一种培养基的配制和使用方法

专利名称：一种培养基的配制和使用方法
(一)技术领域发明涉及一种培养基的配制和使用方法，更具体地说涉及一种包含有谷氨酰胺和/或碳酸氢钠的培养基的配制和使用方法。属于生物制品领域。
背景技术：
培养基是生物制品领域中常用的物质，在细菌和细胞培养中十分必要，但是现有技术中有些培养基的某种组份容易分解，造成保存时间短等问题，导致培养基的使用成本十分高。其中，在动物培养基中，谷氨酰胺是一种必要的组份，但是在常温下，很短的时间内，约7-10日中培养基中的谷氨酰胺成份就可降解90％以上，这给其商品化带来很大的困难。这样的培养基在现有技术中很多，都具有上述的缺陷，例如，中国专利CN1087778C公开了一种杂交瘤细胞的无血清培养基，其中包含有谷氨酰胺成份，但是这种培养基的保存时间十分有限，很难达到商业使用的目的。

发明内容要解决的问题本发明的目的是提供一种含有易分解成份的培养基的配制和使用方法，尤其是一种含有谷氨酰胺和/或碳酸氢钠的培养基的配制和使用方法。
技术方案本发明中培养基的配制和使用方法，其特征在于将液体培养基中易分解组份单独包装，并将其各自置于合适的存储条件下，在使用该培养基之前将两部分混合。
上述培养基中的易分解组份是谷氨酰胺和/或碳酸氢钠；上述谷氨酰胺和/或碳酸氢钠浓缩液的存储条件是低于-20摄氏度冻存，优选-80摄氏度。
上述与谷氨酰胺和/或碳酸氢钠相配合使用的培养基组份的存储条件是4至8摄氏度，优选4摄氏度。
有益效果本发明方法具有良好的效果，因为容易分解的物质放置一段时间后便失去其效果，只能保存很短的时间，造成产品质量不稳定。用本发明方法来配制和使用培养基，能延长培养基的保存时间，可以随时地根据需要使用，使用十分方便，产品质量更加稳定，为液体培养基的商品化带来便利。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
本发明用下面的实施例作进一步的说明，但对本发明的范围不起限制作用。
实施例1培养基Dulbecco′s Modified Eagle Medium(D-MEM)(低葡萄糖)用于动物细胞培养，其配比如下
将上述培养基中的谷氨酰胺单独包装，并在零下80摄氏度下保存。其他组份以4摄氏度保存，在使用时将其混合即可。
实施例2培养基Dulbecco′s Modified Eagle Medium(D-MEM)(高葡萄糖)，用于动物细胞培养，其配比如下
将上述培养基中的谷氨酰胺单独包装，并在零下20摄氏度下保存。其他组份以8摄氏度保存，在使用时将其混合即可。
实施例3 RPMI Medium 1640，用于动物细胞培养，其配比如下
将上述培养基中的谷氨酰胺单独包装，并在零下50摄氏度下保存。其他组份以6摄氏度保存，在使用时将其混合即可。
实施例4Medium 199，用于动物细胞培养，其配比如下
将上述培养基中的谷氨酰胺单独包装，并在零下80摄氏度下保存。其他组份以4摄氏度保存，在使用时将其混合即可。
本发明方法及其得到的产品具有良好的效果，用本发明方法来配制和使用培养基，能延长培养基的保存时间，可以随时地根据需要使用，使用十分方便，降低使用成本，产品质量更加稳定，为液体培养基的商品化带来便利。
权利要求
1.一种培养基的配制和使用方法，其特征在于将液体培养基中易分解组份单独包装，并将其各自置于合适的存储条件下，在使用该培养基之前将两部分混合。
2.如权利要求1所述培养基的配制和使用方法，其特征在于其中的培养基中的易分解组份是谷氨酰胺和/或碳酸氢钠。
3.如权利要求2所述培养基的配制和使用方法，其特征在于其中的谷氨酰胺和/或碳酸氢钠浓缩液的存储条件是低于-20摄氏度冻存。
4.如权利要求2或3所述培养基的配制和使用方法，其特征在于其中的谷氨酰胺和/或碳酸氢钠浓缩液的存储条件是-80摄氏度冻存。
5.如权利要求2所述培养基的配制和使用方法，其特征在于其中与谷氨酰胺和/或碳酸氢钠相配合使用的培养基组份的存储条件是4至8摄氏度。
