专利名称：一种提取褐藻多糖硫酸酯的方法
技术领域：
本发明涉及海洋化工工程技术领域，具体地说是一种从海带浸泡液中提取褐藻多糖硫酸酯的方法。
背景技术：
褐藻多糖硫酸酯或成硫酸酯化多糖，是存在于所有褐藻中的细胞间多糖，又被称为褐藻糖胶、岩藻聚糖。1913年由Kylin首次从褐藻掌状海带中提取出来。褐藻多糖硫酸酯组成很复杂，在不同的褐藻种变化很大，近年的研究表明，它具有抗凝血、活血化淤、调节血脂、抗肿瘤、抗病毒、增强细胞免疫和体液免疫功能、抗衰老、对基体细胞的保护等多种生物活性。
二十世纪五十年代末，由于人工养殖海带事业的发展，海带产量猛增，除供食用外，为工业生产褐藻胶、碘和甘露醇提供了优质原料。在海藻工业中，主要是从海带藻渣中提取褐藻胶，从海带浸泡液中提取碘、甘露醇。然而，海带浸泡液成分复杂，除了含有浓度高的无机电解质外，尚有大量褐藻糖胶、褐藻胶、海带淀粉、氨基酸、色素、单宁等有机物及胶体，在海带综合利用提取甘露醇的工艺过程中，这类杂质称为“糖胶”。“糖胶”的大量存在不仅给提碘和提纯甘露醇带来很大麻烦和困难，严重影响产品得率和生产成本，而且“糖胶”本身再生产中是作为废物处理掉的，这又造成了资源的浪费。
发明内容
本发明提供一种操作简便、节约资源的提取褐藻多糖硫酸酯的方法。
为实现本发明的目的，本发明采用的技术方案方法每150ml的海带浸泡液中加入1-10ml的絮凝剂，搅拌2-10分钟使其絮凝10分钟-8小时，而后离心2-6分钟，分离得到沉淀在pH为2-6的酸性条件下溶胀1-24小时，并搅拌1-4小时使沉淀溶解，过滤，将滤液调至中性，减压浓缩，而后在浓缩液中加入乙醇使浓度到60％-80％，过滤得沉淀并洗涤，冷冻干燥，即得褐藻多糖硫酸酯；所述的絮凝剂为壳聚糖、壳聚糖羧甲基衍生物或壳聚糖季铵盐衍生物，其分子量为2000-76万。
所述的壳聚糖、羧甲基壳聚糖衍生物或壳聚糖季铵盐衍生物为其浓度在1-3％酸溶液或水溶液，酸溶液为1％-3％的乙酸或盐酸水溶液。
所述离心分离的时间为2-6分钟，转速为500-3000转/分钟。所述pH为2-6的条件为用盐酸调pH达到2-6。所述减压浓缩，浓缩液为原溶液的1/10-1/20。所述沉淀洗涤时洗涤液为无水乙醚或无水丙酮。
本发明所具有的优点为
1.采用本发明的方法所得的褐藻多糖硫酸酯可以达到所得沉淀量的5-16％。
2.本发明所采用的方法操作简单，减少了对酸、碱的使用量，节约了资源。
3.本发明从“糖胶”中提取褐藻多糖硫酸酯，对于资源的综合利用具有重要意义。
图1为本发明提取褐藻多糖硫酸酯的红外谱图。
具体实施例方式
实施例1将1ml酸溶液浓度为1％、分子量为2000的壳聚糖乙酸溶液加入到150ml海带浸泡液中，搅拌2分钟使其絮凝4小时，而后以500转/分钟的速度离心2分钟，分离得到沉淀在pH为2的酸性(用盐酸调pH)条件下溶胀4小时，并搅拌2小时溶解，过滤，将滤液调至中性(采用10％NaOH溶液调至中性)，减压浓缩，使浓缩液达到原溶液的1/10，而后在浓缩液中加入乙醇浓度达到65％，过滤得沉淀，沉淀用无水乙醚洗涤2次，用东京理化公司的FD-5N冷冻干燥机进行冷冻干燥，即得褐藻多糖硫酸酯(参见图1)，所得褐藻多糖硫酸酯占沉淀量的10.51％。
实施例2将2ml酸溶液为2％、分子量为76万的壳聚糖乙酸溶液加入到150ml海带浸泡液中，搅拌4分钟使其絮凝0.5小时，而后以3000转/分钟的速度离心3分钟，分离得到沉淀在pH为4的酸性条件下溶胀1小时，搅拌2小时溶解，过滤，将滤液调至中性，减压浓缩，而后在浓缩液中加入乙醇使浓度达到70％，过滤得沉淀，沉淀用无水乙醚洗涤2次，冷冻干燥，即得褐藻多糖硫酸酯，所得褐藻多糖硫酸酯占沉淀量的5％。
实施例3将8ml酸溶液为3％的分子量为8万的壳聚糖盐酸溶液加入到150ml海带浸泡液中，搅拌8分钟使其絮凝8小时，而后以1500转/分钟的速度离心5分钟，分离得到沉淀在pH为6的酸性条件下溶胀24小时，搅拌4小时溶解，过滤，将滤液调至中性，减压浓缩，而后在浓缩液中加入乙醇使浓度达到75％，过滤得沉淀，沉淀用无水丙酮洗涤2次，真空干燥，即得褐藻多糖硫酸酯，所得褐藻多糖硫酸酯占沉淀量的11.1％。
