一种脐带血来源的干细胞的制备方法与流程

文档序号:12411460阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种脐带血来源的干细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤a、沉淀细胞;首先选择新鲜的脐带血,经过低速离心沉淀血红细胞;

步骤b、分离细胞;再进行高速离心,并加入分离液来获得干细胞;

步骤c、提取细胞;用吸管提取干细胞;

步骤d、洗涤细胞;提取后的干细胞用PBS溶液反复洗涤离心;

步骤e、孵育细胞;洗涤后的干细胞,加入培养液,放培养箱中孵育一定的时间;

步骤f、收获细胞;离心之后用生理盐水悬浮细胞,再进行细胞计数;

步骤g、分装细胞;将制备得到的脐带血来源的干细胞进行分装,首先将细胞转移至生理盐水袋中,加入稳定剂,然后分装制成最终产品。

2.根据权利要求1所述的脐带血来源的干细胞的制备方法,其特征在于:所述步骤a中的脐带血来源于剖腹产新生儿的脐带血,脐带血无菌保存于采血袋中。

3.根据权利要求1所述的脐带血来源的干细胞的制备方法,其特征在于:所述步骤b中的分离细胞时的高速离心转数为2500rpm,离心30分钟。

4.根据权利要求1所述的脐带血来源的干细胞的制备方法,其特征在于:所述步骤c中的提取细胞,采用的吸管是3ml吸管。

5.根据权利要求1所述的脐带血来源的干细胞的制备方法,其特征在于:所述步骤d中的洗涤细胞时采用的离心转速为1500rpm,离心5分钟。

6.根据权利要求1所述的脐带血来源的干细胞的制备方法,其特征在于:所述步骤e中的孵育细胞的孵育温度是37℃,并且在5%二氧化碳培养箱中进行,孵育时间为3-4小时。

7.根据权利要求1所述的脐带血来源的干细胞的制备方法,其特征在于:所述步骤f中的收获细胞时的细胞计数,细胞数大约在1×107至1×108范围内。

8.根据权利要求1所述的脐带血来源的干细胞的制备方法,其特征在于:所述步骤g中的生理盐水袋为100ml生理盐水袋,所述稳定剂为人血白蛋白。

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