1.一种从人源化基因编辑哺乳动物中产生人血清白蛋白的方法,所述方法包括:
制备所述非人哺乳动物的基因组,所述非人哺乳动物的基因组包含编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸,所述多聚核糖核酸可操作地连接到启动子多聚核糖核酸,其中,所述人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的或部分的编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸,并且其中所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括人血清白蛋白基因的修饰;
获得源自非人哺乳动物的血液样品,并且
从所述血液样品中分离出所述人血清白蛋白;
并且,所述人源化基因编辑哺乳动物的基因组包含编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸,所述多聚核糖核酸可操作地连接到启动子多聚核糖核酸;
其中,所述人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的或部分的编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸,并且
其中,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括人血清白蛋白基因的修饰。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述修饰包括人血清白蛋白基因的密码子优化和/或所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括乳腺白蛋白基因的一个或多个内含子。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述修饰包括用非人类乳腺细胞优选的密码子替换80%或更少的人类密码子。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括人血清白蛋白基因或非人类乳腺白蛋白基因的内含子1和内含子2的至少一部分。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,人源化基因编辑哺乳动物的血液包括约8至30g/L的人血清白蛋白,通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,转基因猪的血液包括不低于16g/L的人血清白蛋白,通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定,并且其中所述的人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的所述编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,转基因猪的血液包括不低于8g/L的人血清白蛋白,通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定,并且其中所述的人源化基因编辑哺乳动物不表达部分的所述编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述启动子多聚核糖核酸是非人类乳腺的白蛋白启动子。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法,其特征在于,所述人源化基因编辑哺乳动物是猪类动物,奶牛,绵羊,山羊,或兔子。
11.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述人源化基因编辑哺乳动物是猪类动物。
12.根据权利要求1-9中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:3或4和/或SEQ ID NO:5或6的多聚核糖核酸。
13.根据权利要求1-9中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:7的多聚核糖核酸。
14.根据权利要求1-9中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:7的多聚核糖核酸和SEQ ID NO:5或6和SEQ ID NO:3或4的多聚核糖核酸。
15.根据权利要求1-9中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括在所述人源化基因编辑哺乳动物中编码人血清白蛋白的SEQ ID NO:9,10,11或12的多聚核糖核酸。
16.一种制备人源化基因编辑哺乳动物的基因组的方法,所述方法包括:
提供编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸,其中,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括人血清白蛋白基因的修饰;并且
将所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸引入至该非人哺乳动物的基因组,从而制备所述人源化基因编辑哺乳动物的基因组,其中,所述人源化基因编辑哺乳动物并不表达全部的或部分的编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。
17.根据权利要求16所述的方法,其特征在于,将所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸引入至该非人哺乳动物的基因组的步骤包括:
将所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸引入至分离自非人哺乳动物的体细胞中,所述非人哺乳动物的基因组包括所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸;
将引入的所述体细胞的细胞核融入至非人哺乳动物的无核的卵母细胞内,从而产生该非人哺乳动物的胚胎,并且
将所述胚胎植入一个养育的雌性非人哺乳动物,从而产生所述非人哺乳动物。
18.根据权利要求17所述的方法,其特征在于,所述修饰包括人血清白蛋白基因的密码子优化和/或所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括乳腺白蛋白基因的一个或多个内含子。
19.根据权利要求17所述的方法,其特征在于,所述修饰包括用非人类乳腺细胞优选的密码子替换80%或更少的人类密码子。
20.根据权利要求17所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括人血清白蛋白基因或非人类乳腺白蛋白基因的内含子1和内含子2的至少一部分。
21.根据权利要求17所述的方法,其特征在于,人源化基因编辑哺乳动物的血液包括约8至30g/L的人血清白蛋白,通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定。
22.根据权利要求17所述的方法,其特征在于,转基因猪的血液包括不低于16g/L的人血清白蛋白,通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定,并且其中所述的人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的所述编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。
