一种1/2水胞磷胆碱钠化合物的制作方法

本发明属于化学工程医药结晶
技术领域：
，涉及一种1/2水胞磷胆碱钠化合物及其制法。
背景技术：
：胞磷胆碱钠(citicolinesodium)是磷脂类磷脂酰胆碱的前体物质，为卵磷脂合成的必要辅酶。其分子式为c14h25n4nao11p2，分子量为510.31，cas号为33818-15-4，结构式为：目前制备胞磷胆碱钠的方法有：(1)化学合成：利用cmp(5'-胞苷酸)和磷酸胆碱作为反应物，对-甲苯磺酰氯作为缩合剂，在n-二甲基甲酰胺存在下进行缩合制备，用717(cl-)型阴离子交换柱和711(cl-)型浓缩柱分离液酒精沉淀制备胞磷胆碱钠，其缺点是难与缩合剂分离，产品不适合药用；(2)酶促合成：抽提细胞液用胞苷三磷酸(ctp)和磷酸胆碱生物合成胞磷胆碱钠，酶和细胞抽提液合成需要底物ctp，合成价格高；(3)游离细胞和酵母无细胞抽提液合成胞磷胆碱钠，游离酵母合成需要大量酵母，且只能一次性使用，具有很多缺点。因此，有必要寻找成本更低、操作工艺更简单的胞磷胆碱钠的制备方法。目前，利用上述方法制备的胞磷胆碱钠存在流动性差、杂质偏高、易吸湿、稳定性较差等问题。因为其对水分敏感，而且所述产品规格都涉及水含量，所以胞磷胆碱必须在特殊的条件下处理，包括低湿度环境，以提供并维持相对较低的水含量。这些问题的存在，一方面导致产品质量较差且不稳定，临床用药不安全且无法与国外进口原料竞争，另一方面这种情况将造成人力、物力、财力的严重浪费。为解决上述问题，临床医学界迫切需要寻找一种更稳定、更安全、副作用更小的胞磷胆碱钠化合物。现有技术对胞磷胆碱钠制备及结晶方法的大量研究，为其更安全有效的应用提供了保证。而在长期的生产和科研实践中，本发明人对胞磷胆碱钠进行了更为深入的研究，得到了一种胞磷胆碱钠的新溶剂化物，每摩尔胞磷胆碱钠化合物含1/2摩尔水。本发明的胞磷胆碱钠化合物具有流动性好，杂质含量低，引湿性低，溶解速度快，稳定性好的特点，具有更广泛地应用前景。技术实现要素：本发明公开了胞磷胆碱钠的一种新的溶剂化物，更具体的为1/2水胞磷胆碱钠化合物，即每摩尔胞磷胆碱钠化合物含1/2摩尔水，分子式为c14h25n4nao11p2·1/2h2o，分子量为519.31，结构式如下：本发明所述的1/2水胞磷胆碱钠化合物，具体制备步骤如下：向反应器中加入纯化水和丙酮，搅匀。称取胞磷胆碱钠粗品、依地酸钙钠、亚硫酸钠依次加入反应器中，室温下搅拌至溶解；向其中加入活性炭，搅拌吸附，过滤。用酸调节滤液ph，搅匀；向上述溶液中缓慢滴加异丙醇，待异丙醇滴加完毕，控温，静置析晶，过滤，用异丙醇洗涤过滤物，真空干燥，得1/2水胞磷胆碱钠化合物。优选地，上述制备方法中，所述各步反应搅拌速度为150～500r/min；优选250～300r/min。优选地，上述制备方法中，所述纯化水和丙酮的体积比为1：(1～5)；优选1：3。优选地，上述制备方法中，所述用酸调节滤液ph值范围为1～5；优选1.5～2.0。优选地，上述制备方法中，所述异丙醇和反应溶液的体积比为1：(1～6)；优选1：4。优选地，上述制备方法中，所述滴加异丙醇的时间为0.5～3h；优选时间为1～1.5h。优选地，上述制备方法中，所述静置析晶温度为0～15℃，时间为0.5～3h；优选析晶温度为5～10℃，时间为1～1.5h。优选地，上述制备方法中，所述真空干燥温度为30～80℃，干燥时间为1～4h；优选温度为50～70℃，干燥时间为2～3h。卡尔费休法是各种测定物质中水分方法中最为专一、准确的方法之一，已被列为许多物质中水分测定的标准方法，尤其对有机化合物，结果准确可靠。本发明公开的胞磷胆碱钠化合物用卡尔费休法测定水分重量含量在1.65～1.80％之间。理论水含量为1.73％，可推断本发明每个胞磷胆碱钠化合物含有1/2摩尔水。本发明所述的1/2水胞磷胆碱钠化合物，其tg分析结果显示，胞磷胆碱钠化合物的失重百分率计算结果可知，失重约1.71％，胞磷胆碱钠分子中水的理论百分含量是1.73％，参照费休氏法测得胞磷胆碱钠水分含量为1.65～1.80％，而实验测得tg失重为1.71％，与理论水含量基本相符。