一种胎牛血清的提取方法与流程

文档序号:14770100发布日期:2018-06-23 01:19阅读:3507来源:国知局

本发明属于血清制备技术领域,特别涉及一种胎牛血清的提取方法。



背景技术:

血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。

牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛,胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。现有的胎牛血清制备工艺复杂、成本高,且纯度低,不利于体外细胞培养。



技术实现要素:

针对现有技术中存在的技术问题,本发明提供一种胎牛血清的提取方法。

为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案是:一种胎牛血清的提取方法,包括以下步骤:

1)将怀孕9个月的母牛进行剖腹产,产前采用侧卧,剖腹产前进行局部麻醉;

2)手术切口位置选择选择在左腋窝腹壁的五分之二处,切口长为30cm;

3)胎牛拉出子宫后,在洁净室的层流罩下对胎牛进行心脏穿刺采血,心脏穿刺采血时采用消毒后的采血针,采血部位为胎牛的心脏,采血后立即将采集的血液输入带盖瓶体,带盖瓶体的瓶盖中部具有用于采血针穿过的小孔,待将采集的血液输入瓶体后,将带有采血针孔的瓶盖更换为密封瓶盖;

4)将步骤3)中的带盖瓶体放入冷冻离心机中,以3800转/分的转速离心35分钟,析出的血清收集进已经过杀菌的容器内进行保存;

5)将步骤4)中的血清在净化车间进行解冻,解冻温度为恒温27°;

6)对步骤5)中化开的血清进行3次过滤后即得胎牛血清。

作为优选,所述步骤6)中从上到下依次三层微孔过滤膜进行3次过滤均,过滤孔径依次为0.1μm。

与现有技术相比,本发明所具有的有益效果是:本发明提取胎牛血清的工艺简单、易操作,能够保证胎牛血清的性质稳定、生产成本低,胎牛血清纯度高。

具体实施方式

为使本领域技术人员更好的理解本发明的技术方案,下面结合具体实施例对本发明作详细说明。

一种胎牛血清的提取方法,包括以下步骤:

1.一种胎牛血清的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)将怀孕9个月的母牛进行剖腹产,产前采用侧卧,剖腹产前进行局部麻醉;

2)手术切口位置选择选择在左腋窝腹壁的五分之二处,切口长为30cm;

3)胎牛拉出子宫后,在洁净室的层流罩下对胎牛进行心脏穿刺采血,心脏穿刺采血时采用消毒后的采血针,采血部位为胎牛的心脏,采血后立即将采集的血液输入带盖瓶体,带盖瓶体的瓶盖中部具有用于采血针穿过的小孔,待将采集的血液输入瓶体后,将带有采血针孔的瓶盖更换为密封瓶盖;

4)将步骤3)中的带盖瓶体放入冷冻离心机中,以3800转/分的转速离心35分钟,析出的血清收集进已经过杀菌的容器内进行保存;

5)将步骤4)中的血清在净化车间进行解冻,解冻温度为恒温27°;

6)对步骤5)中化开的血清进行3次过滤后即得胎牛血清。

本实施例中,步骤6)中从上到下依次三层微孔过滤膜进行3次过滤均,过滤孔径依次为0.1μm。

本发明提取胎牛血清的工艺简单、易操作,能够保证胎牛血清的性质稳定、生产成本低,胎牛血清纯度高。

以上实施例仅为本发明的示例性实施例,不用于限制本发明,本发明的保护范围由权利要求书限定。本领域技术人员可以在本发明的实质和保护范围内,对本发明做出各种修改或等同替换,这种修改或等同替换也应视为落在本发明的保护范围内。

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