核酸扩增反应装置的制造方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及核酸扩增反应装置。
【背景技术】
[0002]作为快速地扩增核酸的方法，公知有如下方法，即向圆筒状的核酸扩增反应容器中投入油与少量的核酸扩增反应液，将该容器的一端维持为高温，将另一端维持为低温，使容器旋转，交替地切换使反应液以该容器的一端成为铅垂方向下方的方式位于高温的油中的状态与使反应液以另一端成为铅垂方向下方的方式位于低温的油中的状态，从而使核酸扩增反应液的温度快速地产生热循环(例如，参照引用文献I)。在专利文献I所记载的核酸扩增反应装置中，使用有圆筒状的反应容器。而且，为了对核酸量进行测量，经由位于铅垂方向下方的反应容器的底面，向位于反应容器的底部的反应液照射激励光，同时，对从反应液放射的荧光量进行测量。
[0003]专利文献1:日本特开2012-115208号公报
[0004]在上述专利文献I所记载的核酸扩增反应装置中，核酸扩增反应液的液滴的直径与反应容器的直径相比较小，因此核酸扩增反应液在与反应容器的长度方向垂直的面存在二维的自由度。因此，核酸扩增反应液的液滴相对于重力作用的方向倾斜地落下、垂直地落下，从而核酸扩增反应液的液滴在落下速度上产生差别，因此严格地管理核酸扩增反应液的加热量并不容易。若未充分地进行核酸扩增反应液的加热量的管理，则存在在核酸的扩增量上产生差别的可能性。另外，落下位置与检测机构的焦点位置容易偏差，从而核酸量的稳定的检测变得困难。而且，容器呈圆筒状的反应容器的侧面为曲面，因此若朝向反应容器的侧面照射激励光，则导致光在反应容器的表面反射。因此，经由反应容器的侧面的反应容器内的核酸量的稳定的检测变得困难。另一方面，即使经由筒底面向反应容器内部的反应液照射激励光，在混入反应液中的遮光物质积蓄于反应容器的底面的情况下，也存在核酸量的稳定的检测变得困难的情况。
【发明内容】
[0005]本发明是鉴于上述情况而完成的，其课题在于提供一种在使核酸扩增反应溶液在具有不同的温度区域的油中移动从而快速地进行核酸扩增反应的方法中，能够更加稳定地复制核酸，同时，能够更加稳定地进行核酸量的检测的核酸扩增反应装置。
[0006]本发明的一实施方式为一种核酸扩增反应装置，其特征在于，包括:安装部，其供核酸扩增反应容器安装，该核酸扩增反应容器具有第一侧壁以及配置为与上述第一侧壁对置的第二侧壁，上述第一侧壁的内表面与上述第二侧壁的内表面的距离为:在注入有核酸扩增反应液的情况下，上述核酸扩增反应液与上述第一侧壁以及上述第二侧壁双方接触的长度；第一加热部，当在上述安装部安装了上述核酸扩增反应容器的情况下，所述第一加热部对上述核酸扩增反应容器的第一区域进行加热；荧光测量单元，其向上述核酸扩增反应容器的第二区域的上述第一侧壁或者上述第二侧壁照射激励光并对被放射的荧光进行测量；以及驱动机构，其将上述安装部、上述第一区域以及上述第二区域的配置在第一配置与第二配置之间进行切换，上述第一配置为:当在上述安装部安装了上述核酸扩增反应容器的情况下，上述第一区域在重力的作用方向上位于上述第二区域的下方的配置，上述第二配置为:当在上述安装部安装了上述核酸扩增反应容器的情况下，上述第二区域在重力的作用方向上位于上述第一区域的下方的配置。也可以包括第二加热部，当在上述安装部安装上述核酸扩增反应容器的情况下，所述第二加热部对上述第二区域进行加热，上述第一加热部将上述第一区域加热至第一温度，上述第二加热部将上述第二区域加热至与上述第一温度不同的第二温度。上述第二加热部也可以具有从外部贯通上述安装部的孔，上述荧光测量单元通过上述孔向上述核酸扩增反应容器的第二区域的上述第一侧壁或者上述第二侧壁照射激励光。在上述核酸扩增反应液为1.0?7.0 μ I时，上述距离也可以为0.2?1.4mm。
