肿瘤坏死因子(TNF)超家族受体结合分子及其应用的制作方法

背景技术：
：自从人源化的抗体出现以来，抗体例如(利妥昔单抗)、(曲妥单抗)和(贝伐单抗)的治疗应用，已在医药学领域，包括肿瘤学、炎性紊乱(例如类风湿性关节炎，和许多其它适应症)的治疗方面掀起革命。在美国，超过30种人抗体或人源化的抗体已获批用于临床应用，并且，有超过600种新抗体或抗体样分子正处于开发的各种阶段。一些抗体对于可溶性靶标分子具有拮抗功能，所述可溶性靶标分子例如血管内皮生长因子(vegf)或肿瘤坏死因子(tnf)，它们的作用是疾病的病理过程的部分。或者，抗体能够结合、阻断和/或诱导某些疾病(例如癌症)中的病理细胞的破坏。这些治疗抗体的主要功能是通过fab区的结合，以及通过fc结构域(其还介导抗体的长循环半衰期)招募效应物功能。相较于小分子药物，抗体的一个主要优势可能是它们的精准的特异性。抗体能够十分准确地靶向选定的蛋白质抗原，例如致癌基因，以排除极其类似的同系物，这允许良性安全性的概况。因此，抗体的特异性单一靶向功能被充分表征。随着该领域的进展，抗体功能已通过如下方式而被增加：例如，蛋白质工程改造的创新性手段，以提供更高的亲和性、更长的半衰期，和/或更好的组织分布，以及用于增加通过毒性净负荷递送(例如抗体-药物偶联物)的细胞破坏的集中性小分子和大分子技术的组合。用于改善抗体功能的另一种方法利用了免疫球蛋白a(iga)或免疫球蛋白m(igm)结构的多价结合能力，这允许一个iga或igm分子结合多重抗原。感兴趣的重链和轻链可变区可被表达为iga或igm同种型抗体，由此产生与单体抗体，例如，igg抗体，具有相同的特异性的多聚结合分子。iga或igm分子的多价性质呈现了用于其中必须同时结合多重组分以传递生物信号的特定生物系统的应用的有用的工具。例如，真核细胞表面上的许多受体蛋白需要多重单体或亚基的同时活化，以实现跨过细胞膜的生物信号的活化和传递至该细胞的胞质。在活化之前或与活化相应地需要多聚化的细胞表面蛋白质受体的一个这样的系统存在于受体蛋白的肿瘤坏死因子(tnf)超家族中。该受体蛋白的超家族中包括这样的成员，它们在活化之后，将信号传递至造成凋亡的细胞的核。该超家族的其它家族成员造成nf-κb、凋亡途径、胞外信号调节性激酶(erk)、p38分裂素活化的蛋白质激酶(p38mapk)和c-junn末端激酶(jnk)的活化。活化时调节所述细胞的凋亡的tnf超家族受体成员的示例如下：tnfr1(dr1)、tnfr2、tnfr1/2、cd40(p50)、fas(cd95、apo1、dr2)、cd30、4-1bb(cd137、ila)、trailr1(dr4、apo2)、dr5(trailr2)、trailr3(dcr1)、trailr4(dcr2)、opg(ocif)、tweakr(fn14)、lightr(hvem)、dcr3、dr3、edar和xedar。(参见，aggarwal等，blood,119:651-665,2012)。更具体地，假设了上述的tnf超家族受体蛋白成员的活化需要，例如，通过配体，使至少三个非相互作用受体单体被交联，以形成稳定的受体三聚体，导致跨过细胞膜的信号转导。已观察到这些tnf超家族受体蛋白三聚体簇集成三聚体的“筏(raft)”，并且已假设其导致该tnf超家族受体蛋白依赖型信号转导级联的更有效活化。(参见，valley等，j.biol.chem.,287(25):21265-21278,2012)。已讨论了活化的其它模式。(参见，例如，lewis等，biophys.j.,106(6):l21-l24,2014)。通过如上所述的tnf超家族受体蛋白中的某些的信号转导能够导致细胞凋亡。在癌症治疗中，一个治疗策略是使癌细胞中的凋亡性信号转导级联活化，由此截停进展。能够完成该目的的一个方式是通过在癌细胞中表达的(或过表达的)tnf超家族受体蛋白与多价或多聚激动剂结合分子的结合，这能够促进受体三聚化和活化，导致凋亡。在交联后活化导致凋亡的一个tnf超家族受体蛋白是dr5(trailr2)。提高了对于dr5的兴趣，这是因为发现其在多种癌中的表达水平高于正常组织，所述癌症例如膀胱癌(y等，urology，79(4):968.e7-15,2012)、胃癌(lim等，carcinogen.,32(5):723-732,2011)、卵巢癌(jiang等，mol.med.rep.,6(2):316-320,2012)、胰腺导管腺癌(rajeshkumar等，mol.cancerther.,9(9):2583-92,2010)、口鳞状细胞癌(chen等，oncotarget4:206-217,2013)和非小细胞肺癌(reck等，lungcanc.,82(3):441-448,2013)。其对于医学界的另一个重要性是，观察到该受体蛋白家族，尤其是家族成员dr5，在最难以检测和治疗癌症的一些(例如胰腺癌和胃癌)中具有较高表达水平。尽管已发现某些单克隆抗体，例如替加珠单抗(cs-1008，第一三共株式会社(daiichisankyoco.ltd.)，公开于美国专利号7,244,429，vh和vl在本文中分别示为seqidno:7和seqidno:8)在体外和体内是有效的，甚至不用添加其它交联剂，但这些抗体不曾导致显著临床功效。(参见，reck等，2013)。所述抗dr5激动性的单克隆igg抗体的示例是：可那木单抗(conatumumab)(amgen，描述于美国专利号7,521,048，vh和vl在本文中分别示为seqidno:5和seqidno:6)、多兹图单抗(drozitumab)(genentech，描述于美国专利号8,029,783，vh和vl在本文中分别示为seqidno:3和seqidno:4)，和来沙木单抗(lexatumumab)(humangenomesciences，公开于美国专利申请公开号2006/0269555，vh和vl在本文中分别示为seqidno:1和seqidno:2)。需要更好的结合分子来实现进行的基础研究的益处，其提供关于tnf超家族受体蛋白的该子集的关键理解。本文中公开了其它结合分子，基于对受体蛋白tnf超家族的潜在的生化机制的理解，它们能够满足该需求。发明概述本发明提供多聚结合分子，例如，二聚、五聚或六聚结合分子，其包括两个、五个或六个二价结合单元或其变体或片段，其中各结合单元包括两个iga或igm重链恒定区或其片段，各自与抗原结合结构域相关联，其中，该结合分子的抗原结合结构域中的至少三个特异性且竞争性地结合至肿瘤坏死因子(tnf)超家族受体蛋白，其能够诱导表达所述tnf超家族受体蛋白的细胞的凋亡，并且其中，所述结合分子能交联在细胞表面上表达的至少三个相同的tnf超家族受体蛋白，由此诱导所述细胞的凋亡。在某些方面中，本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子能以高于等量的二价igg抗体或其片段的效能诱导表达tnf超家族受体的细胞中的tnf超家族受体介导的凋亡，其还特异性地结合至并激动相同的tnf超家族受体蛋白。在某些方面中，特异性结合至并激动tnf超家族受体蛋白的三个或更多个抗原结合结构域不与其它tnf超家族受体蛋白交叉反应。在某些方面中，特异性结合至并激动tnf超家族受体蛋白的三个或更多个抗原结合结构域能与其它tnf超家族受体蛋白交叉反应。在某些方面中，本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子可包括至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个，或十二个抗原结合结构域，所述抗原结合结构域特异性且竞争性地结合至在所述细胞的表面表达的tnf超家族受体蛋白，由此诱导所述细胞的凋亡。在某些方面中，所述至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个，或十二个抗原结合结构域结合至在所述细胞的表面表达的单一类型的tnf超家族受体分子的相同的胞外表位。在某些方面中，至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个，或十二个抗原结合结构域各自特异性结合在所述细胞的表面表达的单一类型的tnf超家族受体分子的两个或更多个不同的胞外表位的组中的一种。本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子的结合单元可以是人、人源化或嵌合免疫球蛋白结合单元。在某些方面中，本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子能够结合至，但不限于，tnfr1(dr1)、tnfr2、tnfr1/2、cd40(p50)、fas(cd95、apo1、dr2)、cd30、4-1bb(cd137、ila)、trailr1(dr4、apo2)、trailr2(dr5)、trailr3(dcr1)、trailr4(dcr2)、opg(ocif)、tweakr(fn14)、lightr(hvem)、dcr3、dr3、edar和xedar。在某些方面中，所述结合分子包括能够特异性且竞争性地结合至dr5的至少三个抗原结合结构域。在某些方面中，所述抗原结合结构域不结合至dr4、dcr1或dcr2。在某些方面中，所述结合分子包括还能特异性结合至dr4的至少三个抗原结合结构域。在某些方面中，dr5在癌细胞上表达。在某些方面中，提供二聚、五聚或六聚结合分子，其中至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个，或十二个抗原结合结构域包括重链可变区(vh)和轻链可变区(vl)，其中，所述vh和vl包括六个免疫球蛋白互补决定区hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2和lcdr3，其中，所述hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2和lcdr3包括：分别包含vh和vl氨基酸序列seqidno:1和seqidno:2；seqidno:3和seqidno:4；seqidno:5和seqidno:6；seqidno:7和seqidno:8；seqidno:9和seqidno:10；seqidno:11和seqidno:12；seqidno:13和seqidno:14；seqidno:15和seqidno:16；seqidno:17和seqidno:18；seqidno:19和seqidno:20；seqidno:21和seqidno:22；seqidno:23和seqidno:24；seqidno:25和seqidno:26；seqidno:27和seqidno:28；seqidno:29和seqidno:30；seqidno:31和seqidno:32；seqidno:33和seqidno:34；seqidno:35和seqidno:36；seqidno:37和seqidno:38；seqidno:39和seqidno:40；seqidno:41和seqidno:42；seqidno:43和seqidno:44；seqidno:45和seqidno:46；seqidno:47和seqidno:48；seqidno:49和seqidno:50；seqidno:51和seqidno:52；seqidno:53和seqidno:54；seqidno:55和seqidno:56；seqidno:82和seqidno:83；seqidno:84和seqidno:85；seqidno:86和seqidno:87；或seqidno:88和seqidno:89的抗体的cdr；或者scfv序列seqidno:57、seqidno:58、seqidno:59、seqidno:60、seqidno:61、seqidno:62、seqidno:63、seqidno:64、seqidno:65、seqidno:66、seqidno:67、seqidno:68、seqidno:69、seqidno:70、seqidno:71、seqidno:72或seqidno:73的cdr，或者所述六个cdr在所述cdr中的一个或多个中具有一个或两个氨基酸取代。在某些方面中，提供二聚、五聚或六聚结合分子，其中至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个，或十二个抗原结合结构域包括抗体vh和vl，其中，所述vh和vl包括分别与seqidno:1和seqidno:2；seqidno:3和seqidno:4；seqidno:5和seqidno:6；seqidno:7和seqidno:8；seqidno:9和seqidno:10；seqidno:11和seqidno:12；seqidno:13和seqidno:14；seqidno:15和seqidno:16；seqidno:17和seqidno:18；seqidno:19和seqidno:20；seqidno:21和seqidno:22；seqidno:23和seqidno:24；seqidno:25和seqidno:26；seqidno:27和seqidno:28；seqidno:29和seqidno:30；seqidno:31和seqidno:32；seqidno:33和seqidno:34；seqidno:35和seqidno:36；seqidno:37和seqidno:38；seqidno:39和seqidno:40；seqidno:41和seqidno:42；seqidno:43和seqidno:44；seqidno:45和seqidno:46；seqidno:47和seqidno:48；seqidno:49和seqidno:50；seqidno:51和seqidno:52；seqidno:53和seqidno:54；seqidno:55和seqidno:56；seqidno:82和seqidno:83；seqidno:84和seqidno:85；seqidno:86和seqidno:87；或seqidno:88和seqidno:89至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％相同的氨基酸序列；或者其中，所述vh和vl包含在具有与seqidno:57、seqidno:58、seqidno:59、seqidno:60、seqidno:61、seqidno:62、seqidno:63、seqidno:64、seqidno:65、seqidno:66、seqidno:67、seqidno:68、seqidno:69、seqidno:70、seqidno:71、seqidno:72或seqidno:73至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％相同的氨基酸序列的scfv中。在某些方面中，本文提供的结合分子是还包括j链的二聚iga分子形式。在某些方面中，本文提供的结合分子是还包括j链的五聚igm分子形式。在某些方面中，本文提供的结合分子是六聚igm分子。本发明还提供包括本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子的组合物。本发明还提供多核苷酸，所述多核苷酸包括编码多肽亚基(例如，本文提供的结合分子的重链或轻链)的核酸序列。在某些方面中，所述多肽亚基包括融合至vh的c末端的人iga或igm恒定区或其片段，包括：(a)hcdr1、hcdr2和hcdr3区，其包括vh氨基酸序列seqidno:1、seqidno:3、seqidno:5、seqidno:7、seqidno:9、seqidno:11、seqidno:13、seqidno:15、seqidno:17、seqidno:19、seqidno:21、seqidno:23、seqidno:25、seqidno:27、seqidno:29、seqidno:31、seqidno:33、seqidno:35、seqidno:37、seqidno:39、seqidno:41、seqidno:43、seqidno:45、seqidno:47、seqidno:49、seqidno:51、seqidno:53、seqidno:55、seqidno:82、seqidno:84、seqidno:86或seqidno:88中所包含的cdr，或者，scfv氨基酸序列seqidno:57、seqidno:58、seqidno:59、seqidno:60、seqidno:61、seqidno:62、seqidno:63、seqidno:64、seqidno:65、seqidno:66、seqidno:67、seqidno:68、seqidno:69、seqidno:70、seqidno:71、seqidno:72或seqidno:73中所包含的cdr；或者，vh氨基酸序列seqidno:1、seqidno:3、seqidno:5、seqidno:7、seqidno:9、seqidno:11、seqidno:13、seqidno:15、seqidno:17、seqidno:19、seqidno:21、seqidno:23、seqidno:25、seqidno:27、seqidno:29、seqidno:31、seqidno:33、seqidno:35、seqidno:37、seqidno:39、seqidno:41、seqidno:43、seqidno:45、seqidno:47、seqidno:49、seqidno:51、seqidno:53、seqidno:55、seqidno:82、seqidno:84、seqidno:86或seqidno:88中所包含的cdr，或者，scfv氨基酸序列seqidno:57、seqidno:58、seqidno:59、seqidno:60、seqidno:61、seqidno:62、seqidno:63、seqidno:64、seqidno:65、seqidno:66、seqidno:67、seqidno:68、seqidno:69、seqidno:70、seqidno:71、seqidno:72或seqidno:73中所包含的cdr，其中，在所述hcdr的一个或多个中有一个或两个单一氨基酸取代；或(b)与seqidno:seqidno:1、seqidno:3、seqidno:5、seqidno:7、seqidno:9、seqidno:11、seqidno:13、seqidno:15、seqidno:17、seqidno:19、seqidno:21、seqidno:23、seqidno:25、seqidno:27、seqidno:29、seqidno:31、seqidno:33、seqidno:35、seqidno:37、seqidno:39、seqidno:41、seqidno:43、seqidno:45、seqidno:47、seqidno:49、seqidno:51、seqidno:53、seqidno:55、seqidno:82、seqidno:84、seqidno:86或seqidno:88至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％相同的氨基酸序列，或者，与具有氨基酸序列seqidno:57、seqidno:58、seqidno:59、seqidno:60、seqidno:61、seqidno:62、seqidno:63、seqidno:64、seqidno:65、seqidno:66、seqidno:67、seqidno:68、seqidno:69、seqidno:70、seqidno:71、seqidno:72或seqidno:73的scfv的vh部分至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％相同的氨基酸序列。在某些方面中，所述多肽亚基包括轻链恒定区或其片段，其融合至所述二聚、五聚或六聚结合分子的抗原结合结构域的抗体vl部分的多肽亚基的c末端。在某些方面中，所述多肽亚基包括融合至vl的c末端的人κ或λ轻链恒定区或其片段，包括：(a)lcdr1，lcdr2和lcdr3区，其包括vl氨基酸序列seqidno:2、seqidno:4、seqidno:6、seqidno:8、seqidno:10、seqidno:12、seqidno:14、seqidno:16、seqidno:18、seqidno:20、seqidno:22、seqidno:24、seqidno:26、seqidno:28、seqidno:30、seqidno:32、seqidno:34、seqidno:36、seqidno:38、seqidno:40、seqidno:42、seqidno:44、seqidno:46、seqidno:48、seqidno:50、seqidno:52、seqidno:54、seqidno:56、seqidno:83、seqidno:85、seqidno:87或seqidno:89中所含的cdr，或scfv氨基酸序列seqidno:57、seqidno:58、seqidno:59、seqidno:60、seqidno:61、seqidno:62、seqidno:63、seqidno:64、seqidno:65、seqidno:66、seqidno:67、seqidno:68、seqidno:69、seqidno:70、seqidno:71、seqidno:72或seqidno:73中所含的cdr；或vl氨基酸序列seqidno:2、seqidno:4、seqidno:6、seqidno:8、seqidno:10、seqidno:12、seqidno:14、seqidno:16、seqidno:18、seqidno:20、seqidno:22、seqidno:24、seqidno:26、seqidno:28、seqidno:30、seqidno:32、seqidno:34、seqidno:36、seqidno:38、seqidno:40、seqidno:42、seqidno:44、seqidno:46、seqidno:48、seqidno:50、seqidno:52、seqidno:54、seqidno:56、seqidno:83、seqidno:85、seqidno:87或seqidno:89中所含的cdr，或scfv氨基酸序列seqidno:57、seqidno:58、seqidno:59、seqidno:60、seqidno:61、seqidno:62、seqidno:63、seqidno:64、seqidno:65、seqidno:66、seqidno:67、seqidno:68、seqidno:69、seqidno:70、seqidno:71、seqidno:72或seqidno:73中所含的cdr，其中，在所述lcdr中的一个或多个中有一个或两个单一氨基酸取代；或(b)与seqidno:2、seqidno:4、seqidno:6、seqidno:8、seqidno:10、seqidno:12、seqidno:14、seqidno:16、seqidno:18、seqidno:20、seqidno:22、seqidno:24、seqidno:26、seqidno:28、seqidno:30、seqidno:32、seqidno:34、seqidno:36、seqidno:38、seqidno:40、seqidno:42、seqidno:44、seqidno:46、seqidno:48、seqidno:50、seqidno:52、seqidno:54、seqidno:56、seqidno:83、seqidno:85、seqidno:87或seqidno:89至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％相同的氨基酸序列，或与具有氨基酸序列seqidno:57、seqidno:58、seqidno:59、seqidno:60、seqidno:61、seqidno:62、seqidno:63、seqidno:64、seqidno:65、seqidno:66、seqidno:67、seqidno:68、seqidno:69、seqidno:70、seqidno:71、seqidno:72或seqidno:73的scfv的vl部分至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％相同的氨基酸序列。本发明还提供包括本文提供的一种、两种或更多种多核苷酸的组合物。在某些方面中，提供了一种组合物，其中，所述多核苷酸处于分开的载体上。提供所述载体。在某些方面中，提供了一种组合物，其中，所述多核苷酸处于单一载体上。提供所述载体。在某些方面中，所述组合物还包括一种多核苷酸，其包括编码j链或其片段或其变体的核酸序列。本发明还提供宿主细胞，其包括本文提供的多核苷酸、本文提供的组合物，或本文提供的一种或多种载体，其中，所述宿主细胞能够表达本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子。本发明还提供一种产生本文提供的结合分子的方法，其中，所述方法包括培养所述宿主细胞和回收结合分子。在另一个方面中，本发明提供一种诱导表达tnf超家族受体的细胞中的tnf超家族受体介导的凋亡的方法，其中，所述方法包括使表达tnf超家族受体的细胞与本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子接触。在另一个方面中，本发明提供一种诱导表达tnf超家族受体的细胞中的tnf超家族受体脂质筏形成的方法，所述方法包括使表达tnf超家族受体的细胞与本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子接触。在另一个方面中，本发明提供治疗癌症的方法，其中，所述方法包括给予有此需要的对象有效量的本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子，其中，所述癌细胞表达tnf超家族受体，其具有凋亡活性。在某些方面中，相较于非癌细胞(例如，正常肝细胞，例如，正常人肝细胞)，所述多聚结合分子能诱导癌细胞的更大的凋亡。在某些方面中，所述tnf超家族受体是dr5。在某些方面中，该对象是人。附图简述图1a和图1b：多个细胞系上的dr5表达概况。图1a)colo205细胞上的人dr5的表面表达，通过流式细胞术检测；图1b)细胞系的组上的dr5表达的平均荧光强度(mfi)。图2：抗dr5mab对dr5具有特异性。抗人dr5mab特异性地结合至dr5，但非dr4或诱饵受体dcr1和dcr2，通过elisa检测。图3：抗dr5mab细胞结合。抗人dr5mab或同种型对照与colo205细胞孵育15分钟，经清洗，并用别藻蓝素偶联的二抗染色。结合通过流式细胞术检测。图4：抗dr5igg需要交联剂来实现细胞毒性。colo205细胞在不存在或存在交联剂的情况下与抗dr5孵育。24小时后检测细胞活力。同种型对照显示，在采用或不采用交联剂的情况下，均无细胞毒性(数据未显示)。图5：抗dr5igg需要交联剂来实现凋亡。colo205细胞在不存在或存在交联剂的情况下与5μg/ml抗dr5mab孵育。4小时处理之后，分别利用膜联蛋白v和7-aad来检测凋亡细胞和死细胞。图6：抗dr5igg需要交联剂来实现胱天蛋白酶活化。colo205细胞在不存在或存在交联剂的情况下与5μg/ml抗dr5mab孵育。胱天蛋白酶活化在处理1、2、4和24小时之后检测。图7a-d：多聚抗dr5mab的细胞毒性高于单体igg。图7a：非还原性sds-page显示优势性多聚化的一种抗dr5mab(泳道1)；泳道1对应于r&d系统公司(r&dsystems)克隆71903，泳道2对应于biolegend克隆djr2-4，泳道3对应于acris抗体克隆b-k29，且泳道4对应于acris抗体克隆b-d37。图7b：细胞活力试验显示，仅多聚抗dr5mab在不存在交联剂的情况中造成colo205细胞毒性-r&d系统公司(r&dsystems)克隆71903(实心方形)、biolegend克隆djr2-4(空心圆形，虚线)、acris抗体克隆b-k29(实心菱形)、acris抗体克隆b-d37(空心三角形，虚线)。图7c：facs试验结果显示，在不存在交联剂的情况中，多聚抗dr5mab诱导colo205细胞中的凋亡，但对于单体抗dr5mab或同种型对照未观察到类似结果。图7d：胱天蛋白酶活化发光试验显示，在不存在交联剂的情况中，多聚但非单体的抗dr5mab诱导colo205细胞中的胱天蛋白酶活化。图8a-b：dr5mabigm对于dr5具有特异性。dr5mabigg(图a)和igm(图b)#2特异性地结合至人dr5，但非dr4或诱饵受体dcr1和dcr2，通过elisa检测。dr5，实心圆形；dr4，实心三角形；dcr1，空心方形；dcr2，空心三角形。图9：dr5mabigm靶细胞结合。dr5mabigm#1(实心圆形)或dr5mabigg#1(空心方形)与colo205细胞孵育15分钟，经清洗，并用抗人igm或抗人iggfcalexa647偶联的二抗染色。结合(表示为细胞结合的％)通过流式细胞术检测。图10a-e：dr5mabigm超激动剂的细胞毒性高于单体igg。多聚dr5mabigm#1(图a)、igm#2(图b)、igm#3(图c)和igm#4(图d)对于colo205细胞的细胞毒性高于igg等同形式。图e显示dr5mabigm#1的细胞毒性高于交联的igg。dr5mabigm，实心圆形；dr5mabigg，空心方形；dr5mabigg+交联剂，空心三角形。图11a-d：dr5mabigm超激动剂对于colo205肿瘤细胞的细胞毒性高于原代人肝细胞。多聚dr5mabigm#1(图a)，dr5mabigm#2(图b)，dr5mabigm#3(图c)和dr5mabigm#4(图d)与colo205肿瘤细胞或原代人肝细胞孵育，并且24小时后检测细胞活力。dr5mabigm处理的colo205细胞，实心圆形；dr5mabigm处理的肝细胞，空心圆形。详述定义应注意，术语“一个”或“一种”实体指一种或多种该实体；例如，“一种结合分子”应理解为代表一种或多种结合分子。如此，术语“一个”(或“一种”)、“一个或多个”和“至少一个”在本文中可互换使用。此外，本文使用“和/或”时应视作具体公开了两种特征或组分的每一种，有或没有另一种。因此，本文短语“a和/或b”中使用的术语“和/或”旨在包括“a和b”、“a或b”、“a”(单独)、和“b”(单独)。同样，短语如“a、b、和/或c”中使用的术语“和/或”旨在包括各种以下实施方式：a、b、和c；a、b或c；a或c；a或b；b或c；a和c；a和b；b和c；a(单独)；b(单独)；和c(单独)。除非另有定义，本文使用的科技术语与本发明所属领域普通技术人员所理解的通常含义相同。例如，《生物医药和分子生物学简明词典》(concisedictionaryofbiomedicineandmolecularbiology)，juo,pei-show，第2版，2002，crc出版社(crcpress)；《细胞和分子生物学词典》(thedictionaryofcellandmolecularbiology)，第3版，1999，学术出版社(academicpress)；和《牛津生物化学和分子生物学辞典》(oxforddictionaryofbiochemistryandmolecularbiology)，修订，2000，牛津大学出版社(oxforduniversitypress)，向技术人员提供了本发明使用的很多术语的常用词典。单位、前缀和符号以它们的国际单位制(si)接受的形式表示。数值范围包括限定该范围的数值。除非另外说明，氨基酸以氨基到羧基的取向从左到右书写。本文提供的标题不是本发明的各种方面的限制，可以参考说明书整体理解本发明的各种方面或实施方式。因此，下面紧接着定义的术语完全参考说明书全文定义。本文所用的术语“多肽”意在包括单数形式“多肽”和复数形式“多肽”，指由酰胺键(也称肽键)线性连接的多个单体(氨基酸)所组成的分子。术语"多肽"指的是两个或更多个氨基酸的任何一条链或多条链，并且不表示特定长度的产物。因此，肽、二肽、三肽、寡肽、“蛋白质”、“氨基酸链”或其它任何用于指两个或多个氨基酸的一条或多条链的术语均包含于“多肽”的定义内，术语“多肽”可与任意这些术语替代或互换使用。术语“多肽”还指多肽表达后修饰的产物，所述修饰包括但不限于糖基化、乙酰基化、磷酸化、酰胺化，和通过已知保护/阻断基团衍生化、蛋白酶切割或非天然产生氨基酸修饰。多肽可由生物来源衍生或由重组技术产生，但不必定由指定核酸序列翻译而来。其可以任何方式产生，包括通过化学合成。本文公开的多肽的大小可以是约3个或更多个、5个或更多个、10个或更多个、20个或更多个、25个或更多个、50个或更多个、75个或更多个、100个或更多个、200个或更多个、500个或更多个、1,000个或更多个或者2,000个或更多个氨基酸。多肽可具有确定的三维结构，但它们不必定具有这种结构。具有确定三维结构的多肽被称为折叠多肽，不具有确定三维结构但能采用大量不同构象的多肽被称为非折叠多肽。本文所用的术语糖蛋白指偶联于至少一个糖部分的蛋白质，所述糖部分通过某一氨基酸如丝氨酸或天冬酰胺的含氧或含氮侧链连接于蛋白质。“分离的”多肽或其片段、变体或衍生物指不处于其天然环境中的多肽。没有规定的具体纯化水平。例如，可从其自然或天然环境中移出分离多肽。在宿主细胞中表达的重组产生多肽和蛋白质被认为是如本文公开的分离的，通过任何合适技术分离、分级，或者部分或基本上纯化的天然或重组多肽也如此。本文中所用的术语“非天然产生的多肽”或其任何语法变化形式，是条件性的限定，其明确地排除，但仅排除，被法官或管理部门或司法机关或可能会被法官或管理部门或司法机关确定或解释为“天然产生的”那些多肽形式。本文公开的其它多肽是前述多肽的片段、衍生物、类似物或变体，及其任何组合。本文所述的术语"片段"、"变体"、"衍生物"和"类似物"包括保持对应的原始抗体或多肽的至少一些性质(例如，特异性结合至抗原)的任何多肽。除本文他处讨论的具体抗体片段外，多肽的片段还包括，例如，蛋白酶水解片段以及缺失片段。例如，多肽的变体包括如上所述的片段，以及因氨基酸取代、缺失或插入而具有改变的氨基酸序列的多肽。在某些方面中，变体可以是非天然产生的。可使用本领域已知的诱变技术生成非天然产生变体。变体多肽可包含保守或非保守性氨基酸取代、缺失或添加。衍生物是已经改变从而显示原始多肽上不存在的其它特征的多肽。例子包括融合蛋白。多肽变体在本文中也可称作“多肽类似物”。本文所用的多肽的"衍生物"还可指：具有通过功能侧基的反应经由化学方法衍生的一个或多个氨基酸的对象多肽。“衍生物”还包括含有20种标准氨基酸中的一个或多个衍生形式的那些肽。例如，4-羟基脯氨酸可取代脯氨酸；5-羟基赖氨酸可取代赖氨酸；3-甲基组氨酸可取代组氨酸；高丝氨酸可取代丝氨酸；且鸟氨酸可取代赖氨酸。“保守性氨基酸取代”是其中一个氨基酸被具有相似侧链的另一个氨基酸替代的情况。本领域中已定义了具有类似侧链的氨基酸的家族，包括碱性侧链(如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、酸性侧链(如天冬氨酸、谷氨酸)、不带电荷的极性侧链(如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、非极性侧链(如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸)、β-分支侧链(如苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和芳香侧链(如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。