链格孢属肽类的制作方法
【专利摘要】可用于预防或治疗对链格孢属和/或枝孢属的霉菌过敏的药物制剂，包括药学上可接受的载体或稀释剂和选自以下的至少三种的多肽或其药学上可接受的盐：(a)包含WSWKIGPAIATGNT(Alt28；SEQ ID NO:101)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；(b)包含KYRRVVRAGVKVAQTAR(Alt34A；SEQ ID NO:107)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；(c)包含KYAGVFVSTGTLGGG(SEQ ID NO:112)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；(d)包含AEVYQKLKALAKKTYGQ(Alt13A；SEQ ID NO:83)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；(e)包含SLGFNIKATNGGTLD(Alt01A；SEQ ID NO:60)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；(f)包含SAKRMKVAFKLDIEK(Alt06；SEQ ID NO:72)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；(g)包含DITYVATATLPNYCR(SEQ ID NO:111)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；以及(h)包含GWGVMVSHRSGET(Alt14；SEQ ID NO:84)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；其中，所述氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列是具有多达七个氨基酸修饰的所述氨基酸序列，所述修饰的每一个独立地是缺失、取代或插入，且各多肽多达30个氨基酸长度。
【专利说明】链格孢属肽类 发明领域
[0001 ] 本发明涉及可用于预防或治疗对链格孢属（Alternaria)和/或枝孢属 (Cladosporium)的霉菌过敏的多肽和药物制剂。
[0002] 发明背景
[0003] 霉菌过敏原被认为作为人和动物中过敏性疾病，包括哮喘、过敏性鼻炎、过敏性结 膜炎和过敏性皮炎的主要原因。在较冷的气候中，可在晚冬开始的户外空气中发现霉菌，并 且峰值在夏末秋初月份（七月至十月）。在较暖的气候中，可全年发现霉菌孢子，在夏末秋 初月份发现最高水平。虽然室内霉菌可全年存在，并取决于住宅内的湿度水平，当户外霉菌 水平越高时，室内霉菌水平越高。因此，尽管室内霉菌还可来自室内霉菌污染物，但室内霉 菌的常见来源来自户外环境。
[0004] 存在数千类型的霉菌；然而，这些中仅少数通常与过敏相关。以下是基于在 空气中收集的霉菌孢子的类型的过敏性疾病的最可能的原因：链格孢属、枝孢属、曲霉 属（Aspergillus)、青霉属（Penicillium)、长懦抱属（Helminthosporium)、附球菌属 (Epicoccum)、镰孢属（Fusarium)、短梗霉属（Aureobasidium)、莖点霉属（Phoma)、根霉属 (Rhizopus)、毛霉属（Mucor)、黑粉菌（Smuts)、和酵母。链格孢属中的霉菌,特别是互隔交 链孢霉（AlternariaAlternata),和枝孢属被认为是最重要的过敏真菌。
[0005] 枝孢属是最常见的空气传播的室外霉菌。链格孢属是影响儿童的主要过敏原之 一。在温带气候中，从全年的大部分时间（在北半球通常五月至十一月）可检测空气传播 的链格孢属孢子，在夏末和秋季具有峰值。链格孢属孢子的散布发生在干旱时期期间。这 些以更高的风速和更低的相对湿度为特征，其导致在午后时段阳光充足期间的峰值散布。
[0006] 尽管认为是户外霉菌，链格孢属将生长在提供足够湿度和适当生长物质的任何地 方。因此，通常在室内，特别是在潮湿的区域诸如地下室、厨房或卫生间发现链格孢属。通常 在冰箱滴水盘、空调、废物箱、床垫、泡沫橡胶枕头、或甚至在窗户上冷凝地发现链格孢属。 它是在北美和欧洲两者的屋尘中发现的最常见的霉菌孢子之一。避免链格孢属过敏原实际 上是不可能的。
[0007] 发明概沭
[0008] 本发明提供了包含药学上可接受的载体或稀释剂和选自以下的至少三种的多肽 或其药学上可接受的盐的药物制剂：
[0009] (&)包含吧11(16?4从了6阶'仏1七28;5￡〇10勵 :101)的氨基酸序列或源自所述氨基 酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；
