四氢吡啶并嘧啶化合物或其盐的制作方法

本发明涉及一种作为医药、尤其是作为抗雄激素剂有用的新型四氢吡啶并嘧啶化合物及其盐以及含有它们的医药组合物。

背景技术：

前列腺癌在欧美是男性罹患频率最高的癌，是癌的第二大死亡原因。在日本，随着饮食生活的欧美化及人口的高龄化，前列腺癌患者数在逐年增加。一般而言，前列腺癌细胞的增殖受雄激素刺激。因此，在不能切除的进行性前列腺癌的治疗中，通过外科或化学去势、和/或抗雄激素剂给药的所谓雄激素除去疗法而治疗。通过外科或化学去势，体内的雄激素循环水平降低，雄激素受体(Androgen Receptor，以下有时称为AR)的活性降低。通过抗雄激素剂的给药，抑制AR与雄激素的结合，AR活性降低。这些治疗在大多数患者中在初期是非常有效的，但其癌在数年以内复发。该复发前列腺癌被称为去势抵抗性前列腺癌(Castration resistant prostate cancer：CRPC)。

作为去势抵抗性前列腺癌的原因，AR基因扩增及过量表达被确认并被报道(非专利文献1、2)。因AR的过量表达，对于去势治疗引起的超低浓度的雄激素，去势抵抗性前列腺癌也显示很高的感受性。即，因AR的过量表达而使AR被活化，引起肿瘤增殖。另外，AR的突变也作为去势抵抗性前列腺癌的原因被确认并被报道(非专利文献3～5)。因AR发生突变，除雄激素以外，例如雌激素或目前所使用的抗雄激素剂本身作为AR激动剂起作用。

作为最通常使用的抗雄激素剂的比卡鲁胺(Bicalutamide)在激素感受性前列腺癌中作为对AR的拮抗剂而显示抑制效果。但是，以比卡鲁胺为首的用于雄激素除去疗法的抗雄激素剂对于去势抵抗性前列腺癌不具有有效性。主要的原因在于，在去势抵抗性前列腺癌中，AR过量表达，不能充分地发挥AR拮抗活性；显示AR激动剂活性(非专利文献6、7)。因此，为了抑制去势抵抗性前列腺癌具有的过量表达的AR，谋求与现行的抗雄激素剂相比具有强力的AR拮抗活性、且不具有AR激动剂作用的抗雄激素剂。进而，抗雄激素剂同时具有使AR表达降低的效果，由此可以成为更有效的去势抵抗性前列腺癌的治疗剂。

以往，报道了5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶作为辣椒素受体1(Vanilloid Receptor：VR1)抑制剂(专利文献1～3)。在专利文献1中记载了通过抑制VR1受体而对疼痛、炎症性痛觉过敏或膀胱过度活动症及尿失禁有用的双环杂芳基胺化合物。另外，在专利文献2和3中记载了对炎症性疼痛等的处理有用的双环杂芳基胺化合物，公开了对于热痛觉过敏的试验数据。但是，在这些专利文献1～3中，没有报道在5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶的7位具有氰基苯的化合物。此外，没有与抗肿瘤效果有关的数据的记载，对AR拮抗活性或AR表达降低作用完全没有记载。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:国际公开公报第2006/062981号

专利文献2:国际公开公报第2005/066171号

专利文献3:国际公开公报第2006/118598号

非专利文献

非专利文献1:Koivisto P等，“Androgen receptor gene amplification:a possible molecular mechanism for androgen deprivation therapy failure in prostate cancer”，Cancer Res 57:314-319，1997

非专利文献2:Gregory CW等，“Androgen receptor stabilization in recurrent prostate cancer is associated with hypersensitivity to low androgen”，Cancer Res 61:2892-2898，2001

非专利文献3:Taplin ME等，“Mutation of the androgen-receptor gene in metastatic androgen-independent prostate cancer”，N Engl J Med332:1393-1398，1995

非专利文献4:Zhao XY等，“Glucocorticoids can promote androgen-independent growth of prostate cancer cells through a mutated androgen receptor”，Nat Med 6:703-706，2000

非专利文献5:Tan J等，“Dehydroepiandrosterone activates mutant androgen receptors expressed in the androgen-dependent human prostate cancer xenograft CWR22and LNCaP cells”，Mol Endocrinol 11:，450-459，1997

非专利文献6:Charlie D Chen等，“Molecular determinants of resistance to antiandrogen therapy”，Nature Medicine 10:33-39，2004

非专利文献7:Takahito Hara等，“Novel Mutations of Androgen Receptor:A Possible Mechanism of Bicalutamide Withdrawal Syndrome”，Cancer Res 63:149-153，2003

技术实现要素：

发明要解决的课题

本发明的课题在于提供一种新型的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐，其与以比卡鲁胺为首的现行的抗雄激素剂相比，对于在去势抵抗性前列腺癌中过量表达的AR具有更强的拮抗活性，并且对于AR不显示激动剂作用，且具有AR表达量的降低作用。

用于解决课题的方法

本发明的发明人进行了深入研究，结果发现了将5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶作为基本结构，在4位具有－NHR表示的基团、且在7位具有氰基苯的新型化合物组。这些化合物组具有对AR的拮抗活性，另一方面，不显示激动剂活性，除了对于AR表达的细胞的有效性之外，在AR过量表达的细胞中也具有很强的细胞增殖抑制效果。另外，这些化合物组除了对AR的拮抗活性之外，还具有使AR表达降低的作用，在去势抵抗性前列腺癌的荷癌小鼠模型中显示抗肿瘤效果。因此，本发明的发明人发现这些化合物组作为用于治疗癌的医药是有效的，从而完成了本发明。

因此，本发明提供以下的[1]～[22]。

[1]一种四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐，其由下述通式(I)表示：

[式中，

X表示卤原子或卤代－C1－3烷基；

R表示被R¹取代、且同时可以被R²取代的C6－14芳基、或被R¹取代、且同时可以被R²取代的5元或6元的杂芳基；

R¹表示氢原子、苯基、羟基－C1－6烷基、羟基－C3－7环烷基、可以被Ra取代的C1－6烷氧基、C3－7环烷基氨基磺酰基、3～7元环的单环的杂环烷基磺酰基、卤代－C1－3烷氧基羰基氨基、卤代－C1－3烷基羰基氨基、被羟基－C1－6烷基取代的3～7元的单环的杂环链烷羰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf；

R²表示氢原子、卤原子或卤代－C1－3烷基；

Ra表示C1－6烷基吡唑基、三唑基、四唑基、或C1－6烷基磺酰基哌嗪基；

Rf表示卤代－C1－3烷基、羟基－C1－6烷基、羟基－C3－7环烷基、羟基－C3－7环烷基－C1－6烷基、或被Rfa取代的C1－6烷基；

Rfa表示C1－6烷基吡唑基、卤代－C1－3烷基噻唑基、噁二唑基、或卤代－C1－3烷基噁二唑基；

n表示0～3的整数。]。

[2]如[1]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，X为氯原子、溴原子或三氟甲基。

[3]如[1]或[2]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，n为0或1。

[4]如[1]～[3]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R选自以下的组：

[5]如[1]～[4]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，

R¹为氢原子、苯基、羟基－乙基、羟基－异丙基、羟基－环丙基、羟基－环丁基、甲氧基、异丙氧基、被甲基吡唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的2－甲基丙氧基、被四唑基取代的2－甲基丙氧基、被甲基磺酰基哌嗪基取代的正丙氧基、环丙基氨基磺酰基、1,4－氧杂氮杂环庚烷基磺酰基、2,2,2－三氟乙氧基羰基氨基、2,2,2－三氟乙基羰基氨基、被羟基－异丙基取代的哌啶羰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf；

Rf为2,2－二氟乙基、2,2,2－三氟乙基、羟基－2－甲基丙基、羟基环己基、羟基环丙基甲基、被三氟甲基噻唑基取代的甲基、被甲基噻唑基取代的乙基、被噁二唑基取代的乙基、或被三氟甲基噁唑基取代的乙基；

n为0或1。

[6]如[1]～[5]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R选自以下的组：

(式中，R¹为氢原子)；

(式中，

R¹表示－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf表示被Rfa取代的甲基或被Rfa取代的乙基，

Rfa为甲基吡唑基或噁二唑基，

n为0)；

(式中，

R¹为苯基、羟基－乙基、羟基－异丙基、甲氧基、异丙氧基、被甲基吡唑基取代的乙氧基、或被甲基磺酰基哌嗪基取代的正丙氧基)；

(式中，

R¹为羟基－异丙基、羟基－环丙基、羟基－环丁基、异丙氧基、被三唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的2－甲基丙氧基、被四唑基取代的2－甲基丙氧基、环丙基氨基磺酰基、2,2,2－三氟乙氧基羰基氨基、2,2,2－三氟乙基羰基氨基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

R²为氢原子、氟原子或氯原子，

Rf表示2,2－二氟乙基、2,2,2－三氟乙基、被Rfa取代的甲基或被Rfa取代的乙基；

Rfa为三氟甲基噻唑基、噁二唑基或三氟甲基噁二唑基，

n为0或1)；

(式中，

R¹为羟基－异丙基、1,4－氧杂氮杂环庚烷基磺酰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

R²为氢原子或三氟甲基，

Rf为2,2,2－三氟乙基或被Rfa取代的乙基，

Rfa为噁二唑基，

n为0)；

(式中，

R¹为羟基－异丙基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf为2,2－二氟乙基、2,2,2－三氟乙基、羟基－2－甲基丙基、羟基环己基、羟基环丙基甲基，

n为0)；

(式中，

R¹为－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf为羟基－2－甲基丙基，

n为0)；

(式中，

R¹为－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf为羟基－2－甲基丙基，

n为0)；

(式中，

R¹为－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf为2,2,2－三氟乙基，

n为0)；

(式中，

R¹为被羟基－异丙基取代的哌啶羰基)；或

(式中，

R¹为被羟基－异丙基取代的哌啶羰基)。

[7]如[1]～[5]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，X为氯原子、溴原子或三氟甲基；

R为选自以下组中的基团：

R¹表示氢原子、苯基、羟基－C1－4烷基、羟基－C3－5环烷基、可以被Ra取代的C1－4烷氧基、C3－5环烷基氨基磺酰基、7元环的单环的杂环烷基磺酰基、氟－C1－3烷氧基羰基氨基、氟－C1－3烷基羰基氨基、被羟基－C1－4烷基取代的6元的单环的杂环链烷羰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf；

R²表示氢原子、氟原子、氯原子或三氟甲基；

Ra表示C1－4烷基吡唑基、三唑基、四唑基、或C1－4烷基磺酰基哌嗪基；

Rf表示氟－C1－3烷基、羟基－C1－4烷基、羟基－C3－5环烷基、羟基－C3－5环烷基－C1－4烷基、或被Rfa取代的C1－4烷基；

Rfa表示C1－4烷基吡唑基、氟－C1－3烷基噻唑基、噁二唑基、或氟－C1－3烷基噁二唑基；

n表示0或1。

[8]如[7]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，X为氯原子、溴原子或三氟甲基；

R为选自以下组中的基团：

R¹表示氢原子、苯基、羟基－乙基、羟基－异丙基、羟基－环丙基、羟基－环丁基、甲氧基、异丙氧基、被甲基吡唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的2－甲基丙氧基、被四唑基取代的2－甲基丙氧基、被甲基磺酰基哌嗪基取代的正丙氧基、环丙基氨基磺酰基、1,4－氧杂氮杂环庚烷基磺酰基、2,2,2－三氟乙氧基羰基氨基、2,2,2－三氟乙基羰基氨基、被羟基－异丙基取代的哌啶羰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf；

R²表示氢原子、氟原子、氯原子或三氟甲基；

Rf表示2,2－二氟乙基、2,2,2－三氟乙基、羟基－2－甲基丙基、羟基环己基、羟基环丙基甲基、被三氟甲基噻唑基取代的甲基、被甲基噻唑基取代的乙基、被噁二唑基取代的乙基、或被三氟甲基取代的乙基；

n表示0或1。

[9]如[8]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，X为氯原子或三氟甲基；

R为选自以下组中的基团：

R¹表示氢原子、羟基－异丙基、异丙氧基、被四唑基取代的2－甲基丙氧基、被甲基磺酰基哌嗪基取代的正丙氧基、1,4－氧杂氮杂环庚烷基磺酰基、被羟基－异丙基取代的哌啶羰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf；

R²表示氢原子或氟原子；

Rf表示2,2,2－三氟乙基、羟基－2－甲基丙基、被三氟甲基噻唑基取代的甲基、被噁二唑基取代的乙基、或被三氟甲基噁二唑基取代的乙基；

n表示0。

[10]如[1]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其选自以下的化合物(1)～(19)：

(1)4－(4－((1,2,4－噻二唑－5－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈；

(2)4－(4－((4－异丙氧基苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈；

(3)4－(4－((6－氟－5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈；

(4)2－氯－4－(4－((6－(2－羟基丙烷－2－基)哒嗪－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈；

(5)4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈；

(6)2－氯－4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈；

(7)4－(4－((6－(2－羟基丙烷－2－基)哒嗪－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈；

(8)6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8,－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)烟酰胺；

(9)4－(4－((6－异丙氧基吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈；

(10)4－(4－((6－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈；

(11)4－(4－((5－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈；

(12)4－(4－((4－(3－(4－(甲基磺酰基)哌嗪－1－基)丙氧基)苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈；

(13)4－(4－((5－((1,4－氧杂氮杂环庚烷－4－基)磺酰基)噻唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈；

(14)6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2－羟基－2－甲基丙基)哒嗪－3－羧酰胺；

(15)2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2－羟基－2－甲基丙基)嘧啶－5－羧酰胺；

(16)6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－((4－(三氟甲基)噻唑－2－基)甲基)烟酰胺；

(17)(R)－N－(1－(1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)－6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)烟酰胺；

(18)(R)－6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(1－(5－(三氟甲基)－1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)烟酰胺；

(19)4－(4－((5－(4－(2－羟基丙烷－2－基)哌啶－1－羰基)噁唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈。

[11]含有[1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分的抗雄激素剂。

[12]含有[1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分的抗肿瘤剂。

[13]含有[1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分的医药。

[14]含有[1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐、以及药学上可接受的载体的医药组合物。

[15][1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐在抗雄激素剂的制造中的用途。

[16][1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐在抗肿瘤剂的制造中的用途。

[17][1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐在医药的制造中的用途。

[18]如[1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐，其用于在雄激素活性抑制中使用。

[19]如[1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐，其用于在肿瘤的治疗中使用。

[20]如[1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐，其用于作为医药使用。

[21]一种雄激素活性抑制方法，其包括对需要其的对象投与有效量的[1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐的步骤。

[22]一种肿瘤的治疗方法，其包括对需要其的对象投与有效量的[1]～[10]中任一项所述的四氢吡啶并嘧啶化合物或其药学上可接受的盐的步骤。

发明的效果

本发明的新型四氢吡啶并嘧啶化合物或其盐对雄激素受体(AR)显示拮抗活性，对AR活化相关的疾病是有效的。作为AR活化相关的疾病，可举出例如：肿瘤、转移性骨疾病、前列腺肥大症、寻常痤疮、皮脂溢、多毛症、雄激素性秃发、性早熟症、男性化症等。作为该肿瘤，可举出：前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、子宫癌、胰腺癌、肝细胞癌等等。

具体实施方式

在本说明书中，作为“卤原子”，可举出：氟原子、氯原子、溴原子及碘原子。

在本说明书中，“C1－6烷基”为碳原子数1～6的直链或支链状的烷基，可举出例如：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、2－甲基丙基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、叔戊基、新戊基、正己基、叔己基等。另外，本说明书中的“C1－4烷基”及“C1－3烷基”分别是指上述中列举的“C1－6烷基”中的碳原子数1～4及1～3的烷基。

在本说明书中，“卤代－C1－3烷基”为1～7个上述的卤原子被取代的上述的C1－3烷基。作为该“卤代－C1－3烷基”，可举出例如：氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、2－氟乙基、2,2－二氟乙基、2,2,2－三氟乙基、2,2,2－三氯乙基、单氟正丙基、全氟正丙基、全氟异丙基等氟－C1－3烷基及氯－C1－3烷基。

在本说明书中，“C6－14芳基”为碳原子数6～14的芳基，可举出例如：苯基、萘基、蒽基、菲基、芴基等。

在本说明书中，“杂芳基”为含有选自氧、氮或硫中的任一种杂原子的1～4个杂原子的、具有芳香族性的单环或多环的基团。作为杂芳基的实例，可举出例如：呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、二唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、噁二唑基、三嗪唑、噻唑基、噻二唑基、异噁唑基、异噻唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并[b]噻吩基及苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基等。

在本说明书中，“羟基－C1－6烷基”为被1～3个羟基取代的上述的C1－6烷基。作为该“羟基－C1－6烷基”，可举出例如：羟基甲基、1－羟基乙基、1,2－二羟基乙基、1－羟基丙基、1,2－二羟基丙基、1,2,3－三羟基丙基、1－羟基丁基、2－羟基丙烷－2－基、2－羟基－2－甲基丙基等。

在本说明书中，“C3－7环烷基”为碳原子数3～7的环状的烷基，可举出例如：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。

在本说明书中，“羟基－C3－7环烷基”为被1～3个羟基取代的上述的C3－7环烷基。作为该“羟基－C3－7环烷基”，可举出例如：1－羟基环丙基、2－羟基环丙基、1,2－二羟基环丙基、1,2,3－三羟基环丙基、1－羟基环丁基、1－羟基环戊基、1－羟基环己基、4－羟基环己基等。

在本说明书中，“C1－6烷氧基”为碳原子数1～6的直链状或支链状烷氧基，可举出例如：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、2－甲基丙氧基(异丁氧基)、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、异戊氧基、叔戊氧基、新戊氧基、正己氧基、叔己氧基等。另外，本说明书中的“C1－4烷氧基”及“C1－3烷氧基”分别是指上述中列举的“C1－6烷氧基”中的碳原子数1～4及1～3的烷氧基。

在本说明书中，“卤代－C1－3烷氧基”为被1～7个上述的卤原子取代的上述的C1－3烷氧基。作为该“卤代－C1－3烷氧基”，可举出例如：氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、2－氟乙氧基、2,2－二氟乙氧基、2,2,2－三氟乙氧基、2,2,2－三氯乙氧基、单氟－正丙氧基、全氟－正丙氧基、全氟异丙氧基等氟－C1－3烷氧基及氯－C1－3烷氧基。

在本说明书中，“C3－7环烷基氨基磺酰基”为具有被1个上述的C3－7环烷基取代的氨基的磺酰基。作为该“C3－7环烷基氨基磺酰基”，可举出例如：环丙基氨基磺酰基、环丁基氨基磺酰基、环戊基氨基磺酰基等。

在本说明书中，“杂环烷基”为环状的烷基中取代碳而具有1～3个选自氧、氮、硫中的任一种杂原子的3～7元的单环的烷基，可举出例如：氮丙啶基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、四氢呋喃基、四氢苯硫基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、噁嗪基(oxazinanyl group)、噻嗪基(thiazinanyl group)、氮杂环庚烷基(azepanyl group)、二氮杂环庚烷基(diazepanyl group)、氧杂氮杂环庚烷基(oxazepanyl group)等。

在本说明书中，“杂环烷基磺酰基”为被上述的杂环烷基取代的磺酰基。作为该“杂环烷基磺酰基”，可举出例如：哌啶－1－基磺酰基、吗啉代磺酰基、1,4－硫氮杂卓－4－基磺酰基、1,4－氧杂氮杂环庚烷基磺酰基等。

在本说明书中，“卤代－C1－3烷氧基羰基氨基”为被1个卤代－C1－3烷氧基羰基取代的氨基，该“卤代－C1－3烷氧基羰基”为被上述的卤代－C1－3烷氧基取代的羰基。作为该“卤代－C1－3烷氧基羰基氨基”，可举出例如：三氟甲氧基羰基氨基、三氯甲氧基羰基氨基、2－氟乙氧基羰基氨基、2,2－二氟乙氧基羰基氨基、2,2,2－三氟乙氧基羰基氨基等。

在本说明书中，“卤代－C1－3烷基羰基氨基”为被1个上述的卤代－C1－3烷基羰基取代的氨基，该“卤代－C1－3烷基羰基”为被上述的卤代－C1－3烷基取代的羰基。作为该“卤代－C1－3烷基羰基氨基”，可举出例如：三氟甲基羰基氨基、三氯甲基羰基氨基、2－氟乙基羰基氨基、2,2－二氟乙基羰基氨基、2,2,2－三氟乙基羰基氨基等。

在本说明书中，“杂环链烷羰基”为被上述的杂环烷基取代的羰基，可举出例如：4－哌啶－1－羰基、4－哌嗪－1－羰基、氮丙啶－1－羰基、吗啉－4－羰基等。

在本说明书中，“C1－6烷基吡唑基”为被1个上述的C1－6烷基取代的吡唑基。作为该“C1－6烷基吡唑基”，可举出例如：1－甲基－1H－吡唑－5－基、1－乙基－1H－吡唑－5－基、1－丙基－1H－吡唑－5－基、1－甲基－1H－吡唑－3－基、1－甲基－1H－吡唑－4－基等。

在本说明书中，“C1－6烷基磺酰基哌嗪基”为被1个C1－6烷基磺酰基取代的哌嗪基，该“C1－6烷基磺酰基”为被上述的C1－6烷基取代的磺酰基。作为该“C1－6烷基磺酰基哌嗪基”，可举出例如：4－(甲基磺酰基)哌嗪－1－基、4－(乙基磺酰基)哌嗪－1－基、4－(丙基磺酰基)哌嗪－1－基、4－(异丙基磺酰基)哌嗪－1－基、4－(甲基磺酰基)哌嗪－2－基、4－(甲基磺酰基)哌嗪－3－基等。

在本说明书中，“羟基－C3－7环烷基－C1－6烷基”为被1个上述的羟基－C3－7环烷基取代的上述的C1－6烷基。作为该“羟基－C3－7环烷基－C1－6烷基”，可举出例如：(1－羟基环丙基)甲基、(1－羟基环丁基)甲基、2－(1－羟基环丙基)乙基、(1,2－二羟基环丙基)甲基、(1,2,3－三羟基环丙基)甲基等。

在本说明书中，“卤代－C1－3烷基噻唑基”为被1个上述的卤代－C1－3烷基取代的噻唑基，可举出例如：4－(三氟甲基)噻唑－2－基、5－(三氟甲基)噻唑－2－基、4－(三氯甲基)噻唑－2－基、4－(2,2,2－三氟乙基)噻唑－2－基等。

在本说明书中，“卤代－C1－3烷基噁二唑基”为被1个上述的卤代－C1－3烷基取代的噁二唑基，可举出例如：5－(三氟甲基)－1,3,4－噁二唑－2－基、5－(2,2,2－三氟乙基)－1,3,4－噁二唑－2－基、5－(2－氟乙基)－1,3,4－噁二唑－2－基、4－(三氟甲基)－1,2,3－噁唑－5－基等。

在本说明书中，作为“药学上可接受的盐”，只要为药学上可接受的盐的形态，则可以为任一种，可举出例如：盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等无机酸盐；以及乙酸盐、丙酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、甲烷磺酸盐、对甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐等有机酸。

在本说明书中，所谓基团被取代基“可以被取代”，是指该基团可以被该取代基取代或者可以不被该取代基取代的状态。

本发明的四氢吡啶并嘧啶化合物或其盐的特征在于，具有5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶骨架，在该骨架的4位具有－NHR(R如后所述)表示的基团，且在7位具有氰基苯，该氰基苯在4位具有氰基，且在3位具有特定的取代基X(X如后所述)。本发明的四氢吡啶并嘧啶化合物或其盐对雄激素受体(AR)具有拮抗活性，发挥抗肿瘤效果。另一方面，将5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶骨架代替为5,6,7,8－四氢吡啶并[4,3－d]嘧啶或5,6,7,8－四氢[1,2,4]三唑并[4,3－a]吡嗪骨架的化合物不能发挥上述AR拮抗活性或抗肿瘤效果。另外，将在上述的4位具有氰基、且在3位具有取代基X的氰基苯代替为其它氰基苯的化合物，不能发挥上述的效果。

在上述专利文献1～3中公开了具有5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶骨架的化合物。但是，在专利文献1～3中均没有公开在5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶的4位具有－NHR(R如后所述)所示的基团、且在7位具有氰基苯的化合物。另外，在专利文献1～3中完全没有公开5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶化合物作为抗肿瘤剂的有用性，而且对于该化合物的AR相关的效果也没有的暗示。

本发明的四氢吡啶并嘧啶化合物由下述通式(I)表示。

通式(I)中，X表示卤原子或卤代－C1－3烷基。作为X表示的“卤原子”，可举出上述的卤原子，优选为氯原子、溴原子。作为X表示的“卤代－C1－3烷基”，可举出上述的卤代－C1－3烷基，优选为三氟甲基。通式(I)中，X优选为氯原子、溴原子或三氟甲基，更优选为氯原子或三氟甲基。

通式(I)中，R表示被R¹取代、且同时可以被R²取代的C6－14芳基、或被R¹取代、且同时可以被R²取代的5元或6元的杂芳基。

R相关的上述“被R¹取代、且同时可以被R²取代的C6－14芳基”中的C6－14芳基为上述的C6－14芳基，优选为苯基。在该“C6－14芳基”中所取代的R¹的个数为1个，R²的个数为0或1个。

R相关的上述“被R¹取代、且同时可以被R²取代的5元或6元的杂芳基”中的杂芳基为上述的杂芳基。该“5元或6元的杂芳基”优选为吡啶唑、吡嗪唑、嘧啶唑、哒嗪唑、三嗪唑、噻唑基、噻二唑基、噁唑基或噁二唑基，更优选为吡啶唑、嘧啶唑、哒嗪唑、噻唑基、噁唑基或噻二唑基，进一步优选为吡啶唑或哒嗪唑。在该“5元或6元的杂芳基”中所取代的R¹的个数为1个，R²的个数为0或1个。

