基因的表达载 体。
[0094] 上述表达载体通过例如磷酸钙法、电穿孔法等导入培养细胞中。
[0095] 作为导入表达载体的培养细胞，可以使用例如CH0-K1SV细胞、CH0-DG44细胞、293 细胞等培养细胞，利用常规方法对其进行培养即可。
[0096] 上述培养后，可以通过各种柱层析、例如使用蛋白A或蛋白G柱的各种层析对培养 上清中蓄积的抗体进行纯化。
[0097] 本发明的抗人IL-23R抗体为与人IL-23R结合的抗体。作为测定所得到的抗人 IL-23R抗体对人IL-23R的结合活性的方法，有ELISA、FACS等方法。例如，在使用ELISA 的情况下，将人IL_23R(序列号1)的细胞外结构域与免疫球蛋白Fc的融合蛋白固定到 ELISA板上，对其添加抗人IL-23R抗体进行反应后，使由辣根过氧化物酶（HRP)等酶标记的 抗IgG抗体等第二抗体反应，洗涤后，通过使用检测其活性的试剂（例如，HRP标记的情况 下为BM-ChemiluminescenceELISAsubstrate(POD)(RocheDiagnostics公司））等的活 性测定，对第二抗体的结合进行鉴定。另外，本发明的抗体也包含与猴IL-23R结合的抗体， 可以测定对这些蛋白质的结合活性。
[0098] 另外，本发明的抗人IL-23R抗体对人IL-23R具有中和活性。在本说明书中使用 的情况下，抗体的"中和活性"是指通过对IL-23R的结合来抑制经由IL-23R带来的任意的 生物活性的活性，可以将IL-23R的一种或多种生物活性作为指标来进行评价。作为这样的 中和活性，可以列举例如IL-23R应答性细胞KU225细胞的增殖抑制活性、人IL-23刺激 STAT3磷酸化抑制活性，可以通过使用后述实施例中记载的方法来进行评价。
[0099] 作为评价抗人IL-23R抗体的各种稳定性（例如，热稳定性、长期保存稳定性、高浓 度稳定性）的方法，可以列举例如利用差示扫描量热测定或抗体保存中的聚集体形成的测 定的方法。
[0100] 本发明的抗人IL-23R抗体可以优选通过下述方法容易地获得：使用本领域中公 知的方法，合成包含编码序列号5、9、13、17、21、25或29所示的重链可变区氨基酸序列的碱 基序列的DNA和包含编码序列号7、11、15、19、23、27或31所示的轻链可变区氨基酸序列的 碱基序列的DNA，将它们与适当类的人抗体恒定区基因连接，对于重链而言优选人Igy1恒 定区基因、对于轻链而言优选人IgK恒定区基因，构建全人抗体基因，使用本领域中公知 的各种方法，将该抗体基因导入表达载体，将该表达载体导入培养细胞并对该培养细胞进 行培养，从得到的培养物中纯化抗体。包含编码序列号5、9、13、17、21、25或29所示的重链 可变区氨基酸序列的碱基序列的DNA优选分别包含序列号4、8、12、16、20、24或28所示的 碱基序列。包含编码序列号7、11、15、19、23、27或31所示的轻链可变区氨基酸序列的碱基 序列的DNA优选分别包含序列号6、10、14、18、22、26或30所示的碱基序列。
[0101] 包含序列号5所示的重链可变区和人Igy1恒定区的本发明的优选的抗人IL-23R 抗体重链为由序列号33所示的氨基酸序列构成的重链。包含序列号7所示的轻链可变区 和人IgK恒定区的本发明的优选的抗人IL-23R抗体轻链为由序列号35所示的氨基酸序 列构成的轻链。包含编码由序列号33所示的氨基酸序列构成的抗人IL-23R抗体重链的碱 基序列的DNA优选包含序列号32所示的碱基序列。包含编码由序列号35所示的氨基酸序 列构成的抗人IL-23R抗体轻链的碱基序列的DNA优选包含序列号34所示的碱基序列。作 为包含由序列号33所示的氨基酸序列构成的重链和由序列号35所示的氨基酸序列构成的 轻链的本发明的抗人IL-23R抗体，可以列举后述实施例中记载的全人25-3抗体。
