一种莲子心黄酮提取物的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及莲子屯、黄酬提取物的制备方法。
【背景技术】
[0002] 莲子屯、是莲子（植物莲的成熟种子）的绿色干燥幼叶及胚根，莲子屯、中含有的黄 酬类成分具有较好的抗氧化活性。目前关于莲子屯、中黄酬类化合物的分离提纯主要采用大 孔树脂分离方法，大孔树脂在分离时存在不易吸附或者解析不完全等问题，而且分离的产 物纯度不高，而高速逆流色谱是近年来兴起的天然活性成分分离技术，具有制备量大、前处 理简单、无吸附损失、单次分离时间短且分离效果好等优点。目前未见使用高速逆流色谱从 莲子屯、中分离黄酬类活性成分的文献报导。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是为了提高莲子屯、黄酬类活性成分的提取效率，提供一种采用高速 逆流色谱制备莲子屯、黄酬提取物的方法。
[0004] 本发明所提供的制备方法包括W下步骤： 阳0化]1)将莲子屯、粉用溫度为70~80°C、重量为莲子屯、粉10~30倍的65~85%乙醇 水溶液浸提1~化，提取液真空浓缩至相对密度为1. 1~1. 2,然后用非极性有机溶剂萃取 3~5次，将水相浓缩后冻干，得莲子屯、粗提取物；
[0006] 2)将乙酸乙醋、正下醇、水按（1~2) : (1~5) : (3~8)的体积比混合后静置 过夜，分离上相和下相，真空脱气； 阳007] 3)取莲子屯、粗提取物，用下相将其溶解成40~80mg/mL的溶液，使用TBE-300C高 速逆流色谱仪进行分离，分离时溶剂体系溫度为25~30°C，W上相为固定相，W下相为流 动相，具体操作步骤为：先将固定相W 30~50mL/min的流速累入高速逆流色谱仪，待检测 器出口端流出固定相后停累；然后再设置主机正转转速为600~lOOOrpm/min，将流动相W 5~15mL/min的流速累入高速逆流色谱仪，并设置紫外检测器波长为254nm和350nm ;待出 口端流出流动相且紫外信号稳定不变，体系达到平衡时再通过进样阀注入10~20mL莲子 屯、粗提取物溶液，按照检测器和工作站显示的色谱峰收集流分，冻干后得到莲子屯、黄酬提 取物。
[0008] 优选地，步骤1)中，取莲子屯、粉用溫度为75°C、重量为莲子屯、粉20倍的75 %乙醇 水溶液浸提比，提取液真空浓缩至相对密度为1. 15,然后用非极性有机溶剂萃取4次，将水 相浓缩后冻干，得莲子屯、粗提取物。
[0009] 进一步优选地，所述非极性有机溶剂为石油酸。
[0010] 优选地，步骤2)中，所述乙酸乙醋、正下醇、水的体积比为1 : 4 : 6。
[0011] 本发明中所设及的乙醇浓度，均是指重量浓度，如75%乙醇水溶液，指的是每 100g乙醇水溶液中，含有乙醇75邑。
[0012] 本发明的有益效果是：与大孔树脂吸附法相比，高速逆流色谱分离无吸附损失，除 了将粗提取物用溶剂体系溶解外，基本无需其他处理，因此工艺更加简单，提取效率更高； 本发明可分离出=个色谱峰，同时获得=个黄酬类组分，其中峰二和峰=的黄酬含量最高 可达到640. 06mg/g和891. 51mg/g，产率最高可达到6. 16g/kg和16. 5g/kg，黄酬回收率均 明显高于现有的制备方法。
【附图说明】
[0013] 图1是莲子屯、粗提物经分离纯化后的高速逆流色谱图。
【具体实施方式】
[0014]W下结合具体实施例对本发明进行详细地说明。 阳〇1引实施例1
[0016] 一种莲子屯、黄酬提取物的制备方法，其步骤如下：
[0017] 1)取莲子屯、粉化g，用20Kg溫度为75°C的75%乙醇水溶液浸提比，提取液真空浓 缩至相对密度为1. 15,然后用石油酸萃取4次，弃去有机相，将水相浓缩后冻干，得莲子屯、 粗提取物；
[001引 2)将乙酸乙醋、正下醇、水按1 : 4 : 6的体积比混合后静置过夜，分离上相和下 相，真空脱气30分钟；
[0019] 3)取莲子屯、粗提取物，用下相将其溶解成50mg/mL的溶液，使用TBE-300C高速逆 流色谱仪进行分离，分离时溶剂体系溫度为25°C，W上相为固定相，W下相为流动相，具体 操作步骤为：先将固定相W40mL/min的流速累入高速逆流色谱仪，待检测器出口端流出固 定相后停累；然后再设置主机正转转速为80化pm/min，将流动相WlOmL/min的流速累入高 速逆流色谱仪，并设置紫外检测器波长为化4nm和350nm，进行紫外检测，待出口端流出流 动相且紫外信号稳定不变，体系达到平衡时再通过进样阀注入20mL莲子屯、粗提取物溶液， 按照检测器和工作站显示的色谱峰收集流分，冻干后得到莲子屯、黄酬提取物。
[0020] 实施例2
[0021] 一种莲子屯、黄酬提取物的制备方法，其步骤如下： 阳02引 1)取莲子屯、粉化g，用30Kg溫度为70°C的85%乙醇水溶液浸提3h，提取液真空浓 缩至相对密度为1. 1，然后用石油酸萃取3次，将水相浓缩后冻干，得莲子屯、粗提取物；
[0023] 2)将乙酸乙醋、正下醇、水按2 : 5 : 8的体积比混合后静置过夜，分离上相和下 相，真空脱气；
[0024] 3)取莲子屯、粗提取物，用下相将其溶解成40mg/mL的溶液，使用TBE-300C高速逆 流色谱仪进行分离，分离时溶剂体系溫度为30°C，W上相为固定相，W下相为流动相，具体 操作步骤为：先将固定相W30mL/min的流速累入高速逆流色谱仪，待检测器出口端流出固 定相后停累；然后再设置主机正转转速为60化pm/min，将流动相W5mL/min的流速累入高 速逆流色谱仪，并设置紫外检测器波长为254nm和350nm;待出口端流出流动相且紫外信号 稳定不变，体系达到平衡时再通过进样阀注入ISmL莲子屯、粗提取物溶液，按照检测器和工 作站显示的色谱峰收集流分，冻干后得到莲子屯、黄酬提取物。 阳〇2引 实施例3
[00%] -种莲子屯、黄酬提取物的制备方法，其步骤如下：
[0027]I)取莲子屯、粉化g，用IOKg溫度为80°C的65%乙醇水溶液浸提比，提取液真空浓 缩至相对密度为1.