专利名称：一种高纯度的抗生素类药物化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种高纯度的抗生素类药物化合物的精制方法，具体地说，涉及一种
内酰胺青霉素类抗生素药物化合物的精制方法。属于医药技术领域。 抗生素是微生物的代谢产物或合成的类似物，在体外能抑制微生物的生长和存 活，而对宿主不会产生严重的毒副作用。在临床应用上，多数抗生素是抑制病原菌的生长， 用于治疗大多数细菌感染性疾病。 抗生素的种类繁多，结构比较复杂，其中13-内酰胺青霉素类抗生素是比较常见、 应用广泛的一类抗生素，尤其是式(I)结构的抗生素类药物化合物， 是一种13-内酰胺青霉素类抗生素，分子中含有四个原子组成的13-内酰胺环作 为发挥生物活性的必需基团，在和细菌作用时，13-内酰胺环开环与细菌发生酰化作用，抑 制细菌的生长。 如式(I)结构的抗生素类药物化合物包含阿洛西林钠、美洛西林钠、哌拉西林钠、 阿莫西林钠、氨苄西林钠、苯唑西林钠、氟氯西林钠、氯唑西林钠、双氯西林钠等，只是由基 团R的不同而分别代表着不同的化合物。 如式(I)结构的抗生素类药物为半合成青霉素类化合物，利用Penicillin G为原 料，在偏碱性条件下，经青霉素酰化酶进行酶解，生成6-氨基青霉烷酸(6-APA)，再与相应 的侧链酸进行縮合，即可得各种半合成青霉素，然后通过与碱性溶液反应生成各种盐。其縮 合方法通常有三种①酰氯法是较常用的方法，将侧链酸制成酰氯，在低温，中性或近中 性(pH6. 5-7. 0)条件下进行；②酸酐法将侧链酸制成酸酐或混合酸酐来进行反应；③DCC 法将侧链酸和6-APA在有机溶剂中进行縮合，以N，N' - 二环己碳亚胺(DCC)作为縮合剂。
目前，如式(I)结构的青霉素类抗生素化合物，其大都通过上述合成方法制得，制 得的化合物普遍存在纯度低的缺点，导致了制剂稳定性大幅下降，影响了其临床应用。
发明内容
本发明的目的是提供一种抗生素类药物化合物的精制方法，提高了其纯度，改善 了产品制剂质量。 为了实现上述发明目的，本发明技术方案如下
背景技术：
本发明提供了一种e -内酰胺青霉素类抗生素药物化合物的精制方法，其特征在 于包括如下步骤 (1)将|3 -内酰胺青霉素类抗生素药物化合物的粗品溶于水，调节水溶液的pH值 为酸性，收集所析出的固体； (2)将步骤(1)所得到的固体用有机溶剂溶解后，上大孔吸附树脂柱，用洗脱剂进 行洗脱，收集含内酰胺青霉素类抗生素药物化合物的洗脱液； (3)调节步骤(2)所得洗脱液的pH值至碱性或中性，收集所析出的固体，即得到精 制后的13-内酰胺青霉素类抗生素药物化合物。 其中，上述所述的精制方法，其中所述的13-内酰胺青霉素类抗生素药物化合物，
优选是具有如下式(I)所示结构的抗生素类药物化合物
(I) 其中，R为抗生素类药物化合物所含有的其他基团。 进一步地，本发明上述所述的精制方法，其中所述的13-内酰胺青霉素类抗生素 药物化合物选自阿洛西林钠、美洛西林钠、哌拉西林钠、阿莫西林钠、氨苄西林钠、苯唑西林 钠、氟氯西林钠、氯唑西林钠或者双氯西林钠。 优选地，上述所述的精制方法，其中所述步骤(1)中，用酸调节溶液的pH值为 2. 0 4. 5，优选为3. 0 4. 0，所述的酸可以选自盐酸、硫酸、硝酸、枸橼酸、醋酸、硼酸、磷酸
中的一种或者两种以上。 优选地，上述所述的精制方法，其中所述步骤(2)中，所述的大孔吸附树脂为苯乙 烯型大孔吸附树脂；优选所述大孔吸附树脂为D101型大孔吸附树脂或AB-8型大孔吸附树 脂。 优选地，上述所述的精制方法，其中所述步骤(2)中，所述的洗脱剂选自三氯甲 烷、二氯甲烷、乙醇、异丙醇、叔丁醇、乙酸乙酯、丙酮、石油醚中的一种或两种以上；优选所 述的洗脱剂为三氯甲烷和异丙醇的混合物，二者的体积比为3 : 1。 优选地，上述所述的精制方法，其中所述步骤(2)中，所述的有机溶剂选自二氯甲 烷、乙醇、甲醇、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、石油醚中的一种或两种以上；优选所述的有机溶 剂为乙醇和丙酮的混合物，二者体积比为5 : 1。 优选地，上述所述的精制方法，其中所述步骤(3)中，采用碱调节所得洗脱液的pH 值为5. 0 9. O，优选为5. 5 7. 0，所述的碱选自氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、醋酸钠、磷 酸氢二钠、枸橼酸钠中的一种或两种以上。 作为本发明最优选实施方案之一，本发明上述所述的精制方法，其特征在于包括如下步骤 (1)将待精制的13 -内酰胺青霉素类抗生素药物化合物粗品溶于水，加入酸调节 溶液的PH值为3. 0 4. O，搅拌析出不溶物，过滤，经纯水洗涤后得到固体；