通式(I)中，R优选为选自以下组中的基团。

R更优选为选自以下组中的基团。

R进一步优选为选自以下组中的基团。

通式(I)中的R中，R¹表示氢原子、苯基、羟基－C1－6烷基、羟基－C3－7环烷基、可以被Ra取代的C1－6烷氧基、C3－7环烷基氨基磺酰基、3～7元环的单环的杂环烷基磺酰基、卤代－C1－3烷氧基羰基氨基、卤代－C1－3烷基羰基氨基、被羟基－C1－6烷基取代的3～7元的单环的杂环链烷羰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf。

R¹表示的“羟基－C1－6烷基”为上述的羟基－C1－6烷基，优选为被1～3个羟基取代的上述的C1－4烷基(羟基－C1－4烷基)，更优选为被1～3个羟基取代的乙基(羟基－乙基)、或被1～3个羟基取代的异丙基(羟基－异丙基)。该羟基的个数更优选为1个。进一步优选该“羟基－C1－6烷基”为1－羟基乙基或2－羟基丙烷－2－基。

R¹表示的“羟基－C3－7环烷基”为上述的羟基－C3－7环烷基，优选为被1～3个羟基取代的碳原子数3～5的环状的烷基(羟基－C3－5环烷基)，更优选为被1～3个羟基取代的环丙基(羟基－环丙基)、或被1～3个羟基取代的环丁基(羟基－环丁基)。该羟基的个数更优选为1个。进一步优选该“羟基－C3－7环烷基”为1－羟基环丙基或1－羟基环丁基。

R¹表示的“可以被Ra取代的C1－6烷氧基”为被0～3个Ra取代的上述的C1－6烷氧基，优选为被0～3个Ra取代的上述的C1－4烷氧基。Ra的数优选为0或1个。

Ra表示C1－6烷基吡唑基、三唑基、四唑基、或C1－6烷基磺酰基哌嗪基。Ra表示的“C1－6烷基吡唑基”为被1个上述的C1－6烷基取代的吡唑基，优选为被1个上述的C1－4烷基取代的吡唑基(C1－4烷基吡唑基)，更优选为被1个甲基取代的吡唑基(甲基吡唑基)，进一步优选为1－甲基－1H－吡唑－5－基。Ra表示的“C1－6烷基磺酰基哌嗪基”为被用上述的C1－6烷基取代的1个磺酰基所取代的哌嗪基，优选为被用上述的C1－4烷基取代的1个磺酰基所取代的哌嗪基(C1－4烷基磺酰基哌嗪基)，更优选为被甲基取代的1个磺酰基所取代的哌嗪基(甲基磺酰基哌嗪基)。

该“可以被Ra取代的C1－6烷氧基”优选为甲氧基、异丙氧基、被甲基吡唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的2－甲基丙氧基、被四唑基取代的2－甲基丙氧基、或被甲基磺酰基哌嗪基取代的正丙氧基，更优选为异丙氧基、被三唑基取代的2－甲基丙氧基、被四唑基取代的2－甲基丙氧基、或被甲基磺酰基哌嗪基取代的正丙氧基。

R¹表示的“C3－7环烷基氨基磺酰基”为上述的C3－7环烷基氨基磺酰基，优选为被用1个碳原子数3～5的环状烷基取代的氨基所取代的磺酰基(C3－5环烷基氨基磺酰基)，更优选为环丙基氨基磺酰基。

R¹表示的“3～7元的单环的杂环烷基磺酰基”为被上述的杂环烷基取代的磺酰基，优选为被7元的单环的杂环烷基取代的磺酰基，更优选为1,4－氧杂氮杂环庚烷基磺酰基。

R¹表示的“卤代－C1－3烷氧基羰基氨基”为上述的卤代－C1－3烷氧基羰基氨基，优选为被用上述的氟－C1－3烷氧基取代的1个羰基所取代的氨基(氟－C1－3烷氧基羰基氨基)，更优选为2,2,2－三氟乙氧基羰基氨基。

R¹表示的“卤代－C1－3烷基羰基氨基”为上述的卤代－C1－3烷基羰基氨基，优选为被用上述的氟－C1－3烷基取代的1个羰基取代的氨基(氟－C1－3烷基羰基氨基)，更优选为2,2,2－三氟乙基羰基氨基。

R¹表示的“被羟基－C1－6烷基取代的3～7元的单环的杂环链烷羰基”为被用1个上述的羟基－C1－6烷基取代的3～7元的单环的杂环链烷所取代的羰基，优选为被1个上述的羟基－C1－4烷基取代的6元的单环的杂环链烷羰基，更优选为被1个上述的羟基－异丙基取代的哌啶羰基，进一步优选为4－(2－羟基丙烷－2－基)哌啶羰基。

在R¹相关的“－(CH2)n－C(＝O)－NHRf”表示的基团中，Rf表示卤代－C1－3烷基、羟基－C1－6烷基、羟基－C3－7环烷基、羟基－C3－7环烷基－C1－6烷基、或被Rfa取代的C1－6烷基。n可举出0～3的整数，优选为0或1，更优选为0。

Rf表示的“卤代－C1－3烷基”为上述的卤代－C1－3烷基，优选为上述的氟－C1－3烷基，更优选为2,2,2－三氟乙基或2,2－二氟乙基，进一步优选为2,2,2－三氟乙基。

Rf表示的“羟基－C1－6烷基”可举出上述的羟基－C1－6烷基，优选为被1～3个羟基取代的C1－4烷基(羟基－C1－4烷基)，更优选为被1～3个羟基取代的2－甲基丙基(羟基－2－甲基丙基)，进一步优选为2－羟基－2－甲基丙基。

Rf表示的“羟基－C3－7环烷基”为上述的羟基－C3－7环烷基，优选为被1～3个羟基取代的碳原子数5～7的环状的烷基(羟基－C5－7环烷基)，更优选为被1～3个羟基取代的环己基(羟基－环己基)，进一步优选为4－羟基环己基。

Rf表示的“羟基－C3－7环烷基－C1－6烷基”为上述的羟基－C3－7环烷基－C1－6烷基，优选为被用1～3个羟基取代的1个碳原子数3～5的环状的烷基(羟基－C3－5环烷基)所取代的上述的C1－4烷基(羟基－C3－5环烷基－C1－4烷基)，更优选为被用1～3个羟基取代的1个环丙基(羟基－环丙基)所取代的甲基(羟基－环丙基甲基)，进一步优选为(1－羟基环丙基)甲基。

Rf表示的“被Rfa取代的C1－6烷基”为被1～3个Rfa取代的上述的C1－6烷基，优选为被1～3个Rfa取代的上述的C1－4烷基。Rfa的数优选为1个。

Rfa表示C1－6烷基吡唑基、卤代－C1－3烷基噻唑基、噁二唑基、或卤代－C1－3烷基噁二唑基。Rfa表示的“C1－6烷基吡唑基”为上述的C1－6烷基吡唑基，优选为C1－4烷基吡唑基，更优选为甲基吡唑基，进一步优选为1－甲基－1H－吡唑－5－基。Rfa表示的“卤代－C1－3烷基噻唑基”为上述的卤代－C1－3烷基噻唑基，优选为被1个上述的氟－C1－3烷基取代的噻唑基(氟－C1－3烷基噻唑基)，更优选为被1个三氟甲基取代的噻唑基(三氟甲基噻唑基)，进一步优选为4－(三氟甲基)噻唑－2－基。Rfa表示的“卤代－C1－3烷基噁唑基”为上述的卤代－C1－3烷基噁唑基，优选为被1个上述的氟－C1－3烷基取代的噁二唑基(氟－C1－3烷基噁唑基)，更优选为被1个三氟甲基取代的噁二唑基(三氟甲基噁唑基)，进一步优选为5－(三氟甲基)－1,3,4－噁二唑－2－基。

该“被Rfa取代的C1－6烷基”优选为被1个上述的C1－4烷基吡唑基、1个上述的氟－C1－3烷基噻唑基、1个噁二唑基或1个上述的氟－C1－3烷基噁二唑基的任一个取代的上述的C1－4烷基。更优选为被1个上述的三氟甲基噻唑基取代的甲基、被1个上述的甲基噻唑基取代的乙基、被1个噁二唑基取代的乙基、或被1个上述的三氟甲基噁二唑基取代的乙基。进一步优选为2－(1－甲基－1H－吡唑－5－基)乙基、(4－(三氟甲基)噻唑－2－基)甲基、1－(1,3,4－噁二唑－2－基)乙基、1－(5－(三氟甲基)－1,3,4－噁二唑－2－基)乙基。其中，优选为(4－(三氟甲基)噻唑－2－基)甲基。

优选通式(I)中：

R¹为氢原子、苯基、羟基－C1－4烷基、羟基－C3－5环烷基、可以被Ra取代的C1－4烷氧基、C3－5环烷基氨基磺酰基、7元的单环的杂环烷基磺酰基、氟－C1－3烷氧基羰基氨基、氟－C1－3烷基羰基氨基、被羟基－C1－4烷基取代的6元的单环的杂环链烷羰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf；

Ra为C1－4烷基吡唑基、三唑基、四唑基、或C1－4烷基磺酰基哌嗪基；

Rf为卤代－C1－3烷基、羟基－C1－4烷基、羟基－C5－7环烷基、羟基－C3－5环烷基－C1－4烷基、或被Rfa取代的C1－4烷基；

Rfa为C1－4烷基吡唑基、氟－C1－3烷基噻唑基、噁二唑基、氟－C1－3烷基噁二唑基；

n为0或1。

更优选通式(I)中：

R¹为氢原子、苯基、羟基－乙基、羟基－异丙基、羟基－环丙基、羟基－环丁基、甲氧基、异丙氧基、被甲基吡唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的2－甲基丙氧基、被四唑基取代的2－甲基丙氧基、被甲基磺酰基哌嗪基取代的正丙氧基、环丙基氨基磺酰基、1,4－氧杂氮杂环庚烷基磺酰基、2,2,2－三氟乙氧基羰基氨基、 2,2,2－三氟乙基羰基氨基、被羟基－异丙基取代的哌啶羰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf；

Rf为2,2－二氟乙基、2,2,2－三氟乙基、羟基－2－甲基丙基、羟基环己基、羟基环丙基甲基、被三氟甲基噻唑基取代的甲基、被甲基噻唑基取代的乙基、被噁二唑基取代的乙基、或被三氟甲基噁唑基取代的乙基；

n为0或1。

通式(I)中，R²表示氢原子、卤原子或卤代－C1－3烷基。作为该“卤原子”，可举出上述的卤原子，优选为氟原子、氯原子。作为该“卤代－C1－3烷基”，可举出上述的卤代－C1－3烷基，优选为三氟甲基。R²优选为氢原子、氟原子、氯原子或三氟甲基。更优选为氢原子或氟原子。

通式(I)中，作为被R¹取代、且同时可以被R²取代的C6－14芳基、或被R¹取代、且同时可以被R²取代的5元或6元的杂芳基，可举出以下基团：

(式中，R¹为氢原子)；

(式中，

R¹为－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf为被Rfa取代的C1－6烷基，

Rfa为C1－6烷基吡唑基、或噁二唑基，

n为0)；

(式中，

R¹为苯基、羟基－C1－4烷基、羟基－C3－7环烷基、或可以被Ra取代的C1－6烷氧基，

R²为氢原子、卤原子或卤代－C1－3烷基，

Ra为C1－6烷基吡唑基、或C1－6烷基磺酰基哌嗪基)；

(式中，

R¹为上述的羟基－C1－6烷基、羟基－C3－7环烷基、可以被Ra取代的C1－6烷氧基、C3－7环烷基氨基磺酰基、卤代－C1－3烷氧基羰基氨基、卤代－C1－3烷基羰基氨基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

R²为氢原子或卤原子，

Ra为三唑基或四唑基，

Rf为卤代－C1－3烷基、被Rfa取代的C1－6烷基，

Rfa为卤代－C1－3烷基噻二唑基、噁二唑基、卤代－C1－3烷基噁二唑基，

n为0或1)；

(式中，

R¹为上述的羟基－C1－6烷基、3～7元环的单环的杂环烷基磺酰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

R²为氢原子、卤原子或卤代－C1－3烷基，

Rf为卤代－C1－3烷基、或被Rfa取代的C1－6烷基，

Rfa为噁二唑基，

n为0)；

(式中，

R¹为上述的羟基－C1－6烷基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

R²为氢原子、卤原子或卤代－C1－3烷基，

Rf为卤代－C1－3烷基、羟基－C1－6烷基、羟基－C3－7环烷基、羟基－C3－7环烷基－C1－6烷基，

n为0)；

(式中，

R¹为上述的－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

R²为氢原子、卤原子或卤代－C1－3烷基，

Rf为羟基－C1－6烷基，

n为0)；

(式中，

R¹为上述的－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

R²为氢原子、卤原子或卤代－C1－3烷基，

Rf为羟基－C1－6烷基，

n为0)；

(式中，

R¹为上述的－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

R²为氢原子、卤原子或卤代－C1－3烷基，

Rf为卤代－C1－3烷基，

n为0)；

(式中，

R¹为被上述的羟基－C1－6烷基取代的3～7元的单环的环杂链烷羰基，

R²为氢原子、卤原子或卤代－C1－3烷基)；或

(式中，R¹为被上述的羟基－C1－6烷基取代的3～7元的单环的环杂链烷羰基)。

通式(I)中，作为R、R¹及R²的更优选的组合，可举出以下组合：

(式中，R¹为氢原子)；

(式中，

R¹表示－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf表示被Rfa取代的甲基、或被Rfa取代的乙基，

Rfa为甲基吡唑基或噁二唑基，

n为0)；

(式中，

R¹为苯基、羟基－乙基、羟基－异丙基、甲氧基、异丙氧基、被甲基吡唑基取代的乙氧基、或被甲基磺酰基哌嗪基取代的正丙氧基)；

(式中，

R¹为羟基－异丙基、羟基－环丙基、羟基－环丁基、异丙氧基、被三唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的2－甲基丙氧基、被四唑基取代的2－甲基丙氧基、环丙基氨基磺酰基、2,2,2－三氟乙氧基羰基氨基、2,2,2－三氟乙基羰基氨基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

R²为氢原子、氟原子或氯原子，

Rf表示2,2－二氟乙基、2,2,2－三氟乙基、被Rfa取代的甲基、或被Rfa取代的乙基；

Rfa为三氟甲基噻唑基、噁二唑基、或三氟甲基噁二唑基，

n为0或1)；

(式中，

R¹为羟基－异丙基、1,4－氧杂氮杂环庚烷基磺酰基、或－(CH2) n－C(＝O)－NHRf，

R²为氢原子或三氟甲基，

Rf为2,2,2－三氟乙基或被Rfa取代的乙基，

Rfa为噁二唑基，

n为0)；

(式中，

R¹为羟基－异丙基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf为2,2－二氟乙基、2,2,2－三氟乙基、羟基－2－甲基丙基、羟基环己基、羟基环丙基甲基，

n为0)；

(式中，

R¹为－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf为羟基－2－甲基丙基，

n为0)；

(式中，

R¹为－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf为羟基－2－甲基丙基，

n为0)；

(式中，

R¹为－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf为2,2,2－三氟乙基，

n为0)；

(式中，

R¹为被羟基－异丙基取代的哌啶羰基)；或

(式中，

R¹为被羟基－异丙基取代的哌啶羰基)。

通式(I)中，作为R、R¹及R²的进一步优选的组合，可举出以下组合：

(式中，R¹为氢原子)；

(式中，R¹为异丙氧基、或被甲基磺酰基哌嗪基取代的正丙氧基)；

(式中，

R¹为上述的羟基－异丙基、被四唑基取代的2－甲基丙氧基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

R²为氢原子或氟原子，

Rf为2,2,2－三氟乙基、被三氟甲基噻唑基取代的甲基、被噁二唑基取代的乙基、被三氟甲基噁二唑基取代的乙基，

n为0)；

(式中，R¹为异丙氧基、或被四唑基取代的2－甲基丙氧基)；

(式中，R¹为1,4－氧杂氮杂环庚烷基磺酰基)；

(式中，

R¹为上述的羟基－异丙基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf为上述的羟基－2－甲基丙基，

n为0)；

(式中，

R¹为－(CH2)n－C(＝O)－NHRf，

Rf为羟基－2－甲基丙基，

n为0)；或

(式中，R¹为被羟基－异丙基取代的哌啶羰基)。

在优选的实施方式中，上述通式(I)中，

X为氯原子、溴原子或三氟甲基；

R为选自以下的组中的基团：

R¹为氢原子、苯基、羟基－C1－4烷基、羟基－C3－5环烷基、可以被Ra取代的C1－4烷氧基、C3－5环烷基氨基磺酰基、7元环的单环的杂环烷基磺酰基、氟－C1－3烷氧基羰基氨基、氟－C1－3烷基羰基氨基、被羟基－C1－4烷基取代的6元的单环的杂环链烷羰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf；

R²为氢原子、氟原子、氯原子或三氟甲基；

Ra为C1－4烷基吡唑基、三唑基、四唑基、或C1－4烷基磺酰基哌嗪基；

Rf为氟－C1－3烷基、羟基－C1－4烷基、羟基－C3－5环烷基、羟基－C3－5环烷基－C1－4烷基、或被Rfa取代的C1－4烷基；

Rfa为C1－4烷基吡唑基、氟－C1－3烷基噻唑基、噁二唑基、或氟－C1－3烷基噁二唑基；

n为0或1。

在更优选实施方式中，上述通式(I)中，

X为氯原子、溴原子或三氟甲基；

R为选自以下的组中的基团：

R¹为氢原子、苯基、羟基－乙基、羟基－异丙基、羟基－环丙基、羟基－环丁基、甲氧基、异丙氧基、被甲基吡唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的乙氧基、被三唑基取代的2－甲基丙氧基、被四唑基取代的2－甲基丙氧基、被甲基磺酰基哌嗪基取代的正丙氧基、环丙基氨基磺酰基、1,4－氧杂氮杂环庚烷基磺酰基、2,2,2－三氟乙氧基羰基氨基、2,2,2－三氟乙基羰基氨基、被羟基－异丙基取代的哌啶羰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf；

R²为氢原子、氟原子、氯原子或三氟甲基；

Rf为2,2－二氟乙基、2,2,2－三氟乙基、羟基－2－甲基丙基、羟基环己基、羟基环丙基甲基、被三氟甲基噻唑基取代的甲基、被甲基噻唑基取代的乙基、被噁二唑基取代的乙基、或被三氟甲基取代的乙基；

n为0或1。

进而，在优选的实施方式中，上述通式(I)中，

X为氯原子或三氟甲基；

R为选自以下的组中的基团：

R¹表示氢原子、羟基－异丙基、异丙氧基、被四唑基取代的2－甲基丙氧基、被甲基磺酰基哌嗪基取代的正丙氧基、1,4－氧杂氮杂环庚烷基磺酰基、被羟基－异丙基取代的哌啶羰基、或－(CH2)n－C(＝O)－NHRf；

R²为氢原子或氟原子；

Rf为2,2,2－三氟乙基、羟基－2－甲基丙基、被三氟甲基噻唑基取代的甲基、被噁二唑基取代的乙基、或被三氟甲基噁二唑基取代的乙基；

n为0。

作为本发明中的优选的四氢吡啶并嘧啶化合物的具体的实例，可举出以下的(1)～(19)中记载的化合物。

(1)4－(4－((1,2,4－噻二唑－5－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈(实施例1)

(2)4－(4－((4－异丙氧基苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈(实施例2)

(3)4－(4－((6－氟－5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈(实施例5)

(4)2－氯－4－(4－((6－(2－羟基丙烷－2－基)哒嗪－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈(实施例6)

(5)4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈(实施例7)

(6)2－氯－4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈(实施例9)

(7)4－(4－((6－(2－羟基丙烷－2－基)哒嗪－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈(实施例10)

(8)6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8,－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)烟酰胺(实施例11)

(9)4－(4－((6－异丙氧基吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈(实施例13)

(10)4－(4－((6－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈(实施例16)

(11)4－(4－((5－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈(实施例17)

(12)4－(4－((4－(3－(4－(甲基磺酰基)哌嗪－1－基)丙氧基)苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈(实施例18)

(13)4－(4－((5－((1,4－氧杂氮杂环庚烷－4－基)磺酰基)噻唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈(实施例20)

(14)6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2－羟基－2－甲基丙基)哒嗪－3－羧酰胺(实施例32)

(15)2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2－羟基－2－甲基丙基)嘧啶－5－羧酰胺(实施例34)

(16)6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－((4－(三氟甲基)噻唑－2－基)甲基)烟酰胺(实施例36)

(17)(R)－N－(1－(1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)－6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)烟酰胺(实施例38)

(18)(R)－6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(1－(5－(三氟甲基)－1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)烟酰胺(实施例40)

(19)4－(4－((5－(4－(2－羟基丙烷－2－基)哌啶－1－羰基)噁唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈(实施例42)

本发明的四氢吡啶并嘧啶化合物或其盐可以通过各种方法来制造。通式(I)表示的化合物可以按照通常公知的方法而制造。例如，通式(I)表示的化合物可以按照下述反应工序式1～6而制造。反应工序式1～6中，X、R、R¹、R²Rf及Ra与上述的定义相同。

反应工序式1

本反应工序式为由式(II)合成通式(I)的反应工序式。

(步骤1)

本工序是上述反应工序式1中所示的式(II)化合物的保护基P的脱保护的反应。作为脱保护的方法，可以通过通常公知的方法、例如Protective Groups in Organic Synthesis，T.W.Greene，John Wiley&Sons(1981年)中记载的方法、或以其为标准的方法来进行。作为保护基，可举出Boc基、苄氧基羰基及苄基。使用苄基作为保护基时，作为加氢分解的催化剂，可举出氢氧化钯、钯/碳、铂、阮内镍、氧化铂、铑－氧化铝等，优选为钯/碳。相对于该式(II)化合物1当量，试剂的使用量为0.001～10当量，优选为0.05～2当量。脱保护反应的温度为0～100℃，优选为40～80℃。通过本工序得到的式(III)化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制，或不进行分离精制而交付于下一工序。

(步骤2)

本工序是通过式(III)表示的胺与式(IV)表示的离去基团L¹取代的芳香环的亲核取代反应制造式(V)表示的化合物的工序。作为离去基团L¹，除氟、氯等卤原子之外，可举出：甲烷磺酰基氧基、对甲苯磺酰基氧基、三氟甲基磺酰基氧基等。作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如：甲苯、乙腈、苯、二噁烷、THF、DMSO、DMF、吡啶等、或其混合溶剂等，优选为DMSO。用于该反应的式(IV)表示的芳香环的当量相对于式(III)表示的胺1摩尔为0.1～过量摩尔，优选为0.5～3摩尔。该反应中可以使用碱，也可以不使用。在使用碱的情况下，碱可举出吡啶、DBU、碳酸钾、碳酸铯、叔胺等，优选为三乙基胺。该亲核取代反应的温度为0～200℃，优选为0～50℃。通过本工序得到的式(V)化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制，或不进行分离精制而交付于下一工序。

(步骤3)

本工序为将上述式(V)化合物的游离的羟基变换为离去基团L²的工序。作为离去基团L²，可举出与L¹同样的基团，优选卤原子。上述变换反应在无溶剂下或溶剂中进行。作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如DMF、NMP、DMA、甲苯、二氯乙烷、乙腈等。作为用于该反应的碱，可举出三乙基胺、二异丙基乙基胺、N,N－二甲基苯胺、碳酸氢钠等。用于该反应的卤化剂(例如磷酰氯、五氯化磷、三溴化磷)的量相对于该式(V)化合物1摩尔为0.5～20摩尔，优选为5～15摩尔。该变换反应的时间为0.1～48小时，优选为0.5～24小时。反应温度为0～200℃，优选为50～120℃。通过本工序得到的式(VI)化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制，或不进行分离精制而交付于下一工序。

(步骤4)

本工序是连结上述式(VI)化合物和式(VII)化合物，得到通式(I)的化合物的工序。本工序的反应在各种碱存在下、在适当的溶剂中使用金属催化剂和膦配体而进行。作为该金属催化剂，可使用具有各种各样的配体的金属复合体，可举出例如：四(三苯基膦)钯(0)、氯化双(三苯基膦)钯(II)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)、乙酸钯(II)等。作为膦配体，可举出dppf、Xantphos、XPhos等。作为本工序的反应中所使用的碱，可举出碳酸钾、碳酸铯、丁醇钠等。作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如二噁烷、乙酸乙酯、甲苯等。用于本工序的反应的金属催化剂的量相对于该式(VI)化合物1摩尔为0.005～10摩尔，优选为0.01～1摩尔。反应时间为0.1～48小时，优选为0.5～24小时。反应温度为0～200℃，优选为50～120℃。通过本工序得到的通式(I)的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制。

在本工序的其它方法中，通式(I)表示的化合物可以不使用该金属催化剂和膦配体，而仅使用碱而得到。作为碱，可举出碳酸钾等。碱的量相对于上述式(VI)化合物1摩尔为0.005～10摩尔，优选为1.0～5.0摩尔。本工序的反应中所使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如乙腈或二噁烷等。反应时间为0.1～48小时，优选为0.5～24小时。反应温度为0～200℃，优选为50～120℃。通过本工序得到的通式(I)的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制。

作为本工序的进一步其它方法，上述式(VI)化合物和式(VII)化合物的连结也可以在微波照射下进行。该情况下，就碱而言，可以使用本工序的上述的碱，也可以不使用。作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如乙腈等。反应时间为0.01～10小时，优选为0.1～1小时。反应温度为0～200℃，优选为100～200℃。通过本工序得到的通式(I)的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制。