[0010] (b)包含KYRRVVRAGVKVAQTAR(Alt34A;SEQIDN0:107)的氨基酸序列或源自所述 氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；
[0011] (c)包含KYAGVFVSTGTLGGG(SEQIDN0:112)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列 的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；
[0012] ((1)包含4￡￥￥〇1(0^1^1(1076〇仏1七134;5￡〇10勵 :83)的氨基酸序列或源自所述 氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；
[0013] (e)包含SLGFNIKATNGGTLD(Alt01A;SEQIDN0:60)的氨基酸序列或源自所述氨 基酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；
[0014] (f)包含SAKRMKVAFKLDIEK(Alt06;SEQIDN0:72)的氨基酸序列或源自所述氨基 酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；
[0015] (g)包含DITYVATATLPNYCR(SEQIDN0:111)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列 的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；以及
[0016] (h)包含GWGVMVSHRSGET(Altl4;SEQIDN0:84)的氨基酸序列或源自所述氨基酸 序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；
[0017] 其中，所述氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列是具有多达（upto)七个氨 基酸修饰的所述氨基酸序列，所述修饰的每一个独立地是缺失、取代或插入，且各多肽多达 30个氨基酸长度。
[0018] 本发明还提供了用于在治疗或预防对枝孢属和/或链格孢属过敏的方法中使用 的本发明的药物制剂。
[0019] 本发明还提供了治疗个体对链格孢属和/或枝孢属过敏、或预防个体对链格孢属 和/或枝孢属过敏的方法，该方法包括向所述个体施用治疗上或预防上有效量的本发明的 药物制剂。
[0020] 本发明还提供了以上描述的至少三种多肽或盐用于制造用于预防或治疗对链格 孢属和/或枝孢属过敏的药剂的用途。
[0021] 此外本发明提供了确定T细胞是否识别本发明的药物制剂的多肽的体外方法，该 方法包括使所述T细胞与所述药物制剂接触并检测所述T细胞是否被所述多肽刺激。
[0022] 本发明还提供了制备本发明的药物制剂的方法，包括将以上描述的至少三种多肽 或盐与药学上可接受的载体或稀释剂组合。
[0023] 本发明还包括多肽、或其药学上可接受的盐，其长度多达30个氨基酸并包括：
[0024] (I)氨基酸序列：
[0025] (a)WSWKIGPAIATGNT(Alt28；SEQIDNO:101),
[0026] (b)KYRRWRAGVKVAQTAR(Alt34A;SEQIDNO: 107)，或
[0027] (c)KYAGVFVSTGTLGGG(SEQIDN0:112);或
[0028] (II)包含T细胞表位的变体序列，其是具有多达七个氨基酸修饰的所述氨基酸序 列（I)，所述氨基酸修饰的每个独立地是缺失、取代或插入。
[0029] 本发明还提供了，用于在治疗或预防对链格孢属和/或枝孢属过敏的方法中使用 的本发明的多肽或盐，以及本发明的多肽或盐用于制造用于预防或治疗对链格孢属和/或 枝孢属过敏的药剂的用途。此外本发明提供了治疗个体对链格孢属和/或枝孢属过敏、或 预防个体对链格孢属和/或枝孢属过敏的方法，该方法包括向所述个体施用治疗上或预防 上有效量的本发明的多肽或盐。
[0030] 序列描沭
[0031] SEQIDNO: 1至118提供了如实施例1至10中列出的氨基酸序列。更详细地说：
[0032] SEQIDN0:1至6、59至65和111相应于源自蛋白Altal的氨基酸序列。
[0033] SEQIDN0:7至11、66至78和113相应于源自蛋白Alta2的氨基酸序列。
[0034]SEQIDN0:12至22和79至87相应于源自蛋白Alta6的氨基酸序列。
[0035] SEQIDN0:23至29、88、89、112和114相应于源自蛋白Alta7的氨基酸序列。
