一种从柿子中提取小分子单宁含量多的柿单宁的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从柿子中提取小分子单宁含量多的柿单宁的方法，包括下述步骤:原料处理、超高压处理、超声波处理、酶解、微滤、超滤、干燥即得成品。本发明通过采用两种提取方式的结合，一方面缩短了提取时间，另一方面提高了产品得率，保证了分子量10000-15000的缩合单宁的含量，同时也保证了分子量为1700的低分子量单宁的含量。
【专利说明】_种从柿子中提取小分子单宁含量多的柿单宁的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种柿单宁的提取方法，具体涉及一种从柿子中提取小分子单宁含量 多的柿单宁的方法。
【背景技术】
[0002] 柿子是柿树科浆果类温带落叶果树，原产我国，在我国已有一千多年的种植历史。 目前我国种植面积最大，而且柿果产量最多。柿子柔嫩多汁、甘甜爽口、营养丰富。有甜柿 和涩柿两种，涩柿不可直接食用，需要经过脱涩处理。甜柿可以鲜食，也可以做柿饼、柿醋、 柿酒等，柿叶可以做柿茶。柿子含有大量的单宁。单宁又叫鞣酸，是一种多酚的聚合物，是 一种由儿茶酚等聚合而成多酚聚合物，含有许多邻位的酚羟基，因而有许多功能。Seguin于 1796年定义了 一个专门术语Tannin (单宁）来表示植物水浸提物中能使生皮转化为革的化 学成分。后来通过研宄逐渐认识到，植物浸提物中能产生鞣制作用的是一系列多酚类化合 物，其有效成分的分子量在500-3000之间。单宁又称鞣酸，淡黄色至浅棕色无晶粉末，属于 多元苯酷的复杂化合物。将植物单宁又改称为植物多酷（plant polyphonies)，即存在于柿 果使其呈涩味的酚类物质称为柿单宁（kaki tannin)。在柿子单宁组分中，主要以缩合单宁 (分子量10000-15000)为主，占总酷的70-75%，而游离的小分子单宁（分子量1700)组分 较少。柿单宁具有防晒保湿、抗皱美容、防腐杀菌、预防心血管疾病、吸附金属离子以及和蛋 白质相互作用等诸多功能。
[0003] 目前，柿单宁主要来源于天然提取或化学合成。提取小分子单宁含量多的柿单宁 的传统常用方法主要有酸提、碱提和水提等，其中以热水浸提居多，酸、碱提取都会破坏柿 单宁的结构，同时也会对硫酸根的含量产生影响；而热水浸提的提取率一般较低，难以满足 生产需求。一般经过水或醇提取后，提取液减压浓缩后要经过充分的吸附、淋洗、洗脱等系 列流程，特别是需用蒸馏水反复淋洗至洗出液用苯酚-硫酸法检测不出糖为止，操作过程 繁琐，否则在后期干燥过程中由于柿单宁浓缩液含糖份比例过高，干燥机"粘壁"严重，无法 达到物料干燥粉状固态化。中国专利CN102550993B，公开了一种小分子单宁含量多的涩柿 子粉的制备方法，它是将七八成熟的柿子进行清洗、破碎、榨汁，复合酶解、护色、过滤、灭酶 杀菌、真空脱气，得到柿子原汁，再将柿子原汁经过微滤、超滤、冷冻干燥，即得到小分子单 宁含量多的涩柿子粉，但该方法对柿子原料的前处理比较简单，影响最终的产品含量和收 率。
【发明内容】
[0004] 为了克服现有技术的不足，本发明提供了一种从柿子中提取小分子单宁含量多的 柿单宁的方法。
[0005] 本发明是通过如下技术方案实现的：
[0006] -种从柿子中提取小分子单宁含量多的柿单宁的方法，包括下述步骤：
[0007] 1)原料处理：将七八分成熟的柿子清洗、破碎；
[0008] 2)超高压处理：破碎后的柿子中加入5-10倍重量份的纯净水，压力350MPa，作用 温度40-50°C，超高压处理2-5min ;
[0009] 3)超声波处理：将步骤2)得到溶液，超声波处理5-10min，作用温度40-50°C，功 率为300W ;