进而，作为本工序的其它方法，上述式(VI)化合物和式(VII)化合物的连结可以不使用该金属催化剂和膦配体，而使用酸来进行。上述式(VII)化合物的当量相对于上述式(VI)化合物1摩尔为0.1～过量摩尔，优选为1～10摩尔。作为使用的酸，可举出对甲苯磺酸、樟脑磺酸、盐酸等。酸的量相对于上述式(VI)化合物1摩尔为0.005～过量摩尔，优选为0.1～10摩尔。本工序的反应中所使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如：叔丁醇、2－丙醇、THF、二噁烷等。反应时间为0.1～48小时，优选为0.1～24小时。反应温度为0～200℃，优选为50～180℃。通过本工序得到的通式(I)的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制。

反应工序式2

本反应工序式可以适用于通式(I)的R上所取代的R¹为－(CH2) n－C(＝O)－NHRf、或被羟基－C1－6烷基取代的3～7元的单环的含氮杂环烷基的情况。

(步骤5)

本工序是将式(I’)表示的化合物的酯基用通常公知的方法进行水解，得到式(VIII)表示的化合物的工序。上述式(I’)中，Ar为C6－14芳基、或5元或6元的杂芳基，n为0～3的整数，R²的定义与上述相同。式(I’)化合物可以按照上述反应工序式1的步骤而制备。作为保护基P’的脱保护的方法，可以通过通常公知的方法、例如上述的Protective Groups in Organic Synthesis，T.W.Greene，John Wiley&Sons(1981年)中记载的方法、或以其为标准的方法来进行。作为保护基P’，可举出甲基、乙基等。该情况下，优选在碱性条件下的脱保护，作为碱，可举出氢氧化钠、氢氧化钾等无机碱。该碱的使用量相对于式(I’)化合物1摩尔为1～100摩尔。作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如水、甲醇、乙醇、二乙醚、THF等。反应时间为0.1～100小时，优选为0.5～24小时。反应温度为0～120℃，优选为0～90℃。通过本工序得到的式(VIII)化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压干燥、结晶化、再沉淀、溶剂萃取、色谱法等进行分离精制，或不进行分离精制而交付于下一工序。

(步骤6)

本工序是通过将上述式(VIII)表示的化合物与式(IX)表示的胺进行缩合来合成通式(X)表示的化合物的工序。式(IX)中的－N(Rf¹)(Rf²)表示的基为－NHRf或被羟基－C1－6烷基取代的3～7元的单环的含氮杂环烷基。作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如DMF，甲苯、二氯甲烷、乙腈、THF、DMSO等，优选为DMF或甲醇。作为缩合剂，可举出DCC、WSC/1－羟基苯并三唑(以下HOBt)、DMT－MM、HATU等，优选为WSC/HOBt、DMT－MM或HATU。该缩合剂的当量数相对于该式(VIII)化合物1当量分别为0.2～5.0当量，优选为1.0～1.5当量。另外，根据需要可以使用DIPEA等碱。反应温度为0～100℃，优选为10～40℃。反应时间为0.1～24小时，优选为0.5～16小时。通过本工序得到的式(X)的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压干燥、结晶化、再沉淀、溶剂萃取、色谱法等进行分离精制。

反应工序式3

本反应工序式可以适用于通式(I)的R上所取代的R¹为卤代－C1－3烷基羰基氨基的情况。

(步骤7)

本工序为将式(I”)表示的化合物的硝基通过通常公知的接触还原法得到式(XI)表示的化合物的工序。式(I”)化合物可以按照上述反应工序式1的步骤而制备。作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如：甲醇、乙醇、1－丙醇、2－丙醇、叔丁醇、二甲氧基乙烷、二乙二醇二甲醚、二异丙醚、二乙醚、THF、二噁烷、乙酸乙酯、乙酸丁酯等，优选为甲醇或乙醇。作为本工序中使用的催化剂，可举出：钯/碳、氢氧化钯/碳、铂、阮内镍、氧化铂、铑/氧化铝等，优选为钯/碳。相对于该式(I”)化合物1当量，该催化剂的当量数为0.001～10当量，优选为0.01～5.0当量。还原反应的温度为0℃～100℃，优选为20℃～60℃。反应时间为0.1～72小时，优选为6～72小时。通过本工序得到的式(XI)的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制，或不进行分离精制而交付于下一工序。

(步骤8)

本工序为式(XI)表示的化合物和式(XII)表示的羧酸的酰胺化。Ree²表示卤代－C1－3烷基。作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如：DMF、甲苯、二氯甲烷、乙腈、THF、DMSO等，优选为DMF或甲醇。作为本工序中使用的缩合剂，可举出DCC、WSC/HOBt、DMT－MM、HATU等，优选为WSC/HOBt、DMT－MM或HATU。相对于式(XI)化合物1当量，该缩合剂的当量数分别为0.2～5.0当量，优选为1.0～1.5当量。另外，可以根据需要使用DIPEA等碱。酰胺化反应的温度为0～100℃，优选为10～40℃。反应时间为0.1～24小时，优选为0.5～16小时。通过本工序得到的式(XIII)的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制。

反应工序式4

本反应工序式可以适用于通式(I)的R上所取代的R¹为卤代－C1－3烷氧基羰基氨基的情况。Ree²的定义与上述的Ree²的定义相同。

(步骤9)

本工序是由式(VIII’)表示的化合物得到式(XV)表示的化合物的工序。本工序是式(VIII’)表示的化合物与式(XIV)表示的醇的Curtius重排反应。作为本工序中使用的碱，可举出例如三乙基胺、N,N－二异丙基胺等。作为碱的使用量，例如相对于该式(VIII’)化合物1当量，为1～10当量。作为叠氮化试剂，可举出叠氮化钠、DPPA等。作为该叠氮化试剂的使用量，相对于该式(VIII’)化合物1当量，为1～5当量。作为该式(XIV)表示的醇的使用量，相对于该式(VIII’)化合物1当量，通常为1～10当量，优选为2～5当量。作为本工序中使用的溶剂，可举出例如二氯甲烷、氯仿、THF，甲苯、二噁烷等。反应温度为0℃～200℃。反应时间为0～24小时。也可以根据需要在微波照射下进行反应。通过本工序得到的式(XV)的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制。

反应工序式5

本反应工序式可以适用于通式(I)的R上所取代的R¹是可以被Ra取代的C1－6烷氧基的情况。－OR³是可以被Ra取代的C1－6烷氧基。

(步骤10)

本工序为式(I”’)的保护基P”的脱保护反应。式(I”’)化合物可以按照上述反应工序式1的步骤而制备。作为使用的脱保护的方法，可以通过通常公知的方法、例如上述的Protective Groups in Organic Synthesis，T.W.Greene，John Wiley&Sons(1981年)中记载的方法、或以其为标准的方法来进行。作为保护基P”，可举出：苄氧基甲基(BOM)、甲氧基乙氧基甲基(MEM)、叔丁基、苄基等。在使用苄基作为保护基P”的情况下，作为加氢分解的催化剂，可举出：氢氧化钯、钯/碳、铂、阮内镍、氧化铂、铑－氧化铝等，优选为钯/碳。作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如：甲醇、乙醇、1－丙醇、2－丙醇、叔丁醇、二甲氧基乙烷、二乙二醇二甲醚、二异丙醚、二乙醚、THF、二噁烷、乙酸乙酯、乙酸丁酯等，优选为甲醇或乙醇。相对于该式(I”’)化合物1当量，该催化剂的使用量为0.001～10当量，优选为0.05～2当量。反应温度为0～100℃，优选为40～80℃。本工序中得到的式(XVI)表示的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制，或不进行分离精制而交付于下一工序。

(步骤11)

本工序是由上述式(XVI)化合物制造式(XVIII)表示的化合物的方法。本工序可以使用公知的方法、所谓的光延反应(Synthesis，1981,1－28)而进行。相对于该式(XVI)化合物1当量，用于本工序的式(XVII)表示的化合物的量为0.5～5当量，优选为1～3当量。作为用于本反应的偶氮化合物，可举出例如偶氮二羧酸二乙酯、偶氮二羧酸二异丙酯、1,1’－偶氮双(N,N－二甲基甲酰胺)等。相对于式(XVI)化合物1当量，所使用的该偶氮化合物的量为1～5当量，优选为1.1～3当量。作为用于本工序的膦化合物，可举出例如三苯基膦、三丁基膦等。相对于该式(XVI)化合物1当量，所使用的膦化合物的量为1～5当量，优选为1.1～3当量。作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如：THF、二噁烷、二乙醚、氯仿、二氯甲烷、甲苯、DMF、二甲基亚砜等，这些溶剂可以以适当的比例混合而使用。反应温度为室温至回流温度。反应时间为1～4小时。通过本工序得到的式(XVIII)的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、结晶化、再沉淀、色谱法等进行分离精制。

另外，本工序的反应可以使用(氰基亚甲基)三甲基正膦、(氰基亚甲基)三丁基正膦(角田试剂)等试剂而进行。相对于上述式(XVI)化合物1当量，所使用的该试剂的量为1～5当量，优选为1.1～3当量。作为用于反应的溶剂，可举出本工序的上述的溶剂。反应温度通常为室温至回流温度。反应时间为1～48小时。本工序中得到的式(XVIII)表示的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、再沉淀、溶剂萃取、结晶化、色谱法等进行分离精制。

反应工序式6

本反应工序式可以适用于通式(I)的R上所取代的R¹是可以被Ra取代的C1－6烷氧基中的、Ra为C1－6烷基磺酰基哌嗪基的情况。在此，作为C1－6烷氧基，例示正丙基。R⁷为C1－6烷基。

(步骤12)

本工序是式(XVIII’)表示的化合物的保护基P”’的脱保护的反应。作为使用的脱保护的方法，可以通过通常公知的方法，例如，上述的Protective Groups in Organic Synthesis，T.W.Greene，John Wiley&Sons(1981年)中记载的方法、或以其为标准的方法来进行。作为保护基P”’的种类，可举出：叔丁氧基羰基、对甲氧基苄氧羰基、三苯甲基等，优选列举叔丁氧基羰基。

在保护基P”’为叔丁氧基羰基的情况下，可以利用酸进行脱保护。此时，作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如：氯仿、二氯甲烷、二噁烷、THF、乙酸乙酯、甲醇、水等。另外，此时，作为本工序中使用的酸，可举出例如：盐酸、硫酸等无机酸、三氟乙酸、对甲苯磺酸等有机酸。反应温度为0～100℃，优选为室温～60℃。反应时间为1～48小时，优选为1～6小时。通过本工序得到的式(XIX)表示的化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、再沉淀、溶剂萃取、结晶化、色谱法等进行分离精制，或不进行分离精制而交付于下一工序。

(步骤13)

本工序是使用式(XIX)表示的化合物制造式(XXI)表示的化合物的方法。本工序的反应可以在非质子性溶剂中、在碱的存在下、使用式(XX)表示的磺酰氯而进行。作为使用的该式(XX)化合物的量，相对于式(XIX)化合物1当量，为0.5～5当量，优选为1～3当量。作为碱的种类，可举出：三乙基胺、二异丙基乙基胺、吡啶、DMAP、DBU等，优选为三乙基胺。作为本工序中使用的溶剂，只要对反应没有阻碍，就没有特别限定，可举出例如：THF、二噁烷、二乙醚、氯仿、二氯甲烷、甲苯、DMF等，优选为二氯甲烷。反应温度为0～100℃，优选为0～50℃。反应时间为0.5～48小时，优选为1～6小时。通过本工序得到的式(XXI)化合物可以通过公知的分离精制手段、例如浓缩、减压浓缩、再沉淀、溶剂萃取、结晶化、色谱法等进行分离精制。

上述的步骤中得到的上述通式(I)表示的四氢吡啶并嘧啶化合物(以下，有时也称为“本发明的式(I)化合物”)有时根据取代基的种类而产生光学异构体或几何异构体，但这些均包含在本发明的式(I)化合物中。该异构体可以被分离，或可以为异构体的混合物。另外，在上述通式(I)表示的四氢吡啶并嘧啶化合物中存在下述所示的互变异构体，但任一个互变异构体均包含在本发明的式(I)化合物中。

进而，本发明的式(I)化合物也包含以水合物为代表的溶剂合物、非晶形(非晶)或多晶形。

本发明的式(I)化合物可以用通常公知的方法形成盐。作为本发明的式(I)化合物的盐的形态，只要是上述的药学上可接受的盐的形态，则可以为任一种。

本发明的式(I)化合物或其盐可以使用通常公知的分离精制手段、例如浓缩、溶剂萃取、过滤、再结晶、各种色谱法等进行分离精制。

在将本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐作为医药使用时，根据预防或治疗的目的可以采用各种给药方式。作为该给药方式，可举出：口服及非口服给药方式、例如口服剂、注射剂、栓剂、涂布剂、贴附剂等，优选采用口服剂。这些给药方式分别可以通过本领域技术人员所公知惯用的制剂方法而制造。

上述医药可以为含有本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐的有效量及药学上可接受的载体的医药组合物。作为药学上可接受的载体，可使用作为制剂原料所惯用的各种有机或无机的载体物质，可举出例如：固体制剂中的赋形剂、润滑剂、粘结剂、崩解剂、液态制剂中的溶剂、助溶剂、助悬剂、等张剂、缓冲剂、稳定剂、pH调节剂、表面活性剂、湿润剂、保存剂、无痛化剂等。另外，该医药也可以根据需要含有防腐剂、抗氧化剂、着色剂、甜味剂、矫味/矫臭剂等制剂添加物。

作为药学上可接受的载体及制剂添加物，可以为该领域中通常所使用的物质，例如，作为赋形剂，可举出：乳糖、白糖、氯化钠、葡萄糖、淀粉、碳酸钙、高岭土、微结晶纤维素、硅酸等；作为粘结剂，可举出：水、乙醇、丙醇、单糖浆、葡萄糖液、淀粉液、明胶液、羧基甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基淀粉、甲基纤维素、乙基纤维素、虫胶、磷酸钙、聚乙烯基吡咯烷酮等；作为崩解剂，可举出：干燥淀粉、海藻酸钠、琼脂末、碳酸氢钠、碳酸钙、月桂基硫酸钠、硬脂酸甘油单酯、乳糖等；作为润滑剂，可举出：精制滑石、硬脂酸盐、硼砂、聚乙二醇等；作为着色剂，可举出：氧化钛、氧化铁等；作为矫味/矫臭剂，可举出：白糖、橙皮、柠檬酸、酒石酸等。

在制备口服用固体制剂的情况下，可以在本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐中加入赋形剂、及根据需要的粘结剂、崩解剂、润滑剂、着色剂、矫味/矫臭剂等之后、通过常规方法制造片剂、包衣片剂、顆粒剂、散剂、胶囊剂等。

在制备口服用液体制剂的情况下，可以在本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐中加入矫味/矫臭剂、缓冲剂、稳定剂、矫臭剂等，通过常规方法制造内服液剂、糖浆剂、酏剂等。该情况下，作为矫味/矫臭剂，可举出上述中所列举的矫味/矫臭剂；作为缓冲剂，可举出柠檬酸钠等；作为稳定剂，可举出黄蓍胶、阿拉伯胶、明胶等。

在制备注射剂的情况下，可以在本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐中添加pH调节剂、缓冲剂、稳定剂、等张剂、局部麻醉剂等，通过常规方法制造皮下、肌肉内或静脉内用注射剂等。该情况下，作为pH调节剂及缓冲剂，可举出：柠檬酸钠、乙酸钠、磷酸钠等；作为稳定剂，可举出：焦亚硫酸钠、EDTA、巯基乙酸、硫代乳酸等；作为局部麻醉剂，可举出：盐酸普鲁卡因、盐酸利多卡因等等；作为等张剂，可举出氯化钠、葡萄糖等。

在制备栓剂的情况下，可以在本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐中加入本领域技术人员中公知的制剂用载体，例如聚乙二醇、羊毛脂、可可豆脂、脂肪酸甘油三酯等，进一步根据需要加入Tween(注册商标)那样的表面活性剂等之后，通过常规方法来制造。

在制备软膏、霜剂、凝胶剂或糊剂等涂布剂的情况下，可以在本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐中根据需要添加通常所使用的基剂、稳定剂、湿润剂、保存剂等，通过常规方法进行混合并制剂化。作为基剂，可举出：液体石蜡、白色凡士林、白蜜蜡、辛基十二烷基醇、石蜡等；作为保存剂，可举出：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯等。

在制备贴附剂的情况下，可以在通常的支撑体上通过常规方法涂布上述软膏、霜剂、凝胶剂、糊剂等即可。作为支撑体，由棉、人造短纤维、化学纤维构成的纺织布、无纺布或软质氯乙烯、聚乙烯、聚氨酯等膜或发泡体片材是适合的。

应该配合于上述的各单位给药方式中的本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐的量根据应该适用其的对象的症状、体重、年龄、性别或其剂型等而不确定，一般而言，每单位给药方式换算为本发明的式(I)化合物的量，口服剂优选设为0.05～1000mg，注射剂优选设为0.01～500mg，栓剂优选设为1～1000mg。另外，上述给药方式的每1天的给药量因对象的种类、症状、体重、年龄、性别等而不同，不能一概确定，通常成人每1天换算为本发明的式(I)化合物的量设为0.05～5000mg、优选0.1～1000mg即可，优选将其分成1天1次或2～4次左右进行给药。予以说明，在本发明中，作为本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，可以单独使用该化合物或盐的任一种，也可以组合使用任意多种。

在本说明书中，所谓抗雄激素活性，为抑制雄激素的作用的活性，将具有该抗雄激素活性的化合物、组合物或医药称为抗雄激素剂。本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐作为雄激素受体(AR)拮抗剂起作用，通过抑制AR对雄激素的应答而发挥抗雄激素活性。另外，本发明的式(I)化合物或其盐也具有使AR表达降低的作用，通过该作用而可以产生抗雄激素活性。本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐通过该抗雄激素活性而发挥抑制各种疾病的产生或进行、肿瘤的产生、进行或者复发肿瘤的进行或复发的效果。

因此，在其它实施方式中，本发明提供一种抗雄激素剂，其含有本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。另外，本发明提供一种本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐在用于抗雄激素剂的制造中的用途。另外，本发明提供一种本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐的作为抗雄激素剂的用途。另外，本发明提供一种用于作为抗雄激素剂使用的本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

进而，在另一实施方式中，本发明提供一种医药，其含有本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。另外，本发明提供一种本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐在用于医药的制造中的使用。另外，本发明提供一种本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐的作为医药的用途。另外，本发明提供一种用于作为医药使用的本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

进而，在另一实施方式中，本发明提供一种医药组合物，其含有本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐及药学上可接受的载体。

在优选的实施方式中，上述医药或医药组合物作为抗雄激素剂被使用。另外，在优选的实施方式中，上述医药或医药组合物为AR活化相关的疾病的治疗剂。另外，在优选的实施方式中，上述医药或医药组合物为抗肿瘤剂。

此外，在另一实施方式中，本发明提供一种雄激素活性抑制方法，其包含将有效量的本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐投与对象。另外，本发明提供一种AR活化相关的疾病的治疗方法，其包含将有效量的本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐投与对象。另外，本发明提供一种肿瘤的治疗方法，其包含将有效量的本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐投与对象。

在本发明的雄激素活性抑制方法、AR活化相关的疾病的治疗方法及肿瘤的治疗方法中，作为上述对象，可举出需要该方法的人或非人动物。作为非人动物，可举出：猴子、黑猩猩等灵长类、小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠、狗、猫、牛、马、绵羊、山羊、猪等哺乳动物，但并不限定于这些。

投与上述对象的本发明的式(I)化合物或其药学上可接受的盐的有效量或给药计划可以根据该对象的种类、症状、体重、年龄、性别等由本领域技术人员适当确定。例如，该对象为成人的情况下，通常每1天换算为本发明的式(I)化合物的量为0.05～5000mg，优选为0.1～1000mg，优选将其分成1天1次或2～4次左右进行给药。

作为上述AR活化相关的疾病，可举出：肿瘤、转移性骨疾病、前列腺肥大症、寻常痤疮、皮脂溢、多毛症、雄激素性秃发、性早熟症、男性化症等。作为该肿瘤，可举出例如：前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、子宫癌、胰腺癌、肝细胞癌等，优选为前列腺癌。此外，在该肿瘤中也包含耐性化、复发或转移的肿瘤。因此，作为具体的前列腺癌的实例，除通常的前列腺癌之外，可举出去势抵抗性前列腺癌(CRPC)、激素耐性前列腺癌(HRPC)、PSA再燃前列腺癌、紫杉烷抵抗性前列腺癌、放射线耐性前列腺癌等，优选为去势抵抗性前列腺癌。

作为现有的抗雄激素剂，可举出例如比卡鲁胺等，但这些物质具有对AR的激动剂活性，其效果不能长期间持续，均在奏效2年～5年后可看到复发癌。另外，就CRPC而言，AR过量表达认为是复发的主要原因。本发明的式(I)化合物或其盐具有对AR的强力的拮抗活性，另一方面没有激动剂活性，在AR过量表达的细胞中显示很强的AR抑制作用。另外，本发明的式(I)化合物或其盐除了对AR的拮抗活性之外，具有使AR表达降低的作用，因此，对CRPC等AR过量表达的癌是有效的。

实施例

下面，通过实施例、试验例对本发明具体地进行说明，但这些实施例是出于例示的目的而记载的，并不限定本发明的范围。

＜制造实施例＞

在以下的实施例中，只要没有特殊说明，各种试剂使用市售品。在硅胶柱色谱法中，使用MORITEX公司制Purif-Pack(注册商标)SI、Biotage公司制KP-Sil(注册商标)Silica预填充柱、或Biotage公司制HP-Sil(注册商标)Silica预填充柱。在碱性硅胶柱色谱法中，使用MORITEX社制Purif-Pack(注册商标)NH或Biotage公司制KP-NH(注册商标)预填充柱。在碱性硅胶柱色谱法中，使用MORITEX公司制Purif-Pack(注册商标)NH或Biotage公司制KP-NH(注册商标)预填充柱。

反相分取HPLC柱色谱法在下述条件下实施。

柱：YMC公司制YMC-Actus Triart C18，

30×50mm，5μm

UV检测：254nm

柱流速：40mL/min

流动相：水/乙腈(0.1％甲酸)

注入量：1.0mL

梯度水/乙腈10％→60％(7分钟)

在¹H－NMR波谱测定中，使用AL400(400MHz；日本电子(JEOL))、Mercury400(400MHz；Agilent Technologies,Inc.)型波谱仪、或者装备有OMNMR探针(Protasis)的Inova400(400MHz；Agilent Technologies,Inc.)型波谱仪。¹H－NMR波谱将TMS(四甲基硅烷)作为内部标准进行测定，用δ值(ppm)表示化学位移。就化学位移而言，在括弧内表示质子数、吸收方式、偶合常数(J值)。关于吸收方式，使用以下的符号：s＝单峰、d＝双峰、t＝三重峰、q＝四重峰、sept＝七重峰、dd＝双二重峰、dt＝双三峰、dq＝双四重峰、m＝多重峰、br－s＝宽的单峰。

就波谱而言，使用低分解能质量分析计(以下记作LRMS)而进行，用电喷雾离子化法(以下记作ESI)进行测定。

关于化合物的结构式，有时使用以下的符号：Me＝甲基、Et＝乙基、tBu＝叔丁基、Ph＝苯基、Bn＝苄基、Ac＝乙酰基、Boc＝叔丁氧基羰基、TFA＝三氟乙酸、MsOH＝甲烷磺酸。

关于溶剂、试剂等，有时使用以下的简称：

DMSO＝二甲基亚砜；

DMF＝N,N－二甲基甲酰胺；

THF＝四氢呋喃；

dba＝二亚苄基丙酮；

dppf＝1,1－双(二苯基膦基)二茂铁；

XantPhos＝4,5－双(二苯基膦基)－9,9－二甲基呫吨；

Boc2O＝二碳酸二叔丁酯；

DMAP＝4－二甲基氨基吡啶；

TFA＝三氟乙酸；

DIPEA＝二异丙基乙基胺；

DMT－MM＝氯化4－(4,6－二甲氧基－1,3,5－三嗪－2－基)－4－甲基吗啉；

HATU＝O－(7－氮杂苯并三唑－1－基)－N,N,N’,N’－四甲基脲六氟磷酸酯；

HOBt＝1－羟基苯并三唑；

WSC＝EDCI＝1－乙基－3－(3－二甲基氨基丙基)碳化二亚胺；

DBU＝1,8－二氮杂双环[5,4,0]十一碳烯；

NMP＝N－甲基－2－吡咯烷酮；

DMA＝二甲基乙酰胺；

DCC＝N,N’－二环己基碳化二亚胺；

DPPA＝叠氮磷酸二苯酯；

LDA＝二异丙基胺基锂。

(参考例1－1)

4－(4－羟基－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

将市售的7－苄基－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－醇(12.6g)、10％钯/碳(2g)和甲酸铵(16.5g)悬浮于甲醇(200mL)，在60℃下搅拌一夜。就反应液而言，将不溶物进行硅藻土过滤后进行浓缩，不进行精制而用于下一反应。将该物质与4－氟－2－(三氟甲基)苄腈(10g)一起悬浮于DMSO(150mL)，在室温下搅拌一夜。在反应液中加入水(200mL)，将固体进行过滤分离。进一步用乙酸乙酯100mL进行悬浮清洗，并进行加热干燥，由此得到标记化合物(7.1g)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ12.35(1H，br－s)，8.09(1H，S)，7.85(1H，d，J＝8.0Hz)，7.39(1H，s)，7.32(1H，d，J＝8.0Hz)，4.34(2H，s)，3.71(2H，t，J＝4.0)，2.56(2H，t，J＝4.0Hz)；LRMS(ESI)m/z 321[M+H]⁺.