[0036] SEQIDN0:30至35和90至98相应于源自蛋白Alta8的氨基酸序列。
[0037] SEQIDN0:36至48和99至101相应于源自蛋白AltalO的氨基酸序列。
[0038] SEQIDN0:49至58、102至107和115相应于源自蛋白Altal3的氨基酸序列。
[0039] SEQIDNO: 108至110相应于源自以上链格孢属蛋白的同系物的氨基酸序列。
[0040] SEQIDNO: 116至118相应于实施例9中所用的对照多肽的氨基酸序列。
[0041] 以上提到的蛋白的NCBI登录号提供于实施例1至10。
[0042] 发明详沭
[0043] 本发明涉及预防或治疗对枝孢属和/或链格孢属的过敏，并提供了适合于该应用 的多肽及其药学上可接受的盐的组合。多肽或盐的组合可提供于药物制剂中。
[0044] 氨基酸序列及变体氨基酸序列
[0045] 本发明的多肽可优选地包括如以下的任何一个中显示的氨基酸序列、由如以下的 任何一个中显示的氨基酸序列组成、或基本由如以下的任何一个中显示的氨基酸序列组 成：
[0046] (a)WSWKIGPAIATGNT(Alt28；SEQIDNO:101),
[0047] (b)KYRRVVRAGVKVAQTAR(Alt34A；SEQIDNO:107),
[0048] (c)KYAGVFVSTGTLGGG(Altl8；SEQIDNO:112),
[0049] (d)AEVYQKLKALAKKTYGQ(Altl3A；SEQIDN0:83),
[0050] (e)SLGFNIKATNGGTLD(AltOlA；SEQIDN0:60),
[0051] (f)SAKRMKVAFKLDIEK(Alt06；SEQIDN0:72),
[0052] (g)DITYVATATLPNYCR(SEQIDNO:111)，或
[0053] (h)GWGVMVSHRSGET(Altl4；SEQIDN0:84)；
[0054] 本发明的其他多肽包括如以下中显示的氨基酸序列、由如以下中显示的氨基酸序 列组成、或基本由如以下中显示的氨基酸序列组成：
[0055] (i)IEKLRSNITVQYDI(Alt33；SEQIDNO: 105),
[0056] (j)SAFRSIEPELTVY(AltlO；SEQIDN0:77),
[0057] (k)GYTGKIKIAMDVASSE(Altl5；SEQIDN0:86),
[0058] 可替代地，包括在本发明的药物制剂中的多肽可包括以下、由以下组成、或基本由 以下组成：包含T细胞表位的变体序列，其是具有多达七个氨基酸修饰的如（a)至（k)的任 一个中显示的氨基酸序列，所述修饰的每个独立地是缺失、取代或插入。
[0059] 优选地，变体序列中的修饰不改变在相应原始氨基酸序列中存在的T细胞表位的 功能特性。以下进一步讨论T细胞表位的功能特性。
[0060] 在优选的变体序列中，保留相应原始氨基酸序列的足够连续的氨基酸以包含T细 胞表位。通常，此类变体序列保留原始氨基酸序列的至少8个、优选地至少9个连续的氨基 酸。该变体序列可保留原始氨基酸序列的从8至12个氨基酸或从9至12个氨基酸。
[0061] 变体序列可具有少于七个氨基酸修饰。例如，所述变体序列可具有多达六个或多 达五个氨基酸修饰，优选地多达四个所述氨基酸修饰，更优选地多达三个氨基酸修饰，以及 最优选地仅一个或两个氨基酸修饰。全部所述修饰独立地是缺失、取代或插入。
[0062] 在特别优选的实施方案中，变体序列具有一个或两个氨基酸修饰，该修饰或该修 饰的每一个独立地是缺失或取代。
[0063] 缺失
[0064] 当包含T细胞表位的变体序列具有是缺失的氨基酸修饰时，该缺失的氨基酸优选 地从相应原始氨基酸序列的N末端或C末端除去。即，变体序列是通过从原始序列的N末 端和/或C末端除去一个或更多个连续的氨基酸形成的原始氨基酸序列的截短。此类变体 序列可任选地没有其他缺失或没有其他修饰。
[0065] 缺失的氨基酸可较不优选地从相应原始氨基酸序列中的内部位置除去。从内部位 置除去，意指缺失的氨基酸本身不在原始氨基酸序列的N末端或C末端，以及也不是作为构 成原始氨基酸序列的N末端或C末端的连续氨基酸的序列的部分除去。即，为了被认为是 来自内部位置的缺失，所述缺失必须独立于来自原始氨基酸序列的N末端或C末端的缺失 而发生。
[0066] 例如，给定原始序列ABCDEFGH，具有两个氨基酸的内部缺失的实例变体序列可以 是ADEFGH，即B和C从内部位置除去，且保留原始末端残基A和H。相比之下，来自同一原 始序列的N末端的两个连续的氨基酸的缺失将导致变体序列CDEFGH，其中除去A和B，且C 现在是N末端。B在这种情况下的缺失不是从内部位置的除去，因为其作为构成原始序列的 N末端的两个连续的氨基酸的一个被除去。
