抗pmel17抗体和免疫缀合物的制作方法
【专利摘要】本发明提供抗PMEL17抗体和免疫缀合物及其使用方法。
【专利说明】抗PMEL17抗体和免疫缀合物 发明领域
[0001] 本发明涉及抗PMEL17抗体和免疫缀合物及其使用方法。
[0002] 背景
[0003] 黑素细胞蛋白质PMEL17是一种经受自内质网排出至高尔基体的整合膜蛋白，在 高尔基体中，其经糖基化并且最终迀移至黑素体。成熟PMEL17到达黑素体所通过的特定途 径已成为争论的主题，然而，明显的是该蛋白质的某一部分在其进入I期黑素体中之前短 暂存在于细胞表面处。黑素体是产生黑色素的特定溶酶体相关细胞器，所述黑色素沉积在 由源于PMEL17蛋白质的蛋白水解片段构成的原纤维上。黑色素的合成主要局限于黑素细 胞和眼的有丝分裂后色素上皮。黑素细胞独特表达色素形成所需的特定基因，其中一些黑 素细胞在其转化成黑素瘤之后得以维持。
[0004] 人PMEL17是一种具有661个氨基酸的蛋白质（包括氨基末端信号序列），其中跨 膜区域位于氨基酸596和616处。PMEL17经受复杂加工，但该蛋白质的生命周期的至少一 部分是在细胞表面上度过。
[0005] 本领域存在对靶向PMEL17以诊断和治疗PMEL17相关病状（诸如癌症）的药剂的 需要。本发明满足此需要并且提供其它益处。
[0006] 概述
[0007] 本发明提供抗PMEL17抗体和免疫缀合物及其使用方法。
[0008] 在一些实施例中，提供结合PMEL17的分离抗体。在一些这类实施方案中，抗体结 合SEQ ID NO: 26的氨基酸105至125内的表位。在一些这类实施方案中，抗体结合SEQ ID NO: 26的氨基酸25至45内的表位。在一些实施方案中，抗体为单克隆抗体。在一些实施方 案中，抗体为人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。在一些实施方案中，抗体为结合PMEL17的抗 体片段。在一些实施方案中，PMEL17为人PMEL17。在一些实施方案中，人PMEL17具有序列 SEQ ID N0:26或SEQ ID N0:27。在一些实施方案中，抗体为IgGl、IgG2a或IgG2b抗体。
[0009] 在一些实施方案中，抗体包含：a) (i)包含氨基酸序列SEQ ID N0:5的HVR-H3， (ii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:8的HVR-L3,和（iii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:4的 HVR-H2 ;或b)⑴包含氨基酸序列SEQ ID N0:15的HVR-H3,（ii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:8的HVR-L3，和（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:14的HVR-H2 ;或c)通过具有ATCC登 录号 PTA-12862 的杂交瘤 7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的 HVR-H3、HVR-L3 和 HVR-H2。
[0010] 在一些实施方案中，抗体包含：a) (i)包含氨基酸序列SEQ ID N0:3的HVR-H1，
[11] 包含氨基酸序列SEQ ID N0:4的HVR-H2,和（iii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:5的 HVR-H3 ;或b)⑴包含氨基酸序列SEQ ID N0:13的HVR-H1，（ii)包含氨基酸序列SEQ ID NO: 14的HVR-H2,和（iii)包含氨基酸序列SEQ ID NO: 15的HVR-H3 ;或c)通过具有ATCC 登录号 PTA-12862 的杂交瘤 7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的 HVR-H1、HVR-H2 和 HVR-H3。 [0011] 在一些实施方案中，抗体包含：a) (i)包含氨基酸序列SEQ ID N0:3的HVR-H1， (ii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:4的HVR-H2,（iii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:5的 HVR-H3，（iv)包含氨基酸序列SEQ ID N0:6的HVR-L1，（V)包含氨基酸序列SEQ ID N0:7 的HVR-L2,（vi)包含氨基酸序列SEQ ID N0:8的HVR-L3 ;或b) (i)包含氨基酸序列SEQ ID NO: 13的HVR-H1，（ii)包含氨基酸序列SEQ ID NO: 14的HVR-H2,和（iii)包含氨基酸序列 SEQIDN0:15的HVR-H3，（iv)包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-Ll，（v)包含氨基酸序 列SEQ ID N0:7的HVR-L2，（vi)包含氨基酸序列SEQ ID N0:8的HVR-L3 ;或c)通过具有 ATCC 登录号 PTA-12862 的杂交瘤 7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的 HVR-H1、HVR-H2、HVR-H3、 HVR-Ll、HVR-L2 和 HVR-L3。
[0012] 在一些实施方案中，抗体包含：a) (i)包含氨基酸序列SEQ ID N0:6的HVR-L1， (ii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:7的HVR-L2,（iii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:8的 HVR-L3 ;或b)⑴包含氨基酸序列SEQ ID N0:16的HVR-L1，（ii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:7的HVR-L2,（iii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:8的HVR-L3 ;或c)通过具有ATCC登录 号 PTA-12862 的杂交瘤 7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的 HVR-L1、HVR-L2 和 HVR-L3。
[0013] 在一些实施方案中，抗体包含：a)与氨基酸序列SEQ ID NO: 1或50具有至少95% 序列同一性的VH序列；或b)与氨基酸序列SEQ ID N0:2具有至少95%序列同一性的VL序 列；或c)如（a)中的VH序列和如（b)中的VL序列；或d)与氨基酸序列SEQ ID NO:9或 49具有至少95%序列同一性的VH序列；或e)与氨基酸序列SEQ ID NO: 10具有至少95% 序列同一性的VL序列；或f)如（d)中的VH序列和如（e)中的VL序列；或g)与通过具有 ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的VH序列具有至少95 %序 列同一性的VH序列；或h)与通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤7509 (31D1. 6. 7) 产生的抗体的VL序列具有至少95%序列同一性的VL序列；或i)如（g)中的VH序列和如 (h)中的VL序列。
[0014] 在一些实施方案中，抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO: 1或50的VH序列、具 有氨基酸序列SEQ ID N0:9或49的VH序列、或通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交 瘤7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的VH序列。在一些实施方案中，抗体包含具有氨基酸序列 SEQ ID NO: 2的VL序列、具有氨基酸序列SEQ ID NO: 10的VL序列、或通过具有ATCC登录 号PTA-12862的杂交瘤7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的VL序列。在一些实施方案中，抗体 包含（a)具有氨基酸序列SEQ ID NO: 1或50的VH序列和具有氨基酸序列SEQ ID NO: 2的 VL序列；或（b)具有氨基酸序列SEQ ID NO: 9或49的VH序列和具有氨基酸序列SEQ ID NO: 10的VL序列；或（c)通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤7509 (31D1. 6. 7)产生 的抗体的VH序列和通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤7509 (31D1. 6. 7)产生的抗 体的VL序列。
