本发明涉及由基质生产邻苯三酚的乳酸菌。同时，本发明还涉及由该乳酸菌生产的发酵产物。同时，本发明还涉及利用该乳酸菌的邻苯三酚生产方法。进一步地，本发明还涉及这样的乳酸菌的筛选方法。
背景技术：
过去有提议“含有阿波番茶的热水提取成分和桑茶的热水提取成分的抗过敏组合物”(例如，参见日本特开2012-153613号公报等)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2012-153613号公报
技术实现要素：
发明要解决的技术问题
然而，为了配制上述抗过敏组合物，有必要将阿波番茶和桑茶的茶叶加入至热水中并保持，消耗比较高的热能是必然的。
同时，在如上所述的茶叶的热水提取成分中，含有很多除了抗过敏的有效成分以外的成分。因此，服用者如果打算服用规定量的有效成分，则需要比较多地服用该抗过敏组合物。因此，就如上所述的抗过敏组合物而言，在服用者的服用负担变得比较大的同时，也损害了外出时等的携带性。
本发明的课题是提供可以不需要热能或以比较少的热能进行配制的抗过敏剂，所述抗过敏剂可以将服用者的服用负担控制为较小且外出时等的携带性优异。
解决技术问题的技术手段
与本发明的第一方面有关的乳酸菌是由基质生产邻苯三酚(参见以下的化学式(i))的戊糖乳杆菌的乳酸菌。该乳酸菌优选为由以阿波番茶及其原料茶叶的至少一种或其提取成分(例如，阿波番茶的茶叶(5片的量)的热水提取物(100℃，3分钟)与阿波番茶的茶叶(5片的量)的粉碎物的混合物)为基质生产10μg/ml以上邻苯三酚的戊糖乳杆菌的乳酸菌。另外，作为这样的乳酸菌，例如，可以列举：戊糖乳杆菌(lactobacilluspentosus)oll203969菌株(保藏编号nitebp-01986)、戊糖乳杆菌(lactobacilluspentosus)oll203982菌株(保藏编号nitebp-01987)或戊糖乳杆菌(lactobacilluspentosus)oll203984菌株(保藏编号nitebp-01988)。同时，邻苯三酚也被称为苯-1,2,3-三醇、1,2,3-三羟基苯、1,2,3-苯三醇、3-羟基邻苯二酚、三羟基苯、焦没食子酸、焦性没食子酸。同时，作为基质，例如有：阿波番茶及其原料茶叶(阿波番茶的发酵前的茶叶)或其加工品或其提取成分等。另外，这里所说的“阿波番茶”是在以日本德岛县的山与山之间的部分为中心的极其有限的地域生产的后发酵茶，最近也被称为“阿波晚茶”。该阿波番茶通过将煮后的原料茶叶在木桶中腌渍10天至半个月左右进行乳酸发酵后日晒干燥而制造。
通过这些乳酸菌，在室温(约20℃)至30℃左右的温度下，由基质生产高效率抗过敏的有效成分邻苯三酚。因此，通过利用该乳酸菌，可以不使用(消耗)热能或将热能控制为较少，得到抗过敏的有效成分。同时，在该乳酸菌的发酵产物中，含有邻苯三酚比较多。因此，通过使用该乳酸菌，可以高效率地制造(生产)将服用者的服用负担控制为较小且外出时等的携带性优异的抗过敏剂。因此，通过利用该乳酸菌，在可以不需要热能或将热能控制为较少地配制邻苯三酚，同时，可以提供将服用者的服用负担控制为较小且外出时等的携带性优异的抗过敏剂。
[化1]
与本发明的第二方面有关的发酵产物通过在食品材料上接种与本发明的第一方面有关的乳酸菌而生产。另外，这里所说的“食品材料”优选阿波番茶及其原料茶叶(阿波番茶的发酵前的茶叶)或者其加工品或其提取成分(特别是热水提取成分)等。同时，该发酵产物优选通过接种仅仅与本发明的第一方面有关的乳酸菌进行发酵而生产。
