 %溶剂B至0 %溶剂A/100 %溶剂B，梯度时间为2分钟，保持 时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为10% Me0H/90% H20/0. 三氟乙酸且 溶剂B为10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸。使用Micromass Platform用于LC以电喷
雾模式确定MS数据。 8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_ 二氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-N-((2-甲基-1-丙烯-1-基)磺酰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺.将2-甲基丙-1-烯-1-磺酰胺(18. 3mg, 0. 135mmol)和 DBU (0. 03mL, 0. 2mmol) 加到搅拌的8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆_5_甲酸(50mg, 0. 090mmol)和CDI (22mg，0. 14mmol)于THF(ImL)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌 16小时。反应混合物用MeOH稀释，过滤饼通过制备性HPLC(H2O-MeOH(含有0. 1 % TFA缓 冲剂))来纯化，得到8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1] 辛-8-基)羰基)-N-((2-甲基-1-丙烯-1-基)磺酰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d] 吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺(13.8!^，0.020讓01，22%收率)，其为白色固 体。分离化合物，其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或阻转异构体的1 4混合 物的形式存在。1H NMR(300MHz，CD3OD) δ ppm 8. 07 (s，0. 2H)，8. 00 (s，0. 8H)，7. 92 (d，J = 8. 4Hz, 1H)，7. 65-7. 54 (m, 1H)，7. 39-7. 31 (m, 1H)，7. 24-7. 17 (m, 1H)，7. 09-7. 01 (m, 1H)， 6. 47 (s, 1H) ,5. 18 (d, J = 15. 4Ηζ，0. 8H)，5. 01-4. 63 (m，1. 2H)，4. 34-4. 18 (m，1H)，3. 91 (s， 3H)，3· 73-1. 16(m，25. 8H)，2. 25(s，3H)，2· 02(s，3H)，0· 24-0. 18 (m，0· 2H)。LC-MS 保留时间 3. 37 分钟；m/z 671 (ΜΗ+)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6X50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测 器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂 A/100%溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为 10% Me0H/90% H20/0. 三氟乙酸且溶剂B为10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸。使用 Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。嘧啶-2-磺酰胺.在0 °C和快速搅拌下将次氯酸钠(30. 9mL, 60. Ommo 1)滴加到2_巯基嘧啶 (1122mg, IOmmol)于 CH2Cl2 (60mL)和 IN HCl (55. OmL, 55. Ommol)中的溶液中。加完后，将混 合物在0°C搅拌15分钟，然后分离各相。将有机层转移到250mL三颈烧瓶中，然后将所述烧 瓶在冰浴中冷却并配备有冷凝管(_70°C)。历时15分钟将ΝΗ^ 泡通过反应混合物，然后将 反应混合物缓慢温热至室温并搅拌16小时。过滤分离所得白色沉淀物，真空浓缩滤液，得 到嘧啶-2-磺酰胺(350mg，1. 98mmol，20%收率)，其为浅黄色固体。可从沉淀物中得到额外 的产物。1H NMR(300MHz，丙酮 _d6) δ ppm 9. 00 (d, J = 4. 9Ηζ，2Η)，7· 73 (t, J = 4. 9Hz, 1Η)， 6. 77 (宽单峰，2Η)。LC-MS 保留时间0. 17 分钟；m/zl60 (ΜΗ+)。在配备有 Phenomenex-Luna 10μα84.6Χ50πιπι柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为 220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100% 溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为2分钟，保持时间为1分钟，及分析 时间为3分钟，其中溶剂A为10%Me0H/90%H20/0. 1 %三氟乙酸且溶剂B为10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。