(参考例1－2)

4－(4－氯－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

将参考例1－1中得到的固体(12.3g)悬浮于二氯乙烷(60mL)，加入氧氯化磷(36mL)和三乙基胺(12mL)，在90℃下搅拌30分钟。将反应液加入水(300mL)中，利用以碳酸钠调整为pH7的氯仿(300mL×3次)进行萃取。用硫酸镁干燥后进行浓缩，用乙酸乙酯进行悬浮清洗，由此得到9.4g(72％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.89(1H，s)，7.89(1H，d，J＝8.0Hz)，7.47(1H，s)，7.40(1H，d，J＝8.0Hz)，4.73(2H，s)，3.90(2H，t，J＝4.0)，2.94(2H，t，J＝4.0Hz)；LRMS(ESI)m/z 339[M+H]⁺.

(参考例1－3)

2－氯－4－(4－氯－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

在DMSO(183mL)中加入市售的5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－醇盐酸盐(10.0g)和2－氯－4－氟苄腈(8.1g)、三乙基胺(22mL)，在室温下搅拌2天。加入水(400mL)，用浓盐酸调整为pH4～6，滤取析出的固体。将得到的固体用乙酸乙酯进行悬浮清洗后进行干燥，不进行精制而用于下一反应。将得到的固体(6.4g)在氧氯化磷(15mL)中回流10分钟。减压下浓缩后，添加水(400mL)，将水层用碳酸钠调整为pH8。滤取析出的固体并干燥后，用甲苯进行悬浮清洗，得到5.8g(2阶段收率47％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.87(1H，s)，7.70(1H，d，J＝8.9Hz)，7.32(1H，d，J＝2.3Hz)，7.12(1H，dd，J＝8.9，2.3Hz)，4.66(2H，s)，3.83(2H，t，J＝5.8Hz)，2.90(2H，t，J＝5.8Hz)；LRMS(ESI)m/z 306[M+H]⁺.

(参考例2－1)

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)烟酸甲酯

使参考例1－2中得到的化合物(10.0g)和6－氨基烟酸甲酯(4.49g)、Pd(dba)2(1.70g)、dppf(1.64g)、碳酸铯(24.1g)悬浮于二噁烷(120mL)，在氮氛围下、在80℃下搅拌一夜。将反应液自然冷却后，加入水，滤取产生的固体，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到9.42g(70％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.63(1H，s)，8.82(1H，s)，8.65(1H，s)，8.27－8.21(2H，m)，7.85(1H，d，J＝8.8Hz)，7.42(1H，d，J＝2.0Hz)，7.35(1H，dd，J＝8.8,2.0Hz)，4.57(2H，s)，3.85－3.80(5H，m)，2.91(2H，t，5.2Hz)；LRMS(ESI)m/z 455[M+H]⁺.

(参考例2－2)

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)烟酸

使参考例2－1中得到的化合物(9.21g)悬浮于甲醇(100mL)，加入5.0mol/L氢氧化钠水溶液(11mL)之后，在40℃下搅拌一夜。将反应液自然冷却后，使用5.0mol/L盐酸调整为pH3左右。滤取析出的固体，用蒸馏水清洗之后进行风干，由此得到8.24g(92％)的标记化合物。该化合物不进行精制，直接在下一工序中使用。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.59(1H，s)，8.83(1H，d，J＝2.0Hz)，8.67(1H，s)，8.27－8.23(2H，m)，7.87(1H，d，J＝8.8Hz)，7.45(1H，d，J＝2.0Hz)，7.38(1H，dd，J＝2.4,8.8Hz)，4.60(2H，s)，3.86(2H，t，J＝5.6Hz)，2.93(2H，t，J＝5.6Hz)；LRMS(ESI)m/z 441[M+H]⁺.

(参考例3)

2－(6－氨基吡啶－3－基)丙烷－2－醇

将6－氨基烟酸甲酯(5.0g)悬浮于THF(500mL)，在－78℃下添加甲基锂之后，一边进行自然升温，一边搅拌15小时。向反应混合物中加入冰水浴下饱和氯化铵水溶液，用氯仿/甲醇＝5/1萃取3次。将有机层合并，用无水硫酸钠进行干燥。过滤分离不溶物之后进行浓缩干固，将得到的固体用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物2.2g(44％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ7.97(1H，d，J＝2.4Hz)，7.43(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，6.36(1H，d，J＝8.8Hz)，5.66(2H，br－s)，4.82(1H，s)，1.36(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 153[M+H]⁺.

制造实施例A

2－(6－氨基哒嗪－3－基)丙烷－2－醇

(工序1)

6－氨基哒嗪－3－羧酸乙酯的合成

在乙醇(800mL)中缓慢地加入钠(7.2g)，在室温下搅拌2小时。确认全部的钠溶解之后，加入市售的6－氨基哒嗪－3－羧酸甲酯(40.0g)，进一步在室温下搅拌1小时。在反应液中滴加氯化氢 (4.0mol/L乙酸乙酯溶液，约80mL)，调整为pH5左右。将得到的反应液进行浓缩干固，进一步用蒸馏水进行悬浮清洗之后，进行滤取、风干。由此得到标记化合物39.9g(99％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ7.73(1H，d，J＝9.2Hz)，7.14(2H，br－s)，6.77(1H，d，J＝9.2Hz)，4.29(2H，q，J＝7.2Hz)，1.29(3H，t，J＝7.2Hz)；LRMS(ESI)m/z 168[M+H]⁺.

(工序2)

2－(6－氨基哒嗪－3－基)丙烷－2－醇的合成

按照参考例3，使用工序1中得到的化合物(4.00g)取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到作为油状物的1.21g(33％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ7.45(1H，d，J＝9.2Hz)，6.73(1H，d，J＝9.2Hz)，6.14(2H，br－s)，5.12(1H，s)，1.41(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 154[M+H]⁺.

制造实施例B

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)哒嗪－3－羧酸

(工序1)

甲基6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)哒嗪－3－羧酸酯的合成

按照参考例2－1，使用市售的6－氨基哒嗪－3－羧酸甲酯(100mg)取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到38mg(28％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.39(1H，s)，8.65(1H，s)，8.48(1H，d，J＝9.6Hz)，8.16(1H，d，J＝9.6Hz)，7.86(1H，d，J＝8.8Hz)，7.44(1H，d，J＝2.8Hz)，7.37(1H，dd，J＝8.8,2.0Hz)，4.60(2H，s)，3.91(3H，s)，3.85(2H，t，J＝6.0Hz)，2.97(2H，t，5.6Hz)；LRMS(ESI)m/z 456[M+H]⁺.

(工序2)

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)哒嗪－3－羧酸的合成

按照参考例2－2，使用工序1中得到的化合物(2.30g)取代参考例2－1中得到的化合物，进行同样的操作，由此得到2.04g(91％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.32(1H，s)，8.64(1H，s)，8.45(1H，d，J＝9.6Hz)，8.13(1H，d，J＝9.2Hz)，7.86(1H，d，J＝8.8Hz)，7.44(1H，d，J＝2.4Hz)，7.37(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，4.60(2H，s)，3.85(2H，t，J＝5.6Hz)，2.97(2H，t，6.0Hz)；LRMS(ESI)m/z 442[M+H]⁺.

制造实施例C

5－((7－4－氰基－3－(三氟甲基)苯基－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡嗪－2－羧酸

(工序1)

5－((7－4－氰基－3－(三氟甲基)苯基－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡嗪－2－羧酸甲酯的合成

按照参考例2－1，使用5－氨基吡嗪－2－羧酸甲酯(320mg)取代参考例1－2中得到的化合物(700mg)和6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到360mg(38％)的标记化合物(收率66％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ9.99(1H，s)，8.99(1H，s)，8.79(1H，s)，7.70(1H，d，J＝8.8Hz)，7.56(1H，s)，7.09(1H，dd，J＝2.6Hz，8.9Hz)，4.57(2H，s)，4.03(3H，s)，3.90(2H，t，J＝5.7Hz)，2.94(2H，t，5.5Hz)；LRMS(ESI)m/z 456[M+H]⁺.

(工序2)

5－((7－4－氰基－3－(三氟甲基)苯基－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡嗪－2－羧酸的合成

按照参考例2－2，对工序1中得到的化合物(360mg)进行同样的操作，由此得到310mg的标记化合物(收率89％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.06(1H，br－s)，9.39(1H，s)，8.92(1H，s)，8.70(1H，s)，7.89(1H，d，J＝8.8Hz)，7.47(1H，d，J＝2.2Hz，)，7.40(1H，dd，J＝2.7Hz，9.0Hz)，4.63(2H，s)，3.87(2H，t，J＝5.6Hz)，2.94(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 442[M+H]⁺.

制造实施例D

2－((7－4－氰基－3－(三氟甲基)苯基－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)嘧啶－5－羧酸

(工序1)

2－氨基嘧啶－5－羧酸甲酯的合成

将利用Synthesis，2002，6，720中记载的方法合成的3,3－二甲氧基－2－甲氧基羰基丙烯－1－醇·钠盐(3.0g)和胍·盐酸盐溶解于DMF(24mL)，在100℃下搅拌1小时。冷却至室温后，加入水，滤取析出的固体，减压干燥后，得到标记的化合物720mg(30％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.69(2H，s)，7.57(2H，s)，3.78(3H，s)；LRMS(ESI)m/z 154[M+H]⁺.

(工序2)

2－((7－4－氰基－3－(三氟甲基)苯基－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)嘧啶－5－羧酸甲酯的合成

按照参考例2－1，使用工序1中得到的2－氨基嘧啶－5－羧酸甲酯(164mg)取代参考例1－2中得到的化合物(300mg)和6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到128mg的标记化合物(收率32％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ9.11(2H，s)，8.94(1H，s)，8.01(1H，s)，7.71(1H，d，J＝8.8Hz)，7.23(1H，s)，7.07(1H，d，J＝8.8Hz)，4.63(2H，s)，3.97(3H，s)，3.78(2H，t，J＝5.7Hz)，2.92(2H，t，5.5Hz)；LRMS(ESI)m/z 456[M+H]⁺.

(工序3)

2－((7－4－氰基－3－(三氟甲基)苯基－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)嘧啶－5－羧酸的合成

按照参考例2－2，对工序2中得到的化合物(120mg)进行同样的操作，由此得到114mg的标记化合物(收率99％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.65(1H，s)，8.94(2H，m)，8.82(1H，s)，7.88(1H，d，J＝8.8Hz)，7.43(1H，s)，7.36(1H，d，J＝9.0Hz)，4.69(2H，s)，3.78(2H，t，J＝5.5Hz)，2.77(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 442[M+H]⁺.

制造实施例E

5－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－1,3,4－噻二唑－2－羧酸

按照参考例2－1～2－2，使用乙基5－氨基－1,3,4－噻二唑－2－羧酸酯(92mg)取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到141mg的标记化合物(2阶段收率72％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.80(1H，s)，7.88(1H，d，J＝8.4Hz)，7.46(1H，br－s)，7.39(1H，d，J＝8.4Hz)，4.62(2H，s)，3.88(2H，t，J＝5.2Hz)，2.97(2H，t，J＝5.2Hz)；LRMS(ESI)m/z 448[M+H]⁺.

实施例1

4－(4－((1,2,4－噻二唑－5－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

按照参考例2－1，使用5－氨基－1,2,4－噻二唑(45mg)取代参考例1－2中得到的化合物(100mg)和6－氨基烟酸甲酯，使用Pd2(dba)3(30mg)取代Pd(dba)2，使用Xantphos(17mg)取代dppf，进行同样的操作，由此得到10mg的标记化合物(收率8％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.88(1H，s)，8.31(1H，s)，7.71(1H，d，J＝8.8Hz)，7.26(1H，s)，7.10(1H，d，J＝8.8Hz)，4.59(2H，s)，3.89(2H，t，J＝5.9Hz)，2.96(2H，t，J＝5.9Hz)；LRMS(ESI)m/z 404[M+H]⁺.

实施例2

4－(4－((4－异丙氧基苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

将参考例1－2中得到的化合物(19mg)和4－异丙氧基苯胺(10mg)溶解于乙腈(1.5mL)，在微波照射下于180℃下使其反应10分钟。将溶剂浓缩后，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(17mg，60％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.55(1H，s)，7.69(1H，d，J＝8.7Hz)，7.45－7.36(2H，m)，7.24(1H，d，J＝2.4Hz)，7.06(1H，dd，J ＝8.7,2.4Hz)，6.96－6.88(2H，m)，6.31(1H，s)，4.53(1H，sept，J＝6.1Hz)，4.48(2H，s)，3.87(2H，t，J＝6.1Hz)，2.75(2H，t，J＝5.7Hz)，1.35(6H，d，J＝6.1Hz)；LRMS(ESI)m/z 454[M+H]⁺.

实施例3

4－(4－((4－甲氧基苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

将参考例1－2中得到的固体(600mg)和对茴香胺(262mg)悬浮于乙腈(12mL)，在微波照射下于180℃下搅拌20分钟。将得到的反应液进行浓缩干固，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到555mg的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.89(1H，br－s)，8.68(1H，s)，7.96(1H，d，J＝8.0Hz)，7.48－7.42(3H，m)，7.37(1H，dd，J＝8.0，4.0Hz)，6.99(1H，d，J＝20.0Hz)，4.68(2H，s)，3.93(2H，t，J＝4.0Hz)，3.17(3H，s)，2.83(2H，t，4.0Hz)；LRMS(ESI)m/z 426[M+H]⁺.

实施例4

4－(4－((1,1’－联苯)－3－基氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

将参考例1－2中得到的固体(100mg)和3－氨基联苯(125mg)悬浮于乙腈(2.0mL)，加入碳酸钾(182mg)，在80℃下搅拌8小时。将得到的反应液进行浓缩干固，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到15mg的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.63(1H，s)，8.46(1H，s)，7.95(1H，t，J＝2.0Hz)，7.87(1H，d，J＝9.3Hz)，7.75(1H，d，J＝8.3Hz)，7.67－7.62(2H，m)，7.51－7.33(7H，m)，4.53(2H，s)，3.91(2H，t，J＝5.6Hz)，2.84(2H，t，5.6Hz)；LRMS(ESI)m/z 472[M+H]⁺.

实施例5

4－(4－((6－氟－5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

5－溴－6－氟吡啶－2－胺的合成

将6－氟吡啶－2－胺(2.40g)溶解于乙腈(45mL)，在遮光下、冰冷下加入N－溴琥珀酰亚胺(3.81g)，在遮光下、在室温下搅拌3昼夜。将反应液浓缩干固之后，将得到的固体用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到3.22g(79％)的标记化合物。

¹H－NMR(CDCl3)δ7.61(1H，t)，6.27(1H，dd，J＝8.4,0.8Hz)，4.63(2H，br－s)；LRMS(ESI)m/z 191[M+H]⁺.

(工序2)

6－氨基－2－氟烟酸甲酯的合成

将工序1中得到的固体(500mg)、乙酸钯(II)(118mg)、dppf(290mg)、三乙基胺(1.1mL)悬浮于甲醇(10mL)、N,N－二甲基甲酰胺(30mL)，在一氧化碳氛围下(0.4MPa)于75℃下搅拌18小时。将反应液进行硅藻土过滤之后，进行减压浓缩。将得到的油状物溶解于乙酸乙酯之后，用蒸馏水、饱和食盐水清洗，用无水硫酸钠进行干燥。将不溶物过滤分离之后，进行浓缩干固，将得到的固体用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到133mg(30％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ7.91(1H，dd、J＝10.0，8.4Hz)，7.22(2H，br－s)，6.34(1H，dd、J＝8.8,2.0Hz)，3.73(3H，s)；LRMS(ESI)m/z 171[M+H]⁺.

(工序3)

2－(6－氨基－2－氟吡啶－3－基)丙烷－2－醇的合成

将工序2中得到的固体(200mg)溶解于四氢呋喃(4mL)，在冰冷下加入甲基溴化镁(3.0mol/L四氢呋喃溶液，1.96mL)，搅拌5小时。在反应液中加入饱和氯化铵水溶液之后，用乙酸乙酯萃取。将有机层用蒸馏水、饱和食盐水清洗，用无水硫酸镁进行干燥。将不溶物过滤分离之后，进行减压浓缩，将到的油状物用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到作为油状物的32mg(16％)的标记化合物。该化合物不进行进一步的精制，直接在下一工序中使用。

LRMS(ESI)m/z 171[M+H]⁺.

(工序4)

4－(4－((6－氟－5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

按照参考例2－1，使用工序3中得到的油状物取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到25mg(30％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.25(1H，s)，8.56(1H，s)，8.04－7.97(2H，m)，7.83(1H，d，J＝8.8Hz)，7.41(1H，d，J＝2.4Hz)，7.34(1H，dd，J＝8.8,2.0Hz)，5.32(1H，s)，4.53(2H，s)，3.82(2H，t，J＝5.2Hz)，2.84(2H，t，5.6Hz)，1.44(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 473[M+H]⁺.

实施例6

2－氯－4－(4－((6－(2－羟基丙烷－2－基)哒嗪－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

按照参考例2－1，使用参考例1－3中得到的固体(1.85g)取代参考例1－2中得到的化合物，另外，使用制造实施例A中得到的油状物(975mg)取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到650mg(收率25％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.74(1H，s)，8.52(1H，s)，8.19(1H，d，J＝9.2Hz)，7.84(1H，d，J＝9.6Hz)，7.67(1H，d，J＝8.8Hz)，7.30(1H，d，J＝2.4Hz)，7.11(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，5.41(1H，s)，4.50(2H，s)，3.80(2H，t，J＝5.2Hz)，2.89(2H，t，J＝5.2Hz)，1.51(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 422[M+H]⁺.

实施例7

4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

按照参考例2－1，使用参考例3中得到的固体(25mg)取代参考例1－2中得到的固体(50mg)和6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到17mg(26％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.04(1H，s)，8.53(1H，s)，8.41(1H，d，J＝2.4Hz)，8.02(1H，d，J＝8.5Hz)，7.86(1H，d，J＝8.8Hz)，7.82(1H，dd，J＝8.5,2.4Hz)，7.43(1H，d，J＝2.4Hz)，7.37(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，5.14(1H，s)，4.54(2H，s)，3.85(2H，t，J＝5.6Hz)，2.86(2H，t，5.4Hz)，1.45(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 455[M+H]⁺.

实施例8

4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)－4－(三氟甲基)噻唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

2－((叔丁氧基羰基)氨基)－4－(三氟甲基)噻唑－5－羧酸乙酯的合成

使2－氨基－4－(三氟甲基)噻唑－5－羧酸乙酯(1.0g)溶解于THF，加入Boc2O(1.0g)、DMAP(25mg)，在60℃下搅拌1小时。将反应液进行浓缩干固，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(1.14g，80％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.63(1H，br－s)，4.36(2H，q，J＝7.1Hz)，1.55(9H，s)，1.36(3H，t，J＝7.1Hz)；LRMS(ESI)m/z 285[M－叔丁基+H]⁺.

(工序2)

叔丁基(5－(2－羟基丙烷－2－基)－4－(三氟甲基)噻唑－2－基)氨基甲酸酯的合成

使工序1中得到的化合物(450mg)溶解于THF，在氩气氛围下于－78℃下滴加甲基锂(3.0mol/L二乙氧基甲烷溶液；1.76mL)，搅拌40分钟。滴加饱和氯化铵水溶液，用乙酸乙酯萃取，用饱和食盐水清洗。用硫酸钠干燥后进行浓缩，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(410mg，95％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.05(1H，br－s)，2.36(1H，s)，1.71(6H，s)，1.51(9H，s)；LRMS(ESI)m/z 271[M－叔丁基+H]⁺.

(工序3)

2－(2－氨基－4－(三氟甲基)噻唑－5－基)丙烷－2－醇的合成

使工序2中得到的化合物(250mg)溶解于二氯甲烷(5mL)，加入TFA(1mL)，在0℃下搅拌60小时，在室温下搅拌7小时。滴加饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。用硫酸钠干燥后进行浓缩，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(50mg，29％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ4.89(2H，br－s)，2.31(1H，s)，1.68(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 227[M+H]⁺.

(工序4)

4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)－4－(三氟甲基)噻唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

按照参考例2－1，使用工序3中得到的化合物(37mg)取代6－氨基烟酸甲酯，取代在80℃下搅拌一夜，而在微波照射下于150℃下使其反应25分钟，进行同样的操作，由此得到标记化合物(48mg，62％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ11.29(1H，s)，8.73(1H，s)，7.87(1H，d，J＝8.8Hz)，7.46(1H，d，J＝2.4Hz)，7.38(1H，dd，J＝2.4,8.8Hz)，6.14(1H，s)，4.59(2H，s)，3.86(2H，t，J＝5.2Hz)，2.92(2H，t，J＝5.2Hz)，1.58(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 529[M+H]⁺.

实施例9

2－氯－4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

按照参考例2－1，使用参考例1－3中得到的化合物(3.0g)取代参考例1－2中得到的化合物，另外，使用参考例3中得到的化合物(1.59g)取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到标记化合物(1.0g，23％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.04(1H，s)，8.53(1H，s)，8.42(1H，d，J＝2.6Hz)，8.03(1H，d，J＝8.8Hz)，7.83(1H，dd，J＝2.6,8.8Hz)，7.69(1H，d，J＝8.8Hz)，7.31(1H，d，J＝2.6Hz)，7.11(1H，dd，J＝2.6,8.8Hz)，5.14(1H，s)，4.48(2H，s)，3.80(2H，t，J＝5.7Hz)，2.85(2H，t，J＝5.7Hz)，1.46(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 421[M+H]⁺.

实施例10

4－(4－((6－(2－羟基丙烷－2－基)哒嗪－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

按照参考例2－1，使用制造实施例A中得到的化合物(30mg)取代6－氨基烟酸甲酯，取代在80℃下搅拌一夜，而在微波照射下于150℃下使其反应25分钟，进行同样的操作，由此得到标记化合物(30mg，36％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.74(1H，s)，8.52(1H，s)，8.19(1H，d，J＝9.2Hz)，7.88－7.81(1H，m)，7.43(1H，d，J＝2.2Hz)，7.37(1H，dd，J＝2.2,8.8Hz)，5.40(1H，s)，4.56(2H，s)，3.87 (2H，t，J＝5.7Hz)，2.91(2H，t，J＝5.7Hz)，1.51(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 456[M+H]⁺.

实施例11

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8,－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)烟酰胺

使参考例2－2中得到的化合物(8.24g)和DMT－MM(10.36g)悬浮于甲醇(20mL)、N,N－二甲基甲酰胺(40mL)，加入2,2,2－三氟乙基胺(3.71g)之后，在室温下搅拌一夜。在反应液中加入蒸馏水，用乙酸乙酯萃取3次。将有机层合并，用蒸馏水、饱和食盐水清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥。将不溶物过滤分离之后，进行浓缩干固，将得到的固体用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到6.80g(70％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.53(1H，s)，9.13(1H，t，J＝6.2Hz)，8.84－8.81(1H，m)，8.64(1H，s)，8.27－8.20(1H，m)，7.85(1H，d，J＝8.8Hz)，7.43(1H，d，J＝2.6Hz)，7.36(1H，dd，J＝9.0，2.4Hz)，4.57(2H，s)，4.15－4.04(2H，m)，3.84(2H，t，J＝6.0Hz)，2.91(2H，t，5.2Hz)；LRMS(ESI)m/z 522[M+H]⁺.

实施例12

4－(4－((5－(1－羟基环丙基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

1－(6－氯吡啶－3－基)环丙醇的合成

使甲基6－氯烟酰胺(1g)悬浮于二乙醚(20mL)，在氮氛围下在室温下加入四异丙醇钛(1.76mL)并搅拌30分钟。将反应溶液冷却至－78℃之后，加入乙基溴化镁(3M，6.8mL)，在－78℃下搅拌4小时。进一步在室温下搅拌一夜，在反应溶液中加入水，用氯仿萃取3次。用硫酸钠干燥后进行浓缩，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到作为油状物的标记化合物(283mg，29％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ9.33(1H，d，J＝2.6Hz)，7.69(1H，dd，J＝8.1,2.6Hz)，7.28(1H，d，J＝8.1Hz)，0.95(4H，t，J＝7.3Hz)；LRMS(ESI)m/z 170[M+H]⁺.

(工序2)

1－(6－氨基吡啶－3－基)环丙醇的合成

使工序1中得到的化合物(283mg)和二苯甲酮亚胺(363mg)、Pd2(dba)3(76mg)、XantPhos(145mg)及碳酸铯(761mg)溶解于THF(10mL)，在60℃下搅拌3天。过滤反应溶液之后，将残渣用乙酸乙酯清洗，其后将滤液进行减压浓缩。将得到的残渣悬浮于THF(5mL)，加入2N盐酸，在室温下搅拌2小时。在反应溶液中加入饱和碳酸氢钠水溶液，用氯仿萃取3次，用硫酸钠干燥后进行浓缩，将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(98mg，39％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.71(1H，d，J＝2.3Hz)，8.03(1H，dd，J＝8.6,2.3Hz)，6.50(1H，d，J＝8.6Hz)，1.22(4H，t，J＝7.3Hz)；LRMS(ESI)m/z 151[M+H]⁺.

(工序3)

4－(4－((5－(1－羟基环丙基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

按照参考例2－1，使参考例1－2中得到的化合物(50mg)和工序2中得到的化合物(27mg)反应，由此得到标记化合物(9.0mg，13％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.61(1H，s)，8.89(1H，d，J＝1.9Hz)，8.65(1H，s)，8.27(1H，dd，J＝8.8,1.9Hz)，8.22(1H，d，J＝9.1Hz)，7.86(1H，d，J＝9.1Hz)，7.43(1H，d，J＝2.3Hz)，7.36(1H，dd，J＝8.8,2.3Hz)，4.58(2H，s)，3.84(2H，t，J＝5.6Hz)，2.91(2H，t，J＝5.6Hz)，1.07(4H，t，J＝7.3Hz)；LRMS(ESI)m/z 453[M+H]⁺.

实施例13

4－(4－((6－异丙氧基吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

按照参考例2－1，使用6－异丙氧基吡啶－3－胺(54mg)取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到43mg(32％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.64(1H，s)，8.35(1H，s)，8.28(1H，d，J＝2.9Hz)，7.85(2H，m)，7.43(1H，d，J＝2.6Hz)，7.36(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，6.72(1H，d，J＝8.8Hz)，5.18(1H，quin，J＝6.1Hz)，4.49(2H，s)，3.88(2H，t，J＝5.7Hz)，2.76 (2H，t，5.5Hz)，1.26(6H，d，J＝6.2Hz)；LRMS(ESI)m/z 455[M+H]⁺.

