一种用于海水螺旋藻培养的培养液的制作方法

文档序号:14747765发布日期:2018-06-22 01:55阅读:304来源:国知局

本发明属于藻类培养液制备技术领域,具体涉及一种用于海水螺旋藻培养的培养液。



背景技术:

螺旋藻,又称节旋藻,属于蓝藻门、蓝藻纲、螺旋藻属,是一类细胞结构简单的微型丝状藻。螺旋藻蛋白质含量高达60~70%以上,且富含β胡萝卜素、γ-亚麻酸、多种维生素及人体必需的微量矿物元素等,能够增强机体免疫力,抑制一些致癌物质的致癌作用,对生殖,心血管、呼吸、消化及神经系统有良好的作用。螺旋藻是目前人类已知营养最丰富、全面、均衡的生物,具有极大开发潜力的水生生物资源。

螺旋藻属虽然有海水种类,但广泛培养的钝顶螺旋藻和极大螺旋藻都是淡水藻种。制约螺旋藻生产的问题之一是其生产成本较高,其中培养液成本高是关键原因。

目前,螺旋藻培养经常使用的配方有Zarrouk配方、印度CFTRI配方以及MSS-1培养配方等。Zarrouk与印度CFTRI淡水培养配方需要多种营养盐成分,用量较大,因此成本高且配制复杂,而且不适用于海水螺旋藻培养。MSS-1培养配方可以应用于海水培养螺旋藻,虽然配制简单,但其中NaHCO3的用量较大,受热或加压后容易分解,因此在室内一级培养中不能通过加热方法消毒,导致培养过程中很容易发生污染。此前提供的一种海水螺旋藻培养液,虽然避免了以上问题的出现,但其浓缩母液和培养液一段时间后会出现沉淀,从而影响后续的使用和长期的培养效果。



技术实现要素:

本发明的目的是提供一种用于海水螺旋藻培养的培养液,所需成分减少,且各成分使用量较少,不但能够满足螺旋藻增殖所需营养,使成本降低,且避免了培养液一段时间后出现沉淀的问题,培养效果更好。

本发明的螺旋藻培养液,包含有如下浓度的组分:

优选配方包含有如下浓度的组分:

与传统配方相比,本发明配方所需成分减少,且各成分使用量较少,而且在短期培养效果上与之前的配方结果类似,并解决了一段时间后出现沉淀的问题,从而保证了长期培养效果的稳定。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的培养液进行详细的描述。

实施例1

取七水合硫酸锌ZnSO4·7H2O0.5g,五水合硫酸铜CuSO4·5H2O0.3g,二水合钼酸钠Na2MoO4·2H2O0.292g,六水合氯化钴CoCl2·6H2O0.28g,用1000mL蒸馏水定容,混合均匀使其完全溶解,作为微量元素浓缩母液。取上述微量元素浓缩母液0.1mL,五水合柠檬酸铁C6H5O7Fe·5H2O0.006g,一水合硫酸锰MnSO4·H2O0.004g,磷酸二氢钠NaH2PO40.06g,二水合乙二胺四乙酸二钠C10H14N2O8Na2·2H2O0.01g,硝酸钠NaNO30.4g,氯化钾KCl0.12g,硫酸镁MgSO40.1g,逐一加入到30~35‰消毒海水中,待各组分溶解后定容至1000mL,并进行加热煮沸达到消毒的目的,即可得到1000mL本发明的海水螺旋藻培养液。

可以根据具体需要,配制不同体积的培养液,直接配制也很简单,从而避免了使用浓缩母液药品用量大、难溶解以及存放一段时间后出现沉淀的问题。微量元素浓缩母液因为各化合物用量很少,不存在难溶和沉淀的问题。

将培养至对数生长期的螺旋藻液,摇匀,按照藻种与海水培养液的体积比为1:5的接种量接入海水培养液中,然后放置在光照培养箱中进行培养,温度为24℃,光照强度为4000lx,光暗周期为12h:12h。每天取样用721型分光光度计在560nm测定藻液的吸光值(OD值),用来反映螺旋藻的生长变化过程,测定结果见表1。培养7天后螺旋藻的生长效果评价见表2。表2中的比生长速率是评价藻类生长的重要指标,其大小反映了藻类的生长繁殖快慢,利用该指标评价不同培养液中螺旋藻的生长效果。比生长速率的计算公式如下:

K=(lgN-lgN0)/t

其中,N0-初始OD值;N-培养t天的OD值;t-培养天数。

表1:不同培养液处理的藻液吸光值(OD值)变化

表2:不同培养液的螺旋藻生长效果评价

比较Zarrouk培养液、海水螺旋藻培养液原配方与本发明配方实施例培养液处理的螺旋藻生长变化过程见表1,其中藻液吸光值(OD值)大小与螺旋藻群体生长的速度呈正比。由表1可见,从第2天开始,本发明实施例处理的吸光值开始超过了Zarrouk培养液处理,培养第7天时本发明实施例处理的吸光值显著高于Zarrouk培养液处理。与原配方培养液处理相比,培养7天内两者的吸光值没有差异,但根据观察,第3~4天时原配方培养液处理开始出现白色沉淀,而本发明实施例处理7天内均未发现白色沉淀。

Zarrouk培养液、海水螺旋藻培养液原配方与本发明配方实施例培养液培养7天后螺旋藻生长效果评价见表2。数据表明,本发明配方实施例培养液处理的螺旋藻比生长率显著高于Zarrouk培养液处理,与原配方培养液的培养效果没有差异。从藻液的颜色看,Zarrouk培养液处理呈蓝绿色,原配方培养液与本发明配方实施例培养液处理的藻液颜色更深,呈深蓝绿色,显示出生长良好的状态。长期培养发现,原配方培养液处理因沉淀产生,其长期培养效果不稳定,而本发明配方实施例培养液处理长期培养效果更稳定。

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