8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基_3，8_氮杂二环[3.2. 1]辛_8_基)羰 基)-N-(嘧啶-2-基磺酰基)-l，la，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂 蕈-5-甲酰胺.将EDC (26. Omg, 0. 135mmol)禾口 DMAP(llmg，0· 090mmol)力口 至Ij 搅拌的 8-环己 基-11-甲氧基-Ia- ((3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛 _8_ 基)羰基)-I，la，2，12b-四 氢环丙并M吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸(50mg，0. 090mmol)和嘧啶_2_磺酰 胺(21. 6mg，0. 135mmol)于CH2Cl2 (1. 5mL)中的溶液中，将反应混合物在室温搅拌16小时。 用MeOH稀释反应混合物，过滤并通过制备性HPLC (H2O-CH3CN (含有IOmM NH4OAc缓冲剂)) 来纯化，得到8-环己基-11-甲氧基-la_((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰 基)-N-(嘧啶-2-基磺酰基)-1，la, 2,12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆 -5-甲酰胺(29.711^，0.041讓01，45.0%收率)，其为浅黄色固体。LC-MS保留时间1. 71分 钟；m/z 693 (MH-)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184. 6 X 50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下 洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100 %溶剂A/0 %溶剂B至0 %溶剂A/100 %溶剂B， 梯度时间为3分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为4分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用 于LC以电喷雾模式确定MS数据。 4,6- 二甲基嘧啶-2-磺酰胺. 在_23°C和快速搅拌下将次氯酸钠(30. 9mL，60. Ommo 1)滴加到搅拌的4，6- 二甲 基嘧啶-2-硫醇(1. 40 克，10. OOmmol)和 CaCl2 (14g)于 CH2Cl2 (60mL)禾Π INHCl (55. OmL, 55. Ommol)中的溶液中。加完后，将混合物在_23°C搅拌15分钟，分离各相。将有机层转移 到250mL三颈烧瓶中，然后将所述烧瓶冷却至_23°C并配备有冷凝管(_70°C )。历时15分 钟将NH3鼓泡通过反应混合物，然后将反应混合物缓慢温热至室温并搅拌16小时。过滤分 离所得白色沉淀物，真空浓缩滤液，得到4，6- 二甲基嘧啶-2-磺酰胺(1. 003克，5. 36mmol, 53. 6%收率)，其为白色固体。1H NMR(300MHz，丙酮-d6) δ ppm 7. 43 (s，1H)，6. 63 (宽单峰， 2H)，2. 53 (s，6H)。LC-MS 保留时间0. 39 分钟；m/z 188 (ΜΗ+)。在配备有 Phenomenex-Luna 10 μ C184.6X50mm柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为 220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100% 溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为2分钟，保持时间为1分钟，及分析 时间为3分钟，其中溶剂A为10%Me0H/90%H20/0. 1 %三氟乙酸且溶剂B为10% H20/90%
Me0H/0. 三氟乙酸。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。
8-环己基-N- ((4,6- 二甲基嘧啶_2_基)磺酰基)_11-甲氧基- la- ((3_甲基-3， 8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基)-1，la, 2，12b-四氢环丙并M吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂萆-5-甲酰胺·将EDC (26. Omg, 0. 135mmol)禾口 DMAP(llmg，0· 090mmol)力口 至Ij 搅拌的 8-环己 基-11-甲氧基-la-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)_l，la，2， 12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酸(50mg，0. 090mmol)和4， 6-二甲基嘧啶-2-磺酰胺(25. 4mg,0. 135mmol)于CH2Cl2 (1. 