[0015] 在一些实施方案中，提供一种结合PMEL17的分离抗体，其中所述抗体包含：a) (i) 包含氨基酸序列SEQ ID N0:22的HVR-H3,（ii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:25的HVR-L3， 和（iii)包含氨基酸序列SEQ ID NO: 21的HVR-H2;或b)(i)包含氨基酸序列SEQ ID NO: 20 的HVR-H1，（ii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:21的HVR-H2,和（iii)包含氨基酸序列SEQ ID NO:22的HVR-H3 ;或c)⑴包含氨基酸序列SEQ ID NO:23的HVR-Ll，（ii)包含氨基酸 序列 SEQ ID N0:24 的 HVR-L2，（iii)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:25 的 HVR-L3;或 d)(i) 包含氨基酸序列SEQ ID N0:20的HVR-H1，（ii)包含氨基酸序列SEQ ID N0:21的HVR-H2， 和（iii)包含氨基酸序列SEQ ID NO: 22的HVR-H3,（iv)包含氨基酸序列SEQ ID NO: 23的 HVR-Ll，（V)包含氨基酸序列SEQ ID NO: 24的HVR-L2,（vi)包含氨基酸序列SEQ ID NO: 25 的HVR-L3 ;或e)与氨基酸序列SEQ ID NO: 11或51具有至少95%序列同一性的VH序列； 或f)与氨基酸序列SEQ ID NO: 12具有至少95%序列同一性的VL序列；或g)如（e)中的 VH序列和如（f)中的VL序列；或h)具有氨基酸序列SEQ ID NO: 11或51的VH序列；或i) 具有氨基酸序列SEQ ID NO: 12的VL序列；或j)如（h)中的VH序列和如（i)中的VL序 列。在一些实施方案中，抗体为IgGl、IgG2a或IgG2b抗体。
[0016] 在一些实施方案中，提供一种编码任何上述抗体的分离核酸。在一些实施方案中， 提供一种包含所述核酸的宿主细胞。在一些实施方案中，提供一种产生抗体的方法，所述方 法包括培养宿主细胞以使抗体得以产生。
[0017] 在一些实施方案中，提供一种免疫缀合物。在一些这类实施方案中，所述免疫缀 合物包含任何上述抗体和细胞毒性剂。在一些实施方案中，免疫缀合物具有式Ab- (L-D) p， 其中：(a) Ab为如权利要求1至16中任一项项所述的抗体；(b) L为接头；（C)D为选自美登 木素（maytansinoid)、奥瑞斯他汀（auristatin)、卡里奇霉素（calicheamicin)、卩比略并苯 并二氮杂卓（pyrrolobenzodiazepine)和奈莫柔比星（nemorubicin)衍生物的药物；并且 (d) p在1-8的范围内。
[0018] 在一些实施方案中，D为奥瑞斯他汀。在一些这类实施方案中，D具有式De
【权利要求】
1. 一种结合PMEL17的分离抗体，其中所述抗体结合SEQIDNO: 26的氨基酸105至125 内的表位，或结合SEQIDNO: 26的氨基酸25至45内的表位。
2. 如权利要求1所述的抗体，其为单克隆抗体。
3. 如权利要求1所述的抗体，其为人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。
4. 如权利要求1所述的抗体，其为结合PMEL17的抗体片段。
5. 如权利要求1所述的抗体，其中PMEL17为人PMEL17。
6. 如权利要求5所述的抗体，其中人PMEL17具有序列SEQIDNO: 26或SEQIDNO: 27。
7. 如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含： a) (i)包含氨基酸序列SEQIDNO:5的HVR-H3,（ii)包含氨基酸序列SEQIDNO:8的HVR-L3,和（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2 ;或 b) (i)包含氨基酸序列SEQIDNO: 15的HVR-H3,（ii)包含氨基酸序列SEQIDNO: 8的HVR-L3,和（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:14的HVR-H2 ;或 c) 通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的HVR-H3、 HVR-L3 和HVR-H2。