实施例14

4－(4－((4－(2－(1－甲基－1H－吡唑－5－基)乙氧基)苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

2－(1－甲基－1H－吡唑－5－基)乙醇的合成

使1－甲基－1H－吡唑(3.57g)溶解于THF(50mL)，在－78℃下加入叔丁基锂(30.5mL，1.6mol/L戊烷溶液)，在氮氛围下于－60℃下搅拌30分钟，于－10℃下搅拌40分钟。于－10℃下在反应溶液中滴加环氧乙烷(2.42g)的THF溶液(50mL)。将反应溶液在室温下搅拌一夜后，加入饱和氯化铵水溶液，用氯仿萃取3次。将有机层用硫酸钠干燥后进行浓缩，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(2.42g，45％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ7.24(1H，d，J＝1.8Hz)，6.02(1H，d，J＝1.8Hz)，4.76(1H，t，J＝5.3Hz)，3.71(3H，s)，3.60(2H，td，J＝6.9，5.3Hz)，2.74(2H，t，J＝6.9Hz)；LRMS(ESI)m/z 127[M+H]⁺.

(工序2)

4－(4－((4－(苄氧基)苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

按照参考例2－1，使用4－(苄氧基)苯胺(706mg)取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到标记的化合物(1.39g，94％)。

¹H－NMR(MeOH－d4)δ8.30(1H，s)，7.76(1H，d，J＝9.0Hz)，7.47－7.24(9H，m)，7.02－6.97(2H，m)，5.09(2H，s)，4.45(2H，s)，3.89(2H，t，J＝5.8Hz)，2.80(2H，t，J＝5.8Hz)；LRMS(ESI)m/z 502[M+H]⁺.

(工序3)

4－(4－((4－羟基苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

使工序2中得到的化合物(1.39g)和10％钯/碳(含水50％，300mg)、甲酸铵(872mg)悬浮于甲醇(30mL)，在60℃下搅拌一夜。将反应液过滤后，将残渣用氯仿－甲醇清洗，其后加入水，用氯仿－甲醇(3︰1)萃取4次。用硫酸钠干燥后进行浓缩，得到标记化合物(971mg，85％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.25(1H，br－s)，8.43(1H，s)，8.33(1H，s)，7.87(1H，d，J＝8.8Hz)，7.46－7.30(4H，m)，6.73(1H，d，J＝8.3Hz)，4.48(2H，s)，3.88(2H，t，J＝5.6Hz)，2.75(2H，t，J＝5.6Hz)；LRMS(ESI)m/z 412[M+H]⁺.

(工序4)

4－(4－((4－(2－(1－甲基－1H－吡唑－5－基)乙氧基)苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

使工序3中得到的化合物(802mg)和氰基亚甲基三丁基正膦(角田试剂，565mg)、工序1中得到的2－(1－甲基－1H－吡唑－5－基)乙醇(246mg)溶解于甲苯(10mL)－四氢呋喃(8mL)，在95℃下搅拌一夜。将溶剂浓缩后，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(724mg，71％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.55(1H，s)，7.69(1H，d，J＝8.8Hz)，7.47－7.39(3H，m)，7.24(1H，d，J＝2.4Hz)，7.06(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，6.96－6.90(2H，m)，6.32(1H，br－s)，6.14(1H，d，J＝1.5Hz)，4.49(2H，s)，4.22(2H，t，J＝6.6Hz)，3.89(3H，s)，3.87(2H，t，J＝5.6Hz)，3.13(2H，t，J＝6.6Hz)，2.76(2H，t，J＝5.6Hz)；LRMS(ESI)m/z 520[M+H]⁺.

实施例15

4－(4－((6－(2－(1H－1,2,3－三唑－1－基)乙氧基)吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

2－(2－(1H－1,2,3－三唑－1－基)乙氧基)－5－硝基吡啶的合成

使2－氯－5－硝基吡啶(300mg)溶解于THF，在0℃下加入氢化钠(151mg，60％)并搅拌10分钟，进一步加入2－(1H－1,2,3三唑－1－基)乙醇之后，在0℃下搅拌2小时。在反应溶液中加入水之后，用乙酸乙酯萃取3次，将有机层用水和饱和食盐水清洗后，用硫酸钠干燥后进行浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(376mg，90％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.05(1H，d，J＝2.9Hz)，8.47(1H，dd，J＝9.2,2.9Hz)，8.20(1H，s)，7.73(1H，s)，7.07(1H，d，J＝9.2Hz)，4.87－4.78(4H，m)；LRMS(ESI)m/z 236[M+H]⁺.

(工序2)

6－(2－(1H－1,2,3－三唑－1－基)乙氧基)吡啶－3－胺的合成

将工序1中得到的化合物(270mg)溶解于甲醇(8mL)后，加入10％钯/碳(135mg，含水50％)，在氢氛围下、在大气压下搅拌一夜。将反应溶液用Hyflo Super-Cel过滤后，将溶剂进行浓缩，由此得到作为无色油状物的标题化合物(200mg)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.11(1H，d，J＝1.0Hz)，7.70(1H，d，J＝1.0Hz)，7.46(1H，d，J＝2.9Hz)，6.97(1H，dd，J＝8.4,2.9Hz)，6.49(1H，d，J＝8.4Hz)，4.77(2H，s)，4.70(2H，t，J＝5.3Hz)，4.48(2H，t，J＝5.3Hz)；LRMS(ESI)m/z 206[M+H]⁺.

(工序3)

4－(4－((6－(2－(1H－1,2,3－三唑－1－基)乙氧基)吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

按照参考例2－1，使参考例1－2中得到的化合物(50mg)和工序2中得到的化合物(36mg)反应，由此得到标记化合物(28mg，37％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.69(1H，s)，8.38(1H，s)，8.33(1H，d，J＝2.6Hz)，8.19(1H，s)，7.92(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，7.87(1H，d，J＝8.8Hz)，7.73(1H，s)，7.44(1H，d，J＝2.2Hz)，7.38(1H，dd，J＝8.8,2.2Hz)，6.79(1H，d，J＝8.8Hz)，4.79(2H，t，J＝5.2Hz)，4.65(2H，t，J＝5.2Hz)，4.51(2H，s)，3.89(2H，t，J＝5.6Hz)，2.78(2H，t，J＝5.6Hz)；LRMS(ESI)m/z 508[M+H]⁺.

实施例16

4－(4－((6－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙烷－1－醇的合成

将2－氨基－2－甲基丙烷－1－醇(30g)、原甲酸三乙酯(64.8g)和叠氮化钠(26.3g)悬浮于乙酸(150mL)，在回流条件下搅拌一夜。在反应溶液中加入浓盐酸(40mL)，通过过滤除去生成的不溶物。将滤液通过减压浓缩而除去溶剂之后，将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到固体。将得到的固体悬浮于甲苯之后进行过滤，用甲苯清洗后，在减压下进行干燥，由此得到标记化合物(28.5g，60％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.39(1H，s)，5.24(1H，t，J＝5.6Hz)，3.59(2H，d，J＝5.6Hz)，1.56(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 143[M+H]⁺.

(工序2)

6－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－3－胺的合成

按照实施例15的工序1、工序2，使用工序1中得到的2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙烷－1－醇(2.82g)取代2－(1H－1,2,3三唑－1－基)乙醇，进行同样的操作，由此得到标记化合物(3.84g，2阶段收率86％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.54(1H，s)，7.42(1H，d，J＝2.9Hz)，6.96(1H，dd，J＝8.8,2.9Hz)，6.46(1H，d，J＝8.8Hz)，4.79(2H，br－s)，4.40(2H，s)，1.72(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 235[M+H]⁺.

(工序3)

4－(4－((6－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

按照参考例2－1，使参考例1－2中得到的化合物(2.0g)和工序2中得到的化合物(1.52g)反应，由此得到标记化合物(1.49g，47％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.60(1H，s)，8.68(1H，s)，8.39(1H，s)，8.27(1H，d，J＝2.7Hz)，7.92(1H，dd，J＝8.8,2.7Hz)，7.87(1H，d，J＝8.8Hz)，7.44(1H，d，J＝2.5Hz)，7.38(1H，dd，J＝9.1,2.5Hz)，6.75(1H，d，J＝9.1Hz))，4.57(2H，s)，4.50(2H，br－s)3.89(2H，t，J＝5.6Hz)，2.77(2H，t，J＝5.6Hz)1.76(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 537[M+H]⁺.

实施例17

4－(4－((5－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

2－溴－5－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶的合成

使实施例16的工序1中得到的2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙烷－1－醇(3.27g)和6－溴吡啶－3－醇(4.00g)和氰基亚甲基三丁基正膦(角田试剂，9.99g)溶解于甲苯(100mL)，在回流下搅拌一夜。将溶剂浓缩后，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(5.08g，74％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.60(1H，s)，8.08(1H，d，J＝3.3Hz)，7.53(1H，d，J＝8.8Hz)，7.36(1H，dd，J＝8.8,3.3Hz)，4.39(2H，s)，1.76(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 298[M+H]⁺.

(工序2)

叔丁基(5－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－2－基)氨基甲酸酯的合成

使工序1中得到的化合物(4g)和叔丁基氨基甲酸酯(4.72g)、Pd2(dba)3(1.23g)、XantPhos(2.33g)及叔丁醇钠(2.58g)溶解于二噁烷(100mL)，在回流下搅拌一夜。在反应溶液中加入水，用氯仿萃取3次，用硫酸钠干燥后进行浓缩，将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(3.36g，74％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.59(1H，s)，9.58(1H，br－s)，7.89(1H，d，J＝3.0Hz)，7.66(1H，d，J＝9.1Hz)，7.33(1H，dd，J＝9.1,3.0Hz)，4.32(2H，s)，1.75(6H，s)，1.44(9H，s)；LRMS(ESI)m/z 335[M+H]⁺.

(工序3)

5－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－2－胺的合成

使工序2中得到的化合物(185mg)溶解于4N盐酸－二噁烷溶液(3mL)，在回流下搅拌一夜。在反应溶液中加入饱和碳酸氢钠水溶液，用氯仿萃取3次，用硫酸钠干燥后进行浓缩，由此得到作为黄色油状物质的标记化合物(130mg，100％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.60(1H，s)，7.56(1H，d，J＝3.0Hz)，7.01(1H，dd，J＝8.9，3.0Hz)，6.36(1H，d，J＝8.9Hz)，5.52(2H，br－s)，4.18(2H，s)，1.76(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 235[M+H]⁺.

(工序4)

4－(4－((5－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

按照参考例2－1，使参考例1－2中得到的化合物(1.6g)和工序3中得到的化合物(1.14g)反应，由此得到标记化合物(0.80g，32％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.62(1H，s)，9.02(1H，s)，8.49(1H，s)，8.01(1H，d，J＝3.1Hz)，7.99(1H，d，J＝9.1Hz)，7.86(1H，d，J＝8.8Hz)，7.46－7.34(3H，m)，4.53(2H，br－s)， 4.37(2H，s)，3.85(2H，t，J＝5.7Hz)，2.84(2H，t，J＝5.7Hz)1.77(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 537[M+H]⁺.

实施例18

4－(4－((4－(3－(4－(甲基磺酰基)哌嗪－1－基)丙氧基)苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

叔丁基4－(3－(4－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)苯氧基)丙基)哌嗪－1－羧酸酯的合成

按照实施例14(工序4)，使用叔丁基4－(3－羟基丙基)哌嗪－1－羧酸酯(65mg)取代2－(1－甲基－1H－吡唑－5－基)乙醇，进行同样的操作，由此得到标记化合物(140mg，92％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.61(1H，s)，7.69(1H，d，J＝8.8Hz)，7.34－7.31(1H，m)，7.29－7.22(2H，m)，7.06(2H，dd，J＝8.8,2.7Hz)，6.70(1H，d，J＝8.3,2.2Hz)，6.50(1H，s)，4.49(2H，s)，4.05(2H，t，J＝6.2Hz)，3.87(2H，t，J＝5.6Hz)，3.48－3.38(4H，m)，2.79(2H，t，J＝5.6Hz)，2.54(2H，t，J＝7.2Hz)，2.46－2.35(4H，m)，2.04－1.92(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 638[M+H]⁺.

(工序2)

4－(4－((4－(3－(4－(甲基磺酰基)哌嗪－1－基)丙氧基)苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

在工序1中得到的化合物(140mg)中加入10％盐酸－甲醇溶液，在50℃下搅拌3小时之后，将溶剂进行浓缩，由此得到脱Boc体(132mg)。将得到的固体的一部分(30mg)悬浮于二氯甲烷，依次加入三乙基胺(22μL)及甲烷磺酰氯(5μL)之后，在室温下搅拌2小时。在反应溶液中加入水，用氯仿萃取3次之后，用硫酸钠干燥后进行浓缩，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(6.7mg，21％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.54(1H，s)，7.68(1H，d，J＝8.8Hz)，7.45－7.36(2H，m)，7.23(1H，d，J＝2.7Hz)，7.06(1H，dd，J＝8.8,2.7Hz)，6.95－6.89(2H，m)，6.32(1H，s)，4.48(2H，s)，4.03(2H，t，J＝6.1Hz)，3.87(2H，t，J＝5.7Hz)，3.72(1H，q，J＝7.0Hz)，3.30－3.23(4H，m)，2.83－2.73(2H，m)，2.78(3H，s)，2.63－2.55(5H，m)2.02－1.93(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 616[M+H]⁺.

实施例19

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－环丙基吡啶－3－磺酰胺

(工序1)

6－氯－N－环丙基吡啶－3－磺酰胺的合成

将6－氯吡啶－3－磺酰氯(300mg)、三乙基胺(0.59mL)溶解于二氯甲烷(6mL)，加入环丙基胺(121mg)及二甲基氨基吡啶(5mg)，在室温下搅拌一夜。在反应溶液中加入水，用氯仿萃取3次之后，用硫酸钠干燥后进行浓缩，由此得到标记化合物(442mg)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.78(1H，d，J＝2.6Hz)，8.24(1H，br－s)，8.20(1H，dd，J＝8.4,2.6Hz)，7.81(1,d，J＝8.4Hz)，2.25－2.17(1H，m)，0.56－0.49(2H，m)，0.40－0.36(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 233[M+H]⁺.

(工序2)

6－氨基－N－环丙基吡啶－3－磺酰胺的合成

使工序1中得到的化合物(200mg)溶解于乙醇(2mL)，加入28％氨水(2mL)，在微波照射下于140℃下搅拌1小时。将反应溶液进行浓缩，将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(90mg，2阶段收率66％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.27(1H，d，J＝2.2Hz)，7.65(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，7.60(1H，d，J＝2.6Hz)，6.87(2H，s)，6.52(1H， d，J＝8.8Hz)，2.13－2.05(1H，m)，0.52－0.45(2H，m)，0.39－0.33(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 214[M+H]⁺.

(工序3)

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－环丙基吡啶－3－磺酰胺的合成

按照参考例2－1，使参考例1－2中得到的化合物(50mg)和工序2中得到的化合物(38mg)反应，由此得到标记化合物(21mg，28％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.74(1H，s)，8.68(1H，s)，8.67(1H，dd，J＝2.6,0.8Hz)，8.33(1H，dd，J＝8.8,0.8Hz)，8.12(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，7.95(1H，d，J＝2.8Hz)，7.88(1H，d，J＝8.8Hz)，7.45(1H，d，J＝2.2Hz)，7.39(1H，dd，J＝8.8,2.8Hz)，4.61(2H，s)，3.86(2H，t，J＝5.8Hz)，2.94(2H，t，J＝5.8Hz)，2.24－2.15(1H，m)，0.57－0.49(2H，m)，0.43－0.36(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 516[M+H]⁺.

实施例20

4－(4－((5－((1,4－氧杂氮杂环庚烷－4－基)磺酰基)噻唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

N－(5－((1,4－氧杂氮杂环庚烷－4－基)磺酰基)噻唑－2－基)乙酰胺的合成

将2－(乙酰基氨基)－1,3－噻唑－5－磺酰氯(200mg)溶解于DMF(5mL)，加入1,4－氧杂氮杂环庚烷盐酸盐(170mg)和DIPEA(424μL)，在室温下搅拌6小时。在反应液中加入氯化铵水溶液，滤取析出物，由此得到标记化合物(200mg，79％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ13.03(1H，br－s)，8.31(1H，s)，3.99－3.95(4H，m)，3.71－3.58(4H，m)，2.52(3H，s)，2.16－2.10(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 306[M+H]⁺.

(工序2)

5－((1,4－氧杂氮杂环庚烷－4－基)磺酰基)噻唑－2－胺的合成

将工序1中得到的化合物(183mg)溶解于乙醇(4mL)，加入4.0mol/L盐酸(二噁烷溶液；1.2mL)，在70℃下搅拌4.5小时。将反应液进行浓缩，在冰冷下加入氨水，滤取析出物，由此得到标记化合物(110mg，70％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ7.88(2H，br－s)，7.45(1H，s)，3.67－3.64(4H，m)，3.39－3.27(4H，m)，1.84－1.78(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 264[M+H]⁺.

(工序3)

4－(4－((5－((1,4－氧杂氮杂环庚烷－4－基)磺酰基)噻唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

按照参考例2－1，使用工序2中得到的化合物(47mg)取代6－氨基烟酸甲酯，取代在80℃下搅拌一夜，而在微波照射下于150℃下使其反应30分钟，进行同样的操作，由此得到标记化合物(10mg，12％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ11.97(1H，br－s)，8.81(1H，s)，8.03(1H，s)，7.87(1H，d，J＝8.8Hz)，7.45(1H，d，2.0Hz)，7.38(1H，dd，J＝2.0，8.8Hz)，4.61(2H，s)，3.86(2H，t，5.6Hz)，3.69－3.63(4H，m)，3.42－3.30(4H，m)，2.94(2H，t，5.6Hz)，1.84－1.78(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 566[M+H]⁺.

实施例21

2,2,2－三氟乙基(6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8,－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡啶－3－基)氨基甲酸酯

使参考例2－2中得到的化合物(100mg)、叠氮磷酸二苯酯(188mg)、2,2,2－三氟乙醇(68mg)、N,N－二异丙基乙基胺(88mg)悬浮于二噁烷(2.5mL)，在微波照射下于125℃下搅拌2小时。将得到的反应液进行浓缩干固，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到5.8mg(2.4％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.24(1H，s)，9.08(1H，s)，8.51(1H，s)，8.42(1H，s)，8.07(1H，d，J＝9.2Hz)，7.89－7.82 (2H，m)，7.43(1H，d，J＝1.8Hz)，7.36(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，4.79(2H，q，J＝9.2Hz)，4.53(2H，s)，3.84(2H，t，J＝5.9Hz)，2.85(2H，t，5.1Hz)；LRMS(ESI)m/z 538[M+H]⁺.

实施例22

2－(6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡啶－3－基)－N－(2,2,2－三氟乙基)乙酰胺

(工序1)

2－(6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡啶－3－基)乙酸的合成

按照参考例2－1～2－2，使用2－(6－氨基吡啶－3－基)乙酸乙酯(175mg)取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到标记的化合物(94mg，2阶段收率26％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.73(1H，br－s)，8.64(1H，s)，8.27(1H，d，J＝1.1Hz)，8.03(1H，d，J＝8.8Hz)，7.89(1H，d，J＝8.8Hz)，7.84(1H，dd，J＝8.8,1.1Hz)，7.45(1H，d，J＝2.1Hz)，7.39(1H，dd，J＝8.8,2.1Hz)，4.60(2H，s)，3.88(2H，t，J＝5.2Hz)，3.66(2H，s)，2.91(2H，t，J＝5.2Hz)；LRMS(ESI)m/z 455[M+H]⁺.

(工序2)

2－(6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡啶－3－基)－N－(2,2,2－三氟乙基)乙酰胺的合成

按照实施例11，使用工序1中得到的化合物(30mg)取代参考例2－2中得到的化合物，进行同样的操作，由此得到标记化合物(29mg，83％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.10(1H，br－s)，8.79(1H，t，J＝6.2Hz)，8.54(1H，s)，8.20(1H，d，J＝2.2Hz)，8.07(1H，d，J＝8.4Hz)，7.87(1H，d，J＝8.8Hz)，7.66(1H，dd，J＝8.4,2.4Hz)，7.44(1H，d，J＝2.2Hz)，7.37(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，4.55(2H，s)，3.98－3.82(4H，m)，3.52(2H，s)，2.88(2H，t，J＝5.5Hz)；LRMS(ESI)m/z 536[M+H]⁺.

实施例23

N－(6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡啶－3－基)－3,3,3－三氟丙烷酰胺

(工序1)

4－(4－((5－硝基吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

按照参考例2－1，使用5－硝基吡啶－2－胺(986mg)取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到810mg(31％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.11(1H，s)，9.14(1H，d，J＝2.9Hz)，8.71(1H，s)，8.54(1H，dd，J＝9.3,2.7Hz)，8.27(1H，d，J＝9.5Hz)，7.86(1H，d，J＝8.8Hz)，7.43(1H，d，J＝2.2Hz)，7.37(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，4.61(2H，s)，3.84(2H，t，J＝5.7Hz)，2.94(2H，t，5.7Hz)；LRMS(ESI)m/z 442[M+H]⁺.

(工序2)

4－(4－((5－氨基吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

使工序1中得到的化合物(100mg)、10％钯/碳(10mg)悬浮于甲醇(2.0mL)，在氢氛围下在室温下搅拌2天。将得到的悬浮液进行硅藻土过滤，将滤液进行浓缩干固，由此得到12mg(13％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.67(1H，s)，8.40(1H，s)，7.86(1H，d，J＝8.8Hz)，7.72(1H，d，J＝2.9Hz)，7.67(1H，d，J＝8.8Hz)，7.43(1H，d，J＝2.6Hz)，7.36(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，7.00(1H，dd，J＝8.6,2.7Hz)，5.12(2H，s)，4.49(2H，s)，3.85(2H，t，J＝5.9Hz)，2.78(2H，t，5.5Hz)；LRMS(ESI)m/z 412[M+H]⁺.

(工序3)

N－(6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡啶－3－基)－3,3,3－三氟丙烷酰胺

按照实施例11，使用3,3,3－三氟丙酸(7.0mg)取代6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)烟酸，使用工序2中得到的化合物(15mg)取代2,2,2－三氟乙基胺，进行同样的操作，由此得到2.8mg(15％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.51(1H，s)，9.14(1H，s)，8.57(1H，d，J＝2.6Hz)，8.53(1H，s)，8.12(1H，d，J＝8.8Hz)，7.91(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，7.86(1H，d，J＝8.8Hz)，7.43(1H，d，J＝2.6Hz)，7.37(1H，dd，J＝9.0，2.4Hz)，4.54(2H，s)，3.85(2H，t，J＝5.8Hz)，3.53(2H，q，J＝11.2Hz)，2.86(2H，t，5.5Hz)；LRMS(ESI)m/z 522[M+H]⁺.

实施例24

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)哒嗪－3－羧酰胺

按照实施例11，使用制造实施例B中得到的化合物(5.0mg)取代参考例2－2中得到的化合物，使用HATU(8.6mg)、DIPEA(8.1μL)取代DMT－MM，进行同样的操作，由此得到标记化合物(1.22mg)(收率21％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.53(1H，t，J＝6.5Hz)，8.62(1H，s)，8.49－8.42(2H，m)，8.15(1H，d，J＝9.6Hz)，7.85(1H，d，J＝8.9Hz)，7.45(1H，s)，7.36(1H，d，J＝8.9Hz)，4.59(2H，s)，4.09(2H，m)，3.85(2H，t，J＝5.5Hz)，2.96(2H，m)LRMS(ESI)m/z 523[M+H]⁺.

实施例25

3－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)－1,2,4－三嗪－6－羧酰胺

(工序1)

6－溴－1,2,4－三嗪－3－胺的合成

将1,2,4－三嗪－3－胺(5.00g)溶解于乙腈(45mL)、蒸馏水(75mL)，在遮光下、冰冷下加入N－溴琥珀酰亚胺(10.0g)，在遮光下、在室温下搅拌一夜。在反应液中加入蒸馏水(100mL)，用乙酸乙酯(150mL)萃取3次。将得到的有机层合并，用饱和食盐水清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥。将不溶物过滤分离之后，进行浓缩干固，由此得到2.64g(收率29％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.38(1H，s)，7.45(2H，br－s)；LRMS(ESI)m/z 175[M+H]⁺.

(工序2)

3－氨基－1,2,4－三嗪－6－羧酸甲酯的合成

按照实施例5的工序，使用本实施例的工序1中得到的化合物(1.0g)取代实施例5的工序1中得到的化合物，进行同样的操作，由此得到728mg(收率83％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.64(1H，s)，3.85(3H，s)；LRMS(ESI)m/z 155[M+H]⁺.

(工序3)

3－氨基－N－(2,2,2－三氟乙基)－1,2,4－三嗪－6－羧酰胺的合成

将工序2中得到的化合物(100mg)溶解于甲醇(6.5mL)，加入2N氢氧化钠水溶液(4mL)，搅拌3小时。使用2N盐酸调为pH4，其后在减压下进行浓缩干固。将得到的残渣和2,2,2－三氟乙基胺(102μL)溶解于DMF(3mL)和甲醇(3mL)的混合溶液，加入DMT－MM，搅拌一整夜。在反应液中加入蒸馏水，用乙酸乙酯萃取3次。将有机层合并，用蒸馏水、饱和食盐水清洗之后，用无水硫酸钠进行干燥。将不溶物过滤分离之后，进行浓缩干固，用硅胶柱色谱法进行精制，得到标记的化合物(56mg)(收率39％)。

LRMS(ESI)m/z 222[M+H]⁺.