5mL)中的溶液中，将反应混合 物在室温搅拌16小时。反应混合物用MeOH稀释并通过制备性HPLC (H2O-CH3CN(含有IOmM NH4OAc缓冲剂))来纯化，得到8-环己基-N- ((4，6- 二甲基嘧啶_2_基)磺酰基)-11-甲 氧基-la-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基)-1，la，2，12b-四氢环丙 并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂蕈-5-甲酰胺(24. 3mg，0. 032mmol，35. 0 %收率)，其 为浅黄色固体。LC-MS保留时间1. 25分钟；m/z 721 (ΜΗ-)。在配备有Phenomenex-Luna 10μα84.6Χ50πιπι柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，使用检测器波长为 220nm的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件流速为5毫升/分钟，梯度为100% 溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间为2分钟，保持时间为1分钟，及分 析时间为3分钟，其中溶剂A为5%乙腈/95% H20/10mM乙酸铵且溶剂B为5% H20/95%乙 腈/IOmM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。除非另有说明，使用以下LC/MS方法来分析以下操作中的化合物分析条件柱 PHENOMENNEX-LUNA 3. OX 50mm SlO ；流动相(A) 10 90 甲醇-水；(B) 90 10 甲醇-水； 缓冲剂0. 1% TFA ；梯度范围0-100% B ；梯度时间2分钟；流速4毫升/分钟；分析时 间3分钟；检测检测器1 :UV(220nm)；检测器2 =MS (ESI+)。用于制备酰基磺酰胺衍生物的一般方法将酸(1当量)和羰基二咪唑(1. 5当量) 于无水THF中的混合物在50°C加热30分钟并使其冷却至室温。然后依次加入1当量的磺 酰胺(R=烷基或芳基)和DBU (2当量)。将所得混合物在室温搅拌过夜。用酸性水溶液进 行后处理后，经分离的粗产物通过制备性HPLC来纯化，得到酰基磺酰胺衍生物。
(+/-)-8_环己基-N_(l-苄基环丙烷-1-磺酰基)-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧 基-Ia- (3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂蕈-5-甲酰胺·通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 365分钟； MS m/z(M+H)747。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。1H NMR(400MHz，氯 仿-d) δ ppm 1. 57 (25H, m)，2. 74 (4H, m)，3. 36 (3H, m)，3. 64 (1H, d, J = 15. 1 IHz)，3. 88 (3H, m)，4.41(lH，宽单峰)，5· 16 (1H, m)，6. 97 (1H, m)，7. 11 (1H, m)，7. 20 (6H, m)，7. 30 (1H, m)， 7. 83 (2H, m)。(+/-)-8_ 环己基-N-(l_(戊-2-炔基)环丙烷 磺酰基)_1，la，2，12b_ 四 氢-11-甲氧基-la-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷_8_羰基)环丙并[d] B引哚 并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺·通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 334分钟； MS m/z(M+H)723。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。1H NMR(400MHz，氯 仿-d) δ ppm 3. 62 (1H, d)，3. 89 (3H, s)，4. 46 (1H, m)，5. 16 (1H, m)，6. 98 (1H, dd, J = 8. 56， 2. 52Hz)，7. 11 (1H, d, J = 2. 52Hz)，7. 30 (1H, d, J = 8. 81Hz)，7. 55 (1H, m)，7. 88 (1H, d, J = 8. 31Hz) ,8. 03 (1H, s)。
(+/") -8-环己基-N- (1-(三甲基甲硅烷基)环丙烷-1-磺酰基)-1，la，2，12b-四 氢-11-甲氧基-la-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷_8_羰基)环丙并[d] B引哚 并[2，1-a] [2]苯并氮杂蕈-5-甲酰胺.通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 383分钟； MS m/z(M+H)729。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。1H NMR(400MHz，氯 仿-d) δ ppm 0. 15 (9H, s)，1. 09 (2H, m)，1. 41 (7H, m)，1. 80 (5H, m)，2. 01 (7H, m)，2. 49 (5H, m)， 2. 96 (2H, m)，3. 61(2H，d, J = 15. 11Hz) ,3. 89 (3H, s)，4. 48 (2H, m)，5. 16 (1H, m)，6. 98 (1H, dd, J = 8. 44，2. 64Hz)，7. 11 (1H, d, J = 2. 52Hz)，7. 28 (1H, d, J = 8. 81Hz)，7. 49 (1H, m)， 7. 90 (1H, d, J = 8. 31Hz)，7. 99 (1H, s)。
