本发明涉及多糖类的制备，尤其是一种海星多糖的制备方法。
背景技术：
我们知道，多糖是人体皮肤真皮层重要组成成分，生物活性多糖参与生物体的免疫调节，参与生命细胞的各种活动，具有降血糖、降血脂、抗炎症、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等作用。而海星(sea star，starfish，asteroid)属棘皮动物门海星纲(Asteroidea)，在中国有丰富的蕴藏量。目前，海星的经济价值并不大，既未作食用，更未作药用，只能晒干制粉作农肥，属低值海洋生物。近年来，海星的药用价值逐步被重视，国外关于海星的活性化学成分、生理、药理等方面的研究非常活跃，已相继从数十种海星中分离获得了十几类化学物质，但到目前为止，尚未发现以海星为原料制备海星多糖的报道。
技术实现要素：
为了克服现有海星利用率低的不足，本发明提供了一种工艺合理、操作性强的海星多糖的制备方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案为：一种海星多糖的制备方法，其特征在于：其经过下列工艺步骤：
a、原料预处理 选取新鲜的海星为原料，洗净后送入捣碎机中进行匀浆处理，得海星浆液；
b、脱脂处理 将步骤（a）中得到的海星浆液采用100%丙酮溶液脱脂2～3次，丙酮溶液的用量为海星浆液体积的30%～60%，每次脱脂2～3h，得脱脂后的海星浆液；
c、冷冻干燥 将步骤（b）中得到的脱脂后的海星浆液在放入-70℃冰箱中，预冻2～3h，取出后放置于冷冻干燥机中，控制温度-20℃～-40℃，冻干20～24h，粉碎，得海星冻干粉；
d、粗多糖提取 将步骤（c）得到的海星冻干粉加入到浓度为0.1～0.3mol/L的NaOH溶液中，控制温度为60～80℃，浸提1～3h；其中，冻干粉与NaOH溶液的料液比为1:20～40；离心，取上清液，得海星上清液；
e、浓缩 将步骤（d）得到的海星上清液用浓度为2～4mol/L盐酸溶液调节pH值至中性，将溶液体积缩真空浓缩至原体积的20%～25%，得海星粗多糖浓缩液；
f、沉淀 将步骤（f）得到的海星粗多糖浓缩液加入其体积2～3倍的浓度为90～95%乙醇，4℃条件下静置8～12h，离心，取沉淀，得海星粗多糖提取物；
g、成品 将步骤（h）得到的海星粗多糖提取物用无水乙醇洗涤2～3次，冷冻干燥，得浅黄色海星多糖。
所述的真空浓缩的真空度控制为0.086～0.088Mpa。
本发明是将海星原料制浆后采用丙酮溶液进行脱脂处理，脱脂后冻干成粉，采用NaOH溶液提取粗多糖，真空浓缩后进行乙醇沉淀，其提取物用无水乙醇洗涤，冷冻干燥，得浅黄色海星多糖。本发明采用碱法提取多糖，能够使海星细胞壁充分膨胀而破裂，从而使多糖游离出来，提高得率；采用无水乙醇洗涤，可进一步除掉其他杂质，如色素、蛋白、低聚糖、氨基酸等，达到纯化的目的；洗涤的过程也是脱水干燥的过程，所得多糖多呈粉末状，利于后续使用和保存。本发明的海星多糖的制备方法工艺合理、操作简单，易实现规模化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本做进一步说明。
实施例1
一种海星多糖的制备方法，其经过下列工艺步骤：
a、原料预处理 选取新鲜的海星为原料，洗净后送入捣碎机中进行匀浆处理，得海星浆液；
b、脱脂处理 将步骤（a）中得到的海星浆液采用100%丙酮溶液脱脂3次，丙酮溶液的用量为海星浆液体积的50%，每次脱脂2.5h，得脱脂后的海星浆液；
c、冷冻干燥 将步骤（b）中得到的脱脂后的海星浆液在放入-70℃冰箱中，预冻3h，取出后放置于冷冻干燥机中，控制温度-35℃，冻干22h，粉碎，得海星冻干粉；
d、粗多糖提取 将步骤（c）得到的海星冻干粉加入到浓度为0.2mol/L的NaOH溶液中，控制温度为75℃，浸提2h；其中，冻干粉与NaOH溶液的料液比为1:30；然后送入三相碟片式离心机中，控制转速6000rpm，离心处理25min，取上清液，得海星上清液；