[0007]本发明的其它的实施方式为一种核酸扩增反应装置，其特征在于，包括:核酸扩增反应容器，其具有第一侧壁以及配置为与上述第一侧壁对置的第二侧壁，上述第一侧壁的内表面与上述第二侧壁的内表面的距离为:在注入有核酸扩增反应液的情况下，上述核酸扩增反应液与上述第一侧壁以及上述第二侧壁双方接触的长度；第一加热部，当在安装部安装了上述核酸扩增反应容器的情况下，所述第一加热部对上述核酸扩增反应容器的第一区域进行加热；荧光测量单元，其向上述核酸扩增反应容器的第二区域的上述第一侧壁或者上述第二侧壁照射激励光并对被放射的荧光进行测量；以及驱动机构，其将上述安装部、上述第一区域以及上述第二区域的配置在第一配置与第二配置之间进行切换，上述第一配置为:当在上述安装部安装了上述核酸扩增反应容器的情况下，上述第一区域在重力的作用的方向上位于上述第二区域的下方的配置，上述第二配置为:当在上述安装部安装了上述核酸扩增反应容器的情况下，上述第二区域在重力的作用的方向上位于上述第一区域的下方的配置。也可以包括第二加热部，其对上述第二区域进行加热，上述第一加热部将上述第一区域加热至第一温度，上述第二加热部将上述第二区域加热至与上述第一温度不同的第二温度。上述第二加热部也可以具有从外部贯通上述安装部的孔，上述荧光测量单元通过上述孔向上述核酸扩增反应容器的第二区域的上述第一侧壁或者上述第二侧壁照射激励光。在上述核酸扩增反应液为1.0?7.0μ I时,上述距离也可以为0.2?1.4mm。
[0008]根据本发明，能够提供一种在使核酸扩增反应溶液在具有不同的温度区域的油中移动从而快速地进行核酸扩增反应的方法中，能够更加稳定地复制核酸，同时，能够更加稳定地对核酸量进行检测的核酸扩增反应装置。
【附图说明】
[0009]图1A、图1B是实施方式所涉及的核酸扩增反应装置的立体图。图1A示出关闭了盖的状态，图1B示出打开了盖的状态。
[0010]图2是实施方式所涉及的核酸扩增反应装置的主体的分解立体图。
[0011]图3A、图3B是实施方式所涉及的核酸扩增反应容器的剖视图。图3A是相对于核酸扩增反应容器100的对置的第一内壁113以及第二内壁114平行的方向的剖视图，图3B是相对于核酸扩增反应容器100的第一内壁113以及第二内壁114正交的方向的剖视图。
[0012]图4A、图4B是示意性地示出实施方式所涉及的核酸扩增反应装置的主体的沿图IA的A-A线的剖面的剖视图。图4A示出第一配置，图4B示出第二配置。
[0013]图5是示出使用了实施方式所涉及的核酸扩增反应装置的处理的顺序的流程图。
[0014]图6A、图6B是变形例所涉及的核酸扩增反应装置的立体图。图6A示出关闭了盖的状态，图6B示出打开了盖的状态。
[0015]图7是示意性地示出变形例所涉及的核酸扩增反应装置的主体的图沿6A的B-B线的剖面的剖视图。
[0016]图8是示出核酸扩增反应容器内的液滴的投影直径的大小的图。
[0017]图9是示出本发明所涉及的核酸扩增反应容器内的液滴的投影直径相对于圆筒状的核酸扩增反应容器内的液滴的投影直径的比的图。
[0018]附图标记说明
[0019]1,2...核酸扩增反应装置；10、10a...主体；11...安装部；12...第一加热部(力口热部)；12a...第一加热器；12b...第一加热块；13...第二加热部；13a...第二加热器；13b...第二加热块；14...隔尚部件；15...导线；16...凸缘；17...底板；18...测量窗；
19...固定板；20...驱动机构；22...导轨；23...观察窗；24...显示部；25...设定部；
40...荧光检测器；50...盖；51...固定部；100、100a...核酸扩增反应容器；110...流路；
