一种生产高纯度γ-氨基丁酸的方法_3

文档序号:8208866阅读:来源:国知局
胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母浸粉5.0g,葡萄糖20.0g,柠檬酸铵2.0g,乙酸钠5.0g,硫酸锰0.05g,磷酸氢二钠2.0g,余量为去离子水,培养基总量为1L。
[0051]所述种子扩大培养基的配方为:鱼蛋白胨或胰蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母浸粉5.0g、葡萄糖20.0g,柠檬酸铵2.0g,乙酸钠5.0g,硫酸锰0.05g,磷酸氢二钠2.0g,谷氨酸钠50g,余量为反渗透水,调pH5,培养基总量为1L。
[0052](2)加热杀菌:发酵结束,将体系升温80°C,保持20min,杀灭菌体;
[0053](3)冷却:采用薄板冷却器,将上述的发酵液冷却至40°C,并导入脱色罐中,待用;
[0054](4)活性炭处理:采用活性炭脱色,发酵液加入占发酵液质量0.1%的活性炭,保持40°C,搅拌20min进行脱色;
[0055](5)过滤:脱色后的发酵液进行趁热过滤,采用0.20 μ m钛棒过滤,分离直至滤液澄清;
[0056](6)离心固液分离:将上述澄清液进行离心,2000g离心lOmin,收集含γ -氨基丁酸的上清液;
[0057](7)离子交换法脱盐:将上述上清液以I倍床体积流速流过强酸性离子交换树脂,除去反应液中的氯化钠,待阳离子交换树脂吸附饱和后,然后用纯水洗到中性,用2mol/L稀氨水洗脱,氨水用量以树脂当量计;树脂用纯水洗到中性,再用盐酸再生备用;采用离子交换法脱盐法进行纯化,即可获得γ-氨基丁酸溶液,含量达到5% ;
[0058](8)喷射循环真空浓缩:采用外循环式真空浓缩,温度60°C,获得浓缩Y-氨基丁酸溶液,γ-氨基丁酸浓度达到30% ;
[0059](9)结晶干燥:γ-氨基丁酸浓溶液加入95%食用酒精,浓溶液与95%食用酒精用量的体积比为1: 5,析出γ-氨基丁酸沉淀结晶,搅拌冷却至室温,离心分离,95%酒精洗涤,甩干,60°C真空干燥4小时,得γ-氨基丁酸结晶,白色至淡黄色粉末或颗粒,纯度为95%。
[0060]实施例3
[0061]一种生产高纯度γ -氨基丁酸的方法,按照如下步骤进行:
[0062](1)28°C条件下,将希氏乳杆菌在乳酸细菌培养基中培养,220rpm振荡培养48h,获得种子菌液,按照接种量5%,在温度30°C的条件下供气在种子扩大培养基中培养72h,分批流加L-谷氨酸钠至扩大培养发酵液,加入量为扩大培养发酵液质量的5%,同时流加4mol/L的盐酸,控制pH6.0和反应温度40°C,继续反应5天,即停止反应;
[0063]所述乳酸细菌培养基的配方为:鱼蛋白胨或胰蛋白胨l0.0g,牛肉膏l0.0g,酵母浸粉5.0g,葡萄糖20.0g,柠檬酸铵2.0g,乙酸钠5.0g,硫酸锰0.05g,磷酸氢二钠2.0g,余量为去离子水,培养基总量为1L。
[0064]所述种子扩大培养基的配方为:鱼蛋白胨或胰蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母浸粉5.0g、葡萄糖20.0g,柠檬酸铵2.0g,乙酸钠5.0g,硫酸锰0.05g,磷酸氢二钠2.0g,谷氨酸钠50g,余量为反渗透水,调pH6.5,培养基总量为1L。
[0065](2)加热杀菌:发酵结束,将体系升温100°C,保持40min,杀灭菌体;
[0066](3)冷却:采用薄板冷却器,将上述的发酵液冷却至70°C,并导入脱色罐中,待用;
[0067](4)活性炭处理:采用活性炭脱色,发酵液加入占发酵液质量1.0%的活性炭,保持70°C,搅拌40min进行脱色;
[0068](5)过滤:脱色后的发酵液进行趁热过滤,采用0.24 μ m钛棒过滤,分离直至滤液澄清;
[0069](6)离心固液分离:将上述澄清液进行离心,4000g离心20min,收集含γ -氨基丁酸的上清液;
[0070](7)离子交换法脱盐:将上述上清液以2倍床体积流速流过强酸性离子交换树脂,除去反应液中的氯化钠,待阳离子交换树脂吸附饱和后,然后用纯水洗到中性,用2mol/L稀氨水洗脱,氨水用量以树脂当量计;树脂用纯水洗到中性,再用盐酸再生备用;采用离子交换法脱盐法进行纯化,即可获得γ-氨基丁酸溶液,含量达到5% ;