在上述发酵产物中，含有高效率抗过敏的有效成分邻苯三酚。同时，含有邻苯三酚的该发酵产物在从室温至30℃左右的温度下生产。因此，通过使用该发酵产物，可以不使用(消耗)热能或将热能控制为较少而得到抗过敏的有效成分。同时，在该发酵产物中，含有邻苯三酚比较多。因此，通过使用该发酵产物，可以高效率地制造(配制)将服用者的服用负担控制为较小且外出时等的携带性优异的抗过敏剂。因此，通过使用该发酵产物，可以提供在不需要热能或将热能控制为较少地配制抗过敏剂，同时，可以通过将服用者的服用负担控制为较小且外出时等的携带性优异的抗过敏剂。
与本发明的第三方面有关的邻苯三酚生产方法是将基质供给戊糖乳杆菌(lactobacilluspentosus)oll203969菌株、戊糖乳杆菌(lactobacilluspentosus)oll203982菌株和戊糖乳杆菌(lactobacilluspentosus)oll203984菌株的至少一种乳酸菌，在规定温度的厌氧环境下，通过将上述乳酸菌在规定期间进行培养而实施。另外，这里所说的“基质”是指：优选含有阿波番茶等发酵茶及其原料茶叶(阿波番茶的发酵前的茶叶)或者其加工品或其提取成分(特别是热水提取成分)等的成分。
通过该邻苯三酚生产方法，在室温至30℃左右的温度下，由基质生产高效率抗过敏的有效成分邻苯三酚。因此，通过该邻苯三酚生产方法，可以不使用(消耗)热能或将热能控制为较少，得到抗过敏的有效成分。同时，在上述乳酸菌的发酵产物中，含有邻苯三酚比较多。因此，通过使用该邻苯三酚生产方法，可以高效率地制造(生产)将服用者的服用负担控制为较小且外出时等的携带性优异的抗过敏剂。因此，通过使用该邻苯三酚生产方法，可以不需要热能或将热能控制为较少地配制抗过敏剂，同时，可以提供将服用者的服用负担控制为较小且外出时等的携带性优异的抗过敏剂。
与本发明的第四方面有关的生产邻苯三酚的乳酸菌的筛选方法，包括培养步骤、测定步骤和筛选步骤。在培养步骤中，将阿波番茶及其原料茶叶的至少一种或其提取成分供给乳酸菌，在规定温度的厌氧环境下，将上述乳酸菌在规定期间进行培养。另外，这里所说的“规定温度”是指例如25～45℃。同时，这里所说的“规定期间”是指例如1～20天。另外，这里所说的“提取成分”是指热水(热的水)提取成分和乙酸乙酯提取成分等。在测定步骤中，测定乳酸菌培养步骤中的乳酸菌的邻苯三酚生产量。在筛选步骤中，基于邻苯三酚生产量筛选乳酸菌。
通过利用该生产邻苯三酚的乳酸菌的筛选方法，可以容易地筛选出生产高效率的抗过敏有效成分邻苯三酚的乳酸菌。
附图说明
图1是显示实施例1的邻苯三酚的白细胞介素4的mrna表达抑制作用的图。
具体实施方式
本发明的乳酸菌优选由以阿波番茶及其原料茶叶的至少一种或其提取成分(例如，阿波番茶的茶叶(4～6片的量)的热水提取物(90～100℃，3～5分钟)和阿波番茶的茶叶(4～6片的量)的粉碎物的混合物)为基质生产10μg/ml以上的邻苯三酚，较优选生产30μg/ml以上的邻苯三酚，进一步优选生产50μg/ml以上的邻苯三酚，进一步优选生产100μg/ml以上的邻苯三酚，进一步优选生产130μg/ml以上的邻苯三酚，进一步优选生产150μg/ml以上的邻苯三酚，特别优选生产170μg/ml以上的邻苯三酚。
本发明的乳酸菌优选是戊糖乳杆菌(lactobacilluspentosus)oll203969菌株、戊糖乳杆菌(lactobacilluspentosus)oll203982菌株和戊糖乳杆菌(lactobacilluspentosus)oll203984菌株的至少一种的乳酸菌。
