高速逆流色谱法纯化那西肽的方法
【专利摘要】本发明公开了一种提取纯化那西肽的方法。方法是以那西肽菌丝体为原料，采用四氢呋喃为提取溶剂超声提取2次，提取液先过氧化铝短柱，收集过柱液，浓缩掉大部分溶剂，所得提取膏利用高速逆流色谱法进行分离，紫外检测器在线检测，收集目标成分，减压干燥得到高纯度的那西肽。采用本方法纯化那西肽，操作简单，制备周期短，溶剂可回收，总回收率可以达到80%，获得的那西肽含量不低于95%，最高含量可以达到99%，与传统方法相比具有很大优势。
【专利说明】高速逆流色谱法纯化那西肽的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种提取纯化那西肽的方法，具体的说涉及一种高速逆流色谱法纯化 那西肽的方法。
【背景技术】
[0002] 那西肽为动物专用抗生素，其抗菌作用机理是抑制细菌蛋白质合成而起抗菌作 用。细菌对那西肽不易产生耐药性，与其他抗生素也无明显交叉耐药性。那西肽对革兰氏阳 性菌，特别是葡萄球菌有较高的活性。那西肽毒性小，混饲给药在动物消化道中很少吸收， 因而在动物性产品中残留少，主要用于促进畜禽生长。
[0003] 那西肽分子式：
【权利要求】
1. 高速逆流色谱法纯化那西肽的方法，其特征在于：所述方法按如下步骤进行：（1)以 那西肽干菌丝体为原料，采用四氢呋喃为提取溶剂，采用超声波提取方式进行提取若干次； (2)合并步骤（1)提取液，将提取液过氧化铝短柱，收集过柱液；（3)将步骤（2)的过柱液浓 缩获得提取膏，所得提取膏利用高速逆流色谱法进行分离，紫外检测器在线检测，收集目标 成分，减压干燥得到高纯度的那西肽。
2. 根据权利要求1所述的高速逆流色谱法纯化那西肽的方法，其特征在于，所述步 骤（3)中高速逆流色谱法分离操作步骤为：取乙酸乙酯、甲醇、石油醚和水按照体积比 1-5:1-7:1-3:1-7比例充分混合，静置分层，取上相注满高速逆流色谱管，以900-1100rpm 转动主机，泵入下相做流动相，达到动态平衡后，流动相流速设置为l_5ml/min，用流动相溶 解提取膏进样，根据图谱收集成分。
3. 根据权利要求1所述的高速逆流色谱法纯化那西肽的方法，其特征在于：所述步骤 (1) 中提取溶剂体积用量为那西肽干菌丝体质量的3-5倍/次，提取次数为2-3次，过柱液 浓缩掉溶剂时浓缩12-20倍。
4. 根据权利要求1所述的高速逆流色谱法纯化那西肽的方法，其特征在于：所述步骤 (2) 中的氧化铝为中性氧化铝，粒度为200-300目。
5. 根据权利要求1所述的高速逆流色谱法纯化那西肽的方法，其特征在于，所述步骤 (2) 中浓缩采用真空浓缩，温度小于50摄氏度。
6. 根据权利要求1所述的高速逆流色谱法纯化那西肽的方法，其特征在于，所述步骤 (3) 中目标成分压干燥得到那西肽的干燥温度小于50摄氏度，真空度小于lOOOPa。
【文档编号】C07K5/078GK104231043SQ201410396680
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年8月13日 优先权日:2014年8月13日
【发明者】徐天华, 黄振, 吴中华, 陈军, 王丽, 陈贵才 申请人:浙江汇能动物药品有限公司