因此可推断胞磷胆碱钠tg失重是脱除水所致，且每摩尔胞磷胆碱钠含1/2摩尔水。如附图1所示。数据由热分析-质谱联用仪(netzschsta449c)分析得到。分析条件为：样品2～10mg，氧化铝坩埚，高纯氮气做反应气和保护气，流量分别为40ml/min和30ml/min，升温速率10k/min，温度测试范围为25～400℃。样品分解温度约为272.0℃。本发明所述的1/2水胞磷胆碱钠化合物，其红外光谱在波数为3419.5±2cm-1，2665.9±2cm-1，1654.6±2cm-1，1611.9±2cm-1，1487.3±2cm-1，1380.1±2cm-1，1234.7±2cm-1，1135.3±2cm-1，1071.7±2cm-1，936.5±2cm-1，781.7±2cm-1处有特征吸收峰，如附图2所示。红外光谱测试条件为：安捷伦cary630，溴化钾压片。本发明所述的1/2水胞磷胆碱钠化合物，其粉末x射线衍射图谱在衍射角2θ为6.07±0.2°，6.54±0.2°，9.68±0.2°，14.60±0.2°，15.79±0.2°，17.57±0.2°，19.40±0.2°，24.32±0.2°，26.49±0.2°处有特征衍射峰，衍射角的相对衍射强度分别为100，93.05，27.66，20.12，15.04，17.31，32.13，27.70，13.58。如附图3所示。x射线粉末衍射测试条件：荷兰panalytical公司的empyrean(锐影)x射线衍射仪，cukα辐射，光管电压40kv，灯丝电流300ma，连续扫描，步长0.02°，扫描速度8°/min，扫描范围为2～50°。本发明所述的1/2水胞磷胆碱钠化合物，其dsc分析结果显示，在约256.5℃有吸热峰，在约273.9℃有吸热峰。如附图4所示。dsc数据由热分析-质谱联用仪(netzschsta449c)分析得到，分析条件为：样品2～10mg，氧化铝坩埚，高纯氮气做反应气和保护气，流量分别为40ml/min和30ml/min。升温速率10℃/min，温度范围25～400℃。本发明的进一步的目的，提供了一种含1/2水胞磷胆碱钠化合物的药物组合物。优选地，所述药物组合物包含1/2水胞磷胆碱钠化合物和药学上接受的赋形剂。更优选地，药物组合物选自药学上可接受的剂型。附图说明图11/2水胞磷胆碱钠化合物的tg分析图；图21/2水胞磷胆碱钠化合物的傅里叶红外光谱图；图31/2水胞磷胆碱钠化合物的x射线衍射图谱；图41/2水胞磷胆碱钠化合物的dsc分析图。具体实施方式下面将通过具体实施方式对本发明做进一步说明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围中，本领域的技术人员应理解，对本
发明内容所做的等同替换，或相应的改进，仍属于本发明的保护范围之内。实施例1：1/2水胞磷胆碱钠化合物的制备制备过程：向反应器中加入纯化水100ml和丙酮300ml，搅匀。称取胞磷胆碱钠粗品100.11g、依地酸钙钠0.10g、亚硫酸钠0.10g依次加入反应器中，室温下搅拌至溶解。向其中加入活性炭0.25g，搅拌吸附30min，过滤。用1mol/l的盐酸溶液调节滤液ph值至2.0，控制温度在15～20℃，向上述溶液中缓慢滴加异丙醇125ml，待异丙醇滴加完毕，控制温度在5～10℃，静置析晶1.5h，过滤，用异丙醇80ml×2洗涤过滤物，将过滤物放入置有五氧化二磷的真空干燥箱(-0.09mpa)24h后，升温到60℃干燥2.5h，得1/2水胞磷胆碱钠化合物96.21g。结果：红外光谱在波数为3419.5cm-1，2665.9cm-1，1654.6cm-1，1611.9cm-1，1487.3cm-1，1380.1cm-1，1234.7cm-1，1135.3cm-1，1071.7cm-1，936.5cm-1，781.7cm-1处有特征吸收峰。粉末x射线衍射图谱在衍射角2θ为6.07°，6.54°，9.68°，14.60°，15.79°，17.57°，19.40°，24.32°，26.49°处有特征衍射峰，衍射角的相对衍射强度分别为100，93.05，27.66，20.12，15.04，17.31，32.13，27.70，13.58。