6.如权利要求1-5中任意一项所述培养基的配制和使用方法，其特征在于其中培养基的配比如下(mg/L)Glycine(甘氨酸) 30L-Arginine hydrochloride(L-氯化精氨酸) 84L-Cystine 2HCl(L-2盐酸胱氨酸酯) 63L-Glutamine(L-谷氨酰胺) 584L-Histidine hydrochloride-H2O(L-一水氯化组氨酸) 42L-Isoleucine(L-异亮氨酸) 105L-Leucine(L-亮氨酸) 105L-Lysine hydrochloride(L-氯化赖氨酸) 146L-Methionine(L-蛋氨酸) 30L-Phenylalanine(L-苯基丙氨酸) 66L-Serine(L-丝氨酸) 42L-Threonine(L-苏氨酸) 95L-Tryptophan(L-色氨酸) 16L-Tyrosine disodium salt dihydrate(L-酪氨酸二钠盐) 104L-Valine(L-缬氨酸) 94Choline chloride(氯化胆碱) 4D-Calcium pantothenate(D-泛酸钙) 4Folic Acid(叶酸) 4i-Inositol(i-肌醇) 7.2Niacinamide(烟酰胺) 4Pyridoxine hydrochloride(盐酸吡哆醇) 4Riboflavin(核黄素) 0.4Thiamine hydrochloride(盐酸硫胺素) 4Calcium Chloride(CaCl2)(anhyd.)(无水氯化钙) 200Ferric Nitrate(Fe(NO3)3″9H2O)(9水硝酸铁) 0.1Magnesium Sulfate(MgSO4)(anhyd.)(无水硫酸镁) 97.67Potassium Chloride(KCl)(氯化钾) 400Sodium Chloride(NaCl)(氯化钠) 6400Sodium Phosphate monobasic(NaH2PO4-H2O)(一水磷酸二氢钠) 125D-Glucose(Dextrose)(D-葡萄糖) 1000Phenol Red(酚红) 15Sodium Pyruvate(丙酮酸钠) 110。
7.如权利要求1-4中任意一项所述培养基的配制和使用方法，其特征在于其中培养基的配比如下(mg/L)Glycine(甘氨酸) 30L-Arginine hydrochloride(L-氯化精氨酸) 84L-Cystine 2HCl(L-2盐酸胱氨酸酯) 63L-Glutamine(L-谷氨酰胺) 580L-Histidine hydrochloride-H2O(L-一水氯化组氨酸) 42L-Isoleucine(L-异亮氨酸) 105L-Leucine(L-壳氨酸) 105L-Lysine hydrochloride(L-氯化赖氨酸) 146L-Methionine(L-蛋氨酸) 30L-Phenylalanine(L-苯基丙氨酸) 66L-Serine(L-丝氨酸) 42L-Threonine(L-苏氨酸) 95L-Tryptophan(L-色氨酸) 16L-Tyrosine(L-酪氨酸) 72L-Valine(L-缬氨酸) 94Choline chloride(氯化胆碱) 4D-Calcium pantothenate(D-泛酸钙) 4Folic Acid(叶酸) 4i-Inositol(i-肌醇) 7.2Niacinamide(烟酰胺) 4Pyridoxine hydrochloride(盐酸吡哆醇) 4Riboflavin(核黄素) 0.4Thiamine hydrochloride(盐酸硫胺素) 4Calcium Chloride(CaCl2-2H2O)(二水氯化钙) 264Ferric Nitrate(Fe(NO3)3″9H2O)(九水硝酸铁) 0.1Magnesium Sulfate(MgSO4-7H2O)(七水硫酸镁) 200Potassium Chloride(KCl)(氯化钾) 400Sodium Bicarbonate(NaHCO3)(碳酸氢钠) 3700Sodium Chloride(NaCl)(氯化钠) 6400Sodium Phosphate monobasic(NaH2PO4-2H2O)(二水磷酸二氢钠) 141D-Glucose(Dextrose)(D-葡萄糖) 1000Phenol Red(酚红) 15Sodium Pyruvate(丙酮酸钠) 110。
