专利名称：绵茵陈中有机酸的分离富集方法
绵茵陈中有机酸的分离富集方法
技术领域：
本发明涉及有机酸类化合物的富集方法，具体涉及从绵茵陈药材中富集 有机酸类化合物的方法。
背景技术：
茵陈为菊禾斗丰直物、滨蒿JWe附/s/a scopar/a Waldst. et Kit或茵陈蒿JWewz/s/a c"p///fln& Thunb的干燥地上部分。春季幼苗高6 10cm时采收或秋季花蕾长 成时采割，除去杂质及老茎，晒干。春季采收的习称"绵茵陈"，秋季采割的称 "茵陈蒿"，我国现多以绵茵陈入药。茵陈性微寒，味微苦、辛，归肝、胆、脾、 胃、膀胱经。清湿热，退黄疸。用于黄疸尿少，湿疮瘙痒；传染性黄疸型肝 炎。
研究发现，茵陈中含有多种化学成分，如有机酸、黄酮、香豆素等，其 中有机酸类化合物为绵茵陈中的主要成分，含量较高的有3-咖啡酰喹尼酸(绿 原酸)、3,5 —二咖啡酰喹尼酸、3,4 —二咖啡酰喹尼酸等，这些有机酸具有抗 菌解毒、消炎利胆等药理作用，是绵茵陈中的主要药效成分。
有机酸类化合物常用的纯化方法有溶剂萃取法、硅胶柱层析法等，这类 方法需使用较多的有毒溶剂，增加了脱溶剂步骤，提出了更高的检测要求， 增加了分离富集的成本。
大孔吸附树脂是一类新型非离子型高分子化合物，应用于工业脱色、环 境保护、抗生素的提取分离等领域己近20年，近年来在中药有效组分(中药中一大类结构及性质相近的成分)或天然产物提取分离方面得到了广泛的应 用，大孔树脂法也应用于茵陈提取物的纯化中(曾元儿等,绵茵陈提取液的大
孔树脂静态吸附工艺影响因素考察,中成药,2007,29(2):199-201;王凤云等,绵茵 陈提取液的大孔树脂动态吸附工艺研究，中成药,2007,29(4):509-511);但其分 离纯化的目标不明确。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种绵茵陈有机酸的分离 富集方法。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的
一种绵茵陈有机酸的分离富集方法，其特征在于，具体步骤为
(1) 将绵茵陈药材和质量百分比为0% 30%乙醇加入到提取设备中， 加热回流提取0.5 2h，溶剂乙醇倍量为绵茵陈药材质量的10 25倍，提取l 3次，经过滤制得绵茵陈提取液，减压浓縮至绵茵陈药材体积的1 3倍；
(2) 在步骤(1)制得绵茵陈提取液中加入乙醇，乙醇质量百分比为60 80%，放置过夜，时间为10 14h，离心，过滤得到清液，减压浓縮至绵茵陈 药材体积的1 3倍，制得绵茵陈浓縮液；
(3) 将步骤(2)制得绵茵陈浓縮液，用浓度为0.1 2mol/L的盐酸溶液 调节绵茵陈浓缩液的pH至2 5，过滤，制得绵茵陈滤液；
(4) 将步骤(3)制得绵茵陈滤液，经大孔吸附树脂吸附，先用2 3倍 柱体积的水洗脱杂质并弃去清洗液，再用3 6倍柱体积、质量百分比为40 60%乙醇洗脱，洗脱液浓縮干燥后，制得有机酸富集物；
所述的大孔吸附树脂为苯乙烯大孔吸附树脂；最终，有机酸组分得率为1.7%，其中绿原酸含量为4.5%、 3,5-二咖啡酰 喹尼酸含量为1.3%， 3,4-二咖啡酰喹尼酸的含量为1.4%。 与现有技术相比，本发明的积极效果是
本发明采用大孔吸附树脂对绵茵陈中有机酸组分进行分离富集，制备工 艺简单，成本低廉，环境友好，方法稳定，适合工业化生产。
图1本发明的实施例1绵茵陈有机酸组分的高效液相色谱图； 图2本发明的实施例1绵茵陈有机酸组分中绿原酸的洗脱曲线； 图3本发明的实施例1绵茵陈有机酸组分中3,4-二咖啡酰喹尼酸的洗脱 曲线。
具体实施方式
以下提供本发明绵茵陈中有机酸的分离富集方法的具体实施方式
。 实施例l
绵茵陈药材50g，以其16倍量14%乙醇回流提取2小时，过滤。药渣再 用16倍量14%乙醇溶液回流提取2小时，过滤，合并滤液，减压浓縮至l倍 绵茵陈药材体积。加入95%乙醇，使溶液含醇量达70%，静置12h，离心、 过滤，滤液减压浓縮至1倍绵茵陈药材体积。用0.5mol/L HC1调节pH至3.0， 离心、过滤。