hplc法检测纯度为99.91％；卡尔费休法测定水分为1.70％，热重分析失重为1.71％，这样与含有的1/2个水的结果(理论值1.73％)基本一致；元素分析理论值为：c：32.38％，h：5.04％，na：4.43％，n：10.79％，o：35.43％，p：11.94％；实测值为：c：32.35％，h：5.05％，n：4.40％，na：10.80％，o：35.47％，s：11.93％。实施例2：1/2水胞磷胆碱钠化合物的制备制备过程：向反应器中加入纯化水100ml和丙酮400ml，搅匀。称取胞磷胆碱钠粗品100.05g、依地酸钙钠0.12g、亚硫酸钠0.12g依次加入反应器中，室温下搅拌至溶解。向其中加入活性炭0.31g，搅拌吸附30min，过滤。用1mol/l的盐酸溶液调节滤液ph值至1.5，控制温度在15～20℃，向上述溶液中缓慢滴加异丙醇160ml，待异丙醇滴加完毕，，控制温度在0～5℃，静置析晶1h，过滤，用异丙醇80ml×2洗涤过滤物，将过滤物放入置有五氧化二磷的真空干燥箱(-0.09mpa)24h后，升温到70℃干燥2h，得1/2水胞磷胆碱钠化合物95.79g。结果：红外光谱在波数为3419.4cm-1，2665.7cm-1，1654.3cm-1，1611.5cm-1，1487.2cm-1，1380.4cm-1，1234.5cm-1，1135.6cm-1，1071.5cm-1，936.3cm-1，781.4cm-1处有特征吸收峰。粉末x射线衍射图谱在衍射角2θ为6.02°，6.55°，9.69°，14.62°，15.77°，17.58°，19.42°，24.34°，26.50°处有特征衍射峰，衍射角的相对衍射强度分别为100，92.32，26.58，22.35，14.70，18.29，34.15，28.45，12.17。hplc法检测纯度为99.92％；卡尔费休法测定水分为1.65％，热重分析失重为1.70％，这样与含有的1/2个水的结果(理论值1.73％)基本一致；元素分析理论值为：c：32.38％，h：5.04％，na：4.43％，n：10.79％，o：35.43％，p：11.94％；实测值为：c：32.39％，h：5.03％，n：4.42％，na：10.81％，o：35.45％，s：11.90％。实施例3：胞磷胆碱钠冻干制剂的制备取实施例2制备的1/2水胞磷胆碱钠化合物，采用此原料制备胞磷胆碱钠冻干制剂，规格0.25g。处方：制备过程：1、配液(1)向配液罐中加入处方量80％的注射用水；(2)加入处方量的1/2水胞磷胆碱钠化合物，搅拌溶解完全，补加注射用水至全量；(3)将药液中加入0.05％药用炭(供注射用)，搅拌吸附15min；(4)用0.45μm滤膜过滤脱碳；(5)用0.22μm滤膜过滤脱碳。2、灌装：按照理论装量灌装于中硼硅玻璃管状注射剂瓶中，压半塞；3、冷冻干燥；4、轧盖、检验。用卡尔费休法测定胞磷胆碱钠化合物冻干粉含水量结果为1.70％，冻干前胞磷胆碱钠化合物水分测定结果为1.65％，与含有的1/2摩尔水的结果(理论值1.73％)基本一致；结果表明，冻干后胞磷胆碱钠化合物水分未丢失，推断每摩尔化合物所含水应为1/2摩尔结晶水。对比例1：胞磷胆碱钠1水合物的制备根据现有技术文献cn1284880a中实施例的方法制备胞磷胆碱钠1水合物取市售胞磷胆碱钠原料，直接暴露于40℃，75％rh的条件下4小时。卡尔费休法检测胞磷胆碱钠中水的含量为3.45％，而胞磷胆碱钠1水合物理论水的含量为3.41％，基本一致，可以确定该胞磷胆碱钠化合物中含1摩尔水。hplc法检测纯度为99.46％；元素分析理论值为：c：31.83％，h：5.15％，na：4.35％，n：10.61％，o：36.34％，p：11.73％；实测值为：c：31.85％，h：5.14％，na：4.37％，n：10.60％，o：36.32％，p：11.74％。对比例2：根据现有技术文献cn103509073a制备胞磷胆碱钠化合物采用该专利文献实施例2相同的方法制备过程：1、将胞磷胆碱钠粗品45.1g加入甲醇与异丙醇(体积比1:4)配制的300ml混合溶剂中的，加热至30℃，搅拌，过滤，得到粗品溶液，备用。