e、浓缩 将步骤（d）得到的海星上清液用浓度为3mol/L盐酸溶液调节pH值至中性，将溶液送入减压浓缩器中，控制真空度为0.087Mpa，将其体积缩真空浓缩至原体积的23%，得海星粗多糖浓缩液；
f、沉淀 将步骤（f）得到的海星粗多糖浓缩液加入其体积2.5倍的浓度为92%乙醇，4℃条件下静置10h，然后送入三相碟片式离心机中，控制转速6000 rpm，离心处理20min，取沉淀，得海星粗多糖提取物；
g 、成品 将步骤（h）得到的海星粗多糖提取物用无水乙醇洗涤3次，冷冻干燥，得浅黄色海星多糖。
本实施例所提供的制备方法工艺合理、操作简单，易实现规模化生产。制取海星多糖得率和纯度高。
实施例2
一种海星多糖的制备方法，其经过下列工艺步骤：
a、原料预处理 选取新鲜的海星为原料，洗净后送入捣碎机中进行匀浆处理，得海星浆液；
b、脱脂处理 将步骤（a）中得到的海星浆液采用100%丙酮溶液脱脂2次，丙酮溶液的用量为海星浆液体积的60%，每次脱脂3h，得脱脂后的海星浆液；
c、冷冻干燥 将步骤（b）中得到的脱脂后的海星浆液在放入-70℃冰箱中，预冻2.5h，取出后放置于冷冻干燥机中，控制温度-40℃，冻干20h，粉碎，得海星冻干粉；
d、粗多糖提取 将步骤（c）得到的海星冻干粉加入到浓度为0.3mol/L的NaOH溶液中，控制温度为60℃，浸提3h；其中，冻干粉与NaOH溶液的料液比为1:20；然后送入三相碟片式离心机中，控制转速4000rpm，离心处理45min，取上清液，得海星上清液；
e、浓缩 将步骤（d）得到的海星上清液用浓度为4mol/L盐酸溶液调节pH值至中性，将溶液送入减压浓缩器中，控制真空度为0.088Mpa，将其体积缩真空浓缩至原体积的25%，得海星粗多糖浓缩液；
f、沉淀 将步骤（f）得到的海星粗多糖浓缩液加入其体积3倍的浓度为90%乙醇，4℃条件下静置12h，然后送入三相碟片式离心机中，控制转速4000 rpm，离心处理45min，取沉淀，得海星粗多糖提取物；
g、成品 将步骤（h）得到的海星粗多糖提取物用无水乙醇洗涤2次，冷冻干燥，得浅黄色海星多糖。
本实施例所提供的制备方法工艺合理、操作简单，易实现规模化生产。制取海星多糖得率和纯度高。
实施例3
一种海星多糖的制备方法，其经过下列工艺步骤：
a、原料预处理 选取新鲜的海星为原料，洗净后送入捣碎机中进行匀浆处理，得海星浆液；
b、脱脂处理 将步骤（a）中得到的海星浆液采用100%丙酮溶液脱脂3次，丙酮溶液的用量为海星浆液体积的30%%，每次脱脂3h，得脱脂后的海星浆液；
c、冷冻干燥 将步骤（b）中得到的脱脂后的海星浆液在放入-70℃冰箱中，预冻2.5h，取出后放置于冷冻干燥机中，控制温度-20℃，冻干24h，粉碎，得海星冻干粉；
d、粗多糖提取 将步骤（c）得到的海星冻干粉加入到浓度为0.1mol/L的NaOH溶液中，控制温度为80℃，浸提1h；其中，冻干粉与NaOH溶液的料液比为1:40；然后送入三相碟片式离心机中，控制转速5000rpm，离心处理20min，取上清液，得海星上清液；
e、浓缩 将步骤（d）得到的海星上清液用浓度为2mol/L盐酸溶液调节pH值至中性，将溶液送入减压浓缩器中，控制真空度为0.086Mpa，将其体积缩真空浓缩至原体积的20%，得海星粗多糖浓缩液；
f、沉淀 将步骤（f）得到的海星粗多糖浓缩液加入其体积2倍的浓度为95%乙醇，4℃条件下静置8h，然后送入三相碟片式离心机中，控制转速5000 rpm，离心处理30min，取沉淀，得海星粗多糖提取物；
g、成品 将步骤（h）得到的海星粗多糖提取物用无水乙醇洗涤3次，冷冻干燥，得浅黄色海星多糖。
本实施例所提供的制备方法工艺合理、操作简单，易实现规模化生产。制取海星多糖得率和纯度高。