[0067] 当多于一个的缺失发生在变体序列中时，缺失的氨基酸可从N末端和/或C末端 和/或内部位置的任何组合除去。优选的变体序列具有不超过一个的来自内部位置的缺 失。在特别优选的变体序列中，不存在来自内部位置的缺失，且缺失的氨基酸从原始序列的 N末端和/或C末端的任何组合中除去。即，缺失的氨基酸可全部从原始序列的N末端除 去，或其可全部从原始序列的C末端除去，或一些氨基酸可从原始序列的各末端除去。
[0068] 因此，在一个实施方案中，变体序列是具有从（a)至（k)的所述序列的N末端除去 一个、两个、三个、四个、五个、六个或七个氨基酸的（a)至（k)的任何一个的氨基酸序列。 [0069] 在另一个实施方案中，变体序列是具有从（a)至（k)的所述序列的C末端除去一 个、两个、三个、四个、五个、六个或七个氨基酸的（a)至（k)的任何一个的氨基酸序列。 [0070] 在另一个实施方案中，变体氨基酸序列是具有从所述序列的N末端和C末端两者 除去许多氨基酸的（a)至（k)的任何一个的氨基酸序列，条件是所述序列具有总计不超过 六个的修饰。此类变体序列的优选的实施方案是具有从所述序列的N末端和/或C末端除 去一个、两个或三个氨基酸，且任选地没有其他修饰的（a)至（k)的任何一个的氨基酸序 列。
[0071] 具有至少一个缺失的变体氨基酸序列的具体实例包括：
[0072] -变体序列QKLKALAKKTYGQ(SEQIDN0:18)，其是具有从N末端除去四个氨基酸的 AEVYQKLKALAKKTYGQ(SEQIDN0:83)的氨基酸序列；
[0073] -变体序列DITYVATATLPNY(SEQID勵:5)，其是具有从(：末端除去两个氨基酸的 DITYVATATLPNYCR(SEQIDN0:111)的氨基酸序列；
[0074] -变体序列RVVRAGVKVAQTA(SEQIDN0:58)，其是具有从N末端除去三个氨基酸及 从C末端除去一个氨基酸的KYRRVVRAGVKVAQTAR(SEQIDN0:107)的氨基酸序列；以及
[0075] -变体序列YEKYRRVVRAGVKV(SEQIDN0:106)，其是具有从C末端除去五个氨基酸 残基和相应于Alta13的天然序列中的KYRRVVRAGVKVAQTAR的N末端紧接的两个连续氨 基酸的两个氨基酸的N末端延伸的KYRRVVRAGVKVAQTAR(SEQIDN0:107)的氨基酸序列。
[0076] 取代
[0077] 当包含T细胞表位的变体序列具有是取代的氨基酸修饰时，该取代可在原始氨基 酸序列的任何位置上发生。优选的，所述取代不引入脯氨酸或半胱氨酸。还优选的，所述取 代是保守取代。
[0078] 保守取代，意指氨基酸可被具有相似特性的任何可替代的氨基酸取代。以下是实 例的非穷尽列表：
[0079] 具有碱性侧链的氨基酸，诸如赖氨酸、精氨酸或组氨酸，可各自独立地彼此取代。
[0080] 具有酸性侧链的氨基酸，诸如天冬氨酸（aspartate)和谷氨酸（glutamate)可各 自独立地彼此取代，或被其酰胺衍生物，天冬酰胺和谷氨酰胺取代。谷氨酸或谷氨酰胺还可 优选地被焦谷氨酸代替。具有取代谷氨酸或谷氨酰胺的焦谷氨酸的变体序列是特别优选 的，其中所述焦谷氨酸将相应于本发明的多肽的N末端，所述本发明的多肽包括变体序列、 由变体序列组成或基本由变体序列组成。在N末端具有焦谷氨酸的多肽通常在制造期间具 有改进的稳定性。
[0081] 具有脂肪族侧链的氨基酸，诸如甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸，可各 自独立地彼此取代。在该分类中特别优选的取代限于具有更小脂肪族侧链的氨基酸，即甘 氨酸、丙氨酸、缬氨酸，其可优选地各自独立地彼此取代。
[0082] 其他优选的取代包括用正亮氨酸（Nle)取代甲硫氨酸。
[0083] 此外，更笼统地，中性氨基酸可被另一个中性氨基酸取代，带电荷的氨基酸可被另 一个带电荷的氨基酸取代，亲水性氨基酸可被另一个亲水性氨基酸取代，疏水性氨基酸可 被另一个疏水性氨基酸取代，极性氨基酸可被另一个极性氨基酸取代，芳香族氨基酸可被 另一个芳香族氨基酸取代。可用于选择适当的取代基的20种主要的氨基酸的一些特性如 下：
【权利要求】