(2)将步骤(1)所得固体用有机溶剂溶解后，上D101大孔吸附树脂或者AB-8大孔 吸附树脂，用洗脱剂进行洗脱，收集含药物化合物的洗脱液，其中，所述的有机溶剂为乙醇 和丙酮的混合物，二者体积比为5 : l，所述的洗脱剂为三氯甲烷和异丙醇的混合物，二者 体积比为3:1; (3)用碱调节步骤(2)所收集的洗脱液的pH值为5.5 7.0，收取所析出的固体， 用异丙醇洗涤，50 6(TC真空干燥3 5小时，得精制品。 其中，所述的13 -内酰胺青霉素类抗生素药物化合物，优选是阿洛西林钠、美洛西 林钠、哌拉西林钠、阿莫西林钠、氨节西林钠、苯唑西林钠、氟氯西林钠、氯唑西林钠或者双 氯西林钠。通过上述方法精制所述的e-内酰胺青霉素类抗生素药物化合物。所得精制品 的纯度不低于99.9%。 与现有抗生素类药物化合物制备方法相比，本发明方法，通过将调酸碱pH、大孔吸 附树脂分离结合，并在特定工艺参数下，可以精制得到高纯度的精制品，纯度达99. 9%以 上，而且收率收率超过90%，取得令人意外的纯化效果。本发明方法还可以获得一种高纯 度e-内酰胺青霉素类药物化合物，从而可以提高其相应制剂稳定性和临床用药效果。本 发明方法简单、成本低廉、易于操作，适于大规模工业化生产。 本发明所述的13 -内酰胺青霉素类抗生素药物化合物纯度的检测方法为
取样品适量，精密称定，用流动相A溶解并定量稀释成每lml中含2mg的溶液，作 为供试品溶液；另取对照品适量，精密称定，用流动相A溶解并定量稀释制成每lml中含 20 ii g的溶液作为对照溶液。照高效液相色谱法(中国药典附录V D)测定，用十八烷基硅 烷键合硅胶为填充剂；流动相A为0. 05mol/L磷酸盐缓冲液(取0. 05mol/L磷酸二氢钾溶 液，用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至5.0)-乙腈(99 : 1);流动相B为0. 05mol/L磷酸 盐缓冲液(pH值5. O)-乙腈(80 : 20);流速为每分钟1. Oml ;检测波长为254nm。先以流 动相A-流动相B(92 : 8)等度洗脱，待主峰洗脱完毕后立即按下表进行线性梯度洗脱。理 论塔板数按主峰计算不低于2000。取对照溶液20 ii 1注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使 主成分色谱峰的峰高为满量程的20% -25% 。再精密量取供试品溶液和对照溶液各20 iU， 分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不 得大于对照溶液主峰面积(1. 0% )，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍 (3. 0% )。(供试品溶液中任何小于对照溶液主峰面积0. 05倍的峰可忽略不计)
时间(分钟)流动相A (%)流动相B (%)
0928
250100
400100
41928
55928
具体实施例方式
以下通过具体实施方式
进一步解释或说明本发明内容，但实施例不应被理解为对本发明保护范围的限制。 以下实施例所用D101大孔树脂和AB-8大孔树脂购自蚌埠市辽源新材料有限公司。HPLC检测精制前粗品纯度分别为阿洛西林钠96. 5%，美洛西林钠95. 8%，哌拉西林钠96.0%，阿莫西林钠96. 3 % ，氟氯西林钠95.2%，氨节西林钠94. 4 % 。
实施例1阿洛西林钠的精制 (1)将100g阿洛西林钠溶于1000ml水，加入lmol/L的盐酸溶液调节pH值为3.0，搅拌析出不溶物，过滤，经纯化水洗涤后得到固体； (2)将步骤(1)所得固体用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物1500ml溶解，加入填有D101大孔树脂的柱子通过，再用三氯甲烷和异丙醇(3 : 1)混合物500ml洗脱纯化，收集洗脱液； (3)将步骤(2)所得洗脱液用10X醋酸钠溶液调节pH值为5. 5，析出固体，离心机离心10min，用500ml异丙醇洗涤，5(TC真空干燥5小时，得精制品94. 5g，收率94. 5% ，HPLC检测纯度为99. 96%。