111...第一区域；112...第二区域；113...第一内壁；114...第二内壁；115...第三内壁；
116...第四内壁；117...底部；120...密封部；130...液体；140...反应液。
【具体实施方式】
[0020]以下，使用附图并按照以下的顺序对本发明的优选的实施方式进行说明。此外，以下进行说明的实施方式适当地限定权利要求书所记载的本发明的内容。另外，以下所说明的结构的全部不限定为本发明的必要构成要件。
[0021]1.实施方式
[0022]1-1.实施方式的核酸扩增反应装置的结构
[0023]图1A、图1B是实施方式所涉及的核酸扩增反应装置I的立体图。图1A示出关闭了核酸扩增反应装置I的盖50的状态，图1B示出打开了核酸扩增反应装置I的盖50的状态，亦即在安装部11安装有核酸扩增反应容器100的状态。图2是实施方式所涉及的核酸扩增反应装置I的主体10的分解立体图。图4A是示意性地示出实施方式所涉及的核酸扩增反应装置I的主体10的沿图1A的A-A线的剖面的剖视图。
[0024]如图1A所示，实施方式所涉及的核酸扩增反应装置I包含主体10以及驱动机构20。如图2所示，主体10包含安装部U、第一加热部12 (相当于加热部)以及第二加热部13。在第一加热部12与第二加热部13之间设置有隔离部件14。在本实施方式的主体10中，将第一加热部12配置于底板17的一侧，将第二加热部13配置于盖50的一侧。在本实施方式的主体10中，第一加热部12、第二加热部13、以及隔离部件14固定于凸缘16、底板17以及固定板19。
[0025]安装部11为供后述的核酸扩增反应容器100安装的构造。如图1B以及图2所示，本实施方式的安装部11为供核酸扩增反应容器100以插入的方式安装的插口构造，成为供核酸扩增反应容器100插入贯通第一加热部12(加热部)的第一加热块12b、隔离部件14、以及第二加热部13的第二加热块13b的孔的构造。安装部11的个数也可以为多个，在图IB的例子中，在主体10设置有八个安装部11。
[0026]优选，本实施方式的核酸扩增反应装置I包括将核酸扩增反应容器100相对于第一加热部12以及第二加热部13保持于规定的位置的构造。由此，能够通过第一加热部12以及第二加热部13对核酸扩增反应容器100的规定的区域进行加热。更具体而言，如图4所示，能够通过第一加热部12对构成后述的核酸扩增反应容器100的流路110的第一区域111进行加热，通过第二加热部13对第二区域112进行加热。在本实施方式中，决定核酸扩增反应容器100的位置的构造为底板17，如图4A所示，将核酸扩增反应容器100插入至与底板17接触的位置，从而能够相对于第一加热部12以及第二加热部13将核酸扩增反应容器100保持于规定的位置。
[0027]第一加热部12当在安装部11安装了核酸扩增反应容器100的情况下，将后述的核酸扩增反应容器100的第一区域111加热至第一温度。在图4A所示的例子中，第一加热部12配置于主体10中的、对核酸扩增反应容器100的第一区域111进行加热的位置。
[0028]第一加热部12也可以包括产生热的机构以及将已产生的热传递至核酸扩增反应容器100的部件。在图2所示的例子中，第一加热部12包括第一加热器12a以及第一加热块12b。在本实施方式中，第一加热器12a为筒式加热器(Cartridge heater),并通过导线15与未图不的外部电源连接。第一加热器12a插入于第一加热块12b,第一加热器12a发热，从而对第一加热块12b进行加热。第一加热块12b为将从第一加热器12a产生的热传递至核酸扩增反应容器100的部件。在本实施方式中为铝制的块。
[0029]筒式加热器的温度控制较容易，因此将第一加热器12a设为筒式加热器，从而能够容易地使第一加热部12的温度稳定。因此，能够实现