(+/") -8-环己基-N- (1-苯甲酰基环丙烷-1-磺酰基)-1，la，2，12b-四氢_11_甲 氧基-Ia-(3-甲基_3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷_8_羰基)环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺·通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 256分钟； MS m/z(M+H)761。 (+/-)-8_环己基-N_(2-氰基苯磺酰基)-l，la，2，12b_四氢-11-甲氧 基-Ia- (3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂萆-5-甲酰胺·通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 320分钟； MS m/z(M+H)733。(+/-)-8_环己基-N_(环丁基甲磺酰基)-l，la，2，12b_四氢-11-甲氧 基-Ia- (3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂萆-5-甲酰胺·通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 263分钟； MS m/z(M+H)685。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。1H NMR(400MHz，氯 仿-d) δ ppm 1. 36 (5H, m)，1. 99 (20H, m)，2. 80 (5H, m)，3. 64 (5H, m)，3. 90 (3H, s)，4. 40 (2H, m)，5. 23 (1H, m)，6. 97 (1H, m)，7. 12 (1H, d, J = 2. 52Hz)，7. 27 (1H, m)，7. 51 (1H, m)，7. 90 (1H, m) ,8. 04 (1H, m)。(+/-)-8_环己基-N_(环丙基甲磺酰基)-l，la，2，12b_四氢-11-甲氧 基-Ia- (3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂萆-5-甲酰胺·通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 170分钟； MS m/z (M+H) 671。观察到化合物22m以相互转化的旋转异构体的形式存在。1H NMR(400MHz, 氯仿-d) δ ppm 0. 39 (2H, m)，0. 67 (2H, m)，1. 32 (6H, m)，1. 65-3. 22 (18H, m)，3. 56 (5H, m)， 3. 89 (3H, s)，4. 34 (2H, m)，5. 20 (1H, m)，6. 98 (1H, m)，7. 11 (1H，d，J = 2. 27Hz)，7. 30 (1H, m)， 7. 66 (1H, m)，7. 90 (1H, m)，8. 10 (1H, m)。
(+/-)-8_环己基-N-(2-甲氧基乙磺酰基)-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧 基-Ia- (3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷-8-羰基)环丙并M吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂萆-5-甲酰胺·通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 070分钟； MS m/z(M+H)675。观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在。1H NMR(400MHz，氯 仿-d) δ ppm 1. 58 (16H, m)，2. 56 (2H,宽单峰)，2. 95 (3H,宽单峰)，3. 30 (3H, s)，3. 59 (3H, m)，3. 85 (8H, m)，4. 43 (2H, m)，5. 18 (2H，宽单峰)，6. 97 (1H, m)，7. 11 (1H, d, J = 2. 52Hz)， 7. 30 (1H, m)，7. 53 (1H, m)，7. 9] (1H, m)，8. 03 (1H,宽单峰)。(+/") -8-环己基-N-((苯基氨甲酰基)环丙基磺酰基)-1，la，2，12b-四氢-11-甲 氧基-Ia-(3-甲基_3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷_8_羰基)环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂蕈-5-甲酰胺·通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 303分钟； MS m/z(M+H)776。 (+/-)-8_环己基-N-(l-烯丙基环丙烷-1-磺酰基)-l，la，2，12b_四氢-11-甲
