cfDNA建库的接头、引物组、试剂盒和建库方法与流程

文档序号:12697126阅读:来源:国知局
技术总结
本发明属于分子基因学领域,具体涉及一种cfDNA建库的接头、引物组、试剂盒和建库方法;接头包括单链接头A和双链接头B;引物组包括SEQ ID NO.4‑6所示的序列;试剂盒包括所述接头和引物组;建库方法包括如下步骤:(1)对cfDNA进行去磷酸化与变性,得单链cfDNA;(2)连接单链cfDNA与3′端被修饰的单链接头A,得3′端被修饰的单链连接产物;(3)单向扩增第一次连接产物,得双链cfDNA;(4)连接双链cfDNA与双链接头B,得双链连接产物;(5)除去双链连接产物中3′端被修饰的一条链;(6)文库质检;本发明首先将得到的ctDNA变性使其由双链变成单链,然后通过单链连接酶连接接头,使得几乎所有的ctDNA都能被捕获,避免了ctDNA的损耗,从而提高了检测灵敏度。

技术研发人员:岳磊;宋礼华;杨楠;宋社吾;饶海军;华晓君
受保护的技术使用者:安徽安科生物工程(集团)股份有限公司
文档号码:201710116455
技术研发日:2017.03.01
技术公布日:2017.06.20

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