本发明的邻苯三酚生产方法中，优选以阿波番茶及其原料茶叶的至少一种或其提取成分(例如，阿波番茶的茶叶(4～6片的量)的热水提取物(90～100℃，3～5分钟)和阿波番茶的茶叶(4～6片的量)的粉碎物的混合物)为基质，将其供给本发明的乳酸菌，在规定温度的厌氧环境下，将上述乳酸菌在规定期间进行培养。另外，这里所说的“规定温度”是指例如25～45℃，优选为26～40℃，较优选为27～35℃，进一步优选为28～32℃，特别优选为30℃。同时，这里所说的“规定期间”是指例如1～20天，优选为3～15天，较优选为5～10天，进一步优选为6～8天，特别优选为7天。
在本发明的生产邻苯三酚的乳酸菌的筛选方法中，将阿波番茶及其原料茶叶的至少一种或其提取成分供给本发明的乳酸菌，在规定温度的厌氧环境下，经由在规定期间培养乳酸菌，测定乳酸菌的邻苯三酚生产量，然后基于邻苯三酚生产量，筛选乳酸菌。另外，这里所说的“规定温度”是指例如25～45℃，优选为26～40℃，较优选为27～35℃，进一步优选为28～32℃，特别优选为30℃。同时，这里所说的“规定期间”是指例如1～20天，优选为3～15天，较优选为5～10天，进一步优选为6～8天，特别优选为7天。
实施例
以下，示出实施例进一步详细说明本发明。另外，以下所示出的实施例只不过是例示，不对本发明做出限定。
生产邻苯三酚的乳酸菌的筛选
首先，作为生产邻苯三酚的乳酸菌的候选者，准备了在表1中列出的30种乳酸菌(含有来自于人类的乳酸菌和来自于阿波番茶的乳酸菌)。接着，使用mrs培养基，将各种乳酸菌进行两次活化培养。然后，将含有乳酸菌的培养基加入样品管供离心分离机分离。接着，从该样品管舍弃上清之后，将与该上清等量的生理盐水加入该样品管，配制各种乳酸菌的悬浊液。
表1
另一方面，向蒸馏水中放入数片阿波番茶的茶叶后，将该放入茶叶的蒸馏水在100℃煮沸3分钟。然后，将煮沸后的茶叶使用乳钵轻轻研磨破碎，配制成茶叶片。
在茶叶的煮汁(4ml)中，加入上述茶叶片(约5片的量)，进一步地，在其上接种各种乳酸菌的悬浊液(80μl)。然后，在30℃的厌氧环境下，将该乳酸菌培养7天。此后，将该培养液供高效液相色谱分析，测定邻苯三酚的生产量。另外，在以下条件的高效液相色谱中，邻苯三酚在14.015分钟的时间点洗脱。
·柱：cosmosil(注册商标)5c18-msii(直径：4.6mm，长度：250mm)(日本ナカライテスク株式会社制)
·流动相：溶剂a(水:醋酸＝99:1)，溶剂b(甲醇:丙酮:醋酸＝95:4:1)
·洗脱条件：
0～15分钟：溶剂a95质量％/溶剂b5质量％
15～30分钟：溶剂a45～50质量％/溶剂b55～50质量％
30～40分钟：溶剂a50～0质量％/溶剂b50～100质量％
40～50分钟：溶剂a0质量％/溶剂b100质量％
45～55分钟：溶剂a0～95质量％/溶剂b100～5质量％
·柱温：室温
·测定波长：270nm
·样品注入量：10μl
·流速：0.5ml/分钟
在表1中表示各种乳酸菌的邻苯三酚的生产量。从该结果可知，由于乳酸菌的种类不同，邻苯三酚的生产能力也不一样。进一步表明，即使在表1的乳酸菌中，也是戊糖乳杆菌的邻苯三酚的生产能力高，其中，特别是oll203969、oll203982和oll203984的菌株编号的邻苯三酚生产能力显著高。
保藏编号
nitebp-01986
nitebp-01987
nitebp-01988
pct/ro/134表