(工序4)

3－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)－1,2,4－三嗪－6－羧酰胺的合成

按照参考例2－1，使用工序3中得到的化合物(23mg)取代参考例1－2中得到的化合物(30mg)和6－氨基烟酸甲酯，取代在80℃下搅拌一夜，而在微波照射下于140℃搅拌30分钟。其后，进行同样的操作，由此得到32mg的标记化合物(收率70％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.62(1H，t，J＝6.4Hz)，8.99(1H，s)，8.79(1H，s)，8.28(1H，s)，7.85(1H，d，J＝8.8Hz)，7.41(1H，s)，7.36(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，4.68(2H，s)，4.14(2H，m)，3.79(2H，m)，2.81(2H，t，J＝5.5Hz)；LRMS(ESI)m/z 524[M+H]⁺.

实施例26

2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)－4－(三氟甲基)噻唑－5－羧酰胺

(工序1)

乙基2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－4－(三氟甲基)噻唑－5－羧酸酯的合成

按照参考例2－1，使用乙基2－氨基－4－(三氟甲基)噻唑－5－羧酸酯(341mg)取代6－氨基烟酸甲酯，取代在80℃下搅拌一夜，而在微波照射下于150℃下使其反应30分钟，进行同样的操作，由此得到标记化合物(670mg，100％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.59(1H，s)，7.79(1H，d，8.8Hz)，7.40(1H，d，2.4Hz)，7.33(1H，dd，J＝2.4,8.8Hz)，4.43(2H，s)，4.19(2H，q，7.0Hz)，3.79(2H，t，J＝5.9Hz)，2.80(2H，t，J＝5.9Hz)，1.25(3H，t，J＝7.0Hz)；LRMS(ESI)m/z 543[M+H]⁺.

(工序2)

2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－4－(三氟甲基)噻唑－5－羧酸的合成

使工序1中得到的化合物(670mg)悬浮于乙醇(10mL)，加入2.0mol/L氢氧化钠水溶液(4.8mL)，在60℃下搅拌6小时。将反应液浓缩后，用蒸馏水稀释，使用2.0mol/L盐酸调整为pH5左右。滤取析出物，由此得到标记化合物(275mg，45％)。

LRMS(ESI)m/z 515[M+H]⁺.

(工序3)

2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)－4－(三氟甲基)噻唑－5－羧酰胺的合成

按照实施例11，使用工序2中得到的化合物(40mg)取代参考例2－2中得到的化合物，使用HOBt(13mg)、WSC(16mg)取代DMT－MM，进行同样的操作，由此得到标记化合物(11mg，24％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ12.02(1H，s)，9.43(1H，t，J＝6.2Hz)，8.83(1H，s)，7.88(1H，d，J＝8.8Hz)，7.48(1H，d，J＝2.4Hz)，7.40(1H，dd，J＝2.4,8.8Hz)，4.63(2H，s)，4.11－4.01(2H，m)，3.88(2H，t，J＝5.7Hz)，2.96(2H，t，J＝5.7Hz)；LRMS(ESI)m/z 596[M+H]⁺.

实施例27

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2－二氟乙基)烟酰胺

按照实施例11，使用2,2－二氟乙基胺取代2,2,2－三氟乙基胺，使用HATU、DIPEA取代DMT－MM，进行同样的操作，由此得到标记化合物(收率58％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.48(1H，s)，8.90(1H，t，J＝5.8Hz)，8.80(1H，s)，8.62(1H，s)，8.25－8.16(2H，m)，7.84(1H，d，J＝8.9Hz)，7.42(1H，s)，7.35(1H，d，J＝8.9Hz)，6.10(1H， t，J＝56Hz)，4.56(2H，s)，3.83(2H，t，J＝5.5Hz)，3.66(2H，m)，2.90(2H，m)LRMS(ESI)m/z 504[M+H]⁺.

实施例28

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2－二氟乙基)哒嗪－3－羧酰胺

按照实施例11，使用制造实施例B中得到的化合物(5.0mg)取代参考例2－2中得到的化合物，使用2,2－二氟乙基胺取代2,2,2－三氟乙基胺，使用HATU(8.6mg)、DIPEA(8.1μL)取代DMT－MM，进行同样的操作，由此得到标记化合物(3.52mg)(收率62％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.22(1H，br－s)，9.26(1H，t，J＝6.2Hz)，8.62(1H，s)，8.44(1H，d，J＝9.6Hz)，8.14(1H，d，J＝8.9Hz)，7.85(1H，d，J＝8.9Hz)，7.43(1H，s)，7.36(1H，d，J＝8.9Hz)，6.14(1H，t，J＝56Hz)，4.59(2H，s)，3.85(2H，m)，3.73(2H，m)，2.96(2H，m)LRMS(ESI)m/z 505[M+H]⁺.

实施例29

6－((7－(3－氯－4－氰基苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－((1r，4r)－4－羟基环己基)哒嗪－3－羧酰胺

(工序1)

6－((7－苄基－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)哒嗪－3－羧酸甲酯的合成

按照参考例2－1，使用6－氨基哒嗪－3－羧酸甲酯(353mg)取代6－氨基烟酸甲酯，使用市售的7－苄基－4－氯－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶(500mg)取代参考例1－2中得到的化合物，进行同样的操作，由此得到标记化合物(267mg，37％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.56(1H，s)，8.52(1H，d，J＝9.5Hz)，8.17(1H，d，J＝9.5Hz)，7.37(1H，s)，7.59－7.32(5H，m)，3.93(3H，s)，3.68(2H，s)，3.50(2H，s)，2.83(2H，t，J＝5.5Hz)，2.74(2H，t，J＝5.5Hz)；LRMS(ESI)m/z 377[M+H]⁺.

(工序2)

6－((7－(3－氯－4－氰基苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)哒嗪－3－羧酸甲酯的合成

按照参考例1－1，使用2－氯－4－氟苄腈(322mg)取代4－氟－2－(三氟甲基)苄腈，与工序1中得到的化合物(260mg)进行同样的操作，由此得到标记化合物(34mg，12％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ9.01(1H，d，J＝8.8Hz)，8.70(1H，s)，8.24(1H，d，J＝8.8Hz)，7.56(1H，d，J＝8.8Hz)，7.40(1H，s)，7.07(1H，d，J＝2.4Hz)，6.94(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，4.52(2H，s)，4.06(3H，s)，3.87(2H，t，J＝5.2Hz)，3.04(2H，t，J＝5.2Hz)；LRMS(ESI)m/z 422[M+H]⁺.

(工序3)

6－((7－(3－氯－4－氰基苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)哒嗪－3－羧酸的合成

使用工序2中得到的化合物(34mg)，通过与参考例2－2同样的方法得到标记化合物(27mg，82％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.33(1H，br－s)，8.65(1H，s)，8.47(1H，d，J＝9.3Hz)，8.16(1H，d，J＝9.3Hz)，7.70(1H，d，J＝8.8Hz)，7.33(1H，d，J＝2.4Hz)，7.13(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，4.55(2H，s)，3.82(2H，t，J＝5.6Hz)，2.97(2H，t，J＝5.6Hz)；LRMS(ESI)m/z 408[M+H]⁺.

(工序4)

6－((7－(3－氯－4－氰基苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－((1r，4r)－4－羟基环己基)哒嗪－3－羧酰胺的合成

按照实施例11，使工序3中得到的化合物和反式－4－氨基环己醇反应，由此得到标记化合物(5.6mg，50％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.14(1H，br－s)，8.67(1H，d，J＝8.7Hz)，8.63(1H，s)，8.41(1H，d，J＝9.5Hz)，8.12(1H，d，J＝9.5Hz)，7.70(1H，d，J＝8.7Hz)，7.33(1H，d，J＝2.2Hz)，7.13(1H，dd，J＝8.7,2.2Hz)，4.60－4.52(3H，m)，3.84－3.74(3H，m)，2.95(2H， t，J＝5.3Hz)、1.90－1.75(4H，m)，1.56－1.45(2H，m)，1.33－1.18(3H，m)；LRMS(ESI)m/z 505[M+H]⁺.

实施例30

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－((1－羟基环丙基)甲基)哒嗪－3－羧酰胺

按照实施例11，使用制造实施例B中得到的化合物(20mg)和1－(氨基甲基)环丙醇(34mg)，进行同样的操作，由此得到标记化合物(3.6mg，16％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ9.00(1H，d，J＝9.2Hz)，8.74(1H，s)，8.38(1H，t，J＝5.8Hz)，8.31(1H，d，J＝9.2Hz)，8.25－8.08(1H，m)，7.72(1H，d，J＝8.8Hz)，7.27(1H，d，J＝2.6Hz)，7.10(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，7.36(1H，dd，J＝8.8,2.3Hz)，4.57(2H，s)，3.92(2H，t，J＝5.6Hz)，3.69(2H，d，J＝5.8Hz)，3.00(2H，t，J＝5.6Hz)，0.95－0.89(2H，m)，0.77－0.70(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 511[M+H]⁺.

实施例31

2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)异烟酰胺

(工序1)

2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)异烟酸的合成

按照参考例2－1～2－2，使用2－氨基异烟酸乙酯(135mg)取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到标记化合物(147mg，2阶段收率45％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.35(1H，s)8.62(2H，s)，8.48(1H，d，J＝5.0Hz)，7.86(1H，d，J＝8.9Hz)，7.47(1H，dd，J＝5.0，1.1Hz)，7.43(1H，d，J＝2.0Hz)，7.36(1H，dd，J＝8.9，2.0Hz)，4.57(2H，s)，3.85(2H，t，J＝5.4Hz)，2.90(2H，t，J＝5.4Hz)；LRMS(ESI)m/z 441[M+H]⁺.

(工序2)

2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)异烟酰胺的合成

使工序1中得到的化合物(25mg)和2,2,2－三氟乙基胺(11mg)溶解于DMF(1mL)，加入HATU(43mg)及二异丙基乙基胺(40μL)，在室温下搅拌3小时。在反应溶液中加入水之后，用乙酸乙酯萃取3次，将有机层用水和饱和食盐水清洗后，用硫酸钠干燥后进行浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(22mg，73％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.90(1H，s)，8.74(1H，s)，8.43(1H，d，J＝5.1Hz)，7.70(1H，d，J＝8.8Hz)，7.45(1H，s)，7.40(1H， dd，J＝5.1,1.5Hz)，7.25(1H，d，J＝2.6Hz)，7.08(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，6.71(1H，t，J＝5.9Hz)，4.53(2H，s)，4.18(2H，m)，3.89(2H，t，J＝5.8Hz)，2.89(2H，t，J＝5.8Hz)；LRMS(ESI)m/z 522[M+H]⁺.

实施例32

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2－羟基－2－甲基丙基)哒嗪－3－羧酰胺

按照实施例11，使用制造实施例B中得到的化合物(20mg)取代参考例2－2中得到的化合物，使用1－氨基－2－甲基丙烷－2－醇(4mg)取代2,2,2－三氟乙基胺，使用HATU(26mg)、DIPEA(15μL)取代DMT－MM，进行同样的操作，由此得到标记化合物(4.2mg，18％)。

¹H－NMR(CD3OD)δ8.81(1H，d，J＝9.2Hz)，8.65(1H，s)，8.22(1H，d，J＝9.2Hz)，7.79(1H，d，J＝8.8Hz)，7.41(1H，d，J＝2.6Hz)，7.32(1H，dd，J＝2.6,8.8Hz)，4.64－4.54(3H，m)，3.93(2H，t，J＝5.5Hz)，3.47(2H，s)，3.02(2H，t，J＝5.5Hz)，1.26(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 513[M+H]⁺.

实施例33

5－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2－羟基－2－甲基丙基)吡嗪－2－羧酰胺

按照实施例11，使用制造实施例C中得到的化合物(10mg)取代参考例2－2中得到的化合物，使用1－氨基－2－甲基丙烷－2－醇(8mg)取代2,2,2－三氟乙基胺，进行同样的操作，由此得到标记化合物。(6.4mg，55％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.04(1H，br－s)，9.35(1H，s)，8.92(1H，s)，8.67(1H，s)，8.29(1H，t，J＝6.2Hz)，7.88(1H，d，J＝8.9Hz)，7.46(1H，d，J＝2.2Hz)，7.39(1H，dd，J＝2.2,8.9Hz)，4.72(1H，s)，4.62(2H，s)，3.87(2H，t，J＝5.5Hz)，3.34－3.30(2H，m)，2.94(2H，t，J＝5.5Hz)，1.12(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 513[M+H]⁺.

实施例34

2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2－羟基－2－甲基丙基)嘧啶－5－羧酰胺

按照实施例11，使用制造实施例D中得到的化合物(5mg)取代参考例2－2中得到的化合物，使用1－氨基－2－甲基丙烷－2－醇(4mg)取代2,2,2－三氟乙基胺，进行同样的操作，由此得到标记化合物(3.2mg，53％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.42(1H，br－s)，8.95(2H，s)，8.77(1H，s)，8.42(1H，t，J＝6.2Hz)，7.88(1H，d，J＝8.9Hz)，7.43(1H，d，J＝2.1Hz)，7.36(1H，dd，J＝2.1,8.9Hz)，4.67(2H， s)，4.56(1H，s)，3.79(2H，t，J＝5.5Hz)，3.24(2H，d，J＝6.2Hz)，2.77(2H，t，J＝5.5Hz)，1.11(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 513[M+H]⁺.

实施例35

5－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2－(1－甲基－1H－吡唑－5－基)乙基)－1,3,4－噻二唑－2－羧酰胺

(工序1)

2－(1－甲基－1H－吡唑－5－基)乙基甲烷磺酸酯的合成

使实施例14的工序1中得到的2－(1－甲基－1H－吡唑－5－基)乙醇(537mg)及三乙基胺(0.89mL)溶解于氯仿(10mL)，在0℃下滴加甲烷磺酰氯(0.4mL)。将反应溶液在室温下搅拌6小时后，在反应溶液中加入水，用氯仿萃取3次，用硫酸钠干燥后进行浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到作为无色油状物质的标记化合物(930mg)。

¹H－NMR(CDCl3)δ7.42(1H，d，J＝1.7Hz)，6.14(1H，d，J＝1.7Hz)，4.44(2H，t，J＝6.7Hz)，3.85(3H，s)，3.11(2H，t，J＝6.7Hz)，2.95(3H，s)；LRMS(ESI)m/z 205[M+H]⁺.

(工序2)

2－(1－甲基－1H－吡唑－5－基)乙胺的合成

将工序1中得到的化合物(443mg)溶解于DMF，加入叠氮化钠(705mg)，在60℃下搅拌3小时。在反应溶液中加入水之后，用乙酸乙酯萃取3次，将有机层用水和饱和食盐水清洗之后，用硫酸钠干燥后进行浓缩。将得到的残渣溶解于甲醇(8mL)后，加入10％钯/碳(50mg，含水50％)，在氢氛围下、在大气压下搅拌一夜。将反应溶液用Hyflo Super-Cel过滤后，将溶剂进行浓缩，由此得到标记化合物(180mg，76％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ7.42(1H，J＝1.7Hz)，6.10(1H，d，J＝1.7Hz)，3.84(3H，s)，3.57(2H，t，J＝7.1Hz)，2.90(2H，t，J＝7.1Hz)；LRMS(ESI)m/z 126[M+H]⁺.

(工序3)

5－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2－(1－甲基－1H－吡唑－5－基)乙基)－1,3,4－噻二唑－2－羧酰胺的合成

使工序2中得到的化合物(17mg)和制造实施例E中得到的化合物(30mg)溶解于DMF，加入EDC·HCl(25mg)及1－羟基苯并三唑(18mg)，在室温下搅拌一夜。在反应溶液中加入水之后，用乙酸乙酯萃取3次，将有机层用水和饱和食盐水清洗后，用硫酸钠干燥后进行浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(17mg，46％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.32(1H，s)，7.70(1H，d，J＝8.8Hz)，7.49(1H，t，J＝5.9Hz)，7.39(1H，d，J＝1.8Hz)，7.24(1H，d，J＝2.4Hz)，7.09(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，6.11(1H，d，J＝1.8Hz)，4.59(2H，s)，3.91－3.71(4H，m)，3.83(3H，s)，3.07－2.94(4H，m)；LRMS(ESI)m/z 555[M+H]⁺.

实施例36

6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－((4－(三氟甲基)噻唑－2－基)甲基)烟酰胺

按照实施例11，使用(4－(三氟甲基)噻唑－2－基)甲烷胺盐酸盐(16mg)取代参考例2－2中得到的化合物(30mg)和2,2,2－三氟乙基胺，取代DMT－MM而加入HATU(39mg)、DIPEA(18mg)，进行同样的操作，由此得到20mg的标记化合物(收率48％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.53(1H，m)，8.84(1H，s)，8.64(1H，s)，8.41(1H，s)，8.24(2H，m)，8.11(1H，s)，7.86(1H，d，J＝8.8Hz)，7.43(1H，d，J＝2.2Hz)，7.37(1H，d，J＝8.8Hz)，4.78(2H，d，J＝6.2Hz)，4.58(2H，s)，3.84(2H，t，J＝5.7Hz)，2.92(2H，t，5.5Hz)；LRMS(ESI)m/z 605[M+H]⁺.

实施例37

(R)－N－(1－(1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)－2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－4－(三氟甲基)噻唑－5－羧酰胺

(工序1)

(R)－叔丁基(1－肼基－1－氧代丙烷－2－基)氨基甲酸酯的合成

将Boc－D－苯胺甲基酯(2.0g)溶解于乙醇(50mL)，加入肼一水合物(0.6mL)，搅拌一整夜。反应结束后，加入乙酸乙酯、水进行分配。将有机层用饱和食盐水清洗，用无水硫酸钠进行干燥。将不溶物过滤分离之后，进行浓缩干固，将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到500mg(收率25％)的标记化合物。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.96(1H，br－s)，6.83(1H，d，J＝7.7Hz)，4.16(2H，br－s)，3.91(1H，t，7.2Hz)，1.36(9H，s)，1.13(3H，d，J＝7.0Hz)；LRMS(ESI)m/z 204[M+H]⁺.

(工序2)

(R)－叔丁基(1－(1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)氨基甲酸酯的合成

将工序1中得到的化合物溶解于原甲酸三乙酯(11mL)，在150℃下搅拌一整夜。反应后利用硅胶柱色谱法进行精制，得到标记化合物(960mg)(收率82％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.15(1H，s)，7.62(1H，m)，4.87(1H，m)，1.45(3H，d，J＝7.1Hz)，1.38(9H，s)；LRMS(ESI)m/z 157[M－叔丁基+H]⁺.

(工序3)

(R)－1－(1,3,4－噁二唑－2－基)乙胺的合成

将工序2中得到的化合物(200mg)溶解于1,1,1,3,3,3－六氟－2－丙醇(4.7mL)，在微波照射下于150℃下搅拌1小时。冷却后，减压下进行浓缩，得到油状的标记化合物(96mg)(收率91％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.13(1H，s)，4.18(1H，m)，2.12(2H，br－s)，1.38(3H，d，J＝6.8Hz)；LRMS(ESI)m/z 114[M+H]⁺.

(工序4)

(R)－N－(1－(1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)－2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－4－(三氟甲基)噻唑－5－羧酰胺的合成

按照实施例11，使用实施例26(工序2)中得到的化合物(45mg)取代参考例2－2中得到的化合物，使用工序3中得到的(R)－1－(1,3,4－噁二唑－2－基)乙胺(17mg)取代2,2,2－三氟乙基胺，进行同样的操作，由此得到29mg的标记化合物(收率55％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.38(1H，d，J＝6.8Hz)，9.19(1H，s)，8.74(1H，s)，8.11(1H，s)，7.84(1H，d，J＝8.9Hz)，7.43(1H，s)，7.36(1H，d，J＝8.9Hz)，5.33(1H，t，J＝7.2Hz)， 4.56(2H，s)，3.84(2H，t，J＝5.5Hz)，2.90(2H，m)，1.55(3H，d，J＝7.5Hz)LRMS(ESI)m/z 610[M+H]⁺.

实施例38

(R)－N－(1－(1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)－6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)烟酰胺

按照实施例11，使用实施例37的工序3中得到的化合物(15mg)取代参考例2－2中得到的化合物(30mg)和2,2,2－三氟乙基胺，进行同样的操作，由此得到12mg的标记化合物(收率33％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.50(1H，s)，9.18－9.11(2H，m)，8.80(1H，s)，8.62(1H，s)，8.24－8.17(2H，m)，7.84(1H，d，J＝8.9Hz)，7.42(1H，s)，7.35(1H，d，J＝8.9Hz)，5.42(1H，m)，4.56(2H，s)，3.83(2H，t，J＝5.5Hz)，2.90(2H，m)，1.60(3H，d，J＝6.8Hz)LRMS(ESI)m/z 536[M+H]⁺.

实施例39

(R)－N－(1－(1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)－5－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－1,3,4－噻二唑－2－羧酰胺

按照实施例11，使用制造实施例E中得到的化合物取代参考例2－2中得到的化合物，使用实施例37的工序3中得到的化合物取代2,2,2－三氟乙基胺，进行同样的操作，由此得到标记化合物(收率44％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.74(1H，d，J＝7.5Hz)，9.15(1H，s)，8.77(1H，s)，8.10(1H，s)，7.84(1H，d，J＝8.9Hz)，7.43(1H，s)，7.36(1H，d，J＝8.9Hz)，5.41(1H，m)，4.59(2H，s)，3.85(2H，t，J＝5.5Hz)，2.94(2H，m)，1.62(3H，d，J＝7.5Hz)LRMS(ESI)m/z 543[M+H]⁺.

实施例40

(R)－6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(1－(5－(三氟甲基)－1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)烟酰胺

(工序1)

(R)－叔丁基(1－氧代－1－(2－(2,2,2－三氟乙酰基)肼基)丙烷－2－基)氨基甲酸酯的合成

将实施例37的工序1中得到的化合物(400mg)溶解于乙腈(10mL)，加入DIPEA(0.77mL)。在氮氛围下冷却至－45℃，加入三氟乙酸酐(0.56mL)。将其混合液缓慢地升温，在室温下搅拌30分钟。通过减压浓缩除去溶剂之后，加入乙酸乙酯、水并进行分配。将有机层用饱和食盐水清洗，用无水硫酸钠进行干燥。将不溶物过滤分离之后，进行浓缩干固，将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到236mg(收率40％)的标记化合物。

¹H－NMR(CDCl3)δ4.90(1H，m)、4.28(1H，m)，1.46(9H，s)，1.42(3H，d，J＝7.0Hz)；LRMS(ESI)m/z 243[M－叔丁基+H]⁺.

(工序2)

(R)－叔丁基(1－(5－(三氟甲基)－1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)氨基甲酸酯的合成

在工序1中得到的化合物(230mg)的乙腈悬浮液(7.7mL)中加入DIPEA(780μL)和三苯基膦(830mg)，在室温下搅拌5分钟。加入六氯乙烷(420mg)，在室温下搅拌一整夜。使溶剂在减压下馏去，在残渣中加入乙酸乙酯和水并进行分配。萃取后用饱和食盐水清洗，用无水硫酸钠进行干燥。将不溶物过滤分离之后，进行浓缩干固，将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到142mg的标记化合物(收率65％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ5.18－5.11(2H，m)，1.80－1.60(3H，m)，1.45(9H，s)

(工序3)

(R)－1－(5－(三氟甲基)－1,3,4－噁二唑－2－基)乙胺的合成

将工序2中得到的化合物(140mg)溶解于1,1,1,3,3,3－六氟－2－丙醇(2.5mL)，在微波照射下于150℃下搅拌1小时。冷却后，在减压下进行浓缩，得到油状的标记化合物(99mg，收率99％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ4.47－4.36(3H，m)，1.63(3H，d、J＝7.0Hz)

(工序4)

(R)－6－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(1－(5－(三氟甲基)－1,3,4－噁二唑－2－基)乙基)烟酰胺的合成

按照实施例11，使用工序3中得到的化合物取代2,2,2－三氟乙基胺，进行同样的操作，由此得到标记化合物(41％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.53(1H，br－s)，9.22(1H，d，J＝7.3Hz)，8.82(1H，s)，8.64(1H，s)，8.25－8.15(2H，m)，7.86(1H，d，J＝9.0Hz)，7.44(1H，d，J＝2.4Hz)，7.36(1H，dd，J＝9.0Hz，2.4Hz)，5.50(1H，dq，J＝7.3Hz，7.1Hz)，4.58(2H，s)，3.85(2H，m)，2.92(2H，m)，1.66(3H，d，J＝7.1Hz)、LRMS(ESI)m/z 604[M+H]⁺

实施例41

4－(4－((4－(4－(2－羟基丙烷－2－基)哌啶－1－羰基)噁唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

乙基2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)噁唑－4－羧酸酯的合成

按照参考例2－1，使用2－氨基噁唑－4－羧酸乙酯(387mg)取代6－氨基烟酸甲酯，取代在80℃下搅拌一夜，而在微波照射下于160℃下使其反应20分钟，进行同样的操作，由此得到标记化合物(570mg，60％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.30(1H，s)，7.95(1H，s)，7.69(1H，d，8.9Hz)，7.23(1H，d，J＝2.4Hz)，7.07(1H，dd，J＝2.4,8.9Hz)，4.47－4.34(4H，m)，3.74(2H，t，5.5Hz)，2.96(2H，t，J＝5.5Hz)，1.39(3H，t，J＝7.2Hz)；LRMS(ESI)m/z 459[M+H]⁺.

(工序2)

2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)噁唑－4－羧酸的合成

使用工序1中得到的化合物(550mg)，悬浮于乙醇(10mL)，加入2.0mol/L氢氧化钠水溶液(4.8mL)，在60℃下搅拌6小时。将反应液浓缩后，用蒸馏水稀释，使用2.0mol/L盐酸调整为pH5左右。滤取析出的固体，由此得到标记化合物(495mg，96％)。

LRMS(ESI)m/z 431[M+H]⁺.

