一种用于保健酒及其饮料和制备方法与流程

文档序号:17157467发布日期:2019-03-20 00:11阅读:151来源:国知局

本发明属于药酒领域,特别涉及一种保健酒及其制法。



背景技术:

保健酒由于其特殊的功能特点而在酒类市场竞争中不断发展,其市场需求不断增加,很多高端的白酒厂家也纷纷投入保健酒的研发与销售,目前,市场上的保健酒主要存在以下几个方面的问题:(1)乱用药材,有些药酒采用的多种药材功效过度重叠,甚至各成分间相克相消,降低了药酒的药效;(2)保健酒多以治疗疾病为目标,健康人群长期饮用易产生不良反应,甚至产生毒副作用。



技术实现要素:

为了解决现有技术中保健酒药效差、无法长期饮用等问题,本发明提供了一种保健酒及其制法,该保健酒能够用于提高人体免疫力,对人体无毒无害,可长期饮用。

本发明具体技术方案如下:

本发明提供了一种保健酒,该保健酒主要由下列重量份的原料制备而成:

本发明通过大量的试验得出,采用以上原料药制成的保健酒能够用于提高人体免疫力,无毒副作用。

进一步地,保健酒还包括如下重量份的原料:

本发明通过在原有原料的基础上添加以上原料,使健康的人服用后达到强身健体的保健作用。

进一步地,保健酒还包括如下重量份的原料:

本发明通过添加以上原料,能够协调各成分之间的功效,进一步地提高其强身健体的保健作用。

保健酒由下列重量份的原料制备而成:

进一步地,白酒为纯粮酿造基酒,且白酒的酒精度数为62%。

一种制备保健酒的方法,该方法包括以下步骤:

s1:将配方量的枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓用水进行回流提取、过滤,制得滤液,将滤液干燥至粉末,制得水提取物;

s2:s2:取配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,使用90%的乙醇进行回流提取、浓缩、洗脱,将制得的洗脱液干燥至粉末制得醇提取物;

s3:取配方量的冬虫夏草、鹿鞭、人参、鹿茸、杏仁和莲子,研磨成粉末,制得混合粉末;

s4:将步骤s1-s3制得的水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀,进行酶解和发酵,即得保健酒。

本发明根据各原料药的物理性质及所含的化学成分对其进行相应的处理,提高了活性成分的提取率,提高了保健酒的保健效果。

进一步地,步骤s1中,回流提取具体包括以下步骤:

s11:按照配方量称取枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓,破碎后加入25倍重量的水,回流提取3次,每次2h,过滤,收集滤液,将滤液浓缩至相对密度为1.1的浸膏,制得水提浸膏;

s12:在步骤s11制得的水提浸膏中加入2倍浸膏体积的乙醇,离心后得沉淀,将沉淀用3倍重量的无水乙醇洗涤,将洗涤后的沉淀用3倍重量的蒸馏水稀释,得水提稀释液;

s13:在步骤s12制得的水提稀释液中加入水体稀释液5%重量份的蛋白酶在70℃的条件下酶解2h,得酶解液,将酶解液经分子量为80000-200000的透析袋进行第一次透析36h,取保留液,将保留液经分子量为1500000-2000000的透析袋进行第二次透析48h,取第二次渗出液浓缩,加入2倍重量的乙醇混合,离心得到沉淀,再用3倍重量的污水乙醇洗涤,将洗涤后的沉淀用3倍重量的蒸馏水溶解,过滤,喷雾干燥至粉末,即得水提取物。

进一步地,步骤s2中,回流提取的具体方法为:将配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,加入8倍总重量的乙醇浓度为90%乙醇提取2次,每次2h,合并2次提取液,真空减压浓缩至含固量为30%,离心,得沉淀,将沉淀用80%乙醇溶液溶解,上al2o3柱层析,再用4倍保留体积的80%乙醇洗脱,将洗脱液真空减压浓缩至乙醇质量浓度为5%,真空干燥成粉末即得醇提取物;真空干燥的具体条件为:温度60℃,真空度为-0.08mpa。