将已预处理好的HZ-816大孔树脂装入内径16mm，高800mm的玻璃柱 内，加入上述制备得到的提取液50mL，经大孔树脂吸附，以3倍树脂床层体积的去离子水，1/2 BV/h的流速洗去水溶性杂质；再以4倍床层体积50%乙 醇，1/2 BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液。将上述洗脱液减压浓縮后，稠 浸膏经60。C真空干燥，得绵茵陈有机酸组分的得率为1.7%，其中绿原酸含量 为4.5%， 3,5 — 二咖啡酰喹尼酸含量为1.3%， 3,4 — 二咖啡酰喹尼酸含量为 1.4%。
图1为绵茵陈有机酸组分的高效液相色谱图；具体为对照品对照及 LC-MS鉴定结果，其中1、 2、 4为绿原酸异构体，3为绿原酸，5、 6、 7为 异绿原酸，8为3，5-二咖啡酰喹尼酸，9为3,4-二咖啡酰喹尼酸；图2为绵茵 陈有机酸组分中绿原酸的洗脱曲线；图3为绵茵陈有机酸组分中3,4-二咖啡酰 喹尼酸的洗脱曲线。
实施例2
绵茵陈2kg，以其16倍量14%乙醇回流提取2次，每次1小时，将所得 的提取液浓縮至约1.5倍绵茵陈药材体积，加入95%乙醇，调节至含醇量为 70%，静置过夜，过滤。滤液减压浓縮至1倍绵茵陈药材体积，用0.3mol/LHCl 调节pH至2.5。离心。上清液立即以1/4BV/h流速上样，以3倍树脂体积的 去离子水冲去杂质；再用3倍树脂体积50%的乙醇洗脱，收集洗脱液。将上 述洗脱液于60'C以下减压浓縮至稠浸膏，然后于真空烘箱内60"C真空干燥至 恒重，得绵茵陈有机酸粉末32g，收率为1.6%，其中绿原酸含量为4.7%， 3,5 一二咖啡酰喹尼酸含量为1.2%， 3,4—二咖啡酰喹尼酸为1.3%。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普 通技术人员，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围内
权利要求
1.一种绵茵陈有机酸的分离富集方法，其特征在于，具体步骤为(1)将绵茵陈药材和质量百分比为0％～30％乙醇加入到提取设备中，加热回流提取0.5～2h，溶剂乙醇倍量为绵茵陈药材质量的10～25倍，提取1～3次，经过滤制得绵茵陈提取液，减压浓缩至绵茵陈药材体积的1～3倍；(2)在步骤(1)制得绵茵陈提取液中加入乙醇，乙醇质量百分比为60～80％，放置10～14h，离心，过滤得到清液，减压浓缩至绵茵陈药材体积的1～3倍，制得绵茵陈浓缩液；(3)将步骤(2)制得绵茵陈浓缩液，用浓度为0.1～2mol/L的盐酸溶液调节绵茵陈浓缩液的pH至2～5，过滤，制得绵茵陈滤液；(4)将步骤(3)制得绵茵陈滤液，经大孔吸附树脂吸附，先用2～3倍柱体积的水洗脱杂质并弃去清洗液，再用3～6倍柱体积、质量百分比为40～60％乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥后，制得有机酸富集物。
2. 如权利要求1所述的绵茵陈有机酸的分离富集方法，其特征在于，所 述的大孔吸附树脂为苯乙烯大孔吸附树脂。
全文摘要
本发明涉及一种绵茵陈中有机酸的分离富集方法，由乙醇进行提取浓缩后的绵茵陈提取物，经醇沉、浓缩、调节pH值后，用大孔吸附树脂吸附并以一定浓度的乙醇洗脱富集，减压浓缩干燥，得到有机酸富集物。本发明的优点具有简单易行、产物中有机酸含量高、成本低廉和环境友好等特点。
文档编号C07B63/00GK101580447SQ200910053150
公开日2009年11月18日 申请日期2009年6月16日 优先权日2009年6月16日
发明者姜志宏, 慧 孙, 瑞 张, 祝付兰, 罗国安, 坪 胡 申请人:华东理工大学