一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，属于天然药材的有效成分提取领域，以枸杞叶为原料，通过提取、浓缩、分离、纯化、干燥所得的产品，含有芦丁、槲皮素、山奈酚、异鼠李素。该制剂具有优良的抗自由基、抗氧化、抗衰老和降血脂等作用，可广泛地应用于功能性食品和医药保健品。制备过程中用乙醇作为提取溶剂和洗脱剂，大孔吸附树脂为分离材料。本发明使用溶剂安全无毒，价格低廉可回收再利用。生产过程安全、简便，对环境无污染，易于控制，适于大规模的工业化生产，同时还具有黄酮提取率高、纯度高等特点。
【专利说明】
一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，具体涉及利用高效回流浓缩提取-柱层析分离枸杞叶总黄酮的方法，属于天然药材的有效成分提取领域。
【背景技术】
[0002]从植物中提取化学成分作为药用，在祖国传统医药学中已有5000年的历史。传统提取方法按照提取过程对能量需求方式的不同可以分为两大类。一类是加热提取法，主要有煎煮提取法、回流提取法和索氏提取法等不同方式;另一类是浸泡提取法，主要有浸渍提取法和渗漉提取法两种。传统提取法存在着提取时间长、工艺繁复、效率低、工业污染大和对目标化合物提取无选择性等缺陷。
[0003]高效回流浓缩技术是药物动态提取，药物与溶剂间含溶质高梯度，增加了浸出推动力，增加了得膏率。可比常规法多提取5?20%以上。提取、浓缩一步完成，提取时间短，提取物药用成份质量提高。
[0001]枸紀叶又名“天精草”，枸t己叶(Lycium Chinese)俗称天精草，《本草纲目》中称枸杞叶“有除烦益志补五劳七伤，壮心气，除热毒，散疮肿，除风明目”之功效。枸杞总黄酮化合物(TFL Total Flavonoids of Lycium barbarum L.)是枸紀叶主要有效成分之一，含量达577mg/100g。黄酮化合物具有止咳、平喘、祛痰，并能扩张冠状动脉及降低血胆固醇，增强心脏收缩、减少心脏搏动数及清除自由基等作用。本专利中提取物黄酮化合物的含量及成分检测是采用高效液相色谱法(HPLC)检测。
[0004]目前，从枸杞叶中提取枸杞叶总黄酮化合物的方法基本有三大类，水提取法、碱性水或碱性稀醇提取法、有机溶剂提取法、微波法、超声波法。水提取法工艺成本低，安全，但是提取效率低，含杂质多，给后续分离带来许多困难。碱性水或碱性稀醇提取法采用的碱性溶液是稀氢氧化钠和石灰水(氢氧化钙水溶液)，氢氧化钠水溶液的浸出能力高，但杂质较多不利于纯化，石灰水中的钙会与有些黄酮类化合物结合成不溶性物质，降低浸出率。微波法客服了上述方法中的一些缺陷，但提取过程中，微波的热效应会导致提取物中某些热命物质降解，严重影响提取物的活性，也限制了该方法的广泛应用。超声波法浸提时间短，效率高，但难以实现大规模工业化生产。本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺点，采用高效回流浓缩提取设备，利用高效回流浓缩-柱层析提取纯化技术，提供从枸杞叶中快速、高效地获得枸杞叶总黄酮物质的新方法。即:提供一种可以取代上述工艺过程的简单易行、高效、快速、成本低，废液排放量少的新方法。
【发明内容】
[0005]本发明是采用正交试验设计方案，通过筛选提取过程中的溶剂类型、料液比、提取时间、提取温度等技术参数，获得快速、准确、高效、经济的从枸杞叶中提取黄酮类物质的方法。
[0006]为达到上述目的，本发明的技术方案为:
[0007]一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其特征在于，按下列步骤进行:
1.将枸杞叶粉碎至2-4mm粒径大小，70%乙醇溶剂高效回流提取浓缩，浸膏经石油醚萃取去除叶绿素等脂溶性色素，将萃取后的水液过大孔吸附树脂柱，该大孔树脂型号为DlOl，以纯水洗涤去除水溶性糖类物质，以30 % -60 %乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液回收乙醇，浓缩，减压干燥，得枸杞叶总黄酮提取物。
2.进一步，所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其提取材料条件特征为10月采摘枸紀叶片，经60 0C烘干，粉碎至2-4mm粒径。
3.进一步，所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其提取方法条件特征为:采用高效回流浓缩提取设备，提取温度85 °C，提取溶剂70 %乙醇，料液比1:12，提取时间1.5h。
4.进一步，所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，上述样品用大孔吸附树脂柱层析，先用水洗脱，3-4倍柱体积除去可溶性糖及水溶性杂质，再用30?60 %乙醇洗脱4?6个柱体积，收集洗脱液，60°C下浓缩、干燥即得产品。
5.进一步，所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其提取效率特征为枸杞叶总黄酮提取率可达82.5%，所得产品经HPLC方法检测其中有效成分为芦丁、山奈酚、异鼠李素、槲皮素，含量分别为93.05%、3.31%、2.99%、0.65%。