氧基-Ia-(3-甲基_3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷_8_羰基)环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂蕈-5-甲酰胺. 通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 235分钟；MS m/z(M+H)697。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。1H NMR (400MHz，氯仿_d) δ ppm 1. 26 (6H, m)，1. 98 (17H, m)，2. 70 (6H, m)，3. 10 (3H, m)，3. 63 (1H, d, J = 15. IlHz)， 3. 89 (3H, s)，4. 36 (2H, m)，5. 11 (2H, m)，5. 73 (1H, m)，6. 99 (1H, m)，7. 11 (1H，d，J = 2. 27Hz)， 7. 29 (1H, d, J = 8. 56Hz)，7. 53 (1H, m)，7. 89 (1H, m)，8. 01 (1H, s)。(+/-)-8-环己基4-(苯基甲磺酰基)-1，1 2，1213-四氢-11-甲氧基-Ia-(3_甲 基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆 -5-甲酰胺·通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LCMS方法1 (72007-001) LC-MS保留时间3. 253分钟；MS m/z(M+H)707。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形 式存在。1H NMR (400MHz，氯仿 _d) δ ppml. 35 (6H, m)，1. 96 (8H, m)，2· 76(12H, m)，3. 32 (1H, 宽单峰),3. 60 (1H, d, J = 15. IlHz) ,3. 90 (3H, s),4. 21 (1H, m) ,4. 79 (1H, m) ,4. 88 (1H, m)，5. 10 (OH, m)，6. 97 (1H, dd, J = 8. 56,2. 52Hz)，7. 10 (1H, d, J = 2. 52Hz)，7. 32 (7H, m)， 7. 66 (1H, d, J = 8. 06Hz)，7. 92 (1H, d, J = 8. 56Hz)。(+/-)-8-环己基4-((3，5_二氯苯基)甲磺酰基)-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧 基-Ia- (3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂萆-5-甲酰胺·通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 405分钟； MS m/z(M+H)775。
(+/-)-8_环己基-N_((3-氯苯基)甲磺酰基)-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧 基-Ia- (3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂萆-5-甲酰胺.通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 3301分钟； MS m/z(M+H)741。 (+/-)-8_环己基-N_
((甲氧基羰基)环丙基磺酰基)-l，la，2，12b-四氢-11-甲 氧基-Ia-(3-甲基_3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷_8_羰基)环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺.通过制备性HPLC来纯化产物并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 090分钟； MS m/z(M+H)715。 8-环己基-N_(2-甲氧基乙磺酰基)-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧基_la_(3-甲 基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆 -5-甲酰胺·步骤1:向叔丁酯-乙酯(0. 4克，0. 776mmol)于THF(8mL)中的溶液中加入INNaOH(3. IOmL, 3. IOmmol)和MeOH( 5ml) (2 20PM)。将白色混合物在室温搅拌2小时。 用EtOAc稀释，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空除去溶剂，得到酯-酸，其为白色固体(0. 38 克，100%)。LC-MS 保留时间3. 913 分钟；MS m/z(M+H)502。步骤 2 向酯-酸(0. 38 克， 0. 