本发明属于天然药物提取领域，具体涉及一种从相思子属植物中制备葫芦巴碱的方法。
背景技术：
广州相思子(Aburs cantoniensis Hance)、毛相思子(Abrus mollis Hance)和相思子(Abrus precatorius L.)均为豆科植物相思子属植物，具有清热解毒、疏肝止痛等作用，多用于治疗急慢性肝炎等病症。
葫芦巴碱，化学名为N-甲基烟酸内酯或N-甲基烟酸内盐，溶于水、甲醇、乙醇等水溶极性溶剂，分子式为C7H7NO2，分子量为137.14，结构式为：
葫芦巴碱存在于豆科植物相思子属广州相思子(Aburs cantoniensis Hance)、毛相思子(Abrus mollis Hance)和相思子(Abrus precatorius L.)等植物的全草中。药理研究表明，葫芦巴碱具有保肝，抗炎，镇痛，降血脂，降血糖，促进神经组织再生，抗偏头痛，抗癌宫颈癌和肝癌，抗菌等作用，无明显的不良反应，可用于肝病、糖尿病和高脂血症等疾病的防治，也可用作营养型添加剂和医药中间体，为开发前景广阔的天然药物，一直为国内外学者所关注。
目前，未见有针对广州相思子、毛相思子和相思子中葫芦巴碱开展提取纯化制备工艺的方法，而其他植物中葫芦巴碱单体成分的提取分离方法复杂，提取率低，所涉及溶剂毒性大，不适用于工业化生产。
中国专利申请201310706466.9公开了野生葫芦巴碱的新型提取方法，该方法利用超高压技术和大孔树脂吸附及柱层析耦联技术富集纯化葫芦巴中葫芦巴碱，采用梯度的乙醇对大孔吸附树脂进行洗脱，再采用不同配比的丙酮、石油醚对含葫芦巴碱半成品的硅胶柱层析进行梯度洗脱，该方法工艺复杂，所用的溶剂毒性较大。
技术实现要素：
为解决现有技术中存在的技术问题，本发明目的在于提供一种从相思子属植物中制备葫芦巴碱的方法，该方法对葫芦巴碱的提取纯化得率高，样品纯度高，安全稳定，步骤简便，成本低，可用于工业化生产。
本发明提供一种从相思子属植物中制备葫芦巴碱的方法，其包括以下步骤：
(1)取广州相思子、毛相思子或相思子，加入水溶性溶剂进行提取，滤过，将滤液浓缩并回收溶剂，然后将浓缩液上氧化铝柱，用水溶性溶剂洗脱至无色，收集全部洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干，得葫芦巴碱粗纯化物；
(2)往步骤(1)制得的葫芦巴碱粗纯化物中加入适量水溶性溶剂反复提取，超滤，浓缩，重结晶，得高纯度的葫芦巴碱。
进一步地，所述步骤(1)和(2)中的水溶性溶剂为水、乙醇、甲醇或丙酮中的至少一种。
进一步地，所述步骤(1)中的提取方式为加热回流、超声、浸提中的一种。
进一步地，所述步骤(1)中的氧化铝为中性、酸性或碱性氧化铝，所述氧化铝的目数为60目以上。
优选地，所述氧化铝的目数为100-200目。
进一步地，所述步骤(2)中的超滤的膜规格为3000分子量以下。
进一步地，所述步骤(1)具体为：取广州相思子、毛相思子或相思子，加入药材重量5～200倍水溶性溶剂，加热回流提取或超声提取或浸泡提取1～5次，每次0.1～5小时，过滤，合并滤液，将滤液浓缩，制得每ml含药材量0.01～3g的水浓缩液，然后将水浓缩液上100～200目的氧化铝柱，用2～10倍柱体积的水溶性溶剂洗脱至无色，收集全部通过柱子的洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干，得葫芦巴碱粗纯化物。
优选地，所述步骤(1)具体为：取广州相思子、毛相思子或相思子，加入药材重量5～200倍纯化水，加热回流提取1～5次，每次0.1～5小时，过滤，合并滤液，将滤液浓缩，制得每ml含药材量0.01～3g的水浓缩液，然后将水浓缩液上100～200目的中性氧化铝柱，用2～10倍柱体积的纯化水洗脱至无色，收集全部通过柱子的洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干，得葫芦巴碱粗纯化物。
进一步地，所述步骤(2)具体为：往步骤(1)制得的葫芦巴碱粗纯化物中加入其重量5～50倍乙醇或甲醇提取1～5次，合并提取液，1000分子量超滤膜滤过，滤液浓缩，重结晶，得高纯度的葫芦巴碱。
与现有技术相比，本发明的优势在于：
(1)本发明提供的制备方法能够较好地去除黄酮类等其他类成分，获得高纯度葫芦巴碱。
