一种人参快速增殖培养基及其配制方法
【技术领域】
[0001 ]本发明属于人参组织培养技术领域，特别涉及一种人参快速增殖培养基，还涉及 一种人参快速增殖培养基的配制方法。
【背景技术】
[0002] 人参是被子植物门双子叶植物纲离瓣花亚纲五加科，多年生草本植物，生长于密 林，多分布于黑龙江、吉林、辽宁和河北北部深山中，含有10多种人参皂甙，以及人参快醇、 多种氨基酸和维生素，是名贵的中草药材。
[0003] 但是目前人参组织培养的不定芽生长缓慢，增殖时间长，增殖系数低，难以满足市 场、科研和物种保护的要求。
【发明内容】
[0004] 基于现有技术存在上述问题，本发明提供一种人参快速增殖培养基，其以MS培养 基为基础培养基，并添加有6-BA(6-苄氨基腺嘌呤）、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）、〇1(水解酪 蛋白）、琼脂粉和白砂糖，本发明提供的人参快速增殖培养基具有增殖时间短，增殖系数大 的优点。
[0005] -种人参快速增殖培养基，以MS培养基为基础培养基，并添加有6_BA( 6-苄氨基腺 嘌呤）、2，4-D( 2，4-二氯苯氧乙酸）、CH(水解酪蛋白）、琼脂粉和白砂糖，水解酪蛋白含有多 种氨基酸，可提供人参不定芽生长需要，部分氨基酸还起到调节细胞分离分化的作用，促进 不定芽增殖。
[0006] 6-BA(6-苄氨基腺嘌呤）的浓度为0.5-1.511^/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）的浓 度为0.5-2 mg/L、CH(水解酪蛋白）的浓度为200-500 mg/L，琼脂粉的浓度为8~llg/L，蔗糖 的浓度为25~35g/L。
[0007] 6-BA(6-苄氨基腺嘌呤）的浓度为0.8-1.211^/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）的浓 度为1-1 · 5 mg/L、CH(水解酪蛋白）的浓度为350-450 mg/L，琼脂粉的浓度为9 · 5~10 · 5g/L， 蔗糖的浓度为29~31g/L。
[0008] 所述的人参快速增殖培养基的pH值为6.3~6.9。
[0009] 所述的人参快速增殖培养基的pH值为6.7,接近中性的培养环境适合人参不定芽 增殖。
[0010] 所述的水解酪蛋白是使用盐酸水解的酸水解酪蛋白。
[0011] -种人参快速增殖培养基的配制方法，其包括以下步骤： 步骤SlO溶解配制培养基，用蒸馏水溶解MS基础培养基各成分，并添加6-BA(6-苄氨基 腺嘌呤）、2，4_D( 2，4-二氯苯氧乙酸）、CH(水解酪蛋白）、琼脂粉和白砂糖； 步骤S20高温灭菌，将步骤SlO配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121°C高温灭 菌20~21分钟，冷却凝固。
[0012] 所述的步骤SlO还包括步骤Sll调节pH值，使用HCL和KOH滴定调节培养基pH值至 6·7〇
【具体实施方式】
[0013] 实施例一:配制人参快速增殖培养基。
[0014] 根据表1所示的MS培养基配方以及表2所示的人参快速增殖培养基配方，配制本发 明所述的人参快速增殖培养基。
[0015] 用天平称取MS培养基中的各成分以及6-ΒΑ(6-苄氨基腺嘌呤）、2,4-0(2,4-二氯苯 氧乙酸）、CH(水解酪蛋白）、琼脂粉和白砂糖，置于三角瓶中，加入适量蒸馏水，搅拌溶解，并 调节。田直至6.7，定容至100〇111匕将三角瓶封口，置于高压灭菌锅中，于121°(3灭菌2〇1^11，然 后置于超净工作台中自然冷却，备用。
[0016] 将冷却到50_60°C时将培养基分装至组织培养瓶中，晾凉，待其凝固后将组织培养 瓶封口，备用。
[0017] 表1 MS培养基的成分及其用量。
[0018] 表2人参快速增殖培养基的成分及其用量。
[0019] 实施例二:本发明所述的人参快速增殖培养基的测试 根据表1所示的MS培养基配方以及表3所示的人参快速增殖培养基配方，参照实施例一 所述的培养基制备方法，分别配制各试验组、对照组的人参快速增殖培养基。