1. 一种药物制剂，所述药物制剂包括药学上可接受的载体或稀释剂和选自以下的至少 三种的多肽或其药学上可接受的盐： (a) 包含WSWKIGPAIATGNT(Alt28;SEQ ID N0:101)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序 列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐； (b) 包含KYRRVVRAGVKVAQTAR(Alt34A;SEQ ID N0:107)的氨基酸序列或源自所述氨基 酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐； (〇)包含1^46￥?￥5了6111^6(5￡0 10勵:112)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列的包 含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐； ⑷包含AEVYQKLKALAKKTYGQ(Altl3A;SEQ ID N0:83)的氨基酸序列或源自所述氨基 酸序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐； (e) 包含SLGFNIKATNGGTLD(Alt01A;SEQ ID N0:60)的氨基酸序列或源自所述氨基酸 序列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐； (f) 包含SAKRMKVAFKLDIEK(Alt06 ;SEQ ID N0:72)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序 列的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐； (区）包含0几￥￥4了411^附〇?(5￡0 10勵:111)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列的包 含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐；以及 (h)包含GWGVMVSHRSGET(Altl4;SEQ ID N0:84)的氨基酸序列或源自所述氨基酸序列 的包含T细胞表位的变体序列的多肽、或其所述盐； 其中，所述氨基酸序列的包含T细胞表位的变体序列是具有多达七个氨基酸修饰的所 述氨基酸序列，所述修饰的每一个独立地是缺失、取代或插入，且各多肽多达30个氨基酸 长度。
2. 根据权利要求1所述的药物制剂，其中（a)至（h)的多肽分别由（a)至（h)中列举 的氨基酸序列或变体序列组成。
3. 根据权利要求1或2所述的药物制剂，其中所述氨基酸序列的变体序列是具有一种 或两种氨基酸修饰的所述氨基酸序列，所述修饰或所述修饰的每个独立地是缺失或取代。
4. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，其中所述取代或各取代是保守的取 代。
5. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，其中所述氨基酸序列的变体序列是具 有从N末端缺失多达两个氨基酸和/或从C末端缺失多达两个氨基酸的所述氨基酸序列。
6. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，其中各多肽多达20个氨基酸长度。
7. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，其中至少一种多肽具有如所述前述权 利要求中限定的氨基酸序列或变体序列，所述氨基酸序列或变体序列具有分别相应于所述 氨基酸序列源自的蛋白的天然序列中的所述氨基酸序列的N末端或C末端紧接的一个至六 个氨基酸的从一个至六个氨基酸的N末端和/或C末端延伸。
8. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂包括（a)的多肽或盐。
9. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂包括（b)、（c)、或（d)的 至少一种多肽或盐。
10. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂包括（a)、(b)和（c)的 多肽或盐。
11. 根据权利要求9或10所述的药物制剂，所述药物制剂包括具有氨基酸序列 YEKYRRVVRAGVKV(Alt：M，SEQ ID NO:l〇6)的多肽。
12. 根据权利要求9至11的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂包括具有氨基酸序 列 KKYAGVFVSTGTLGGGK(Altl8，SEQ ID NO:89)的多肽。
13. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂包括（a)、(b)和（d)的 多肽或盐。
14. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂包括（a)、（b)、（c)和 (d)的多肽或盐。
15. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂包括（e)或（f)的至少 一种多肽或盐。