进一步地,步骤s4中,酶解和发酵的具体方法为:将水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀后,放置于发酵罐内,搅拌30min,温度升至75℃,保温20min,加入碳酸氢钠调节ph值为6.5,加入80-90重量份的果胶酶,搅拌20min,升高温度值85℃,保温1h,降温至10℃,加入180-200重量份的酿酒干酵母发酵20-30天,升温至100℃,保温20min,静置10h,离心,取上清液,即得保健酒。

本发明通过以上酶解和发酵的过程,能够提高保健酒的澄清度,改善保健酒的口感。

本发明提供的保健酒能够用于提高人体免疫力、增强人体体质。

具体实施方式

实施例1

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

实施例2

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

实施例3

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

实施例4

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

实施例5

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

该保健酒的制备方法为:

s1:将配方量的枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓用水进行回流提取、过滤,制得滤液,将滤液干燥至粉末,制得水提取物;

s2:s2:取配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,使用90%的乙醇进行回流提取、浓缩、洗脱,将制得的洗脱液干燥至粉末制得醇提取物;

s3:取配方量的冬虫夏草、鹿鞭、人参、鹿茸、杏仁和莲子,研磨成粉末,制得混合粉末;

s4:将步骤s1-s3制得的水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀,进行酶解和发酵,即得保健酒;

步骤s1中的回流提取方法为:称取配方量的配方量的枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓,加入10倍总重量的水提取3次,每次2h,合并滤液,浓缩、干燥至粉末,即得水提取物;

步骤s2中的回流提取方法为:称取配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,加入8倍总重量的乙醇浓度为90%乙醇提取2次,每次2h,合并2次提取液,浓缩、干燥至粉末,即得醇提取物。

实施例6

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

该保健酒的制备方法为:

s1:将配方量的枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓用水进行回流提取、过滤,制得滤液,将滤液干燥至粉末,制得水提取物;

s2:s2:取配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,使用90%的乙醇进行回流提取、浓缩、洗脱,将制得的洗脱液干燥至粉末制得醇提取物;

s3:取配方量的冬虫夏草、鹿鞭、人参、鹿茸、杏仁和莲子,研磨成粉末,制得混合粉末;

s4:将步骤s1-s3制得的水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀,进行酶解和发酵,即得保健酒;

步骤s1中,回流提取具体包括以下步骤:

s11:按照配方量称取枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓,破碎后加入25倍重量的水,回流提取3次,每次2h,过滤,收集滤液,将滤液浓缩至相对密度为1.1的浸膏,制得水提浸膏;

s12:在步骤s11制得的水提浸膏中加入2倍浸膏体积的乙醇,离心后得沉淀,将沉淀用3倍重量的无水乙醇洗涤,将洗涤后的沉淀用3倍重量的蒸馏水稀释,得水提稀释液;

s13:在步骤s12制得的水提稀释液中加入水体稀释液5%重量份的蛋白酶在70℃的条件下酶解2h,得酶解液,将酶解液经分子量为80000的透析袋进行第一次透析36h,取保留液,将保留液经分子量为1500000的透析袋进行第二次透析48h,取第二次渗出液浓缩,加入2倍重量的乙醇混合,离心得到沉淀,再用3倍重量的污水乙醇洗涤,将洗涤后的沉淀用3倍重量的蒸馏水溶解,过滤,喷雾干燥至粉末,即得水提取物;

步骤s2中的回流提取方法为:称取配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,加入8倍总重量的乙醇浓度为90%乙醇提取2次,每次2h,合并2次提取液,浓缩、干燥至粉末,即得醇提取物。