[0020] 表3人参快速增殖培养基的成分及其用量。
[0021] 在超净工作台中选取生长正常、无褐化的人参不定芽，将不定芽取出，用无菌手术 刀将不定芽切分割成单一不定芽，接种于表3所示各试验组、对照组的培养基中，然后于光 暗周期为Hh光照/IOh黑暗、光照强度为23001UX、温度为23±2°C的条件下进行培养。培养 35天后统计增殖人参值系数和纪录最快长出新不定芽的时间。
[0022] 表4何首乌芽增殖培养基测试结果。
[0023] 注：1.表中增殖系数=增值后总芽数/接种芽数;平均最快增殖用时是指对照组或 者试验组的每个重复最快增殖出一颗新芽的时间的平均值。
[0024] 由表4的试验结果可知，采用本发明提供的人参快速增殖培养基可将增殖系数提 高到5以上，同时从对照组3和试验组的对比中可以看出水解酪蛋白对人参的不定芽增殖没 有诱导作用，但是却能明显的促进人参不定义在增殖，大大地提高植物激素的作用，另外从 试验组的相互对比中还可以看出植物激素添加过量会影响促进效果。
【主权项】
1. 一种人参快速增殖培养基，其特征在于，以MS培养基为基础培养基，并添加有6-BA (6-苄氨基腺嘌呤）、2，4-D( 2，4-二氯苯氧乙酸）、CH(水解酪蛋白）、琼脂粉和白砂糖。2. 根据权利要求1所述的一种人参快速增殖培养基，其特征在于，6-BA(6-苄氨基腺嘌 呤）的浓度为〇. 5-1.5mg/L、2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸）的浓度为0.5-2 mg/L、CH(水解酪蛋 白）的浓度为200-500 mg/L，琼脂粉的浓度为8~llg/L，蔗糖的浓度为25~35g/L。3. 根据权利要求2所述的一种人参快速增殖培养基，其特征在于，6-BA(6-苄氨基腺嘌 呤）的浓度为〇. 8-1.2mg/L、2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸）的浓度为1-1.5 mg/L、CH(水解酪蛋 白）的浓度为350-450 mg/L，琼脂粉的浓度为9.5~10.58/1，蔗糖的浓度为29~318/1。4. 根据权利要求1至3的其中之一所述的一种人参快速增殖培养基，其特征在于，所述 的人参快速增殖培养基的pH值为6.3~6.9。5. 根据权利要求4的所述的一种人参快速增殖培养基，其特征在于，所述的人参快速增 殖培养基的pH值为6.7。6. 根据权利要求1至3的其中之一所述的一种人参快速增殖培养基，其特征在于，所述 的水解酪蛋白是使用盐酸水解的酸水解酪蛋白。7. -种人参快速增殖培养基的配制方法，其特征在于，其包括以下步骤： 步骤S10溶解配制培养基，用蒸馏水溶解MS基础培养基各成分，并添加6-BA(6-苄氨基 腺嘌呤）、2，4-D( 2，4-二氯苯氧乙酸）、CH(水解酪蛋白）、琼脂粉和白砂糖； 步骤S20高温灭菌，将步骤S10配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121°C高温灭 菌20~21分钟，冷却凝固。8. 根据权利要求7所述的一种人参快速增殖培养基的配制方法，其特征在于，所述的步 骤S10还包括步骤SI 1调节pH值，使用HCL和KOH滴定调节培养基pH值至6.7。
【专利摘要】本发明提供一种人参快速增殖培养基，属于人参组织培养技术领域，该培养基以MS培养基为基础培养基，并添加有6-BA（6-苄氨基腺嘌呤）、2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）、CH（水解酪蛋白）、琼脂粉和白砂糖，本发明提供的人参快速增殖培养基具有增殖时间短，增殖系数大的优点。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105519439
【申请号】CN201610011344
【发明人】何志铿
【申请人】佛山市金蓝领教育科技有限公司
【公开日】2016年4月27日
【申请日】2016年1月9日