本发明涉及一种试剂盒,尤其涉及微量dna提取、纯化的试剂盒。
背景技术:
目前微量dna提取方法包括chelex100法、硅珠法、磁珠法等各类方法。硅珠法的主要原理是通过dna与二氧化硅之间特异性吸附完成dna的提取纯化,提取灵敏度与纯度较高,但在dna提取纯化过程中受移管、试剂剂量、漂洗步骤、洗脱体积等的影响,在处理微量物证方面效果欠佳;而chelex100采用利用核酸和蛋白质对酚和氯仿变性作用的反应性不同分离核酸与蛋白质,其原理简单并且操作便捷,单其所提取的dna杂质较多,对后续实验分析不利;磁珠法则是通过磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合提取纯化dna,其提取dna纯度高且污染低,然而繁琐的步骤导致实验整体耗时较长,降低工作效率。
技术实现要素:
本发明旨在提供一种快速、高效且无损地从生物检材中提取、纯化极微量的dna的试剂盒。
一种微量dna提取、纯化试剂盒,运用直接裂解法提取dna,通过直接破坏并释放细胞中dna的方法,对各类生物检材上极微量的dna进行快速、高效地提取和纯化。本发明确定了稳定有效的dna提取纯化试剂和操作方法,并提供了详细的操作流程。
本试剂盒包括微量dna提取和纯化试剂及其操作方法。该试剂盒的操作简便,仅需要4个步骤,可以对各类检材进行微量dna进行提取,而且在复旦大学现代人类学教育部重点实验室和各地公安机关法医学dna实验均进行结果印证。在微量dna提取和纯化方面可以得到广泛的应用。
附图说明
图1是本发明的试剂盒整体包装示意图
具体实施方式
实施例1:
1.试剂盒制作流程:
配制bufferi→包装
配制bufferii→包装
配制bufferiii→包装
2.试剂盒的组成:
bufferi10ml
bufferii40ml
bufferiii2ml
实施例二:
试剂盒使用方法:
1.仪器要求:金属温浴设备,离心机
2.标本要求:毛发、棉签等各类检材
3.稳定性与保存:
本试剂盒中bufferi及bufferii需在-20℃条件下保存,其稳定贮存时间至少为一年,bufferiii在4℃条件下可稳定贮存至少一年。
4.操作程序:
1.将检材放入离心套管,加入100-200μlbufferi,静置1min,65℃孵育10min;
2.95℃孵育2min,离心去除套管;
3.加入300-600μlbufferii混匀,14000rpm离心3min后倒去上清,95℃烘干;
4.加入10-20μlbufferiii,振荡后14000rpm离心3min,取上清即可。