实施例7

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

该保健酒的制备方法为:

s1:将配方量的枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓用水进行回流提取、过滤,制得滤液,将滤液干燥至粉末,制得水提取物;

s2:s2:取配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,使用90%的乙醇进行回流提取、浓缩、洗脱,将制得的洗脱液干燥至粉末制得醇提取物;

s3:取配方量的冬虫夏草、鹿鞭、人参、鹿茸、杏仁和莲子,研磨成粉末,制得混合粉末;

s4:将步骤s1-s3制得的水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀,进行酶解和发酵,即得保健酒;

步骤s1中,回流提取具体包括以下步骤:

s11:按照配方量称取枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓,破碎后加入25倍重量的水,回流提取3次,每次2h,过滤,收集滤液,将滤液浓缩至相对密度为1.1的浸膏,制得水提浸膏;

s12:在步骤s11制得的水提浸膏中加入2倍浸膏体积的乙醇,离心后得沉淀,将沉淀用3倍重量的无水乙醇洗涤,将洗涤后的沉淀用3倍重量的蒸馏水稀释,得水提稀释液;

s13:在步骤s12制得的水提稀释液中加入水体稀释液5%重量份的蛋白酶在70℃的条件下酶解2h,得酶解液,将酶解液经分子量为200000的透析袋进行第一次透析36h,取保留液,将保留液经分子量为2000000的透析袋进行第二次透析48h,取第二次渗出液浓缩,加入2倍重量的乙醇混合,离心得到沉淀,再用3倍重量的污水乙醇洗涤,将洗涤后的沉淀用3倍重量的蒸馏水溶解,过滤,喷雾干燥至粉末,即得水提取物;

步骤s2中,回流提取的具体方法为:将配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,加入8倍总重量的乙醇浓度为90%乙醇提取2次,每次2h,合并2次提取液,真空减压浓缩至含固量为30%,离心,得沉淀,将沉淀用80%乙醇溶液溶解,上al2o3柱层析,再用4倍保留体积的80%乙醇洗脱,将洗脱液真空减压浓缩至乙醇质量浓度为5%,真空干燥成粉末即得醇提取物;真空干燥的具体条件为:温度60℃,真空度为-0.08mpa。

实施例8

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

该保健酒的制备方法为:

s1:将配方量的枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓用水进行回流提取、过滤,制得滤液,将滤液干燥至粉末,制得水提取物;

s2:s2:取配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,使用90%的乙醇进行回流提取、浓缩、洗脱,将制得的洗脱液干燥至粉末制得醇提取物;

s3:取配方量的冬虫夏草、鹿鞭、人参、鹿茸、杏仁和莲子,研磨成粉末,制得混合粉末;

s4:将步骤s1-s3制得的水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀,进行酶解和发酵,即得保健酒;

步骤s1中,回流提取具体包括以下步骤:

s11:按照配方量称取枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓,破碎后加入25倍重量的水,回流提取3次,每次2h,过滤,收集滤液,将滤液浓缩至相对密度为1.1的浸膏,制得水提浸膏;

s12:在步骤s11制得的水提浸膏中加入2倍浸膏体积的乙醇,离心后得沉淀,将沉淀用3倍重量的无水乙醇洗涤,将洗涤后的沉淀用3倍重量的蒸馏水稀释,得水提稀释液;

s13:在步骤s12制得的水提稀释液中加入水体稀释液5%重量份的蛋白酶在70℃的条件下酶解2h,得酶解液,将酶解液经分子量为200000的透析袋进行第一次透析36h,取保留液,将保留液经分子量为2000000的透析袋进行第二次透析48h,取第二次渗出液浓缩,加入2倍重量的乙醇混合,离心得到沉淀,再用3倍重量的污水乙醇洗涤,将洗涤后的沉淀用3倍重量的蒸馏水溶解,过滤,喷雾干燥至粉末,即得水提取物;

步骤s2中,回流提取的具体方法为:将配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,加入8倍总重量的乙醇浓度为90%乙醇提取2次,每次2h,合并2次提取液,真空减压浓缩至含固量为30%,离心,得沉淀,将沉淀用80%乙醇溶液溶解,上al2o3柱层析,再用4倍保留体积的80%乙醇洗脱,将洗脱液真空减压浓缩至乙醇质量浓度为5%,真空干燥成粉末即得醇提取物;真空干燥的具体条件为:温度60℃,真空度为-0.08mpa;

