利用RNA环化技术制备寡肽的方法及寡肽的表达DNA与流程

文档序号:33511293发布日期:2023-03-21 23:44阅读:来源:国知局

技术特征:
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n-ggaggagga-自环化序列2。16.根据权利要求11所述的寡肽的表达dna,其特征在于所述表达dna为自环化序列1-atgcatcatcatcatcatcat-(ggccagccgcgt)
n-ggaggagga-自环化序列2。17.一种寡肽的表达载体,其特征在于将权利要求9-16中任一项所述的寡肽的表达dna构建到表达载体中而成。18.根据权利要求17所述的寡肽的表达载体,其特征在于所述表达载体为pet28a。19.一种寡肽的表达宿主,其特征在于含有权利要求17或18所述的寡肽的表达载体。20.根据权利要求19所述的寡肽的表达宿主,其特征在于宿主为大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、氧化葡糖杆菌、酵母菌、植物原生质体或者动物细胞。

技术总结
本发明公开了一种利用RNA环化技术制备寡肽的方法,其特征在于其步骤包括:(1)构建寡肽的表达DNA,该表达DNA包括自环化序列1-起始密码子-串联重复的寡肽编码DNA-RBS序列-自环化序列2;(2)将构建的寡肽的表达DNA构建到表达载体上,转入宿主细胞中进行表达,得到融合寡肽;(3)纯化融合寡肽;(4)使用蛋白酶切割分离;(5)纯化分离后的寡肽。还公开了相应的寡肽的表达DNA及表达载体和宿主。本发明将寡肽通过重复进行串联,串联后的编码框ORF不包含终止密码子。当mRNA被自环化序列进行环化后,环化的ORF不含有终止密码子,因此可以持续地进行滚环式翻译,最终产生含有很多重复串联序列的融合蛋白。融合蛋白。融合蛋白。


技术研发人员:许波 张志乾 吴奕瑞 刘丽花 江翱 邱益 苏立俊 郭羽 谭洪群 陈西朋 张豫
受保护的技术使用者:态创生物科技(广州)有限公司
技术研发日:2022.12.20
技术公布日:2023/3/20
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