实施例2美洛西林钠的精制 (1)将100g美洛西林钠溶于1000ml水，加入5mol/L的磷酸溶液调节pH值为4. 0，搅拌析出不溶物，过滤，经纯化水洗涤后得到固体； (2)将步骤(1)所得固体用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物1300ml溶解，加入填有AB-8大孔树脂的柱子通过，再用三氯甲烷和异丙醇(3 : 1)混合物600ml洗脱纯化，收集洗脱液； (3)将步骤(2)所得洗脱液用10X枸橼酸钠溶液调节pH值为7. O，析出固体，离心机离心20min，用500ml异丙醇洗涤，6(TC真空干燥3小时，得精制品92. 8g，收率92. 8%，HPLC检测纯度为99. 94% 。
实施例3哌拉西林钠的精制 (1)将100g哌拉西林钠溶于800ml水，加入2mol/L的硝酸溶液调节pH值为3. 5，搅拌析出不溶物，过滤，经纯化水洗涤后得到固体； (2)将步骤(1)所得固体用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物1200ml溶解，加入填有AB-8大孔树脂的柱子通过，再用三氯甲烷和异丙醇(3 : 1)混合物500ml洗脱纯化，收集洗脱液； (3)将步骤(2)所得洗脱液用0. lmol/L氢氧化钠溶液调节pH值为6. 0，析出固体，离心机离心10min，用500ml异丙醇洗涤，55。C真空干燥4小时，得精制品93. 7g，收率93.7%， HPLC检测纯度为99. 93 % 。
实施例4阿莫西林钠的精制 (1)将100g阿莫西林钠溶于1000ml水，加入2%枸橼酸溶液调节pH值为2. 5，搅拌析出不溶物，过滤，经纯化水洗涤后得到固体； (2)将步骤(1)所得固体用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物1600ml溶解，加入填有D101大孔树脂的柱子通过，再用三氯甲烷和异丙醇(3 : 1)混合物800ml洗脱纯化，收集洗脱液； (3)将步骤(2)所得洗脱液用5X碳酸氢钠溶液调节pH值为5.0，析出固体，离心机离心20min，用500ml异丙醇洗涤，5(TC真空干燥4小时，得精制品95. 2g，收率95. 2% ，HPLC检测纯度为99. 97%。
实施例5氟氯西林钠的精制 (1)将100g氟氯西林钠溶于1200ml水，加入lmol/L的醋酸溶液调节pH值为2.0，搅拌析出不溶物，过滤，经纯化水洗涤后得到固体； (2)将步骤(1)所得固体用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物800ml溶解，加入填有AB-8大孔树脂的柱子通过，再用三氯甲烷和异丙醇(3 : 1)混合物400ml洗脱纯化，收集洗脱液； (3)将步骤(2)所得洗脱液用0. 2mol/L磷酸氢二钠溶液调节pH值为7. 5，析出固体，离心机离心10min，用500ml异丙醇洗涤，6(TC真空干燥4小时，得精制品91. 8g，收率91. 8%， HPLC检测纯度为99. 95%。
实施例6氨苄西林钠的精制 (1)将100g氨苄西林钠溶于1000ml水，加入0. lmol/L的盐酸溶液调节pH值为4. 5，搅拌析出不溶物，过滤，经纯化水洗涤后得到固体； (2)将步骤(1)所得固体用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物1000ml溶解，加入填有D101大孔树脂的柱子通过，再用三氯甲烷和异丙醇(3 : 1)混合物600ml洗脱纯化，收集洗脱液； (3)将步骤(2)所得洗脱液用5X碳酸钠溶液调节pH值为6. 5，析出固体，离心机离心20min，用500ml异丙醇洗涤，5(TC真空干燥3小时，得精制品92. 2g，收率92. 2% ，HPLC检测纯度为99. 92%。 应当理解，这些实施例仅仅是对本发明优选方案的说明，而并不以任何方式限制本发明的保护范围。本领域技术人员在本发明所公开内容的教导下，在不背离本发明精神和主旨的前提下，可以对本发明进行适当的修饰和改进，这些都将落入本发明的范围之内。
