技术领域本发明涉及菌种培育技术领域，具体为一种羊肚菌菌种分离方法。
背景技术：
羊肚菌是一种珍稀食用菌品种,因其菌盖表面凹凸不平、状如羊肚而得名。羊肚菌是子囊菌中最著名的美味食菌，其菌盖部分含有异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸和缬氨酸7种人体必需的氨基酸，甘寒无毒，有益肠胃、化痰理气药效。羊肚菌的营养相当丰富，据测定，羊肚菌含粗蛋白20%、粗脂肪26%、碳水化合物38.1%，还含有多种氨基酸，特别是谷氨酸含量高达1.76%。因此，羊肚菌是十分好的食物蛋白质来源，并有“素中之荤”的美称。人体中的蛋白质是由20种氨基酸搭配而组成的，而羊肚菌就含有18种，其中8种氨基酸是人体不能制造的。由于羊肚菌在菌种分离和纯化过程存在技术难度，人工栽培出现重复性差、产量低、品质差的表现，目前难于生产推广。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种简单、易操作、效率高的羊肚菌菌种分离方法。为达到上述目的，采用的技术方案为：一种羊肚菌菌种分离方法，首先准备一次性水杯和牙签，并进行消毒、杀菌处理；制作马铃薯培养基、抗生素培养基或水琼脂培养基；以及成熟期的羊肚菌；将羊肚菌去根，用无菌水冲洗表面，再吸干表面水分；用牙签横穿羊肚菌菌柄，把羊肚菌倒挂在一次性水杯内，一次性水杯倒放在做好的培养基上，每隔6-8h换一次培养基，直到不再喷射孢子，将换下来的培养基置于15-25℃培养，即可分离得到羊肚菌菌种。所述一次性水杯和牙签采用75%酒精消毒，然后超净工作台中紫外杀菌15-25min。所述马铃薯培养基的制作方法为：马铃薯200g，去皮煮沸20-25min,8层纱布过滤取滤液，然后加入20g葡萄糖或蔗糖，20g琼脂，定容至1L，高温121℃,高压0.1MPa灭菌25min，待培养基冷却到50-60℃，倒入灭菌平板或一次性无菌平板即可。所述抗生素培养基的制作方法为：马铃薯200g，去皮煮沸20-25min,8层纱布过滤取滤液，然后加入20g葡萄糖或蔗糖，20g琼脂，定容至1L，高温121℃,高压0.1MPa灭菌25min，待培养基冷却到50℃加入链霉素30U/mL和青霉素30U/mL，然后倒入灭菌平板或一次性无菌平板即可。所述水琼脂培养基的制作方法为：1L水加入20g琼脂，高温121℃,高压0.1MPa灭菌25min，待培养基冷却到50-60℃，倒入灭菌平板或一次性无菌平板即可。高温121℃,高压0.1MPa灭菌25min，待培养基冷却到50-60℃，倒入灭菌平板或一次性无菌平板即可。采用上述方案的有益效果为：这种羊肚菌菌种分离方法采用牙签和一次性水杯进行，经过工具消毒、羊肚菌清洗、收集孢子和培养孢子就可以分离得到羊肚菌菌种，使用工具简单，可操作性强，萌发率高，成本低廉，为羊肚菌的人工种植提供了新方案。附图说明图1为本发明羊肚菌菌种分离装置的结构示意图。图2为本发明分离得到的羊肚菌菌丝。图3为羊肚菌子囊孢子400倍的显微结构。图中，1-一次性水杯，2-牙签，3-菌体，4-培养板。具体实施方式下面结合实施例及附图进一步介绍本发明，但本发明不仅限于下述实施例，可以预见本领域技术人员在结合现有技术的情况下，实施情况可能产生种种变化。如图1，为本发明羊肚菌菌种分离装置的结构示意图。羊肚菌菌种分离方法，首先准备一次性水杯1和牙签2，并进行消毒、杀菌处理；制作马铃薯培养基、抗生素培养基或水琼脂培养基；以及成熟期的羊肚菌体菌体3。将羊肚菌菌体3去根，用无菌水冲洗表面，再吸干表面水分；用牙签2横穿菌体3的菌柄，把菌体3倒挂在一次性水杯1内，一次性水杯1倒放在装好培养基的培养板4上，每隔6-8h换一次培养基，持续3天左右，直到不再喷射孢子，将换下来的培养基置于15-25℃培养，即可分离得到羊肚菌菌种。所述一次性水杯和牙签采用75%酒精消毒，然后超净工作台中紫外杀菌15-25min。所述马铃薯培养基的制作方法为：马铃薯200g，去皮煮沸20-25min,8层纱布过滤取滤液，然后加入20g葡萄糖或蔗糖，20g琼脂，定容至1L，高温121℃,高压0.1MPa灭菌25min，待培养基冷却到50-60℃，倒入灭菌平板或一次性无菌平板即可。所述抗生素培养基的制作方法为：马铃薯200g，去皮煮沸20-25min,8层纱布过滤取滤液，然后加入20g葡萄糖或蔗糖，20g琼脂，定容至1L，高温121℃,高压0.1MPa灭菌25min，待培养基冷却到50℃加入链霉素30U/mL和青霉素30U/mL，然后倒入灭菌平板或一次性无菌平板即可。所述水琼脂培养基的制作方法为：1L水加入20g琼脂，高温121℃,高压0.1MPa灭菌25min，待培养基冷却到50-60℃，倒入灭菌平板或一次性无菌平板即可。高温121℃,高压0.1MPa灭菌25min，待培养基冷却到50-60℃，倒入灭菌平板或一次性无菌平板即可。如图2为本发明分离得到的羊肚菌菌丝。如图3为羊肚菌子囊孢子400倍的显微结构。本发明未对羊肚菌子实体进行酒精消毒，可防止酒精浸入菌体组织，与传统的钟罩法分离相比占空间小、操作性强，可同时大批量进行分离，效率显著提升。因为羊肚菌生长迅速，分离得到的菌丝需要及时挑取进行纯化。