本发明属于植物保护技术领域，具体涉及一种用于烟草赤星病（alternariaalternata）和苹果斑点落叶病（alternariaalternariaf.spmali）分离和培养使用的改进型pda培养基及其制备方法。
背景技术：
pda培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即potatodextroseagar。pda培养基是植保领域用于植物真菌病害病原菌分离、培养的最常用的培养基之一。多抗霉素产品生物效价检测中经常使用烟草赤星病和苹果斑点落叶病病原菌作为指示菌，大量使用pda培养基，现配现用常常比较浪费时间，且批次间存在差异性，常常影响检测效果，且会出现培养周期已到，但生长达不到预期要求的情况。
中国专利申请201610081117.6公开一种高透明度pda培养基的制作方法，属pda培养基的制作方法领域，包括以下步骤：a、马铃薯切块；b、煮块：先用大火再文火煮，使马铃薯丁熟而不烂；c、过滤；d、加料：将葡萄糖20g，磷酸二氢钾0.8-1.4g，硫酸镁1.2g-1.7g加入上述滤液，搅匀，用水定容至1000ml；e、调ph值：使用盐酸溶液与氢氧化钠溶液调节ph值至6.5-7，得到液体培养基；先将高纯度琼脂粉19-23g分装至数个调配容器中，然后将液体培养基分装到所述数个调配容器中，混匀；f、倒平板；g、去湿：将培养皿皿盖在酒精灯火焰上把水汽烘干；h、密封，无菌检测。该方法能精准、快速地进行各原料的配比，避免系统误差和操作误差；且能很好地控制培养皿内水分，避免杂菌滋生。
中国专利申请201610740833.0公开了马铃薯全粉在制备pda培养基上的应用，属于微生物培养基领域；本发明还公开了一种马铃薯全粉培养基，其组成成分及其比例为：马铃薯全粉10～20g，葡萄糖2～10g，琼脂粉12～20g，水1000ml。还公开了马铃薯全粉培养基在真菌培养上的应用。马铃薯全粉培养基中将马铃薯中的淀粉、蛋白质、维生素和矿物质等营养物质全部保存，营养全面，食用菌在马铃薯全粉培养基上菌丝生长速度快，且生长旺盛；其次，马铃薯全粉培养基制备方法简单，没有制取马铃薯汁等过程，制备时间大大缩短；此外，马铃薯全粉培养基生产成本低；马铃薯全粉培养基成分皆为干粉，保存、运输都很方便。
但是现有技术中的研究的pda培养基均没有能够很好的克服和改善pda培养基在上述两个病原菌培养中遇到的问题。
技术实现要素：
为了解决现有技术中存在的上述问题，本发明提供一种改进型pda培养基及其制备方法，可以较好的克服和改善pda培养基在上述两个病原菌培养中遇到的问题，增强其专用功能。
本发明采用如下技术方案：一种改进型pda培养基的制备方法，在传统pda培养基的制造过程添加番茄、胡萝卜然后对培养基进行喷雾干燥后得到。这样的培养基一次可以大批量制造，供多次使用，使用方便。
作为本发明的优选的实施方案，所述的制备方法包括以下步骤：
（1）将去皮马铃薯、胡萝卜、番茄洗净、切片备用，其中以质量份计，去皮马铃薯1000-2000份，胡萝卜300-500份，番茄80-100份；
（2）将马铃薯和胡萝卜片放入10000份冷饮用水中加热浸提，等水温升至95℃时开始计时，加入番茄片，煮沸浸提20分钟，过程中不搅动，采用4层医用无菌纱布过滤；
（3）滤渣废弃，滤液在在75-85℃条件下喷雾干燥，得到含水量不高于5%干粉，0-15℃干燥密封保存；
（4）使用时称取8-10质量份干粉，加入1000质量份水中，根据培养基硬度要求加入琼脂后，蒸汽灭菌即可使用。
作为本发明的优选的实施方案，步骤（1）中，将去皮马铃薯、胡萝卜、番茄分别切成0.5cm、0.5cm和1cm厚的片备用。
作为本发明的优选的实施方案，步骤（2）中，等水温升至95℃时开始计时，第15分钟加入番茄片，第20分钟停止加热；浸提汁采用4层医用无菌纱布过滤后加入葡萄糖溶解均匀。