步骤s4中,酶解和发酵的具体方法为:将水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀后,放置于发酵罐内,搅拌30min,温度升至75℃,保温20min,加入碳酸氢钠调节ph值为6.5,加入80重量份的果胶酶,搅拌20min,升高温度值85℃,保温1h,降温至10℃,加入180重量份的酿酒干酵母发酵20天,升温至100℃,保温20min,静置10h,离心,取上清液,即得保健酒。

实施例9

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

该保健酒的制备方法为:

s1:将配方量的枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓用水进行回流提取、过滤,制得滤液,将滤液干燥至粉末,制得水提取物;

s2:s2:取配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,使用90%的乙醇进行回流提取、浓缩、洗脱,将制得的洗脱液干燥至粉末制得醇提取物;

s3:取配方量的冬虫夏草、鹿鞭、人参、鹿茸、杏仁和莲子,研磨成粉末,制得混合粉末;

s4:将步骤s1-s3制得的水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀,进行酶解和发酵,即得保健酒;

步骤s1中,回流提取具体包括以下步骤:

s11:按照配方量称取枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓,破碎后加入25倍重量的水,回流提取3次,每次2h,过滤,收集滤液,将滤液浓缩至相对密度为1.1的浸膏,制得水提浸膏;

s12:在步骤s11制得的水提浸膏中加入2倍浸膏体积的乙醇,离心后得沉淀,将沉淀用3倍重量的无水乙醇洗涤,将洗涤后的沉淀用3倍重量的蒸馏水稀释,得水提稀释液;

s13:在步骤s12制得的水提稀释液中加入水体稀释液5%重量份的蛋白酶在70℃的条件下酶解2h,得酶解液,将酶解液经分子量为200000的透析袋进行第一次透析36h,取保留液,将保留液经分子量为2000000的透析袋进行第二次透析48h,取第二次渗出液浓缩,加入2倍重量的乙醇混合,离心得到沉淀,再用3倍重量的污水乙醇洗涤,将洗涤后的沉淀用3倍重量的蒸馏水溶解,过滤,喷雾干燥至粉末,即得水提取物;

步骤s2中,回流提取的具体方法为:将配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,加入8倍总重量的乙醇浓度为90%乙醇提取2次,每次2h,合并2次提取液,真空减压浓缩至含固量为30%,离心,得沉淀,将沉淀用80%乙醇溶液溶解,上al2o3柱层析,再用4倍保留体积的80%乙醇洗脱,将洗脱液真空减压浓缩至乙醇质量浓度为5%,真空干燥成粉末即得醇提取物;真空干燥的具体条件为:温度60℃,真空度为-0.08mpa;

步骤s4中,酶解和发酵的具体方法为:将水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀后,放置于发酵罐内,搅拌30min,温度升至75℃,保温20min,加入碳酸氢钠调节ph值为6.5,加入90重量份的果胶酶,搅拌20min,升高温度值85℃,保温1h,降温至10℃,加入200重量份的酿酒干酵母发酵30天,升温至100℃,保温20min,静置10h,离心,取上清液,即得保健酒。

实施例10

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

该组合物由实施例8的方法制备而成。

对照例1

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

对照例2

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

对照例3

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

对照例4

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

对照例5

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

对照例6

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

对照例7

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

该保健酒的制备方法为:

s1:将配方量的枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓用水进行回流提取、过滤,制得滤液,将滤液干燥至粉末,制得水提取物;

s2:s2:取配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,使用90%的乙醇进行回流提取、浓缩、洗脱,将制得的洗脱液干燥至粉末制得醇提取物;

s3:取配方量的冬虫夏草、鹿鞭、人参、鹿茸、杏仁和莲子,研磨成粉末,制得混合粉末;

s4:将步骤s1-s3制得的水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀,即得保健酒。

对照例8

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

该保健酒的制备方法为:

s1:将配方量的枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓用水进行回流提取、过滤,制得滤液,将滤液干燥至粉末,制得水提取物;

s2:s2:取配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,使用90%的乙醇进行回流提取、浓缩、洗脱,将制得的洗脱液干燥至粉末制得醇提取物;

s3:取配方量的冬虫夏草、鹿鞭、人参、鹿茸、杏仁和莲子,研磨成粉末,制得混合粉末;

s4:将步骤s1-s3制得的水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀,进行发酵,即得保健酒。

步骤s4中,发酵具体方法为:加入200重量份的酿酒干酵母发酵30天,升温至100℃,保温20min,静置10h,离心,取上清液,即得保健酒。

对照例9

一种保健酒,该保健酒由下列重量份的成分组成:

该保健酒的制备方法为:

s1:将配方量的枸杞、炒白术、杜仲、当归、菊花、车前子和土茯苓用水进行回流提取、过滤,制得滤液,将滤液干燥至粉末,制得水提取物;

s2:s2:取配方量的制何首乌、熟地、杏仁、桔梗、五味子、蝮蛇、酸枣、天麻、红花、丹参、三七、桃仁、川牛膝和甘草,干燥后粉碎,使用90%的乙醇进行回流提取、浓缩、洗脱,将制得的洗脱液干燥至粉末制得醇提取物;

s3:取配方量的冬虫夏草、鹿鞭、人参、鹿茸、杏仁和莲子,研磨成粉末,制得混合粉末;

s4:将步骤s1-s3制得的水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀,进行酶解,即得保健酒。

步骤s4中,酶解的具体方法为:将水提取物、醇提取物和混合粉末加入配方量的白酒中混合均匀后,放置于发酵罐内,搅拌30min,温度升至75℃,保温20min,加入碳酸氢钠调节ph值为6.5,加入90重量份的果胶酶,搅拌20min,升高温度值85℃,保温1h,降温至10℃。

试验例1各组保健酒对小鼠体重的影响

试验方法:取健康icr雄性小白鼠160只,随机分为试验1-7组、附加1组、对照1-6组、基酒组、阳性1组,每组10只,试验1-7组采用实施例1-7的保健酒,对照1-6组采用对照例1-6的保健酒,附加1组采用静置2年后的实施例7的保健酒,基酒组采用酒精度数为62%的白酒,阳性1组采用中国专利201611095300.8提供的多功能保健酒,每天灌胃1次,灌胃量为15.8ml/天,连续30天,每隔两天称量体重,连续30天,计算小鼠体重增长值以及体重增长率,取平均值,试验期间小鼠自由摄食、饮水,试验结果见表1。

表1.各组药酒对小鼠体重的影响结果

由表1可知,本发明实施例1-7的保健酒对增长小鼠体重的效果显著地高于对照例1-6保健酒、基酒以及阳性1组的保健酒,证明本发明提供的保健酒对能够提高小鼠的体重增加速度,当对本发明提供的保健酒中的原料进行删减或替换后,均会降低其增长小鼠体重的效果;而实施例5-7的效果高于实施例1-4,证明本发明提供的保健酒的制备方法能够提高小鼠体重的增长速度,附加1组对增殖小鼠体重的效果与试验7组无显著差异性,证明本发明提供的保健酒放置两年后,药效依然很好。

试验例2负重游泳试验

方法:取140只小鼠,分为试验8-14组、附加2组、对照7-12组、基酒组和阳性2组,每组10只,试验8-14组采用实施例1-7的保健酒,附加2组采用静置2年后的实施例7的保健酒,对照7-12组采用对照例1-6的保健酒,基酒组采用酒精度数为62%的白酒,阳性2组采用中国专利201611095300.8提供的多功能保健酒,各组保健酒的灌胃量均为15.8ml/天,连续灌胃30天,于末次给药30min后,进行负重游泳试验,将尾部负荷5%体重铅皮的小鼠置于50×50×40cm的游泳箱中,水深不少于30cm,水温25℃±1.0℃,记录小鼠自游泳开始至死亡的时间,该时间即为小鼠负重游泳时间(参照mcrdle推荐的力竭判断标准,小鼠头部沉入水中,经10s仍不能返回水面视为力竭,记录游泳开始时间至力竭的时间作为小鼠负重游泳的时间),结果见表3。