23.根据权利要求17所述的方法,其特征在于,转基因猪的血液包括不低于8g/L的人血清白蛋白,通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定,并且其中所述的人源化基因编辑哺乳动物不表达部分的所述编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。
24.根据权利要求17所述的方法,其特征在于,所述人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。
25.根据权利要求17所述的方法,其特征在于,所述启动子多聚核糖核酸是非人类乳腺的白蛋白启动子。
26.根据权利要求17-25中任一项所述的方法,其特征在于,所述人源化基因编辑哺乳动物是猪类动物,奶牛,绵羊,山羊,或兔子。
27.根据权利要求26所述的方法,其特征在于,所述人源化基因编辑哺乳动物是猪类动物。
28.根据权利要求17-25中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:3或4和/或SEQ ID NO:5或6的多聚核糖核酸。
29.根据权利要求17-25中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:7的多聚核糖核酸。
30.根据权利要求17-25中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:7的多聚核糖核酸和SEQ ID NO:5或6和SEQ ID NO:3或4的多聚核糖核酸。
31.根据权利要求17-25中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括在所述人源化基因编辑哺乳动物中编码人血清白蛋白的SEQ ID NO:9,10,11或12的多聚核糖核酸。
32.一种将非人供体组织移植到受体哺乳动物中的方法,所述方法包括:
将供体组织移植到受体哺乳动物,其中,所述非人供体组织获取自人源化基因编辑哺乳动物,所述人源化基因编辑哺乳动物并不表达全部的或部分的编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸,并且
其中,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括人血清白蛋白基因的修饰。
33.根据权利要求32所述的方法,其特征在于,所述非人供体组织是肝脏。
34.根据权利要求32所述的方法,其特征在于,所述修饰包括人血清白蛋白基因的密码子优化和/或所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括乳腺白蛋白基因的一个或多个内含子。
35.根据权利要求32所述的方法,其特征在于,所述修饰包括用非人类乳腺细胞优选的密码子替换80%或更少的人类密码子。
36.根据权利要求32所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括人血清白蛋白基因或非人类乳腺白蛋白基因的内含子1和内含子2的至少一部分。
37.根据权利要求32所述的方法,其特征在于,人源化基因编辑哺乳动物的血液包括约8至30g/L的人血清白蛋白,通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定。
38.根据权利要求32所述的方法,其特征在于,转基因猪的血液包括不低于16g/L的人血清白蛋白,通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定,并且其中所述的人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的所述编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。
39.根据权利要求32所述的方法,其特征在于,转基因猪的血液包括不低于8g/L的人血清白蛋白,通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定,并且其中所述的人源化基因编辑哺乳动物不表达部分的所述编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。
40.根据权利要求32所述的方法,其特征在于,所述人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。
41.根据权利要求32所述的方法,其特征在于,所述启动子多聚核糖核酸是非人类乳腺的白蛋白启动子。
42.根据权利要求32-41中任一项所述的方法,其特征在于,所述人源化基因编辑哺乳动物是猪类动物,奶牛,绵羊,山羊,或兔子。
43.根据权利要求42所述的方法,其特征在于,所述人源化基因编辑哺乳动物是猪类动物。
44.根据权利要求32-41中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:3或4和/或SEQ ID NO:5或6的多聚核糖核酸。
45.根据权利要求32-41中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:7的多聚核糖核酸。
46.根据权利要求32-41中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:7的多聚核糖核酸和SEQ ID NO:5或6和SEQ ID NO:3或4的多聚核糖核酸。
47.根据权利要求32-41中任一项所述的方法,其特征在于,所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括在所述人源化基因编辑哺乳动物中编码人血清白蛋白的SEQ ID NO:9,10,11或12的多聚核糖核酸。
48.一种用于制备转基因猪类动物的靶向载体,所述转基因猪类动物的基因组包括编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸,所述载体包含的多聚核糖核酸包括以下多聚核糖核酸中的至少一种:SEQ ID NO:7的多聚核糖核酸,SEQ ID NO:3或4的多聚核糖核酸,或SEQ ID NO:5或6的多聚核糖核酸;
其中,所述转基因猪类动物不表达全部的或部分的编码所述转基因猪类动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。
49.根据权利要求48所述的靶向载体,其特征在于,所述多聚核糖核酸被插入在SEQ ID NO:14的序列的5’臂与SEQ ID NO:15的序列的3’臂之间。
50.根据权利要求48所述的靶向载体,其特征在于,所述多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:7的多聚核糖核酸,SEQ ID NO:3或4的多聚核糖核酸,以及SEQ ID NO:5或6的多聚核糖核酸。
51.根据权利要求48所述的靶向载体,其特征在于,所述多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:13的多聚核糖核酸。
52.一种分离的宿主细胞,其特征在于,其包括根据权利要求48-51中任一项所述的靶向载体。