例如，苯丙氨酸取代酪氨酸是保守取代。在某些实施方式中，本发明的多肽和抗体的序列中的保守取代不废除包含所述氨基酸序列的多肽或抗体与所述结合分子结合的抗原的结合。鉴定不消除抗原结合的核苷酸和氨基酸保守取代的方法是本领域熟知的(参见，例如，brummell等，biochem.32:1180-1187(1993)；kobayashi等，proteineng.12(10):879-884(1999)；和burks等，proc.natl.acad.sci.usa94:.412-417(1997))。术语“多核苷酸”意在包括单个核酸和多个核酸，指分离的核酸分子或构建物，例如信使rna(mrna)、cdna或质粒dna(pdna)。多核苷酸可包含常规磷酸二酯键或非常规键(如酰胺键，如肽核酸(pna)中发现的酰胺键)。术语“核酸”或“核酸序列”指多核苷酸中存在的任何一种或多种核酸区段，如dna或rna片段。"分离的"核酸或多核苷酸意为与其原始环境分离的核酸或多核苷酸的任何形式。例如，凝胶纯化的多核苷酸，或编码载体中所含多肽的重组多核苷酸将被视作是“分离的”。并且，认为已被工程改造以具有供于克隆的限制性位点的多核苷酸区段，例如，pcr产物，是“分离的”。分离的多核苷酸的其它示例包括在异源性宿主细胞中维持的重组多核苷酸或在非原始溶液(例如缓冲液或盐水)中(部分地或基本上地)纯化的重组多核苷酸。分离的rna分子包括多核苷酸的体内或体外rna转录本，其中，所述转录本不是自然中存在的转录本。分离的多核苷酸或核酸还包括通过合成方式产生的这样的分子。此外，多核苷酸或核酸可以是或可包括调节元件例如启动子、核糖体结合位点，或转录终止子。本文中所用的术语“非天然产生的多核苷酸”或其任何语法变化形式，是条件性的限定，其明确地排除，但仅排除，被判定机构或管理部门或司法机关或可能会被被判定机构或管理部门或司法机关确定或解释为“天然产生的”那些核酸或多核苷酸形式。本文所用的术语“编码区”指由翻译成氨基酸的密码子组成的核酸部分。虽然“终止密码子”(tag、tga或taa)不翻译成氨基酸，但它可被认为是编码区的一部分，而任何侧接序列如启动子、核糖体结合位点、转录终止子、内含子等均不是编码区的一部分。两个或更多个编码区可存在于单一多核苷酸构建物中，例如在单一载体上，或者在分开的多核苷酸构建物中，例如在单独(不同)载体上。此外，任何载体均能包含单一编码区，或可包含两个或更多个编码区，例如，单一载体可分开编码免疫球蛋白重链可变区和免疫球蛋白轻链可变区。此外，载体、多核苷酸或核酸可包括异源性的编码区，其融合或未融合至另一个编码区。异源性的编码区包括不限于，编码专有的元件或基序(例如分泌信号肽或异源性的功能结构域)的那些。在某些实施方式中，所述多核苷酸或核酸是dna。对dna而言，包含多肽编码核酸的多核苷酸通常包含启动子和/或其它转录或翻译控制元件，这些元件与一个或多个编码区操作性连接。操作性连接指当基因产物如多肽的编码区与一个或多个调控序列以此方式连接时，将该基因产物的表达置于该调控序列的影响或控制下。如果启动子功能的诱导使编码所需基因产物的mrna转录，且如果两个dna片段间连接的属性不干扰表达调控序列指导基因产物表达或不干扰转录dna模板的能力，则两个dna片段(如多肽编码区及其相连的启动子)“操作性连接”。因此，如果启动子能够影响核酸的转录，则启动子区域与多肽编码核酸操作性连接。启动子可以是在预定细胞中指导dna实质转录的细胞特异性启动子。启动子以外的其它转录控制元件如增强子、操纵子、阻遏物和转录终止信号，能与多核苷酸可操作连接以指导细胞特异性转录。多种转录控制区对于本领域技术人员而言是已知的。它们包括但不限于在脊椎动物细胞中发挥作用的转录控制区，例如但不限于，来自巨细胞病毒(立即早期启动子，与内含子-a联用)、猿病毒40(早期启动子)和逆转录病毒(如劳氏肉瘤病毒)的启动子和增强子区段。其它转录控制区包括源自脊椎动物基因的那些，例如肌动蛋白、热激蛋白、牛生长激素和兔β-球蛋白，以及能够控制真核细胞中的基因表达的其它序列。其它合适的转录控制区包括组织特异性启动子和增强子以及淋巴因子诱导型启动子(例如，通过干扰素或白介素诱导的启动子)。类似地，本领域普通技术人员了解各种翻译控制元件。它们包括但不限于：核糖体结合位点、翻译起始和终止密码子以及衍生自小核糖核酸病毒的元件(特别是内部核糖体进入位点或ires，也称为cite序列)。在其它实施方式中，多核苷酸可以是rna，例如，信使rna(mrna)、转移rna或核糖体rna的形式。多核苷酸和核酸编码区可与编码分泌或信号肽的其它编码区相关联，所述编码分泌或信号肽引导本文所述的多核苷酸编码的多肽的分泌。根据信号假说，哺乳动物细胞分泌的蛋白质具有信号肽或分泌前导序列，一旦生长的蛋白质链跨粗面内质网的输出启动，所述序列从成熟蛋白质上切除。本领域普通技术人员了解，脊椎动物细胞分泌的多肽可具有融合于所述多肽n末端的信号肽，它们从完整或“全长”多肽上切割产生分泌或“成熟”形式的多肽。在某些实施方式中，使用天然信号肽，例如免疫球蛋白重链或轻链信号肽，或者使用仍然能够指导与其操作性相连多肽分泌的该序列的功能衍生物。或者，可采用异源性的哺乳动物信号肽，或其功能衍生物。例如，野生型前导序列可用小鼠β-葡萄糖醛酸酶或人组织纤溶酶原激活剂(tpa)的前导序列取代。本文中所用的术语“tnf受体蛋白超家族”、“tnf超家族”、“tnf受体家族”、“tnf受体”或此类短语的任何组合，指的是在多种细胞和组织的表面上表达的肿瘤坏死因子跨膜受体蛋白的家族。该超家族的家族成员包括，在通过配体结合活化之后触发其中表达所述受体蛋白的细胞中的凋亡、增殖和/或形态发生的那些。活化后触发凋亡的tnf超家族受体蛋白成员包括，但不限于如下受体：tnfr1(dr1)、tnfr2、tnfr1/2、cd40(p50)、fas(cd95、apo1、dr2)、cd30、4-1bb(cd137、ila)、trailr1(dr4、apo2)、trailr2(dr5)、trailr3(dcr1)、trailr4(dcr2)、opg(ocif)、tweakr(fn14)、lightr(hvem)、dcr3、dr3、edar和xedar。活化后触发增殖的tnf超家族受体蛋白成员包括但不限于如下受体：tnfr1/2、gitr(aitr)、taci、bcma、tweakr(fn14)、rank(trancer)、cd27、cd40(p50)、ox40(cd134)、lt-βr、tnfr1(dr1)和tnfr2。据信活化后触发形态发生的tnf超家族受体蛋白成员包括，但不限于如下受体：fas(cd95、apo1、dr2)、trailr1(dr4、apo2)、dr5(trailr2)、trailr3(dcr1)、trailr4(dcr2)、opg(ocif)、cd40(p50)、edar、xedar和tnfr1/2。本文公开了某些结合分子或其抗原结合片段、变体或衍生物，其结合至某些tnf超家族受体蛋白，由此诱发细胞凋亡。除非特定地述及全尺寸抗体，否则术语"结合分子"涵盖全尺寸抗体以及所述抗体的抗原结合亚基、片段、变体、类似物或衍生物，例如，以类似于抗体分子的方式结合抗原但采用不同的支架的工程改造的抗体分子或片段。本文中所用的术语“结合分子”以其最宽泛的含义指特异性结合至受体(例如，表位或抗原决定簇)的分子。如本文进一步描述，结合分子可包含本文所述的多种“抗原结合结构域”之一。结合分子的非限制性示例是抗体或其保持抗原-特异性结合的片段。本文中所用的术语“结合结构域”或“抗原结合结构域”指的是必需且足以特异性结合至表位的结合分子的区域。例如，“fv”，例如，抗体的可变重链和可变轻链，作为两个分开多肽亚基或作为单一链，被视作是“结合结构域”。其它结合结构域包括，但不限于，源自骆驼科物种的抗体的可变重链(vhh)，或在纤连蛋白支架上表达的六个免疫球蛋白互补决定区(cdr)。本文所述的“结合分子”可包括一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个或更多个“抗原结合结构域”。术语“抗体”和“免疫球蛋白”在本文中可互换使用。抗体(或其片段、变体或衍生物，如本文所述)包括：至少重链的可变区(对于骆驼科物种而言)或至少重链和轻链的可变区。脊椎动物系统中的基本免疫球蛋白结构是相对较好地了解的。参见例如，harlow等，《抗体：实验室手册》(antibodies:alaboratorymanual)(冷泉港实验室出版社(coldspringharborlaboratorypress)，第2版，1988)。除非另有说明，术语“抗体”涵盖从抗体的小抗原结合片段到全尺寸抗体的范围内的任何物质，例如，igg抗体，其包括两个完整重链和两个完整轻链，iga抗体，其包括四个完整重链和四个完整轻链，并且任选地包括j链和/或分泌型组分，或igm抗体，其包括十个或十二个完整重链和十个或十二个完整轻链且任选地包括j链。正如下文中更详细讨论，术语“免疫球蛋白”包括可通过生化性质区分的各种类型多肽。本领域技术人员应理解，重链分为gamma、mu、alpha、delta或epsilon(γ、μ、α、δ、ε)，其中还有一些亚类(如γ1-γ4或α1-α2)。该链的特性决定抗体“同种型”分别为igg、igm、iga、igg或ige。免疫球蛋白亚类(亚型)如igg1、igg2、igg3、igg4、iga1、iga2等已被充分表征，且已知赋予功能特化。根据本文公开内容，本领域技术人员能容易地区分这些免疫球蛋白各自的经修饰形式，从而，它们涵盖在本发明范围内。轻链分类为kappa或lambda(κ、λ)。各重链类别可与κ或λ轻链结合。通常，轻链和重链互相共价结合，并且当由例如杂交瘤、b细胞或遗传工程改造的宿主细胞表达免疫球蛋白时，两条重链的“尾”部分通过共价二硫键或非共价连接结合在一起。在重链中，氨基酸从y构型的分叉末端处的n-端到各条链的底部处的c-端。某些抗体(例如，igg抗体)的基础结构包括两个重链亚基和两个轻链亚基，其通过二硫键共价连接以形成“y”结构，也在本文中称为“h2l2”结构，或“结合单元”。术语“结合单元”在本文中用于指结合分子，例如，抗体或其抗原结合片段，的部分，其对应于标准“h2l2”免疫球蛋白结构，即，两个重链或其片段和两个轻链或其片段。在例如其中所述结合分子是二价igg抗体或其抗原结合片段的某些方面中，术语“结合分子”和“结合单元”是等同的。在例如其中所述结合分子是iga二聚体、igm五聚体或igm六聚体的其它方面中，所述结合分子包含两个或更多个“结合单元”。分别地，在iga二聚体的情况中是两个，或在igm五聚体或六聚体的情况中是五个或六个。结合单元不必包括全长抗体重链和轻链，但通常将是二价的，即，将包括两个“结合结构域”，如下定义。本发明提供的某些结合分子是二聚的，并且包括两个二价结合单元，其包括iga恒定区或其片段。本发明提供的某些结合分子是五聚或六聚的，并且包括五个或六个二价结合单元，其包括igm恒定区或其片段。包含两个或更多个，例如，两个、五个或六个结合单元的结合分子，在本文中称为“多聚的”。术语“价”、“二价”、“多价”和语法等同形式，指的是给定的结合分子或结合单元中的结合结构域的数量。如此，述及给定的结合分子，例如，igm抗体或其片段，术语“二价”、“四价”和“六价”分别表示存在两个结合结构域、四个结合结构域，和六个结合结构域。在其中各结合单元是二价的典型的igm源性的结合分子中，该结合分子本身可具有10或12价。二价或多价结合分子可以是单特异性的，即，所有的结合结构域均是相同的，或可以是双特异性的或多特异性的，例如，其中两个或更多个结合结构域是不同的，例如，结合至相同的抗原上的不同的表位，或结合至完全不同的抗原。术语“表位”包括能够特异性结合至抗体的任何分子决定簇。在某些方面中，表位可包括分子的化学活性的表面基团(例如氨基酸、糖侧链、磷酰基或磺酰基基团)，而在某些方面中，表位可具有一定的三维结构特点和/或特定的电荷特点。表位是由抗体结合的靶标的区域。术语“靶标”以最广泛的含义使用以包括可由结合分子结合的物质。靶标可以是，例如，多肽、核酸、碳水化合物、脂质或其它分子。此外，例如，“靶标”可以是包含可被结合分子结合的表位的细胞、器官或生物体。轻链和重链都划分成结构和功能同源性的区域。从功能角度使用术语“恒定”和“可变”。在这方面，应理解可变轻(vl)链或可变重(vk)链部分的可变区决定抗原识别和特异性。相反，轻链的恒定区(cl)和重链的恒定区(例如，ch1、ch2或ch3)提供生物学特性，例如分泌、跨胎盘移动、fc受体结合、补体结合等。按照习惯，恒定区结构域的编号随着远离抗原结合位点或抗体的氨基端而增加。n末端部分是可变区，并且c末端部分是恒定区；ch3(或者，在igm的情况中，ch4)和cl结构域实际上分别包括重链和轻链的羧基端。“全长igm抗体重链”是这样的多肽，其以n末端向c末端的方向包括，抗体重链可变结构域(vh)、抗体重链恒定结构域1(cm1或cμ1)、抗体重链恒定结构域2(cm2或cμ2)、抗体重链恒定结构域3(cm3或cμ3)，和抗体重链恒定结构域4(cm4或cμ4)，其可包括尾片段。“全长iga抗体重链”是这样的多肽，其以n末端向c末端的方向包括，抗体重链可变结构域(vh)、抗体重链恒定结构域1(ca1或cα1)、抗体重链恒定结构域2(ca2或cα2)，和抗体重链恒定结构域3(ca3或cα3)，其可包括尾片段。如上所述，一个或多个可变区允许结合分子选择性地识别抗原上的表位并特异性地结合该表位。即，vl结构域和vh结构域或结合分子(例如，抗体)的互补决定区(cdr)的子集组合，以形成抗原结合结构域。更具体地，所述抗原结合结构域可由各vh和vl链上的三个cdr确定。某些抗体形成较大结构。例如，iga可形成这样的分子，该分子包括两个h2l2结合单元和通过二硫键共价连接的j链，其还可与分泌型组分相关联，并且，igm可形成这样的五聚或六聚分子，该分子包括五个或六个h2l2结合单元和任选的通过二硫键共价连接的j链。抗体抗原结合结构域中存在的六个“互补决定区”或“cdr”是氨基酸的非连续短序列，其特异性地定位，以随着抗体在水性环境中采用其三维构型而形成结合结构域。结合结构域中的其余氨基酸称为“构架”区，显示较小的分子间差异。构架区主要采用β-片层构象，并且cdr形成连接β-片层结构且在某些情况下形成β-片层结构的部分的环。因此，构架区用于通过链间非共价相互作用形成为cdr提供正确方向位置的支架。由定位的cdr形成的结合结构域确定了与免疫反应性抗原上的表位互补的表面。这种互补表面促进了抗体与其互补表位的非共价结合。分别组成cdr和构架区域的氨基酸，可由本领域普通技术人员通过任何给定的重或轻链可变区而容易地鉴定，因为它们已以多种不同的方式被定义(参见，"免疫学热门蛋白质序列(sequencesofproteinsofimmunologicalinterest)"，kabat,e.等，美国卫生及公共服务部(u.s.departmentofhealthandhumanservices)，(1983)；和chothia和lesk，j.mol.biol.,196:901-917(1987)，其通过引用其全文纳入本文)。除非明确表述为相反的含义，否则在本领域内所使用和/或接受的某一术语有两种或多种定义的情况下，本文所用的术语定义应包括所有这些含义。具体示例是使用术语“互补决定区”(“cdr”)描述在重链和轻链多肽的可变区内发现的非毗连抗原结合位点。这些具体的区域已被描述，例如，由kabat等，美国卫生及公共服务部，"免疫学热门蛋白质序列(sequencesofproteinsofimmunologicalinterest)"(1983)，和由chothia等，j.mol.biol.196:901-917(1987)，其通过引用纳入本文。kabat和chothia定义包括氨基酸在彼此比较时的重叠或子集。不过，除非另有说明，述及抗体或其变体的cdr的定义(或本领域普通技术人员已知的其它定义)意图落在本文定义或所用的术语范围之内。合适的氨基酸残基包括上文引用的各参考文献中定义的cdr，如下表1所示以作对比。涵盖具体cdr的确切氨基酸编号将根据cdr的序列和大小而变化。鉴于抗体的可变区氨基酸序列，本领域技术人员能够常规地确定哪些氨基酸包含具体cdr。表1cdr定义*kabatchothiavhcdr131-3526-32vhcdr250-6552-58vhcdr395-10295-102vlcdr124-3426-32vlcdr250-5650-52vlcdr389-9791-96*表1中所有cdr定义的编号均按照kabat等所述的编号规则(见下文)。kabat等也定义了适用于任何抗体的可变区序列的编号系统。本领域普通技术人员能明确地将所述“kabat编号系统”应用于任何可变区序列，而不依赖序列本身外的任何实验数据。本文所用的“kabat编号”指kabat等(1983)美国卫生与公众服务部，“免疫学热门蛋白质序列(sequenceofproteinsofimmunologicalinterest)”(1983)中所述的编号系统。除非明确注明采用kabat编号系统，否则，对本发明的全部氨基酸序列采用连贯的编号。结合分子，例如，抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物，包括但不限于，多克隆、单克隆、人、人源化的或嵌合抗体、单一链抗体、表位-结合片段，例如，fab、fab'和f(ab')2、fd、fvs、单链fvs(scfv)、单链抗体、二硫键连接的fvs(sdfv)、包含vl或vh结构域的片段，通过fab表达文库产生的片段。scfv分子是本领域已知的，并且描述于例如美国专利号5,892,019。"特异性结合"一般表示，结合分子，例如，抗体或其片段、变体或衍生物通过其抗原结合结构域结合至表位，并且所述结合需要所述抗原结合结构域和所述表位之间的一些互补性。按照这一定义，当结合分子通过其抗原结合结构域与表位结合比与随机无关的表位结合更容易时，称该结合分子“特异性结合”该表位。本文中使用术语“特异性”定性分析某一抗体与某一表位结合的相对亲和性。例如，可认为结合分子“a”比结合分子“b”对给定表位具有更高特异性，或者可以说结合分子“a”以比对相关表位“d”的特异性更高的特异性或亲和性结合表位“c”。可以说结合分子，例如，本文公开的抗体或其片段、变体或衍生物，以小于或等于5x10-2秒-1、10-2秒-1、5x10-3秒-1、10-3秒-1、5x10-4秒-1、10-4秒-1、5x10-5秒-1或10-5秒-15x10-6秒-1、10-6秒-1、5x10-7秒-1或10-7秒-1的解离速率(k(off))结合靶标抗原。可以说本文公开的结合分子，例如，抗体或抗原结合片段、变体或衍生物，以大于或等于103m-1秒-1、5x103m-1秒-1、104m-1秒-1、5x104m-1秒-1、105m-1秒-1、5x105m-1秒-1、106m-1秒-1或5x106m-1秒-1或107m-1秒-1的结合速率(k(on))结合靶标抗原。如果结合分子，例如，抗体或其片段、变体或衍生物，以一定程度上阻断参比抗体或抗原结合片段与该表位的结合的程度优先结合至该表位，则可以说，该结合分子，例如，抗体或其片段、变体或衍生物竞争性地抑制参比抗体或抗原结合片段与给定的表位的结合。可通过本领域已知的任意方法确定竞争性抑制，例如，竞争elisa试验。可以说，结合分子竞争性地抑制参比抗体或抗原结合片段与给定表位的至少90％、至少80％、至少70％、至少60％或至少50％的结合。本文所用的术语“亲和性”指单独表位与例如免疫球蛋白分子的一个或多个结合结构域结合的强度量度。参见例如，harlow等，《抗体：实验室手册》(antibodies:alaboratorymanual)(冷泉港实验室出版社(coldspringharborlaboratorypress)，第2版，1988)，第27-28页。本文中所用的术语"亲和力(avidity)"指的是结合结构域的群和抗体之间的复合物的总体稳定性。参见，例如，harlow，第29-34页。亲合力既与群体中单独结合结构域与特定表位的亲和性相关，也与免疫球蛋白分子和抗原的价态相关。例如，二价单克隆抗体和具有高度重复表位结构的抗原例如多聚体之间的相互作用是具有高亲合力的一个例子。二价单克隆抗体与以高密度存在于细胞表面上的受体之间的相互作用也将具有高亲和力。本文公开的结合分子或其抗原结合片段、变体或衍生物也可就其交叉反应性进行描述或说明。本文所用的术语“交叉反应性”指，结合分子(例如抗体或其片段、变体或衍生物)对某一种抗原具有特异性、与第二种抗原发生反应的能力；它是两种不同抗原性物质之间关联性的量度。因此，如果结合分子与诱导其形成的表位以外的其他表位结合，则具有交叉反应性。交叉反应性表位通常含有许多与诱导表位相同的互补结构特征，在某些情况下甚至比原始表位更匹配。结合分子，例如，抗体或其片段、变体或衍生物还可就它们与抗原的结合亲和性来描述或说明。例如，结合分子可以不超过5x10-2m、10-2m、5x10-3m、10-3m、5x10-4m、10-4m、5x10-5m、10-5m、5x10-6m、10-6m、5x10-7m、10-7m、5x10-8m、10-8m、5x10-9m、10-9m、5x10-10m、10-10m、5x10-11m、10-11m、5x10-12m、10-12m、5x10-13m、10-13m、5x10-14m、10-14m、5x10-15m或10-15m的解离常数或kd结合至抗原。包括单链抗体或其它结合结构域的抗体片段可单独存在或以如下一种或多种的组合的形式存在：铰链区、ch1、ch2、ch3或ch4结构域、j链，或分泌型组分。还包括抗原结合片段，其可包括一个或多个可变区与铰链区、ch1、ch2、ch3或ch4结构域、j链或分泌型组分中的一个或多个的任何组合。结合分子，例如，抗体或其抗原结合片段，可来自任何动物来源，包括鸟类和哺乳动物。所述抗体可以是人、鼠、驴、兔、山羊、豚鼠、骆驼、美洲鸵、马或鸡抗体。在另一个实施方式中，所述可变区可以是软骨鱼(condricthoid)来源(例如，来自鲨鱼)。本文中所用的"人"抗体包括，具有人免疫球蛋白的氨基酸序列的抗体，且包括从人免疫球蛋白文库分离或来自一种或多种人免疫球蛋白的动物转基因的抗体，并且其可在一些示例中表达内源性免疫球蛋白，但一些则不是，如下文所述，例如，描述于kucherlapati等的美国专利号5,939,598。本文中所用的术语“重链亚基”包括这样的氨基酸序列，其源自免疫球蛋白重链、结合分子，例如，包含重链亚基的抗体，可包括如下至少一项：vh结构域、ch1结构域、铰链(例如，上部、中部和/或下部铰链区)结构域、ch2结构域、ch3结构域、ch4结构域，或其变体或片段。例如，结合分子，例如，抗体或其片段、变体或衍生物，除了vh结构域以外，还可包括但不限于：ch1结构域；ch1结构域，铰链和ch2结构域；ch1结构域和ch3结构域；ch1结构域，铰链和ch3结构域；或ch1结构域，铰链结构域，ch2结构域和ch3结构域。在某些方面中，结合分子，例如，抗体或其片段、变体或衍生物，除vh结构域以外，还可包括，ch3结构域和ch4结构域；或ch3结构域，ch4结构域和j链。此外，用于本发明的结合分子可缺乏某些恒定区部分，例如，ch2结构域的全部或部分。本领域普通技术人员应理解，可修饰这些结构域(例如重链亚基)，从而其氨基酸序列不同于原始免疫球蛋白分子。本文所用的术语“轻链亚基”包括衍生自免疫球蛋白轻链的氨基酸序列。轻链亚基包括至少vl，并且还可包括cl(例如，cκ或cλ)结构域。结合分子，例如，抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物可就它们识别或特异性结合的表位或抗原部分进行描述或说明。靶抗原与抗体的抗原结合结构域特异性相互作用的部分是“表位”或“抗原决定簇”。靶抗原可包含单个表位，或至少两个表位，并可包括任意数量的表位，这取决于抗原的大小、构象和类型。如前所述，各种免疫球蛋白类别的恒定区的亚基结构和三维构型是众所周知的。本文所用的术语“vh结构域”包括免疫球蛋白重链的氨基末端可变区，术语“ch1结构域”包括免疫球蛋白重链的第一(最靠氨基末端)恒定区结构域。ch1结构域邻近vh结构域，并且位于典型igg重链分子的铰链区的氨基末端。本文所用的术语“ch2结构域”包括这样的重链分子部分，其例如从igg抗体的约氨基酸244延伸到氨基酸360，采用常规的编号方案(氨基酸244至360，kabat编号系统；和氨基酸231-340，eu编号系统；参见kabatea等，同前)。ch3结构域从ch2结构域延伸至igg分子的c末端并且包含约108个氨基酸。某些免疫球蛋白类别，例如，igm，还包括ch4区。本文中所用的术语“铰链区”包括在igg、iga和igd重链中将ch1结构域接合至ch2结构域的重链分子的部分。该铰链区包含约25个氨基酸并且是柔性的，因此允许两个n末端抗原结合区域独立地移动。本文所用的术语“二硫键”包括两个硫原子之间形成的共价键。氨基酸半胱氨酸包含可形成二硫键或桥接第二巯基基团的巯基基团。本文所用的术语“嵌合抗体”指这样的抗体，其中免疫反应性区域或位点获自或衍生自第一物种，而恒定区(其可能是完整、一部分或修饰的)获自第二物种。在一些实施方式中，靶标结合区或位点将来自非人来源(例如，小鼠或灵长类)并且恒定区是人的。术语“多特异性抗体”或“双特异性抗体”指的是在单一抗体分子中具有针对两个或更多个不同的表位的结合结构域的抗体。可构建除了标准抗体结构以外的具有两种结合特异性的其它结合分子。由双特异性抗体或多特异性抗体进行的表位结合可以是同时或相继的。三元杂交瘤(trioma)和杂合杂交瘤是可分泌双特异性抗体的细胞系的两个示例。双特异性抗体还可通过重组手段构建。(和heiss,futureoncol.6:1387-94(2010)；mabry和snavely,idrugs.13:543-9(2010))。双特异性抗体也可以是双特异抗体(diabody)。本文中所用的术语"工程改造的抗体"指的是这样的抗体，其中重链和轻链之一或两者中的可变结构域通过在cdr或构架区域的一个或多个氨基酸的至少部分替代而被改变。在某些方面中，来自具有已知特异性的抗体整个cdr可被移接到异源性抗体的构架区域中。虽然替代性的cdr可衍生自与产生构架区的抗体属于同一类或甚至亚类的抗体，但cdr仍可衍生自不同类别的抗体，例如，不同物种的抗体。将来自具有已知特异性的非人抗体的一个或多个“供体”cdr移植到人重链或轻链构架区内形成的工程改造的抗体在本文中称为“人源化抗体”。在某些方面中，并非全部cdr由来自供体可变区的完整cdr替代，而所述供体的抗原结合能力仍可被转移至受者可变结构域。鉴于例如美国专利号5,585,089、5,693,761、5,693,762和6,180,370中给出的解释，本领域技术人员完全有能力通过进行常规实验法或通过试验和误差检定来获得功能工程改造的或人源化的抗体。本文所用的术语“工程改造的”包括通过合成手段(例如通过重组技术、体外肽合成，通过酶或化学偶联肽，或这些技术的一些组合)进行的核酸或多肽分子的操作。本文中所用的术语"连接的"、"融合的"或"融合"或其它语法等同形式可互换使用。这些术语指通过包括化学偶联或重组在内的方式将两个或更多元件或组件连接在一起。“框内融合”指以维持原始orf翻译读框的方式，将两个或多个多核苷酸开放阅读框(orf)连接形成连续的较长orf。因此，重组融合蛋白是包含两个或多个片段的单一蛋白质，所述片段对应原始orf编码的多肽(这些片段在自然条件下通常不如此连接)。尽管因此阅读框在融合片段中是连续的，但片段仍可被物理或空间分隔，如框内接头序列。例如，编码免疫球蛋白可变区cdr的多核苷酸可框内融合，但用编码至少一个免疫球蛋白构架区或额外cdr区的多核苷酸间隔开，前提是“融合的”cdr作为连续多肽的一部分共同翻译。本文中所用的术语“交联的”指的是两个或更多个分子通过第三分子接合在一起。例如，具有特异性结合至相同的抗原的两个结合结构域的二价抗体可“交联”该抗原的两个拷贝，例如，当它们表达在细胞上时。许多tnf超家族受体蛋白需要细胞表面上的三个或更多个受体的交联以供活化。tnf超家族受体蛋白的交联表示，例如，本文所述的结合分子与在细胞表面上表达的tnf超家族受体的接触，从而至少三个所述家族成员同时由一个或多个结合分子结合在一起，由此活化所述受体。对于多肽而言，“线性序列”或“序列”是多肽中从氨基到羧基末端方向上氨基酸的顺序，在序列中彼此相邻的氨基酸是多肽一级结构中的毗连残基。多肽的部分处于在连续的多肽链中出现得较早的多肽的另一个部分的“氨基末端”或“n末端”。类似地，多肽的部分处于在连续的多肽链中出现得较晚的多肽的另一个部分的“羧基末端”或“c末端”。例如，在典型的抗体中，可变区位于恒定区的“n末端”，并且恒定区位于可变区的“c末端”。本文所用的术语“表达”指基因生成生化物质如多肽的过程。该过程包括在细胞内基因功能存在的任何表现，包括但不限于，基因敲除以及瞬时表达和稳定表达。它包括但不限于，基因转录成rna，例如信使rna(mrna)，和将这类mrna翻译成多肽。如果所需的最终产物是生化物质(biochemical)，则表达包括产生该生化物质和任何前体。基因的表达产生"基因产物"。本文中所用的基因产物可以是核酸，例如，通过基因转录产生的信使rna，或由转录本翻译的多肽。本文所述的基因产物还包括具有转录后修饰的核酸，例如聚腺苷酸化，或具有翻译后修饰的多肽，如甲基化、糖基化、加入脂质、连接其它蛋白质亚基、经蛋白酶水解切割等。术语例如"治疗(treating)"或"治疗(treatment)"或"以治疗(totreat)"或"缓解(alleviating)"或"以缓解(toalleviate)"指的是治愈、减缓、减少现存的已经诊断的病理病症或紊乱的症状，和/或截停或减缓现存的已经诊断的病理病症或紊乱的进展的治疗性措施。术语例如“预防(prevent)”、“预防(prevention)”、“避免”、“遏制(deterrence)”等指的是预防未经诊断的目标病理病症或紊乱的进展的预防性的或预防用的措施。因此，需要治疗的那些(对象)可包括已经患有疾病的那些(对象)；易于患有疾病的那些(对象)；和需要预防疾病的那些(对象)。“对象”或“个体”或“动物”或“患者”或“哺乳动物”指需要诊断、预防或治疗的任何对象，特别是哺乳动物对象。哺乳动物对象包括人、家养动物、家畜和动物园动物、竞技动物或宠物，如犬、猫、豚鼠、兔、大鼠、小鼠、马、猪、奶牛、熊等。本文中所用的短语例如“将受益于治疗的对象”和“有治疗需求的动物”包括这样的对象，例如哺乳动物对象，其将受益于结合分子例如包含一个或多个抗原结合结构域的抗体的给予。所述结合分子，例如，抗体，可用于，例如，诊断性操作方法和/或用于疾病的治疗或预防。igm结合分子igm是通过b细胞响应抗原刺激产生的第一种免疫球蛋白，并且以约1.5mg/ml在血清中以5天的半衰期存在。igm是五聚或六聚分子。igm结合单元包括两个轻和两个重链。尽管igg包含三个重链恒定结构域(ch1、ch2和ch3)，igm的重(μ)链还包含第四恒定结构域(ch4)，其包括c末端“尾片段”。人igm恒定区通常包含氨基酸序列seqidno:74。人cμ1区的范围是seqidno:74的约氨基酸5-约氨基酸102；人cμ2区的范围是seqidno:74的约氨基酸114-约氨基酸205，人cμ3区的范围是seqidno:74的约氨基酸224-约氨基酸319，cμ4区的范围是seqidno:74的约氨基酸329-约氨基酸430，并且所述尾片段的范围是seqidno:74的约氨基酸431-约氨基酸453。seqidno:74如下所示：gsasaptlfplvscenspsdtssvavgclaqdflpdsitlswkyknnsdisstrgfpsvlrggkyaatsqvllpskdvmqgtdehvvckvqhpngnkeknvplpviaelppkvsvfvpprdgffgnprksklicqatgfsprqiqvswlregkqvgsgvttdqvqaeakesgpttykvtstltikesdwlgqsmftcrvdhrgltfqqnassmcvpdqdtairvfaippsfasifltkstkltclvtdlttydsvtiswtrqngeavkthtniseshpnatfsavgeasiceddwnsgerftctvthtdlpsplkqtisrpkgvalhrpdvyllppareqlnlresatitclvtgfspadvfvqwmqrgqplspekyvtsapmpepqapgryfahsiltvseeewntgetytcvahealpnrvtertvdkstgkptlynvslvmsdtagtcy五个igm结合单元可与另一个小多肽链(j链)形成复合物，以形成igm抗体。人j链包含氨基酸序列seqidno:76。在没有j链的情况下，igm结合单元通常组装成六聚体。尽管不希望受理论限制，认为igm结合单元组装成五聚或六聚结合分子涉及cμ3和cμ4结构域。因此，本发明提供的五聚或六聚结合分子通常包括igm恒定区，其包括至少cμ3和cμ4结构域。seqidno:76如下所示：mknhllfwgvlavfikavhvkaqederivlvdnkckcaritsriirssedpnediverniriivplnnrenisdptsplrtrfvyhlsdlckkcdpteveldnqivtatqsnicdedsatetcytydrnkcytavvplvyggetkmvetaltpdacypdigm重链恒定区还可包括cμ2结构域或其片段、cμ1结构域或其片段，和/或其它igm重链结构域。在某些方面中，本文提供的结合分子可包括完整igm重(μ)链恒定结构域，例如，seqidno:74或其变体、衍生物或类似物。五聚或六聚tnf超家族结合分子本发明提供五聚或六聚结合分子，即，具有如本文定义的五个或六个“结合单元”的结合分子，其可特异性结合至一个或多个tnf超家族受体蛋白，例如，dr5。相较于由单一结合单元组成的结合分子，例如，二价igg抗体，本文提供的结合分子可具有改善的结合特点或生物活性。例如，五聚或六聚结合分子可更高效地交联细胞(例如，肿瘤细胞)表面上的三个或更多个tnf超家族受体分子，由此促进所述细胞的凋亡。本文提供的结合分子可同样地具有与由合成或嵌合结构组成的多价结合分子不同的特点。例如，相对于包含嵌合恒定区或合成结构的结合分子，人igm恒定区的应用可提供减少的免疫原性，和由此增加的安全性。此外，基于igm的结合分子可一致地形成六聚或五聚寡聚体，导致同源性更高的表达产物。更优的补体结合也可以是基于igm的结合分子的有利的效应物功能。在某些方面中，本发明提供五聚或六聚结合分子，其分别包含五个或六个二价结合单元，其中各结合单元包括两个igm重链恒定区或其片段。在某些方面中，所述两个igm重链恒定区是人重链恒定区。如果所述本文提供的结合分子是五聚的，则该结合分子还可包含j链，或其片段，或其变体。igm重链恒定区可包括cμ1结构域、cμ2结构域、cμ3结构域和/或cμ4结构域中的一个或多个，限制条件是，所述恒定区可在该结合分子中提供所需功能，例如，与第二igm恒定区相关联以形成结合结构域，或与其它结合单元相关联以形成六聚体或五聚体。在某些方面中，个体结合单元中的两个igm重链恒定区或其片段各包含cμ3结构域或其片段、cμ4结构域或其片段、尾片段(tp)或其片段，或cμ3结构域cμ结构域，和tp或其片段的任何组合。在某些方面中，个体结合单元中的两个igm重链恒定区或其片段还各自包含cμ2结构域或其片段、cμ1结构域或其片段，或cμ1结构域或其片段和cμ2结构域或其片段。在某些方面中，给定的结合单元中的两个igm重链恒定区各自与抗原结合结构域，例如抗体的fv部分，例如，人或鼠抗体的vh和vl相关联，其中，所述vl可以与轻链恒定区相关联。