16. 根据权利要求15所述的药物制剂，所述药物制剂包括具有氨基酸序列 SAKR-Nle-KVAFKLDIEK(Alt06A，SEQ ID NO:73)的多肽，或其盐。
17. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂包括（g)或（h)的至少 一种多肽或盐。
18. 根据权利要求17所述的药物制剂，所述药物制剂包括具有氨基酸序列 KDITYVATATLPNY(Alt02;SEQ ID NO:61)、或DITYVATATLPNYSR(Alt02A;SEQ ID NO:62)的多 肽，或其任一的盐。
19. 根据权利要求17或18所述的药物制剂，所述药物制剂包括具有氨基酸序列 GWGV-Nle-VSHRSGET(Altl4A，SEQ ID NO:85)的多肽，或其盐。
20. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂包括（a)、（b)、（c)、 (d)、和（e)的多肽或盐。
21. 根据权利要求20所述的药物制剂，所述药物制剂包括（f)、（g)或（h)的至少一种 多肽或盐。
22. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂被密封在容器中。
23. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂是药学上可接受的溶 液或冻干物。
24. 根据权利要求23所述的药物制剂，其中所述溶液配制用于皮内施用、皮下施用、口 服施用、鼻腔施用、局部施用、舌下施用、含服施用或表皮施用。
25. 根据权利要求23或24所述的药物制剂，其中所述溶液以安瓿、密封小瓶、注射器、 弹药型制剂、柔性袋或玻璃瓶来提供。
26. 根据权利要求23所述的药物制剂，其中所述冻干物以密封小瓶来提供。
27. 根据前述权利要求的任一项所述的药物制剂，所述药物制剂用于在治疗或预防对 链格孢属（Alternaria)和/或枝孢属（Cladosporium)过敏的方法中使用。
28. -种确定T细胞是否识别根据权利要求1至21的任一项所述的药物制剂的多肽的 体外方法，所述方法包括使所述T细胞与所述药物制剂接触并检测所述T细胞是否被所述 多肽刺激。
29. 根据权利要求28所述的方法，进行所述方法以确定个体是否具有对链格孢属和/ 或枝孢属过敏，或处于具有对链格孢属和/或枝孢属过敏的风险中。
30. -种治疗个体对链格孢属和/或枝孢属过敏、或预防个体对链格孢属和/或枝孢 属过敏的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗上或预防上有效量的如权利要求1至21 的任一项限定的药物制剂。
31. 如权利要求1至21中限定的至少三种多肽或盐用于制造用于预防或治疗对链格孢 属和/或枝孢属过敏的药剂的用途。
32. -种制备本发明的药物制剂的方法，所述方法包括将如权利要求1至21的任一项 限定的至少三种多肽或盐与药学上可接受的载体或稀释剂组合。
33. -种多肽、或其药学上可接受的盐，所述多肽、或其药学上可接受的盐多达30个氨 基酸长度并包括： (I) 氨基酸序列： (a) WSWKIGPAIATGNT(Alt28 ；SEQ ID NO:101), (b) KYRRWRAGVKVAQTAR(Alt34A;SEQIDN0:107)，* (c) KYAGVFVSTGTLGGG(SEQ ID N0:112);或 (II) 包含T细胞表位的变体序列，其是具有多达七个氨基酸修饰的所述氨基酸序列 (I)，所述修饰的每个独立地是缺失、取代或插入。
34. 根据权利要求33所述的多肽或盐，其中所述多肽具有选自以下的氨基酸序列： KKYAGVFVSTGTLGGGK(Altl8，SEQIDN0:89)jPYEKYRRWRAGVKV(Alt34，SEQIDN0:106)。
35. 根据权利要求33或34所述的多肽或盐，所述多肽或盐用于在治疗或预防对链格孢 属和/或枝孢属过敏的方法中使用。
36. 根据权利要求33或34的多肽或盐用于制造用于预防或治疗对链格孢属和/或枝 孢属过敏的药剂的用途。
37. -种治疗对个体链格孢属和/或枝孢属过敏、或预防个体对链格孢属和/或枝孢属 过敏的方法，所述方法包括向所述个体施用治疗上或预防上有效量的根据权利要求33或 34的多肽或盐。
【文档编号】C07K14/37GK104507959SQ201380040582
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2013年5月30日 优先权日:2012年6月1日
【发明者】罗德里克·彼得·哈夫纳, 保罗·莱德勒, 帕斯卡·希基, 马克·拉尔什 申请人:切尔卡西亚有限公司