实施例4将2ml酸溶液为2％的分子量为70万的羧甲基壳聚糖水溶液加入到150ml海带浸泡液中，搅拌4分钟使其絮凝0.5小时，而后以1000转/分钟的速度离心3分钟，分离得到沉淀在pH为4的酸性条件下溶胀8小时，搅拌3小时溶解，过滤，将滤液调至中性，减压浓缩，而后在浓缩液中加入乙醇使浓度达到70％，过滤，沉淀用无水乙醚洗涤2次，真空干燥，即得褐藻多糖硫酸酯，所得褐藻多糖硫酸酯占沉淀量的14.2％。
实施例5将8ml 3％的分子量为76万的壳聚糖羟丙基三甲基季铵盐水溶液加入到150ml海带浸泡液中，搅拌8分钟，絮凝10分钟，而后以2000转/分钟的速度离心4分钟，分离得到沉淀在pH为6的条件下溶胀24小时，搅拌4小时溶解，过滤，将滤液调至中性，减压浓缩，而后在浓缩液中加入乙醇使浓度达到80％，过滤，沉淀用无水丙酮洗涤2次，真空干燥，即得褐藻多糖硫酸酯，所得褐藻多糖硫酸酯占沉淀量的16.1％。
实施例6与实施例1不同之处在于所采用的絮凝剂为N，N，N-三甲基壳聚糖。
实施例7与实施例2不同之处在于所采用的絮凝剂为N，N，N-三甲基壳聚糖季铵盐。
实施例8与实施例3不同之处在于所采用的絮凝剂为2-(2-羟基苯甲亚胺基)羧甲基壳聚糖。
实施例9与实施例1不同之处在于所采用的絮凝剂为2-(2-羟基-5-硝基苯甲亚胺基)羧甲基壳聚糖。
实施例10与实施例1不同之处在于所采用的絮凝剂为2-(2-羟基-5-氯苯甲亚胺基)羧甲基壳聚糖。
权利要求
1.一种提取褐藻多糖硫酸酯的方法，其特征在于每150ml的海带浸泡液中加入1-10ml的絮凝剂，搅拌2-10分钟使其絮凝10分钟-8小时，而后离心2-6分钟，分离得到沉淀在pH为2-6的酸性条件下溶胀1-24小时，并搅拌1-4小时使沉淀溶解，过滤，将滤液调至中性，减压浓缩，而后在浓缩液中加入乙醇使浓度到60％-80％，过滤得沉淀并洗涤，冷冻干燥，即得褐藻多糖硫酸酯；所述的絮凝剂为壳聚糖、壳聚糖羧甲基衍生物或壳聚糖季铵盐衍生物，其分子量为2000-76万。
2.根据权利要求1所述的提取褐藻多糖硫酸酯的方法，其特征在于所述的壳聚糖、羧甲基壳聚糖衍生物或壳聚糖季铵盐衍生物为其浓度在1-3％酸溶液或水溶液，酸溶液为1％-3％的乙酸或盐酸水溶液。
3.根据权利要求1所述的提取褐藻多糖硫酸酯的方法，其特征在于所述离心分离的时间为2-6分钟，转速为500-3000转/分钟。
4.根据权利要求1所述的提取褐藻多糖硫酸酯的方法，其特征在于所述pH为2-6的条件为用盐酸调pH达到2-6。
5.根据权利要求1所述的提取褐藻多糖硫酸酯的方法，其特征在于所述减压浓缩，浓缩液为原溶液的1/10-1/20。
6.根据权利要求1所述的提取褐藻多糖硫酸酯的方法，其特征在于所述沉淀洗涤时洗涤液为无水乙醚或无水丙酮。
全文摘要
本发明涉及海洋化工工程技术领域，具体地说是一种从海带浸泡液中提取褐藻多糖硫酸酯的方法。方法每150ml的海带浸泡液中加入1－10ml的絮凝剂，搅拌2－10分钟使其絮凝10分钟－8小时，离心、沉淀在pH为2－6的条件下溶胀1－24小时，并搅拌1－4小时溶解，过滤将滤液调至中性，减压浓缩，而后在浓缩液中加入乙醇，过滤得沉淀并洗涤，而后干燥，即得褐藻多糖硫酸酯。本发明涉以壳聚糖及其衍生物为絮凝剂，从海带浸泡液中絮凝沉淀“糖胶”，然后从所得的“糖胶”中提取褐藻多糖硫酸酯。采用本发明可以使资源得到综合利用，而且操作简便，减少了对酸、碱的使用量，节约了资源，同时所得的褐藻多糖硫酸酯可以达到所得沉淀量的5－16％。
文档编号C08B37/04GK101037483SQ20071001457
公开日2007年9月19日 申请日期2007年4月20日 优先权日2007年4月20日
发明者李鹏程, 陈晓琳, 邢荣娥, 于华华, 刘松 申请人:中国科学院海洋研究所