8. 如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含： a) (i)包含氨基酸序列SEQIDNO:3的HVR-Hl，（ii)包含氨基酸序列SEQIDNO:4的HVR-H2,和（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3 ;或 b) ⑴包含氨基酸序列SEQIDNO: 13的HVR-H1，（ii)包含氨基酸序列SEQIDNO: 14 的HVR-H2,和（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3 ;或 c) 通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤7509(31D1. 6. 7)产生的抗体的HVR-H1、 HVR-H2 和HVR-H3。
9. 如权利要求8所述的抗体，其中所述抗体包含： a) (i)包含氨基酸序列SEQIDNO:3的HVR-Hl，（ii)包含氨基酸序列SEQIDNO:4的HVR-H2,（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3,（iv)包含氨基酸序列SEQIDN0:6 的HVR-Ll，（V)包含氨基酸序列SEQIDNO: 7的HVR-L2,（vi)包含氨基酸序列SEQIDNO: 8 的HVR-L3 ;或 b) ⑴包含氨基酸序列SEQIDNO: 13的HVR-H1，（ii)包含氨基酸序列SEQIDNO: 14 的HVR-H2,和（iii)包含氨基酸序列SEQIDNO: 15的HVR-H3,（iv)包含氨基酸序列SEQID N0:16的HVR-L1，（V)包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2,（vi)包含氨基酸序列SEQ IDN0:8 的HVR-L3 ;或 c) 通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的HVR-Hl、 HVR-H2、HVR-H3、HVR-L1、HVR-L2 和HVR-L3。
10. 如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含： a) (i)包含氨基酸序列SEQIDNO:6的HVR-Ll，（ii)包含氨基酸序列SEQIDNO:7的HVR-L2,（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:8 的HVR-L3 ;或 b) (i)包含氨基酸序列SEQIDNO: 16的HVR-Ll，（ii)包含氨基酸序列SEQIDNO: 7的HVR-L2,（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:8 的HVR-L3 ;或 c) 通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的HVR-Ll、 HVR-L2 和HVR-L3。
11. 如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含： a) 与氨基酸序列SEQIDNO: 1具有至少95%序列同一性的VH序列；或 b) 与氨基酸序列SEQIDN0:2具有至少95%序列同一性的VL序列；或 c) 如（a)中的VH序列和如（b)中的VL序列；或 d) 与氨基酸序列SEQIDN0:9具有至少95%序列同一性的VH序列；或 e) 与氨基酸序列SEQIDNO: 10具有至少95%序列同一性的VL序列；或 f) 如（d)中的VH序列和如（e)中的VL序列；或 g) 与通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的VH序 列具有至少95%序列同一性的VH序列；或 h) 与通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的VL序 列具有至少95%序列同一性的VL序列；或 i) 如（g)中的VH序列和如（h)中的VL序列。
12. 如权利要求11所述的抗体，其包含具有氨基酸序列SEQIDNO: 1的VH序列、 具有氨基酸序列SEQIDN0:9的VH序列、或通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤 7509(31D1.6. 7)产生的抗体的VH序列。
13. 如权利要求11所述的抗体，其包含具有氨基酸序列SEQIDN0:2的VL序列、具 有氨基酸序列SEQIDNO: 10的VL序列、或通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤 7509(31D1.6. 7)产生的抗体的VL序列。