[0010] 4)酶解：步骤3)得到的溶液，置于密封发酵罐内，加入活化好的果胶酶、苹果淀粉 酶、果胶裂解酶的复合酶进行酶解，酶解时间为20-30分钟，酶解温度为43-45?，果胶酶、 苹果淀粉酶、果胶裂解酶的重量比是5 :3:2，复合酶加入量是4〇-8〇11^/1^;
[0011] 5)微滤、超滤：将步骤4)得到的酶解液高温瞬时杀菌灭酶，温度121-125°C，过滤， 滤液再用〇. 22 μ m的微滤膜，进行微滤，将过微滤膜的滤液先用截留20000分子量的超滤膜 进行第一次超滤，将过第一次超滤膜后的滤液再用截留1000分子量的超滤膜进行第二次 超滤；
[0012] 6)将步骤5)得到的滤液浓缩，冷冻干燥干燥得到小分子单宁含量多的柿单宁。
[0013] 与现有技术相比，本发明具有如下优点：
[0014] 1、本发明采用超高压处理柿子原料，在预定压力保持一段时间，使原料细胞内外 压力达到平衡（有效成分达到溶解平衡）后迅速卸压，使细胞内外渗透压力差突然增大， 细胞内的有效成分穿过细胞膜（细胞膜的结构在超高压下发生变化），转移到细胞外的提 取液中，达到提取目标成分的目的。超高压提取避免了因长时间高温而引起的有效成分的 变化、损失以及生理活性的降低，同时因为超高压是在密闭的环境下进行的，没有溶剂的挥 发，不会对环境造成污染。是一种安全有效的提取活性物质的方法。
[0015] 2、本发明在采用超高压处理原料后，接着再采用超声波提取，超声波提取利用的 是强烈的机械剪切作用，促进柿单宁的溶出，本发明通过采用两种提取方式的结合，一方面 缩短了提取时间，另一方面提高了产品得率，柿单宁含量95%以上，提取率75%以上。
[0016] 3、本发明对柿子提取液进行复合酶处理，可以充分分解柿子中的糖分，使大分子 物质断裂成小分子成分，采用截留20000分子量的超滤膜进行第一次超滤，将过第一次超 滤膜后的滤液再用截留1000分子量的超滤膜进行第二次超滤，收集第二次超滤的截留液， 保证了分子量10000-15000的缩合单宁的含量，同时也保证了分子量为1700的低分子量单 宁的含量。
[0017] 4、本发明避免了柱层析、吸附、淋洗、洗脱等系列流程，糖类物质通过复合酶分解， 提取液减压浓缩后直接干燥，操作简单易行。
【具体实施方式】
[0018] 下面以实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
[0019] 实施例1 :
[0020] 一种从柿子中提取小分子单宁含量多的柿单宁的方法，包括下述步骤：
[0021] 1)原料处理：将IOkg七八分成熟的柿子清洗、破碎；
[0022] 2)超高压处理：破碎后的柿子中加入50kg的纯净水，压力350MPa，作用温度 50°C，超高压处理2min ;
[0023] 3)超声波处理：将步骤2)得到溶液，超声波处理8min，作用温度40°C，功率为 300W ；
[0024] 4)酶解：步骤3)得到的溶液，置于密封发酵罐内，加入活化好的果胶酶、苹果淀粉 酶、果胶裂解酶的复合酶进行酶解，酶解时间为20分钟，酶解温度为43-45?，果胶酶、苹果 淀粉酶、果胶裂解酶的重量比是5:3:2，复合酶加入量是8〇11^/1^ ;
[0025] 5)微滤、超滤：将步骤4)得到的酶解液高温瞬时杀菌灭酶，温度121-125?，过滤， 滤液再用〇. 22 μ m的微滤膜，进行微滤，将过微滤膜的滤液先用截留20000分子量的超滤膜 进行第一次超滤，将过第一次超滤膜后的滤液再用截留1000分子量的超滤膜进行第二次 超滤；
[0026] 6)将步骤5)得到的滤液浓缩，冷冻干燥干燥得到小分子单宁含量多的柿单宁。
[0027] 实施例2 :
[0028] -种从柿子中提取小分子单宁含量多的柿单宁的方法，包括下述步骤：
[0029] 1)原料处理：将IOkg七八分成熟的柿子清洗、破碎；
