增强芽孢杆菌碱性条件下纤维素外切酶表达量的方法与流程

文档序号:11936796阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种增强芽孢杆菌碱性条件下纤维素外切酶表达量的方法,其特征在于:包括如下步骤:将由碱性启动子、SD序列、信号肽编码序列和纤维素外切酶编码基因组成的表达单元,通过同源重组整合到芽孢杆菌基因组中。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的碱性条件为pH8-9。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的纤维素外切酶编码基因来源于黑曲霉。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的碱性启动子的序列如SEQ ID NO.1所示。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的SD序列如SEQ ID NO.2所示。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的信号肽编码序列如SEQ ID NO.3所示。

8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的纤维素外切酶编码基因的序列如SEQ ID NO.4所示。

9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:包括如下步骤:将SEQ ID NO.5所示序列通过限制性内切酶SacI、XbaI及DNA连接酶连接到pHT01载体上构建同源重组载体;用所构建的同源重组载体转化地衣芽孢杆菌ATCC 9945a,筛选同源重组成功的菌株。

10.一种在碱性条件下表达纤维素外切酶的芽孢杆菌,其特征在于:通过权利要求1-9任一项所述的方法得到。

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