[0071](8)喷射循环真空浓缩:采用外循环式真空浓缩,温度90°C,获得浓缩Y-氨基丁酸溶液,γ-氨基丁酸浓度达到30% ;
[0072](9)结晶干燥:γ -氨基丁酸浓溶液加入95%食用酒精,浓溶液与95%食用酒精用量的体积比为1: 10,析出γ-氨基丁酸沉淀结晶,搅拌冷却至室温,离心分离,95%酒精洗涤,甩干,60°C真空干燥8小时,得γ-氨基丁酸结晶,白色至淡黄色粉末或颗粒,纯度为95%。
[0073]实施例4
[0074]一种生产高纯度γ -氨基丁酸的方法,按照如下步骤进行:
[0075](I) 27°C条件下,将希氏乳杆菌在乳酸细菌培养基中培养,ISOrpm振荡培养30h,获得种子菌液,按照接种量3%,在温度29°C的条件下供气在种子扩大培养基中培养56h,分批流加L-谷氨酸钠至扩大培养发酵液,加入量为扩大培养发酵液质量的5%,同时流加3mol/L的盐酸,控制pH 5.0和反应温度35°C,继续反应4天,即停止反应;
[0076]所述乳酸细菌培养基的配方为:鱼蛋白胨或胰蛋白胨l0.0g,牛肉膏l0.0g,酵母浸粉5.0g,葡萄糖20.0g,柠檬酸铵2.0g,乙酸钠5.0g,硫酸锰0.05g,磷酸氢二钠2.0g,余量为去离子水,培养基总量为1L。
[0077]所述种子扩大培养基的配方为:鱼蛋白胨或胰蛋白胨l0.0g,牛肉膏10.0g,马唐提取物5.0g、葡萄糖20.0g,朽1檬酸钱2.0g,乙酸钠5.0g,硫酸猛0.05g,磷酸氢二钠2.0g,谷氨酸钠50g,余量为反渗透水,调pH5.5,培养基总量为1L。
[0078]所述马唐提取物的提取方法如下:将马唐植株晒干,用3-7倍质量的30%异丙醇水溶液在60-70°C减压回流提取。提取2次,每次1-3小时,合并提取液,减压回收溶媒,浓缩提取液至原体积的0.1-0.05倍,向浓缩液中加入95%乙醇使乙醇浓度达到50%,沉淀过滤,用70%乙醇洗涤沉淀至百色,在60°C下真空干燥制成。
[0079](2)加热杀菌:发酵结束,将体系升温90°C,保持30min,杀灭菌体;
[0080](3)冷却:采用薄板冷却器,将上述的发酵液冷却至50°C,并导入脱色罐中,待用;
[0081](4)活性炭处理:采用活性炭脱色,发酵液加入占发酵液质量0.5%的活性炭,保持50 °C,搅拌30min进行脱色;
[0082](5)过滤:脱色后的发酵液进行趁热过滤,采用0.22 μ m钛棒过滤,分离直至滤液澄清;
[0083](6)离心固液分离:将上述澄清液进行离心,3000g离心15min,收集含γ -氨基丁酸的上清液;
[0084](7)离子交换法脱盐:将上述上清液以1.5倍床体积流速流过强酸性离子交换树月旨,除去反应液中的氯化钠,待阳离子交换树脂吸附饱和后,然后用纯水洗到中性,用2mol/L稀氨水洗脱,氨水用量以树脂当量计;树脂用纯水洗到中性,再用盐酸再生备用;采用离子交换法脱盐法进行纯化,即可获得γ-氨基丁酸溶液,含量达到10% ;
[0085](8)喷射循环真空浓缩:采用外循环式真空浓缩,温度70°C,获得浓缩Y-氨基丁酸溶液,γ-氨基丁酸浓度达到40% ;
[0086](9)结晶干燥:γ-氨基丁酸浓溶液加入95%食用酒精,浓溶液与95%食用酒精用量的体积比为1: 7,析出Y-氨基丁酸沉淀结晶,搅拌冷却至室温,离心分离,95%酒精洗涤,甩干,60°C真空干燥6小时,得γ-氨基丁酸结晶,白色至淡黄色粉末或颗粒,纯度为99%。
[0087]实施例5
[0088]一种生产高纯度γ -氨基丁酸的方法,按照如下步骤进行:
[0089](I) 27°C条件下,将希氏乳杆菌在乳酸细菌培养基中培养,ISOrpm振荡培养30h,获得种子菌液,按照接种量3%,在温度29°C的条件下供气在种子扩大培养基中培养56h,分批流加L-谷氨酸钠至扩大培养发酵液,加入量为扩大培养发酵液质量的5%,同时流加3mol/L的盐酸,控制pH 5.0和反应温度35°C,继续反应4天,即停止反应;
[0090]所述乳酸细菌培养基的配方为:鱼蛋白胨或胰蛋白胨l0.0g,牛肉膏l0.0g,酵母浸粉5.0g,葡萄糖20.0g,柠檬酸铵2.0g,乙酸钠5.0g,硫酸锰0.05g,磷酸氢二钠2
当前第3页1 2 3 4 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1