[0030] 2)超高压处理：破碎后的柿子中加入IOOkg的纯净水，压力350MPa，作用温度 40°C，超高压处理5min ;
[0031] 3)超声波处理：将步骤2)得到溶液，超声波处理5min，作用温度45°C，功率为 300W ；
[0032] 4)酶解：步骤3)得到的溶液，置于密封发酵罐内，加入活化好的果胶酶、苹果淀粉 酶、果胶裂解酶的复合酶进行酶解，酶解时间为30分钟，酶解温度为43-45?，果胶酶、苹果 淀粉酶、果胶裂解酶的重量比是5:3:2，复合酶加入量是4〇11^/1^ ;
[0033] 5)微滤、超滤：将步骤4)得到的酶解液高温瞬时杀菌灭酶，温度121-125°C，过滤， 滤液再用〇. 22 μ m的微滤膜，进行微滤，将过微滤膜的滤液先用截留20000分子量的超滤膜 进行第一次超滤，将过第一次超滤膜后的滤液再用截留1000分子量的超滤膜进行第二次 超滤；
[0034] 6)将步骤5)得到的滤液浓缩，冷冻干燥干燥得到小分子单宁含量多的柿单宁。
[0035] 实施例3 :
[0036] -种从柿子中提取小分子单宁含量多的柿单宁的方法，包括下述步骤：
[0037] 1)原料处理：将IOkg七八分成熟的柿子清洗、破碎；
[0038] 2)超高压处理：破碎后的柿子中加入80kg的纯净水，压力350MPa，作用温度 45°C，超高压处理3min ;
[0039] 3)超声波处理：将步骤2)得到溶液，超声波处理lOmin，作用温度50°C，功率为 300W ；
[0040] 4)酶解：步骤3)得到的溶液，置于密封发酵罐内，加入活化好的果胶酶、苹果淀粉 酶、果胶裂解酶的复合酶进行酶解，酶解时间为25分钟，酶解温度为43-45?，果胶酶、苹果 淀粉酶、果胶裂解酶的重量比是5:3:2，复合酶加入量是6〇11^/1^ ;
[0041] 5)微滤、超滤：将步骤4)得到的酶解液高温瞬时杀菌灭酶，温度121-125°C，过滤， 滤液再用〇. 22 μ m的微滤膜，进行微滤，将过微滤膜的滤液先用截留20000分子量的超滤膜 进行第一次超滤，将过第一次超滤膜后的滤液再用截留1000分子量的超滤膜进行第二次 超滤；
[0042] 6)将步骤5)得到的滤液浓缩，冷冻干燥干燥得到小分子单宁含量多的柿单宁。
[0043] 结果：
[0044]
【权利要求】
1. 一种从柿子中提取小分子单宁含量多的柿单宁的方法，其特征在于，包括下述步 骤： 1) 原料处理：将七八分成熟的柿子清洗、破碎； 2) 超高压处理：破碎后的柿子中加入5-10倍重量份的纯净水，压力350MPa，作用温度 40-50 °C，超高压处理2-5min ; 3) 超声波处理：将步骤2)得到溶液，超声波处理5-10min，作用温度40-50°C，功率为 300W ； 4) 酶解：步骤3)得到的溶液，置于密封发酵罐内，加入活化好的果胶酶、苹果淀粉酶、 果胶裂解酶的复合酶进行酶解，酶解时间为20-30分钟，酶解温度为43-45°C，果胶酶、苹果 淀粉酶、果胶裂解酶的重量比是5:3:2，复合酶加入量是4〇-8〇11^/1^; 5) 微滤、超滤：将步骤4)得到的酶解液高温瞬时杀菌灭酶，温度121-125°C，过滤，滤液 再用0. 22 y m的微滤膜，进行微滤，将过微滤膜的滤液先用截留20000分子量的超滤膜进行 第一次超滤，将过第一次超滤膜后的滤液再用截留1000分子量的超滤膜进行第二次超滤； 6) 将步骤5)得到的滤液浓缩，冷冻干燥干燥得到小分子单宁含量多的柿单宁。
【文档编号】C07H1/08GK104478950SQ201410795380
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年12月19日 优先权日:2014年12月19日
【发明者】刘小峰, 何明茜, 罗知颂, 李京生, 刘二伟 申请人:桂林得坤生物科技股份有限公司