758mmol)和 3-甲基 _3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷(0. 181 克，0. 909mmol)于 DCM(3mL) 中的混合物中加入TEA(0. 5mL, 3. 59mmol)和HBTU (0. 345克，0. 909mmol)。将混合物在室温 搅拌2小时。用EtOAc稀释并用IN NaOH和盐水洗涤，干燥(MgSO4)并通过Biotage 25M 柱来纯化，得到酯-酰胺，其为白色泡沫状固体(0. 398g，86% )。LC-MS保留时间3. 493 分钟；MS m/z (M+H)610。步骤3 在冰冷却浴中将酯-酰胺(0. 398克，0. 653mmol)溶解在 DCM(2mL)中并加入TFA(2mL，26. Ommo 1)。将反应混合物在室温搅拌1. 5小时，除去溶剂， 得到酸-酰胺，其为棕色固体(0. 36g,100% )0 LC-MS保留时间3. 186。MS m/z(M+H)554。 步骤4:对酰胺-酰胺进行纯化并分离，其为TFA盐。LC-MS保留时间3. 078分钟；MS m/ ζ (M+H) 675，并观察到其以相互转化的旋转异构体的形式存在。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 1. 28 (7H, m)，2. 15 (22H, m)，3. 28 (3H, s)，3. 47 (1H, m)，3. 86 (3H, m)，4. 06 (2H,宽单 峰)，5. 24 (1H, m) ,6. 96 (1H, m)，7. 11 (1H, d, J = 2. 52Hz)，7. 29 (1H, m)，7. 60(1H，宽单峰)， 7. 90 (1H, m) ,8. 10 (1H, m)。用于以下操作的所有样品通过下述LCMS方法1来分析LCMS方法1 起始％ B :0，终止％ B 100 ；梯度时间3分钟；停止时间4分钟；流 速4毫升/分钟；波长220 ；溶剂A Me0H/90% H20/0. 三氟乙酸；溶剂B 10% H20/90% Me0H/0. 三氟乙酸；柱Xbridge4. 6X50mM S5。 (+/-)-8_环己基-N_[(2-氟苯基)甲磺酰基]-1，1￡1，2，1213-四氢-11-甲氧 基-la- (3-甲基-3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂萆_5_甲酰胺(YT4)步骤1 制备酰基磺酰胺YT2向化合物 YTl (60mg，0. 105mmol)、(2_ 氟苯基)甲磺酰胺(39. 6mg，0. 209mmol)和 DMAP(55mg,0. 450mmol)于 DCM(ImL)中的溶液中加入 EDCI (40mg，0. 209mmol)。将混合物在 室温搅拌三天。反应混合物通过制备性HPLC来纯化并通过Biotage 12M(Me0H/DCM = 0至 10% )来再次纯化，得到化合物YT2，其为无色玻璃状物(66mg，100% )。LC-MS保留时间 3. 55 分钟；MS m/z (M+H) 631。
步骤2 将甲基酯YT2水解成酸YT3向化合物 YT2 (66mg, 0. 102mmol)于 THF (3mL)和 MeOH (ImL)中的溶液中加入 NaOHdmL, 1. OOOmmol)。将混合物在室温搅拌2小时，然后用EtOAc稀释，用冷的HCl (IN) 和盐水洗涤，干燥(MgS04)。真空蒸发溶剂，得到YT3，其为黄色固体(63mg;100%)。LC-MS 保留时间3. 501 分钟；MSm/z(M+H)617。步骤3:酰胺偶联向化合物 YT3(63mg，0. 102mmol)和 3-甲基 _3，8- 二氮杂二环[3. 2. 1]辛 烷·2Ηα (20. 34mg，0. 102mmol)于 DCM(1. 5mL)中的混合物中加入 ΤΕΑ(0· 05mL，0. 359mmol) 和HBTU(54. 2mg，0. 143mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。用MeOH(ImL)淬灭反应并蒸干， 将残余物溶解在MeOH中，过滤并通过制备性HPLC来纯化，得到YT4，其为呈单TFA盐形式的 米色固体(30. 8mg ;35. 9% )。1H NMR(400MHz，氯仿 _d) δ ppm 7. 88-7. 97 (1H，m)，7. 63 (1H， 宽单峰)，7. 34-7. 45 (1H, m)，7. 20-7. 32 (4H, m)，7. 05-7. 18 (2H, m)，6. 96 (1H, dd, J = 8. 94，
2.64Hz)，5. 14 (1H, d, J = 16. 12Hz)，4. 95-5. 04 (1H, m)，4. 83-4. 90 (1H, m)，3. 88 (3H, s)，
3.67-4. 62 (2H, m)，3. 63 (1H, d, J = 14. 86Hz)，3. 30-3. 42 (1H, m)，2. 13-3. 08 (10H, m)， 1. 62-2. 16 (8H, m) ,0. 95-1. 52 (6H, m)。LC-MS 保留时间3. 171 分钟；MS m/z(M+H)725。
