水稻种子快速萌发QTLqGS11的分子标记及其应用的制作方法

文档序号:12167732阅读:来源:国知局

技术特征:

1.水稻种子快速萌发QTL qGS11的分子标记,其特征在于所述的分子标记选自YB20、YB21、RM26614中的任意一种;所述的分子标记YB20的上游引物为RMYB20L:SEQ ID NO.1,下游引物为RMTB20R:SEQ ID NO.2,扩增产物大小为133bp;所述的分子标记YB21的上游引物为YB21L:SEQ ID NO.3,下游引物为YB21R:SEQ ID NO.4,扩增产物大小为194bp;所述的分子标记RM26614的上游引物为RM26614L:SEQ ID NO.5,下游引物为RM26614R:SEQ ID NO.6,扩增产物大小为183bp。

2.权利要求1所述的水稻种子快速萌发QTL qGS11的分子标记引物,其特征在于所述的分子标记YB20的上游引物为RMYB20L:SEQ ID NO.1,下游引物为RMTB20R:SEQ ID NO.2,扩增产物大小为133bp;所述的分子标记YB21的上游引物为YB21L:SEQ ID NO.3,下游引物为YB21R:SEQ ID NO.4,扩增产物大小为194bp;所述的分子标记RM26614的上游引物为RM26614L:SEQ ID NO.5,下游引物为RM26614R:SEQ ID NO.6,扩增产物大小为183bp。

3.权利要求1所述的分子标记在筛选快速萌发的水稻品种中的应用。

4.权利要求2所述的分子标记引物在筛选快速萌发的水稻品种中的应用。

5.一种快速鉴别qGS11增效等位基因存在与否的方法,其特征在于包含如下步骤:

(1)取水稻叶片,提取基因组DNA;

(2)利用权利要求2所述的分子标记引物中的任意一对、两对或三对对所述的基因组DNA进行PCR扩增,PCR扩增产物在8%非变性聚丙烯酰胺胶上进行电泳检测,如果扩增出对应大小的DNA片段,标志着种子快速萌发QTL qGS11增效等位基因的存在。

6.根据权利要求5所述的水稻种子快速萌发分子筛选方法,其特征在于所述的PCR反应:体积为25微升,其中10×buffer 2.5微升,25mM MgCl2 1.5微升,4pmol/微升引物对2.5微升,2.5mM dNTPs 2微升,5单位/微升Taq酶0.2微升,模板DNA 20纳克,加水至25微升。反应程序为DNA 95℃预变性5min;95℃预变性30s,50℃退火30s,72℃延伸展30s,循环35次;最后72℃延伸10min。

7.根据权利要求5所述的水稻种子快速萌发分子筛选方法,其特征在于SSR分子标记YB20的上下游引物扩增籼稻品种IR28或者IR28与粳稻杂交后代的基因组DNA,如果能够扩增出133bp的扩增片段,则标志着qGS11的籼稻IR28增效等位基因存在,否则扩增出128bp,则表明增效等位基因没有导入。

8.根据权利要求5所述的水稻种子快速萌发分子筛选方法,其特征在于用SSR分子标记YB21的上下游引物扩增籼稻品种IR28或者IR28与粳稻杂交后代的基因组DNA,如果能够扩增出194bp的扩增片段,则标志着qGS11的籼稻IR28增效等位基因存在,否则扩增出178bp,则表明增效等位基因没有导入。

9.根据权利要求5所述的水稻种子快速萌发分子筛选方法,其特征在于用SSR分子标记RM26614的上下游引物扩增籼稻品种IR28或者IR28与粳稻杂交后代的基因组DNA,如果能够扩增出183bp的扩增片段,则标志着qGS11的籼稻IR28增效等位基因存在,否则扩增出200bp,则表明增效等位基因没有导入。

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