专利名称：水溶性肝素型壳聚糖磺胺抗凝血剂的制作方法
水溶性肝素型壳聚糖磺胺(Sulfamic Chitosan，简写为SCS)抗凝血剂，是用化学方法获得的一种药物，用于输血、血管外科和治疗血栓形成、静脉炎和栓塞。因此，本发明属于细精化工或者药物化学技术领域，也属于生物医学工程技术领域。
经化学改性后而能直接溶解于水的壳糖胺(chitonsan，简写为CS，化学式C6H11O4N)纯净溶液，分子结构中具有生物活性的-NH2基基团充分暴露出来。CS纯度越高者其生理活性也越佳。水溶性CS可以去除已沉积于鼠骨中的放射性元素，磺化的CS则有阻抑癌细胞转移的功能(shojiroKyotani et al.，Chen.Pharm.BUll.，1992，4(10)267；2814)。通常，采用氯磺酸作为磺化剂，在2位胺基质子化的苛刻条件下，得到6位磺化的水溶性CS产物(赵文伟等，化学通报，1994，(4)31-34)，但迄今未见有在CS的2位胺基上接枝引入磺酸基(-SO3H)的报导。而只有在2位与3位引入磺酸基后，这种磺化产物才有与肝素(Heparin，化学式C6H12O10NS2，一种从动物肝、肺中提取的抗凝血剂)相似的结构，也才有防止凝血素转变成凝血酶，防止血纤维蛋白原转变成血纤维朊，即有阻止凝血和抗血栓形成的功能。
本发明的目的是选用一种温和条件下的磺化剂，在CS的2、3、6位上直接磺化根，从而变成水溶性肝素型壳聚糖磺胺，而且在反应过程中，使未予磺化的那部分CS分子链降解，加大了部分亲水性，使仅能溶于稀酸液中的CS能分散于水——乙醇液中，胺基基团的生物活性更强。
为实现本发明的目的所采用的技术措施如下本发明将脱酰度80～90％，灰粉1.0～1.5％的CS，按如下方法进一步予以精制提纯将20～40g/L CS溶于0.17～0.33mol/L的醋酸溶液中，边搅拌边慢慢滴入相当于醋酸溶液1～2倍体积的0.125～0.25mol/LNaOH溶液，使溶液pH≈7.2～7.8为止，静置2～4h后，尽量分去含醋酸钠的水溶液，得到脱酰度＞90％，灰份＜1.0％的洁白絮状CS精制物。
将精制纯化的CS，同200～400g/L氨磺酸(SA)在115±5℃温度下磺化反应4～6h，静置后分层溶液部份用CaCO3纯化后得水溶性SCS；沉淀部分用2.77～4.36mol/L NaOH溶液在65±5℃温度下碱化反应0.5～0.6h，调成中性后分层。第二次分层后得到的溶液部分经浓缩干燥得白色粉状SCS，收率15～25％；沉淀部分经低温干燥即得纯白疏松的CS。用此方法获得改形CS，其生物活性比目前采用的真空干燥或真空冷冻干燥制得的CS粉高得多，而其成本则仅为后者的1/2～1/3。
SCS的分子结构表征如下
n＝100-1000下面结合实例对本发明作进一步说明。实例一、按如下配比一步制取SCSCS 脲发烟硫酸 PTC20～40g/L 5～15g/L 10～30g/L 1.0～1.5g/L其余乙醇。按以上配比，先将溶于少量浓硫酸中的尿素溶液与CS乙醇液混合均匀，加入相转移催化剂(PTC)十二烷基二甲苄基溴化物，在室温隔离条件下加入发烟硫酸，然后在60～80℃温度下搅拌反应1～2h，接着升温至115±5℃反应后，分离、浓缩、干燥分别得到SCS与改形CS。
实例二，低分子量全水溶性SCS的制取将未经精制提纯即浓碱脱酰反应后所直接得到的CS，用46～60g/LH2O2溶液，在60～80℃温度下，不锈钢搅拌杆快速搅拌反应1.5～3.0h，滤去不溶物，即去除灰粉与部分未脱酰的甲壳质(chitin)，所得含量50～100g/L CS的清亮柠檬色液中，加入20～35g/L NH2SO3H溶液，在60～80℃温度下反应3～5h，得粽褐色的SCS粘稠液。
权利要求
1.一种以壳糖胺为原料，在磺化剂和相转移催化剂作用下，经磺化反应得到的水溶性肝素型壳聚糖磺胺(SCS)抗凝血剂，具有如下的结构表征
n＝100-1000
2.根据权利要求1所述的SCS抗凝血剂，其特征在于按如下配比一步制取SCSCS 脲发烟硫酸PTC20～40g/L 5～15g/L 10～30g/L 1.0～1.5g/L
3.根据权利要求1所述的SCS抗凝血剂，其特征在于用经过氧化氢降解的壳聚糖溶液与氨基磺酸反应而制得低分子量全水溶性的SCS棕褐色液。
4.根据权利要求1所述的SCS抗凝血剂，其特征在于在精制提纯的中和反应过程中，采用稀的壳糖胺乙酸盐去滴定稀的碱液，从而得到洁白纯化的CS，且经磺化反应后而成改形CS，在低温下常规干燥便能得到白色疏松CS粉。
全文摘要
本发明公开了水溶性肝素型壳聚糖磺胺(SCS)抗凝血剂的配方。按此配方,用精制提纯的壳糖胺或在直接脱酰后的壳糖胺为原料,以脲与发烟硫酸为磺化剂,选用一种季铵盐为相转移催化剂,经磺化反应而生成SCS,同时得到生物活性高的改形壳糖胺,其优点是生产工艺简便,成本较低,无废水、废气、废物排出,不产生环境污染。
文档编号C07B37/10GK1229071SQ9710935
公开日1999年9月22日 申请日期1997年12月30日 优先权日1997年12月30日
发明者陶映初, 陶华, 张曦, 罗光胜 申请人:武汉可太安生物工程有限公司