作为本发明的优选的实施方案，步骤（3）中，所述的含水量测定方法为105℃条件下烘干2h,计算减重量占烘干前干粉百分比。
作为本发明的优选的实施方案，步骤（4）中，所述的蒸汽灭菌为121℃饱和蒸汽灭菌。
作为本发明的优选的实施方案，所述的制备方法包括以下步骤：
（1）称取去皮马铃薯2000g，胡萝卜500克，番茄100克，洗干净，马铃薯沿着短茎方向切成0.5cm厚的圆片，胡萝卜切成0.5cm厚的圆片，番茄切1厘米厚的片备用；
（2）将马铃薯和胡萝卜片放入10kg冷饮用水中加热浸提，水温到达95℃时计时，煮沸浸提20分钟，过程中不搅动；浸提汁采用4层医用无菌纱布过滤后加入200克葡萄糖溶解均匀；
（3）滤渣废弃，滤液在75-85℃条件下喷雾干燥，控制水分在5%以下干粉，0-15℃密封保存；
（4）使用时称取8-10g干粉，加水1000g，根据硬度要求加入琼脂粉后121℃饱和蒸汽灭菌即可使用。
本发明还保护上述制备方法制备得到的改进型pda培养基。
与现有技术相比，本发明通过在传统pda培养基的制造过程添加番茄、胡萝卜并对培养基制备工艺的改进，通过上述改进，本发明取得了以下的有益效果：
1)通过改进，明显的改善了pda培养基对烟草赤星病和苹果斑点落叶病等病原菌的培养性能，菌丝生长量显著增加。
2)改进后，该培养基可以一次制作，多次使用，显著提高了pda培养基的配制效率，避免了批次间差异的影响。
3)改进后，培养基原料更易于贮存，有效延长了培养基原料的保质期。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步详细说明，但本发明并不仅仅局限于下述实施例。
实施例1
取4000g去皮马铃薯、1000g胡萝卜和200g番茄，分别切成厚度为0.5cm、0.5cm和1cm厚度的片。先将马铃薯和胡萝卜片放入20000g自来水中开始加热，温度到达95℃开始计时，15min后加入番茄片，再煮5min后用4层医用无菌纱布过滤，得到滤液19100g。用水调整喷雾干燥塔温度为82℃后进滤液开始喷雾干燥，得到干粉783克。检测后水分含量为4.1%。取8克上述干粉放入1000g水中，加入琼脂粉18g,得到改进型pda培养基1026g。
实施例2
取2000g去皮马铃薯、500g胡萝卜和100g番茄，分别切成厚度为0.5cm、0.5cm和1cm厚度的片。先将马铃薯和胡萝卜片放入10000g自来水中开始加热，温度到达95℃开始计时，15min后加入番茄片，再煮5min后用4层医用无菌纱布过滤，得到滤液9133g。用水调整喷雾干燥塔温度为75℃后进滤液开始喷雾干燥，得到干粉361克，检测后水分含量为4.7%。取10克上述干粉放入1000g水中，加入琼脂粉18g,得到改进型pda培养基1028g。
实施例3
取2000g去皮马铃薯、500g胡萝卜和100g番茄，分别切成厚度为0.5cm、0.5cm和1cm厚度的片。先将马铃薯和胡萝卜片放入10000g自来水中开始加热，温度到达95℃开始计时，15min后加入番茄片，再煮5min后用4层医用无菌纱布过滤，得到滤液9133g。用水调整喷雾干燥塔温度为85℃后进滤液开始喷雾干燥，得到干粉343克，检测后水分含量为3.7%。取9克上述干粉放入1000g水中，加入琼脂粉20g,得到改进型pda培养基1029g。
实施例4
普通pda培养基和实施例1、2、3培养基接种烟草赤星病、苹果斑点落叶病后3天和4天后菌落生长情况对比情况如下表1所示。
表1普通pda培养基和实施例1、2、3培养基的菌落生长情况
从表1中可以看出，改进后的pda培养基显著提高了菌落的生长量，但对单位面积产孢量几乎没有影响。可见，本发明制备的改进的pda培养基明显改善了烟草赤星病和苹果斑点落叶病等病原菌的培养性能，菌丝生长量显著增加。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。