一种何首乌芽增殖培养基及其配制方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及何首乌组织培养技术领域，特别是涉及一种何首乌芽增殖培养基，还 涉及一种何首乌芽增殖培养基配制方法。
【背景技术】
[0002] 何首乌，是寥科何首乌属多年生缠绕藤本植物，块根肥厚，长椭圆形，黑褐色，其块 根入药，可安神、养血、活络、消痈，是常见的中药材。
[0003] 目前组织培养是何首乌人工快速繁殖的常用手段之一，然而现有的组织培养技术 中何首乌芽增殖系数不高、增殖时间长，越来越难以满足市场的需求。
【发明内容】
[0004] 基于现有技术存在上述问题，本发明提供一种何首乌芽增殖培养基，其以MS培养 基为基础培养基，并添加有6-BA(6_苄氨基腺嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含钐可溶性化合物、琼 脂粉和白砂糖。本发明中的培养基添加了钐元素，能极大地提高何首乌芽增殖系数，缩短增 殖时间。
[0005] -种何首乌芽增殖培养基，以MS培养基为基础培养基，并添加有6-BA(6_苄氨基腺 嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含钐可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖。
[0006] 6-BA(6-苄氨基腺嘌呤）的浓度为0·5-1 ·5mg/L，IBA(吲哚丁酸）的浓度为0· 1-0·5 mg/L，含钐可溶性化合物的浓度为0.1-0.2mM，琼脂粉的浓度为8~1 lg/L，蔗糖的浓度为25 ~35g/L〇
[0007] 6-84(6-苄氨基腺嘌呤）的浓度为0.8-1.211^/1，184(吲哚丁酸）的浓度为0.2-0.4mg/L，含钐可溶性化合物的浓度为0.12-0.16mM，琼脂粉的浓度为9~10g/L，蔗糖的浓度 为28~33g/L。
[0008] 所述的何首乌叶片诱导培养基的pH值为6.3~6.9。
[0009] 所述的何首乌叶片诱导培养基的pH值为6.7,中性的环境适合何首乌芽增殖，可提 高增殖系数。
[0010] 含钐可溶性化合物是硝酸钐，还可以是氧化钐或者氯化钐，钐元素是一种稀土元 素，具有植物生长调节剂的作用，可刺激促进植物生长，常用于提高农作物的质量和产量。
[0011] -种何首乌芽增殖培养基的配制方法，其包括以下步骤： 步骤S10溶解配制培养基：用蒸馏水溶解MS基础培养基各成分，并添加6-BA(6-苄氨基 腺嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含钐可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖； 步骤S20高温灭菌:将步骤S10配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121°C高温灭 菌20~21分钟，冷却凝固。
[0012] 步骤S10还包括步骤SI 1调节pH值:使用HCL和Κ0Η滴定调节培养基pH值至6.7。
【具体实施方式】
[0013]实施例一:配制何首乌芽增殖培养基。
[0014]根据表1所示的MS培养基配方以及表2所示的何首乌芽增殖培养基配方，配制本发 明所述的何首乌芽增殖培养基。
[0015] 用天平称取MS培养基中的各成分以及6-BA(6-苄氨基腺嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含 钐可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖，置于三角瓶中，加入适量蒸馏水，搅拌溶解，并调节pH值 至6.7，定容至100〇111匕将三角瓶封口，置于高压灭菌锅中，于121°(3灭菌2〇1]1；[11，然后置于超 净工作台中自然冷却，备用。
[0016] 将冷却到50_60°C时将培养基分装至组织培养瓶中，晾凉，待其凝固后将组织培养 瓶封口，备用。
[0017] 表1 MS培养基的成分及其用量。
[0018] 表2何首乌芽增殖培养基的成分及其用量。
