本发明属于高分子技术领域，尤其涉及一种黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法。
背景技术：
黄曲霉毒素(aft)是一组化学结构类似的化合物，目前已分离鉴定出12种，主要分子型式含b1、b2、g1、g2、m1、m2等。黄曲霉毒素被世界卫生组织(who)的癌症研究机构划定为1类致癌物，是一种毒性极强的剧毒物质。黄曲霉毒素存在于土壤、动植物、各种坚果，特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。
随着人们对食品安全关注度的快速上升，毒素的快速检测已成为国内外研究的发展趋势。但是薄膜层析法、液相色谱法、金标试纸法和免疫亲和柱法具有检测周期长，程序复杂所需试剂繁多，检测费用过高等缺点，已远远不能满足现代检测要求。随着分子印迹技术的发展和真菌毒素检测要求的不断提高，分子印迹技术在真菌毒素检测中的应用越来越广泛。将分子印迹聚合物填充于固相萃取小柱中，可用于样品的分离、纯化和浓缩，与抗体相比，黄曲霉毒素分子印迹聚合物制备步骤简单、稳定性好、使用寿命长。但是目前分子印迹技术的一种印迹方法都只能印迹一种毒素，对于结构存在差异的黄曲霉毒素而言，发展一种适用于多种毒素的印迹方法具有及其重要的科学意义和市场前景。
技术实现要素：
本发明的目的在于：针对上述一种印迹方法都只能印迹一种毒素的现象，导致的一种毒素需要多种的印迹方法，制备复杂、市场前景不好的问题，本发明提供一种黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法。
本发明采用的技术方案根据下：一种黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法，所述黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法包括以下步骤：
(1)以甲基丙烯酸作为功能单体，以黄曲霉毒素作为模板分子，在碱性条件下，使得所述模板分子与所述功能单体混合均匀并形成共价复合物，再加入含双烯键的交联剂、致孔剂，紫外光引发剂，进一步混合均匀，得到预聚液；
(2)所述预聚液通过紫外光照射进行光引发功能单体与交联剂之间、交联剂与交联剂之间的聚合反应从而制得聚合物；
(3)用酸性溶液清除所述聚合物中的模板分子，即制得黄曲霉毒素分子印迹聚合物。
优选地，所述步骤(1)中：模板分子与功能单体的质量比为1:10-1:1000，碱性条件为ph值在7.5以上，交联剂与致孔剂的体积比为1:2-1:10，交联剂与功能单体的质量比为1:1-1:100。
优选地，所述步骤(2)中，通过紫外光照射进行光引发包括以下步骤：将预聚液滴入某容器中，并在其上覆盖掩膜板，在紫外光下曝光5-120s，透光部分因紫外光照射诱发而聚合，而被遮挡的部分则不聚合。
优选地，所述步骤(3)中的酸性溶液为ph值在5以下的乙腈-水溶液或甲醇-水溶液。
优选地，所述黄曲霉毒素为黄曲霉毒素b1、黄曲霉毒素b2、黄曲霉毒素g1、黄曲霉毒素g2；所述交联剂可以是聚乙二醇双丙烯酸酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯或甲叉双丙烯酰胺中至少一种；所述紫外光引发剂是安息香二甲醚、偶氮二异丁腈、1-羟基环己基苯基酮irgacure184或安息香乙醚中至少一种；所述致孔剂是聚乙二醇、1，4-丁二醇或十二醇中至少一种。
优选地，所述掩膜板为多孔、每个孔均含圆环状结构的掩膜板，从而使得预聚液在紫外光照射诱发而聚合后，通过所述掩膜板得到多孔的、环状、聚合物，且聚合物沿着每个孔的外边缘，每个孔的中心则成为空白的区域，所述空白的区域有利于后期的检测。
优选地，所述多孔选择96孔。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
1.本发明通过采用以甲基丙烯酸作为功能单体，以黄曲霉毒素作为模板分子、以含双烯键作为交联剂、致孔剂以及紫外光引发剂，可分别制得黄曲霉毒素b1、黄曲霉毒素b2、黄曲霉毒素g1、黄曲霉毒素g2的分子印迹聚合物，具有重要的科学意义和市场前景；
2.本发明选用的功能单体是ph值调控的单体，碱性条件识别模板，酸性条件下放出模板，因此洗脱时将洗液调整为酸性就可以将模板分子从聚合物中洗脱；本发明的预聚液中含有大量的致孔剂，因此制备的聚合物含有大量的孔洞结构，酸性洗液洗脱下来的模板分子可以轻松的从孔洞中传质出来；