14. 一种分离抗体，其包含（a)具有氨基酸序列SEQIDNO: 1的VH序列和具有氨基 酸序列SEQIDN0:2的VL序列；或（b)具有氨基酸序列SEQIDN0:9的VH序列和具有 氨基酸序列SEQIDNO: 10的VL序列；或（c)通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交 瘤7509 (31D1. 6. 7)产生的抗体的VH序列和通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤 7509(31D1.6. 7)产生的抗体的VL序列。
15. -种结合PMEL17的分离抗体，其中所述抗体包含： a) (i)包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3,（ii)包含氨基酸序列SEQIDN0:25 的HVR-L3,和（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2 ;或 b) ⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:20的HVR-H1，（ii)包含氨基酸序列SEQIDN0:21 的HVR-H2,和（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3 ;或 c) ⑴包含氨基酸序列SEQIDNO:23的HVR-Ll，（ii)包含氨基酸序列SEQIDNO:24 的HVR-L2,（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:25的HVR-L3 ;或 d) ⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:20的HVR-H1，（ii)包含氨基酸序列SEQIDN0:21 的HVR-H2,和（iii)包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3,（iv)包含氨基酸序列SEQ IDN0:23的HVR-L1，（V)包含氨基酸序列SEQIDN0:24的HVR-L2,（vi)包含氨基酸序列 SEQIDN0:25 的HVR-L3 ;或 e) 与氨基酸序列SEQIDNO: 11具有至少95%序列同一性的VH序列；或 f) 与氨基酸序列SEQIDNO: 12具有至少95%序列同一性的VL序列；或 g) 如（e)中的VH序列和如（f)中的VL序列；或 h) 具有氨基酸序列SEQIDNO: 11的VH序列；或 i) 具有氨基酸序列SEQIDNO: 12的VL序列；或 j)如（h)中的VH序列和如⑴中的VL序列。
16. 如权利要求1至15中任一项所述的抗体，其为IgGl、IgG2a或IgG2b抗体。
17. -种分离核酸，其编码如权利要求1至16中任一项所述的抗体。
18. -种宿主细胞，其包含如权利要求17所述的核酸。
19. 一种产生抗体的方法，其包括培养如权利要求18所述的宿主细胞以使所述抗体得 以产生。
20. -种免疫缀合物，其包含如权利要求1至16中任一项所述的抗体和细胞毒性剂。
21. 如权利要求20所述的免疫缀合物，其具有式Ab-(L-D)p，其中： (a) Ab为如权利要求1至16中任一项所述的抗体； (b) L为接头； (c) D为选自美登木素、奥瑞斯他汀、卡里奇霉素、吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍 生物的药物；并且 (d) p在1-8的范围内。
22. 如权利要求21所述的免疫缀合物，其中D为奥瑞斯他汀。
23. 如权利要求22所述的免疫缀合物，其中D具有式DE
并且其中R2和R6各自为甲基，R3和R4各自为异丙基，R5为H，R7为仲丁基，各R8独立 地选自〇13、0_013、0!1和!1;1?9为!1 ;并且1?18为-(：〇〇2-(：〇?8)2-芳基。
24. 如权利要求21所述的免疫缀合物，其中所述药物为MMAE。
25. 如权利要求22所述的免疫缀合物，其中D为式A的吡咯并苯并二氮杂卓：