[0019] 实施例二:本发明所述的何首乌芽增殖培养基的测试 根据表1所示的MS培养基配方以及表3所示的何首乌芽增殖培养基配方，参照实施例一 所述的培养基制备方法，分别配制各试验组、对照组的何首乌芽增殖培养基。
[0020] 表3何首乌芽增殖培养基。
[0021] 在超净工作台中选取生长正常、无褐化的何首乌丛生芽，将丛生芽取出，用无菌手 术刀将丛生芽分割成单芽，将单芽接种于表3所示各试验组、对照组的培养基中，然后于光 暗周期为12h光照/12h黑暗、光照强度为20001UX、温度为25±2°C的条件下进行培养。培养 30天后统计增殖何首乌芽增值系数、褐化率。
[0022] 表4何首乌芽增殖培养基测试结果。
[0023] 注:增值系数=(增值后芽数-褐化死亡芽数)/接种芽数。
[0024] 由表4的试验结果可知，采用本发明提供的何首乌芽增殖培养基可将增殖系数提 高到5以上，同时从对照组3与试验组比较可以看出钐元素虽然能起到一定调节植物生长的 作用，但效果不明显，钐元素更多的作用在于调节植物生长状态，促进生长素和细胞分裂素 的互作，从而促进何首乌芽增殖。另外由于组织培养继代增殖越多，变异概率越大，在保证 不变异的前提下，提高增殖效率可以大大缩短了增值时间。
【主权项】
1. 一种何首乌芽增殖培养基，其特征在于，以MS培养基为基础培养基，并添加有6-BA (6-苄氨基腺嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含钐可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖。2. 根据权利要求1所述的一种何首乌芽增殖培养基，其特征在于，6-BA(6-苄氨基腺嘌 呤）的浓度为〇. 5-1.5mg/L，IBA(吲哚丁酸）的浓度为0.1-0.5 mg/L，含钐可溶性化合物的 浓度为〇.1-〇.211^，琼脂粉的浓度为8~118/1，蔗糖的浓度为25~358/1。3. 根据权利要求2所述的一种何首乌芽增殖培养基，其特征在于，6-BA( 6-苄氨基腺嘌 呤）的浓度为〇. 8-1.2mg/L，IBA(B引噪丁酸）的浓度为0.2-0.4mg/L，含钐可溶性化合物的浓 度为0.12-0.1611^，琼脂粉的浓度为9~1(^/1，蔗糖的浓度为28~338/1。4. 根据权利要求1至3的其中之一所述的一种何首乌芽增殖培养基，其特征在于，所述 的何首乌叶片诱导培养基的pH值为6.3~6.9。5. 根据权利要求4的所述的一种何首乌芽增殖培养基，其特征在于，所述的何首乌叶片 诱导培养基的pH值为6.7。6. 根据权利要求1至3的其中之一所述的一种何首乌芽增殖培养基，其特征在于，所述 的含钐可溶性化合物是硝酸钐，还可以是氧化钐或者氯化钐。7. -种何首乌芽增殖培养基的配制方法，其特征在于，其包括以下步骤： 步骤S10溶解配制培养基，用蒸馏水溶解MS基础培养基各成分，并添加6-BA(6-苄氨基 腺嘌呤）、IBA(吲哚丁酸）、含钐可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖； 步骤S20高温灭菌，将步骤S10配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121°C高温灭 菌20~21分钟，冷却凝固。8. 根据权利要求7所述的一种何首乌芽增殖培养基的配制方法，其特征在于，所述的步 骤S10还包括步骤SI 1调节pH值，使用HCL和KOH滴定调节培养基pH值至6.7。
【专利摘要】本发明提供一种何首乌芽增殖培养基，属于何首乌组织培养技术领域，该培养基以MS培养基为基础培养基，并添加有6-BA（6-苄氨基腺嘌呤）、IBA（吲哚丁酸）、含钐可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖。本发明中的培养基添加了钐元素，能极大地提高何首乌芽增殖系数，缩短增殖时间。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105532462
【申请号】CN201610011321
【发明人】何志铿
【申请人】佛山市金蓝领教育科技有限公司
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2016年1月9日