2、将丙酮与氯仿按体积比1:3的比例配制结晶溶剂，所述结晶溶剂体积为400ml，备用。3、搅拌下，向步骤1的粗品溶液中加入步骤2的结晶溶剂，有固体析出；滴加完毕后，继续在搅拌下滴加氯仿，滴加的体积为胞磷胆碱钠粗品重量的5倍，整个滴加过程控制溶液温度为30℃；滴毕，降温至5℃静置1h，过滤，洗涤，50℃真空干燥3h，得胞磷胆碱钠化合物41.2g。hplc法检测纯度为99.48％；卡尔费休法测定水分为0.95％，热重分析失重为0.98％；元素分析理论值为：c：32.95％，h：4.94％，na：4.51％，n：10.98％，o：34.49％，p：12.14％；实测值为：c：32.98％，h：4.93％，na：4.50％，n：10.96％，o：34.48％，p：12.16％。试验例1流动性考察对实施例1、对比例1和对比例2所制备胞磷胆碱钠化合物的流动性进行研究。休止角检测方法为将颗粒置于固定的漏斗中，使其自由落至水平面上，形成一底部半径为r的圆盘形堆积体，测定堆积体的高度为h，根据公式tanθ＝h/r计算。检测结果见下表：结果：本发明实施例1制备的1/2水胞磷胆碱钠化合物的流动性明显好于现有技术对比例1、对比例2制备的的胞磷胆碱钠化合物，在制剂的制备过程中，可以满足多种制备方式的需要。试验例2纯度检测对本发明实施例1、对比例1和对比例2所制备的胞磷胆碱钠化合物进行了纯度和有关物质检测。检测结果见下表：结果：本发明实施例1制备的1/2水胞磷胆碱钠化合物纯度高于对比例1和对比例2制备的胞磷胆碱钠化合物，有关物质低于对比例1、对比例2制备的胞磷胆碱钠化合物，本发明产品质量较好。试验例3引湿性考察对本发明实施例1、对比例1和对比例2所制备的胞磷胆碱钠化合物引湿性进行了研究。考察条件为相对湿度75％(rh)与相对湿度92.5％(rh)，温度为40℃，考察指标为胞磷胆碱钠中的含水量。检测结果见下表：结果：本发明实施例1制备的1/2水胞磷胆碱钠化合物引湿性明显低于现有技术对比例1、对比例2制备的胞磷胆碱钠化合物。说明本发明所述的1/2水胞磷胆碱钠化合物稳定性良好，适合药物制剂的制造及长期储存。试验例4溶解速度考察将实施例1、对比例1和对比例2所制备的胞磷胆碱钠化合物分别溶于水中，振摇，通过溶解时间比较溶解速度的快慢。检测结果见下表：试验例实施例1对比例1对比例2称样量(g)2.52.52.5加水量(ml)505050溶解时间(min)1.0±0.33.7±0.84.5±0.6结果：本发明实施例1制备的1/2水胞磷胆碱钠化合物的溶解速度明显好于对比例1和对比例2的胞磷胆碱钠化合物。试验例5稳定性研究1、高温稳定性评价取实施例1和对比例1、对比例2所制备的胞磷胆碱钠化合物置60℃条件下放置10天，于第10天取样。考察指标为样品的性状、水分、有关物质及含量。检测结果见下表：结果：由上述高温试验可看出，本发明实施例1的水分基本未发生变化，对比例1和对比例2的水分明显降低，推断本实施例1制备的样品所含水分为结晶水，对比例1和对比例2制备的样品所含水分为吸附水。从上述结果可看出，本发明实施例1制备的样品其他各项检测指标明显优于对比例1、对比例2制备的样品，表明本发明的1/2水胞磷胆碱钠化合物稳定性好。2、加速稳定性评价取实施例1、对比例1和对比例2所制备的胞磷胆碱钠化合物，考察条件为温度40℃±2℃。放置6个月，分别于0、1、2、3、6月末取样。考察指标为性状、溶液的澄清度与颜色、水分、有关物质及含量。检测结果见下表：结果：通过加速试验结果可看出，本发明实施例1的水分未发生明显变化，对比例1和对比例2的水分明显降低，可进一步推断本实施例1制备的样品所含水分为结晶水，对比例1和对比例2制备的样品所含水分为吸附水；本发明实施例1的其他各项检测指标也明显优于对比例1和对比例2，充分说明了本发明制备的1/2水胞磷胆碱钠化合物稳定性更好，质量优于同类产品。本发明的胞磷胆碱钠化合物经多个试验证明其每摩尔化合物含1/2摩尔结晶水；经多项指标检验和稳定性试验考察表明其稳定性好，质量远远优于现有技术的产品，本发明具有预料不到的技术效果，质量可靠。当前第1页12