8.如权利要求1-4中任意一项所述培养基的配制和使用方法，其特征在于其中培养基的配比如下(mg/L)Glycine(甘氨酸) 10L-Arginine(L-精氨酸) 200L-Asparagine(L-天门冬醯胺酸) 50L-Aspartic acid(L-天(门)冬氨酸) 20L-Cystine 2HCl(L-2盐酸胱氨酸酯) 65L-Glutamic Acid(L-谷氨酸) 20L-Glutamine(L-谷氨酰胺) 300L-Histidine(L-组氨酸) 15L-Hydroxyproline(L-羟(基)脯氨酸) 20L-Isoleucine(L-异亮氨酸) 50L-Leucine(L-亮氨酸) 50L-Lysine hydrochloride(L-氯化赖氨酸) 40L-Methionine(L-蛋氨酸) 15L-Phenylalanine(L-苯基丙氨酸) 15L-Proline(L-脯氨酸) 20L-Serine(L-丝氨酸) 30L-Threonine(L-苏氨酸) 20L-Tryptophan(L-色氨酸) 5L-Tyrosine disodium salt dihydrate(L-酪氨酸二钠盐) 29L-Valine(L-缬氨酸) 20Biotin(维生素H) 0.2Choline chloride(氯化胆碱) 3D-Calcium pantothenate(D-泛酸钙) 0.25Folic Acid(叶酸) 1i-Inositol(i-肌醇) 35Niacinamide(烟酰胺) 1Para-Aminobenzoic Acid(对氨基苯(甲)酸) 1Pyridoxine hydrochloride(盐酸吡哆醇) 1Riboflavin(核黄素) 0.2Thiamine hydrochloride(盐酸硫胺素) 1Vitamin B12(维生素B12) 0.005Calcium nitrate(Ca(NO3)24H2O)(四水硝酸钙) 100Magnesium Sulfate(MgSO4)(anhyd.)(无水硫酸镁) 48.84Potassium Chloride(KCl)(氯化钾) 400Sodium Bicarbonate(NaHCO3)(碳酸氢钠) 2000Sodium Chloride(NaCl)(氯化钠) 5300Sodium Phosphate dibasic(Na2HPO4)anhydrous(无水磷酸二氢钠) 800D-Glucose(Dextrose)(D-葡萄糖) 2000Glutathione(reduced)(谷胱甘肽) 1HEPES 5958Phenol Red(酚红) 5。
9.如权利要求1-4中任意一项所述培养基的配制和使用方法，其特征在于其中培养基的配比如下(mg/L)Glycine(甘氨酸) 50L-Alanine(L-丙胺酸) 25L-Arginine hydrochloride(L-氯化精氨酸) 70L-Asparticacid(L-天(门)冬氨酸) 30L-Cysteine hydrochloride-H2O(L-一水氯化半胱氨酸) 0.1L-Cystine 2HCl(L-2盐酸胱氨酸酯) 26L-Glutamic Acid(L-谷氨酸) 75L-Glutamine(L-谷氨酰胺) 100L-Histidine hydrochloride-H2O(L-一水氯化组氨酸) 21.88L-Hydroxyproline(L-羟(基)脯氨酸) 10L-Isoleucine(L-异亮氨酸) 40L-Leucine(L-)亮氨酸) 60L-Lysine hydrochloride(L-氯化赖氨酸) 70L-Methionine(L-蛋氨酸) 