(2)本发明方法稳定性好，步骤简便，且所用溶剂毒性低。
(3)本发明提供的方法成本低，周期短，制备量大，效率高，可应用于工业化生产。
具体实施方式
以下通过具体实施方式进一步描述本发明，但本发明不仅仅限于以下实施例。
实施例1
(1)取广州相思子1000g，加入药材重量15倍纯化水，超声提取3次，每次0.5小时，过滤，合并滤液，将滤液浓缩，制得每ml含药材量1g的水浓缩液，然后将水浓缩液上200目的中性氧化铝柱，用3倍柱体积的纯化水洗脱至无色，收集全部通过柱子的洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干，得葫芦巴碱粗纯化物；
(2)往步骤(1)制得的葫芦巴碱粗纯化物中加入其重量10倍甲醇提取2次，合并提取液，1000分子量超滤膜滤过，滤液浓缩，重结晶，得高纯度的葫芦巴碱3.5g。
实施例2
(1)取毛相思子1000g，加入药材重量10倍纯化水，浸泡提取2次，每次3小时，过滤，合并滤液，将滤液浓缩，制得每ml含药材量0.2g的水浓缩液，然后将水浓缩液上100目的中性氧化铝柱，用4倍柱体积的纯化水洗脱至无色，收集全部通过柱子的洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干，得葫芦巴碱粗纯化物；
(2)往步骤(1)制得的葫芦巴碱粗纯化物中加入其重量15倍甲醇提取2次，合并提取液，1000分子量超滤膜滤过，滤液浓缩，重结晶，得高纯度的葫芦巴碱3.2g。
实施例3
(1)取相思子1000g，加入药材重量20倍纯化水，加热回流提取3次，每次2小时，过滤，合并滤液，将滤液浓缩，制得每ml含药材量0.1g的水浓缩液，然后将水浓缩液上200目的中性氧化铝柱，用2倍柱体积的纯化水洗脱至无色，收集全部通过柱子的洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干，得葫芦巴碱粗纯化物；
(2)往步骤(1)制得的葫芦巴碱粗纯化物中加入其重量15倍乙醇提取3次，合并提取液，1000分子量超滤膜滤过，滤液浓缩，重结晶，得高纯度的葫芦巴碱3.8g。
实施例4
(1)取广州相思子1000g，加入药材重量30倍纯化水，加热回流提取2次，每次3小时，过滤，合并滤液，将滤液浓缩，制得每ml含药材量0.5g的水浓缩液，然后将水浓缩液上100目的中性氧化铝柱，用8倍柱体积的纯化水洗脱至无色，收集全部通过柱子的洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干，得葫芦巴碱粗纯化物；
(2)往步骤(1)制得的葫芦巴碱粗纯化物中加入其重量30倍乙醇提取2次，合并提取液，1000分子量超滤膜滤过，滤液浓缩，重结晶，得高纯度的葫芦巴碱3.9g。
实施例5
(1)取广州相思子1000g，加入药材重量10倍浓度为25％乙醇溶液，加热回流提取2次，每次3小时，过滤，合并滤液，将滤液浓缩，制得每ml含药材量1g的浓缩液，然后将浓缩液上100目的碱性氧化铝柱，用5倍柱体积的浓度为25％乙醇溶液洗脱至无色，收集全部通过柱子的洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干，得葫芦巴碱粗纯化物；
(2)往步骤(1)制得的葫芦巴碱粗纯化物中加入其重量20倍乙醇提取3次，合并提取液，1000分子量超滤膜滤过，滤液浓缩，重结晶，得高纯度的葫芦巴碱3.8g。
实施例6
(1)取毛相思子1000g，加入药材重量15倍浓度为20％甲醇溶液，加热回流提取2次，每次3小时，过滤，合并滤液，将滤液浓缩，制得每ml含药材量0.5g的浓缩液，然后将浓缩液上100目的酸性氧化铝柱，用10倍柱体积的浓度为20％甲醇溶液洗脱至无色，收集全部通过柱子的洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干，得葫芦巴碱粗纯化物；
(2)往步骤(1)制得的葫芦巴碱粗纯化物中加入其重量15倍甲醇提取3次，合并提取液，1000分子量超滤膜滤过，滤液浓缩，重结晶，得高纯度的葫芦巴碱3.7g。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。