3.本发明采用光聚法制备聚合物，时间很短，可在2min内聚合完成，因此模板分子不会出现变形；
4.本发明案例中使用的掩膜板，可以在96孔内制备圆环状聚合物，识别毒素分子后，反应终止液为强酸性溶液，将环内识别的毒素洗脱，直接在中心空白区检测，从而实现在线识别、在线检测，在线抓取的目的；光聚法制备毒素分子印迹阵列，可以得到各种形貌、结构的印迹阵列。
具体实施方式
本说明书中公开的所有特征，或公开的所有方法或过程中的步骤，除了互相排斥的特征和/或步骤以外，均可以以任何方式组合。
实施例1
本发明采用的技术方案根据下：一种黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法，所述黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法包括以下步骤：
(1)以甲基丙烯酸作为功能单体，以黄曲霉毒素b1作为模板分子，在碱性条件下，使得所述模板分子与所述功能单体混合均匀并形成共价复合物，再加入含双烯键的交联剂、致孔剂，紫外光引发剂，进一步混合均匀，得到预聚液；
(2)所述预聚液通过紫外光照射进行光引发功能单体与交联剂之间、交联剂与交联剂之间的聚合反应从而制得聚合物；
(3)用酸性溶液清除所述聚合物中的模板分子，即制得黄曲霉毒素分子印迹聚合物。
所述步骤(1)中：模板分子与功能单体的质量比为1:10，碱性条件为ph值在7.5以上，交联剂与致孔剂的体积比为1:2，交联剂与功能单体的质量比为1:1。
所述步骤(2)中，通过紫外光照射进行光引发包括以下步骤：将预聚液滴入某容器中，并在其上覆盖掩膜板，在紫外光下曝光5s，透光部分因紫外光照射诱发而聚合，而被遮挡的部分则不聚合。
所述步骤(3)中的酸性溶液为ph值在5以下的乙腈-水溶液或甲醇-水溶液。
所述交联剂可以是聚乙二醇双丙烯酸酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯或甲叉双丙烯酰胺中至少一种；所述紫外光引发剂是安息香二甲醚、偶氮二异丁腈、1-羟基环己基苯基酮irgacure184或安息香乙醚中至少一种；所述致孔剂是聚乙二醇、1，4-丁二醇或十二醇中至少一种。
所述掩膜板为多孔、每个孔均含圆环状结构的掩膜板，从而使得预聚液在紫外光照射诱发而聚合后，通过所述掩膜板得到多孔的、环状、聚合物，且聚合物沿着每个孔的外边缘，每个孔的中心则成为空白的区域，所述空白的区域有利于后期的检测。所述多孔选择96孔。
本发明通过采用以甲基丙烯酸作为功能单体，以黄曲霉毒素b1作为模板分子、以含双烯键作为交联剂、致孔剂以及紫外光引发剂，制得黄曲霉毒素b1分子印迹聚合物，具有重要的科学意义和市场前景。
实施例2
本发明采用的技术方案根据下：一种黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法，所述黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法包括以下步骤：
(1)以甲基丙烯酸作为功能单体，以黄曲霉毒素b2作为模板分子，在碱性条件下，使得所述模板分子与所述功能单体混合均匀并形成共价复合物，再加入含双烯键的交联剂、致孔剂，紫外光引发剂，进一步混合均匀，得到预聚液；
(2)所述预聚液通过紫外光照射进行光引发功能单体与交联剂之间、交联剂与交联剂之间的聚合反应从而制得聚合物；
(3)用酸性溶液清除所述聚合物中的模板分子，即制得黄曲霉毒素分子印迹聚合物。
所述步骤(1)中：模板分子与功能单体的质量比为1:1000，碱性条件为ph值在7.5以上，交联剂与致孔剂的体积比为1:10，交联剂与功能单体的质量比为1:100。
所述步骤(2)中，通过紫外光照射进行光引发包括以下步骤：将预聚液滴入某容器中，并在其上覆盖掩膜板，在紫外光下曝光120s，透光部分因紫外光照射诱发而聚合，而被遮挡的部分则不聚合。
所述步骤(3)中的酸性溶液为ph值在5以下的乙腈-水溶液或甲醇-水溶液。
所述交联剂可以是聚乙二醇双丙烯酸酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯或甲叉双丙烯酰胺中至少一种；所述紫外光引发剂是安息香二甲醚、偶氮二异丁腈、1-羟基环己基苯基酮irgacure184或安息香乙醚中至少一种；所述致孔剂是聚乙二醇、1，4-丁二醇或十二醇中至少一种。
所述掩膜板为多孔、每个孔均含圆环状结构的掩膜板，从而使得预聚液在紫外光照射诱发而聚合后，通过所述掩膜板得到多孔的、环状、聚合物，且聚合物沿着每个孔的外边缘，每个孔的中心则成为空白的区域，所述空白的区域有利于后期的检测。所述多孔选择96孔。