其中点线指示任选地在Cl与C2或C2与C3之间存在双键； R2独立地选自H、OH、= 0、=CH2、CN、R、OR、=CH-RD、=C(Rd) 2、0-S02-R、CO2R和COR， 并且任选地进一步选自卤基或二卤基，其中Rd独立地选自1?、〇)21?、〇?、〇10、〇) 2!1和卤基； R6和R9独立地选自H、R、0H、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR'、N02、Me3Sn和卤基； R7独立地选自H、R、0H、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR'、N02、Me3Sn和卤基； Q独立地选自0、S和NH; R11为H或R或其中Q为0、SO具其中M为金属阳离子； R和R'各自独立地选自任选取代的Cp8烷基、C3_8杂环基和C5_2(|芳基，并且任选地就基 团NRR'而言，R和R'连同其所连接的氮原子一起形成任选取代的4、5、6或7元杂环； R12、R16、R19和R17分别是如对于R2、R6、R9和R7所定义； R"为C3_12亚烷基，该链可间杂有一个或多个杂原子和/或任选取代的芳环；并且X和X'独立地选自0、S和N(H)。
26. 如权利要求25所述的免疫缀合物，其中D具有结构：
其中η为0或1。
27. 如权利要求25所述的免疫缀合物，其中D具有选自以下的结构：
其中Re和RΕ"各自独立地选自H或R11，其中Rd独立地选自R、CO2R、COR、CHO、CO2H和卤 基； 其中Ar1和Ar2各自独立地为任选取代的C5_2(|芳基；并且 其中η为0或1。
28. 如权利要求21所述的免疫缀合物，其中D为式B的吡咯并苯并二氮杂卓：
其中水平波形线指示与该接头的共价连接位点； Rvi和Rv2独立地选自H、甲基、乙基、苯基、氟取代的苯基和C5_6杂环基；并且η为O或1。
29. 如权利要求21所述的免疫缀合物，其中D为奈莫柔比星衍生物。
30. 如权利要求29所述的免疫缀合物，其中D具有选自以下的结构：
31. 如权利要求21至30中任一项所述的免疫缀合物，其中所述接头可由蛋白酶裂解。
32. 如权利要求31所述的免疫缀合物，其中所述接头包含val-cit二肽或Phe-Lys二 肽。
33. 如权利要求21至30中任一项所述的免疫缀合物，其中所述接头具有酸不稳定性。
34. 如权利要求33所述的免疫缀合物，其中所述接头包含腙。
35. 如权利要求23所述的免疫缀合物，其具有式：
其中S为硫原子。
36. 如权利要求26所述的免疫缀合物，其具有式：
?O
37.如权利要求30所述的免疫缀合物，其具有选自以下的式：
O
38. 如权利要求21至37中任一项所述的免疫缀合物，其中p在2-5的范围内。
39. 如权利要求21至38中任一项所述的免疫缀合物，其包含如权利要求9所述的抗 体。
40. 如权利要求21至38中任一项所述的免疫缀合物，其包含如权利要求14所述的抗 体。
41. 一种药物制剂，其包含如权利要求21至40中任一项所述的免疫缀合物和药学上可 接受的载体。
42. 如权利要求41所述的药物制剂，其进一步包含另一种治疗剂。
43. -种治疗患有PMEL17阳性癌症的个体的方法，所述方法包括向所述个体施用有效 量的如权利要求20至40中任一项所述的免疫缀合物。
44. 如权利要求43所述的方法，其中所述PMEL17阳性癌症为黑素瘤。
45. 如权利要求44所述的方法，其进一步包括向所述个体施用另一种治疗剂。
46. -种抑制PMEL17阳性细胞增殖的方法，所述方法包括在容许如权利要求20至40 中任一项所述的免疫缀合物结合所述细胞的表面上的PMEL17的条件下使所述细胞暴露于 所述免疫缀合物，借此抑制所述细胞的增殖。
47. 如权利要求46所述的方法，其中所述细胞为黑素瘤细胞。
48. 如权利要求1至16中任一项所述的抗体，其缀合于标记。
49. 如权利要求48所述的抗体，其中所述标记为正电子发射体。
50. 如权利要求49所述的抗体，其中所述正电子发射体为89Zr。
51. -种检测生物样品中的人PMEL17的方法，其包括使所述生物样品与如权利要求1 至16中任一项所述的抗PMEL17抗体在容许所述抗PMEL17抗体结合天然存在的人PMEL17 的条件下接触，以及检测在所述抗PMEL17抗体与所述生物样品中的天然存在的人PMEL17 之间是否形成复合物。
52. 如权利要求51所述的方法，其中所述抗PMEL17抗体为如权利要求9或权利要求 15所述的抗体。
53. 如权利要求51所述的方法，其中所述生物样品为黑素瘤样品。
54. -种检测PMEL17阳性癌症的方法，其包括⑴向患有或疑似患有PMEL17阳性癌症 的受试者施用经标记抗PMEL17抗体，其中所述经标记抗PMEL17抗体包含如权利要求1至 16中任一项所述的抗PMEL17抗体，和（ii)检测所述受试者中的所述经标记抗PMEL17抗 体，其中检测到所述经标记抗PMEL17抗体指示在所述受试者中存在PMEL17阳性癌症。
55. 如权利要求54所述的方法，其中所述经标记抗PMEL17抗体为经标记的如权利要求 9或权利要求15所述的抗体。