本文提供的结合分子中，所述结合分子的至少一个抗原结合结构域是tnf超家族受体蛋白结合结构域，即，可特异性结合至tnf受体蛋白超家族的成员(例如，人dr5)的结合结构域。iga结合分子iga在粘膜免疫中起关键作用，并且占产生的总免疫球蛋白的约15％。iga是单体或二聚分子。iga结合单元包括两个轻和两个重链。iga包含三个重链恒定结构域(cα1、cα2和cα3)，并且包括c末端“尾片段”。人iga具有两个亚型，iga1和iga2。人iga1恒定区通常包含氨基酸序列seqidno:78。人cα1区的范围是seqidno:78的约氨基酸6-约氨基酸98；人cα2区的范围是seqidno:78的约氨基酸125-约氨基酸220，人cα3区的范围是seqidno:78的约氨基酸228-约氨基酸330，并且所述尾片段的范围是seqidno:78的约氨基酸331-约氨基酸352。人iga2恒定区通常包含氨基酸序列seqidno:79。人cα1区的范围是seqidno:79的约氨基酸6-约氨基酸98；人cα2区的范围是seqidno:79的约氨基酸112-约氨基酸207，人cα3区的范围是seqidno:79的约氨基酸215-约氨基酸317，并且所述尾片段的范围是seqidno:79的约氨基酸318-约氨基酸340。seqidno:78和79如下所示：seqidno:78asptspkvfplslcstqpdgnvviaclvqgffpqeplsvtwsesgqgvtarnfppsqdasgdlyttssqltlpatqclagksvtchvkhytnpsqdvtvpcpvpstpptpspstpptpspscchprlslhrpaledlllgseanltctltglrdasgvtftwtpssgksavqgpperdlcgcysvssvlpgcaepwnhgktftctaaypesktpltatlsksgntfrpevhllpppseelalnelvtltclargfspkdvlvrwlqgsqelprekyltwasrqepsqgtttfavtsilrvaaedwkkgdtfscmvghealplaftqktidrlagkpthvnvsvvmaevdgtcyseqidno:79asptspkvfplsldstpqdgnvvvaclvqgffpqeplsvtwsesgqnvtarnfppsqdasgdlyttssqltlpatqcpdgksvtchvkhytnpsqdvtvpcpvpppppcchprlslhrpaledlllgseanltctltglrdasgatftwtpssgksavqgpperdlcgcysvssvlpgcaqpwnhgetftctaahpelktpltanitksgntfrpevhllpppseelalnelvtltclargfspkdvlvrwlqgsqelprekyltwasrqepsqgtttfavtsilrvaaedwkkgdtfscmvghealplaftqktidrmagkpthvnvsvvmaevdgtcy两个iga结合单元可与两个其它多肽链，j链(seqidno:76)和分泌型组分(前体，seqidno:80，成熟，seqidno:81)形成复合物，以形成分泌iga(siga)抗体。尽管不希望受理论限制，认为iga结合单元组装成二聚siga结合分子涉及cα3和尾片段结构域。因此，本发明提供的二聚siga结合分子通常包括iga恒定区，其包括至少cα3和尾片段结构域。seqidno:80和seqidno:81如下所示：seqidno:80:mllfvltcllavfpaistkspifgpeevnsvegnsvsitcyypptsvnrhtrkywcrqgarggcitlissegyvsskyagranltnfpengtfvvniaqlsqddsgrykcglginsrglsfdvslevsqgpgllndtkvytvdlgrtvtincpfktenaqkrkslykqiglypvlvidssgyvnpnytgrirldiqgtgqllfsvvinqlrlsdagqylcqagddsnsnkknadlqvlkpepelvyedlrgsvtfhcalgpevanvakflcrqssgencdvvvntlgkrapafegrillnpqdkdgsfsvvitglrkedagrylcgahsdgqlqegspiqawqlfvneestiprsptvvkgvaggsvavlcpynrkesksikywclwegaqngrcpllvdsegwvkaqyegrlslleepgngtftvilnqltsrdagfywcltngdtlwrttveikiiegepnlkvpgnvtavlgetlkvpchfpckfssyekywckwnntgcqalpsqdegpskafvncdensrlvsltlnlvtradegwywcgvkqghfygetaavyvaveerkaagsrdvslakadaapdekvldsgfreienkaiqdprlfaeekavadtrdqadgsrasvdsgsseeqggssralvstlvplglvlavgavavgvararhrknvdrvsirsyrtdismsdfensrefgandnmgassitqetslggkeefvattesttetkepkkakrsskeeaemaykdfllqsstvaaeaqdgpqeaseqidno:81:kspifgpeevnsvegnsvsitcyypptsvnrhtrkywcrqgarggcitlissegyvsskyagranltnfpengtfvvniaqlsqddsgrykcglginsrglsfdvslevsqgpgllndtkvytvdlgrtvtincpfktenaqkrkslykqiglypvlvidssgyvnpnytgrirldiqgtgqllfsvvinqlrlsdagqylcqagddsnsnkknadlqvlkpepelvyedlrgsvtfhcalgpevanvakflcrqssgencdvvvntlgkrapafegrillnpqdkdgsfsvvitglrkedagrylcgahsdgqlqegspiqawqlfvneestiprsptvvkgvaggsvavlcpynrkesksikywclwegaqngrcpllvdsegwvkaqyegrlslleepgngtftvilnqltsrdagfywcltngdtlwrttveikiiegepnlkvpgnvtavlgetlkvpchfpckfssyekywckwnntgcqalpsqdegpskafvncdensrlvsltlnlvtradegwywcgvkqghfygetaavyvaveerkaagsrdvslakadaapdekvldsgfreienkaiqdpriga重链恒定区还可包括cα2结构域或其片段、cα1结构域或其片段，和/或其它iga重链结构域。在某些方面中，本文提供的结合分子可包括完整iga重(α)链恒定结构域(例如，seqidno:78或seqidno:79)或其变体、衍生物或类似物。二聚tnf超家族受体结合分子本发明提供二聚结合分子，例如，具有本文定义的两个iga“结合单元”的结合分子，其可特异性结合至一个或多个tnf超家族受体蛋白，例如，dr5。相较于由单一结合单元组成的结合分子，例如，二价igg抗体，本文提供的结合分子可具有改善的结合特点或生物活性。例如，iga结合分子可更高效地交联细胞(例如，肿瘤细胞)表面上的三个或更多个tnf超家族受体，由此促进所述细胞的凋亡。此外，iga结合分子可到达粘膜位点，提供本文提供的结合分子的更大的组织分布。基于iga的结合分子的应用可允许，例如，本文提供的结合分子的更大的组织分布。粘膜分布可有益于某些癌症，例如，肺癌、卵巢癌、结直肠癌，或鳞状细胞癌。同样地，本文提供的二聚结合分子可具有可与包含五个或六个结合单元的结合分子(例如，六聚或五聚igm抗体)区分开的结合特点或生物活性。例如，二聚结合分子将更小，从而能够，例如，实现实体肿瘤中更好的组织穿透。在某些方面中，本发明提供二聚结合分子，其包含两个二价结合单元，其中各结合单元包括两个iga重链恒定区或其片段。在某些方面中，所述两个iga重链恒定区是人重链恒定区。本文提供的二聚iga结合分子还可包含j链，或其片段，或其变体。本文提供的二聚iga结合分子还可包含分泌型组分，或其片段，或其变体。iga重链恒定区可包括cα1结构域、cα2结构域和/或cα3结构域中的一个或多个，限制条件是，所述恒定区可在该结合分子中发挥所需功能，例如，与轻链恒定区相关联以促进抗原结合结构域的形成，或与另一个iga结合单元相关联以形成二聚结合分子。在某些方面中，个体结合单元中的两个iga重链恒定区或其片段各自包含cα3结构域或其片段、尾片段(tp)或其片段，或cα3结构域、tp或其片段的任何组合。在某些方面中，个体结合单元中的两个iga重链恒定区或其片段还各自包含cα2结构域或其片段、cα1结构域或其片段，或cα1结构域或其片段和cα2结构域或其片段。在某些方面中，给定的结合单元中的两个iga重链恒定区各自与抗原结合结构域，例如抗体的fv部分，例如，人或鼠抗体的vh和vl相关联，其中，所述vl可以与轻链恒定区相关联。本文提供的结合分子中，所述结合分子的至少一个抗原结合结构域是tnf超家族受体蛋白结合结构域，即，可特异性结合至tnf受体蛋白超家族的成员(例如，人dr5)的结合结构域。tnf超家族受体结合结构域本文提供的tnf超家族受体蛋白结合分子可以是二聚、五聚或六聚的，其分别包含两个、五个或六个二价结合单元。所述结合单元可以是全长的或其保持结合功能的变体或片段。各结合单元包含两个iga或igm重链恒定区或其片段，其各自与抗原结合结构域相关联。如上所述，抗原结合结构域是必需的且足以特异性结合至表位的结合分子的区域。本文所述的“结合分子”可包括一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个或更多个“抗原结合结构域”。本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子可包括至少三个抗原结合结构域，其特异性且竞争性地结合至肿瘤坏死因子(tnf)超家族受体蛋白。如上所述，这些tnf超家族受体蛋白中的一些，在活化后，能诱导表达其结合的tnf超家族受体蛋白的细胞的凋亡。如目前所理解的，当多个受体蛋白结合到一起时，造成受体分子的交联，由此信号被传递跨过细胞膜进入表达tnf超家族受体蛋白的细胞的胞质，从而将发生凋亡。本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子可交联在细胞表面上表达的至少三个相同的tnf超家族受体蛋白。归因于tnf超家族受体蛋白的二聚、五聚或六聚性质，本文提供的结合分子可交联多达三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个或十二个tnf超家族受体蛋白，所述受体蛋白必须空间上彼此接近，由此促进它们的交联和活化。当本文提供的二价结合单元tnf超家族受体蛋白结合分子的全部五个或全部六个分别结合至单一细胞上的至多十个或十二个tnf超家族受体蛋白时，可发生受体的交联和活化。因为所述结合单元各自是二价的，所以各结合分子可结合至多达10个(对于五聚结合分子而言)或12个(对于六聚结合分子而言)tnf超家族受体蛋白。在经本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子的结合所致的受体活化之后，细胞可经历凋亡、活化或形态发生，如上所述，这取决于结合了该超家族的哪种受体。在某些方面中，本文公开的二聚、五聚或六聚结合分子能以高于等同量的二价igg抗体或其片段的效能诱导表达tnf超家族受体的细胞中的tnf超家族受体介导的凋亡，其还特异性地结合至并激动相同的tnf超家族受体蛋白。不希望受理论限制，因为提供结合分子是二聚、五聚或六聚的，并且因为各结合单元是二价的，所以所述结合分子能以更高效能诱导受体介导的先前关于该受体蛋白超家族所表征的功能，相较于任何单独的单一结合单元，例如等同的igg结合单元而言。igg结合单元是二价的，包含两个结合位点，但如先前的临床研究所示，该超家族的两个受体与单一igg分子的结合在不添加其它组分(例如交联剂等)的情况下可能是无效的。“效能”或“改善的结合特点”是指，实现给定的生物结果，例如，给定的试验，例如，基于elisa或western印迹的胱天蛋白酶试验、通过facs分析所见的膜联蛋白-v染色，或在下文实例中提供的其它试验中，20％、50％或90％的tnf超家族受体蛋白的活化所需的给定的结合分子的最小的量。例如，当tnf超家族受体蛋白是在活化时造成其中它被活化的细胞的凋亡的受体蛋白时，效能可被表示为曲线，其中％细胞存活处于y轴，而结合分子浓度(例如，以μg/ml或μm计)处于x轴。因为本文提供的结合分子是二聚、五聚或六聚的，所以其可分别具有多达4、10或12个抗原结合结构域。各抗原结合结构域可特异性结合至并激动tnf超家族受体。此外，各抗原结合结构域可对tnf超家族受体蛋白的一个具体的表位具有特异性。在某些方面中，所述结合分子不与其它tnf超家族受体蛋白交叉反应。然而，在其它方面中，所述抗原结合结构域中的两个或更多个可对不同的表位和/或不同的tnf超家族受体蛋白具有特异性。因此，单个的二聚、五聚或六聚结合分子可：a)同时结合许多相同的受体蛋白上的单一表位，b)结合同一相同的受体蛋白上的许多不同的表位，或c)可结合不同的tnf超家族受体蛋白上的不同的表位。在实施方式a)中，本文提供的tnf超家族受体蛋白结合分子可结合相同的tnf超家族受体的多重拷贝，对于各相同的拷贝在相同位置处结合，由此形成所述受体蛋白在单一位置处的筏，并且可能增加受体蛋白被活化的可能性。在其它实施方式中，例如实施方式c)，本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子可用于接触多重不同的tnf超家族受体蛋白，由此通过多种被靶标的受体活化多于一个途径，以实现细胞中的所需生物响应。当然，在这些实施方式中，本文提供的tnf超家族受体蛋白结合分子可接触并激动全部处于一种单一细胞上或处于多重细胞间的此类受体。因此，本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子可包含三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个，或在六聚结合分子的情况中，包含多达十一个，或十二个抗原结合结构域，其特异性且竞争性地结合至在一个或多个细胞的表面上表达的一个或多个tnf超家族受体蛋白，由此诱导该一个或多个细胞中的意图的或所需的生物响应。本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子的结合单元可以是人、人源化或嵌合免疫球蛋白结合单元。人源化免疫球蛋白序列的方法是本领域已知的。因此，编码二聚、五聚或六聚结合分子多肽的核苷酸序列可直接来自人序列，或可以是人源化的或嵌合的，即，由来自多种不同的物种的序列编码。本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子可特异性结合已知tnf超家族受体蛋白中的任何一种。这些受体蛋白可基于触发形态发生、凋亡或增殖的特定功能而被分组。因此，本文提供的tnf超家族受体蛋白结合分子可以，例如，特异性结合至如下受体中的任何一个或多个：tnfr1(dr1)、tnfr2、tnfr1/2、cd40(p50)、fas(cd95、apo1、dr2)、cd30、4-1bb(cd137、ila)、dr4(trailr1、apo2)、dr5(trailr2)、dcr1(trailr3)、dcr2(trailr4)、opg(ocif)、tweakr(fn14)、lightr(hvem)、dcr3、dr3、edar和xedar。在一个实施方式中，本文提供的tnf超家族受体蛋白结合分子特异性且竞争性地结合至dr5但不特异性结合至其它受体，例如，dr4(trailr1、apo2)、诱饵受体dcr1(trailr3)或诱饵受体dcr2(trailr4)。在某些方面中，本文提供的tnf超家族受体蛋白结合分子可特异性且竞争性地结合至dr5，并且还可特异性结合至dr4。表达tnf超家族受体蛋白的细胞可以是任何动物细胞。例如，在一个实施方式中，所述细胞是人细胞。例如，所述细胞可以是灵长类、啮齿类、犬、马等的任何一种或多种的细胞。此外，表达所述tnf超家族受体蛋白的细胞可以是癌细胞。即，所述细胞可以是恶性或良性肿瘤中的细胞。本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子可经遗传工程改造，从而其抗原结合结构域由已知特异性结合tnf超家族受体蛋白的序列编码。许多团队已经公开了单克隆抗体、经表征且已知特异性结合至tnf超家族受体(例如，dr5)的大多数igg同种型的可变区的序列。已知特异性结合至dr5的非限制性免疫球蛋白可变区序列提供于表2和3。对于tnf受体蛋白超家族的其它成员具有特异性的其它单克隆抗体序列已被公开。本领域技术人员能够将这些公开的序列工程改造成免疫球蛋白结构，例如igg、iga、igm结构，或其生物活性或功能片段(例如scfv片段等，如上所述)。用于将克隆的可变区遗传工程改造成为免疫球蛋白结构域，并且表达和纯化所述构建体的方法是公开的并且处于本领域技术人员的能力范围内。因此，在某些方面中，本文提供的tnf超家族受体蛋白结合结构域包含抗dr5mab的六个免疫球蛋白互补决定区hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2和lcdr3，或所述六个免疫球蛋白互补决定区在一个或多个cdr中具有一个、两个、三个、四个或五个单氨基酸取代，其包含：分别如下的vh和vl氨基酸序列seqidno:1和seqidno:2；seqidno:3和seqidno:4；seqidno:5和seqidno:6；seqidno:7和seqidno:8；seqidno:9和seqidno:10；seqidno:11和seqidno:12；seqidno:13和seqidno:14；seqidno:15和seqidno:16；seqidno:17和seqidno:18；seqidno:19和seqidno:20；seqidno:21和seqidno:22；seqidno:23和seqidno:24；seqidno:25和seqidno:26；seqidno:27和seqidno:28；seqidno:29和seqidno:30；seqidno:31和seqidno:32；seqidno:33和seqidno:34；seqidno:35和seqidno:36；seqidno:37和seqidno:38；seqidno:39和seqidno:40；seqidno:41和seqidno:42；seqidno:43和seqidno:44；seqidno:45和seqidno:46；seqidno:47和seqidno:48；seqidno:49和seqidno:50；seqidno:51和seqidno:52；seqidno:53和seqidno:54；seqidno:55和seqidno:56；seqidno:82和seqidno:83；seqidno:84和seqidno:85；seqidno:86和seqidno:87；或seqidno:88和seqidno:89；或scfv氨基酸序列seqidno:57、seqidno:58、seqidno:59、seqidno:60、seqidno:61、seqidno:62、seqidno:63、seqidno:64、seqidno:65、seqidno:66、seqidno:67、seqidno:68、seqidno:69、seqidno:70、seqidno:71、seqidno:72，或seqidno:73。表2抗dr5抗体vh和vl序列表3：抗dr5scfv序列在某些方面中，dr5结合结构域包含vh和vl，其中，所述vh和vl包含分别与seqidno:1和seqidno:2；seqidno:3和seqidno:4；seqidno:5和seqidno:6；seqidno:7和seqidno:8；seqidno:9和seqidno:10；seqidno:11和seqidno:12；seqidno:13和seqidno:14；seqidno:15和seqidno:16；seqidno:17和seqidno:18；seqidno:19和seqidno:20；seqidno:21和seqidno:22；seqidno:23和seqidno:24；seqidno:25和seqidno:26；seqidno:27和seqidno:28；seqidno:29和seqidno:30；seqidno:31和seqidno:32；seqidno:33和seqidno:34；seqidno:35和seqidno:36；seqidno:37和seqidno:38；seqidno:39和seqidno:40；seqidno:41和seqidno:42；seqidno:43和seqidno:44；seqidno:45和seqidno:46；seqidno:47和seqidno:48；seqidno:49和seqidno:50；seqidno:51和seqidno:52；seqidno:53和seqidno:54；seqidno:55和seqidno:56；seqidno:82和seqidno:83；seqidno:84和seqidno:85；seqidno:86和seqidno:87；或seqidno:88和seqidno:89至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％相同的氨基酸序列；或者其中，所述vh和vl位于scfv中，该scfv包含与seqidno:57、seqidno:58、seqidno:59、seqidno:60、seqidno:61、seqidno:62、seqidno:63、seqidno:64、seqidno:65、seqidno:66、seqidno:67、seqidno:68、seqidno:69、seqidno:70、seqidno:71、seqidno:72，或seqidno:73至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％相同的氨基酸序列。尽管本领域普通技术人员基于本发明可设想多种不同的二聚、五聚和六聚结合分子，并因而包括在本发明中，但在某些方面中，提供如上所述的结合分子，其中各结合单元包含两个iga或igm重链，其各包含位于iga或igm恒定区或其片段的氨基末端的vh，和两个免疫球蛋白轻链，其各包含位于免疫球蛋白轻链恒定区的氨基末端的vl。此外，在某些方面中，所述结合分子的至少一个结合单元，或所述结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个结合单元，包含或包括如上所述的dr5结合结构域中的两个。在某些方面中，所述结合分子的至少一个结合单元中的，或所述结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元中的两个dr5结合结构域，可以彼此不同，或它们可以是相同的。在某些方面中，所述结合分子的至少一个结合单元，或所述结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元中的所述两个iga或igm重链，是相同的。在某些方面中，所述结合分子的至少一个结合单元，或至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元中的两个相同的iga或igm重链包含公开于表2和3的重链可变结构域氨基酸序列。在某些方面中，所述结合分子的至少一个结合单元，或所述结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元中的两个轻链是相同的。在某些方面中，所述结合分子的至少一个结合单元，或所述结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元内的两个相同的轻链是κ轻链，例如，人κ轻链，或λ轻链，例如，人λ轻链。在某些方面中，所述结合分子的至少一个结合单元，或所述结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元内的两个相同的轻链各自包含公开于表2和3的轻链可变结构域氨基酸序列。在某些方面中，本发明提供的二聚、五聚或六聚结合分子的至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元包含或各包含两个相同的iga或igm重链恒定区，其各自包含相同的公开于表2和3的重链可变结构域氨基酸序列，和两个相同的轻链，其各自包含相同的公开于表2和3的重链可变结构域氨基酸序列。根据该方面，所述结合分子的至少一个结合单元，或所述结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元中的dr5结合结构域可以是相同的。此外根据该方面，本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子可包含如上所述的dr5结合结构域的至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个，或至少十二个拷贝。在某些方面中，所述结合单元中至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个可以是相同的，并且，在某些方面中，所述结合单元可包含相同的结合结构域，例如，至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个，或至少十二个dr5结合结构域可以是相同的。在某些方面中，相较于其它结合分子，本文提供的二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子可具有有利的结构或功能性质。例如，相对于对应的具有相同的抗原结合结构域的二价结合分子，所述二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合。生物试验包括，但不限于elisa和western印迹胱天蛋白酶试验，和facs分析，其利用指示凋亡细胞死亡的染色，例如膜联蛋白-v。在某些方面中，本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子触发表达tnf超家族受体蛋白的细胞的凋亡的效能高于等同量的特异性结合至与该tnf超家族受体蛋白结合结构域相同的tnf超家族受体蛋白表位的单特异性的、二价igg1抗体或其片段。在某些方面中，本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子触发表达dr5的细胞的凋亡的效能可高于等同量的单特异性的、二价抗dr5单克隆抗体或其片段，其中，所述抗体是或包含与提供于表2和3的抗体相同的vh和vl区域，例如，可那木单抗(amgen)、多兹图单抗(genentech)或来沙木单抗(hgs/glaxosmithkline)。多核苷酸、载体和宿主细胞本发明还提供多核苷酸，例如，分离的、重组和/或非天然产生的多核苷酸，其包含编码本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子的多肽亚基的核酸序列。“多肽亚基”表示可被独立地翻译的结合分子、结合单元或结合结构域的部分。示例包括但不限于，抗体vh、抗体vl、单链fv、抗体重链、抗体轻链、抗体重链恒定区、抗体轻链恒定区，和/或其任何片段。本发明还提供一种组合物，其包含两个或更多个多核苷酸，其中，所述两个或更多个多核苷酸可共同地编码如上所述的二聚、五聚或六聚结合分子。在某些方面中，所述组合物可包括编码iga或igm重链或其片段，例如，如上所述的人iga或igm重链的多核苷酸，其中，所述iga或igm重链包含tnf超家族受体蛋白结合结构域的至少vh，和，编码轻链或其片段，例如，人κ或λ轻链的多核苷酸，所述轻链包含tnf超家族受体蛋白结合结构域的至少vl。提供的多核苷酸组合物还可包括编码j链(例如，人j链)或其片段或其变体的多核苷酸。在某些方面中，本文提供的组合物所含的多核苷酸可位于两个或三个分开载体(例如，表达载体)上。本发明提供所述载体。在某些方面中，本文提供的组合物所含的多核苷酸中的两种或更多种可位于单一载体(例如，表达载体)上。本发明提供所述载体。本发明还提供宿主细胞，例如，原核或真核宿主细胞，其包含编码本文提供的二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子或其任何亚基的多核苷酸或两个或更多个多核苷酸，本文提供的多核苷酸组合物，或载体或两个、三个或更多个载体，其共同地编码本文提供的二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子，或其任何亚基。在某些方面中，本发明提供的宿主细胞可表达本发明提供的二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子，或其亚基。在一个相关方面中，本发明提供产生本发明提供的二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子的方法，其中，所述方法包括培养如上所述的宿主细胞，和，回收结合分子。使用方法本发明提供用于触发表达tnf超家族受体蛋白的细胞(例如，恶性或永生化的细胞)的凋亡的改进方法，该方法利用本文提供的二聚、五聚或六聚的基于iga或基于igm的tnf超家族受体蛋白结合分子。下述方法可利用结合分子，所述结合分子包含源自任何现存的抗tnf超家族受体蛋白抗体(包括但不限于提供于表2和3的抗体，或其变体、衍生物或类似物)的tnf超家族受体蛋白结合结构域，其中，相较于等同的二价抗体、片段、变体、衍生物或类似物，所述二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子可提供表达tnf超家族受体蛋白的细胞的改善的凋亡介导的细胞死亡。基于本发明，包含任何感兴趣的tnf超家族受体蛋白结合结构域的二聚、五聚或六聚的基于iga或基于igm的tnf超家族受体蛋白结合分子的构建完全在本领域普通技术人员的能力范围内。改善的活性可以，例如，允许使用减少的剂量，或可导致对于耐受原始抗体的杀伤的细胞的更有效杀伤。“耐受”表示抗tnf超家族受体蛋白抗体对于表达tnf超家族受体蛋白的细胞的任何程度的活性减少。在某些方面中，本发明提供触发表达tnf超家族受体蛋白的细胞的凋亡、形态发生或增殖的方法，其中，所述方法包括，使表达tnf超家族受体蛋白的细胞与本文所述的二聚、五聚或六聚结合分子接触，其中，所述结合分子对于表达tnf超家族受体蛋白的细胞的凋亡、形态发生或增殖的触发的效能高于特异性结合至与该tnf超家族受体蛋白结合结构域相同的tnf超家族受体蛋白表位的等同量的单特异性的、二价igg1抗体或其片段。而在另一个方面，当以有效剂量给予有癌症治疗需求的对象时，本文提供的tnf超家族受体蛋白结合分子可促进癌治疗，例如，通过减缓肿瘤生长、停止肿瘤生长，或减小现存肿瘤的尺寸来介导。本发明提供治疗癌症的方法，所述方法包括：给予有治疗需求的对象有效剂量的本文提供的tnf超家族受体蛋白结合分子，例如，本文提供的dr5结合分子。在某些方面中，所述表达tnf超家族受体蛋白的细胞是永生化的细胞系，即癌细胞。术语“癌症”、“肿瘤”、“癌性”和“恶性”指或描述哺乳动物的生理病症，其典型特征是细胞生长失控。癌症的示例包括但不限于，癌，包括腺癌、淋巴瘤、胚细胞瘤、黑素瘤、肉瘤和白血病。所述癌症的更具体的示例包括，鳞状细胞癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、胃肠癌、霍奇金氏和非霍奇金氏淋巴瘤、胰腺癌、恶性胶质瘤、胶质瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌例如肝细胞癌和肝细胞瘤、膀胱癌、乳腺癌(包括激素介导的乳腺癌，参见，例如，innes等(2006)br.j.cancer94:1057-1065)、结肠癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、骨髓瘤(例如多发性骨髓瘤)、涎腺癌、肾癌例如肾细胞癌和维尔姆斯瘤、基底细胞癌、黑素瘤、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、睾丸癌、食管癌、多种类型的头颈癌，包括但不限于，鳞状细胞癌，和粘蛋白来源的癌，例如，粘蛋白卵巢癌、胆管癌(肝)和乳头状肾细胞癌。粘膜分布，例如由本文提供的基于iga的结合分子提供的粘膜分布，对于某些癌症，例如，肺癌、卵巢癌、结直肠癌或鳞状细胞癌而言是有益的。本发明还提供一种预防或治疗有此需要的对象的癌症的方法，包括，给予该对象有效量的本文提供的二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子或其抗原结合片段、包含所述结合分子的组合物或制剂，或本文所述的多核苷酸、载体或宿主细胞。用于治疗癌症的组合物的有效剂量可根据许多不同的因素变化，包括给药方式、目标位点、患者的生理状态、患者是人还是动物、给予的其他药物和治疗是预防性还是治疗性。在某些方面中，本文提供的治疗方法可提供增加的安全性，其中，相较于非癌细胞(例如，正常人肝细胞)，所述组合物对癌细胞显示更大的细胞毒性(例如，更大程度上地诱导凋亡)。通常，患者是人，但也可治疗非人哺乳动物(包括转基因哺乳动物)。可使用本领域技术人员已知的常规方法对治疗剂量进行滴定以优化安全性和功效。本发明的组合物可以任何合适的方法给予，例如，肠胃外、心室内、经口、通过吸入喷雾、局部、直肠、鼻、口腔、阴道或通过植入型储器。本文所用术语“胃肠外”包括皮下、静脉内、肌内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、脑内和颅内注射或输注技术。待治疗的对象可以是有治疗需要的任何动物，例如，哺乳动物，在某些方面中，对象是人对象。以其最简形式，待给予对象的制剂是本文提供的二聚、五聚或六聚结合分子，或其抗原结合片段，其以常规的剂型给予，其可与本文他处所述的药物赋形剂、运载体或稀释剂联合给予。本文提供的tnf超家族受体蛋白结合分子或其抗原结合片段可通过本文他处所述的任何合适的方法给予，例如，通过iv输注。在某些方面中，本文提供的tnf超家族受体蛋白结合分子或其抗原结合片段可被引入肿瘤，或肿瘤细胞附近。全部类型的肿瘤均能受通过该方法的治疗，其包括但不限于，乳腺、肺、胰腺、卵巢、肾、结肠和膀胱的癌，以及黑素瘤、肉瘤和淋巴瘤。粘膜分布对于某些癌症，例如，肺癌、卵巢癌、结直肠癌或鳞状细胞癌可能是有益的。用于本文提供的方法的二聚、五聚或六聚结合分子，是具有如本文定义的两个、五个或六个“结合单元”的结合分子，其可特异性结合至tnf超家族受体蛋白，例如，人dr5。在某些方面中，用于本文提供的方法的二聚、五聚或六聚结合分子分别包含两个、五个或六个二价结合单元，其中各结合单元包括两个iga或igm重链恒定区或其片段。在某些方面中，所述两个iga或igm重链恒定区是人重链恒定区。其中，用于本文提供的方法的结合分子是基于二聚iga的结合分子，所述结合分子还可包含j链，或其片段，或其变体，并且还可包含分泌型组分，或其片段，或其变体。