(+/-)_8-环己基-N-[l_(甲氧基羰基)环丙烷磺酰基]-1，la, 2,12b_四氢_11_甲 氧基-Ia-(3-甲基_3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛烷_8_羰基)环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆,-δ-甲酰胺(YTO) ·向化合物 YT5 (240mg, 0. 359mmol)和 CDI (146mg, 0. 899mmol)中加入 THF(ImL)。 将混合物在50°C搅拌0.5小时并冷却下来。加入1-氨磺酰基环丙烷甲酸甲酯(160mg， 0. 893mmol)和DBU(0. 217mL，1. 438mmol)。将混合物搅拌3天并用EtOAc稀释，用饱禾口 NaH2PO4溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)并通过Biotage 25S柱(MeOH/DCM = 0至25 % )来纯 化，得到YT6，其为白色固体(160mg，27%)。LC-MS保留时间3. 171分钟；MS m/z(M+H)725。
权利要求
式I化合物或其药用盐其中R1为 CONR5R6；R2为R3为氢、卤素、烷基、烯基、羟基、苄基氧基、烷氧基或卤代烷氧基；R4为环烷基；R5为烯基SO2 、炔基SO2 、烷氧基烷基SO2 、(环烷基)烷基SO2 、(烷基)环烷基SO2 、((环烷基)烷基)环烷基SO2 、(苄基)环烷基SO2 、(烯基)环烷基SO2 、(炔基)环烷基SO2 、(三烷基甲硅烷基)环烷基SO2 、(CO2R7)环烷基SO2 、(苯甲酰基)环烷基SO2 、(苯基N(R7)CO)环烷基SO2 、四氢呋喃基SO2 、四氢吡喃基SO2 、(四氢呋喃基)烷基SO2 、(四氢吡喃基)烷基SO2 、异噁唑烷基SO2 、Ar1SO2 、(Ar1)烷基SO2 、Ar2SO2 或(CON(R7)(R7))烷基；R6为氢或烷基；R7为氢或烷基；R8为氢、烷基、环烷基、(环烷基)烷基、烷基羰基、环烷基羰基、卤代烷基羰基、烷氧基羰基、烷基SO2 、环烷基SO2 、卤代烷基SO2 、氨基羰基、(烷基氨基)羰基、(二烷基氨基)羰基、苄基、苄基氧基羰基或吡啶基；Ar1为苯基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基或异喹啉基，且取代有0 3个选自卤素、烷基、烷氧基和氰基的取代基；和Ar2为呋喃基、噻吩基、吡咯基、异噁唑基、异噻唑基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基或四唑基，且取代有0 3个选自卤素、烷基、烷氧基和氰基的取代基。FPA00001184774500011.tif,FPA00001184774500012.tif
2.权利要求1的化合物，其中R3为氢或甲氧基。
3.权利要求1的化合物，其中R4为环己基。
4.权利要求1的化合物，其中R5为乙烯基S02-、2-丙烯基S02-、(2-甲基丙烯-1-基) SO2-,(戊炔基)S02-、(甲氧基乙基)S02-、(乙基)环丙基S02-、(甲基)环丙基S02-、((环 丙基)甲基)环丙基S02-、(丙烯基)环丙基S02-、(三甲基甲硅烷基)环丙基S02-、(甲基 OC(O))环丙基S02-、(苯甲酰基)环丙基S02-、(苯甲酰基)环丙基S02-、(苯基N (H) CO) 环丙基so2-、四氢呋喃基so2-、四氢吡喃基so2-、(四氢呋喃基)甲基so2-、(异噁唑烷基) SO2-,(苯基)SO2-,(氰基苯基)SO2-,((甲氧基)(甲基)苯基)SO2-,(甲基吡啶基)SO2-, (氯吡啶基)so2-、(嘧啶基)so2-、(二甲基嘧啶基)so2-、(喹啉基)so2-、(苄基)so2-、(氯苯基)甲基so2-、(氟苯基)甲基so2-、(二氯苯基)甲基so2-、(吡啶基)甲基so2-、(呋 喃基)SO2-,(噻吩基)SO2-, (二甲基异噁唑基)SO2-,(甲基咪唑基)SO2-,(叔丁基噻唑基) S02-、(二甲基噻唑基)S02-、(三唑基)502-或(C0N(甲基)(甲基))(二甲基)甲基，和R6为氢。
5.权利要求1的化合物，其中R8为氢或烷基。
6.权利要求1的化合物，其中Ar1为苯基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基或异喹啉基，且取代 有0-3个选自卤素、烷基、烷氧基和氰基的取代基。
7.权利要求1的化合物或其药用盐，所述化合物选自8-环己基-N-[ ( 二甲基氨基)磺酰基]-1，la, 2，12b-四氢-Ia-(羟基甲基)_11_甲氧 基_环丙并M吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺；吗啉-4-甲酸([8-环己基-5-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-l，12b-二 氢-11-甲氧基环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_基]甲基)酯；Ia-[(乙酰基乙基氨基)甲基]-8-环己基-N_[( 二甲基氨基)磺酰基]_l，la，2， 12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_5_甲酰胺；8-环己基-N-[( 二甲基氨基)磺酰基]-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧基_la_(吗 啉-4-基甲基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺；8-环己基-N- [ ( 二甲基氨基)磺酰基]-1，la，2，12b-四氢-11-甲氧基-Ia- [2- (3-甲 基-3，8-二氮杂二环[3. 