(工序3)

4－(4－((4－(4－(2－羟基丙烷－2－基)哌啶－1－羰基)噁唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

按照实施例11，使用工序2中得到的化合物(15mg)取代参考例2－2中得到的化合物，使用2－(哌啶－4－基)丙烷－2－醇(6mg)取代2,2,2－三氟乙基胺，使用HATU(20mg)、DIPEA(12μL)取代DMT－MM，进行同样的操作，由此得到标记化合物(4.8mg，25％)。

¹H－NMR(CD3OD)δ8.40(1H，s)，7.99(1H，br－s)，7.95－7.85(1H，m)，7.77(1H，d，J＝8.8Hz)，7.38(1H，d，J＝2.3Hz)，7.29(1H，dd，J＝2.3,8.8Hz)，4.75－4.60(2H，m)，4.48(2H，br－s)，3.84－3.80(2H，m)，3.32－3.24(2H，m)，2.90－2.65(3H，m)，1.95－1.80(2H，m)，1.66－1.58(1H，m)，1.41－1.25(2H，m)，1.17(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 556[M+H]⁺.

实施例42

4－(4－((5－(4－(2－羟基丙烷－2－基)哌啶－1－羰基)噁唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

乙基2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)噁唑－5－羧酸酯的合成

按照参考例2－1，使用2－氨基噁唑－5－羧酸乙酯(276mg)取代6－氨基烟酸甲酯，取代在80℃下搅拌一夜，而在微波照射下于160℃下使其反应25分钟，进行同样的操作，由此得到标记化合物(180mg，27％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.28(1H，s)，7.68－7.77(3H，s)，7.23(1H，d，2.6Hz)，7.08(1H，dd，J＝2.6,8.8Hz)，4.45－4.36(4H，m)，3.75(2H，t，5.7Hz)，2.98(2H，t，J＝5.7Hz)，1.39(3H，t，J＝7.2Hz)；LRMS(ESI)m/z 459[M+H]⁺.

(工序2)

2－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)噁唑－5－羧酸的合成

按照实施例41的工序2，使用本实施例的工序1中得到的化合物(180mg)取代实施例41的工序1中得到的化合物，进行同样的操作，由此得到标记化合物(137mg，81％)。

LRMS(ESI)m/z 431[M+H]⁺.

(工序3)

4－(4－((5－(4－(2－羟基丙烷－2－基)哌啶－1－羰基)噁唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

按照实施例11，使用工序2中得到的化合物(25mg)取代参考例2－2中得到的化合物，使用2－(哌啶－4－基)丙烷－2－醇(10mg)取代2,2,2－三氟乙基胺，使用HOBt(10mg)、WSC(13mg)取代DMT－MM，进行同样的操作，由此得到标记化合物(8.6mg，27％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.26(1H，s)，7.69(1H，d，J＝8.8Hz)，7.60(1H，s)，7.29－7.21(1H，m)，7.07(1H，dd，J＝2.2,8.8Hz)，4.75－4.60(2H，m)，4.42(2H，s)，3.75(2H，t，J＝5.7Hz)，3.06－2.92(2H，m)，1.94－1.86(2H，m)，1.61(2H，dt，J＝2.9，12.1Hz)，1.39－1.16(9H，m)；LRMS(ESI)m/z 556[M+H]⁺.

实施例43

4－(4－((5－(4－(2－羟基丙烷－2－基)哌啶－1－羰基)－1,3,4－噁二唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

乙基5－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－1,3,4－噁二唑－2－羧酸酯的合成

按照参考例2－1，使用5－氨基－1,3,4－噁二唑－2－羧酸乙酯(418mg)取代6－氨基烟酸甲酯，取代在80℃下搅拌一夜，而在微波照射下于150℃下使其反应30分钟，进行同样的操作，由此得到标记化合物(120mg，15％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.59(1H，s)，7.88(1H，d，8.8Hz)，7.46(1H，d，2.6Hz)，7.38(1H，dd，J＝2.6,8.8Hz)，4.55(2H，s)，4.40(2H，q，7.0Hz)，3.83(2H，t，J＝5.9Hz)，2.80(2H，t，J＝5.9Hz)，1.34(3H，t，J＝7.0Hz)；LRMS(ESI)m/z 460[M+H]⁺.

(工序2)

4－(4－((5－(4－(2－羟基丙烷－2－基)哌啶－1－羰基)－1,3,4－噁二唑－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

将工序1中得到的化合物(30mg)溶解于乙醇(2mL)、THF(2mL)，加入1.0mol/L氢氧化钠水溶液(130μL)，在室温下搅拌5分钟。将反应液进行冰冷，使用1.0mol/L盐酸调整为pH5左右之后，进行浓缩干固。使得到的固体溶解于甲醇(1mL)、DMF(1mL)，加入2－(哌啶－4－基)丙烷－2－醇(11mg)和DMT－MM(21mg)，在室温下搅拌整夜。在反应液中加入2－(哌啶－4－基)丙烷2－醇(10mg)和DMT－MM(88mg)，在室温下进一步搅拌6小时。在反应液中加入水，滤取析出物，将得到的固体用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(5.0mg，14％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.56(1H，br－s)，7.87(1H，d，J＝8.8Hz)，7.46(1H，d，J＝2.2Hz)，7.38(1H，dd，J＝2.2,8.8Hz)，4.69－4.43(4H，m)，4.20(1H，s)，3.81(2H，t，J＝5.7Hz)3.17－3.04(1H，m)，2.85－2.61(3H，m)，1.80(2H，t，J＝12.8Hz)，1.57－1.45(1H，m)，1.31－1.12(2H，m)，1.03(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 557[M+H]⁺.

实施例44

2－溴－4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

(工序1)

6－((7－苄基－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)烟酸甲酯的合成

按照参考例2－1，使市售的7－苄基－4－氯－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶(5.37g)和6－氨基烟酸甲酯(3.45g)、Pd(dba) 2(1.19g)、dppf(1.15g)、碳酸钾(5.70g)悬浮于1,2－二甲氧基乙烷(100mL)，在氮氛围下于83℃下搅拌一小时。将反应液自然冷却后，加入水(400mL)，滤取产生的固体，用甲醇/水(3/1,60mL)悬浮清洗后，用甲苯(60mL)进行悬浮清洗，进行加热干燥，由此得到标记化合物(5.18g，收率67％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.39(1H，s)，8.84(1H，s)，8.57(1H，s)，8.32(1H，d，J＝8.0Hz)，8.26(1H，dd，J＝8.0，4.0Hz)，7.40－7.20(5H，m)，3.86(3H，s)，3.69(2H，s)，3.48(2H，s)，2.80－2.70(4H，m)；LRMS(ESI)m/z 376[M+H]⁺。

(工序2)

2－(6－((7－苄基－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡啶－3－基)丙烷－2－醇的合成

在氮氛围下，将工序1中得到的化合物(5.0g)悬浮于THF(16mL)，在冰冷下用5分钟滴加1mol/L甲基溴化镁THF溶液(47mL)。滴加结束后，升温至室温，在原有的温度下搅拌3.5小时。再将反应容器进行冰冷，在20℃以下加入2mol/L盐酸(24mL)。用硅藻土除去不溶物，将由分层得到的油层用硫酸镁进行干燥，在减压下馏去溶剂。在得到的油状物中加入间二甲苯(25mL)，在冰冷下进行搅拌，使固体晶析。滤取析出的沉淀物之后，进行加热干燥，得到标记化合物(2.44g，收率49％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.78(1H，s)，8.44(1H，s)，8.40(1H，d，J＝4.0Hz)，8.07(1H，d，J＝8.0Hz)，7.82(1H，dd，J＝8.0，4.0Hz)，7.40－7.25(5H，m)，5.14(1H，s)，3.68(2H，s)，3.43(2H，s)，2.80－2.65(4H，m)，1.45(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 376[M+H]⁺

(工序3)

2－(6－((5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡啶－3－基)丙烷－2－醇的合成

将工序2中得到的化合物(1.0g)溶解于乙醇(10mL)，加入10％钯/碳(50％湿品，600mg)，在氢氛围下于60℃下搅拌7小时。用硅藻土将不溶物过滤分离，将母液进行浓缩。在得到的油状物中加入甲基异丁基酮(12mL)，进行冷却，使沉淀物析出。滤取固体之后，在减压下进行加热干燥，滤取析出的不溶物，由此得到标记化合物(576mg，收率76％)。

(工序4)

2－溴－4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈的合成

将工序3中得到的化合物(20mg)、2－溴－4－氟苄腈(21mg)、碳酸钾(15mg)溶解于DMSO(0.2mL)，在微波照射下于125℃下搅拌25分钟。将反应混合物用反相分取HPLC柱色谱法进行精制，将得到的组分进行减压浓缩，由此得到作为白色非晶的标记化合物(15mg，46％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.67(1H，s)，8.47(1H，d，J＝8.8Hz)，8.42(1H，d，J＝2.6Hz)，7.87(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，7.51(1H，d，J＝8.8Hz)，7.36(1H，br－s)，7.17(1H，d，J＝2.6Hz)，6.89(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，4.45(2H，s)，3.81(2H，t，J＝5.9Hz)，2.83(2H，t，J＝5.7Hz)，1.62(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 465[M+H]⁺。

实施例45

2－氯－4－(4－((4－氟－5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

(工序1)

4－氟－5－碘吡啶－2－胺的合成

将4－氟吡啶－2－胺(1.20g)溶解于乙腈(24mL)，在遮光及冰冷下加入N－碘琥珀酰亚胺(2.41g)之后，在室温下搅拌整夜。将得到的反应液进行浓缩，用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到作为淡黄色固体的132mg(5％)的标题化合物。

(工序2)

6－氨基－4－氟吡啶－3－羧酸乙酯的合成

将工序1中得到的化合物(132mg)、乙酸钯(II)(31mg)、dppf(77mg)、三乙基胺(0.23mL)悬浮于乙醇(26mL)，在一氧化碳氛围下(0.5MPa)于60℃下搅拌两整夜。将反应液进行减压浓缩之后，加入乙酸乙酯(20mL)、蒸馏水(20mL)，进行硅藻土过滤。将有机相用蒸馏水、饱和食盐水清洗，用无水硫酸钠进行干燥。将不溶物过滤分离之后，进行浓缩干固，将得到的固体用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到作为灰白色固体的67mg(66％)的标记化合物。

(工序3)

6－((7－(3－氯－4－氰基苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－4－氟烟酸乙酯的合成

使参考例1－3中得到的化合物(139mg)、工序2中得到的化合物(60mg)、Pd2(dba)3(30mg)、XantPhos(38mg)、碳酸铯(318mg)悬浮于二噁烷(1.2mL)，在氮氛围下于80℃下搅拌4小时。将反应液自然冷却后，进行硅藻土过滤，将滤液进行浓缩。将得到的固体用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到作为淡黄色固体的14mg(9％)的标记化合物。

(工序4)

2－氯－4－(4－((4－氟－5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈的合成

将工序3中得到的化合物(14mg)溶解于THF(1.4mL)，在冰浴下加入甲基溴化镁(3mol/L二乙醚溶液，0.11mL)，在室温下搅拌1小时。在反应液中加入饱和氯化铵水溶液(3mL)，用氯仿萃取3次。将有机相合并，用硫酸镁进行干燥后，将不溶物过滤分离，进行减压浓缩。将得到的残渣用反相分取HPLC柱色谱法进行精制，由此得到作为黄色固体的2.1mg(16％)的标题化合物。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.70(1H，s)，8.47(1H，d，J＝11.0Hz)，8.37(1H，d，J＝14.3Hz)，7.53(1H，d，J＝8.8Hz)，7.45(1H，br－s)，6.99(1H，d，J＝2.6Hz)，6.85(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，4.47(2H，s)，3.81(2H，t，J＝5.9Hz)，2.83(2H，t，J＝5.7Hz)，1.67(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 439[M+H]⁺。

实施例46

2－氯－4－(4－((6－氟－5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

(工序1)

6－氨基－2－氟烟酸乙酯的合成

按照实施例5的工序2，使用乙醇取代甲醇，进行同样的操作，由此得到标题化合物。

(工序2)

6－((7－(3－氯－4－氰基苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－2－氟烟酸乙酯

按照参考例2－1，使用参考例1－2中得到的化合物和工序1中得到的化合物，进行同样的操作，由此得到标题化合物。

(工序3)

2－氯－4－(4－((6－氟－5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

按照实施例45的工序4，使用工序3中得到的化合物(30mg)，进行同样的操作，由此得到作为白色固体的标题化合物(4.2mg，14％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.70(1H，s)，8.39(1H，dd，J＝8.4,1.8Hz)，8.06(1H，dd，J＝10.6,8.4Hz)，7.53(1H，d，J＝8.8Hz)，7.00(1H，d，J＝2.6Hz)，6.85(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，4.47(2H，s)，3.81(2H，t，J＝5.7Hz)，2.80(2H，t，J＝5.7Hz)，1.65(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 439[M+H]⁺。

实施例47

4－(4－((4－氟－5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

按照实施例46，使用按照实施例5的工序2使用4－氟吡啶－2－胺取代6－氟吡啶－2－胺而合成的6－氨基－4－氟烟酸乙酯，另外，使用参考例1－2中得到的化合物取代参考例1－3中得到的化合物，进行同样的操作，由此得到作为白色固体的标题化合物(21.3mg，20％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.70(1H，s)，8.47(1H，d，J＝11.0Hz)，8.37(1H，d，J＝14.3Hz)，7.70(1H，d，J＝8.4Hz)，7.45(1H，br－s)，7.25(1H，d，J＝2.6Hz)，7.08(1H，dd，J＝8.6,2.6Hz)，4.47(2H，s)，3.80(2H，t，J＝6.0Hz)，2.83(2H，t，J＝5.8Hz)，1.67(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 473[M+H]⁺.

实施例48

5－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2－二氟乙基)吡啶酰胺

(工序1)

5－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)吡啶－3－基)吡啶甲酸的合成

按照参考例2－1～2－2，使用5－氨基吡啶甲酸甲酯(540mg)取代6－氨基烟酸甲酯，进行同样的操作，由此得到标记化合物(496mg，2阶段收率38％)。

(工序2)

5－((7－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2－二氟乙基)吡啶－3－基)吡啶酰胺的合成

按照实施例11，使用工序1中得到的化合物(40mg)取代参考例2－2中得到的化合物，使用HATU(69mg)、DIPEA(63uL)取代DMT－MM，使用2,2－二氟乙基胺取代2,2,2－三氟乙基胺，进行同样的操作，由此得到标记化合物(24mg)(收率52％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.13(br－s，1H)，8.97(d，J＝2.2Hz，1H)，8.94(t，J＝6.2Hz，1H)，8.55(s，1H)，8.41(dd，J＝8.6,2.4Hz，1H)，8.02(d，J＝8.6Hz，1H)，7.88(d，J＝9.1Hz，1H)，7.45(brd，J＝2.2Hz，1H)，7.39(dd，J＝9.1,2.2Hz，1H)，5.94－6.33(m，1H)，4.57(s，2H)，3.90(brt，J＝5.5Hz，2H)，3.63－3.74(m，2H)，3.25(br－s，1H)，2.87(t，J＝5.5Hz，2H)；LRMS(ESI)m/z 504[M+H]⁺.

实施例49

6－((7－(3－氯－4－氰基苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)哒嗪－3－羧酰胺

按照实施例29，使实施例29的工序3中得到的化合物(9.0mg)和2,2,2－三氟乙基胺(4.4mg)反应，由此得到标记化合物(7.0mg，65％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ10.27(br－s，1H)，9.58(t，J＝6.6Hz，1H)，8.65(s，1H)，8.47(d，J＝9.5Hz，1H)，8.18(d，J＝9.5Hz，1H)，7.70(d，J＝9.0Hz，1H)，7.33(d，J＝2.4Hz，1H)，7.13(dd，J＝9.0，2.4Hz，1H)，4.56(s，2H)，4.06－4.17(m，2H)，3.82(t，J＝5.6Hz，2H)，2.97(brt，J＝5.6Hz，2H)；LRMS(ESI)m/z489[M+H]⁺.

实施例50

4－(4－((5－氟－6－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

按照实施例15，使用2－氯－3－氟－5－硝基吡啶(100mg)取代2－氯－5－硝基吡啶，并且使用实施例16的工序1中得到的2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙烷－1－醇(97mg)取代2－(1H－1,2,3三唑－1－基)乙醇，进行同样的操作，由此得到标记化合物(40mg，49％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.59(s，1H)，8.82(br－s，1H)，8.43(s，1H)，8.14(d，J＝2.2Hz，1H)，8.05(dd，J＝12.1,2.2Hz，1H)，7.87(d，J＝8.8Hz，1H)，7.44(d，J＝2.6Hz，1H)，7.38(dd，J＝8.8,2.6Hz，1H)，4.67(s，2H)，4.52(s，2H)，3.88(t，J＝5.7Hz，2H)，2.78(brt，J＝5.5Hz，2H)，1.77(s，6H)；LRMS(ESI)m/z 555[M+H]⁺.

实施例51

4－(4－((5－氟－6－(2－甲基－2－(1H－1,2,3－三唑－1－基)丙氧基)吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

2－甲基－2－(1H―1,2,3―三唑－1－基)丙酸乙酯的合成

将2－叠氮－2－甲基丙酸乙酯(3.1g)溶解于甲苯(190mL)，加入乙炔基三甲基硅烷(13mL)，在130℃下搅拌36小时。将反应液浓缩干固之后，将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到粗体的油状物(2.16g)。将得到的油状物溶解于THF(20mL)，加入1.0mol/L四丁基氟化铵THF溶液(9.8mL)，在室温下搅拌15小时之后，加入1.0mol/L四丁基氟化铵THF溶液(3.0mL)，在室温下搅拌7小时。向反应混合物中加入饱和氯化铵水溶液，用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠进行干燥。将不溶物过滤分离之后，进行浓缩干固，将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(500mg，42％)。

(工序2)

2－甲基－2－(1H―1,2,3―三唑－1－基)丙烷－1－醇的合成

将工序1中得到的化合物(420mg)溶解于THF(10mL)，在冰冷下加入氢氧化铝锂(130mg)的THF溶液(10mL)。在冰冷下搅拌2小时后，滴加水(132μL)、1.0mol/L氢氧化钠水溶液(132μL)、水(400μL)。将反应液进行硅藻土过滤后，用乙酸乙酯清洗。将滤液进行浓缩干固，将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(240mg，74％)。

(工序3)

4－(4－((5－氟－6－(2－甲基－2－(1H－1,2,3－三唑－1－基)丙氧基)吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

按照实施例15，使用2－氯－3－氟－5－硝基吡啶(100mg)取代2－氯－5－硝基吡啶，并且使用工序2中得到的2－甲基－2－(1H－1,2,3－三唑－1－基)丙烷－1－醇(80mg)取代2－(1H－1,2,3三唑－1－基)乙醇，进行同样的操作，由此得到标记化合物(54mg，66％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.82(br－s，1H)，8.43(s，1H)，8.26(s，1H)，8.17(d，J＝2.1Hz，1H)，8.05(dd，J＝12.3,2.1Hz，1H)，7.87(d，J＝8.8Hz，1H)，7.71(s，1H)，7.44(d，J＝2.1Hz，1H)，7.38(dd，J＝8.8,2.4Hz，1H)，4.66(s，2H)，4.52(br－s，2H)，3.89(t，J＝5.6Hz，2H)，2.78(brt，J＝5.6Hz，2H)，1.73(s，6H)；LRMS(ESI)m/z 554[M+H]⁺.

实施例52

4－(4－((5－氯－6－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－3－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

按照实施例15，使用2,3－二氯－5－硝基吡啶(100mg)取代2－氯－5－硝基吡啶，并且使用实施例16的工序1中得到的2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙烷－1－醇(88mg)取代2－(1H－1,2,3三唑－1－基)乙醇，进行同样的操作，由此得到标记化合物(33mg，39％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.58(s，1H)，8.79(s，1H)，8.44(s，1H)，8.30(d，J＝2.5Hz，1H)，8.22(d，J＝2.2Hz，1H)，7.87(d，J＝8.8Hz，1H)，7.44(d，J＝2.2Hz，1H)，7.39(dd，J＝8.8,2.5Hz，1H)，4.64(s，2H)，4.52(br－s，2H)，3.89(t，J＝5.6Hz，2H)，2.78(brt，J＝5.6Hz，2H)，1.79(s，6H)；LRMS(ESI)m/z 571[M+H]⁺.

实施例53

2－氯－4－(4－((5－(2－甲基－2－(1H－四唑－1－基)丙氧基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

按照实施例17的工序4，使用参考例1－3中得到的化合物(50mg)取代实施例17的工序3中得到的化合物(42mg)和参考例1－2中得到的化合物，进行同样的操作，由此得到标记化合物(27mg，33％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.61(s，1H)，8.97(br－s，1H)，8.47(s，1H)，7.97－8.02(m，2H)，7.67(d，J＝9.2Hz，1H)，7.40(dd，J＝9.0，3.1Hz，1H)，7.29(d，J＝2.2Hz，1H)，7.09(dd，J＝9.2,2.2Hz，1H)，4.45(br－s，2H)，4.36(s，2H)，3.78(t，J＝5.6Hz，2H)，2.80(brt，J＝5.6Hz，2H)，1.77(s，6H)；LRMS(ESI)m/z 503[M+H]⁺.

实施例54

2－氯－4－(4－((4－甲氧基苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

将参考例1－3中得到的固体(5.0mg)、4－甲氧基苯胺(11g)、(+)－10－樟脑磺酸(3.8mg)悬浮于2－丙醇(1mL)，在微波照射下于120℃下搅拌1小时。在氮气流下将反应液浓缩干固之后，将残渣用反相分取HPLC柱色谱法进行精制，将得到的组分进行减压浓缩，由此得到标题化合物(1.7mg，26％)。

¹H－NMR(400MHz，CDCl3)δ：8.54(1H，s)，7.52(1H，d，J＝9.2Hz)，7.41(2H，brd，J＝8.8Hz)，6.99(1H，s)，6.93(2H，d，J＝8.8Hz)，6.84(1H，brd，J＝9.2Hz)，6.34(1H，br－s)，4.45(2H，s)，3.82(3H，s)，3.78－3.84(2H，m)，2.73(2H，br－s)；LRMS(ESI)m/z 392[M+H]⁺.

实施例55

2－氯－4－(4－((3－甲氧基苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

将参考例1－3中得到的固体(12mg)、3－甲氧基苯胺(15mg)、(+)－10－樟脑磺酸(5.3mg)悬浮于叔丁醇(1mL)，在微波照射下于115℃下搅拌45分钟。在氮气流下将反应液浓缩干固之后，将残渣用反相分取HPLC柱色谱法进行精制，将得到的组分进行减压浓缩，由此得到标题化合物(5.5mg，36％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.80(1H，s)，7.52(1H，d，J＝9.2Hz)，7.45－7.58(2H，m)，7.07(1H，brd，J＝9.2Hz)，6.99(1H，s)， 6.85(1H，d，J＝7.1Hz)，6.72(1H，d，J＝7.2Hz)，6.48(1H，br－s)，4.45(2H，s)，3.84(3H，s)，3.78－3.84(2H，m)，2.67－2.84(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 392[M+H]⁺.

实施例56

2－氯－4－(4－((6－氟－5－(1－羟基环丁基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

(工序1)

1－(6－氯－2－氟－3－吡啶基)环丁醇的合成

将2－氯－6－氟吡啶(910mg)的THF(15mL)溶液冷却至－78℃之后，滴加LDA(2mol/LTHF溶液，5.2mL)。将反应液在－78℃下搅拌45分钟后，滴加环丁酮(480mg)，将反应液在－78℃下搅拌90分钟。在反应液中加入乙酸乙酯及水，将有机层用饱和氯化铵水溶液、饱和食盐水依次清洗，用无水硫酸钠进行干燥。将不溶物过滤分离之后，进行浓缩干固，将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到作为无色油状物质的标记化合物(1.5g)。

(工序2)

1－(6－氨基－2－氟－3－吡啶基)环丁醇的合成

将工序1中得到的化合物(200mg)、氢氧化铜(I)(30mg)悬浮于NMP(2mL)及28％氨水的混合溶剂，在微波照射下于110℃下搅拌2小时。将溶剂减压馏去之后，将残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(8.4mg，4.6％)。

(工序3)

2－氯－4－(4－((6－氟－5－(1－羟基环丁基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈的合成

按照参考例2－1，使用参考例1－3中得到的固体(7.2mg)取代参考例1－2中得到的化合物，另外，使用工序2中得到的化合物(4.2mg)取代6－氨基烟酸甲酯，由此得到作为黄色非晶质的标题化合物(2.0mg，19％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.71(1H，s)，8.40(1H，dd，J＝8.8,2.2Hz)，7.86(1H，dd，J＝11.0，8.1Hz)，7.53(1H，d，J＝8.1Hz)，7.00(1H，d，J＝2.2Hz)，6.85(1H，dd，J＝8.8,2.2Hz)，4.48(2H，s)，3.75－3.86(2H，m)，2.76－2.86(2H，m)，2.56－2.72(2H，m)，2.33－2.48(2H，m)，2.07－2.22(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 451[M+H]⁺.

实施例57

4－(4－((2－羟基丙烷－2－基)苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

4－(4－((4－乙酰基苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

将参考例1－2中得到的化合物(8.2mg)、1－(4－氨基苯基)乙酮(8.3mg)、(+)－10－樟脑磺酸(2.9mg)悬浮于叔丁醇(1mL)，在微波照射下于135℃下搅拌90分钟。在氮气流下将反应液浓缩干固之后，将残渣用反相分取HPLC柱色谱法进行精制，将得到的组分进行减压浓缩，由此得到标题化合物(7.9mg，75％)。

(工序2)

4－(4－((2－羟基丙烷－2－基)苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

在工序1中得到的化合物(2.5mg)的THF(0.5mL)溶液中，在室温下加入溴化甲基镁(2M THF溶液，0.1mL)，将反应液在室温下搅拌15分钟。在氮气流下将反应液浓缩干固之后，将残渣用反相分取HPLC柱色谱法进行精制，将得到的组分进行减压浓缩，由此得到作为白色固体的标题化合物(1.8mg，69％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.60(1H，s)，7.70(1H，d，J＝8.8Hz)，7.53(4H，s)，7.24(1H，d，J＝2.0Hz)，7.07(1H，dd，J＝8.8,2.0Hz)，6.42(1H，s)，4.51(2H，s)，3.89(2H，t，J＝5.6Hz)，2.78(2H，t，J＝5.6Hz)，1.61(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 454[M+H]⁺.