表2.对小鼠游泳时间的影响结果

由表2可以看出,试验8-14组的保健酒能够显著地提高小鼠的游泳时间,效果显著地高于对照7-12组、基酒组和阳性2组,证明本发明提供的保健酒能够用于提高小鼠的免疫力,增强其体质,当对本发明提供的保健酒中的原料进行删减或替换后,均会降低其提高免疫力的效果;而实施例5-7的保健酒提高小鼠游泳时间的效果高于实施例1-4,证明本发明提供的保健酒的制备方法能够进一步地提高小鼠的免疫力,附加2组对提高小鼠免疫力的效果与试验7组无显著差异性,证明本发明提供的保健酒放置两年后,药效依然很好。

试验例3全血乳酸测定试验

取小鼠140只,分为试验15-21组、附加3组、对照13-18组、基酒组和阳性3组,每组10只,试验15-21组采用实施例1-7的保健酒,附加3组采用静置2年后的实施例7的保健酒,对照13-18组采用对照例1-6的保健酒,基酒组采用酒精度数为62%的白酒,阳性3组采用中国专利201310467858.4提供的多功能保健酒,各组保健酒的灌胃量均为15.8ml/天,末次灌胃30min后,在温度为30℃的水中不负重游泳90min,分别与游泳前、游泳后立即、游泳后休息20min三个时间段,用毛细管从小鼠眼内呲取血20μl,采用血乳酸试剂盒,按照其说明书上的方法处理血样并测定高血乳酸(bla)的含量和曲线面积,结果见表3。

其中,

血乳酸曲线下面积=1/2×(游泳前血乳酸值+游泳后0min血乳酸值)×10+1/2×(游泳后0min血乳酸值+游泳后休息20min的血乳酸值)×20。

表3.对小鼠血乳酸含量测定结果

由表3可知,实施例1-7组的血乳酸曲线下面积显著的小于对照例1-6组以及基酒和阳性3组的保健酒,说明本发明提供的保健酒能够减少运动中乳酸的产生,当对本发明提供的保健酒中的原料进行删减或替换后,均会降低其减少运动中产生的乳酸的效果;而实施例5-7的保健酒的效果显著地高于实施例1-4,证明本发明提供的制备方法能够进一步地提高保健酒减少运动中乳酸的产生,附加3组减少运动中乳酸产生的效果与试验7组无显著差异性,证明本发明提供的保健酒放置两年后,药效依然很好。

试验例4肝糖原含量(蒽酮法)和血尿素氮含量(二乙酰-肟)测定试验

1.肝糖原含量测定取140只小鼠,分为试验22-28组、对照19-24组、基酒组和阳性4组,每组10只,试验22-28组采用实施例1-7的保健酒,附加4组采用静置2年后的实施例7的保健酒,对照19-24组采用对照例1-6的保健酒,基酒组采用酒精度数为62%的白酒,阳性4组采用中国专利201310467858.4提供的多功能保健酒,各组保健酒的灌胃量均为15.8ml/天,均灌胃30天,于末次灌胃后处死小鼠,取新鲜肝脏以生理盐水漂洗后,滤纸吸干,称重,样本重量≤100mg为宜,按照样本重量(mg):碱液体积(μl)=1:3一起加入试管中,沸水浴20min,流水冷却,得糖原水解液,加入蒸馏水将糖原水解液进一步制备成糖原检测液,其中加蒸馏水的量为:肝脏重量×100-肝脏重量×4(组织样本与碱液的体积数),测定各组肝糖原含量和血尿素氮含量,结果见表4。