2.1]辛-8-基)-2_氧代乙基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2] 苯并氮杂萆-5-甲酰胺；8-环己基-N-[( 二甲基氨基)磺酰基]-la-[2-[(2R，6R)-2，6- 二甲基吗 啉-4-基]-2-氧代乙基]-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2] 苯并氮杂蕈-5-甲酰胺；8-环己基-N-[( 二甲基氨基)磺酰基]-1，1￡1，2，1213-四氢-11-甲氧基-la-[2_(吗 啉-4-基)-2_氧代乙基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_5_甲酰胺；8-环己基-5-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]_l，12b-二氢-11-甲氧基-环 丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆-la(2H)_乙酸甲酯；8-环己基-5-[[[( 二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]_l，12b-二氢-11-甲氧基-环 丙并[d]吲哚并[2,1-a] [2]苯并氮杂萆-la (2H)_乙酸；5_羧基-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮 杂萆-la(2H)_乙酸α -甲酯；8-环己基-Ν-[[(2-氟苯基)甲基]磺酰基]-1，1^2，1213-四氢_11_甲氧 基-Ia-[(3-甲基_3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基]_环丙并M吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺；1-[[[[8-环己基-1，1&，2，1213-四氢-11-甲氧基-la-[(3-甲基 _3，8-二氮杂二环 [3. 2. 1]辛-8-基)羰基]环丙并M吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_5_基]羰基]氨 基]磺酰基]-环丙烷甲酸甲酯；8-环己基-N-[(4，6-二甲基嘧啶-2-基)磺酰基]-l，la，2，12b-四氢_11_甲氧 基-Ia-[(3-甲基_3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基]_环丙并M吲哚并[2，l_a][2]苯并氮杂萆-5-甲酰胺；8-环己基-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧基 _la_[(3-甲基 _3，8_ 二氮杂二环[3. 2. 1] 辛-8-基)羰基]-N-(嘧啶-2-基磺酰基)-环丙并[d]吲哚并[2，l-a] [2]苯并氮杂萆 -5-甲酰胺；8-环己基-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧基 _la_[(3-甲基 _3，8_ 二氮杂二环[3. 2. 1] 辛-8-基)羰基]-N-[(2-甲基-1-丙烯基)磺酰基]-环丙并M吲哚并[2，l_a] [2]苯 并氮杂萆-5-甲酰胺；8-环己基-N-(乙烯基磺酰基)-1，la，2，12b-四氢-11-甲氧基-Ia- [ (3-甲基-3，8- 二 氮杂二环[3. 2. 1]辛-8-基)羰基]-环丙并M吲哚并[2，1-a] [2]苯并氮杂萆_5_甲酰 胺；8-环己基-l，la，2，12b-四氢-11-甲氧基 _la_[(3-甲基 _3，8_ 二氮杂二环[3. 2. 1] 辛-8-基)羰基]-N-(1H-1，2，4-三唑-3-基磺酰基)-环丙并[d]吲哚并[2，l_a] [2]苯 并氮杂萆-5-甲酰胺；和8-环己基-N-[(2，4-二甲基噻唑-5-基)磺酰基]-l，la，2，12b-四氢_11_甲氧 基-Ia-[(3-甲基_3，8-二氮杂二环[3. 2. 1]辛_8_基)羰基]_环丙并M吲哚并[2，l_a] [2]苯并氮杂革-5-甲酰胺。
8.一种组合物，其包含权利要求1的化合物或其药用盐和药用载体。
9.权利要求8的组合物，其还包含至少一种额外的对HCV具有治疗益处的化合物，其中 所述化合物选自干扰素、环孢菌素、白细胞介素、HCV金属蛋白酶抑制剂、HCV丝氨酸蛋白酶 抑制剂、HCV聚合酶抑制剂、HCV解螺旋酶抑制剂、HCV NS4B蛋白抑制剂、HCV进入抑制剂、 HCV组装抑制剂、HCV释出抑制剂、HCV NS5A蛋白抑制剂、HCV NS5B蛋白抑制剂和HCV复制 子抑制剂。
10.一种治疗丙型肝炎感染的方法，所述方法包括向患者给药治疗有效量的权利要求 1的化合物。
11.权利要求10的方法，其还包括给药至少一种额外的对HCV具有治疗益处的化合物， 其中所述化合物选自干扰素、环孢菌素、白细胞介素、HCV金属蛋白酶抑制剂、HCV丝氨酸蛋 白酶抑制剂、HCV聚合酶抑制剂、HCV解螺旋酶抑制剂、HCV NS4B蛋白抑制剂、HCV进入抑制 剂、HCV组装抑制剂、HCV释出抑制剂、HCV NS5A蛋白抑制剂、HCV NS5B蛋白抑制剂和HCV 复制子抑制剂。
全文摘要
本发明披露了式I化合物及使用所述化合物的组合物和方法。所述化合物具有抗丙型肝炎病毒(HCV)的活性，并可用于治疗被HCV感染的那些患者。
文档编号C07D471/08GK101918406SQ200880125128
公开日2010年12月15日 申请日期2008年11月19日 优先权日2007年11月21日
发明者杨忠, 涂勇, 皮亚塞纳·休瓦瓦萨姆, 约翰·A·本德 申请人:百时美施贵宝公司