实施例58

4－(4－((1－羟基乙基)苯基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

在实施例57(工序1)中得到的化合物(1.7mg)的甲醇(0.5mL)溶液中，在室温下加入四氢硼酸钠(3mg)，将反应液在室温下搅拌15分钟。在氮气流下将反应液浓缩干固之后，将残渣用反相分取HPLC柱色谱法进行精制，将得到的组分进行减压浓缩，由此得到作为白色固体的标题化合物(1.6mg，94％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.60(1H，s)，7.70(1H，d，J＝8.8Hz)，7.53－7.60(2H，m)，7.38－7.46(2H，m)，7.20－7.30(1H，m)，7.03－7.13(1H，m)，6.42(1H，d，9.2Hz)，4.88－4.98(1H，m)，4.51(2H，s)，3.85－3.93(2H，m)，2.75－2.85(2H，m)，1.49－1.56(3H，m)；LRMS(ESI)m/z 440[M+H]⁺.

比较例1

N－(4－氰基－3－(三氟甲基)苯基)－3－((4－氟苯基)磺酰基)－2－羟基－2－甲基丙烷酰胺(Bicalutamide)

以J.Org.Chem.,2003,68(26):10181－2中记载的方法合成。

比较例2

4－(4－((4－异丙氧基苯基)氨基)－7,8－二氢吡啶并[4,3－d]嘧啶－6(5H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

6－苄基－5,6,7,8－四氢吡啶并[4,3－d]嘧啶－4－醇的合成

在乙基1－苄基－4－氧代哌啶－3－羧酸酯盐酸盐(5.31g)中加入甲脒盐酸盐(1.67g)及甲醇钠(30mL，28％甲醇溶液)，在85℃下搅拌整夜。在反应溶液中加入水之后，用氯仿萃取5次，用硫酸钠干燥后进行浓缩，由此得到标记化合物(3.16g，77％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ7.81(1H，s)，7.32－7.23(5H，m)，3.58(2H，s)，3.09(2H，s)，2.58(2H，t，J＝5.7Hz)，2.43(2H，t，J＝5.7Hz)；LRMS(ESI)m/z 242[M+H]⁺.

(工序2)

(4－(4－羟基－7,8－二氢吡啶并[4,3－d]嘧啶－6(5H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

将工序1中得到的化合物(3.16g)溶解于甲醇(8mL)之后，加入10％钯/碳(600mg，含水50％)及甲酸铵(4.13g)，在60℃下搅拌两天。将反应溶液用Hyflo Super-Cel过滤后，将残渣用甲醇及DMSO清洗，其后，将滤液的甲醇进行减压馏去。在得到的溶液中加入4－氟－2－(三氟甲基)苄腈(2.70g)，在40℃下搅拌两天。在反应溶液中加入水之后，用乙酸乙酯萃取3次，用水和饱和食盐水清洗有机层。将得到的溶液用硫酸钠干燥后，进行减压浓缩，由此得到标记化合物(4.03g，44％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.07(1H，s)，7.85(1H，d，J＝8.9Hz)，7.34(1H，d，J＝2.2Hz)，7.28(1H，dd，J＝8.9，2.2Hz)，4.20(2H，s)，3.75(2H，t，J＝5.6Hz)，2.72(2H，t，J＝5.6Hz)；LRMS(ESI)m/z 321[M+H]⁺.

(工序3)

(4－(4－氯－7,8－二氢吡啶并[4,3－d]嘧啶－6(5H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

将工序2中得到的化合物(1.82g)溶解于1,2－二氯乙烷(10mL)之后，加入氧氯化磷(5.3mL)及三乙基胺(1.73mL)，在90℃下搅拌2小时。将反应溶液注入于冰水中，慎重地加入固体的碳酸钾进行中和。将得到的溶液用氯仿萃取3次，用硫酸钠干燥后，在减压下进行浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(1.09g，57％)。

LRMS(ESI)m/z 339[M+H]⁺.

(工序4)

4－(4－((4－异丙氧基苯基)氨基)－7,8－二氢吡啶并[4,3－d]嘧啶－6(5H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

使工序3中得到的化合物(60mg)溶解于乙腈(1.5mL)，加入4－异丙氧基苯胺(40mg)，在微波照射下于180℃下搅拌30分钟。在反应溶液中加入饱和碳酸氢钠水溶液之后，用氯仿萃取3次，将有机层用硫酸钠干燥后进行浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(82mg，100％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.57(1H，s)，7.69(1H，d，J＝8.8Hz)7.41－7.37(2H，m)，7.23(1H，d，J＝2.6Hz)，7.10(1H，dd，J＝8.8,2.6Hz)，6.95－6.90(2H，m)，6.30(1H，b－rs)，4.55(1H，sept，J＝6.1Hz)，4.30(2H，s)，3.82(2H，t，J＝5.9Hz)，3.06(2H，t，J＝5.9Hz)，1.36(6H，d，J＝6.1Hz)；LRMS(ESI)m/z 454[M+H]⁺.

比较例3

4－(3－((4－异丙氧基苯基)氨基)－5,6－二氢[1,2,4]三唑并[4,3－a]吡嗪－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈

(工序1)

2－氯－3－肼基吡嗪的合成

使2,3－二氯吡嗪(25g)溶解于乙醇(500mL)，加入肼一水合物(16.7mL)，在回流下搅拌1小时半。在反应溶液中加入水，滤取析出的固体之后，在减压下进行干燥。将得到的固体从乙醇中进行再结晶，由此得到作为白色结晶的标记化合物(18.12g，74％)。

(工序2)

8－氯－[1,2,4]三唑并[4,3－a]吡嗪的合成

将工序1中得到的化合物(8g)和原甲酸三乙酯(32mL)的混合物在回流下搅拌4小时。将反应液冷却至室温后，过滤析出的固体，其后，用乙醇清洗，进行减压下干燥，由此得到标记化合物(8.10g，95％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.53(1H，s)，8.62(1H，d，J＝4.6Hz)，7.76(1H，d，J＝4.6Hz)；LRMS(ESI)m/z 155[M+H]⁺.

(工序3)

叔丁基5,6,－二氢－[1,2,4]三唑并[4,3－a]吡嗪－7(8H)－羧酸酯的合成

将工序2中得到的化合物(8.10g)和氢氧化铂(IV)及10％钯/碳(2g，含水50％)溶解于甲醇(8mL)之后，在氢氛围下以50psi(Parr)搅拌34小时。将反应溶液用Hyflo Super-Cel过滤后，将溶剂进行浓缩，将由此得到的油状物溶解于二氯甲烷(200mL)，加入N,N－二异丙基乙基胺(10mL)及二碳酸二叔丁基酯(11.4g)，在室温下搅拌3小时。在反应溶液中加入饱和碳酸氢钠水溶液之后，用氯仿萃取3次，将有机层用硫酸钠干燥后进行浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(2.55g，22％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ8.15(1H，s)，4.84(2H，s)，4.09(1H，t，J＝5.5Hz)，3.88(1H，t，J＝5.5Hz)、1.50(9H、s)；LRMS(ESI)m/z 225[M+H]⁺.

(工序4)

叔丁基3－溴－5,6,－二氢－[1,2,4]三唑并[4,3－a]吡嗪－7(8H)－羧酸酯的合成

使工序3中得到的化合物(1g)溶解于氯仿(20mL)，在0℃下加入碳酸氢钠(688mg)及N－溴琥珀酰亚胺(873mg)，在室温下搅拌2小时半。在反应溶液中加入水之后，用氯仿萃取3次，将有机层用硫酸钠干燥后进行浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(693mg，51％)。

LRMS(ESI)m/z 303[M+H]⁺.

(工序5)

4－(3－溴－5,6－二氢－[1,2,4]三唑并[4,3－a]吡嗪－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

使工序4中得到的化合物(53mg)溶解于氯仿(2mL)，加入三氟乙酸(0.2mL)，在室温下搅拌一夜。将反应溶液在减压下进行浓缩，将由此得到的油状物溶解于N,N－二甲基甲酰胺(1.5mL)，加入碳酸铯(111mg)及4－氟－2－(三氟甲基)苄腈(64mg)，在200℃下搅拌2小时。在反应溶液中加入水之后，用乙酸乙酯萃取3次，将有机层用水和饱和食盐水清洗后，用硫酸钠干燥后进行浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(19mg，30％)。

LRMS(ESI)m/z 372[M+H]⁺.

(工序6)

4－(3－((4－异丙氧基苯基)氨基)－5,6－二氢[1,2,4]三唑并[4,3－a]吡嗪－7(8H)－基)－2－(三氟甲基)苄腈的合成

使工序5中得到的化合物(19mg)溶解于二噁烷(1mL)，加入4－异丙氧基苯胺(12mg)及4N－盐酸－二噁烷(64μL)，在微波照射下于180℃下搅拌20分钟。在反应溶液中加入饱和碳酸氢钠水溶液之后，用氯仿萃取3次，将有机层用硫酸钠干燥后进行浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色谱法进行精制，由此得到标记化合物(13mg，57％)。

¹H－NMR(CDCl3)δ7.71(1H，d，J＝8.8Hz)，7.29(1H，s)，7.18－7.12(3H，m)，7.03(1H，dd，J＝8.8,2.7Hz)，6.88－6.79(2H，m)，4.66(2H，s)，4.45(1H，sept,J＝6.1Hz)，3.83(4H，br－s)，1.31(6H，d，J＝6.1Hz)；LRMS(ESI)m/z 443[M+H]⁺.

比较例4

7－(3－氯吡啶－2－基)－N－(4－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－胺

用专利文献1或3中记载的方法来合成。

比较例5

3－氯－4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

在DMSO(2mL)中加入实施例44的工序3中得到的化合物(74mg)、3－氯－4－氟苄腈(40mg)、碳酸钠(82mg)，在120℃下使其反应3小时。过滤不溶物之后，用反相分取HPLC柱色谱法得到标记化合物(26mg，24％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.92(1H，s)，8.52(1H，s)，8.42(1H，d，J＝2.4Hz)，8.07(1H，d，J＝8.8Hz)，8.01(1H，d，J＝2.4Hz)，7.84(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，7.79(1H，dd，J＝8.4,2.0Hz)，7.36(1H，d，J＝8.4Hz)，5.14(1H，s)，4.26(2H，s)，3.53(2H，t，J＝5.6Hz)，2.90(2H，t，J＝5.6Hz)，1.46(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 421[M+H]⁺

比较例6

3－氯－5－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

在DMSO(2mL)中加入实施例44的工序3中得到的化合物(74mg)、3－氯－5－氟苄腈(40mg)、碳酸钠(82mg)，在120℃下使其反应15小时。过滤不溶物之后，用反相分取HPLC柱色谱法得到标记化合物(17mg，收率15％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.99(1H，s)，8.53(1H，s)，8.42(1H，d，J＝2.4Hz)，8.04(1H，d，J＝8.4Hz)，7.83(1H，dd，J＝8.8,2.8Hz)，7.51(1H，s)，7.43(1H，t，J＝2.4Hz)，7.26(1H，s)，5.13(1H，s)， 4.40(2H，s)，3.73(2H，t，J＝5.6Hz)，2.85(2H，t，J＝5.6Hz)，1.46(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 421[M+H]⁺

比较例7

2－氯－6－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

在DMSO(2mL)中加入实施例44的工序3中得到的化合物(74mg)、2－氯－6－氟苄腈(40mg)、碳酸钠(82mg)，在120℃下使其反应3小时。过滤不溶物之后，用反相分取HPLC柱色谱法得到标记化合物(18mg，收率16％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.01(1H，s)，8.52(1H，s)，8.43(1H，d，J＝2.4Hz)，8.04(1H，d，J＝8.8Hz)，7.84(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，7.62(1H，t，J＝8.4Hz)，7.27(2H，t，J＝8.4Hz)，5.14(1H，s)，4.31(2H，s)，3.66(2H，t，J＝5.6Hz)，2.94(2H，t，J＝5.6Hz)，1.46(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 421[M+H]⁺

比较例8

6－((7－(2－氰基－4－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8―四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)烟酰胺

(工序1)

6－((7－苄基－5,6,7,8―四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)烟酸的合成

将实施例44的工序1中得到的化合物(150mg)悬浮于甲醇(1mL)、6mol/L氢氧化钠水溶液(0.2mL)，在微波照射下于120℃下使其反应10分钟。接着加入5N－HCl(0.24mL)，滤取产生的固体并进行干燥，得到淡褐色的目的物(120mg，83％)。该物质不进行精制而用于以下的反应。

(工序2)

6－((7－苄基－5,6,7,8―四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)烟酰胺的合成

在DMF(3mL)中加入工序1中得到的化合物(120mg)，加入DIPEA(N,N－二异丙基乙基胺，76μL)、HATU(162mg)。接着，加入2,2,2－三氟乙胺(43mg)，在室温下搅拌2小时。接着在冰冷下加入水(3mL)并搅拌1小时。析出的固体进行滤取、干燥，得到标记化合物(70mg，收率92％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.28(1H，s)，9.14(1H，t，J＝6.4Hz)，8.23(1H，s)，8.54(1H，s)，8.29(1H，d，J＝8.8Hz)，8.22(1H，d，J＝8.8Hz)，7.40－7.30(5H，m)，4.13－4.09(2H，m)，3.68(2H，s)，3.46(2H，s)，2.76－2.72(4H，m)；LRMS(ESI)m/z 443[M+H]⁺

(工序3)

6－((5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)烟酰胺

将工序2中得到的化合物(640mg)溶解于乙醇(30mL)，加入10％钯/碳(50％湿品，300mg)，在氢氛围下于70℃下搅拌5小时。用硅藻土将不溶物进行过滤分离，将母液进行浓缩。在得到的粗生成物中加入甲基异丁基酮(1mL)、己烷(1mL)，使固体析出。滤取固体之后，进行干燥，由此得到标记化合物(440mg，收率86％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.16－9.10(2H，m)，8.80(1H，s)，8.52(1H，s)，8.24(1H，d，J＝8.8Hz)，8.20(1H，d，J＝8.8Hz)，4.13－4.04(2H，m)，3.71(2H，s)，2.94(2H，t，J＝5.6Hz)，2.62－2.60(2H，m)；LRMS(ESI)m/z 353[M+H]⁺.

(工序4)

6－((7－(2－氰基－4－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8―四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)烟酰胺的合成

在DMSO(2mL)中加入工序3中得到的化合物(74mg)、2－氟－5－(三氟甲基)苄腈(50mg)、碳酸钠(82mg)，在120℃下使其反应3小时。过滤不溶物之后，用反相分取HPLC柱色谱法得到标记化合物(31mg，28％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.56(1H，s)，9.12(1H，t，J＝6.4Hz)，8.84(1H，t，J＝5.6Hz)，8.67(1H，s)，8.30－8.20(3H，m)，7.61(1H，d，J＝8.8Hz)，7.48(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，6.23(2H，s)，4.23(2H，t，J＝6.4Hz)，4.20－4.05(2H，m)，3.23(2H，t，J＝6.4Hz)；LRMS(ESI)m/z 522[M+H]⁺.

比较例9

6－((7－(2－氰基－5－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8―四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)烟酰胺

在DMSO(2mL)中加入比较例8的工序3中得到的化合物(74mg)、2－氟－4－(三氟甲基)苄腈(50mg)、碳酸钠(82mg)，在120℃下使其反应3小时。过滤不溶物之后，用反相分取HPLC柱色谱法得到标记化合物(32mg，收率29％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.57(1H，s)，9.13(1H，t，J＝6.4Hz)，8.85(1H，s)，8.69(1H，s)，8.24(2H，S)，7.94(1H，d，J＝8.0Hz)，7.87(1H，s)，7.22(1H，d，J＝8.8Hz)，6.12(2H，s)，4.26(2H，t，J＝6.4Hz)，4.18－4.06(2H，m)，3.24(2H，t，J＝6.4Hz)；LRMS(ESI)m/z 522[M+H]⁺.

比较例10

6－((7－(3－氰基－2－(三氟甲基)苯基)－5,6,7,8―四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－4－基)氨基)－N－(2,2,2－三氟乙基)烟酰胺

在DMSO(2mL)中加入比较例8的工序3中得到的化合物(148mg)、3－氟－2－(三氟甲基)苄腈(100mg)、碳酸钠(164mg)，在120℃下使其反应15小时。过滤不溶物之后，用反相分取HPLC柱色谱法得到标记化合物(18mg，收率17％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ9.41(1H，s)，9.14(1H，t，J＝6.4Hz)，8.86(1H，d，J＝2.4Hz)，8.62(1H，s)，8.31(1H，d，J＝8.4Hz)，8.25(1H，dd，J＝8.8,2.4Hz)，8.05－8.00(1H，m)，7.95－7.85(2H，m)，4.18－4.06(4H，m)，3.29(2H，t，J＝5.6Hz)，2.92(2H，t，J＝5.6Hz)；LRMS(ESI)m/z 522[M+H]⁺.

比较例11

4－(4－((5－(2－羟基丙烷－2－基)吡啶－2－基)氨基)－5,6－二氢吡啶并[3,4－d]嘧啶－7(8H)－基)苄腈

将实施例44的工序3中得到的化合物(20mg)、4－氟苄腈(11mg)、碳酸钾(15mg)溶解于DMSO(0.2mL)，在微波照射下于125℃下搅拌25分钟。将反应混合物用反相分取HPLC柱色谱法进行精制，得到标记化合物(4.4mg，16％)。

¹H－NMR(DMSO－d6)δ8.67(1H，s)，8.47(1H，d，J＝8.4Hz)，8.42(1H，d，J＝2.2Hz)，7.86(1H，dd，J＝8.8,2.2Hz)，7.56(2H，d，J＝9.2Hz)，6.97(2H，d，J＝9.2Hz)，4.46(2H，s)，3.82(2H，t，J＝5.7Hz)，2.82(2H，t，J＝5.7Hz)，1.62(6H，s)；LRMS(ESI)m/z 387[M+H]⁺.

＜生物评价试验＞

试验例1：对AR的拮抗活性

用以下的方法评价对AR的拮抗活性。将pMMTV-luc载体(具有作为雄激素应答元件的小鼠乳腺癌病毒末端重复序列(Murine Mouse mammary Virus Long Terminal Repeat)的报告基因质粒)和pEX-hAR载体(人的雄激素受体的表达载体：在CMV启动子的控制下表达人AR基因)使用作为转染试剂的Nucleofector(注册商标)Kit R(Lonza)、使用Amaxa(Lonza)转染COS-7细胞(ATCC)。将转染后的COS-7细胞在含有炭处理过的胎牛血清(以下记作DCC-FBS)10％的不含酚红的RPMI1640(以下记作评价培养基)中以成为1.5×10⁴/孔的方式接种于透明底96孔微孔培养板(BD)中，培养一夜。在该培养物中添加含有二氢睾酮(DHT)的评价培养基(DHT的终浓度1nmol/L)和含有实施例化合物或比较例化合物的评价培养基(该实施例化合物或比较例化合物的终浓度为5、14、41、123、370、1111、3333、或10000nmol/L)，培养24小时后，测定转录活性值。转录活性用Bright-Glo^TMLuciferase Assay System(Promega)进行测定。将1nmol/LDHT的转录活性值设为100％，将仅有评价培养基的转录活性值设为0％，由测定的转录活性利用logistic回归算出50％转录活性抑制浓度(IC50值)。

将结果示于第1表。本发明化合物与Bicalutamide(比较例1)相比，显示同等以上的对AR的拮抗活性。另一方面，专利文献1及3中所记载的比较例4的化合物不显示在本发明的实施例化合物中所看到的那样的对AR的拮抗活性。另外，比较例2的具有5,6,7,8－四氢吡啶并[4,3－d]嘧啶骨架的化合物、比较例3的具有5,6,7,8－四氢[1,2,4]三唑并[4,3－a]吡嗪骨架的化合物及比较例4的专利文献2～3中记载的化合物，与实施例的具有5,6,7,8－四氢吡啶并[3,4－d]嘧啶骨架的化合物不同，不显示对AR的拮抗活性。此外，具有比较例5～10中记载的取代基X、但具有与本发明化合物不同的氰基苯的化合物也不显示对AR的拮抗活性。进而，比较例11中记载的不具有取代基X的化合物也不显示对AR的拮抗活性。

[表1-1]

第1表

[表1-2]

第1表(续)

[表1-3]

第1表(续)

[表1-4]

第1表(续)

[表1-5]

第1表(续)

[表1-6]

第1表(续)

[表1-7]

第1表(续)

[表1－8]

第1表(续)

试验例2：雄激素依赖的前列腺癌细胞增殖抑制活性

将雄激素受体基因扩增的人前列腺癌细胞LNCaP(非专利文献5)在含有DCC-FBS 5％的不含酚红的RPMI1640(以下记作评价培养基)中以成为4.0×10³/孔的方式接种于透明底96孔微孔培养板(BD)中，培养一夜。在该培养物中添加含有DHT的评价培养基(DHT的终浓度10nmol/L)和含有实施例化合物或比较例化合物的评价培养基(该实施例或比较例化合物的终浓度为10、30、100、300、1000、3000、10000、或30000nmol/L)，培养72小时后，测定活细胞数。活细胞数使用Cell Counting Kit-8(同仁化学研究所)进行测定。将10nmol/LDHT的细胞增殖活性值设为100％，将仅有评价培养基的细胞增殖活性设为0％，由测定的活细胞数利用logistic回归算出50％增殖抑制浓度(GI50值)。

将结果示于第2表。实施例化合物与Bicalutamide(比较例1)相比，显示了同等以上的雄激素依赖的前列腺癌细胞增殖抑制活性。

[表2]

第2表

试验例3：对AR的激动剂活性

将AR阳性人前列腺癌细胞VCaP(In Vivo 15：163-168,2001)在含有DCC-FBS 5％的不含酚红的RPMI1640(以下记作评价培养基)中以成为1.5×10⁴/孔的方式接种于透明底96孔微孔培养板(BD)中，培养一夜。在该培养物中添加含有实施例化合物或比较例化合物的评价培养基(该实施例或比较例化合物的终浓度为2、5、14、41、123、370、1111、3333、或10000nmol/L)，培养72小时后，测定活细胞数(试验组)。作为对照，仅添加评价培养基并进行培养，测定活细胞数(对照组)。活细胞数用CellTiter-Glo^TM Luminescent Cell Viability Assay(Promega)进行测定。将仅有评价培养基的活细胞数作为基准，由测定的活细胞数算出实施例或比较例化合物的细胞增殖率。

细胞增殖率(％)

＝(试验组的活细胞数－对照组的活细胞数)/(对照组的活细胞数)×100

考虑仅有评价培养基的活细胞数的误差，评价的9个浓度中的细胞增殖率在任一浓度下细胞增殖率超过10％的情况下，判断为具有对AR的激动剂活性。

将结果示于第3表。与Bicalutamide(比较例1)不同，在本发明化合物中没有看到对AR的激动剂活性。

[表3]

第3表

试验例4：雄激素受体表达量的降低作用的评价

将AR阳性人前列腺癌细胞LNCaP在含有5％FBS的RPMI1640(以下较评价培养基)中以成为3.5×10⁵/孔的方式接种于6孔微孔培养板(BD)中，培养一夜。在该培养物中以实施例化合物或比较例化合物的终浓度成为10000nmol/L的方式添加含有实施例化合物或比较例化合物的评价培养基，培养48小时。48小时培养后，除去培养基，用PBS清洗细胞之后，添加Lysis beffer(在M-PER中添加Protease Inhibitor Cocktail)0.1mL，在4℃下静置20分钟，溶解细胞后，将细胞溶液进行离心分离，将上清液作为Cell Lysate回收。使Cell Lysate的蛋白质浓度一致，进行SDS-PAGE，使用抗AR抗体(SANTA CRUZ公司，N-20)进行Western Blotting。将Super Signal West Pico Substrate(Thermo Scientific)用作检测试剂，用LAS-3000(FUJIFILM)将抗体反应带(抗AR受体)进行定量。在该定量中，与评价培养基对照相比，LNCaP的AR表达降低50％以上的情况时，判断为具有AR表达降低作用。

将结果示于第4表。将AR表达降低作用为50％以上的情况用“降低”表示。比较例1～4在10μM时AR表达降低作低于10％，完全没有看到作用，但本发明化合物在10μM时确认50％以上的AR表达降低作用。

[表4]

第4表

试验例5：去势耐性前列腺癌in vivo模型中的抗肿瘤作用的评价

由AR阳性人前列腺癌细胞LNCaP根据论文(Clin Cancer Res，20017：2941-8)报告建立去势耐性前列腺癌LNCaP-Xeno-IL-6细胞(该论文中报告为LNCaP-IL-6+细)，用于in vivo试验。将LNCaP-Xeno-IL-6细胞移植于雄性裸鼠皮下，在肿瘤体积成为大概200mm³时，进行去势处理。去势后，连日口服给药仅介质(0.5％HPMC)或悬浮于介质的实施例化合物2周。实施例化合物依据暴露量进行给药。记录2周给药后的肿瘤体积，将评价化合物给药组的平均肿瘤体积相对于仅介质的给药组的平均肿瘤体积作为T/C(％)，基于下述式算出。

T/C(％)＝(评价化合物组的平均肿瘤体积)/(介质给药组的平均肿瘤体积)

将结果示于第5表。本发明化合物在去势抵抗性前列腺癌in vivo模型中显示了抗肿瘤效果。

[表5]

第5表