其中，用于本文提供的方法的结合分子是基于五聚igm的结合分子，所述结合分子还可包含j链，或其片段，或其变体。用于本文提供的方法的结合分子的iga重链恒定区可包括cα1结构域、cα2结构域和/或cα3结构域中的一个或多个，限制条件是，所述恒定区能够在该结合分子中发挥所需功能，例如，与轻链恒定区相关联以促进结合结构域的形成，或与另一个结合单元相关联以形成二聚体。在某些方面中，个体结合单元中的两个iga重链恒定区或其片段各包含cα3结构域或其片段、尾片段(tp)或其片段，或cα3结构域和tp或其片段的任何组合。在某些方面中，个体结合单元中的两个iga重链恒定区或其片段还各自包含cα2结构域或其片段、cα1结构域或其片段，或cα1结构域或其片段和cα2结构域或其片段。用于本文提供的方法的结合分子的igm重链恒定区可包括cμ1结构域、cμ2结构域、cμ3结构域和/或cμ4结构域中的一个或多个，限制条件是，恒定区可在该结合分子中发挥所需功能，例如，与轻链恒定区相关联以促进结合结构域的形成，或与其它结合单元相关联以形成六聚体或五聚体。在某些方面中，个体结合单元中的两个igm重链恒定区或其片段各包含cμ3结构域或其片段、cμ4结构域或其片段、尾片段(tp)或其片段，或cμ3结构域cμ4结构域，和tp或其片段的任何组合。在某些方面中，个体结合单元中的两个igm重链恒定区或其片段还各自包含cμ2结构域或其片段、cμ1结构域或其片段，或cμ1结构域或其片段和cμ2结构域或其片段。尽管本领域普通技术人员基于本发明可设想多种用于本文提供的方法的不同的二聚、五聚和六聚结合分子，并因而包括在本发明中，但在某些方面中，提供用于本文提供的方法的结合分子，其中各结合单元包含两个iga或igm重链，其各包含位于iga或igm恒定区或其片段的氨基末端的vh，和两个免疫球蛋白轻链，其各包含位于免疫球蛋白轻链恒定区的氨基末端的vl。此外在某些方面中，用于本文提供的方法的结合分子的至少一个结合单元，或用于本文提供的方法的结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元，包含或含有如上所述的两个tnf超家族受体蛋白结合结构域。在某些方面中，用于本文提供的方法的所述结合分子的至少一个结合单元，或所述结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元中的两个tnf超家族受体蛋白结合结构域可以彼此不同，或它们可以相同。在某些方面中，用于本文提供的方法的结合分子的至少一个结合单元，或所述结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元中的所述两个iga或igm重链，是相同的。在某些方面中，用于本文提供的方法的所述结合分子的至少一个结合单元，或所述结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元中的所述两个轻链是相同的。在某些方面中，用于本文提供的方法的结合分子的至少一个结合单元，或所述结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个，或至少六个结合单元内的两个相同的轻链是κ轻链，例如，人κ轻链，或λ轻链，例如，人λ轻链。相较于其它结合分子，用于本文提供的方法的二聚、五聚或六聚tnf受体结合分子可具有有利的结构或功能性质。例如，相较于对应的结合分子(例如，来沙木单抗或其变体、类似物，或衍生物)，用于本文提供的方法的二聚、五聚或六聚tnf受体结合分子可在生物试验(体外或体内)中具有改善的活性。生物试验包括但不限于elisa或western印迹胱天蛋白酶试验和facs分析，其采用指示凋亡的细胞死亡的染色，例如膜联蛋白-v。药物组合物和给药方法制备和给予本文提供的二聚、五聚或六聚tnf受体结合分子至有此需要的对象的方法是本领域人员熟知且能根据本发明容易地确定的。tnf受体结合分子的给予途径可以是，例如，经口、胃肠外、通过吸入或局部给予。本文所用的术语胃肠外包括例如，静脉内、动脉内、腹膜内、肌肉内、皮下、直肠或阴道给药。尽管这些给予形式设想为合适的形式，但给予形式的其它示例将是注射用溶液，具体地是用于静脉内或动脉内注射或滴注的溶液。合适的药物组合物可包含缓冲剂(如乙酸盐、磷酸盐或柠檬酸盐缓冲剂)、表面活性剂(如聚山梨酯)，以及任选的稳定剂(如人白蛋白)等。如本文所述，本文提供的二聚、五聚或六聚tnf受体结合分子可以药学上有效的量给予供于表达tnf超家族受体蛋白的癌的体内治疗。在这方面，应理解，将配制本发明公开的结合分子以利于给药并提高活性物质的稳定性。药物组合物因此可包含药学上可接受的、非毒性无菌运载体，例如生理盐水、非毒性缓冲液、防腐剂等。本文提供的二聚、五聚或六聚tnf受体结合分子的药学有效的量表示足以实现有效结合至靶标并实现治疗益处的量。合适的制剂描述于《雷明顿药物科学》(remington'spharmaceuticalsciences)马克出版公司(mackpublishingco.)第16版.(1980)。本文提供的某些药物组合物可以可接受的剂型口服给予，包括例如，胶囊、片剂、水性悬液或溶液。也可通过鼻气溶胶或吸入来给予某些药物组合物。这类组合物可采用苯甲醇或其他合适的防腐剂，吸收促经济以增强生物可及性，和/或其他常规增溶剂或分散剂制备成盐水溶液。可与运载体材料组合以产生单一剂型的二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子的量将根据，例如，处理的对象和具体的给予模式而变化。可以单剂型、多剂型或在确立的时间段内的输注中给予组合物。也可调整给药方案，以提供最优所需响应(例如，治疗或预防性响应)。保持在本发明范围内，本文提供的二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子可以足够的量给予有治疗需求的对象以产生治疗作用。本文提供的二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子可以常规的剂型给予该对象，该常规的剂型通过根据已知技术，将本发明的抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物与常规的药学上可接受的运载体或稀释剂相组合来制备。药学上可接受的运载体或稀释剂的形式和性质可根据其将要组合的活性成分的量、给予途径和其它熟知变量来描述。"治疗有效剂量或量"或"有效量"意在表示，当给予时，就患有表达tnf超家族受体蛋白的癌的患者的治疗而言，获得积极治疗响应的二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子的量。本文公开的组合物的治疗有效剂量将根据许多不同的因素变化，包括给药方式、目标位点、患者的生理状态、患者是人还是动物、给予的其他药物和治疗是预防性还是治疗性。在某些方面中，对象或患者是人，但也可治疗非人哺乳动物，包括转基因哺乳动物。可使用本领域技术人员已知的常规方法对治疗剂量进行滴定以优化安全性和功效。待给予的二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子的量是本领域普通技术人员根据本发明而容易地确定的，无需过度实验。影响给予模式和二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子的相应量的因素影响包括但不限于，经历治疗个体的疾病严重性、病史、年龄、身高、体重、健康和身体状况。类似地，待给予的二聚、五聚或六聚tnf受体结合分子的量将取决于给予模式，以及对象将经历该试剂的单一剂量还是多重剂量。本发明还提供二聚、五聚或六聚tnf超家族受体蛋白结合分子在制备用于治疗、预防，或控制癌的药物中的应用，其中，所述癌表达tnf超家族受体蛋白。除非另有说明，本发明将采用细胞生物学、细胞培养、分子生物学、转基因生物学、微生物学、重组dna和免疫学的常规技术，它们均在本领域技术范围内。这些技术在文献中已有充分描述。参见例如，sambrook等编(1989)molecularcloningalaboratorymanual(《分子克隆：实验室手册》)(第2版；冷泉港实验室出版社(coldspringharborlaboratorypress))；sambrook等编(1992)molecularcloning:alaboratorymanual(《分子克隆：实验室手册》)，(纽约州的冷泉港实验室出版社(coldspringsharborlaboratory，ny))；d.n.glover编，(1985)dnacloning(《dna克隆》)，第i和ii卷；gait编(1984)oligonucleotidesynthesis(《寡核苷酸合成》)；mullis等，美国专利号4,683,195；hames和higgins编(1984)nucleicacidhybridization(《核酸杂交》)；hames和higgins编(1984)transcriptionandtranslation(《转录和翻译》)；freshney(1987)cultureofanimalcells(《动物细胞培养》)(arl公司(alanr.liss，inc.))；immobilizedcellsandenzymes(《固定的细胞和酶》)(irl出版社)(1986)；perbal(1984)apracticalguidetomolecularcloning(《分子克隆实践指南》)；论文，methodsinenzymology(《酶学方法》)(学术出版社公司(academicpress，inc.)，纽约州)；miller和calos编(1987)genetransfervectorsformammaliancells(《哺乳动物细胞的转基因载体》)(冷泉港实验室出版社(coldspringharborlaboratory))；wu等编，methodsinenzymology(《酶学方法》)，第154和155卷；mayer和walker编(1987)immunochemicalmethodsincellandmolecularbiology(《细胞和分子生物学中的免疫化学方法》)(学术出版社(academicpress)，伦敦)；weir和blackwell编(1986)handbookofexperimentalimmunology(《实验免疫学手册》)，第i-iv卷；manipulatingthemouseembryo(《小鼠胚胎操作》)，纽约州冷泉港的冷泉港实验室出版社(coldspringharborlaboratory，coldspringharbor，n.y.)，(1986)；和ausubel等(1989)currentprotocolsinmolecularbiology(《新编分子生物学实验指南》)(马里兰州巴尔的摩的约翰韦利父子公司(johnwiley&sons，baltimore，md.))。抗体工程的一般原理可参见borrebaeck编(1995)antibodyengineering(《抗体工程》)(第2版；牛津大学出版社(oxforduniv.press))。蛋白质工程的一般原理可参见rickwood等编(1995)proteinengineering，apracticalapproach(《蛋白质工程，实践方法》)，(英国牛津的牛津大学出版社的irl出版公司(irlpressatoxforduniv.press，oxford，eng.))。抗体和抗体-半抗原结合的一般原理可参见：nisonoff(1984)molecularimmunology(《分子免疫学》)(第2版；马萨诸塞州桑德兰的辛奥尔联合公司(sinauerassociates，sunderland，mass.))；和steward(1984)antibodies,theirstructureandfunction(《抗体的结构和功能》)(chapman和hall，纽约州纽约市)。此外，本领域已知且没有具体描述的免疫学标准方法可按照下述文献所述进行：currentprotocolsinimmunology(《新编免疫学实验指南》)，纽约州的约翰韦利父子公司(johnwiley&sons)；stites等编(1994)basicandclinicalimmunology(《基础和临床免疫学》)(第8版；appleton和lange，康涅狄格州的诺沃克(norwalk，conn.))和mishell和shiigi(编)(1980)selectedmethodsincellularimmunology(《细胞免疫学的选用方法》)(w.h.弗里曼公司(w.h.freemanandco)，纽约州)。列出免疫学通用原理的标准参考文献包括：currentprotocolsinimmunology(《新编免疫学实验指南》)，约翰韦利父子公司(johnwiley&sons)，纽约州；klein(1982)j.，immunology:thescienceofself-nonselfdiscrimination(《免疫学：自身-非自身区别的科学》)(约翰韦利父子公司，纽约州)；kennett等编(1980)monoclonalantibodies,hybridoma:anewdimensioninbiologicalanalyses(《单克隆抗体，杂交瘤：生物学分析的新领域》)(普莱努公司(plenumpress)，纽约州)；campbell(1984)"monoclonalantibodytechnology"inlaboratorytechniquesinbiochemistryandmolecularbiology"(《生化和分子生物学实验室技术》中的“单克隆抗体技术”)，burden等编(的埃尔斯威尔公司(elsevere)，阿姆斯特丹)；goldsby等编(2000)kubyimmunnology(《库比免疫学》)(第4版；h.弗里曼公司(h.freemand&co.))；roitt等(2001)immunology(《免疫学》)(第6版；伦敦：摩兹比公司(mosby))；abbas等(2005)cellularandmolecularimmunology(《细胞和分子免疫学》)(第5版；埃尔斯威尔健康科学分公司(elsevierhealthsciencesdivision))；kontermann和dubel(2001)antibodyengineering(《抗体工程》)(施普林格公司(springerverlag))；sambrook和russell(2001)molecularcloning:alaboratorymanual(《分子克隆：实验室手册》)(冷泉港出版社(coldspringharborpress))；lewin(2003)geneviii(《基因viii》)(普伦蒂斯霍尔出版社(prenticehall)2003)；harlow和lane(1988)antibodies:alaboratorymanual(《抗体：实验室手册》)(冷泉港出版社)；dieffenbach和dveksler(2003)pcrprimer(《pcr引物》)(冷泉港出版社)。将上文中引用的所有参考文献以及其中引用的所有参考文献通过引用全文纳入本文。通过说明的方式，而非限制性方式提供以下实施例。实施例实施例1：dr5表达概况dr5细胞表面表达通过荧光活化的细胞分选(facs)分析定量。简言之，facs染色缓冲液(bdpharmigen，目录号#554656)用于染色和清洗步骤。肿瘤细胞(1x105-5x105)用0.25μg的抗人dr5-pe(ebioscience，目录号#12-9908-42)或同种型-pe对照(ebioscience，目录号#12-4714-42)4℃染色15分钟，避光。细胞清洗两次，重悬于facs染色缓冲液，并通过流式细胞术采集结果。图1a显示抗人dr5抗体的峰迁移(下图)，与同种型对照(上图)不同。图1b显示dr5表达在细胞系之间不同，其中在这组细胞系中，293f细胞表达最多的dr5。实施例2：抗dr5mab特异性特异性elisa该试验的目的是证明抗dr5mab结合至dr5，但非dr4或诱饵受体dcr1和dcr2。可溶性dr5、dr4、dcr1或dcr2蛋白(r&dsystems，目录号分别为#631-t2-100/cf，347-dr-100/cf，630-tr-100/cf，633-tr-100)以100mmnahco3(ph9.5)中的2μg/ml被覆在elisa板上，4℃过夜。pbs中的2％bsa溶液用于封闭和抗体孵育步骤。板室温封闭1小时，然后用小鼠抗人dr5mab(acris，抗体目录号#am31206af-n)室温孵育1小时。抗dr5mab3倍连续稀释至浓度1-200ng/ml。用pbs加0.05％吐温20清洗3次之后，板用大鼠抗小鼠κ-hrp(southernbiotech，目录号#1180-05)室温孵育1小时，避光。用pbs加0.05％吐温20清洗3次之后，板用tmb基质(bdbiosciences，目录号#555214)室温孵育20分钟。反应用1mh2so4终止，并采用微滴定酶标仪测定450nm的吸光度。图2显示，小鼠抗人dr5mab结合至dr5，但非dr4、dcr1或dcr2。对于人抗dr5mabelisa，1:2000小鼠抗人λ-hrp(southernbiotech，目录号#9180-05)或1:6000小鼠抗人κ-hrp(southernbiotech，目录号#9230-05)用于检测。细胞结合该实施例用于证实抗dr5mab结合至细胞。facs染色缓冲液(bdpharmigen，目录号#554656)用于染色和清洗步骤。colo205细胞(2x105细胞，来自atcc编号#ccl-222)用10μg/ml的小鼠抗人dr5mab(acris，抗体目录号#am31206af-n)或同种型对照(invivogen，目录号#hcd20-mab9)4℃染色15分钟，避光。细胞清洗两次，然后以终稀释度1:200用山羊抗小鼠igg-apc(jacksonimmunoresearch，目录号#115-136-071)4℃染色15分钟，避光。细胞清洗两次，然后重悬于facs染色缓冲液，并通过流式细胞术采集结果。结果示于图3，下图显示对于抗dr5mab观察到的峰迁移。对于人抗dr5mab结合，山羊抗人iggfc-alexa647(southernbiotech，目录号#2014-31)或兔抗人igm-alexa647(abcam，目录号#ab150191)用于检测。实施例3：抗dr5mab功能活性和细胞毒性试验该实施例证明需要交联以实现dr5mab细胞毒性。colo205细胞(atcc目录号#ccl-222)以1x104细胞/孔接种于96孔板并允许连接过夜。第二天，细胞用连续稀释的小鼠抗人dr5mab(acris，抗体目录号#am31206af-n，r&dsystems，目录号#mab631，biolegend，目录号#307402，或acris，抗体目录号#am31205af-n)处理，并37℃孵育24小时。比色读出：收获前三个小时，cck-8细胞活力试剂(dojindock04-13)以总反应体积的10％添加，并且板在37℃孵育剩下的3小时。在酶标仪评价450nm的吸光度。结果示于图4(空心圆形)，显示在不存在交联剂时，没有或几乎没有细胞毒性。然后，试验如上所述进行，不同之处在于在用连续稀释的小鼠抗人dr5mab在室温预孵育细胞20分钟之后，以抗dr5mab的最高剂量的浓度的3倍添加山羊抗小鼠igg1fc(jacksonimmunoresearch，目录号#115-005-205)交联剂。结果示于图4(实心圆形)，显示采用交联剂的100％细胞毒性。对于人抗dr5mab诱导的细胞毒性，抗人iggfc(biolegend，目录号#409302)用作交联剂。或者，山羊抗人igg加igm(h+l)fab2(jacksonimmunoresearch，目录号#109-006-127)可用作交联剂。发光读出：收获时，细胞效价glo活力试剂(promegag7572)以与孔中的培养基相等的体积添加。细胞裂解10分钟并在酶标仪上读取发光。实施例4：凋亡试验在存在或不存在交联剂的情况下的抗dr5-诱导的凋亡采用如下方法检测。colo205细胞(1x105细胞，来自atcc，编号#ccl-222)用5μg/ml小鼠抗人dr5mab(acris，抗体目录号#am31206af-n或r&dsystems，目录号#mab631)或同种型对照(invivogen，目录号#hcd20-mab9)37℃处理至多4小时。细胞用冷pbs清洗两次，然后用供应的结合缓冲液(bdpharmigen，目录号#559763)中的膜联蛋白v-pe和7-aad(各1μl/样品)4℃染色15分钟，避光。膜联蛋白v和7-aad分别用以检测凋亡的(x轴)和死细胞(y轴)，采用流式细胞术。未处理的细胞获得的结果示于图5的最左侧图(未处理的)，而采用抗人dr5mab在不存在交联剂的情况下获得的结果示于图5中从左计起的第二张图(仅抗dr5igg)。图中观察到没有或几乎没有变化。然后，试验如上所述进行，不同之处在于在用连续稀释的小鼠抗人dr5mab在室温预孵育细胞20分钟之后，以比抗dr5mab的最高剂量增加3倍的浓度添加山羊抗小鼠igg1fc(jacksonimmunoresearch，目录号#115-005-205)交联剂。图5中从左计起第三张图显示采用仅交联剂的结果(无凋亡)。图5的最右侧图显示显著膜联蛋白v染色的细胞，指示在交联剂存在的情况下(抗dr5igg+交联剂)发生凋亡。对于人抗dr5mab诱导的凋亡，抗人iggfc(biolegend，目录号#409302)用作交联剂。或者，山羊抗人igg加igm(h+l)fab2(jacksonimmunoresearch，目录号#109-006-127)可用作交联剂。实施例5：胱天蛋白酶活化试验该实施例显示通过胱天蛋白酶活化证明的抗dr5诱导的凋亡。colo205细胞(atcc目录号#ccl-222)以1x104细胞/孔接种于96孔板并允许连接过夜。第二天，细胞用5μg/ml小鼠抗人dr5mab(acris，抗体目录号#am31206af-n或r&dsystems，目录号#mab631)37℃处理至多24小时。收获时，以与各孔中的总培养基相等的体积添加胱天蛋白酶glo3/7试剂(promega目录号#g8090)。反应室温振荡孵育30分钟，并在酶标仪上评价发光。在不存在交联的情况中没有或几乎没有观察到胱天蛋白酶活性(图6，交叉阴影短线)。然后，试验如上所述进行，不同之处在于在用连续稀释的小鼠抗人dr5mab在室温预孵育细胞20分钟之后，以比抗dr5mab的最高剂量高3倍的浓度添加山羊抗小鼠igg1fc(jacksonimmunoresearch，目录号#115-005-205)交联剂。结果以短实线示于图6。在存在交联的情况中，观察到显著胱天蛋白酶活性。对于人抗dr5mab诱导的胱天蛋白酶活化，抗人iggfc(biolegend，目录号#409302)用作交联剂。或者，山羊抗人igg加igm(h+l)fab2(jacksonimmunoresearch，目录号#109-006-127)可用作交联剂。实施例6：多聚抗dr5抗体具有更优的活性该实施例显示多聚抗dr5抗体的更优的体外活性。图7a，是非还原性sds-page的照片，其显示优势性的多聚的一种抗dr5mab(泳道1，r&dsystems，克隆71903)，泳道2对应于biolegend克隆djr2-4，泳道3对应于acris抗体克隆b-k29，且泳道4对应于acris抗体克隆b-d37。抗dr5mab功能活性和细胞毒性试验采用与实施例3类似的方法，显示，仅多聚抗dr5mab在不存在交联剂的情况中造成colo205细胞毒性。(参见，图7b；r&dsystems克隆71903，实心方形；biolegend克隆djr2-4，空心圆形，虚线；acris抗体克隆b-k29，实心菱形；acris抗体克隆b-d37，空心三角形，虚线)。凋亡试验采用与实施例4类似的方法，显示，在不存在交联剂的情况中，多聚抗dr5mab诱导colo205细胞随时间推移的凋亡，但单体抗dr5mab或同种型对照并非如此。(参见，图7c；所示的1小时、2小时和4小时时间点)。胱天蛋白酶活化试验采用方法类似于实施例5中提供的那些，显示，在不存在交联剂的情况中，多聚抗dr5mab，但非单体抗dr5mab，诱导colo205细胞中的胱天蛋白酶活化。(参见，图7d)。实施例7：igm抗dr5抗体的构建dna构建体的产生根据seqidno:1和seqidno:2(抗dr5mab#1)的vh和vl序列、根据seqidno:5和seqidno:6(抗dr5mab#2)的vh和vl序列、根据seqidno:84和seqidno:85(抗dr5mab#3)的vh和vl序列，和根据seqidno:88和seqidno:89(抗dr5mab#4)的vh和vl序列通过标准克隆方法插入aragenbioscience公司和lakepharma公司的专有igg和igm载体。转染哺乳动物细胞用等摩尔比的不同的表达载体通过标准操作方法共转染。人抗dr5igg的纯化人抗dr5igg采用mabselectsure亲和性基质(gelifesciences，目录号#17-5438-01)按照生产商推荐纯化。人抗dr5igm的纯化。具有或不具有j链的人抗dr5igm采用captureselectigm亲和性基质(bac，thermofisher，目录号#2890.05)按照生产商推荐纯化。实施例8：igm抗dr5mab#2对于dr5具有特异性通过如实施例2描述的elisa，测试了抗dr5mab#2的igg形式和五聚igm-j链形式的结合特异性。如图8a(igg)和图8b(igm)中所示，这些抗体结合至人dr5但非人dr4或诱饵受体dcr1或dcr2中的任一种。通过如实施例2所描述的方法测试了抗dr5mab#1的igg和igm形式与靶标细胞colo205的结合。结果示于图9。实施例9：igm抗dr5mab的细胞毒性高于对应的igg形式采用实施例3中描述的生物发光试验，测试了抗dr5mab#1、#2、#3和#4的igg形式和五聚igm-j链形式对于colo205细胞的细胞毒性。如图10a-d中所示，抗dr5igm的细胞毒性高于igg对应物。在图10e中，在采用和不采用交联剂的情况下，将抗dr5mab#1的igm形式与对应的igg形式做比较。甚至采用交联剂时，igm形式更具细胞毒性。肝毒性试验此外，dr5mabigm超激动剂对于colo205肿瘤细胞的细胞毒性高于对于原代人肝细胞的细胞毒性。colo205细胞毒性试验采用实施例3中描述的生物发光试验进行。约3.5x104原代人肝细胞(bioreclamation，目录号#x008001-p)接种于胶原被覆的96孔板并允许连接过夜。第二天，colo205细胞和肝细胞用连续稀释的igm抗dr5mab#1-#4处理，并37℃孵育24小时。收获时，细胞效价glo活力试剂(promegag7572)以与孔中的培养基相等的体积添加。细胞裂解10分钟并在酶标仪上读取发光。如图11a-d中所示，四种igm抗dr5mab对于colo205肿瘤细胞(实心圆形)的细胞毒性一致地高于对于原代人肝细胞(空心圆形)的细胞毒性。序列表<110>b·t-y·王(wang,beatricetien-yi)m·a·施瓦泽(schwarzer,maxallen)b·a·基特(keyt,brucealan)<120>肿瘤坏死因子(tnf)超家族受体结合分子及其应用<130>57912-149854<140><141><150>62/105,323<151>2015-01-20<160>89<170>patentinversion3.5<210>1<211>121<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>1gluvalglnleuvalglnserglyglyglyvalgluargproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrpheaspasptyr202530glymetsertrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045serglyileasntrpasnglyglyserthrglytyralaaspserval505560lysglyargvalthrileserargaspasnalalysasnserleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alalysileleuglyalaglyargglytrptyrpheaspleutrpgly100105110lysglythrthrvalthrvalserser115120<210>2<211>108<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>2sersergluleuthrglnaspproalavalservalalaleuglygln151015thrvalargilethrcysglnglyaspserleuargsertyrtyrala202530sertrptyrglnglnlysproglyglnalaprovalleuvaliletyr354045glylysasnasnargproserglyileproaspargpheserglyser505560serserglyasnthralaserleuthrilethrglyalaglnalaglu65707580aspglualaasptyrtyrcysasnserargaspserserglyasnhis859095valvalpheglyglyglythrlysleuthrvalleu100105<210>3<211>121<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>3gluvalglnleuvalglnserglyglyglyvalgluargproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrpheaspasptyr202530alametsertrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045serglyileasntrpglnglyglyserthrglytyralaaspserval505560lysglyargvalthrileserargaspasnalalysasnserleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alalysileleuglyalaglyargglytrptyrpheasptyrtrpgly100105110lysglythrthrvalthrvalserser115120<210>4<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>4sergluleuthrglnaspproalavalservalalaleuglyglnthr151015valargilethrcysserglyaspserleuargsertyrtyralaser202530trptyrglnglnlysproglyglnalaprovalleuvaliletyrgly354045alaasnasnargproserglyileproaspargpheserglyserser505560serglyasnthralaserleuthrilethrglyalaglnalagluasp65707580glualaasptyrtyrcysasnseralaaspserserglyasnhisval859095valpheglyglyglythrlysleuthrvalleu100105<210>5<211>122<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>5glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysprosergln151015thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersergly202530asptyrphetrpsertrpileargglnleuproglylysglyleuglu354045cysileglyhisilehisasnserglythrthrtyrtyrasnproser505560leulysserargvalthrileservalaspthrserlyslysglnphe65707580serleuargleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr859095cysalaargaspargglyglyasptyrtyrtyrglymetaspvaltrp100105110glyglnglythrthrvalthrvalserser115120<210>6<211>108<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>6gluilevalleuthrglnserproglythrleuserleuserprogly151015gluargalathrleusercysargalaserglnglyileserargser202530tyrleualatrptyrglnglnlysproglyglnalaproserleuleu354045iletyrglyalaserserargalathrglyileproaspargpheser505560glyserglyserglythraspphethrleuthrileserargleuglu65707580progluaspphealavaltyrtyrcysglnglnpheglyserserpro859095trpthrpheglyglnglythrlysvalgluilelys100105<210>7<211>449<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>7gluvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr202530valmetsertrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045alathrileserserglyglysertyrthrtyrtyrproaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnalalysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargargglyaspsermetilethrthrasptyrtrpglyglngly100105110thrleuvalthrvalserseralaserthrlysglyproservalphe115120125proleualaproserserlysserthrserglyglythralaalaleu130135140glycysleuvallysasptyrpheprogluprovalthrvalsertrp145150155160asnserglyalaleuthrserglyvalhisthrpheproalavalleu165170175glnserserglyleutyrserleuserservalvalthrvalproser180185190serserleuglythrglnthrtyrilecysasnvalasnhislyspro195200205serasnthrlysvalasplysargvalgluprolyssercysasplys210215220thrhisthrcysproprocysproalaprogluleuleuglyglypro225230235240servalpheleupheproprolysprolysaspthrleumetileser245250255argthrprogluvalthrcysvalvalvalaspvalserhisgluasp260265270progluvallyspheasntrptyrvalaspglyvalgluvalhisasn275280285alalysthrlysproargglugluglntyrasnserthrtyrargval290295300valservalleuthrvalleuhisglnasptrpleuasnglylysglu305310315320tyrlyscyslysvalserasnlysalaleuproalaproileglulys325330335thrileserlysalalysglyglnproarggluproglnvaltyrthr340345350leuproproserarggluglumetthrlysasnglnvalserleuthr355360365cysleuvallysglyphetyrproseraspilealavalglutrpglu370375380serasnglyglnprogluasnasntyrlysthrthrproprovalleu385390395400aspseraspglyserphepheleutyrserlysleuthrvalasplys405410415serargtrpglnglnglyasnvalphesercysservalmethisglu420425430alaleuhisasnhistyrthrglnlysserleuserleuserprogly435440445lys<210>8<211>213<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>8aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcyslysalaserglnaspvalglythrala202530valalatrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile354045tyrtrpalaserthrarghisthrglyvalproserargphesergly505560serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphealathrtyrtyrcysglnglntyrsersertyrargthr859095pheglyglnglythrlysvalgluilelysargthrvalalaalapro100105110servalpheilepheproproseraspgluglnleulysserglythr115120125alaservalvalcysleuleuasnasnphetyrproargglualalys130135140valglntrplysvalaspasnalaleuglnserglyasnserglnglu145150155160servalthrgluglnaspserlysaspserthrtyrserleuserser165170175thrleuthrleuserlysalaasptyrglulyshislysvaltyrala180185190cysgluvalthrhisglnglyleuserserprovalthrlysserphe195200205asnargglyglucys210<210>9<211>112<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>9glnileglnleuvalglnserglyprogluleulyslysproglyglu151015thrvallysilesercyslysalaserglytyrthrphethraspphe202530sermetasntrpvallysglnalaproglylysglyleulystrpmet354045glytrpileasnthrgluthrglygluprothrtyralaaspaspphe505560lysglyargphealaleusermetgluthrseralaserthralatyr65707580leuglnileasnasnleulysasngluaspthralathrtyrphecys859095valargileasptyrtrpglyglnglythrthrleuthrvalserser100105110<210>10<211>113<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>10aspvalvalmetthrglnthrproleuserleuprovalserleugly151015aspglnalaserilesercysargserserglnserleuvalhisser202530asnglyasnthrtyrleuhistrptyrleuglnlysproglyglnser354045prolysleuleuiletyrlysvalserasnargpheserglyvalpro505560aspargpheserglyserglyserglythraspphethrleulysile65707580serargvalglualagluaspleuglyvaltyrphecyspheglnser859095thrhisvalprohisthrpheglyglyglythrlysleugluilelys100105110arg<210>11<211>145<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>11metasptrpthrtrpargileleupheleuvalalaalaalathrser151015alahisserglnvalglnleuvalglnserglyalaglumetlyslys202530proglyalaservallysvalsercyslysthrserglytyrthrphe354045thrasntyrlysileasntrpvalargglnalaproglyglnglyleu505560glutrpmetglytrpmetasnproaspthraspserthrglytyrpro65707580glnlyspheglnglyargvalthrmetthrargasnthrserileser859095thralatyrmetgluleuserserleuargsergluaspthralaval100105110tyrtyrcysalaargsertyrglyserglysertyrtyrargasptyr115120125tyrtyrglymetaspvaltrpglyglnglythrthrvalthrvalser130135140ser145<210>12<211>128<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>12metglualaproalaglnleuleupheleuleuleuleutrpleupro151015aspthrthrglygluilevalleuthrglnserproalathrleuser202530leuserproglygluargalathrleusercysargalaserglnser354045valsersertyrleualatrptyrglnglnlysproglyglnalapro505560argleuleuiletyraspalaserasnargalathrglyileproala65707580argpheserglyserglyserglythraspphethrleuthrileser859095serleugluprogluaspphealavaltyrtyrcysglnglnargser100105110asntrpproleuthrpheglyglyglythrlysvalgluilelysarg115120125<210>13<211>471<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>13metlyshisleutrpphepheleuleuleuvalalaalaproargtrp151015valleusergluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallys202530proglyalaservallysilesercyslysalaserglytyrserphe354045ileglytyrphemetasntrpmetlysglnserhisglylysserleu505560glutrpileglyargpheasnprotyrasnglyaspthrphetyrasn65707580glnlysphelysglylysalathrleuthrvalasplysserserthr859095thralahismetgluleuleuserleuthrsergluaspseralaval100105110tyrphecysglyargseralatyrtyrpheaspserglyglytyrphe115120125asptyrtrpglyglnglythrthrleuthrvalserseralaserthr130135140lysglyproservalpheproleualaproserserlysserthrser145150155160glyglythralaalaleuglycysleuvallysasptyrpheproglu165170175provalthrvalsertrpasnserglyalaleuthrserglyvalhis180185190thrpheproalavalleuglnserserglyleutyrserleuserser195200205valvalthrvalproserserserleuglythrglnthrtyrilecys210215220asnvalasnhislysproserasnthrlysvalasplysargvalglu225230235240prolyssercysasplysthrhisthrcysproprocysproalapro245250255gluleuleuglyglyproservalpheleupheproprolysprolys260265270aspthrleumetileserargthrprogluvalthrcysvalvalval275280285aspvalserhisgluaspprogluvallyspheasntrptyrvalasp290295300glyvalgluvalhisasnalalysthrlysproargglugluglntyr305310315320asnserthrtyrargvalvalservalleuthrvalleuhisglnasp325330335trpleuasnglylysglutyrlyscyslysvalserasnlysalaleu340345350proalaproileglulysthrileserlysalalysglyglnproarg355360365gluproglnvaltyrthrleuproproserarggluglumetthrlys370375380asnglnvalserleuthrcysleuvallysglyphetyrproserasp385390395400ilealavalglutrpgluserasnglyglnprogluasnasntyrlys405410415thrthrproprovalleuaspseraspglyserphepheleutyrser420425430lysleuthrvalasplysserargtrpglnglnglyasnvalpheser435440445cysservalmethisglualaleuhisasnhistyrthrglnlysser450455460leuserleuserproglylys465470<210>14<211>239<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>14metvalleuglnthrglnvalpheileserleuleuleutrpileser151015glyalatyrglyaspvalvalmetthrglnthrproleuserleupro202530valserleuglyaspglnalaserilesercysargserserglnser354045leuvalhisserasnglyasnthrtyrleuhistrptyrleuglnlys505560proglyglnserprolysleuleuiletyrlysvalserasnargphe65707580serglyvalproaspargpheserglyserglyserglythraspphe859095thrleulysileserargvalglualagluaspleuglyiletyrphe100105110cysserglnserthrhisvalprotrpthrpheglyglyglythrlys115120125leugluilelysargthrvalalaalaproservalpheilephepro130135140proseraspgluglnleulysserglythralaservalvalcysleu145150155160leuasnasnphetyrproargglualalysvalglntrplysvalasp165170175asnalaleuglnserglyasnserglngluservalthrgluglnasp180185190serlysaspserthrtyrserleuserserthrleuthrleuserlys195200205alaasptyrglulyshislysvaltyralacysgluvalthrhisgln210215220glyleuserserprovalthrlysserpheasnargglyglucys225230235<210>15<211>112<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>15glnvalglnleuvalglnserglysergluleulyslysproglyala151015servallysvalsercyslysalaserglytyrthrphethraspphe202530sermetasntrpvalargglnalaproglyglnglyleuglutrpmet354045glytrpileasnthrgluthrglygluprothrtyralaaspaspphe505560lysglyargphevalpheserleuaspthrservalserthralatyr65707580leuglnileserserleulysalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargileasptyrtrpglyglnglythrthrvalthrvalserser100105110<210>16<211>113<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>16aspilevalmetthrglnserproleuserleuprovalthrprogly151015gluproalaserilesercysargserserglnserleuvalhisser202530asnglyasnthrtyrleuhistrptyrleuglnlysproglyglnser354045proglnleuleuiletyrlysvalserasnargpheserglyvalpro505560aspargpheserglyserglyserglythraspphethrleulysile65707580serargvalglualagluaspvalglyvaltyrtyrcyspheglnser859095thrhisvalprohisthrpheglyglnglythrlysleugluilelys100105110arg<210>17<211>470<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<220><221>mod_res<222>(3)..(3)<223>任何氨基酸<400>17metglyxaaleuglyleusertrpvalpheleuvalvalileleuglu151015glyvalglncysgluvalhisleuvalgluserglyglyglyleuval202530argproglyglyserleulysleusercysalaalaserglypheala354045phesersertyraspmetsertrpvalargglnthrproglulysarg505560leuglutrpvalalatyrileseraspglyglyglyilethrtyrtyr65707580proaspthrmetlysglyargphethrileserargaspasnalalys859095asnthrleuserleuglnmetserserleulyssergluaspthrala100105110mettyrtyrcysalaarghisilethrmetvalvalglypropheala115120125tyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalseralaalaserthrlys130135140glyproservalpheproleualaprocysserargserthrsergly145150155160glythralaalaleuglycysleuvallysasptyrpheproglupro165170175valthrvalsertrpasnserglyalaleuthrserglyvalhisthr180185190pheproalavalleuglnserserglyleutyrserleuserserval195200205valthrvalproserserserleuglythrglnthrtyrilecysasn210215220valasnhislysproserasnthrlysvalasplysargvalglupro225230235240lyssercysasplysthrhisthrcysproprocysproalaproglu245250255leuleuglyglyproservalpheleupheproprolysprolysasp260265270thrleumetileserargthrprogluvalthrcysvalvalvalasp275280285valserhisgluaspprogluvallyspheasntrptyrvalaspgly290295300valgluvalhisasnalalysthrlysproargglugluglntyrasn305310315320serthrtyrargvalvalservalleuthrvalleuhisglnasptrp325330335leuasnglylysglutyrlyscyslysvalserasnlysglyleupro340345350alaproileglulysthrileserlysalalysglyglnproargglu355360365proglnvaltyrthrleuproproserarggluglumetthrlysasn370375380glnvalserleuthrcysleuvallysglyphetyrproseraspile385390395400alavalglutrpgluserasnglyglnprogluasnasntyrlysthr405410415thrproprovalleuaspseraspglyserphepheleutyrserlys420425430leuthrmetasplysserargtrpglnglnglyasnvalphesercys435440445servalmethisglualaleuhisasnhistyrthrglnlysserleu450455460serleuserproglylys465470<210>18<211>234<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>18metargleuproalaglnleuleuglyleuleumetleutrpvalser151015glyserserglyaspileglnmetthrglnserserserserpheser202530valserleuglyaspargvalthrilethrcyslysalasergluasp354045iletyrasnargleualatrptyrglnglnlysproglyasnalapro505560argleuleuileserglyalathrserleugluthrglyvalproser65707580argpheserglyserglyserglylysasptyrthrleuserilethr859095serleuglnthrgluaspvalalathrtyrtyrcysglnglntyrtrp100105110serthrproleuthrpheglyalaglythrlysleugluleulysarg115120125alavalalaalaproservalaspilepheproproseraspglugln130135140leulysserglythralaservalvalcysleuleuasnasnphetyr145150155160proargglualalysvalglntrplysvalaspasnalaleuglnser165170175glyasnserglngluservalthrgluglnaspserlysaspserthr180185190tyrserleuserserthrleuthrleuserlysalaasptyrglulys195200205hislysvaltyralacysgluvalthrhisglnglyleuserserpro210215220valthrlysserpheasnargglyglucys225230<210>19<211>466<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>19metgluleuglyleusertrpvalpheleuvalvalileleuglugly151015valglncysgluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallys202530proglyalaservalargmetsercyslysalaserglytyrthrphe354045thrsertyrpheilehistrpvallysglnargproglyglnglyleu505560glutrpileglytrpiletyrproglyasnvalasnthrlystyrser65707580glulysphelysglylysalathrleuthralaasplysserserser859095thralatyrmetglnpheserserleuthrsergluaspseralaval100105110tyrphecysalaargglyglualaglytyrpheasptyrtrpglygln115120125glythrthrleuthrvalserseralaserthrlysglyproserval130135140pheproleualaprocysserargserthrserglyglythralaala145150155160leuglycysleuvallysasptyrpheprogluprovalthrvalser165170175trpasnserglyalaleuthrserglyvalhisthrpheproalaval180185190leuglnserserglyleutyrserleuserservalvalthrvalpro195200205serserserleuglythrglnthrtyrilecysasnvalasnhislys210215220proserasnthrlysvalasplysargvalgluprolyssercysasp225230235240lysthrhisthrcysproprocysproalaprogluleuleuglygly245250255proservalpheleupheproprolysprolysaspthrleumetile260265270serargthrprogluvalthrcysvalvalvalaspvalserhisglu275280285aspprogluvallyspheasntrptyrvalaspglyvalgluvalhis290295300asnalalysthrlysproargglugluglntyrasnserthrtyrarg305310315320valvalservalleuthrvalleuhisglnasptrpleuasnglylys325330335glutyrlyscyslysvalserasnlysglyleuproalaproileglu340345350lysthrileserlysalalysglyglnproarggluproglnvaltyr355360365thrleuproproserarggluglumetthrlysasnglnvalserleu370375380thrcysleuvallysglyphetyrproseraspilealavalglutrp385390395400gluserasnglyglnprogluasnasntyrlysthrthrproproval405410415leuaspseraspglyserphepheleutyrserlysleuthrmetasp420425430lysserargtrpglnglnglyasnvalphesercysservalmethis435440445glualaleuhisasnhistyrthrglnlysserleuserleuserpro450455460glylys465<210>20<211>234<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>20metargleuproalaglnleuleuglyleuleumetleutrpvalser151015glyserserglyaspilevalmetthrglnserhislysphemetser202530thrservalglyaspargvalserilethrcyslysalaserglnasp354045valserthralavalalatrptyrglnglnlysproglyglnserpro505560argleuleuiletyrtrpalaserthrarghisthrglyvalproasp65707580argphethrglyserglyserglythrasptyrthrleuthrileser859095servalglnalagluaspglnalaleutyrtyrcysglnglnhistyr100105110argthrprotrpthrpheglyglyglythrlysleugluilelysarg115120125alavalalaalaproservalaspilepheproproseraspglugln130135140leulysserglythralaservalvalcysleuleuasnasnphetyr145150155160proargglualalysvalglntrplysvalaspasnalaleuglnser165170175glyasnserglngluservalthrgluglnaspserlysaspserthr180185190tyrserleuserserthrleuthrleuserlysalaasptyrglulys195200205hislysvaltyralacysgluvalthrhisglnglyleuserserpro210215220valthrlysserpheasnargglyglucys225230<210>21<211>121<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>21glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyala151015servallysvalsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr202530aspileasntrpvalargglnalathrglyglnglyleuglutrpmet354045glytrpmetasnproasnseraspasnthrglytyralaglnlysphe505560glnglyargvalthrmetthrargasnthrserileserthralatyr65707580metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargtrpasnhistyrglyserglyserhispheasptyrtrpgly100105110glnglythrleuvalthrvalserser115120<210>22<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>22aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargalaserglnserileseriletyr202530leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile354045tyralaalaserserleuglnserglyvalproleuargphesergly505560serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspilealathrtyrtyrcysglnglnsertyrlysthrproleu859095thrpheglyglyglythrlysvalgluilelys100105<210>23<211>120<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>23glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysprosergln151015thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersergly202530glyhistyrtrpsertrpileargglnhisproglylysglyleuglu354045trpileglytyriletyrtyrserglyserthrtyrtyrasnproser505560leulysserargvalthrileservalaspthrserlysasnglnphe65707580serleulysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr859095cysalaargaspaspserserglytrpglypheasptyrtrpglygln100105110glyileleuvalthrvalserser115120<210>24<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>24aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargalaserglnglyleuargasnasp202530leuglytrppheglnglnlysproglylysvalthrlysargleuile354045tyralaalaserserleuglnargglyvalproserargphesergly505560serglyserglythrgluphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphealathrtyrtyrcysleuglnhistyrserpheprotrp859095thrpheglyglnglythrlysvalgluilelys100105<210>25<211>120<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>25glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysprosergln151015thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersergly202530glyhistyrtrpsertrpileargglnhisproglylysglyleuglu354045trpileglytyriletyrtyrserglyseralatyrtyrasnproser505560leulysserargvalthrileservalaspthrserlysasnglnphe65707580serleulysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr859095cysalaargaspaspserserglytrpglypheasptyrtrpglygln100105110glyileleuvalthrvalserser115120<210>26<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>26aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargalaserglnglyleuargasnasp202530leuglytrppheglnglnlysproglylysalaprolysargleuile354045tyralaalaserserleuglnargglyvalproserargphesergly505560serglyserglythrgluphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphethrthrtyrphecysleuglnhisasnserpheprotrp859095thrpheglyglnglythrlysvalgluilelys100105<210>27<211>120<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>27glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysprosergln151015thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersergly202530glyhistyrtrpsertrpileargglnhisproglylysglyleuglu354045trpileglytyriletyrtyrserglyseralatyrtyrasnproser505560leulysserargvalthrileservalaspthrserlysasnglnphe65707580serleulysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr859095cysalaargaspaspserserglytrpglypheasptyrtrpglygln100105110glyileleuvalthrvalserser115120<210>28<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>28aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargalaserglnglyleuargasnasp202530leuglytrppheglnglnlysproglylysalaprolysargleuile354045tyralaalaserserleuglnargglyvalproserargphesergly505560serglyserglythrgluphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphethrthrtyrphecysleuglnhisasnserpheprotrp859095thrpheglyglnglythrlysvalgluilelys100105<210>29<211>121<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>29glnvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvallysproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrpheserasptyr202530tyrmetasntrpileargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045serhisileserserserglyserileleuasptyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnalalysasnserleutyr65707580leuglnmetasnserleuargvalgluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargaspglyalaalaalaglythraspalapheaspleutrpgly100105110glnglythrmetvalthrvalserser115120<210>30<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>30aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargserserglnserileserasntyr202530ileasntrptyrglnglnargproglylysalaproasnleuleuile354045hisaspvalserserpheglnseralavalproserargpheserarg505560serglyserglythrvalphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphealathrtyrphecysglnglnthrtyrilethrprophe859095thrpheglyproglythrlysvalaspilelys100105<210>31<211>122<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>31glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesertyrtyr202530glyilehistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045alavaliletrptyraspglyserasnlystyrtyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargglyargtyrsersersersertrptrptyrpheaspleutrp100105110glyargglythrleuvalthrvalserser115120<210>32<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>32aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargalaserglnglyileserasntyr202530leualatrptyrglnglnlysproglylysvalprolysleuleuile354045tyralaalaserthrleuglnserglyvalproserargphesergly505560serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspvalalathrtyrtyrcysglnlystyrasnseralaproleu859095thrpheglyglyglythrlysvalgluilelys100105<210>33<211>122<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>33glnvalglnalagluglnserglyproglyleuvallysproserglu151015thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserileserasntyr202530tyrtrpsertrpileargglnproproglylysglyleuglutrpile354045glytyriletyrtyrserglyserthrlystyrasnproserleulys505560serargvalthrileservalaspthrserlysasnglnpheserleu65707580lysleuthrservalthrthralaaspthralavaltyrtyrcysala859095argaspserproargglypheserglytyrglualapheaspsertrp100105110glyglnglythrleuvalthrvalserser115120<210>34<211>113<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>34aspilevalmetthrglnserproaspserleualavalserleugly151015gluargalathrileasncyslysserserglnservalleutyrarg202530serasnasnlysiletyrleualatrptyrglnglnlysproglygln354045proprolysleuleuiletyrtrpalaserthrarggluserglyval505560proaspargpheserglyserglyserglythraspphethrleuthr65707580ileserserleuleualagluaspvalalavaltyrtyrcysglngln859095tyrtyrserthrprophethrpheglyproglythrlysvalaspile100105110lys<210>35<211>120<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>35glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysprosergln151015thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserileserserasp202530asntyrtyrtrpsertrpileargglnhisproglylysglyleuglu354045trpileglytyriletyrtyrserglyserthrtyrtyrasnproser505560leulysserargvalthrileservalaspthrserlysasnglnphe65707580serleulysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr859095cysalaargglyvalasntrpasnpheleupheaspiletrpglygln100105110glythrmetvalthrvalserser115120<210>36<211>112<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>36aspilevalmetthrglnserproleuserleuprovalthrprogly151015gluproalaserilesercysargserserglnserleuleuargarg202530asnglytyrasntyrleuasptrptyrleuglnlysproglyglnser354045proglnleuleuiletyrleuglyserasnargalaserglyvalpro505560aspargpheserglyserglyserglythraspphethrleulysile65707580serargvalglualagluaspvalglyvaltyrtyrcysmetglnala859095leuglnthrproleuthrpheglyglyglythrgluvalgluilelys100105110<210>37<211>116<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>37glnvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvallysproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrpheserasptyr202530tyrmetsertrpileargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045sertyrileserargserglyserthriletyrtyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnalalysasnserleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargserleuglyglymetaspvaltrpglyglnglythrthrval100105110thrvalserser115<210>38<211>113<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>38aspilevalmetthrglnpheproaspserleualavalserleugly151015gluargalathrileasncyslysserserglnservalleuhisser202530serasnasnlysasntyrleuthrtrptyrglnleulysproglygln354045proprolysleuleuiletyrtrpalaserthrarggluserglyval505560proaspargpheserglyserglyserglythraspphethrleuthr65707580ileserserleuglnalagluaspvalalavaltyrtyrcyshisgln859095tyrtyrserthrproserserpheglyglnglythrlysleugluile100105110lys<210>39<211>129<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>39glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrpheasnasntyr202530glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045alavaliletrptyraspglyserasnlystyrtyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargaspargthrvaltyrserasnserserprophetyrtyrtyr100105110tyrtyrglymetaspvaltrpglyglnglythrthrvalthrvalser115120125ser<210>40<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>40aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargthrserglnserileserthrtyr202530leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile354045seralathrserserleuglnserglyvalproserargphesergly505560serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphealathrtyrtyrcysglnglnsertyrserthrproleu859095thrpheglyglyglythrlysvalgluilelys100105<210>41<211>129<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>41glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrpheserthrtyr202530glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045alavaliletrptyraspglyserasnlystyrtyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargaspargthrvaltyrserserserserprophetyrtyrtyr100105110tyrtyrglymetaspvaltrpglyglnglythrthrvalthrvalser115120125ser<210>42<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>42aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargalaserglnserilesersertyr202530leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile354045seralathrserserpheglnserglyvalproserargphesergly505560serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphealaalatyrtyrcysglnglnsertyrserthrproleu859095thrpheglyglyglythrlysvalgluilelys100105<210>43<211>119<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>43glnvalglnleuglnglntrpglyalaargleuleulysproserglu151015thrleuserleuthrcysalavaltyrglyglyserpheserglytyr202530tyrtrpsertrpileargglnproproglylysglyleuglutrpile354045glygluileasnhisserglyserthrasntyrasnproserleulys505560serargvalthrileservalaspthrserlysasnglnpheserleu65707580lysleuargservalthralaalaaspthralavaltyrtyrcysala859095argglyglyserserglytyrtrptyrpheaspleutrpglyarggly100105110thrleuvalthrvalserser115<210>44<211>113<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>44aspilevalmetthrglnserproaspserleualavalserleugly151015gluargalathrileasncyslysserserglnservalleuhisser202530serasnasnlysasntyrleuvaltrptyrglnglnlysproglygln354045proprolysleuleuiletyrtrpalaserthrarggluserglyval505560proaspargpheserglyserglyserglythraspphethrleuthr65707580ileserserleuglnalagluaspvalalavaltyrtyrcysglngln859095tyrtyrserthrproleuthrpheglyglyglythrlysvalgluile100105110lys<210>45<211>121<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>45gluvalglnvalvalgluserglyglyglyleuvallysproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr202530sermetasntrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045serserilesersersersersertyriletyrtyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnalalysasnserleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargglyglysersertrptyrglyasptrppheaspprotrpgly100105110glnglythrleuvalthrvalserser115120<210>46<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>46aspileglnmetthrglnserproserservalseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargalaserglnglyilesersertrp202530leuvaltrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile354045tyralaalaserserleuglnserglyvalproserargphesergly505560serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphealathrtyrtyrcysglnglnalaasnserpheprophe859095thrpheglyglyglythrlysvalgluilelys100105<210>47<211>126<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>47glnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyargserleu151015argleusercysalaalaserglyphethrphesersertyrglymet202530histrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpvalalaval354045iletrptyraspglyargasnlystyrtyralaaspservallysgly505560argphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyrleugln65707580metasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcysalaarg859095gluvalglytyrcysthrasnglyvalcyssertyrtyrtyrtyrgly100105110metaspvaltrpglyglnglythrthrvalthrvalserser115120125<210>48<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>48aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargalaserglnglyileserasntyr202530leualatrppheglnglnlysproglylysalaprolysserleuile354045tyralaalaserserleuglnserglyvalproserlysphesergly505560serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphealathrtyrtyrcysglnglntyrasnsertyrproleu859095thrpheglyglyglythrlysvalgluilelys100105<210>49<211>122<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>49glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysprosergln151015thrleuserleuthrcysservalserglyglyserilesersergly202530glytyrtyrtrpsertrpileargglnhisproglylysglyleuglu354045trpileglytyriletyrtyrserglyserthrtyrcysasnproser505560leulysserargvalthrileservalaspthrserlysasnglnphe65707580serleulysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr859095cysalaargaspasnglyserglysertyrasptrppheaspprotrp100105110glyglnglyileleuvalthrvalserser115120<210>50<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>50aspileglnmetthrglnserproserservalseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargalaserglnglyilesersertrp202530leualatrptyrglnglnlysproglylysalaprolyspheleuile354045phevalalaserserpheglnserglyvalproserargphesergly505560serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphealathrtyrtyrcysglnglnalaasnserpheproarg859095thrpheglyglnglythrlysvalgluilelys100105<210>51<211>122<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>51glnvalglnmetglngluserglyproglyleuvallysprosergln151015thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersergly202530asptyrtyrtrpsertrpileargglnhisproglylysasnleuglu354045trpileglytyriletyrtyrserglyserthrtyrtyrasnproser505560leulysserargvalthrileservalaspthrserlysasnglnphe65707580serleulysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr859095cysalaargaspasnglyserglysertyrasptrppheaspprotrp100105110glyglnglythrleuvalthrvalserser115120<210>52<211>107<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>52aspileglnmetthrglnserproserservalseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysargalaserglnglyilesersertrp202530leualatrptyrglnglnlysproglylysalaprolyspheleuile354045phevalalaserserleuglnserglyvalproserargphesergly505560serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphealathrtyrtyrcysglnglnalaasnserpheproarg859095thrpheglyglnglythrlysvalgluilelys100105<210>53<211>118<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>53lysvalglnleuglnglnserglyalagluleuvallysproglyala151015servallysleusercyslysalaserglytyrthrphethrasptyr202530thrilehistrpvallysglnargserglyglnglyleuglutrpile354045glytrpphetyrproglyglyglytyrilelystyrasnglulysphe505560lysaspargalathrleuthralaasplysserserasnthrvaltyr65707580metgluleuserargleuthrsergluglyseralavaltyrphecys859095alaarghisglugluglyiletyrpheasptyrtrpglyglnglythr100105110thrleuthrvalserser115<210>54<211>109<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>54aspilealametthrglnserhislysphemetserthrleuvalgly151015aspargvalserilethrcyslysalaserglnaspvalasnthrala202530ilealatrptyrglnglnlysproglyglnserprolysleuleuile354045tyrtrpalaserthrarghisthrglyvalproaspargphethrgly505560serglyserglythrasptyrthrleuthrilesersermetgluala65707580gluaspalaalathrtyrtyrcysglnglntrpserserasnproleu859095thrpheglyalaglythrlysleugluleulysargala100105<210>55<211>118<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>55lysvalglnleuglnglnserglyalagluleuvallysproglyala151015servallysleusercyslysalaserglytyrthrphethrasptyr202530thrilehistrpvallysglnargserglyglnglyleuglutrpile354045glytrpphetyrproglyglyglytyrilelystyrasnglulysphe505560lysaspargalathrleuthralaasplysserserasnthrvaltyr65707580metgluleuserargleuthrsergluaspseralavaltyrphecys859095alaarghisglugluglyiletyrpheasptyrtrpglyglnglythr100105110thrleuthrvalserser115<210>56<211>104<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>56aspilevalmetthrglnserhislysphemetserthrservalgly151015aspargvalserilethrcyslysalaserglnaspvalasnthrala202530ilealatrptyrglnglnlysproglyglnserprolysleuleuile354045tyrtrpalaserthrarghisthrglyvalproaspargphethrgly505560serglyserglythrasptyrthrleuthrileserservalglnala65707580gluaspleualaleutyrtyrcysglnglnhistyrthrthrprophe859095thrpheglyserglythrlysleu100<210>57<211>244<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>57gluvalglnleuvalglnserglyglyglyvalgluargproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrpheaspasptyr202530glymetsertrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045serglyileasntrpasnglyglyserthrglytyralaaspserval505560lysglyargvalthrileserargaspasnalalysasnserleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alalysileleuglyalaglyargglytrptyrpheaspleutrpgly100105110lysglythrthrvalthrvalserserglyglyglyglyserglygly115120125glyglyserglyglyglyglysersergluleuthrglnaspproala130135140valservalalaleuglyglnthrvalargilethrcysglnglyasp145150155160serleuargsertyrtyralasertrptyrglnglnlysproglygln165170175alaprovalleuvaliletyrglylysasnasnargproserglyile180185190proaspargpheserglyserserserglyasnthralaserleuthr195200205ilethrglyalaglnalagluaspglualaasptyrtyrcysasnser210215220argaspserserglyasnhisvalvalpheglyglyglythrlysleu225230235240thrvalleugly<210>58<211>245<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>58gluvalglnleuvalgluthrglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr202530alametsertrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045seralaileserglyserglyglyserthrtyrtyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrhiscys859095alaargglyglytyrserserserargseralaalatyraspiletrp100105110glyglnglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglysergly115120125glyglyglyserglyglyglyglysersergluleuthrglnasppro130135140alavalservalalaleuglyglnthrvalargilethrcysglngly145150155160aspserleuargsertyrtyralasertrptyrglnglnlysprogly165170175glnalaprovalleuvaliletyrglylysasnasnargprosergly180185190ileproaspargpheserglyserserserglyasnthralaserleu195200205thrilethrglyalaglnalagluaspglualaasptyrtyrcysasn210215220serargaspserserglyasnhisvalvalpheglyglyglythrlys225230235240leuthrvalleugly245<210>59<211>246<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>59glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyala151015servallysilesercysgluglyserglytyrthrpheasnsertyr202530thrleuhistrpleuargglnalaproglyglnargleuglutrpmet354045glyargileasnalaglyasnglyasnthrlystyrserglnasnphe505560glnglyargleuserilethrargaspthrseralathrthralatyr65707580metgluleuserserleuargsergluaspthrglyvaltyrtyrcys859095alaargvalphethrtyrserpheglymetaspvaltrpglyarggly100105110thrleuvalthrvalserserglyglyglyglyserglyglyglygly115120125serglyglyglyglyseralaglnservalleuthrglnproproser130135140alaserglythrproglyglnargvalthrilesercysserglygly145150155160glyserasnileglyargasnservalsertrptyrglnglnleupro165170175glythralaprolysleuileleutyrserasnasnglnargproser180185190glyvalproaspargpheserglyserlysserglythrseralaser195200205leualaileserglyleuargsergluaspglualaleutyrtyrcys210215220alaalatrpaspaspserleuserglyglyvalpheglyglyglythr225230235240lysleuthrvalleugly245<210>60<211>244<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>60glnvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr202530alametsertrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045seralaileserglyserglyglyserthrtyrtyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alalysvalhisargproglyargserglytyrpheasptyrtrpgly100105110argglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglyserglygly115120125glyglyserglyglyglyglysersergluleuthrglnaspproala130135140valservalalaleuglyglnthrvalargilethrcysglnglyasp145150155160serleuargsertyrtyralasertrptyrglnglnlysproglygln165170175alaprovalleuvaliletyrglylysasnasnargproserglyile180185190proaspargpheserglyserserserglyasnthralaserleuthr195200205ilethrglyalaglnalagluaspglualaasptyrtyrcysasnser210215220argaspserserglyasnhisvalvalpheglyglyglythrlysleu225230235240thrvalleugly<210>61<211>235<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>61glnvalglnleuglnglnserglyalagluvallyslysproglyala151015servalargvalsercysglnalaserglytyrserleuserglutyr202530tyrilehistrpvalargglnalaproglyglnglyleuglutrpmet354045glytrpleuasnproasnserglyvalthrasptyralaglnlysphe505560glnglyargvalsermetthrargaspthrserileserthralatyr65707580metgluleuserserleuthrpheasnaspthralavaltyrphecys859095alaargglyasnglyasptyrtrpglylysglythrleuvalthrval100105110serproglyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglygly115120125sersergluleuthrglnaspproalavalservalalaleuglygln130135140thrvalargilethrcysglnglyaspserleuargsertyrtyrthr145150155160asntrppheglnglnlysproglyglnalaproleuleuvalvaltyr165170175alalysasnlysargproserglyileproaspargpheserglyser180185190serserglyasnthralaserleuthrilethrglyalaglnalaglu195200205aspglualaasptyrtyrcyshisserargaspserserglytrpval210215220pheglyglyglythrlysleuthrvalleugly225230235<210>62<211>245<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>62glnvalglnleuvalglnserglyglyglyvalvalglnproglyarg151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrpheserproasp202530alamethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpmet354045glyvalileserpheaspglyserglnthrphetyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnserglnasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargseraspaspthralavaltyrtyrcys859095alaargalaproalaargphepheproleuhispheaspiletrpgly100105110argglythrmetvalthrvalserserglyglyglyglyserglygly115120125glyglyserglyglyglyglyseralaleusersergluleuthrgln130135140aspproalavalservalalaleuglyglnthrvalargilethrcys145150155160glnglyaspserleuargthrhistyralasertrptyrhisglnarg165170175proglyargalaprovalleuvalasntyrprolysaspserargpro180185190serglyileproaspargpheserglyserserserglyasnthrala195200205serleuthrileileglyalaglnalaalaaspgluglyasptyrtyr210215220cysglnserargaspserserglyvalleupheglyglyglythrlys225230235240valthrvalleugly245<210>63<211>247<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>63gluvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr202530trpmetsertrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045alaasnilelysglnaspglyserglulystyrtyrvalaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnalalysasnserleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargasppheserglytyrglyasptyrleuasptyrtrpglylys100105110glythrleuvalthrvalserserglyglyglyglyserglyglygly115120125glyserglyglyglyglyseralaglnseralaleuthrglnpropro130135140seralaserglyserproglyglnservalthrilesercysthrgly145150155160thrserseraspileglyasntyrasntyrvalsertrptyrglngln165170175hisproglylysalaprolysleumetiletyrgluvalasngluarg180185190proserglyvalproaspargpheserglyserlysserglyasnthr195200205alaserleuthrvalserglyleuargprogluaspglualaasptyr210215220tyrcyssersertyralaglyasnasnalavalilepheglyglygly225230235240thrglnleuthrvalleugly245<210>64<211>255<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>64glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyala151015servallysvalsercyslysalaserglytyrthrphethrthrhis202530alamethistrpvalargglnalaproglyglnserleuglutrpmet354045glytrpileasnthrglyasnglyasnthrlystyrserglnserphe505560glnglyargvalserilethrargaspthrseralaasnthralatyr65707580metgluleuserserleulyssergluaspthralamettyrtyrcys859095alaargalaserargaspserserglytyrtyrtyrvalproprogly100105110aspphepheaspiletrpglyglnglythrleuvalthrvalserser115120125glyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyserala130135140glnseralaleuthrglnproalaservalserglyserproglygln145150155160serilethrilesercysthrglyserargseraspileglyglytyr165170175asnphevalsertrptyrglnglnhisproglylysalaprolysleu180185190leuiletyraspvaltyrasnargproserglyileserasphisphe195200205serglyserlysseraspasnthralaserleuthrileserglyleu210215220glnsergluaspaspalaasptyrtyrcyssersertyralaglytyr225230235240histhrtrpilepheglyglyglythrlysvalthrvalleugly245250255<210>65<211>248<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>65gluvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyala151015servallysleusercyslysalaserglytyrthrleuvalasntyr202530phemethistrpvalargglnalaproglyglnglyproglutrpmet354045glymetileasnproserglyglythrthrlysasnargglnlysphe505560glnaspargvalthrmetthrargaspthrserthrargthrvaltyr65707580metgluleuserglyleuthrsergluaspthralavaltyrtyrcys859095alathraspphelysglythraspileleupheargasptrpglyarg100105110glythrleuvalthrvalserserglyglyglyglyserglyglygly115120125glyserglyglyglyglyseralaglnservalleuthrglnpropro130135140seralaserglythrproglyglnargvalserilesercyssergly145150155160serserserasnileglyserasnthrvaliletrptyrglnglnleu165170175proglythralaprolysleuleumettyrserasnaspargargpro180185190serglyvalproaspargpheserglyserlysserglythrserala195200205serleualaileserglyleuglnsergluaspglualaasptyrtyr210215220cysalathrtrpaspaspserleuasnglyhistyrvalpheglythr225230235240glythrlysleuthrvalleugly245<210>66<211>243<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>66glnmetglnleuvalglnserglyglyglyleuvallysproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrpheserasptyr202530tyrmetsertrpileargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045seralaileserglyserglyglyserthrtyrtyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargglyglyserthrpheaspiletrpglyargglythrmetval100105110thrvalserserglyglyglyglyserglyglyglyglyserglygly115120125glyglyseralaglnprovalleuthrglnproproseralasergly130135140thrproglyglnargvalthrilesercysserglyserasnserasn145150155160ileglyserargprovalasntrptyrglnglnleuproglythrala165170175prolysleuleuileglnglyasnasnglnargproserglyvalpro180185190aspargpheserglyserlysserglythrseralaserleualaile195200205serglyleuglnsergluaspglualaasptyrtyrcysalaalatrp210215220aspaspserleuthrglytyrvalpheglyproglythrlysleuthr225230235240valleugly<210>67<211>240<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>67glnmetglnleuvalglnserglyglyalavalvalglnproglyarg151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr202530glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045alavalilesertyraspglyserilelystyrtyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alaarggluargleuargglyleuaspprotrpglyglnglythrmet100105110valthrvalserserglyglyglyglyserglyglyglyglysergly115120125glyglyglysersergluleuthrglnaspproalavalservalala130135140leuglyglnthrvalargilethrcysglnglyaspserleuargser145150155160tyrtyralasertrptyrglnglnlysproglyglnalaprovalleu165170175valiletyrglylysasnasnargproserglyileproaspargphe180185190serglyserserserglyasnthralaserleuthrilethrglyala195200205glnalagluaspglualaasptyrtyrcysasnserargaspserser210215220glyasnhisvalvalpheglyglyglythrlysleuthrvalleugly225230235240<210>68<211>243<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>68gluvalglnleuvalgluthrglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrpheserprotyr202530tyrmetsertrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045seralaileserglyserglyglyseriletyrtyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralaleutyrtyrcys859095alaargglyalaserglyproasptyrtrpglyargglythrmetval100105110thrvalserserglyglyglyglyserglyglyglyglyserglygly115120125glyglyseralaglnservalleuthrglnproproservalserala130135140alaproglyglnlysvalthrilesercysserglyserthrserasn145150155160ileglyasnasntyrvalsertrptyrglnglnvalproglythrala165170175prolysleuleuiletyraspasnasnlysargproserglyilepro180185190aspargpheserglyserlysserglythrseralathrleuglyile195200205thrglyleuglnthrglyaspglualaasptyrtyrcysglythrtrp210215220aspserserleuseralaleuvalpheglyglyglythrlysvalthr225230235240valleugly<210>69<211>253<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>69glnvalglnleuglnglnserglyalagluvallysthrproglyser151015servallysvalsercyslysalaserglyglythrpheargasnasn202530alailesertrpvalargglnalaproglyglnglyleuglutrpmet354045glyglypheileprolyspheglythrthrasnhisalaglnlysphe505560glnglyargvalthrmetthralaaspaspserthrasnthrvaltyr65707580metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargglyglyalatyrcysglyglyglyargcystyrleutyrgly100105110metaspvaltrpglyglnglythrleuvalthrvalserserglygly115120125glyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyseralaglnala130135140valvalileglngluproserleuthrvalserproglyglythrval145150155160thrleuthrcysglyserserthrglyalavalthrserglyhistyr165170175protyrtrppheglnglnlysproglyglnalaproargthrleuile180185190tyraspthrserasnlysargsertrpthrproalaargphesergly195200205serleuleuglyglylysalaalaleuthrleuserglyalaglnpro210215220gluaspglualaglutyrtyrcysleuvalsertyrserglyserleu225230235240valvalpheglyglyglythrlysleuthrvalleugly245250<210>70<211>243<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>70gluvalglnleuleugluserglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr202530alametsertrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045seralaileserglyserglyglyserthrtyrtyralaaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095vallysglyalatrpleuasptyrtrpglyargglythrmetvalthr100105110valserserglyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglygly115120125glyseralaleuasnphemetleuthrglnprohisservalserglu130135140serproglylysthrvalthrilesercysthrglyserserglyser145150155160valalaargasntyrvalglntrptyrglnglnargproglyserala165170175prothrilevaliletyrgluaspasnargargproserglyvalpro180185190glyargpheserglyserileaspargserserasnseralaserleu195200205thrileserglyleuglnthrgluaspglualaasptyrtyrcysgln210215220sertyrasntyrasnthrtrpvalpheglyglyglythrlysleuthr225230235240valleugly<210>71<211>247<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>71gluvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyala151015servallysvalsercysargalaserglytyrthrphethrsertyr202530glyilethrtrpvalargglnalaproglyglnglyleuglutrpmet354045glytrpileseralatyrasnglylysthrasntyrvalglngluleu505560glnglyargvalthrmetthrthraspthrserthrserthrvaltyr65707580metgluleuthrserleuargseraspaspthralavaltyrtyrcys859095alaargargglyasnasntyrargpheglytyrpheaspphetrpgly100105110glnglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglyserglygly115120125glyglyserglyglyglyglyseralaleugluthrthrleuthrgln130135140serproglythrleuserleuserproglygluargalathrleuser145150155160cysargalaserglnserileserserserasnleualatrptyrgln165170175glnlysproglyargalaproargleuleuiletyrglyalaserser180185190argalaileglyileproaspargpheserglyserglyserglythr195200205aspphethrleuthrileserargleuglualagluaspphealaval210215220tyrtyrcysglnglntyrglyserserproilethrpheglyglngly225230235240thrargleugluilelysarg245<210>72<211>248<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>72glnvalglnleuglnglnserglyproglyleuvallysprosergln151015thrleuserleuthrcysalaileserglyaspservalserserthr202530thrvalalatrpasptrpileargglnserproserargglyleuglu354045trpleuglyargthrtyrtyrargserlystrptyrasnglutyrala505560valservallysserargilethrileasnvalaspthrserlysasn65707580glnileserleuglnleuasnservalthrprogluaspthralaval859095tyrtyrcysalaarggluproaspalaglyargglyalapheaspile100105110trpglyglnglythrthrvalthrserproleuargtrpglyargphe115120125glytrpargglyleuglyargglytrpleuargserprovalthrgln130135140serproglythrleuserleuserproglygluargalathrleuser145150155160cysargalaserglnservalserserserhisleualatrptyrgln165170175glnlysproglyglnalaproargleuleuiletyrglyalaserser180185190argalathrglyileproaspargpheserglyserglyserglythr195200205aspphethrleuthrileserserleugluprogluaspphealaval210215220tyrtyrcysglnglnargserasntrpproproargalavalphegly225230235240glnglythrargleugluilelys245<210>73<211>248<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>73glnvalglnleuglnglnserglyproglyargvalglnprosergln151015thrleuserleuthrcysalaileserglyaspservalserasnasn202530asnalaalatrptyrtrpileargglnserproserargglyleuglu354045trpleuglyargthrtyrtyrargserlystrptyrasnasptyrala505560valservallysserargilethrileserproaspthrserlysasn65707580glnpheserleuglnleuasnservalthrprogluaspthralaval859095tyrtyrcysalaargargglyaspglyasnsertyrpheasptyrtrp100105110glyglnglythrleuvalthrvalserserglyileleuargtrpgly115120125argpheglytrpargglyleuglyargglytrpleugluilevalleu130135140thrglnserproglythrleuserleuserproglygluargalathr145150155160leusercysargalaserglnservalserserglytyrvalsertrp165170175tyrargglnlysproglyglnalaproargleuleuiletyrglyala180185190serthrargalathrglyileproaspargpheserglyserglyser195200205glythraspphethrleuthrileserargleugluprogluaspphe210215220alavaltyrtyrcyshisglntyrglyserserproasnthrtyrgly225230235240glnglythrlysvalglyilelys245<210>74<211>452<212>prt<213>智人(homosapiens)<400>74glyseralaseralaprothrleupheproleuvalsercysgluasn151015serproseraspthrserservalalavalglycysleualaglnasp202530pheleuproaspserilethrleusertrplystyrlysasnasnser354045aspileserserthrargglypheproservalleuargglyglylys505560tyralaalathrserglnvalleuleuproserlysaspvalmetgln65707580glythraspgluhisvalvalcyslysvalglnhisproasnglyasn859095lysglulysasnvalproleuprovalilealagluleuproprolys100105110valservalphevalproproargaspglyphepheglyasnproarg115120125lysserlysleuilecysglnalathrglypheserproargglnile130135140glnvalsertrpleuarggluglylysglnvalglyserglyvalthr145150155160thraspglnvalglnalaglualalysgluserglyprothrthrtyr165170175lysvalthrserthrleuthrilelysgluserasptrpleuglygln180185190sermetphethrcysargvalasphisargglyleuthrpheglngln195200205asnalasersermetcysvalproaspglnaspthralaileargval210215220phealaileproproserphealaserilepheleuthrlysserthr225230235240lysleuthrcysleuvalthraspleuthrthrtyraspservalthr245250255ilesertrpthrargglnasnglyglualavallysthrhisthrasn260265270ilesergluserhisproasnalathrpheseralavalglygluala275280285serilecysgluaspasptrpasnserglygluargphethrcysthr290295300valthrhisthraspleuproserproleulysglnthrileserarg305310315320prolysglyvalalaleuhisargproaspvaltyrleuleupropro325330335alaarggluglnleuasnleuarggluseralathrilethrcysleu340345350valthrglypheserproalaaspvalphevalglntrpmetglnarg355360365glyglnproleuserproglulystyrvalthrseralaprometpro370375380gluproglnalaproglyargtyrphealahisserileleuthrval385390395400serglugluglutrpasnthrglygluthrtyrthrcysvalalahis405410415glualaleuproasnargvalthrgluargthrvalasplysserthr420425430glylysprothrleutyrasnvalserleuvalmetseraspthrala435440445glythrcystyr450<210>75<211>1347<212>dna<213>智人(homosapiens)<400>75gccccaacccttttccccctcgtctcctgtgagaattccccgtcggatacgagcagcgtg60gccgttggctgcctcgcacaggacttccttcccgactccatcactttctcctggaaatac120aagaacaactctgacatcagcagcacccggggcttcccatcagtcctgagagggggcaag180cacgcagccacctcacaggtgctgctgccttccaaggacgtcatgcagggcacagacgaa240cacgtggtgtgcaaagtccagcaccccaacggcaacaaagaaaagaacgtgcctcttcca300gtgattgctgagctgcctcccaaagtgagcgtcttcgtcccaccccgcgacggcttcttc360ggcaacccccgcaagtccaagctcatctgccaggccacgggtttcagtccccggcagatt420caggtgtcctggctgcgcgaggggaagcaggtggggtctggcgtcaccacggaccaggtg480caggctgaggcaaaggagtctgggaccacgacctacaaggtgaccagcacactgaccatc540aaagagagcgactggctcagccagagcatgttcacctgccgcgtggatcacaggggcctg600accttccagcagaatgcgtcctccatgtgtggccccgatcaagacacagccatccgggtc660ttctccatccccccatcctttgccagcatcttcctcaccaagtccaccaagttgacctgc720ctggtcacagacctgaccacctatgacagcgtgaccatctcctggacccgccagaatggc780gaagctgtgaaaacccacaccaacatctccgagagccaccccaatgccactttcagcgcc840gtgggtgaggccagcatctgcgaggatgactggaattccggggagaggttcacgtgcacc900gtgacccacacagacctgccctcgccactgaagcagaccatctcccggcccaagggggtg960gccctgcacaggcccgatgtctacttgctgccaccagcccgggagcagctgaacctgcgg1020gagtcggccaccatcacgtgcctggtgacgggcttctctcccgcggacgtcttcgtgcag1080tggatgcagagggggcagcccttgtccccggagaagtatgtgaccagcgccccaatgcct1140gagccccaggccccaggccggtacttcgcccacagcatcctgaccgtgtccgaagaggaa1200tggaacacgggggagacctacacctgcgtggtggcccatgaggccctgcccaacagggtc1260accgagaggaccgtggacaagtccaccggtaaacccaccctgtacaacgtgtccctggtc1320atgtccgacacagctggcacctgctac1347<210>76<211>159<212>prt<213>智人(homosapiens)<400>76metlysasnhisleuleuphetrpglyvalleualavalpheilelys151015alavalhisvallysalaglngluaspgluargilevalleuvalasp202530asnlyscyslyscysalaargilethrserargileileargserser354045gluaspproasngluaspilevalgluargasnileargileileval505560proleuasnasnarggluasnileseraspprothrserproleuarg65707580thrargphevaltyrhisleuseraspleucyslyslyscysasppro859095thrgluvalgluleuaspasnglnilevalthralathrglnserasn100105110ilecysaspgluaspseralathrgluthrcystyrthrtyrasparg115120125asnlyscystyrthralavalvalproleuvaltyrglyglygluthr130135140lysmetvalgluthralaleuthrproaspalacystyrproasp145150155<210>77<211>480<212>dna<213>智人(homosapiens)<400>77atgaagaaccatttgcttttctggggagtcctggcggtttttattaaggctgttcatgtg60aaagcccaagaagatgaaaggattgttcttgttgacaacaaatgtaagtgtgcccggatt120acttccaggatcatccgttcttccgaagatcctaatgaggacattgtggagagaaacatc180cgaattattgttcctctgaacaacagggagaatatctctgatcccacctcaccattgaga240accagatttgtgtaccatttgtctgacctctgtaaaaaatgtgatcctacagaagtggag300ctggataatcagatagttactgctacccagagcaatatctgtgatgaagacagtgctaca360gagacctgctacacttatgacagaaacaagtgctacacagctgtggtcccactcgtatat420ggtggtgagaccaaaatggtggaaacagccttaaccccagatgcctgctatcctgactaa480<210>78<211>353<212>prt<213>智人(homosapiens)<400>78alaserprothrserprolysvalpheproleuserleucysserthr151015glnproaspglyasnvalvalilealacysleuvalglnglyphephe202530proglngluproleuservalthrtrpsergluserglyglnglyval354045thralaargasnpheproproserglnaspalaserglyaspleutyr505560thrthrserserglnleuthrleuproalathrglncysleualagly65707580lysservalthrcyshisvallyshistyrthrasnproserglnasp859095valthrvalprocysprovalproserthrproprothrproserpro100105110serthrproprothrproserprosercyscyshisproargleuser115120125leuhisargproalaleugluaspleuleuleuglyserglualaasn130135140leuthrcysthrleuthrglyleuargaspalaserglyvalthrphe145150155160thrtrpthrproserserglylysseralavalglnglyproproglu165170175argaspleucysglycystyrservalserservalleuproglycys180185190alagluprotrpasnhisglylysthrphethrcysthralaalatyr195200205progluserlysthrproleuthralathrleuserlysserglyasn210215220thrpheargprogluvalhisleuleuproproproserglugluleu225230235240alaleuasngluleuvalthrleuthrcysleualaargglypheser245250255prolysaspvalleuvalargtrpleuglnglyserglngluleupro260265270argglulystyrleuthrtrpalaserargglngluproserglngly275280285thrthrthrphealavalthrserileleuargvalalaalagluasp290295300trplyslysglyaspthrphesercysmetvalglyhisglualaleu305310315320proleualaphethrglnlysthrileaspargleualaglylyspro325330335thrhisvalasnvalservalvalmetalagluvalaspglythrcys340345350tyr<210>79<211>340<212>prt<213>智人(homosapiens)<400>79alaserprothrserprolysvalpheproleuserleuaspserthr151015proglnaspglyasnvalvalvalalacysleuvalglnglyphephe202530proglngluproleuservalthrtrpsergluserglyglnasnval354045thralaargasnpheproproserglnaspalaserglyaspleutyr505560thrthrserserglnleuthrleuproalathrglncysproaspgly65707580lysservalthrcyshisvallyshistyrthrasnproserglnasp859095valthrvalprocysprovalproproproproprocyscyshispro100105110argleuserleuhisargproalaleugluaspleuleuleuglyser115120125glualaasnleuthrcysthrleuthrglyleuargaspalasergly130135140alathrphethrtrpthrproserserglylysseralavalglngly145150155160proprogluargaspleucysglycystyrservalserservalleu165170175proglycysalaglnprotrpasnhisglygluthrphethrcysthr180185190alaalahisprogluleulysthrproleuthralaasnilethrlys195200205serglyasnthrpheargprogluvalhisleuleuproproproser210215220glugluleualaleuasngluleuvalthrleuthrcysleualaarg225230235240glypheserprolysaspvalleuvalargtrpleuglnglysergln245250255gluleuproargglulystyrleuthrtrpalaserargglnglupro260265270serglnglythrthrthrphealavalthrserileleuargvalala275280285alagluasptrplyslysglyaspthrphesercysmetvalglyhis290295300glualaleuproleualaphethrglnlysthrileaspargmetala305310315320glylysprothrhisvalasnvalservalvalmetalagluvalasp325330335glythrcystyr340<210>80<211>764<212>prt<213>智人(homosapiens)<400>80metleuleuphevalleuthrcysleuleualavalpheproalaile151015serthrlysserproilepheglyproglugluvalasnservalglu202530glyasnservalserilethrcystyrtyrproprothrservalasn354045arghisthrarglystyrtrpcysargglnglyalaargglyglycys505560ilethrleuilesersergluglytyrvalserserlystyralagly65707580argalaasnleuthrasnpheprogluasnglythrphevalvalasn859095ilealaglnleuserglnaspaspserglyargtyrlyscysglyleu100105110glyileasnserargglyleuserpheaspvalserleugluvalser115120125glnglyproglyleuleuasnaspthrlysvaltyrthrvalaspleu130135140glyargthrvalthrileasncysprophelysthrgluasnalagln145150155160lysarglysserleutyrlysglnileglyleutyrprovalleuval165170175ileaspserserglytyrvalasnproasntyrthrglyargilearg180185190leuaspileglnglythrglyglnleuleupheservalvalileasn195200205glnleuargleuseraspalaglyglntyrleucysglnalaglyasp210215220aspserasnserasnlyslysasnalaaspleuglnvalleulyspro225230235240gluprogluleuvaltyrgluaspleuargglyservalthrphehis245250255cysalaleuglyprogluvalalaasnvalalalyspheleucysarg260265270glnserserglygluasncysaspvalvalvalasnthrleuglylys275280285argalaproalaphegluglyargileleuleuasnproglnasplys290295300aspglyserpheservalvalilethrglyleuarglysgluaspala305310315320glyargtyrleucysglyalahisseraspglyglnleuglnglugly325330335serproileglnalatrpglnleuphevalasnglugluserthrile340345350proargserprothrvalvallysglyvalalaglyglyservalala355360365valleucysprotyrasnarglysgluserlysserilelystyrtrp370375380cysleutrpgluglyalaglnasnglyargcysproleuleuvalasp385390395400sergluglytrpvallysalaglntyrgluglyargleuserleuleu405410415glugluproglyasnglythrphethrvalileleuasnglnleuthr420425430serargaspalaglyphetyrtrpcysleuthrasnglyaspthrleu435440445trpargthrthrvalgluilelysileilegluglygluproasnleu450455460lysvalproglyasnvalthralavalleuglygluthrleulysval465470475480procyshispheprocyslysphesersertyrglulystyrtrpcys485490495lystrpasnasnthrglycysglnalaleuproserglnaspglugly500505510proserlysalaphevalasncysaspgluasnserargleuvalser515520525leuthrleuasnleuvalthrargalaaspgluglytrptyrtrpcys530535540glyvallysglnglyhisphetyrglygluthralaalavaltyrval545550555560alavalglugluarglysalaalaglyserargaspvalserleuala565570575lysalaaspalaalaproaspglulysvalleuaspserglyphearg580585590gluilegluasnlysalaileglnaspproargleuphealagluglu595600605lysalavalalaaspthrargaspglnalaaspglyserargalaser610615620valaspserglyserserglugluglnglyglyserserargalaleu625630635640valserthrleuvalproleuglyleuvalleualavalglyalaval645650655alavalglyvalalaargalaarghisarglysasnvalaspargval660665670serileargsertyrargthraspilesermetseraspphegluasn675680685serargglupheglyalaasnaspasnmetglyalaserserilethr690695700glngluthrserleuglyglylysglugluphevalalathrthrglu705710715720serthrthrgluthrlysgluprolyslysalalysargserserlys725730735gluglualaglumetalatyrlysasppheleuleuglnserserthr740745750valalaalaglualaglnaspglyproglngluala755760<210>81<211>585<212>prt<213>智人(homosapiens)<400>81lysserproilepheglyproglugluvalasnservalgluglyasn151015servalserilethrcystyrtyrproprothrservalasnarghis202530thrarglystyrtrpcysargglnglyalaargglyglycysilethr354045leuilesersergluglytyrvalserserlystyralaglyargala505560asnleuthrasnpheprogluasnglythrphevalvalasnileala65707580glnleuserglnaspaspserglyargtyrlyscysglyleuglyile859095asnserargglyleuserpheaspvalserleugluvalserglngly100105110proglyleuleuasnaspthrlysvaltyrthrvalaspleuglyarg115120125thrvalthrileasncysprophelysthrgluasnalaglnlysarg130135140lysserleutyrlysglnileglyleutyrprovalleuvalileasp145150155160serserglytyrvalasnproasntyrthrglyargileargleuasp165170175ileglnglythrglyglnleuleupheservalvalileasnglnleu180185190argleuseraspalaglyglntyrleucysglnalaglyaspaspser195200205asnserasnlyslysasnalaaspleuglnvalleulysproglupro210215220gluleuvaltyrgluaspleuargglyservalthrphehiscysala225230235240leuglyprogluvalalaasnvalalalyspheleucysargglnser245250255serglygluasncysaspvalvalvalasnthrleuglylysargala260265270proalaphegluglyargileleuleuasnproglnasplysaspgly275280285serpheservalvalilethrglyleuarglysgluaspalaglyarg290295300tyrleucysglyalahisseraspglyglnleuglngluglyserpro305310315320ileglnalatrpglnleuphevalasnglugluserthrileproarg325330335serprothrvalvallysglyvalalaglyglyservalalavalleu340345350cysprotyrasnarglysgluserlysserilelystyrtrpcysleu355360365trpgluglyalaglnasnglyargcysproleuleuvalaspserglu370375380glytrpvallysalaglntyrgluglyargleuserleuleugluglu385390395400proglyasnglythrphethrvalileleuasnglnleuthrserarg405410415aspalaglyphetyrtrpcysleuthrasnglyaspthrleutrparg420425430thrthrvalgluilelysileilegluglygluproasnleulysval435440445proglyasnvalthralavalleuglygluthrleulysvalprocys450455460hispheprocyslysphesersertyrglulystyrtrpcyslystrp465470475480asnasnthrglycysglnalaleuproserglnaspgluglyproser485490495lysalaphevalasncysaspgluasnserargleuvalserleuthr500505510leuasnleuvalthrargalaaspgluglytrptyrtrpcysglyval515520525lysglnglyhisphetyrglygluthralaalavaltyrvalalaval530535540glugluarglysalaalaglyserargaspvalserleualalysala545550555560aspalaalaproaspglulysvalleuaspserglyphearggluile565570575gluasnlysalaileglnaspproarg580585<210>82<211>146<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>82metaspleumetcyslyslysmetlyshisleutrpphepheleuleu151015leuvalalaalaproargtrpvalleuserglnleuglnleuglnglu202530serglyproglyleuvallysprosergluthrleuserleuthrcys354045thrvalserglyglyserileileserlyssersertyrtrpglytrp505560ileargglnproproglylysglyleuglutrpileglyseriletyr65707580tyrserglyserthrphetyrasnproserleulysserargvalthr859095ileservalaspthrserlysasnglnpheserleulysleuserser100105110valthralaalaaspthralavaltyrtyrcysalaargleuthrval115120125alaglupheasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserser130135140alaser145<210>83<211>129<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>83metglualaproalaglnleuleupheleuleuleuleutrpleupro151015aspthrthrglygluilevalleuthrglnserproalathrleuser202530leuserproglygluargalathrleusercysargalaserglnser354045valserserpheleualatrptyrglnglnlysproglyglnalapro505560argleuleuiletyraspalaserasnargalathrglyileproala65707580argpheserglyserglyserglythraspphethrleuthrileser859095serleugluprogluaspphealavaltyrtyrcysglnglnargser100105110asntrpproleuthrpheglyproglythrlysvalaspilelysarg115120125thr<210>84<211>146<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>84metaspleumetcyslyslysmetlyshisleutrpphepheleuleu151015leuvalalaalaproargtrpvalleuserglnleuglnleuglnglu202530serglyproglyleuvallysprosergluthrleuserleuthrcys354045thrvalserglyglyserileserserargserasntyrtrpglytrp505560ileargglnproproglylysglyleuglutrpileglyasnvaltyr65707580tyrargglyserthrtyrtyrasnserserleulysserargvalthr859095ileservalaspthrserlysasnglnpheserleulysleuserser100105110valthrvalalaaspthralavaltyrtyrcysalaargleuserval115120125alaglupheasptyrtrpglyglnglyileleuvalthrvalserser130135140alaser145<210>85<211>129<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>85metglualaproalaglnleuleupheleuleuleuleutrpleupro151015aspthrthrglygluilevalleuthrglnserproalathrleuser202530leuserproglygluargalathrleusercysargalaserglnser354045valserserpheleualatrptyrglnglnlysproglyglnalapro505560argleuleuiletyraspalaserasnargalathrglyserproala65707580argpheserglyserglyserglythraspphethrleuthrileser859095serleugluprogluaspphealavaltyrtyrcysglnglnargser100105110asptrpproleuthrpheglyproglythrlysvalaspilelysarg115120125thr<210>86<211>154<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>86metaspleumetcyslyslysmetlyshisleutrpphepheleuleu151015leuvalalaalaproargtrpvalleuserglnleuglnleuglnglu202530serglyproglyleuvallysprosergluthrleuserleuthrcys354045thrvalserglyglyserilesersersersertyrtyrtrpglytrp505560valargglnproproglylysglyleuglutrpileglyserilehis65707580tyrserglyserthrphetyrasnproserleulysserargvalthr859095ileservalaspthrserlysasnglnpheserleulysleuserser100105110valthralaalaaspthrthrvaltyrtyrcysalaargglnglyser115120125thrvalvalargglyvaltyrtyrtyrglymetaspvaltrpglygln130135140glythrthrvalthrvalserseralaser145150<210>87<211>131<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>87metgluthrproalaglnleuleupheleuleuleuleutrpleupro151015aspthrthrglygluilevalleuthrglnserproglythrleuser202530leuserproglygluargalathrleusercysargalaserglnser354045valsersersertyrleualatrptyrglnglnlysproglyglnala505560proargleuleuiletyrglyalaserserargalathrglyilepro65707580aspargpheserglyserglyserglythraspphethrleuthrile859095serargleugluprogluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyr100105110glyserserproleutyrthrpheglyglnglythrlysleugluile115120125lysargthr130<210>88<211>139<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>88metglupheglyleusertrpleupheleuvalalaileleulysgly151015valglncysgluvalglnleuleugluserglyglyglyleuvalgln202530proglyargserleuargleusercysalaalaserglyphethrphe354045sersertyralametsertrpvalargglnalaproglylysglyleu505560glutrpvalseralaileserglyserglyglyserargtyrtyrala65707580aspservallysglyargphethrileserargaspasnserlysasn859095thrleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthralaval100105110tyrtyrcysalalysgluserserglytrppheglyalapheasptyr115120125trpglyglnglythrleuvalthrvalserser130135<210>89<211>127<212>prt<213>人工序列<220><223>人工序列描述:合成多肽<400>89metserproserglnleuileglypheleuleuleutrpvalproala151015serargglygluilevalleuthrglnserproasppheglnserval202530thrprolysglulysvalthrilethrcysargalaserglnserile354045glyserserleuhistrptyrglnglnlysproaspglnserprolys505560leuleuilelystyralaserglnserpheserglyvalproserarg65707580pheserglyserglyserglythraspphethrleuthrileasnser859095leuglualagluaspalaalaalatyrtyrcyshisglnserserser100105110leuproilethrpheglyglnglythrargleugluilelysarg115120125当前第1页12