cfDNA建库的接头、引物组、试剂盒和建库方法与流程

文档序号:12697126阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于cfDNA建库的接头,其特征在于,所述接头包括单链接头A和双链接头B;

所述单链接头A的序列为SEQ ID NO.1,且3′端用生物素修饰;

所述双链接头B包括接头B1和接头B2,所述接头B1和接头B2的序列分别为SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3。

2.一种用于cfDNA建库的引物组,其特征在于,所述引物组包括SEQ ID NO.4-6所示的序列。

3.一种cfDNA建库试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的接头和权利要求2所述的引物组。

4.如权利要求3所述的cfDNA建库试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括单链连接酶和用于单链连接酶的缓冲液。

5.如权利要求3所述的cfDNA建库试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括T4DNA聚合酶和用于T4DNA聚合酶的缓冲液。

6.一种cfDNA建库的方法,其特征在于:包括如下步骤:

(1)对cfDNA进行去磷酸化与变性,得单链cfDNA;

(2)连接单链cfDNA与3′端被修饰的单链接头A,得3′端被修饰的单链连接产物;

(3)单向扩增第一次连接产物,得双链cfDNA;

(4)连接双链cfDNA与双链接头B,得双链连接产物;

(5)除去双链连接产物中3′端被修饰的一条链;

(6)文库质检。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1