2.肝糖原测定步骤如下表

上述步骤完成后,混匀后置沸水中煮5min,冷却后于620nm波长,

1cm光径下测定各试管的od值;

3.血尿素氮含量测定取140只小鼠,分为试验22-28组、对照19-24组、基酒组和阳性4组,每组10只,试验22-28组采用实施例1-7的保健酒,附加4组采用静置2年后的实施例7的保健酒,对照19-24组采用对照例1-6的保健酒,基酒组采用酒精度数为62%的白酒,阳性4组采用中国专利201310467858.4提供的多功能保健酒,各组保健酒的灌胃量均为15.8ml/天,均灌胃30天,于末次灌胃30min后,在温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后小鼠拔眼球采全血,置于4℃冰箱中约3小时,血凝固后2000rpm离心15min,取血清备用,测定各组血尿素氮含量。

4.血尿素氮含量的测定步骤:

上述步骤完成后,混匀,置于沸水浴中准确水浴15min后,立即

用流水冷却,在520nm波长下,测定各管od值。

注:10mmol/l尿素氮=280.1mg/ml。

表4.各组保健酒对小鼠肝糖原和尿素氮含量的影响结果

由表4可知,实施例22-28组小鼠的尿素氮含量和肝糖原含量均显著低于对照19-24组、基酒组和阳性4组,说明本发明提供的保健酒能够显著减少或抑制疲劳小鼠血清尿素的产生,当对本发明提供的保健酒中的原料进行删减或替换后,均会降低其抗疲劳的效果;而实施例5-7的保健酒抑制疲劳的作用显著地高于实施例1-4,证明本发明提供的制备方法能够进一步地提高保健酒抗疲劳的作用,附加4组抗疲劳的效果与试验7组无显著差异性,证明本发明提供的保健酒放置两年后,药效依然很好。

试验例5物理性质测定试验

对实施例8和对照例7-9的保健酒进行感官评价,4位评委(a、b、c、d)针对这4组保健酒(20ml,放置于直径1.5cm的透明玻璃管内),在暖气调整为27±1℃的办公室中饮用,直至喝完20ml为止,进行口感评价,将各组保健酒放置于室温下保存两年,进行外观评价;用4分满分的分数评价法针对3个项目进行评价;3个项目分别是指澄明度(1分:澄明度极差且有沉淀、2分:有浑浊现象、3分:轻微浑浊、4分:完全澄明);香味(1分:无香味、2分:少许香味、3分:较多香味、4分:较浓香味);沉淀(1分:沉淀高度>3mm、2分:沉淀高度为1-3mm、3分:1>沉淀高度>0mm、4分:无任何沉淀)实验结果见表5。

表5.保健酒的口感及外观评分结果

由表5可知,本发明实施例8提供的方法制备的保健酒具有较浓的香味,且外观澄明,而对照例7-9的制备方法制备的保健酒的综合评分都显著的低于实施例7;其中,对照例7的香味和澄明度都较差,且有少量沉淀,对照例8的澄明度不高且有大量沉淀,对照例9的香味不够醇厚且有部分沉淀,证明本发明的制备方法能够显著地提高保健酒的稳定性。

试验例6急性毒性试验

选用spf级昆明小鼠只,体重为18-22g,雌雄各半,分为9组,每组10只,分别灌胃以实施例1-8的保健酒和白开水,采用一次最大限度试验法,染毒剂量为7000mg/kg·bw,试验时按0.2ml/10g·bw灌胃,灌胃前试验动物禁食16h,自由饮水,灌胃后继续禁食2h后给予正常饮食,连续观察14天,记录试验动物的中毒表现及死亡情况,并对观察期满的动物进行大体解剖和观察。

结果表明,9个试验组经口灌胃后,在14天观察期内未见中毒症状,试验结束后对试验动物做大体解剖也没有明显的异常,证明本发明制备的保健酒对昆明种小鼠的经口ld50>7000mg/kg·bw,属于实际无毒,可以长期服用。

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