[0008]本发明采用高效回流浓缩提取-柱层析纯化技术从枸杞叶中提取黄酮类物质的方法与已有提取技术相比，具有以下优点和显著效果:
①缩短提取浓缩时间:高效回流浓缩提取可实现提取-浓缩同步完成，提取时间较传统方法可缩短6-8倍以上，浸膏得率较常规法提高5?20%，提高了设备处理量和效率。
②操作简便，条件易控，节约溶媒，节省时间，降低能耗，设备维护保养方便，易于大规模工业化生产。
【具体实施方式】
[0009]以下为本发明较佳的实施方式，并不因此而限定了本发明的保护范围。
一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，按下列步骤进行:
1.将枸杞叶粉碎至2-4mm粒径大小，70%乙醇溶剂高效回流提取浓缩，浸膏经石油醚萃取去除叶绿素等脂溶性色素，将萃取后的水液过大孔吸附树脂柱，该大孔树脂型号为DlOl，以纯水洗涤去除水溶性糖类物质，以30 % -60 %乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液回收乙醇，浓缩，减压干燥，得枸杞叶总黄酮提取物。
2.进一步，所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其提取材料条件特征为10月采摘枸紀叶片，经60 0C烘干，粉碎至2-4mm粒径。
3.进一步，所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其提取方法条件特征为:采用高效回流浓缩提取设备，提取温度85 °C，提取溶剂70 %乙醇，料液比1:12，提取时间1.5h。
4.进一步，所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，上述样品用大孔吸附树脂柱层析，先用水洗脱，3-4倍柱体积除去可溶性糖及水溶性杂质，再用30?60 %乙醇洗脱4?6个柱体积，收集洗脱液，60°C下浓缩、干燥即得产品。
5.进一步，所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其提取效率特征为枸杞叶总黄酮提取率可达82.5%，所得产品经HPLC方法检测其中有效成分为芦丁、山奈酚、异鼠李素、槲皮素，含量分别为93.05%、3.31%、2.99%、0.65%。
[0010]实施例1:
[0011]以10月采摘的枸杞叶片，经60°C烘干，粉碎，粒径2-4mm为材料。投入萃取斧中加入70 %乙醇，料液比(kg: L) 1:1O，混合;提取温度:85 °C，总提取时间1.5h;依上述方法，枸杞叶黄酮提取率可达82.5%。
[0012]本发明采用高效回流浓缩提取-柱层析纯化技术从枸杞叶中提取黄酮类物质的方法与已有提取技术相比，具有以下优点和显著效果:高效回流浓缩提取可实现提取-浓缩同步完成，提取时间较传统方法可缩短6-8倍以上，浸膏得率较常规法提高5?20%，提高了设备处理量和效率;操作简便，条件易控，节约溶媒，节省时间，降低能耗，设备维护保养方便，易于大规模工业化生产。
【主权项】
1.一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其特征是所述方法包括以下步骤:将枸杞叶粉碎至2-4_粒径大小，70%乙醇溶剂高效回流提取浓缩，浸膏经石油醚萃取去除叶绿素等脂溶性色素，将萃取后的水液过大孔吸附树脂柱，该大孔树脂型号为D101，以纯水洗涤去除水溶性糖类物质，以30 % -60 %乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液回收乙醇，浓缩，减压干燥，得枸杞叶总黄酮提取物。2.根据权利要求1所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其特征是所述提前方法的提取材料条件特征为10月采摘枸杞叶片，经60°C烘干，粉碎至2-4_粒径。3.根据权利要求1所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其特征是所述提取方法的提取条件特征为:采用高效回流浓缩提取设备，提取温度85°C，提取溶剂70 %乙醇，料液比1:12，提取时间1.5h。4.根据权利要求1所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其特征是所述萃取后的水液样品用大孔吸附树脂柱层析，先用水洗脱，3-4倍柱体积除去可溶性糖及水溶性杂质，再用30?60%乙醇洗脱4?6个柱体积，收集洗脱液，60°C下浓缩、干燥即得产品。5.根据权利要求1所述的一种从枸杞叶中提取总黄酮的方法，其特征是其提取效率特征为枸杞叶总黄酮提取率可达82.5%，所得产品经HPLC方法检测其中有效成分为芦丁、山奈酚、异鼠李素、槲皮素，含量分别为93.05%、3.31%、2.99%、0.65%。
【文档编号】A61K36/815GK106038821SQ201610537828
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月30日
【发明人】曹有龙, 刘兰英, 袁海静
【申请人】宁夏农林科学院