番茄黄化曲叶病抗病基因ty‑5的分子标记引物及其应用的制作方法与工艺

技术特征：
1.番茄黄化曲叶病抗病基因ty-5的分子标记，其特征在于，该分子标记为InDel标记类型，是用番茄黄化曲叶病抗病基因ty-5的分子标记引物，经过PCR扩增得到的与ty-5紧密连锁的共显性DNA分子标记，该分子标记的核苷酸序列为SEQIDNo.3或SEQIDNo.4所示其中分子标记引物的上游引物序列为：TAACAAAGCCCTCAAAGC，下游引物序列为：GTCTCCGAAACGTAATCC。2.番茄黄化曲叶病抗病基因ty-5的分子标记方法，其特征在于，该分子标记方法包括以下步骤：1)提取番茄基因组DNA；2)以上述番茄基因组DNA为模板与权利要求1所述的分子标记引物进行PCR扩增，对PCR反应的产物进行分离、鉴定、显色后，检测判断是否有番茄黄化曲叶病抗病基因ty-5。3.根据权利要求2所述的分子标记方法，其特征在于，步骤2)中，PCR反应体系为：10ng/μL模板DNA1μL；4pmmol/L分子标记引物1.0μL；10×PCRBuffer1.0μL；25mmol/LMgCl21.0μL；10mmol/LdNTPs0.25μL；5U/μlrTaqDNAPolymerase0.1μL；ddH2O5.65μL；PCR反应扩增程序为：94℃预变性5min；每个循环94℃变性30s，48℃退火30s，72℃延伸30s，共38个循环，最后72℃延伸7min。4.如权利要求1所述的番茄黄化曲叶病抗病基因ty-5的分子标记引物在ty-5基因的分子标记辅助育种中的应用。5.如权利要求1所述的番茄黄化曲叶病抗病基因ty-5的分子标记引物在检测番茄黄化曲叶病毒病抗性基因ty-5基因中的应用。6.番茄黄化曲叶病毒病抗性基因ty-5检测方法，包括以下步骤：以番茄基因组DNA为模板与权利要求1所述的番茄黄化曲叶病抗病基因ty-5的分子标记引物进行PCR扩增，对扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，对电泳后条带进行记录，根据条带大小确定是否含有ty-5基因；其中PCR反应体系为：反应体系共10μL，10ng/μL模板DNA1.0μL；4pmmol/L分子标记引物1.0μL、10×PCRBuffer1.0μL、25mmol/LMgCl21.0μL、10mmol/LdNTPs0.25μL、5U/μlrTaqDNAPolymerase0.1μL、ddH2O5.65μL；PCR反应扩增程序为：94℃预变性5min；每个循环94℃变性30s，48℃退火30s，72℃延伸30s，共38个循环，最后72℃延伸7min。