56. 如权利要求54或权利要求55所述的方法，其中所述经标记抗PMEL17抗体包含缀 合于正电子发射体的抗PMEL17抗体。
57. 如权利要求56所述的方法，其中所述正电子发射体为89Zr。
58. -种治疗患有PMEL17阳性癌症的个体的方法，其中所述PMEL17阳性癌症对第一治 疗剂具有抗性，所述方法包括向所述个体施用有效量的如权利要求20至40中任一项所述 的免疫缀合物。
59. 如权利要求58所述的方法，其中所述PMEL17阳性癌症为黑素瘤。
60. 如权利要求58或权利要求59所述的方法，其中所述第一治疗剂包含结合除 PMEL17以外的抗原的第一抗体。
61. 如权利要求60所述的方法，其中所述第一治疗剂为包含结合除PMEL17以外的抗原 的第一抗体和第一细胞毒性剂的第一免疫缀合物。
62. 如权利要求60或权利要求61所述的方法，其中所述第一抗体结合选自内皮素B受 体（ETBR)、酪氨酸酶相关蛋白质I(TYRPl)、细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)和糖蛋白 NMBOiPNMB)的抗原。
63. 如权利要求62所述的方法，其中所述第一抗体结合ETBR。
64. 如权利要求63所述的方法，其中所述第一抗体为hu5E9.vl。
65. 如权利要求64所述的方法，其中所述第一免疫缀合物为hu5E9. VI-MC-vaI-cit-PAB-MMAE〇
66. 如权利要求61至65中任一项所述的方法，其中所述第一细胞毒性剂与如权利要求 20至40中任一项所述的免疫缀合物的所述细胞毒性剂不同。
67. 如权利要求66所述的方法，其中所述第一细胞毒性剂为MMAE并且如权利要求20 至40中任一项所述的免疫缀合物的所述细胞毒性剂选自卡里奇霉素、吡咯并苯并二氮杂 卓和奈莫柔比星衍生物。
68. 如权利要求67所述的方法，其中如权利要求20至40中任一项所述的免疫缀合物 的所述细胞毒性剂选自吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物。
69. -种治疗患有PMEL17阳性癌症的个体的方法，其包括向所述个体施用有效量的与 包含结合ETBR的抗体的第二免疫缀合物组合的如权利要求20至40中任一项所述的第一 免疫缀合物。
70. 如权利要求69所述的方法，其中结合ETBR的所述抗体包含含有序列SEQIDNO: 33 的HVRHl、含有序列SEQIDNO: 34的HVRH2、含有序列SEQIDNO: 35的HVRH3、含有序列 SEQIDNO:36 的HVRLl、含有序列SEQIDNO:37 的HVRL2、和含有序列SEQIDNO:38 的 HVRL3〇
71. 如权利要求69所述的方法，其中结合ETBR的所述抗体包含含有序列SEQIDNO:40 的重链可变区和含有序列SEQIDNO:39的轻链可变区。
72. 如权利要求69至71中任一项所述的方法，其中所述第一免疫缀合物包含选自奥瑞 斯他汀、吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物的细胞毒性剂，并且所述第二免疫缀合 物包含选自奥瑞斯他汀、吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物的细胞毒性剂。
73. 如权利要求69至72中任一项所述的方法，其中所述第一免疫缀合物包含选自吡咯 并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物的细胞毒性剂，并且所述第二免疫缀合物包含奥瑞斯 他汀。
74. 如权利要求73所述的方法，其中所述第二免疫缀合物包含MMAE。
75. 如权利要求69至74中任一项所述的方法，其中所述第二免疫缀合物包含含有 MC-val-cit-PAB-MMAE的接头-药物部分。
76. 如权利要求69至75中任一项所述的方法，其中所述第二免疫缀合物为hu5E9. VI-MC-vaI-cit-PAB-MMAE〇
77. 如权利要求69至76中任一项所述的方法，其中所述PMEL17阳性癌症为黑素瘤。
78. 如权利要求69至77中任一项所述的方法，其中所述PMEL17阳性癌症也为ETBR阳 性的。
【文档编号】C07K16/28GK104470544SQ201380022616
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2013年4月30日 优先权日:2012年5月1日
【发明者】Y·陈, W·玛丽特, P·波拉基斯, C·坦, J·阿桑迪, S·克拉克 申请人:基因泰克公司