本发明通过采用以甲基丙烯酸作为功能单体，以黄曲霉毒素b2作为模板分子、以含双烯键作为交联剂、致孔剂以及紫外光引发剂，制得黄曲霉毒素b2分子印迹聚合物，具有重要的科学意义和市场前景。
实施例3
本发明采用的技术方案根据下：一种黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法，所述黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法包括以下步骤：
(1)以甲基丙烯酸作为功能单体，以黄曲霉毒素g1作为模板分子，在碱性条件下，使得所述模板分子与所述功能单体混合均匀并形成共价复合物，再加入含双烯键的交联剂、致孔剂，紫外光引发剂，进一步混合均匀，得到预聚液；
(2)所述预聚液通过紫外光照射进行光引发功能单体与交联剂之间、交联剂与交联剂之间的聚合反应从而制得聚合物；
(3)用酸性溶液清除所述聚合物中的模板分子，即制得黄曲霉毒素分子印迹聚合物。
所述步骤(1)中：模板分子与功能单体的质量比为1:500，碱性条件为ph值在7.5以上，交联剂与致孔剂的体积比为1:6，交联剂与功能单体的质量比为1:50。
所述步骤(2)中，通过紫外光照射进行光引发包括以下步骤：将预聚液滴入某容器中，并在其上覆盖掩膜板，在紫外光下曝光68s，透光部分因紫外光照射诱发而聚合，而被遮挡的部分则不聚合。
所述步骤(3)中的酸性溶液为ph值在5以下的乙腈-水溶液或甲醇-水溶液。
所述交联剂可以是聚乙二醇双丙烯酸酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯或甲叉双丙烯酰胺中至少一种；所述紫外光引发剂是安息香二甲醚、偶氮二异丁腈、1-羟基环己基苯基酮irgacure184或安息香乙醚中至少一种；所述致孔剂是聚乙二醇、1，4-丁二醇或十二醇中至少一种。
所述掩膜板为多孔、每个孔均含圆环状结构的掩膜板，从而使得预聚液在紫外光照射诱发而聚合后，通过所述掩膜板得到多孔的、环状、聚合物，且聚合物沿着每个孔的外边缘，每个孔的中心则成为空白的区域，所述空白的区域有利于后期的检测。所述多孔选择96孔。
本发明通过采用以甲基丙烯酸作为功能单体，以黄曲霉毒素g1作为模板分子、以含双烯键作为交联剂、致孔剂以及紫外光引发剂，制得黄曲霉毒素g1分子印迹聚合物，具有重要的科学意义和市场前景。
实施例4
本发明采用的技术方案根据下：一种黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法，所述黄曲霉毒素分子印迹聚合物的制备方法包括以下步骤：
(1)以甲基丙烯酸作为功能单体，以黄曲霉毒素g2作为模板分子，在碱性条件下，使得所述模板分子与所述功能单体混合均匀并形成共价复合物，再加入含双烯键的交联剂、致孔剂，紫外光引发剂，进一步混合均匀，得到预聚液；
(2)所述预聚液通过紫外光照射进行光引发功能单体与交联剂之间、交联剂与交联剂之间的聚合反应从而制得聚合物；
(3)用酸性溶液清除所述聚合物中的模板分子，即制得黄曲霉毒素分子印迹聚合物。
所述步骤(1)中：模板分子与功能单体的质量比为1:600，碱性条件为ph值在7.5以上，交联剂与致孔剂的体积比为1:7，交联剂与功能单体的质量比为1:75。
所述步骤(2)中，通过紫外光照射进行光引发包括以下步骤：将预聚液滴入某容器中，并在其上覆盖掩膜板，在紫外光下曝光88s，透光部分因紫外光照射诱发而聚合，而被遮挡的部分则不聚合。
所述步骤(3)中的酸性溶液为ph值在5以下的乙腈-水溶液或甲醇-水溶液。
所述交联剂可以是聚乙二醇双丙烯酸酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯或甲叉双丙烯酰胺中至少一种；所述紫外光引发剂是安息香二甲醚、偶氮二异丁腈、1-羟基环己基苯基酮irgacure184或安息香乙醚中至少一种；所述致孔剂是聚乙二醇、1，4-丁二醇或十二醇中至少一种。
所述掩膜板为多孔、每个孔均含圆环状结构的掩膜板，从而使得预聚液在紫外光照射诱发而聚合后，通过所述掩膜板得到多孔的、环状、聚合物，且聚合物沿着每个孔的外边缘，每个孔的中心则成为空白的区域，所述空白的区域有利于后期的检测。所述多孔选择96孔。
本发明通过采用以甲基丙烯酸作为功能单体，以黄曲霉毒素g2作为模板分子、以含双烯键作为交联剂、致孔剂以及紫外光引发剂，制得黄曲霉毒素g2的分子印迹聚合物，具有重要的科学意义和市场前景。