本发明涉及白蛋白的制备方法，尤其涉及一种牛血清白蛋白分度热休克法提取工艺。
背景技术：
牛血清白蛋白(bsa)，又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.430kda，等电点为4.7，是生物学诸多学科及医、药学各领域广泛应用的生化试剂，也可用作医药保健食品、调味品。
牛血清白蛋白最常用的制备方法是以牛血为原料分离出血清，用硫酸铵分级沉淀后，经辛酸处理精制而得；中国专利文献cn1544470c公开了一种牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺，其方法是采用3.8％枸橼酸钠抗凝血得到血浆，加热加入辛酸钠，调ph值后加乙醇，再经过滤、脱盐、浓缩、冻干后得牛血清白蛋白。上述牛血清白蛋白制备方法中需要添加许多成本较高的盐类(如枸橼酸钠、辛酸钠等)及有机化学物质(乙醇溶剂等)，制备出白蛋白的纯度难以保证，而且生产工艺较复杂，难以进行大批量生产。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种纯度高、工艺流程简单、成本低的一种牛血清白蛋白分度热休克法提取工艺。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种牛血清白蛋白分度热休克法提取工艺，包括如下步骤：
1.分离血清：健康牛新鲜全血，去纤维蛋白，连续离心收集血清，红血球另用；
2.提取：将血清和等量的生理盐水加入反应罐，20-40rpm搅拌混匀，边搅拌边加入0.32-0.38％辛酸钠，使之与白蛋白充分结合；加入0.1m稀盐酸，调节ph至5.8-6.0，加温60℃-75℃保温10小时，过滤去沉淀，清夜调ph至4.5-5.0，保温，过滤去沉淀，收集清液；
3.浓缩、脱盐及在位除菌过滤：清液调ph至6.8-7.2经循环除菌，以一万分子量超滤膜超滤浓缩、洗脱盐分，蛋白浓缩液终浓度不超过15％；
4.冷冻干燥为晶体状干粉。
而且，所述步骤2中当清夜调ph至4.5-5.0时可加温60℃-75℃，保温2-3小时后过滤去沉淀，收集清液。
本发明的优点和经济效果是：
1.工艺过程中，60℃-75℃保温10小时，能有效灭活病毒类外源因子，产品的安全性有保障；同时彻底灭活蛋白酶，避免用户的标记物受影响。
2.分度加热，减轻了蛋白变性分离过程中共沉情况，白蛋白收率提高，每100ml成牛血清得白蛋白不少于2g。
3.在位除菌，使得蛋白液在较长时间的浓缩、脱盐过程中避免细菌滋生，排除细菌代谢物所产生的问题。
4.用料简单、节约成本、工艺简便、易于操作。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图。
具体实施方式
为能进一步了解本发明的内容、特点及功效，兹例举以下实施例，并配合附图详细说明如下。需要说明的是，本实施例是描述性的，不是限定性的，不能由此限定本发明的保护范围。
实施例1：
一种牛血清白蛋白分度热休克法提取工艺，包括如下步骤：
1.分离血清：健康牛新鲜全血，去纤维蛋白，连续离心收集血清，红血球另用；
2.提取：将血清和等量的生理盐水加入反应罐，20rpm搅拌混匀，边搅拌边加入0.32％辛酸钠，使之与白蛋白充分结合；加入0.1m稀盐酸，调节ph至5.8，加温60℃保温10小时，过滤去沉淀，清夜调ph至4.5，加温60℃，保温2小时后过滤去沉淀，收集清液，过滤去沉淀，收集清液；
3.浓缩、脱盐及在位除菌过滤：清液调ph至6.8经循环除菌，以一万分子量超滤膜超滤浓缩、洗脱盐分，蛋白浓缩液终浓度不超过15％；
4.冷冻干燥为晶体状干粉。
实施例2：
一种牛血清白蛋白分度热休克法提取工艺，包括如下步骤：
1.分离血清：健康牛新鲜全血，去纤维蛋白，连续离心收集血清，红血球另用；
2.提取：将血清和等量的生理盐水加入反应罐，40rpm搅拌混匀，边搅拌边加入0.38％辛酸钠，使之与白蛋白充分结合；加入0.1m稀盐酸，调节ph至6.0，加温75℃保温10小时，过滤去沉淀，清夜调ph至5.0，加温75℃，保温3小时后过滤去沉淀，收集清液；
3.浓缩、脱盐及在位除菌过滤：清液调ph至7.2经循环除菌，以一万分子量超滤膜超滤浓缩、洗脱盐分，蛋白浓缩液终浓度不超过15％；
4.冷冻干燥为晶体状干粉。
实施例3：
一种牛血清白蛋白分度热休克法提取工艺，包括如下步骤：
1.分离血清：健康牛新鲜全血，去纤维蛋白，连续离心收集血清，红血球另用；
2.提取：将血清和等量的生理盐水加入反应罐，30rpm搅拌混匀，边搅拌边加入0.35％辛酸钠，使之与白蛋白充分结合；加入0.1m稀盐酸，调节ph至6.0，加温65℃保温10小时，过滤去沉淀，清夜调ph至5.0，调ph至5.0时可加温75℃，保温3小时后过滤去沉淀，收集清液；
3.浓缩、脱盐及在位除菌过滤：清液调ph至7.0经循环除菌，以一万分子量超滤膜超滤浓缩、洗脱盐分，蛋白浓缩液终浓度不超过15％；
4.冷冻干燥为晶体状干粉。
本发明产品的检验结果：