本发明涉及药物有效成分提取技术领域，具体涉及一种川楝素的提取方法。
背景技术：
川楝素(toosendanin，tsn，分子式为c30h38o11，分子量574.60)是从楝属植物的根皮、枝皮和果实中提取出的四环三萜类化合物，为无色针状结晶，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶，微溶于苯及氯仿，几乎不溶于水及石油醚。tsn具有广泛的药理作用和杀虫活性，其主要药理作用为：驱蛔虫、抑制中枢神经系统、使心脏收缩节律异常、对消化系统有明显的影响及抗肉毒中毒作用等。最近有研究表明，tsn可以引发细胞分化和凋亡，抑制肿瘤细胞增殖，具有潜在的抗肿瘤作用。
传统提取tsn的方法主要有机溶剂提取法和水提取法，近年来在传统方法的基础上产生了超临界co2萃取法、微波辅助的有机溶剂提取法和超声波辅助的有机溶剂提取法。虽然方法上得到一定的改进，但依然存在提取得率不高、杂质多、纯度低等问题。
技术实现要素：
为了解决上述问题，本发明提供一种川楝素的提取方法。本发明通过超声波辅助动态逆流提取、澄清剂澄清、大孔吸附树脂吸附、石油醚沉淀等步骤对川楝素进行提取，能够有效提高川楝素的纯度和提取率，提取得到的川楝素得率高，杂质少，纯度高。
本发明通过以下技术方案实现：
一种川楝素的提取方法，包括以下步骤：
（1）：将楝树的枝皮和树皮洗净，晾干，粉碎；
（2）：将步骤（1）粉碎后的物料放入动态逆流萃取设备中，加入80%乙醇，在超声波辅助下，提取15-25min，过滤，得粗提液；
（3）：向步骤（2）的粗提液中加入天然中药澄清剂kbt-ztc，当絮凝物不再增加时，过滤，滤液中加入0.1-0.3g/l活性炭进行脱色15-20min，离心，上清液旋转蒸发浓缩，得浸膏；
（4）：将步骤（3）的浸膏用乙醇溶解，溶液经大孔吸附树脂吸附，解吸时先用蒸馏水进行除杂，再用甲醇进行洗脱，收集甲醇洗脱液，减压浓缩，得粗提物；
（5）：将步骤（4）的粗提物用甲醇溶解，再加入石油醚至溶液变浑浊，静置过夜，将析出的沉淀用蒸馏水洗涤，烘干，得川楝素粗品；
（6）：将步骤（5）的川楝素粗品用3-6倍重量无水乙醇溶解，旋转蒸发，回收乙醇，得川楝素纯品。
作为本发明的进一步说明，步骤（1）所述楝树的枝皮和树皮粉碎至50-80目。
作为本发明的进一步说明，步骤（2）所述料液比为1:10-15。
作为本发明的进一步说明，步骤（2）所述超声波的频率为250-450w。
作为本发明的进一步说明，步骤（2）所述提取的温度为30-40℃。
作为本发明的进一步说明，步骤（3）所述天然中药澄清剂kbt-ztc为科立尔生物科技有限公司生产的澄清剂，加入量为2-5g/l。
作为本发明的进一步说明，步骤（4）所述甲醛为60-90%甲醛。
与现有技术相比，本发明的优点及有益效果为：
1、本发明采用动态逆流法提取川楝素，在提取过程中，乙醇始终与楝树物料保持相对浓度，使川楝素的溶出量和溶出效率提高，同时，极大的减少了溶剂乙醇的用量；在超声波的辅助下，本发明的提取消耗的时间短，效率高。
2、本发明引入天然中药澄清剂kbt-ztc，对在乙醇提取的过程中存在的蛋白质、油脂、淀粉等大分子杂质，起到良好的澄清作用；提取液经过活性炭脱色，去除了色素，为后续分离纯化提供良好的基础。
3、本发明利用大孔树脂对川楝素进行分离提纯，将川楝素与杂质分离，提高川楝素的纯度。
4、本发明通过超声波辅助动态逆流提取、澄清剂澄清、大孔吸附树脂吸附、石油醚沉淀等步骤对川楝素进行提取，能够有效提高川楝素的纯度和提取率，提取得到的川楝素得率高，杂质少，纯度高。
5、本发明川楝素的提取率为1.35-1.60mg/g。
具体实施方式
下面将结合具体实施例对本发明进一步详细说明，但不限于本发明的保护范围。
实施例1
一种川楝素的提取方法，包括以下步骤：
（1）：将楝树的枝皮和树皮洗净，晾干，粉碎至50目；
（2）：将步骤（1）粉碎后的物料放入动态逆流萃取设备中，加入80%乙醇，料液比为1:10，在超声波的频率为250w、温度30℃的超声波辅助下，提取25min，过滤，得粗提液；
