技术特征:
技术总结
本发明提供了一种利用类弹性蛋白elp构建活性绵羊β‑防御素sbd‑1体外表达的方法,属分子生物学领域,是通过 RT‑PCR得到克隆了编码sbd‑1的成熟肽全基因序列,与elp相连后,克隆入原核表达载体pet‑22b中,构成表达载体pet‑22b‑elp‑sbd‑1;利用大肠杆菌偏爱密码子和 Gen Script rare codon analysis 软件获得优化密码子优化的elp‑sbd‑1基因序列并人工合成该基因,将重组载体转化BL21(DE3)大肠杆菌,IPTG诱导融合蛋白表达,利用ITC对其纯化,成功获得绵羊β‑防御素sbd‑1。本发明的优点是:利用类弹性蛋白elp具有温度敏感的可逆相变特性,用离心等简单方法分离纯化,作为重组蛋白的纯化标签,为代替抗生素提供理论基础,对大量生产β‑防御素sbd‑1提供方法依据。
技术研发人员:曹贵方;王鑫;智达夫;李喜和;刘默凝;李秀男;魏薇;田志鹏;龙鑫;王大清;张福全
受保护的技术使用者:内蒙古农业大学
技术研发日:2018.04.23
技术公布日:2018.09.14