[0102] 包含序列号9所示的重链可变区和人Igy1恒定区的本发明的优选的抗人IL-23R 抗体重链为由序列号37所示的氨基酸序列构成的重链。包含序列号11所示的轻链可变区 和人IgK恒定区的本发明的优选的抗人IL-23R抗体轻链为由序列号39所示的氨基酸序 列构成的轻链。包含编码由序列号37所示的氨基酸序列构成的抗人IL-23R抗体重链的碱 基序列的DNA优选包含序列号36所示的碱基序列。包含编码由序列号39所示的氨基酸序 列构成的抗人IL-23R抗体轻链的碱基序列的DNA优选包含序列号38所示的碱基序列。作 为包含由序列号37所示的氨基酸序列构成的重链和由序列号39所示的氨基酸序列构成的 轻链的本发明的抗人IL-23R抗体，可以列举后述实施例中记载的全人30-15抗体。
[0103] 包含序列号13所示的重链可变区和人Igy1恒定区的本发明的优选的抗人 IL-23R抗体重链为由序列号41所示的氨基酸序列构成的重链。包含序列号15所示的轻链 可变区和人IgK恒定区的本发明的优选的抗人IL-23R抗体轻链为由序列号43所示的氨 基酸序列构成的轻链。包含编码由序列号41所示的氨基酸序列构成的抗人IL-23R抗体重 链的碱基序列的DNA优选包含序列号40所示的碱基序列。包含编码由序列号43所示的氨 基酸序列构成的抗人IL-23R抗体轻链的碱基序列的DNA优选包含序列号42所示的碱基序 列。作为包含由序列号41所示的氨基酸序列构成的重链和由序列号43所示的氨基酸序列 构成的轻链的本发明的抗人IL-23R抗体，可以列举后述实施例中记载的全人30-16抗体。
[0104] 包含序列号17所示的重链可变区和人Igy1恒定区的本发明的优选的抗人 IL-23R抗体重链为由序列号45所示的氨基酸序列构成的重链。包含序列号19所示的轻链 可变区和人IgK恒定区的本发明的优选的抗人IL-23R抗体轻链为由序列号47所示的氨 基酸序列构成的轻链。包含编码由序列号45所示的氨基酸序列构成的抗人IL-23R抗体重 链的碱基序列的DNA优选包含序列号44所示的碱基序列。包含编码由序列号47所示的氨 基酸序列构成的抗人IL-23R抗体轻链的碱基序列的DNA优选包含序列号46所示的碱基序 列。作为包含由序列号45所示的氨基酸序列构成的重链和由序列号47所示的氨基酸序列 构成的轻链的本发明的抗人IL-23R抗体，可以列举后述实施例中记载的全人30-18抗体。
[0105] 包含序列号21所示的重链可变区和人Igy1恒定区的本发明的优选的抗人 IL-23R抗体重链为由序列号49所示的氨基酸序列构成的重链。包含序列号23所示的轻链 可变区和人Igk恒定区的本发明的优选的抗人IL-23R抗体轻链为由序列号51所示的氨 基酸序列构成的轻链。包含编码由序列号49所示的氨基酸序列构成的抗人IL-23R抗体重 链的碱基序列的DNA优选包含序列号48所示的碱基序列。包含编码由序列号51所示的氨 基酸序列构成的抗人IL-23R抗体轻链的碱基序列的DNA优选包含序列号50所示的碱基序 列。作为包含由序列号49所示的氨基酸序列构成的重链和由序列号51所示的氨基酸序列 构成的轻链的本发明的抗人IL-23R抗体，可以列举后述实施例中记载的全人32-28抗体。
[0106] 包含序列号25所示的重链可变区和人Igy1恒定区的本发明的优选的抗人 IL-23R抗体重链为由序列号53所示的氨基酸序列构成的重链。包含序列号27所示的轻链 可变区和人IgK恒定区的本发明的优选的抗人IL-23R抗体轻链为由序列号55所示的氨 基酸序列构成的轻链。包含编码由序列号53所示的氨基酸序列构成的抗人IL-23R抗体重 链的碱基序列的DNA优选包含序列号52所示的碱基序列。包含编码由序列号55所示的氨 基酸序列构成的抗人IL-23R抗体轻链的碱基序列的DNA优选包含序列号54所示的碱基序 列。作为包含由序列号53所示的氨基酸序列构成的重链和由序列号55所示的氨基酸序列 构成的轻链的本发明的抗人IL-23R抗体，可以列举后述实施例中记载的全人34-58抗体。