（3）：向步骤（2）的粗提液中加入科立尔生物科技有限公司生产的天然中药澄清剂kbt-ztc，加入量为2g/l，当絮凝物不再增加时，过滤，滤液中加入0.1g/l活性炭进行脱色15min，离心，上清液旋转蒸发浓缩，得浸膏；
（4）：将步骤（3）的浸膏用乙醇溶解，溶液经大孔吸附树脂吸附，解吸时先用蒸馏水进行除杂，再用60%甲醇进行洗脱，收集甲醇洗脱液，减压浓缩，得粗提物；
（5）：将步骤（4）的粗提物用甲醇溶解，再加入石油醚至溶液变浑浊，静置过夜，将析出的沉淀用蒸馏水洗涤，烘干，得川楝素粗品；
（6）：将步骤（5）的川楝素粗品用3倍重量无水乙醇溶解，旋转蒸发，得川楝素纯品。
通过高效液相色谱检测，本实施例川楝素的提取率为1.352%。
实施例2
一种川楝素的提取方法，包括以下步骤：
（1）：将楝树的枝皮和树皮洗净，晾干，粉碎至80目；
（2）：将步骤（1）粉碎后的物料放入动态逆流萃取设备中，加入80%乙醇，料液比为1:15，在超声波的频率为450w、温度40℃的超声波辅助下，提取15min，过滤，得粗提液；
（3）：向步骤（2）的粗提液中加入科立尔生物科技有限公司生产的天然中药澄清剂kbt-ztc，加入量为5g/l，当絮凝物不再增加时，过滤，滤液中加入0.3g/l活性炭进行脱色20min，离心，上清液旋转蒸发浓缩，得浸膏；
（4）：将步骤（3）的浸膏用乙醇溶解，溶液经大孔吸附树脂吸附，解吸时先用蒸馏水进行除杂，再用90%甲醇进行洗脱，收集甲醇洗脱液，减压浓缩，得粗提物；
（5）：将步骤（4）的粗提物用甲醇溶解，再加入石油醚至溶液变浑浊，静置过夜，将析出的沉淀用蒸馏水洗涤，烘干，得川楝素粗品；
（6）：将步骤（5）的川楝素粗品用6倍重量无水乙醇溶解，旋转蒸发，得川楝素纯品。
通过高效液相色谱检测，本实施例川楝素的提取率为1.479%。
实施例3
一种川楝素的提取方法，包括以下步骤：
（1）：将楝树的枝皮和树皮洗净，晾干，粉碎至60目；
（2）：将步骤（1）粉碎后的物料放入动态逆流萃取设备中，加入80%乙醇，料液比为1:12，在超声波的频率为300w、温度35℃的超声波辅助下，提取20min，过滤，得粗提液；
（3）：向步骤（2）的粗提液中加入科立尔生物科技有限公司生产的天然中药澄清剂kbt-ztc，加入量为3g/l，当絮凝物不再增加时，过滤，滤液中加入0.2g/l活性炭进行脱色18min，离心，上清液旋转蒸发浓缩，得浸膏；
（4）：将步骤（3）的浸膏用乙醇溶解，溶液经大孔吸附树脂吸附，解吸时先用蒸馏水进行除杂，再用80%甲醇进行洗脱，收集甲醇洗脱液，减压浓缩，得粗提物；
（5）：将步骤（4）的粗提物用甲醇溶解，再加入石油醚至溶液变浑浊，静置过夜，将析出的沉淀用蒸馏水洗涤，烘干，得川楝素粗品；
（6）：将步骤（5）的川楝素粗品用4倍重量无水乙醇溶解，旋转蒸发，得川楝素纯品。
通过高效液相色谱检测，本实施例川楝素的提取率为1.560%。
实施例4
一种川楝素的提取方法，包括以下步骤：
（1）：将楝树的枝皮和树皮洗净，晾干，粉碎至60目；
（2）：将步骤（1）粉碎后的物料放入动态逆流萃取设备中，加入80%乙醇，料液比为1:13，在超声波的频率为400w、温度37℃的超声波辅助下，提取18min，过滤，得粗提液；
（3）：向步骤（2）的粗提液中加入科立尔生物科技有限公司生产的天然中药澄清剂kbt-ztc，加入量为4g/l，当絮凝物不再增加时，过滤，滤液中加入0.2g/l活性炭进行脱色16min，离心，上清液旋转蒸发浓缩，得浸膏；
（4）：将步骤（3）的浸膏用乙醇溶解，溶液经大孔吸附树脂吸附，解吸时先用蒸馏水进行除杂，再用70%甲醇进行洗脱，收集甲醇洗脱液，减压浓缩，得粗提物；
（5）：将步骤（4）的粗提物用甲醇溶解，再加入石油醚至溶液变浑浊，静置过夜，将析出的沉淀用蒸馏水洗涤，烘干，得川楝素粗品；
（6）：将步骤（5）的川楝素粗品用4倍重量无水乙醇溶解，旋转蒸发，得川楝素纯品。
通过高效液相色谱检测，本实施例川楝素的提取率为1.594%。