一种用于甘薯黑斑病抗性鉴定中的黑斑病菌培养方法与流程

文档序号:11144743阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于甘薯黑斑病抗性鉴定中的黑斑病菌培养方法,其特征在于,所述培养方法包括如下步骤:

(1)病原菌分离和纯化:从田间采集黑斑病发病薯块,通过组织分离法分离黑斑病菌,分离时洗去薯块表面泥土,并用75%酒精进行表面消毒,在超净工作台上将病斑表皮去除,取病斑部并切成小块接种在PDA培养基上培养,经分离纯化和柯赫氏法验证确定为黑斑病菌;

(2)甘薯液体培养基制备:将2g薯块,加水煮沸并搅拌,使薯块彻底匀浆在溶液中,纱布过滤,将滤液高压灭菌;

(3)黑斑病菌的培养和孢子悬浮液制备:将分离纯化的黑斑病菌接入甘薯液体培养基中培养20-24h,纱布过滤去除菌丝后,在转速为4000-6000rpm的离心机中离心5min,之后用无菌水悬浮获得孢子悬浮液,并将其OD600调至1.0。

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