权利要求
一种β-内酰胺青霉素类抗生素药物化合物的精制方法，其特征在于包括如下步骤(1)将β-内酰胺青霉素类抗生素药物化合物的粗品溶于水，调节水溶液的pH值为酸性，收集所析出的固体；(2)将步骤(1)所得到的固体用有机溶剂溶解后，上大孔吸附树脂柱，用洗脱剂进行洗脱，收集含β-内酰胺青霉素类抗生素药物化合物的洗脱液；(3)调节步骤(2)所得洗脱液的pH值至碱性或中性，收集所析出的固体，即得到精制后的β-内酰胺青霉素类抗生素药物化合物。
2. 根据权利要求l所述的精制方法，其中所述的P-内酰胺青霉素类抗生素药物化合 物是具有如下式(I)所示结构的抗生素类药物化合物其中，R为抗生素类药物化合物所含有的其他基团。
3. 根据权利要求2所述的精制方法，其中所述的e-内酰胺青霉素类抗生素药物化合 物可以为阿洛西林钠、美洛西林钠、哌拉西林钠、阿莫西林钠、氨苄西林钠、苯唑西林钠、氟 氯西林钠、氯唑西林钠或者双氯西林钠。
4. 根据权利要求l-3所述的精制方法，其特征在于所述步骤(1)中，用酸调节溶液的 pH值为2. 0 4. 5，优选为3. 0 4. 0，所述的酸可以选自盐酸、硫酸、硝酸、枸橼酸、醋酸、硼 酸、磷酸中的一种或者两种以上。
5. 根据权利要求l-4所述的精制方法，其特征在于所述步骤(2)中，所述的大孔吸附树 脂为苯乙烯型大孔吸附树脂；优选所述大孔吸附树脂为D101型大孔吸附树脂或AB-8型大 孔吸附树脂。
6. 根据权利要求l-5所述的精制方法，其特征在于所述步骤(2)中，所述的洗脱剂选自 三氯甲烷、二氯甲烷、乙醇、异丙醇、叔丁醇、乙酸乙酯、丙酮、石油醚中的一种或两种以上； 优选所述的洗脱剂为三氯甲烷和异丙醇的混合物，二者的体积比为3 : 1。
7. 根据权利要求l-6所述的精制方法，其特征在于所述步骤(2)中，所述的有机溶剂选 自二氯甲烷、乙醇、甲醇、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、石油醚中的一种或两种以上；优选所述 的有机溶剂为乙醇和丙酮的混合物，二者体积比为5 : 1。
8. 根据权利要求l-7所述的精制方法，其特征在所述步骤(3)中，采用碱调节所得洗脱 液的PH值为5. 0 9. O，优选为5. 5 7. 0，所述的碱选自氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、醋 酸钠、磷酸氢二钠、枸橼酸钠中的一种或两种以上。
9. 根据权利要求l-8所述的精制方法，其特征在于包括如下步骤(1)将待精制的P-内酰胺青霉素类抗生素药物化合物粗品溶于水，加入酸调节溶液的pH值为3. 0 4. 0，搅拌析出不溶物，过滤，经纯水洗涤后得到固体；(2) 将步骤(1)所得固体用有机溶剂溶解后，上D101大孔吸附树脂或者AB-8大孔吸附 树脂，用洗脱剂进行洗脱，收集含药物化合物的洗脱液，其中，所述的有机溶剂为乙醇和丙 酮的混合物，二者体积比为5 : l，所述的洗脱剂为三氯甲烷和异丙醇的混合物，二者体积比为3 : 1 ;(3) 用碱调节步骤(2)所收集的洗脱液的pH值为5.5 7.0，收取所析出的固体，用异 丙醇洗涤，50 6(TC真空干燥3 5小时，得精制品。
10.根据权利要求9所述的精制方法，其中所述的e-内酰胺青霉素类抗生素药物化合 物为阿洛西林钠、美洛西林钠、哌拉西林钠、阿莫西林钠、氨节西林钠、苯唑西林钠、氟氯西 林钠、氯唑西林钠或者双氯西林钠，所得精制品的纯度不低于99. 9%。
全文摘要
本发明提供一种高纯度的抗生素类药物化合物，具体地说，提供一种β-内酰胺青霉素类抗生素药物化合物的精制方法。通过将酸碱pH法、大孔吸附树脂法有效地结合，并在特定工艺参数下进行精制纯化，得到高纯度的β-内酰胺青霉素类抗生素药物化合物，纯度达99.9％以上，而且收率收率超过90％，取得令人意外的纯化效果。本发明方法可以获得一种高纯度β-内酰胺青霉素类药物化合物，从而可以提高其相应制剂稳定性和临床用药效果。方法简单、成本低廉、易于操作，适于大规模工业化生产。
文档编号C07D499/18GK101696210SQ200910169648
公开日2010年4月21日 申请日期2009年8月28日 优先权日2009年8月28日
发明者邱民 申请人:海南美大制药有限公司;