[0107] 包含序列号29所示的重链可变区和人Igy1恒定区的本发明的优选的抗人 IL-23R抗体重链为由序列号57所示的氨基酸序列构成的重链。包含序列号31所示的轻链 可变区和人IgK恒定区的本发明的优选的抗人IL-23R抗体轻链为由序列号59所示的氨 基酸序列构成的轻链。包含编码由序列号57所示的氨基酸序列构成的抗人IL-23R抗体重 链的碱基序列的DNA优选包含序列号56所示的碱基序列。包含编码由序列号59所示的氨 基酸序列构成的抗人IL-23R抗体轻链的碱基序列的DNA优选包含序列号58所示的碱基序 列。作为包含由序列号57所示的氨基酸序列构成的重链和由序列号59所示的氨基酸序列 构成的轻链的本发明的抗人IL-23R抗体，可以列举后述实施例中记载的全人32-36抗体。
[0108] 本发明也包括包含本发明的抗体的重链可变区和轻链可变区且保有活性的单链 可变区片段（scFv)、Fab、Fab'、F(ab'）2等抗人IL-23R抗体片段。另外，本领域技术人员 也可以基于本发明来制作该抗人IL-23R抗体或抗体片段与其他肽或蛋白质的融合抗体或 者制作结合有修饰剂的修饰抗体。用于融合的其他肽或蛋白质只要不使抗体的结合活性降 低则没有特别限定，可以列举例如人血清白蛋白、各种标签肽、人工螺旋基序肽、麦芽糖结 合蛋白质、谷胱甘肽S转移酶、各种毒素、其他能够促进多聚体化的肽或蛋白质等。用于修 饰的修饰剂只要不使抗体的结合活性降低则没有特别限定，可以列举例如聚乙二醇、糖链、 磷脂、核糖体、低分子化合物等。
[0109] 这样得到的本发明的抗人IL-23R抗体可以在根据需要进一步纯化后，通过常规 方法制剂化而用于银肩病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮（SLE)、克罗恩病或溃疡性结 肠炎等炎症性肠病（IBD)、强直性脊柱炎（AS)、白塞氏病、葡萄膜炎、癌等IL-23R参与发病 的疾病的治疗。
[0110] 本发明的抗人IL-23R抗体可以优选作为银肩病治疗剂使用。作为这些治疗剂等 的剂型的例子，可以制成注射剂、点滴用剂等非口服剂，优选通过静脉内给药、皮下给药等 来给药。另外，制剂化时，可以在药学上容许的范围内使用与这些剂型相应的载体、添加剂。
[0111] 上述制剂化时的本发明的抗人IL-23R抗体的添加量根据患者的症状的程度和年 龄、使用的制剂的剂型或抗体的结合效价等而不同，使用例如约〇. 〇〇lmg/kg至约100mg/kg 即可。
[0112] 本发明还提供包含编码本发明的抗人IL-23R抗体的序列的多核苷酸及包含该多 核苷酸的表达载体。本发明还提供包含编码本发明的抗人IL-23R抗体的重链可变区的序 列的多核苷酸、包含编码本发明的抗人IL-23R抗体的轻链可变区的序列的多核苷酸以及 包含上述任何一种多核苷酸或两种多核苷酸的表达载体。本发明的表达载体只要是在原核 细胞和/或真核细胞的各种宿主细胞中表达编码本发明的抗体或其重链可变区和/或轻链 可变区的基因并能够产生这些多肽的表达载体则没有特别限制。可以列举例如质粒载体、 病毒载体（例如，腺病毒、逆转录病毒）等。本发明的表达载体优选含有前述的包含编码本 发明的抗体的重链或轻链的序列的多核苷酸，或者含有包含编码本发明的抗体的重链的序 列的多核苷酸和包含编码本发明的抗体的轻链的序列的多核苷酸。
[0113] 本发明的表达载体可以含有编码本发明的抗人IL-23R抗体的基因、或者编码本 发明的抗人IL-23R抗体的重链可变区的基因和/或编码本发明的抗人IL-23R抗体的轻 链