15L-Phenylalanine(L-苯基丙氨酸) 25L-Proline(L-脯氨酸) 40L-Serine(L-丝氨酸) 25L-Threonine(L-苏氨酸) 30L-Tryptophan(L-色氨酸) 10L-Tyrosine disodium salt dihydrate(L-酪氨酸二钠盐) 40L-Valine(L-缬氨酸) 25Alpha-tocopherol Phosphate(α-磷酸维生素E) 0.01Ascorbic Acid(维生素C) 0.05Biotin(生物素) 0.01Choline chloride(氯化胆碱) 0.5D-Calcium pantothenate(D-泛酸钙) 0.01Folic Acid(维生素B) 0.01i-Inositol(i-肌醇) 0.05Menadione(Vitamin K3)(维生素K3) 0.01Niacinamide(烟酰胺) 0.025Nicotinic acid(Niacin)(烟酸) 0.025Para-Aminobenzoic Acid(对氨基苯(甲)酸) 0.05Pyridoxal hydrochloride(盐酸吡哆醛) 0.025Pyridoxine hydrochloride(盐酸吡哆醇) 0.025Riboflavin(核黄素) 0.01Thiamine hydrochloride(盐酸硫胺素) 0.01Vitamin A(acetate)(维生素A(醋酸盐)) 0.1Vitamin D2(Calciferol)(维生素D2(钙化醇)) 0.1Calcium Chloride(CaCl2)(anhyd.)(无水氯化钙) 200Ferric nitrate(Fe(NO3)-9H2O)(九水硝酸铁) 0.7Magnesium Sulfate(MgSO4)(anhyd.)(无水硫酸镁) 97.67Potassium Chloride(KCl)(氯化钾) 400Sodium Bicarbonate(NaHCO3)(碳酸氢钠) 2200Sodium Chloride(NaCl)(氯化钠) 4750Sodium Phosphate monobasic(NaH2PO4)anhydrous(无水磷酸二氢钠) 1402-deoxy-D-ribose(2-脱氧-D-核糖) 0.5Adenine su1fate(硫酸腺嘌呤) 10Adenosine 5′-phosphate(5’-磷酸腺苷) 0.2Adenosine 5′-triphosphate(5’-三磷酸腺苷) 1Cholesterol(胆固醇) 0.2D-Glucose(Dextrose)(D-葡萄糖) 1000Glutathione(reduced)(谷胱甘肽) 0.05Guanine hydrochloride(盐酸鸟嘌呤) 0.3HEPES 5960Hypoxanthine Na(次黄嘌呤钠) 0.4Phenol Red(酚红) 20Ribose(核糖) 0.5Sodium Acetate(乙酸钠) 50Thymine(胸腺嘧啶) 0.3Tween 8020Uracil(尿嘧啶) 0.3Xanthine-Na(黄嘌呤钠) 0.34。
10.一种培养基，其特征在于用如权利要求1-9中任意一项所述的方法得到。
全文摘要
发明涉及一种培养基的配制和使用方法，更具体地说涉及一种包含有谷氨酰胺和/或碳酸氢钠的培养基的配制和使用方法。属于生物制品领域。本发明培养基的配制和使用方法为将液体培养基中易分解组份单独包装，并将其各自置于合适的存储条件下，在使用该培养基之前将两部分混合。本发明方法具有良好的效果，因为容易分解的物质放置一段时间后便失去其效果，只能保存很短的时间，用本发明方法来配制和使用培养基，能延长培养基的保存时间，可以随时地根据需要使用，使用十分方便，产品质量更加稳定，为液体培养基的商品化带来便利。
文档编号C12N1/00GK1657604SQ20051005321
公开日2005年8月24日 申请日期2005年2月7日 优先权日2005年2月7日
发明者黄宗堂 申请人:黄宗堂